[精品]新高考生物一轮复习2.培养基的类型及其应用讲义及答案
2022届高考生物一轮复习 第2讲 微生物的培养和应用练习(含解析)新人教版选修1
第2讲微生物的培养和应用1．(2021·湖南茶陵三中高三月考)下图为5个不同浓度的土霉素溶液对大肠杆菌生长影响的实验结果。
请回答下列相关问题：(1)培养基中通常加入琼脂作为凝固剂。
为检测培养基是否被污染，应采用的检测方法是将未接种的培养基在适宜的温度下放置适宜的时间，观察培养基上是否有菌落产生。
(2)该实验是用稀释涂布平板法接种大肠杆菌，在接种前要对培养基进行高压蒸汽灭菌。
根据图中结果，对大肠杆菌抑制作用最明显的土霉素浓度是⑤(填图中数字)，依据是透明圈越大，抑制效果越明显。
(3)为研究相同浓度的a、b、c三种不同抗生素对大肠杆菌生长的影响，根据上述研究方法，请仿照图绘制处理方法。
[解析] (1)培养基中通常加入琼脂作为凝固剂。
检测培养基是否被污染的方法是：将未接种的培养基在适宜的温度下放置适宜的时间，观察培养基上是否有菌落产生。
(2)该实验是用稀释涂布平板法接种大肠杆菌；培养基需要用高压蒸汽灭菌法灭菌。
透明圈越大，抑制效果越明显，图中⑤号圆纸片的抑菌圈最大，因此该浓度的土霉素对大肠杆菌抑制作用最明显。
(3)该方案的自变量为相同浓度的a、b、c三种不同抗生素，注意在图中要标记清楚，根据对照原则，结合图中研究方法可绘制下图。
2．(2020·福建高考模拟)乳酸杆菌是人体有益的微生物之一，常用于生产酸奶，其发酵产物为乳酸，能溶解周围环境中的难溶性碳酸钙。
回答下列问题：(1)为检测某品牌酸奶中的乳酸杆菌含量是否达标，检验人员进行了相关实验。
①配置培养基：培养基中除含水、无机盐、碳源、氮源和琼脂外，还需添加维生素和CaCO3。
②稀释样品：取1 mL待测酸奶，用无菌水进行梯度稀释。
③接种培养：用稀释涂布平板法接种，培养时控制的气体条件是无氧。
④观察计数：菌落周围出现的透明圈(或溶钙圈)就是乳酸杆菌的菌落，选择菌落数在30～300的平板计数。
每隔24小时统计一次菌落数目，选取菌落数目稳定时的记录作为结果，目的是可以防止因培养时间不足而导致遗漏菌落的数目。
高考一轮微生物的培养与应用讲课文档
问题探讨
问题2：在灼烧接种环之后，为什么要等其 冷却后再进行划线？ 答：以免接种环温度太高，杀死菌种。 问题3：在作第二次以及其后的划线操作时， 为什么总是从上一次划线的末端开始划线？ 答：划线后，线条末端细菌的数目比线条起始 处要少，每次从上一次划线的末端开始，能使 细菌的数目随着划线次数的增加而逐步减少， 最终能得到由单个细菌繁殖而来的菌落。
冰箱保存。
2、长期保存： 甘油冷冻管藏法
第四十五页，共119页。
考点三 纯化大肠杆菌以及菌种的保 藏
【回扣教材】
1．制作牛肉膏蛋白胨固体培养基 (1) 方 法 步 骤 ：计__算_____ 、 称 量 、 溶 化 、 __灭__菌______ 、 __倒__平__板___。
(2)倒平板操作的步骤：
第四十六页，共119页。
①将灭过菌的培养皿放在___火__焰__旁__的桌面上，右手拿 装有培养基的锥形瓶，左手拔出棉塞。 ②右手拿锥形瓶，将___瓶__口__迅速通过火焰。 ③用左手的拇指和食指将培养皿打开一条稍大于瓶口的 缝隙，右手将锥形瓶中的培养基(约10～20 mL)倒入培 养皿，左手立即盖上培养皿的皿盖。 ④等待平板____冷__却___凝__固，大约需5～10 min。然后，将平板
(1)在微生物所需要的化合物中需要量最大的是碳源。自 养微生物利用CO2或碳酸盐作为碳源（以无机碳源作为主 要碳源）。 而异养微生物的碳源是有机物，最常利用的是糖类(特别是 葡萄糖)；
(2)微生物最常利用的氮源是氨盐、硝酸盐。能把氮气 作为氮源的只限于固氮菌、某些放线菌和藻类等。
霉菌仅以无机氮素化合物为氮源；部分细菌不用有机氮 化合物作为氮源就不能生长。
琼后脂，制成
琼脂固体培养基，是实验室最常用的培养基之一。微生
2024届高三一轮复习生物-微生物的培养技术与应用(共36张ppt)
液体培养基、固体培养基
功能 选择培养基、鉴别培养基
区别 有无琼脂
成分 一般都含有水、碳源、氮 源和无机盐等营养物质
条件 PH、特殊营养物质、O2
组分 牛肉膏 蛋白胨 NaCl
H2O
含量
5g
10g 5g 定容至 1000mL
提供的主要营养 碳源、磷酸盐和维生
素等 氮源和维生素等
无机盐
水
1、基本成分
成分
操作，错误的是( D )①煮沸消毒可以杀死微生物的营养细胞和
部分芽孢②接种操作要在酒精灯火焰附近进行③家庭制作葡萄酒
时要将容器和葡萄进行灭菌④培养基要进行高压蒸汽灭菌⑤加入
培养基中的指示剂和染料不需要灭菌A．①
B．②
③C．③④
D．③⑤
三、微生物的纯培养
培养物
在微生物学中，将接种于培养基内，在合适条件下形成 的含特定种类微生物的群体。
纯培养物 由单一个体繁殖所获得的微生物群体。
纯培养获Βιβλιοθήκη 纯培养物的过程。纯培养步骤
配制培养基、灭菌、倒平板、接种、分离和培养
接种的常用方法：平板划线法、稀释涂布平板法
1、探究实践——酵母菌的纯培养
配制培养基 称取、煮沸、过滤、定容
调pH
灭菌 倒平板
培养基：湿热灭菌；培养皿：干热灭菌
①
②
③
④ 冷却后倒置
分离出葡萄球菌。下述操作不正确的是( C )A．对配制的培养基进行高
压蒸汽灭菌B．使用无菌棉拭子从皮肤表面取样C．用取样后的棉拭子在 固体培养基上涂布D．观察菌落的形态和颜色等进行初步判断
大本P295 2．不同的微生物对营养物质的需求各不相同，但一般都需要水、碳源、
氮源和无机盐。下列有关微生物所需营养物质的描述，正确的是( B
2020版高考生物一轮复习生物技术与工程第2讲微生物的培养和应用教学案新人教版
第2讲 微生物的培养和应用[考纲展示] 1.微生物的分离和培养 2.某种微生物数量的测定 3.培养基对微生物的选择作用考点一| 微生物的实验室培养1．培养基(1)概念：人们按照微生物对营养物质的不同需求，配制出供其生长繁殖的营养基质。
(2)种类：液体培养基和固体培养基，二者的区别是是否添加凝固剂。
(3)营养成分： ①主要营养物质：碳源、氮源、水和无机盐。
②其他条件：pH 、特殊营养物质和氧气。
2．无菌技术(1)关键：防止外来杂菌的入侵。
(2)不同对象的无菌操作方法(连线)：答案：①—b —Ⅰ ②—b —Ⅱ ③、④—a ⑤—a —Ⅲ、Ⅳ ⑥—b3．制备牛肉膏蛋白胨固体培养基(1)计算：依据配方比例，计算配制100 mL 的培养基时，各种成分的用量。
(2)称量：准确地称取各种成分。
(3)溶化⎩⎪⎨⎪⎧ ①牛肉膏连同称量纸一同放入烧杯②加入少量水，加热③牛肉膏溶化后取出称量纸④加入称量好的蛋白胨和氯化钠，搅拌⑤加入琼脂，加热使其熔化，并不断搅拌⑥补加蒸馏水定容(4)灭菌⎩⎪⎨⎪⎧ ①灭菌前，调节pH ②方法：高压蒸汽灭菌法。
压力为100 kPa ，温度为121 ℃，灭菌时间为15～30 min(5)倒平板：待培养基冷却至50 ℃左右时，在酒精灯火焰旁倒平板。
4．纯化大肠杆菌(1)菌落：由一个细胞繁殖而来的肉眼可见的子细胞群体。
(2)纯化大肠杆菌的方法 ①纯化培养原理：在培养基上得到由一个细胞繁殖而来的肉眼可见的菌落，即可获得较纯的菌种。
②纯化大肠杆菌的关键步骤：接种。
③常用的微生物接种方法有两种。
a ．平板划线法：通过接种环在琼脂固体培养基表面连续划线的操作，将聚集的菌种逐步稀释分散到培养基的表面。
b ．稀释涂布平板法：将菌液进行一系列的梯度稀释，然后将不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂固体培养基的表面，进行培养。
5．菌种的保存方法(1)对于频繁使用的菌种，可以采用临时保藏的方法。
(2)对于需要长期保存的菌种，可以采用甘油管藏的方法。
高三生物一轮复习课件微生物的培养技术及应用
典型例题
【变式5】 ( B )如图为“土壤中分解尿素的细菌的分离和计数”实验中
样品稀释示意图。据图分析正确的是 A．3号试管的稀释倍数为103倍 B．5号试管的结果表明每克土壤中的菌株数为1.7×109个 C．5号试管中稀释液进行平板培养得到的菌落平均数恰为4号试管的10倍 D．该方法和平板划线法都可对微生物进行准确计数
常用方法 煮沸消毒法、巴氏消毒法等 干热灭菌法、湿热灭菌法等
典型例题
【典例2】( C )(2021·天津卷)下列操作能达到灭菌目的的是A.
用免洗酒精凝胶擦手B. 制作泡菜前用开水烫洗容器C. 在火焰上 灼烧接种环D. 防疫期间用石炭酸喷洒教室
典型例题
4．( D )下列关于灭菌和消毒的叙述，错误的是
01
一、发酵工程的培养基
1、培养基的概念 培养基是为人工培养微生物而制备的，适合微生物等生长、 繁殖或积累代谢产物的营养基质。
2、类型
组织 微生物 提取物
①按成分
牛肉膏蛋白胨
取材
营养
配制
营养成分 重复性
①按成分
一、发酵工程的培养基
准确 蒸馏水
成分 含量 可重复性
繁琐
较高
基础 特殊
琼脂
一、发酵工程的培养基
五、微生物的分离、纯化和培养
1、菌落：由 单个或少数微生物 繁殖而来的肉眼可见的、有一定形态 结构的子细胞群体。 2、纯化微生物（获得单菌落）的方法 平板划线法 和 稀释涂布平板法。 3、原理：
微生物群
连续划线 分散或稀释
单个细胞 生长繁殖 单个菌落
五、微生物的分离、纯化和培养
平板划线法：通过接种环在琼脂固体培养基表面连续划线的操作，将 聚集的菌种逐步分散到培养基的表面。
高考生物一轮复习第2讲微生物培养与应用课件新人教版选修1湖南专用
③有些培养基不需要添加特殊营养物质，生物自 己能合成，如大肠杆菌Leabharlann 合成某些维生素，作为特殊 营养物质。
④制备：计算→称量→溶化→灭菌→倒平板。
高考生物一轮复习第2讲微生物培 养与应用课件新人教版选修1湖南
(2)无菌技术 无菌技术主要操作要求 a．实验前应对操作空间、操作人员消毒，对所 用器具和培养基灭菌。 b．实验进行时需在酒精灯火焰周围无菌区操作， 另外要避免已灭菌处理材料再次污染。
高考生物一轮复习第2讲微生物培 养与应用课件新人教版选修1湖南
二、土壤中分解尿素的细菌的分离与计数
1．分离的原理 (1)土壤中的细菌之所以能够分解尿素，是因为它 们体内能合成脲酶。这种物质在把尿素分解成无机物 的过程中起催化作用。 (2)实验室中微生物筛选的原理：人为提供有利于 目的菌株生长的条件(包括营养、温度、pH等)，同时 抑制或阻止其他微生物生长。
高考生物一轮复习第2讲微生物培 养与应用课件新人教版选修1湖南
【 例 1】 分 析 下 面 培 养 基 的 配 方 ： KH2PO4 、 Na2HPO4、MgSO4·7H2O、葡萄糖、尿素、琼脂。请 回答：
(1)在该培养基的配方中，为微生物的生长提供碳 源和氮源的分别是葡萄糖 和尿素。
(2)想一想这种培养基对微生物是否具有选择作用？ 如果具有，又是如何进行选择的？
高考生物一轮复习第2讲微生物培 养与应用课件新人教版选修1湖南
2．纯化大肠杆菌以及菌种的保藏
(1)制备牛肉膏蛋白胨固体培养基：计算、称量、溶
化、灭菌、倒平板。
(2)纯化大肠杆菌
①原理：在培养基上将细菌稀释或分散成单个细胞，
高考生物一轮复习 微生物的培养与应用课件
(4)实验流程。
栏
土壤取样：富含_纤__维__素___的环境
目
↓
链
选择培养：用_选__择__培__养__基___培养，以增加纤维素分解菌的浓度 接
↓
梯___度__稀__释_：制备系列稀释液
↓
涂布平板：将样品涂布到鉴别纤维素分解菌的培养基上
↓ 挑选产生_透__明__圈___的菌落
要点探究
考点1 微生物的实验室培养
的肉眼可见的菌落，即可获得较纯的菌种。
②纯化大肠杆菌的关键步骤：__接__种____。
基础回顾
③常用的微生物接种方法有两种：
a．平板划线法：是通过接种环在琼脂固体培养基表面
___连__续__划__线__的__操__作___，将聚集的菌种逐步稀释分散到培养基的表面。
b．稀释涂布平板法：是将菌液进行一系列的__梯__度__稀__释____，
②固氮微生物能够固定空气中的N2，合成氨态氮，培养 基中不需添加氮源。
要点探究
(2)培养基中的不同营养成分不一定是不同物质提供。
培养基中不同的营养成分可以由同一物质提供，有些物质，
如NH4HCO3，既是氮源也是某些自养生物的碳源。
3．消毒和灭菌的不同点。
栏
目
比较项 目
理化因素的作用强 度
消灭微生物的数量
易蔓延
要点探究
(2)稀释涂布平板法统计样品中菌落的数目往往比实际数目低， 这是因为当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的只是一个 菌落。
(1)分离原理：土壤中的细菌之所以能分解尿素，是因为它 栏
们能合成__脲__酶____，这种物质在把尿素分解成无机物的过程中起
目 链
到__催__化____作用。
2022版高考生物一轮复习 生物技术实践 第2课 微生物的培养与应用课件 新人教版
(4)灭菌
(5)倒平板:待培养基冷却至___5℃0 左右时,在____酒__精___灯__火附焰近倒平板。 4.纯化大肠杆菌: (1)菌落:由___一__个___细_繁胞殖而来的肉眼可见的_____子__细群胞体。
(2)纯化大肠杆菌的方法 ①纯化培养原理:在培养基上得到___由__一___个__细__胞___繁__殖___而_的来肉眼可见的_____,菌即落可 获得较纯的_____。菌种 ②纯化大肠杆菌的关键步骤:__接__种_。 ③常用的微生物接种方法有两种。 a.平板划线法:通过__接___种__环在琼脂固体培养基表面____连__续___划的线操作,将聚集的 菌种逐步稀释分散到培养基的表面。如图所示
4.人教版选修1 P29教材改编:据某微生物培养基的配方表回答下列问题:
成分 含量 成分 含量
纤维素粉 5g
NaNO3 1g
Na2HPO4·7H2O 1.2 g
MgSO4· 7H2O 0.5 g
KCl 0.5 g
酵母膏 0.5 g
将上述成分溶解后,用蒸馏水定容到1 000 mL
KH2PO4 0.9 g
4.分解纤维素的微生物的分离:
(1)纤维素酶。 ①组成:纤维素酶是一种__复__合___酶,一般认为它至少包括三种组分,即____C_1_酶___、_ CX酶
_和___葡__萄___糖__苷__酶。
②作用:
纤维素
_纤__维___二__糖_ _______ 葡萄糖ຫໍສະໝຸດ (2)纤维素分解菌的筛选。
①原理:
②筛选方法:__刚__果___红染色法,即通过是否产生____透__明_来圈筛选纤维素分解菌。 ③培养基:以__纤__维___素为唯一碳源的选择培养基。
②计算公式:每克样品中的菌株数=(C÷V)×M,其中,C代表某一稀释度下平板上 生长的平均菌落数,V代表涂布平板时所用的稀释液的体积(mL),M代表稀释倍 数。 ③操作:设置__重__复___组和___对___照_,组增强实验的说服力与准确性。同时为了保证结 果准确,一般选择菌落数在__3_0_～___3_0的0 平板进行计数。
高考生物一轮复习 专题2微生物的培养与应用课件 新人教版选修1
高频 考 点 突 破
寻 本 源·················································基 础 牢
一、培养基的种类
划分 培养基种类
标准
特点
用途
物理 性质
液体培养基 固体培养基
不加凝固剂 工业生产
加凝固剂，如 微生物分离、
琼脂
鉴定等
划分 培养基种类
标准
特点
答案：D
典型 例 题 导 思
精 点 拨·················································明 技 巧
题型一 微生物的培养基的配制和应用 【例1】 如下所示为培养某种微生物的培养基的配 方，请回答：
成分
NaNO3 K2HPO4 KCl MgSO4·7H2O FeSO4 (CH2O) H2O 青霉素
3．实验流程 土壤取样：富含________的环境
选择培养：用________培养，以增加纤维素分解菌的 数量
梯度稀释
涂布平板：将样品涂布到鉴别纤维素分解菌的培养基 上
挑选产生透明圈的菌落：产生________的菌落周围 出现透明圈
点拨 (1)纤维素分解菌的选择培养基为液体培养基， 因培养基中无凝固剂，利用液体培养基以增加纤维素分解 菌的浓度。
用途
培养基中加入某 培养和分离出
种化学物质，用 特定微生物(如
来抑制不需要的 分离酵母菌和 用途 选择培养基
微生物的生长， 霉菌，可以在
促进所需要的微 培养基中加入
生物的生长
青霉素)
划分 培养基种类
标准
特点
用途
用途
鉴别培养基
根据微生物 的代谢特 点，在培养 基中加入某 种指示剂或 化学药品
高三生物 第2讲 微生物的培养与应用复习课件 新人教版
B．甲培养基适于分离酵母菌，乙培养基适于分离真菌
C．甲培养基适于分离异养型自生固氮菌；乙培养基适 于分离自养型自生固氮菌
D．甲培养基适于分离异养型共生细菌；乙培养基适于 分离异养型共生固氮菌
【解析】 根据所提供的甲、乙两种培养基的成分分析， 两者之间的主要差别是：甲培养基有葡萄糖和淀粉作为有机 碳源和能源，也有少量的无机碳源(CaCO3)；乙培养基无有 机碳源和能源。两者之间的共同点是：都不含氮源。说明这 两种培养基分别适于培养异养型自生固氮微生物和自养型自 生固氮微生物。
在倒平板时就加入刚果红
优点 缺点
显示出的颜色反应基本上是 纤维素分解菌的作用
操作烦琐，加入刚果红溶液 会使菌落之间发生混杂
操作简便，不存在菌落混杂问题
①由于在纤维素粉、琼脂和土豆汁中都含有 淀粉类物质，可以使能够产生淀粉酶的微生 物出现假阳性反应； ②有些微生物具有降解色素的能力，长时间 培养会降解刚果红，从而形成明显的透明圈， 这些微生物与纤维素分解菌不易区分
【特别提醒】 ①为确定得到的是纤维素分解菌，还需进行发酵产 纤维素酶的实验。纤维素酶的发酵方法有液体发酵和固 体发酵两种。纤维素酶的测定方法，一般是对纤维素酶 的分解滤纸等纤维素后所产生的葡萄糖进行定量测定。 ②流程中的“选择培养”是否需要，应根据样品中 目的菌株数量的多少来确定。
【对位训练】
5．分离土壤中纤维素分解菌用到的方法是
B．用移液管吸取1 mL培养的菌液，注入101倍稀释的 试管中。用手指轻压移液管上的橡皮头，吹吸3次，使菌液 与水充分混匀。
C．从101倍稀释的试管中吸取1 mL稀释液，注入102倍 稀释的试管中，重复b步混匀操作。以此类推，直到完成最 后1支试管的稀释。
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2.培养基的类型及其应用
分类标准 培养基
类型
配制特点 主要应用
物理 性质 固体培 养基 加入琼脂较多 菌种分离, 鉴定,计数 半固体培
养基
加入琼脂较少 菌种保存
液体培 养基 不加入琼脂 工业生产,
连续培养
化学
组成
合成培 养基 由已知成分配制而成,培养基成分明确 菌种分离、鉴
定
天然培 养基 由天然成分配制而成,培养基成分不明确 工业生产,
降低成本
目的
用途
鉴别培
养基
添加某种指示剂或化学药剂 菌种的鉴别
选择培养
基
添加(或缺少)某种化学成分 菌种的分离