动物实验计划书
医学科研计划书范文
医学科研计划书范文一、研究背景。
近年来，随着人口老龄化和生活水平的提高，慢性病的发病率逐渐增加，给人们的健康和生活质量带来了严重的威胁。
慢性病的治疗和管理已成为当前医学领域的热点和难点问题。
其中，糖尿病是一种常见的慢性病，严重影响患者的生活质量，给社会和家庭带来了巨大的负担。
因此，研究糖尿病的发病机制和治疗方法具有重要的理论和实际意义。
二、研究目的。
本研究旨在探讨糖尿病的发病机制和治疗方法，通过实验研究和临床观察，寻找新的治疗策略，为临床治疗提供新的思路和方法。
三、研究内容。
1. 糖尿病的发病机制研究，通过动物实验和细胞实验，探讨糖尿病的发病机制，包括胰岛素分泌异常、胰岛素抵抗以及胰岛素信号通路等方面的研究。
2. 糖尿病的治疗方法研究，通过临床观察和药物实验，研究新的治疗方法，包括药物治疗、营养治疗、运动疗法以及中医药治疗等方面的研究。
四、研究方法。
1. 实验方法，采用动物模型和细胞模型，通过实验操作和数据分析，探讨糖尿病的发病机制和治疗方法。
2. 临床观察，选取一定数量的糖尿病患者，进行临床观察和治疗，收集数据并进行统计分析。
3. 文献综述，对国内外相关文献进行综述，总结前人研究成果，为本研究提供理论依据。
五、研究预期。
1. 对糖尿病的发病机制有新的认识，为糖尿病的防治提供新的理论依据。
2. 发现新的糖尿病治疗方法，为临床治疗提供新的思路和方法。
3. 提高医护人员对糖尿病的认识和治疗水平，提高患者的生活质量。
六、研究进度安排。
1. 第一年，开展糖尿病发病机制研究，进行实验操作和数据收集。
2. 第二年，开展糖尿病治疗方法研究，进行临床观察和治疗实验。
3. 第三年，总结研究成果，撰写学术论文，申请专利。
七、研究经费预算。
本研究经费预算为100万元，主要用于实验材料和设备购置、人员工资和差旅费等方面。
八、研究团队。
本研究由我院医学科研团队承担，团队成员包括主要研究人员、实验技术人员和临床医生等。
九、研究成果应用。
2024年小学五年级科学计划书(6篇)
2024年小学五年级科学计划书一、班级学生情况本班现有学生____人，其中男生____人，女生____人。
通过几天的了解本班的学生能够遵守学校纪律，按时上下学，完成自己应该做的事情。
大部分学生已初步养成了良好的学习习惯，上课积极回答问题，参与小组讨论，已形成一定的学习能力、与人合作的能力、有参与意识、竞争意识。
但班内也存在几名学生在各科作业按时完成和认真书写方面做得很不好，关键原因在于懒惰，学习习惯还需老师及家长重视培养。
在新学年中要不断努力，争取不断前进，取得更好的成绩，并树立良好的班风，把学生培养成有理想、有道德、有文化、有纪律的一代新人，做一位合格的社会主义建设者和接班人。
二、本学期工作目标（一）、班风建设：1、抓好班干部队伍的建设和培养，切实发挥班级管理作用。
新学期，新气象，我决定重新改选班委。
开学第一天，我让学生通过民主选举投票的方式，重新选出了班长、副班长、学习委员、纪律委员、劳动委员，组成了一个新的班委。
对于每一位班干部，我都严格的进行了任务分工，让他们明确自己的职责，同学们随时监督他们的工作。
同时，我召开了班委会，鼓励他们大胆工作，并教给他们一些进行班级卫生、纪律、班级文化建设管理的方法。
我认为要想培养一个良好的班集体，班干部的作用至关重要，在班干部中先要形成良好的团结合作意识，以班干部的行动带动学生的行动，让好的行为带动整个班集体，这样才会收到好的效果。
2、加强学生的自我管理能力，使学生学习有目标，行动有准则。
针对班级的学习和纪律管理，我在班里划分了纪律小组和学习小组，分别确定了小组长。
根据同学们的意见，共同制定出了一套详细的考评制度。
小组与小组之间形成了一种竞争关系，大大的激发了孩子们的学习、纪律意识，使得他们学习有目标，行动有准则，共同创建一个良好的班级学习氛围。
通过以上的调整，我的宗旨是让孩子们充分发挥他们主人翁的意识，锻炼着自己管理自己，自己督促自己不断进步，我相信他们有这个能力做好。
家兔基础实验操作及注意事项总结
基本技能操作经验总结（一）家兔的给药、基本手术及相关仪器的初步使用1.家兔的捉拿【实验方法】先轻轻打开笼门，勿使其受惊，随后手伸入笼内，从头前阻拦其跑动，一只手迅速抓住兔的颈背部的皮毛，慢慢提起家兔，然后用另一只手轻轻托住臀部，尽量使兔处在舒适、放松的状态。
【注意事项】避免抓住耳朵提拿家兔，这样不但会损伤家兔的耳朵，而且易引起家兔的紧张并激起挣扎和反抗。
抓取动物时手法不当，动作过激导致家兔惊吓，产生强烈挣扎而长时间处于激动状态，大脑皮层细胞兴奋阈值增加，肾上腺素的释放，大脑中枢电位频率增高，大脑皮层运动区过度兴奋，导致麻醉效果不佳。
2.家兔的称重与放置【实验方法】兔笼放置在电子秤上，去皮。
将兔子脖子卡住兔笼头端的凹槽，盖上兔笼盖，使兔子呈趴伏状，记录数据。
压住兔笼盖和后座，将兔笼转移到操作台准备实验。
【注意事项】兔笼重量提前去皮；尽量避免头尾不对应；时刻注意压住兔笼盖，避免转移途中兔子挣脱。
3.耳缘静脉麻醉【实验方法】穿刺前准备工作：穿刺前应拔除待穿刺血管部位的兔毛，轻柔或以手指轻弹待穿刺的血管使其充血扩张，或用酒精棉球涂擦待穿刺的血管使血管扩张。
穿刺手法：左手食指和中指夹住静脉的近端，拇指绷紧静脉的远端，无名指及小指垫在下面，右手持头皮针尽量从静脉的远端刺入。
若回抽注射器有暗红色血液流出或注射时若无阻力、无隆起现象，说明针头在血管内。
移动拇指于针头上以固定针头，放开食指和中指，将药液缓慢注入，然后拔出针头，用手压迫针眼片刻。
注：本实验所用麻醉药——乌拉坦用药剂量为1000 mg/Kg。
【注意事项】1. 进针部位宜选择在耳缘静脉远心端的血管段，若穿刺失败，可向近心端前移一段再进行穿刺；2.可利用酒精棉球擦拭使耳缘静脉血管扩张，便于操作；3.静脉注射必须缓慢（大概每分钟推送5ml ），同时观察家兔肌肉紧张、角膜反射和对皮肤夹捏的反应，当这些活动明显减弱或消失时，应立即停止注射。
在注射麻醉药物时，可先用麻醉药物总量的三分之二，密切观察动物生命体征的变化，若已达到预计麻醉效果剩余药液可暂不注射，以避免麻醉过深抑制呼吸中枢导致动物死亡；4.实验动物的固定【实验方法】将动物麻醉后，仰卧位固定于手术台上，颈部伸直，口腔与气管成一直线，保持气管畅通。
研究计划书模板范文医学
研究计划书模板范文医学一、项目名称：基于基因编辑技术的心血管疾病治疗研究二、研究背景与意义：心血管疾病是全球范围内的主要死亡原因之一。
随着基因编辑技术的发展，特别是CRISPR-Cas9系统的出现，为心血管疾病的基因治疗提供了新的途径。
本研究旨在探讨基因编辑技术在心血管疾病治疗中的应用潜力和机制。
三、研究目标：1. 确定心血管疾病相关的关键基因。
2. 利用CRISPR-Cas9技术对这些基因进行编辑。
3. 评估基因编辑对心血管疾病模型的影响。
四、研究内容与方法：1. 文献回顾：收集心血管疾病的基因治疗相关研究，确定研究靶点。
2. 基因编辑：设计CRISPR-Cas9系统，针对目标基因进行编辑。
3. 细胞实验：在体外细胞模型中验证基因编辑的效果。
4. 动物实验：在心血管疾病动物模型中评估基因编辑的治疗效果。
5. 数据分析：对实验结果进行统计学分析，评估基因编辑的治疗效果。
五、预期成果：1. 确定心血管疾病治疗的潜在基因靶点。
2. 建立基因编辑技术在心血管疾病治疗中的应用模型。
3. 发表研究成果，为心血管疾病的基因治疗提供理论依据。
六、研究计划与时间安排：- 第1-3个月：完成文献回顾和研究设计。
- 第4-6个月：进行基因编辑和体外细胞实验。
- 第7-12个月：进行动物实验和数据分析。
- 第13个月：撰写研究报告和论文。
七、预算计划：1. 实验室耗材和试剂：XX万元。
2. 动物模型购买和饲养：XX万元。
3. 人员工资和差旅费：XX万元。
4. 发表论文和学术交流：XX万元。
八、风险评估与应对措施：1. 技术风险：通过与领域内专家合作，提高实验成功率。
2. 伦理风险：确保所有实验符合伦理审查标准。
3. 资金风险：合理分配预算，确保研究顺利进行。
九、研究团队介绍：本项目由XX医院心血管科和XX大学生物医学工程系联合开展。
团队成员包括心血管疾病专家、基因编辑技术专家和生物统计学家。
十、结论：本研究计划将为心血管疾病的基因治疗提供新的视角和方法，有望在未来改善心血管疾病患者的治疗效果。
斑马鱼卵实验伦理证书
斑马鱼卵实验伦理证书摘要：1.斑马鱼卵实验的背景和意义2.实验伦理证书的作用和重要性3.斑马鱼卵实验的伦理问题4.如何申请斑马鱼卵实验伦理证书5.斑马鱼卵实验伦理证书的审核标准和流程正文：斑马鱼卵实验是一种在生物学领域中广泛应用的实验方法，主要用于研究胚胎发育、基因编辑和生物技术等。
近年来，随着科学技术的发展，斑马鱼卵实验在生物领域的应用越来越广泛，其重要性也不言而喻。
然而，实验中涉及到的伦理问题也日益引起了人们的关注。
实验伦理证书是一种保障实验过程中生物安全和伦理问题的重要措施。
在斑马鱼卵实验中，申请实验伦理证书是必不可少的一个环节。
实验伦理证书的申请不仅可以确保实验的合法性，还可以有效地避免实验过程中可能出现的伦理问题。
斑马鱼卵实验的伦理问题主要包括生物安全、动物福利和实验结果的道德性等方面。
因此，在进行斑马鱼卵实验之前，必须对实验的伦理问题进行充分的考虑和评估。
那么，如何申请斑马鱼卵实验伦理证书呢？首先，实验申请人需要向实验伦理委员会提交实验申请表和实验计划书。
实验计划书需要详细描述实验的目的、方法和可能涉及到的伦理问题及其解决方案等。
其次，实验伦理委员会将对实验申请进行审核，如果审核通过，将会颁发实验伦理证书。
斑马鱼卵实验伦理证书的审核标准和流程主要包括以下几个方面：实验目的和方法是否符合科学伦理和法律规定、实验过程中是否会对动物造成伤害和痛苦、实验结果的道德性和社会影响等。
只有当实验申请人对这些方面都有充分的考虑和准备，才能顺利地获得实验伦理证书。
总之，斑马鱼卵实验伦理证书是保障实验过程中生物安全和伦理问题的重要措施。
实验申请人需要对实验的伦理问题进行充分的考虑和评估，并按照实验伦理委员会的要求提交实验申请表和实验计划书。
2024年小学科学学科教学计划书
2024年小学科学学科教学计划书一、教学目标1. 培养学生对科学的兴趣和探索精神，激发其科学思维和创造能力。
2. 培养学生科学观察、实验和问题解决的能力，提高其科学素养。
3. 使学生掌握科学知识，并能将其应用于日常生活中。
二、教学内容1. 科学常识通过讲述和学习科学常识，让学生了解自然界的规律、事物的性质和相互关系，培养学生的科学观念和科学知识。
2. 科学实验通过开展简单的科学实验和观察，让学生亲身体验科学探索的乐趣，培养学生的实验操作能力和观察能力。
3. 科学活动开展科学活动，如科学展览、科学实践等，让学生在实际操作中感受科学的魅力，培养学生合作、沟通和创新的能力。
三、教学方法1. 启发式教学通过提问和引导，让学生主动思考和探索科学问题，培养其解决问题的能力。
2. 实践教学通过实际操作和实践活动，让学生亲身体验科学现象和规律，培养其实际操作和观察能力。
3. 多媒体教学利用多媒体技术辅助教学，丰富教学内容和形式，提高学生的学习兴趣和参与度。
四、教学计划1. 科学常识教学内容：空气、水、植物、动物、地球等的基本性质和相互作用。
教学方法：讲解、实物展示、图片展示等。
教学时间：2周。
2. 科学实验教学内容：简单的物理、化学实验，如小球下滑实验、烧钉实验等。
教学方法：实验演示、实验操作指导。
教学时间：2周。
3. 科学活动教学内容：开展科学展览、科学实践活动，如植物观察、动物标本制作等。
教学方法：团队合作、实地参观等。
教学时间：2周。
五、教学评价1. 课堂表现评价评价学生在课堂上的参与度、思考能力和合作精神等。
2. 实验报告评价评价学生在实验中的观察能力、实验操作技能和实验报告撰写能力等。
3. 综合评价通过综合考试等方式，评价学生对科学知识的掌握程度和科学思维的运用能力。
六、教学资源与保障1. 教学设施提供适合科学实验和活动的教室和设备。
2. 教材和教具选用符合学生年龄特点和教学目标的科学教材和教具。
3. 师资培训组织科学教师参加培训，提高其科学教学能力和创新意识。
实验计划书
实验计划书（初定）xxxxxxx年xx月xx号此为初步计划书，还有很多不成熟甚至错误之处，望老师给予指出！本实验总体上分为三大步。
（1）生理实验部分：本部分主要进行papaya硬度和细胞壁相关酶类活性的测定。
（2）分子实验部分：本部分主要是获得papaya细胞壁相关酶类的基因序列以及由RNA差异表达谱获得细胞壁代谢酶基因等的表达特征。
（3）验证实验部分：本部分主要通过实时荧光定量PCR的方法(Real time Q-PCR)验证并初步确定与“橡皮化”相关的细胞壁代谢酶基因的家族成员。
生理实验部分是第一步需要实施的，也是比较独立的部分，初步定为40天左右的时间结束。
分子实验和验证实验部分是本实验的核心，这两部分紧密结合，需要同步进行，首先是各种样本（CK，ETH，1-MCP)的获得,随后是各样本的RNA提取，然后委托深圳华大基因公司进行转录组测序并从转录组中筛选细胞壁代谢相关的基因序列,采用5RACE及3RACE的方法,获得这些基因的全长序列以及构建差异表达谱进行相关差异基因筛选等生物信息分析，最后通过实时荧光定量PCR的方法(Real time Q-PCR)验证并初步确定与“橡皮化”相关的细胞壁代谢酶基因的家族成员。
一，买果。
二，采后预处理：采后立即运回实验室，剔除病果和机械损伤果，选用形状、大小、外观颜色相对一致的番木瓜果实，剪留0.5cm长果柄为实验材料。
先用1.0 g/L的次氯酸钠溶液洗果10 min，再用0.5g/L的施保功溶液浸泡果实10 min，取出晾干后备用。
三，样品分组（四组）：1.对照组：果实用PE（聚乙烯）保鲜袋包装，轻绑袋口，置于低温（15℃）的恒温箱中贮藏。
2.1.0μl/L的1-MCP处理（橡皮化果实）：在室温条件下（25℃），用浓度1.0μl/L的1-MCP密闭熏蒸处理果实24 h，取出果实后用PE 保鲜袋包装，轻绑袋口，置于15℃（冷藏）、RH（相对湿度）为90%的条件下贮藏。
动物运输计划书
动物运输计划书1. 引言动物运输是指将动物从一个地方转移到另一个地方的过程。
这种运输既可以是国内运输，也可以是国际运输。
无论是国内还是国际运输，都需要制定一个完善的动物运输计划，以确保动物的安全和福利。
本文档旨在为动物运输计划提供一个参考框架，并提供一些建议，以确保在动物运输过程中最大程度地减少动物的压力和负担，提供最佳的保护和福利。
2. 运输类型在制定动物运输计划之前，我们首先需要确定运输的具体类型。
常见的动物运输类型包括：•宠物运输：包括家养宠物如狗、猫等的运输。
•农场动物运输：包括牛、猪、羊等畜牧动物的运输。
•实验动物运输：包括用于科学研究的实验动物的运输。
不同类型的动物有不同的运输需求，因此我们需要根据具体情况来制定相应的运输计划。
3. 运输前准备在动物运输之前，我们需要进行一系列的准备工作，以确保动物的顺利运输。
3.1 健康检查在动物运输之前，必须进行健康检查。
这包括检查动物是否患有传染病、是否接种了必要的疫苗以及是否携带寄生虫等。
只有健康的动物才能进行运输。
3.2 运输容器准备为了确保动物的安全和舒适，在运输过程中需要为动物准备合适的运输容器。
运输容器应具备以下特点：•大小适宜：容器的尺寸应适合动物的大小，以确保动物有足够的空间活动。
•通风良好：容器内应有足够的通风口，以保持良好的空气流通。
•安全牢固：容器应能够牢固地固定动物，以防止在运输过程中的意外事件。
3.3 运输计划制定根据实际情况，制定详细的运输计划。
运输计划应包括以下内容：•运输路线：确定从出发地到目的地的最佳路线。
•运输时间：确定运输的最佳时间，以避免极端天气条件或高峰期。
•运输人员：确定负责动物运输的人员，并确保其具备相关的知识和经验。
•紧急情况计划：制定应对紧急情况的详细计划，以确保动物的安全。
4. 运输过程管理在动物运输过程中，我们需要对运输过程进行管理，以确保动物的安全和福利。
4.1 规划途中休息点在长途运输中，应安排途中的休息点，为动物提供休息和饮水的机会。
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动物实验计划书篇一：实验计划书实验计划书题目：巴氏杆菌的分离及鉴定实验方案组数：第三组组长：李扬帆组员：苏晓娟王逸涵海旭南孙春亮刘长宝刘珊陈红刘明超卢宁年级：08级专业：动物医学专业实验目的：(1)掌握多杀性巴氏杆菌分离的基本要领和方法(2)掌握多杀性巴氏杆菌培养的原理和方法(3)掌握有关多杀性巴氏杆菌的生化试验(4)通过多杀性巴氏杆菌的分离与鉴定，掌握大肠杆菌的分离和鉴定程序，由此推广到生产实践的应用中去。
试剂：琼脂、牛肉膏、蛋白胨、葡萄糖、乳糖、氯化钠、吲哚试剂、草酸铵结晶紫，革兰氏碘液，95%酒精，石炭酸复红，蒸馏水，生理盐水，二甲苯，香柏油，1%中性红水溶液，无菌的脱纤绵羊或家兔鲜血，靛基质试剂，3%过、胆盐、枸橼酸盐、蔗糖、酵母膏、硫代硫酸钠、0.4%酚红水溶液、磷酸氢二钾实验器材：灭菌的手术刀，镊子，刀片，玻璃皿、染液缸、接种环、试管夹、载玻片、擦镜纸、滤纸、显微镜、酒精棉、超净工作台、恒温箱、高压灭菌锅、试管、培养皿、接种针、漏斗、铁架台、玻璃棒等。
病料采集：取巴氏杆菌致死的小鼠,腹部向上固定于蜡盘上，用酒精棉球消毒体表，打开腹腔，暴露肝脏，用剪刀在火焰烧灼灭菌，在肝脏表面烫之杀死表面杂菌，随即在灼烧部位刺一小孔，用灭菌接种环深入灼烧部位小孔中，将接种棒轻轻旋转2次，借以达到取足采料的目的。
涂片染色镜检：美兰染色：巴氏杆菌致死的小鼠，肝脏或脾脏触片，或心血涂片，以碱性美兰液或瑞氏染色液染色，如发现典型的两极着色的短杆菌革兰氏染色：巴氏杆菌致死的小鼠，肝脏或脾脏触片，或心血涂片，革兰氏染色阴性分离培养鉴定：增菌培养：血清肉汤培养基：在血清肉汤中培养，开始轻度浑浊，4-6d后液体变清朗，管底出现黏稠沉淀，振摇后不分散，表面形成菌环。
分离培养：①取巴氏杆菌致死的小鼠,腹部向上固定于蜡盘上，用酒精棉球消毒体表，打开腹腔，暴露肝脏，用剪刀在火焰烧灼灭菌，在肝脏表面烫之杀死表面杂菌，随即在灼烧部位刺一小孔，用灭菌接种环深入灼烧部位小孔中，将接种棒轻轻旋转2次，借以达到取足采料的目的。
②在血液平板上划线培养，37℃培养24h，观察菌落形态、大小、溶血状况等。
多杀性巴氏杆菌在血液平板上长成淡灰色、圆形、湿润、露珠样小菌落。
③挑取疑似菌落4-6个：分别作以下实验Ⅰ用血琼脂平板进行分离培养，血液平板上长成淡灰色、圆形、湿润、露珠样小菌落，无溶血现象,革兰氏染色为阴性球杆菌Ⅱ用麦康凯琼脂进行分离培养，麦康凯培养基上不生长Ⅲ将此菌接种在三糖铁培养基上可生长，并使底部变黄。
④多杀性巴氏杆菌的纯培养细菌生化试验：（1）甲基红试验（mR试验）：原理：细菌分解葡萄糖产酸，使培养液呈酸性，滴加甲基红试剂呈红色。
方法：细菌接种于葡萄糖蛋白胨水培养基结果：阳性反应：呈红色阴性反应：无变化（2）吲哚试验（靛基质试验）原理：细菌分解色氨酸产生靛基质，与靛基质试剂结合形成红色的化合物而呈色。
方法：细菌接种于蛋白胨水培养基，37℃培养2－3天，沿试管壁缓慢加入靛基质试剂，静置5分钟，观察结果结果：阳性反应：红色环状物阴性反应：无变化（3）氧化酶试验：阳性加2-3滴试剂于滤纸上，用牙签挑去一个菌落到纸上涂布，观察菌落的反应。
阳性反应在5-10s内有粉红到黑色，15min后可出现假阳性反应。
用95%酒精配制的1%的(:动物实验计划书)（4）触酶试验：阳性将3%过氧化氢在载玻片上，挑菌观察有无气泡产生即可。
阳性反应者有气泡，无则为阴性。
（5）VP试验：阴性取24h的纯培养物，接种于葡萄糖蛋白胨水培养基中，置于37℃培养48-72小时，取出后在培养基中先加入VP试剂甲液0.6ml，再加入乙液0.2ml。
静止在试管架上，15min后培养液呈红色者为阳性。
（6）糖发酵试验：原理：细菌分解糖产酸使培养液呈酸性，指示剂表现呈色反应。
方法：细菌接种于糖发酵管内，37℃培养24小时，观察结果。
结果观察：培养基为黄色者，记为+;变黄且产气泡者，记为（+）;否则记为-葡萄糖发酵管，乳糖发酵管，蔗糖发酵管，果糖发酵管，麦芽糖发酵管，各两个结果：阳性反应：从蓝紫色变为黄色阴性法应：仍呈蓝紫色（7）明胶穿刺试验：取纯培养物穿刺接种至半固体琼脂培养基，穿刺线应在培养基中间，直至管底，拔出时应原路返回。
结果说明：若该菌有鞭毛，能运动，则部分或全部半固体琼脂变浑浊。
不运动者只在穿刺线上生长。
（8）抑菌试验取菌，用棉签用棉签致密接种于血清琼脂平板上，用无菌镊子将各种抗菌药物圆纸片，分别贴于培养基表面，各片距离要相等。
37度培养24h，观察结果。
血清学鉴定毒力因子检测及抗原鉴定：取纯培养物用0.5%氯化钠溶液洗下制成浓菌液，并分成2份。
一份经100度加热1小时（如仍有不凝集性，则在121度下处理2小时）。
另一份用0.5%福尔马林37度作用24~48小时。
分别用各种抗o血清和抗oK血清对上述菌液做玻板凝集实验。
如该菌株含K抗原，则各种抗o血清不能使福尔马林处理的菌液凝集，但可被各种抗oK血清中的一种凝集。
经100度或者121度加热的菌液可被一种抗o血清凝集，但可能与别的抗o血清发生交叉凝集，可用试管凝集法按凝集效价来排除。
H抗原一般不做鉴定。
试验项目分配篇二：实验计划书实验计划书（初定）此为初步计划书，还有很多不成熟甚至错误之处xxxxxxx年xx月xx 号，望老师给予指出！本实验总体上分为三大步。
（1）生理实验部分：本部分主要进行papaya 硬度和细胞壁相关酶类活性的测定。
（2）分子实验部分：本部分主要是获得papaya细胞壁相关酶类的基因序列以及由Rna差异表达谱获得细胞壁代谢酶基因等的表达特征。
（3）验证实验部分：本部分主要通过实时荧光定量PcR的方法(RealtimeQ-PcR)验证并初步确定与“橡皮化”相关的细胞壁代谢酶基因的家族成员。
生理实验部分是第一步需要实施的，也是比较独立的部分，初步定为40天左右的时间结束。
分子实验和验证实验部分是本实验的核心，这两部分紧密结合，需要同步进行，首先是各种样本（cK，ETH，1-mcP)的获得,随后是各样本的Rna提取，然后委托深圳华大基因公司进行转录组测序并从转录组中筛选细胞壁代谢相关的基因序列,采用5RacE及3RacE的方法,获得这些基因的全长序列以及构建差异表达谱进行相关差异基因筛选等生物信息分析，最后通过实时荧光定量PcR的方法(RealtimeQ-PcR)验证并初步确定与“橡皮化”相关的细胞壁代谢酶基因的家族成员。
一，买果。
二，采后预处理：采后立即运回实验室，剔除病果和机械损伤果，选用形状、大小、外观颜色相对一致的番木瓜果实，剪留0.5cm长果柄为实验材料。
先用1.0g/L的次氯酸钠溶液洗果10min，再用0.5g/L的施保功溶液浸泡果实10min，取出晾干后备用。
三，样品分组（四组）：1.对照组：果实用PE（聚乙烯）保鲜袋包装，轻绑袋口，置于低温（15℃）的恒温箱中贮藏。
2.1.0μl/L的1-mcP处理（橡皮化果实）：在室温条件下（25℃），用浓度1.0μl/L的1-mcP密闭熏蒸处理果实24h，取出果实后用PE保鲜袋包装，轻绑袋口，置于15℃（冷藏）、RH（相对湿度）为90%的条件下贮藏。
3.0.5g/L的乙烯利处理：在室温条件下（25℃），用浓度0.5g/L的乙烯利处理果实3分钟，取出果实后用PE保鲜袋包装，轻绑袋口，置于15℃（冷藏）、RH为90%的条件下贮藏。
四，实验过程：贮藏过程中每隔2d（催熟果实）和5d取样一次，鲜果或-70℃贮存，为以后进行基因表达水平的研究。
取样的同时，进行以下生理指标的测定：1.果实硬度：使用果实硬度计（FHm-1型,日本产）进行测定。
2.PG（多聚半乳糖醛酸酶）活性：称取1g果肉，加入5mL(先加3mL,后用2mL冲洗)0.05mol/L，pH4.6的柠檬酸缓冲液低温存放（含5%nacl和1.8mm的EdTa（乙二胺四乙酸）），冰浴研磨匀浆。
然后在10000转离心30min，将上清液进行透析，用0.05mol/L，pH4.6的柠檬酸缓冲液作为透析液，透析液不含EdTa和nacl。
透析条件：4℃条件下放24小时，中间换一次缓析液，透析完的溶液用于酶活力的测定。
该操作在冰浴下进行。
PG活性测定：PG活性测定以1%多聚半乳糖醛酸(PGa,美国Sigma公司)为底物,反应混合液为：1%PGa0.5mL、醋酸钠缓冲液(pH4.6)1.5mL、酶提取液0.5mL,0.5mL的水（总反应体系为3mL）,40℃反应60min,立即加入1mLdnS(3,5-二硝基水杨酸)终止反应。
再加入沸水中煮沸10min后冷却，于波长540nm下定量分析酶水解生成的半乳糖醛酸含量。
以3mL蒸馏水+1mLdnS作为对照（cK）。
以每小时释放1mg的d-半乳糖醛酸(美国Sigma公司)为1个酶活性单位（U）。
以标准d-半乳糖醛酸绘制标准曲线。
试验重复3次。
对照不加酶液，以缓冲液代替。
3.PmE（果胶甲酯酶）酶活性：取2g果肉，加3mL预冷的1mol/Lnacl和2gPVP（聚乙烯基吡咯烷酮）置于研钵中，充分研磨后，转移到离心管中，再用2mLnacl润洗，倒入离心管中，于冰浴中放置1小时，每隔20min震荡一次，在4℃下，10000转离心30min，收集上清液，用0.01mol/LnaoH调至pH为7.5,于4℃保存备用。
测定：在试管中依次加入1.5mL0.5%(w/v)的果胶放冰箱备用，有效期5天、0.5mL0.01%溴麝香酚兰指示剂棕色瓶(pH为7.5)，1.0mL水，0.5mL酶液（酶液最后加入），总反应体系为3.5mL。
立即将试管放入37℃的水浴锅中30min，以蒸馏水为cK。
取出试管后冷却，迅速测定其在620nm波长一分钟内的变化。
以每min变化0.01为一个活力单位（U），以U/g.Fw表示。
4.纤维素酶(cX)：取0.625g羧甲基纤维素钠溶于0.2mol/L（pH为4.6）的醋酸钠缓冲液中，加几滴氢氧化钠调PH值到7.0，放低温下溶解，定容至100mL。
酶液的制备同PG。
活性测定：反应体系为1mLcmc（羧甲基纤维素钠）溶液，酶液1mL，醋酸钠缓冲液(pH4.6)1.0mL（总反应体系为3mL）,40℃保温60min，取出加入3，5一二硝基水杨酸（dnS）1mL终止反应；加入沸水中煮沸5min，冷却后用分光光度计在540nm处比色测定吸光度值。
以3mL蒸馏水+1mLdnS作为对照（cK）。
每小时由底物生产1μmol葡萄糖所需的酶量定义为一个酶活力单位（U）。
纤维素酶活力（U/g）=〔葡萄糖含量（mg）×酶液提取总体积（mL）×5.56〕/〔反应液中酶液加入量（mL）×样品重（g）×时间（h）〕式中5.56——1mg葡萄糖的微摩尔数（1000/180=5.56）；用3,5-二硝基水杨酸测定生成的葡萄糖做标准曲线。