Waters高效液相色谱系统操作规程

Waters高效液相色谱系统操作规程一. 准备1. 使用前应根据待检样品的检验方法准备所需的流动相（应足够；流动相必须用滤膜过滤）、样品和标准溶液（也可在平衡系统时配制）。

2. 通电前应检查仪器设备之间的电源线、数据线和输液管道是否连接正常。

3. 接通电源，依次打开1525泵、2487检测器，待检测器自检结束显示测量状态时，打开打印机、电脑显示器、主机。

4. 打开Breeze软件，进入系统主界面。

二. 操作步骤1.更换流动相。

2.在主界面中点击“Manage Breeze”按钮，选择system选项，出现系统连接示意图，观察各个部件是否连接好。

若未连接好，则需点击“Diagnostics/Reconfigure”进行诊断。

3.回到主界面，选择“Manage Breeze”中的project选项，单击“Make a new project”，“Next”，在“Project Name”中输入名称，单击“Finish”。

单击“Change a project/User”，在“Project”中选择输入的名称，单击“OK”。

4.单击“View Method”按钮，点击“Pump”图标，设置泵的参数。

点击“UV Det”图标，设置紫外检测器的波长。

单击“Save Method”按钮保存设置方法。

5. 打开泵的抽液阀，使用灌注注射器抽取一定量的洗脱剂。

单击Purge图标，出现“Purge Wizard”对话框，选中“Purge Pump”选项，点击“Next”“Next”，调节A、B泵的流量分别为约3ml/min。

打开泵的参考阀，点击“Next”。

Purge结束后关闭参考阀。

6.点击主界面中的“press to equilibrate system/ monitor baseline”按钮，平衡系统0.5－1h，直至基线稳定。

7.点击“press to make a single injection”按钮，进入“Specify Single Inject Parameters”对话框，设置参数，点击“inject”。

将进样阀手柄转动至Load位置，将注射器针完全插入进样阀入口中，平稳地注入试样溶液，待主界面出现图标提示后将进样阀手柄快速转动至Inject位置，系统将自动运行，采集数据并记录图谱。

三．数据处理（外标法）和打印1. 点击系统主界面中的“Find Data”图标，点击〈Channels〉标签，选择待积分的标准，右击后选“Review”进入Review 窗口。

按“Processing Parameters Wizard”图标，进入Processing Parameters Wizard向导窗口，选中“start new processing parameters”,按「OK」，“Next”，确定所需的最小峰面积。

按“Next”,“Next”，修改峰名称，按“Next”,“Next”，选中“External Standard Calibration”,“Next”，输入方法名称，“Finish”。

点击“Save all”保存。

2.点击主界面中的“Find Data”图标，单击“Results”标签，“update”，选中已处理的标准，点击“Preview Report”按钮，出现“Open Report Method”对话框，选中“Use the following report method”项，在下拉列表中选择所需的报告方式。

单击“OK”。

3.点击“Save Report”保存结果或按“Print”打印报告结果。

四．清洗系统和关机为防止缓冲盐和样品残留在进样阀中，每次分析结束后应冲洗进样阀。

通常可用水冲洗，或先用能溶解样品的溶剂冲洗，再用水冲洗。

数据采集完毕后，关闭检测器，用 100%的超纯水冲洗系统20min，再用10％甲醇溶液冲洗10min后，换纯甲醇冲洗10min，然后关泵。

退出Breeze系统，关闭计算机。

注意事项：1．流动相须经真空抽滤、超声脱气。

样品用针头过滤器（0.02微米）过滤（针头选用HPLC专用针头，绝对不能用气相的注射器）。

2．流动相过滤时应注意用相应的有机膜或无机膜，不能混用。

3．色谱柱用完后，若有缓冲盐残余，须用超纯水、甲醇－水（10％甲醇）、甲醇（色谱纯）依次清洗，并使色谱柱充满甲醇溶液。

4．滤头不用时应清洗干净后浸泡在甲醇中。

5．不能按“立即停泵”按钮，停泵时应将泵的流速设置为零，确定后使泵缓慢停止工作。

6．2414示差检测器的阀门不耐压，purge时间要长（一般2－3小时，最长24小时），使样品池与参比池达到平衡。

7．2487紫外检测器不能频繁开关氘灯。

8．拆装柱时应注意柱的方向。

9．2414示差检测器不建议进行梯度洗脱。

国家级食品检测（深圳）重点实验室一、概况国家级食品检测（深圳）重点实验室组建于2000年，2002年6月通过国家实验室认可和计量认证，2003年被国家质检总局正式确认为国家级重点实验室。

实验室主要承担食品、化妆品的安全卫生项目检测，承担相关的科研任务，并为社会提供技术咨询和服务，是深圳口岸唯一专业从事进出口食品、化妆品等检测的大型、综合性检测实验室。

实验室拥有先进的仪器设备、高素质的人才队伍和较强的技术实力，在确保进出口食品安全、促进国际贸易、应对突发事件和推动食品检测技术发展方面取得了突出的成绩。

二、人员实验室现有专业技术和管理人员约60人，其中研究员1人、高级工程师7人、工程师20人，博士5人、硕士17人，有13名专业技术人员曾有国外就学、培训、技术交流的经历，有1名国家质检总局“十一五”规划科技委专家、1名国家质检总局优秀中青年技术骨干、1名系统内残留监控专家、3名深圳市食安委和科技局专家和多名深圳检验检疫局中青年专家，还聘请了食品安全的权威吴永宁研究员和李庆阁教授作为客座研究员，拥有一支经验丰富、梯队合理、技术过硬的科技人才队伍。

三、设备和环境深圳出入境检验检疫局十分重视实验室的建设，近年来不断加大实验室仪器设备的投入，仅2007年一年的总投入就高到4400万，目前在用仪器设备约9000万。

主要大型精密检测仪器设备包括：液相色谱质谱联用仪、气相色谱质谱联用仪、气相色谱仪、液相色谱仪、离子色谱仪、原子吸收光谱仪、细菌快速鉴定仪、荧光定量PCR仪、全自动样品处理及核酸提取工作站等，仪器设备水平处于国内领先、国际先进水平。

美国、欧盟、澳大利亚、新西兰等国的政府官员、技术专家和行业协会曾多次到我中心参观交流，均对我中心的设备水平赞不绝口；深圳市市委书记、市长等主要领导视察实验室，高度评价实验室的仪器设备和环境设施，认为实验室的条件是深圳市同类型实验室中最好的。

目前实验室建筑面积约为3000平方米，各种设施齐全，功能分区合理，环境优美；2008年底，实验室将搬迁到新落成的国检大厦，在新址实验室将拥有约9000平方米的使用面积，这给实验室未来发展提供充足的空间。

四、检测能力实验室采用国家标准（GB）、行业标准（SN）、国际标准以及自行研究建立的方法进行检测，检测项目覆盖食品和化妆品的全部安全卫生项目，包括：农药残留、兽药残留、微量元素、微生物、食品添加剂、食品质量指标、保健食品功能成分、生物毒素和其他有毒有害环境污染物等约1200多个项目，特别在农兽药残留、生物毒素、微量元素和食源性致病菌检测方面，实验室的技术水平和检测能力在区域内具有优势，居于系统一流、国内领先水平。

实验室每年均参加多项实验室间的比对和国内外权威机构组织的能力验证计划，以确保检测技术的准确可靠。

自2002年以来，实验室共参加CNAS、CNCA、APLAC、FAPAS、FEPAS、NATA等机构组织的能力验证计划42次、127项，全部取得满意的结果。

2007年，实验室还首次成功组织全国性的能力验证活动，最终实现了从能力验证活动参与者到组织者角色转换。

这表明，实验室的技术水平和检测能力获得国内外权威机构的认可和食品检测同行的肯定。

五、科研成果经过近几年的不懈努力和日积月累，实验室的科研工作在2007年获得了丰硕的成果，取得了重大的突破。

全年共完成5项总局科研项目、1项国家和12项行业标准。

2个项目获得总局2007年科技兴检一等奖， 3个获得三等奖，1个项目获得深圳市首届科技创新奖。

2007年，实验室新立项科技部十一•五食品安全子课题3项、广东省科研课题1项、总局科研课题4项、并获得13项国家标准、4项行业标准制定组织或参与资格。

与此同时，实验室也培养了一大批科研技术骨干，如岳振峰、朱海、靳保辉、沈金灿等，他们已经成为实验室乃至深圳局科研工作的中坚力量。

六、对外交流与合作自2002年起，实验室加强与国内高校和科研机构的交流与合作，陆续与中国检验检疫科学研究院、国家人类基因组南方研究中心、生物芯片上海国家工程研究中心、厦门大学、华中农业大学、华南农业大学、中国农业大学、江南大学、暨南大学、仲恺农业技术学院、深圳大学、深圳高级技术学院等单位建立良好的科技合作关系，并与厦门大学签订了检、学、研科技合作协议，取得了令人满意的成果。

2007年以来，实验室的对外交流与合作明显增多，外派培训人员不断。

多人次参加国际食品法典委员会（CAC）食品添加剂和农药残留等重要国际会议，多次参与总局组织的对外谈判交涉与考核。

分两次为澳门民政部署政府化验所4人次培训食品中农兽残检测人员，直接促成了我局与澳门民政部署合作协议的签署。

成功接待20多位驻华使节和美国科文斯公司、日本吉之岛公司高层人员来访。

成功举办了国内食品安全的泰斗陈君石院士和分析化学的权威张玉奎院士等的专题讲座。