血培养操作指南
血培养标本采集操作流程及要点说明

【护理目标】遵循无菌操作原则,患者、标本、送检准确。
【操作重点步骤】1.严格执行查对制度、无菌技术操作原则、标本采集原则。
2.需两人共同核对医嘱,患者的血型必须与用血申请单、交叉配血申请单、血型检验报告单、医嘱上的血型相符。
3.告知患者/家属交叉配血的目的和配合方法及采血后的注意事项。
4.按静脉采血法评估患者的静脉、皮肤情况并进行采血。
5.根据申请用血量决定交叉配血标本的量,若申请用血为200 mL 则标本量为 2 mL,申请用血量每增加200 mL 标本量增加 1 mL。
6.床旁采血前再需两人同时在床旁再次核对医嘱、患者(按采血容器标签上内容 ) 、患者血型、用血申请单、交叉配血申请单。
7.采血完毕,标本连同输血申请单马上送输血科( 或检验科 ) 。
8.医疗废物按“感染性医疗垃圾”处理。
【结果标准】1.患者/家属对所做的护理操作和解释表示理解和满意。
2.采血准确、送检及时。
【操作流程及要点说明】与静脉采血法流程图同。
【护理目标】标本采集时间及容器符合检查要求,标本无污染,患者安全。
【操作重点步骤】1.严格执行查对制度、无菌技术操作原则、标本采集原则、标准预防原则。
2.评估患者的病情、抗生素使用情况,准备血培养基。
3.告知患者/家属采血的目的、方法及采血后的注意事项。
4.根据医嘱、评估结果选择恰当的血培养基和采血量。
5.采血过程中严格无菌技术操作,防止污染。
6.在申请单上准确记录采血量、采血时间、操作者姓名。
7.采血后,标本马上送检验室,防止标本变质、被污染。
8.医疗废物按“感染性医疗垃圾”处理。
【结果标准】1.患者/家属对所做的解释和护理表示理解和满意。
2.采取标本方法正确,标本符合检验要求。
3.标本送检和异常结果回报及时,异常情况得到及时处理。
南昌市洪都中医院血培养标本采集操作流程及要点说明操作流程核对与静脉采血法同评估患者抗生素使用情况,其它与静脉采血法同告知1、血培养标本采集的目的和配合方法2、采血后注意事项准备1、用物:常规消毒物品一套、止血带、血培养基、采血针、手套、按需备酒精灯及火柴2、其它与静脉采血法同使用密封瓶培养基采血1、将密封血培养瓶口的保护帽剔去,消毒瓶盖,干燥 1min2、选择合适的静脉和穿刺点,在穿刺点上方约6CM 处系止血带,常规消毒皮肤,嘱患者握拳3、戴手套后用采血针头按静脉穿刺法穿刺血管,见回血后用胶布固定针翼,接培养瓶,当针头出血速度变慢(由线状变点滴状)时反折针头,拔出培养瓶4、嘱患者松拳,迅速拔出针头,用干棉签按压穿刺点 5 min使用三角烧瓶培养基采血1、将封瓶纸松开2、与上述 2同3、戴手套,按静脉穿刺法穿刺血管,见回血后用注射器抽取所需血量后松止血带,拔针方法与上述 4同4、将烧瓶塞打开,迅速在酒精灯火焰上消毒瓶口,取下针头,将抽出的血液沿管壁注入瓶内,轻轻摇匀,再将瓶塞经酒精灯火焰消毒后盖好,扎紧封瓶纸马上送检要点说明1、按检查项目及抗生素使用情况准备相应的血培养基和采血量2、检查培养基灭菌有效期、有无破损、胶塞有无松脱、瓶签模糊,瓶内培养液肉眼观察有无絮状物、变质1、成人血培养采血5ML2、儿童 2-3ML ,婴儿 1-2ML3、亚急性细菌性心内膜炎患者为提高细菌培养阳性率,采血量可增至 10-15ML。
血培养及骨髓培养操作规程

血液及骨髓细菌鉴定操作规程文件号:HY-021-XJ-001 发布日期:2005年8月7日版本:B1版编写:王磊共:2 页审核:李茹平更新发布日期:审批:张久德1、检验目的:血液及骨髓标本的鉴定2、标本的接种:2.1培养基2.1.1血培养基中都必须添加SPS。
2.1.2双相培养基,即在培养瓶内有琼脂层于肉汤垂直(有商品供应)。
2.2 取血量:采血量一般以肉汤培养基的1/10为宜。
2.2.1急性败血症,脑膜炎,骨髓炎,关节炎,急性未处理的细菌性肺炎、肾盂肾炎。
应该在治疗前从不同部位采血分别接种于需氧,厌氧血培养瓶内。
2.2.2可疑为心内膜炎,体温不太高的持续菌血症。
2.2.2.1急性病例:治疗前在1~2H内在3个不同部位取3份标本。
2.2.2.2亚急性病例:第1天取3个标本,24H后,若全阴性再取3个标本。
2.2.2.3若已用抗生素的心内膜炎患者,连续3天每天取2个标本。
2.3已用抗生素治疗的其他患者:在48H内取6个血标本,每次在使用抗生素前采集标本3、检验步骤:3.1 严格无菌技术取血液注入血培养瓶后立即送实验室,放35℃孵育7天,送实验室之前,不可放冰箱暂存。
3.2下面几种情况提示细菌生长。
(1)琼脂层有细菌生长。
(2)均匀混浊,发酵葡萄糖产生气泡。
(3)微混浊有绿色变化。
(4)血球层上面出现颗粒状或絮状沉淀物生长,或自下而上的严重溶血。
(5)混浊并有胶冻状凝固,瓶壁有颗粒状粘附。
(6)表面有菌膜、菌环状生长,下层混浊。
3.3肉眼见有细菌生长,做如下处理:(1)取生长物涂片,做革兰染色。
(2)取生长物做药敏试验。
(3)取生长物做相应的生化鉴定。
(4)取生长物移种血瓶板、巧克力和中国蓝/麦康凯/伊红美蓝等平板或厌氧平板,进行分离以获得纯培养。
(5)革兰染色所见结果应急时报告临床医生。
(6)涂片结果证实为一种细菌生长,则可直接以增菌液做鉴定试验。
如有二种或多种细菌同时生长,则必须经过分离培养,以获得纯菌后再鉴定。
血培养临床操作规范(2017版)

血培养临床操作规范(2017版)血培养,是一种将新鲜离体的血液标本接种于营养培养基上,在一定温度、湿度等条件下,使对营养要求较高的细菌生长繁殖并对其进行鉴别,从而确定病原菌的一种人工培养法。
我国卫生部在2017年9月发布了新版《临床微生物实验室血培养操作规范》,其主要内容如下:一、采血指征:可疑感染患者出现以下任一指征时,可考虑采集血培养。
1. 体温>38℃或<36℃.2. 寒战.3. 外固血白细胞计数增多(计数>10.0×10/L,特别有“核左移”时)或减少(计数<4.0×10°/L).4. 呼吸频率>20次/min或动脉血二氧化碳分压(PaCO2)<32mmHg.5. 心率>90次/min6. 皮肤黏膜出血.7. 昏迷.8. 多器官功能障碍.9. 血压降低.10. 炎症反应参数如C反应蛋白、降钙素原(PCT)、1,3-3-D葡聚糖(G试验)升高等二、采血时间寒战或发热初起时采集。
抗菌药物应用之前采集最佳。
三、采集套数成人每次应采集2套-3套,每套从不同穿刺点进行采集,2d-5d内无需重复采集。
如怀疑感染性心内膜炎,应重复采集多套。
儿童通常仅采集需氧瓶。
有以下高危因素时应考虑厌氧瓶培养:其母产褥期患腹膜炎,或慢性口腔炎或鼻窦炎、蜂窝组织炎、有腹腔感染的症状和体症、咬伤、接受类固醇治疗的粒细胞缺乏患儿。
考虑肺炎链球菌菌血症时,宜同时做脑脊液培养。
四、采血量成人每瓶采血量8mL-10mL,或按照说明书采集,婴幼儿及儿童采血量不应超过患者总血量的1%,具体采血量参考说明书。
若采血量充足,注射器采集的血液先注入厌氧瓶,后注入需氧瓶,碟形针采集的血液反之。
若采血量不足,优先注入需氧瓶。
五、采集方法1. 采集静脉血:仅在评估导管相关性血流感染时采集导管血。
血培养宜单独采血,与其他检测项目同时采血,应先接种血培养瓶,以避免污染。
2. 采集前做好手卫生,静脉穿刺点选定后,去除血培养瓶的塑料瓶帽,切勿打开金属封口环和胶塞,使用75%乙醇或70%异丙醇消毒,自然干燥60s。
血液培养标准操作规程

10临床意义
3.3标本拒收
3.3.1血培养瓶破裂或明显污染。
3.3.2培养瓶标识与检验申请单不符。
3.3.3用过期培养瓶采集标本,采血量不足等。
3.3.4对不合格标本,应及时通知采集人员重新留取标本。
3.4标本保存
采集标本后立即送检,不能及时送检的可室温放置,切勿放冰箱。冬季血培养瓶在送检过程应采取一定的保暖措施。
4试剂、仪器
4.1革兰氏染液、氧化酶试剂、3%触酶、血琼脂平板、巧克力平板、沙保罗平板及相关生化试剂等。
4.2恒星BC-60血液细菌培养仪、恒星HX-21细菌鉴定药敏分析仪,成人血培养瓶,厌氧血培养瓶、儿童血培养瓶、恒星细菌鉴定药敏分析试剂板。
4.3接种针、接种环、红外灭菌器、显微镜、电热恒温箱、CO2恒温培养箱、生物安全柜等。
4.4试剂有效期和使用参照试剂说明书。
5细菌鉴定及药敏质控
参见《微生物组内质量的控制程序》。
6检验步骤
接收标本后,立即对标本进行编号登记。门诊病人登记联系方式
6.1自动化培养
6.1.1置全自动血培养仪中。当标本有细菌生长时,仪器发出阳性报警,应立即用无菌注射器抽取瓶内培养液作直接涂片格兰染色,镜检,将结果向临床医生报告,同时转种血琼脂平板,并进行直接药敏试验,置35℃、5%CO2培养箱培养18-24h。若涂片为酵母样真菌时转接沙保罗培养基。从琼脂平板挑去菌落进行涂片染色及触酶和氧化酶实验。根据初步分出的菌属选不同的鉴定及药敏卡片上机进行细菌鉴定和药敏试验。
8.4传染病(伤寒沙门菌)报院感科及医务科。
8.5传染病菌株保存(伤寒沙门菌)交疾病控制中心复核
血培养的原则和流程

样本采集和运输
• 样本拒收标准
– 标签错误或在血培养瓶上未贴标签 – 破损的或渗漏的血培养瓶 – 血液凝固的血培养瓶
提高血培养阳性率关键点
1. 时机:一旦怀疑血流感染,应该立即采 集血培养(尽可能在患者寒战或发热 时),无须等到发热最高峰。 2.次数:每名患者应至少采集2次血培养, 最好为 3 次,每次间隔不超过 30 分钟且 为不同部位。 3. 采样要求:在抗菌药物使用前或血药浓 度最低时。如果已经使用抗菌药物,使 用能中和抗菌药物的血培养瓶。
是否进行厌氧培养
• 血培养在需氧瓶和厌氧瓶中的分配
– 对于常规的血培养,建议采取包括需氧和厌 氧的一套血培养瓶
– 当采血量不能满足推荐的采血量时,首先应 进行需氧瓶的培养
要不要做厌氧培养?
菌血症病原菌种类构成 需氧瓶
需氧菌
厌氧瓶
厌氧菌
兼性厌氧菌
病原菌培养更完整
Байду номын сангаас
样本采集和运输
• 样本的转运
– 血培养瓶应立即被送往实验室 – 血培养瓶保留在室温不得超过数小时 – 接种后血培养瓶禁止冷藏或冷冻
Blood Culture Set:一套组合的血培养瓶,其接种的是同一来源的 标本(同一穿刺)
血培养现状
• 阳性率不高,但2次送检阳性率明显提高
RJH 0704
每日送检1套阳性率 3.8%
每日送检2套阳性率 17.6%
采血量
– 对于成年患者,每套血培养瓶推荐的采血量 为20至30ml
– 对于婴幼儿患者,采血量不超过患者总血量 的1%
CLSI 血培养的原则和流程: 基本内容
• • • • 范围 定义 血培养的临床重要性 标本采集和运输
血培养标本采集运送与报告标准操作规程指导书

血培养标本采集、运送与报告标准操作规程指导书一、血培养指征患者出现寒战、体温超过38℃或低体温,怀疑血流感染时,尤其存在医院内肺炎、留置中心静脉超过72h,感染性心内膜炎、骨髓炎、免疫缺陷伴全身感染症状等情况时应抽血做细菌和真菌培养。
二、采血时机一旦怀疑有血流感染可能应立即采血做血培养,最好在抗菌治疗前或停用抗菌药物24h后,以寒战、发热时采集为宜。
三、采血流程(一)消毒1、培养瓶消毒程序:用消毒液消毒培养瓶橡皮塞,待干燥后使用。
2、皮肤消毒程序:用消毒液从穿刺点向外画圈消毒至消毒区域直径达到5cm以上,待干燥后穿刺采血。
(二)静脉穿刺和培养瓶接种成人用注射器无菌穿刺取血后,排尽针头空气直接注入血培养瓶,勿换针头,先注于厌氧培养瓶,避免注入空气,然后注入需氧培养瓶,轻轻混匀以防血液凝固。
(三)注意事项1、采血部位通常为肘静脉,疑为细菌性心内膜炎时以肘动脉或股动脉采血为宜,切忌在静滴抗菌药物的静脉处采血。
除非怀疑有导管相关的血流感染,否则不应从留置静脉或动脉处导管取血,因为导管易被皮肤正常菌群污染。
2、采血次数:对于成年患者,应该同时分别在两个部位采集血标本,在两个不同部位分离到同样菌种才能确定是病原菌。
3、细菌性心内膜炎:在24h内取血3次,每次间隔不少于30分钟,必要时次日再做血培养2次。
4、采血量:以培养基与血液之比10:1为宜,以稀释血液中的抗菌药物、抗体等杀菌物质。
采血量过少会明显降低阳性率。
成人每次每培养瓶采血8-10ml,婴幼儿每次每培养瓶采血2ml。
四、运送要求1、所有标本采集后都立即送到实验室,最好在2h内。
如果不能及时送检,宜置于室温环境。
不应暂存于冰箱内。
2、放标本的容器必须防漏、禁止将渗漏的标本送到实验室。
血培养标本采集操作流程及要点说明

【护理目标】遵循无菌操作原则,患者、标本、送检准确。
【操作重点步骤】1.严格执行查对制度、无菌技术操作原则、标本采集原则。
2.需两人共同核对医嘱,患者的血型必须与用血申请单、交叉配血申请单、血型检验报告单、医嘱上的血型相符。
3.告知患者/家属交叉配血的目的和配合方法及采血后的注意事项。
4.按静脉采血法评估患者的静脉、皮肤情况并进行采血。
5.根据申请用血量决定交叉配血标本的量,若申请用血为200 mL则标本量为2 mL,申请用血量每增加200 mL标本量增加1 mL。
6.床旁采血前再需两人同时在床旁再次核对医嘱、患者(按采血容器标签上内容)、患者血型、用血申请单、交叉配血申请单。
7.采血完毕,标本连同输血申请单马上送输血科(或检验科)。
8.医疗废物按“感染性医疗垃圾”处理。
【结果标准】1.患者/家属对所做的护理操作和解释表示理解和满意。
2.采血准确、送检及时。
【操作流程及要点说明】与静脉采血法流程图同。
【护理目标】标本采集时间及容器符合检查要求,标本无污染,患者安全。
【操作重点步骤】1.严格执行查对制度、无菌技术操作原则、标本采集原则、标准预防原则。
2.评估患者的病情、抗生素使用情况,准备血培养基。
3.告知患者/家属采血的目的、方法及采血后的注意事项。
4.根据医嘱、评估结果选择恰当的血培养基和采血量。
5.采血过程中严格无菌技术操作,防止污染。
6.在申请单上准确记录采血量、采血时间、操作者姓名。
7.采血后,标本马上送检验室,防止标本变质、被污染。
8.医疗废物按“感染性医疗垃圾”处理。
【结果标准】1.患者/家属对所做的解释和护理表示理解和满意。
2.采取标本方法正确,标本符合检验要求。
3.标本送检和异常结果回报及时,异常情况得到及时处理。
血培养标本采集操作流程及要点说明操作流程要点说明。
血培养标本采集操作流程及要点说明

【护理目标】按照无菌操作原则,患者、标本、送检正确。
【操作重点步骤】1.严格履行核对制度、无菌技术操作原则、标本收集原则。
2.需两人共同核对医嘱,患者的血型一定与用血申请单、交错配血申请单、血型查验报告单、医嘱上的血型符合。
3.见告患者/家眷交错配血的目的和配合方法及采血后的注意事项。
4.按静脉采血法评估患者的静脉、皮肤状况并进行采血。
5.依据申请用血量决定交错配血标本的量,若申请用血为200 mL 则标本量为 2 mL,申请用血量每增添200 mL 标本量增添 1 mL。
6.床旁采血前再需两人同时在床旁再次核对医嘱、患者(按采血容器标签上内容 ) 、患者血型、用血申请单、交错配血申请单。
7.采血完成,标本连同输血申请单立刻送输血科( 或查验科 ) 。
8.医疗废物按“感染性医疗垃圾”办理。
【结果标准】1.患者/家眷对所做的护理操作和解说表示理解和满意。
2.采血正确、送检实时。
【操作流程及重点说明】与静脉采血法流程图同。
【护理目标】标本收集时间及容器切合检查要求,标本无污染,患者安全。
【操作重点步骤】1.严格履行核对制度、无菌技术操作原则、标本收集原则、标准预防原则。
2.评估患者的病情、抗生素使用状况,准备血培育基。
3.见告患者/家眷采血的目的、方法及采血后的注意事项。
4.依据医嘱、评估结果选择适合的血培育基和采血量。
5.采血过程中严格无菌技术操作,防备污染。
6.在申请单上正确记录采血量、采血时间、操作者姓名。
7.采血后,标本立刻送查验室,防备标本变质、被污染。
8.医疗废物按“感染性医疗垃圾”办理。
【结果标准】1.患者/家眷对所做的解说和护理表示理解和满意。
2.采纳标本方法正确,标本切合查验要求。
3.标本送检和异样结果回报实时,异样状况获得实时办理。
血培育标本收集操作流程及重点说明操作流程核对与静脉采血法同评估患者抗生素使用状况,其余与静脉采血法同见告1、血培育标本收集的目的和配合方法2、采血后注意事项准备1、用物:惯例消毒物件一套、止血带、血培育基、采血针、手套、按需备酒精灯及火柴2、其余与静脉采血法同使用密封瓶培育基采血1、将密封血培育瓶口的保护帽剔去,消毒瓶盖,干燥 1min2、选择适合的静脉和穿刺点,在穿刺点上方约6CM处系止血带,惯例消毒皮肤,嘱患者握拳3、戴手套后用采血针头按静脉穿刺法穿刺血管,见回血后用胶布固定针翼,接培育瓶,当针头出血速度变慢(由线状变点滴状)时反折针头,拔出培育瓶4、嘱患者松拳,快速拔出针头,用干棉签按压穿刺点 5 min使用三角烧瓶培育基采血1、将封瓶纸松开2、与上述 2同3、戴手套,按静脉穿刺法穿刺血管,见回血后用注射器抽取所需血量后松止血带,拔针方法与上述 4同4、将烧瓶塞翻开,快速在酒精灯火焰上消毒瓶口,取下针头,将抽出的血液沿管壁注入瓶内,轻轻摇匀,再将瓶塞经酒精灯火焰消毒后盖好,扎紧封瓶纸立刻送检重点说明1、按检查项目及抗生素使用状况准备相应的血培育基和采血量2、检查培育基灭菌有效期、有无损坏、胶塞有无松脱、瓶签模糊,瓶内培育液肉眼察看有无絮状物、变质1、成人血培育采血5ML2、小孩 2-3ML,婴儿 1-2ML3、亚急性细菌性心内膜炎患者为提升细菌培育阳性率,采血量可增至 10-15ML。
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山东省立医院血培养操作指南
当微生物侵入血液迅速繁殖超出机体免疫系统清除这些微生物的能力时形成菌血症或真菌血
症(统称血流感染),并可感染血管外组织, 临床上应该进行急症处理,应尽快采集血液进行培养。
血培养是采集患者血液标本并接种到培养瓶中,用以发现、识别引起菌血症或真菌血症的病原微生物,是诊断菌血症和真菌血症的基本而重要的方法。
血培养结果对感染性疾病的诊断、治疗和预后都有极为重要的临床意义。
1.标本的采集和运送
1.1 血培养的临床指征(须100%送检率):
1.1.1发热(≥38 ℃)或低温(≤36 ℃)伴下列一项:
A 寒战;
B 肺炎;
C 留置导管超过5天;
D 白细胞>1.8万/mm3;;
E 感染性心内膜炎;
F 收缩压低于90mmHg;
G 无其他原因可以解释的感染;
H PCT或CRP升高;
1.1.2发热≥39.5 ℃
注意事项:
1、怀疑脑膜炎患者应同时进行血培养;
2、对新生儿可疑菌血症,还应同时做尿液和脑脊液培养。
3、老年菌血症患者可能不发热或体温不低,如伴有身体不适、肌痛或卒中,可能是感染性心内膜炎的重要指征。
1.1.2 血培养的标本采集时机:
只要怀疑患者有血流感染的可能,在考虑使用抗菌药物之前,都应立即采集血培养标本。
若患者已行抗菌药物治疗,则应选择含有抗菌药物吸附物的培养瓶,并在下一次抗菌药物应用前采血培养。
细菌通常在寒战和发烧前1小时入血,此时为采集血培养标本进行病原菌培养的最佳时机。
1.1.3 血培养的次数:
要求:对怀疑菌血症、真菌血症的患者,推荐同时或短时间间隔(10分钟内)从不同部位(如
双臂)采集2~3套血培养标本,做到“双瓶双侧”。
如有必要,可同时或短时间间隔内从下肢静脉采血接种第三套培养瓶。
在采集血培养后的2至5天内,不需要重复采集血培养只有在疑似感染性心内膜炎或导管相关性感染患者的连续性菌血症时在不同时间点采血才有必要。
说明:以一个需氧瓶和一个厌氧瓶为一套血培养,作为常规血培养组合。
所谓“双瓶双侧”,是指从一个部位采血接种一套培养瓶,再从另一部位采血接种另一套培养瓶。
一次静脉采血注入到多个培养瓶中应视为单个血培养。
1.1.4 血培养的采血量:
要求:成年患者推荐的采血量为20~30ml,每瓶5ml~10ml。
婴幼儿患者推荐的采血量应少于患儿总血容量的1%,每瓶不少于2ml。
血培养采血量要根据患儿的血容量和年龄确定:
A 新生儿:只需做一侧需氧培养,即单瓶需氧瓶抽取0.5~1.5ml;
B 体重8~13Kg:只需做一侧需氧培养,即单瓶需氧瓶抽取:3~5ml;
C 体重13~36Kg:需做两侧需氧培养,每瓶需氧瓶抽取:3~5ml;
D体重>36Kg:需做到“双瓶双侧”抽取血培养,每瓶抽取:5~10ml;
1.1.5 血液标本在需氧瓶和厌氧瓶中的分配
要求:以一个需氧瓶和一个厌氧瓶为一套血培养,作为常规血培养的组合。
当采血量不够推荐的采血量时,应首先满足需氧瓶,剩余标本再接种入厌氧瓶。
1.2 血培养标本的采集
1.2.1 皮肤消毒与防止血培养污染
要求:使用碘伏、碘酊、次氯酸或异丙醇作为血培养的皮肤消毒剂,以下为各种消毒剂的种类及消毒方法:
1.2.2 标本采集部位
要求:从两侧上肢静脉采血,“双瓶双侧”采血培养。
必要时从下肢静脉采血做第三套血培养。
说明:不建议采集动脉血,其诊断价值不高,且增加了抽血污染的机会。
尽量避免从静脉留置导管采血培养,因其常伴有高污染率。
如果必须从留置导管内采血,也应同时从外周静脉采集另外一个血培养标本以帮助阳性结果的判读。
1.2.3 减少血培养污染的注意事项
要求:采血之前,血培养瓶的橡皮塞需使用70%异丙醇酒精消毒并干燥,然后再进行穿刺部位的皮肤消毒。
严格按照1.2.1所述皮肤消毒方法操作,并等待足够消毒时间。
严格无菌操作,医护人员采集标本前应严格洗手,不允许在皮肤消毒后用手接触待穿刺部位。
不推荐采血后更换注射器针头接种血培养瓶,采用真空采血装置能降低污染率。
说明:无论采用何种采血方法,血培养可接受的污染率通常是≤3%。
1.3 血培养标本的运送
要求:采血后应该立即送检。
如不能立即送检,需室温保存,切勿冷藏。
标本接种到培养瓶后,需轻轻颠倒混匀以防血液凝固。
说明:血培养瓶在接种前、接种后均不得冷藏或冷冻,否则会导致某些病原微生物死亡。
接种后的培养瓶最好立即送到实验室,最迟不能超过2小时。
1.4 血培养标本的拒收标准、
遇到下列血培养标本应拒收并且要求重新采集标本:
1.血培养瓶上贴的标签错误或未贴标签。
2.血培养瓶渗漏、破裂或明显污染。
3.血液凝固。
2. 几种特殊要求的血培养
2.1导管相关的血流感染(CRBSI)
2.3.1 短期外周导管
要求:通过静脉穿刺获得病人的两套外周血培养(双瓶双侧)。
无菌操作拔出导管并用Maki 半定量方法培养。
说明:Maki半定量法是先用75%酒精清洁导管周围皮肤,然后无菌移动导管,剪取导管末端5cm置于无菌容器中,立即送至实验室(为防止干燥,常规培养送检时间不得超过15min,4℃保存不得超过2小时)。
培养结果的解释:
a 如果一套或多套血培养阳性,导管片段培养也是阳性(半定量≥15 个菌落),并且为同一种菌:提示导管相关血流感染(CRBSI)。
b 如果一套或多套血培养阳性,而导管片段培养阴性:不能确定为CRBSI;但如果培养出的是金黄色葡萄球菌或假丝酵母菌,而且能排除其他来源的感染,则提示CRBSI。
c 如果血培养阴性,而导管片段培养阳性,提示是微生物在导管表面定植而非CRBSI。
d 如果血培养阴性,导管片段培养也是阴性,则不可能是CRBSI。
2.3.2 中心静脉导管及静脉留置口(VAP)
有两种方法,其中方法一适用于想保留导管的患者,如果已经决定要拔除导管,则方法二更合适。
方法一:对疑似CRBSI的患者至少需要采集两套血培养,其中至少一套标本来自外周静脉(注意做好标记),另一套血培养标本需同时或短时间间隔内从导管口或VAP隔膜无菌操作采集(注意做好标记)。
培养结果的解释:
a 如果两套血培养均阳性,通过菌种鉴定和药敏试验结果比对确定为同一株微生物,并且缺乏其他感染的证据,提示为CRBSI
b 如果两套血培养均为阳性,来自导管的血培养的细菌数量(CFU/ml)是外周静脉血培养的5倍以上,并且缺乏其他感染的证据,提示可能为CRBSI(适用于手工定量血培养系统,比如裂解-离心浓缩法) 。
c 如果仅有导管的血培养为阳性:不能确定为CRBSI,提示为导管定植菌或标本采集过程中的污染菌。
d 如果仅有来自外周静脉的血培养为阳性,不能确定为CRBSI,但是如果培养出的微生物是金黄色葡萄球菌或假丝酵母菌,并且缺乏其他感染的证据,则提示可能为CRBSI。
确定为CRBSI还需要定量或半定量导管片段培养出相同微生物。
e 如果两套血培养均为阴性,则不会是CRBSI
方法二:通过独立的外周静脉穿刺无菌采集两套血培养;拔出可疑导管,剪取5cm的导管远端的片段送实验室进行Maki’s半定量培养或振荡/超声后定量培养。
培养结果的解释:
a 如果一套或多套血培养阳性,同时导管末端培养阳性,而且通过菌种鉴定和药敏试验结果比对确定为同一株微生物,则很可能是CRBSI 。
b 如果一套或多套血培养阳性,而导管末端培养为阴性,如果培养出的微生物是金黄色葡萄
球菌或假丝酵母菌,并且缺乏其他感染的证据,则提示可能为CRBSI。
确定为CRBSI还需其他结果支持。
c 如果血培养阴性而导管末端培养阳性,提示为导管定植菌,不是CRBSI。
d 如果血培养和导管末端培养均为阴性,则不会是CRBSI。
2.4 感染性细菌性心内膜炎
血培养结果对感染性心内膜炎的诊断和治疗非常重要。
如果采用较理想的血培养技术,90%以上感染性心内膜炎患者能获得阳性血培养结果。
以下为适用于感染性心内膜炎诊断的特殊规定。
2.4.1血培养的采集时机
对于可能的心内膜炎患者,起始采集3套血培养,如果在24小时仍报告为阴性,则继续连续采集2套血培养,一共采集5套血培养。
a 急性感染性心内膜炎:
要求:在经验性抗生素治疗前30min之内采血培养(1~2小时内操作完毕)。
说明:对于疑似或已知高毒力病原菌(如金黄色葡萄球菌)所致感染性心内膜炎患者,需要在第一时间立即采血培养以避免治疗上不必要的延误。
b 亚急性感染性心内膜炎:
要求:每隔15min左右收集血液,采集数套血培养。
说明:适当的时间间隔有助于证明为持续性菌血症,尤其是当心电图正常或模棱两可时具有更高的临床价值。
对疑似亚急性感染性心内膜炎的患者,不一定必须在经验性抗生素治疗前采血培养,对这些患者,尝试确定微生物学诊断更为重要。
由于大多数感染性心内膜炎患者菌血症持续存在,使血培养的时间选择相对不是那么重要。
2.4.2 需要的血培养数量
对于可能的心内膜炎患者,起始采集3套血培养,如果在24小时仍报告为阴性,则继续连续采集2套血培养,一共采集5套血培养。
检验科细菌室
2015年4月30日
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