血培养操作技术
血培养操作指南
血培养操作指南血培养是一种常见的实验技术，用于检测病原微生物在血液中的生长。
它可以帮助诊断生物样本中的病原微生物感染，并确定其对不同抗生素的敏感性。
本文将介绍血培养的操作指南，包括准备工作、操作步骤和结果解读等内容。
一、准备工作1. 清洁操作区域：确保操作区域干净整洁，避免细菌的交叉污染。
可以使用70%酒精或其他消毒剂对操作台面进行消毒。
2. 准备培养基和试剂：血培养通常使用含有富营养物质的寒天培养基，如血琼脂（Blood agar）或巧克力琼脂（Chocolate agar）。
此外，还需要溶血素试剂用于检测细菌的溶血能力。
3. 样本采集器具：准备血液采集器具，如一次性血管采血器、针头和注射器等，确保采集的血液样本干净无菌。
4. 实验器具消毒：对使用的实验器具进行彻底消毒，如培养皿、注射针、试管等。
二、操作步骤1. 血液样本采集：选择合适的采集部位和采集方法，确保血液样本的质量。
常见的采集部位包括静脉、手指或动脉，具体采集方法请按照医学标准操作。
2. 分配样本：使用无菌的技术将采集的血液样本分配到不同的培养皿中。
常见的分配量为每个培养皿2-5毫升。
3. 涂布培养基：使用无菌的匀涂棒或玻璃棒，将血液均匀涂布在准备好的血琼脂或巧克力琼脂培养基上。
4. 培养条件设置：将涂有血液的培养皿放入恒温培养箱中，设置适当的温度和培养时间。
一般情况下，37℃是最常用的培养温度。
5. 观察培养结果：在培养箱中观察培养皿的生长情况。
如果有细菌或真菌的生长，会在琼脂表面形成菌落。
通常需要培养24小时以上才能获得可靠的结果。
6. 溶血试验：将生长的培养物用溶血素试剂滴于琼脂表面，观察是否有细菌对血细胞进行溶血作用。
7. 结果解读：根据生长的菌落形态和溶血试验的结果，可以初步判断感染的病原菌种类和性质。
进一步的鉴定和确认需要进行进一步的实验和检测。
三、注意事项1. 严格遵守无菌操作：整个实验过程中应遵守严格的无菌操作，防止细菌和真菌的污染。
临床微生物血培养操作指南最新版
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血培养采集操作规程
血培养采集操作规程一、概述当微生物侵入血液迅速繁殖超出免疫系统清除这些微生物的能力时形成菌血症或真菌菌血症。
血液和骨髓的细菌学培养对菌血症的诊断具有重要价值。
临床菌血症按病程可分为一过性菌血症、间歇性菌血症、持续性菌血症。
菌血症患者多数为间歇性菌血症，病原菌周期性出现在血液中，随之为无细菌时期。
不管临床症状经历的严重程度，患者血液中病原菌浓度相当低，据此要求临床多次采集血液标本进行培养，但24h内一般不超过3次。
血培养常见菌:革兰阴性菌主要包括大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌、肠杆菌，伤寒沙门菌、绿脓假单胞菌、不动杆菌属等;革兰阳性菌主要包括金黄色葡萄球菌、凝固酶阴性葡萄球菌、念珠菌属等。
菌血症是临床医学急症，应尽快采集血液进行培养。
二、物品准备与检验申请1、领取专用血培养瓶。
请拿检验申请单到病房二楼细菌室登记领取。
细菌室周一到周六上午正常上班。
其他时间如中午、夜班、节假日请到生化室联系。
普通血培养领取普通双相血培养瓶（绿色帽），全自动血培养领取:成人血培养领成人瓶（灰色帽），儿童血培养领儿童瓶（粉红色帽）。
2、填写检验申请单。
用钢笔填写，字迹清楚，填写完整。
填写内容包括：患者姓名、性别、年龄、科别、病区、床号、住院号、临床诊断、送检目的、申请医生及送检时间。
三、采集指征一般患者出现以下一种体征时可作为采血的重要指征:发热(≥38℃) 或低温(≤36℃) ，寒战，白细胞增多(计数大于10. 0×109/ L ，特别有“核左移”时) ，皮肤黏膜出血、昏迷、多器官衰竭，血压降低，C 反应蛋白升高及呼吸加快，血液病患者出现粒细胞减少，血小板减少等，或同时具备上述几种体征时而临床可疑菌血症应采集血液培养。
新生儿可疑菌血症，应该同时做尿液和脑脊液培养。
对入院危重感染患者应在未进行抗菌药物治疗之前，及时做血培养。
四、采集方法1、操作流程: 打开血培养瓶塑料盖用75%酒精消毒血培养瓶橡皮塞并擦干表面残余酒精→消毒皮肤后用无菌注射器抽取血液从橡皮塞处注入血培养瓶内→用75%酒精重新消毒血培养瓶橡皮塞并盖好塑料盖→立即送检。
血培养操作方法
进行血液培养是一种常见的微生物学实验操作，用于检测血液中是否存在细菌或真菌等病原微生物。
以下是一般的血液培养操作方法：
1.准备培养基和试剂：选择适用于血液培养的富营养培养基，如琼脂平板或液体培养
基。
确保培养基未受污染并符合要求。
另外，准备好其他必要的试剂和器具。
2.采集样本：从患者的静脉血液中采集样本。
严格遵守无菌操作规范，避免外界细菌
的污染。
3.接种：将采集的血液样本分别接种在含有富营养物质的琼脂平板上，或直接加入到
含有培养基的试管中。
4.培养：将接种后的琼脂平板或试管放入培养箱中，控制适当的温度和湿度，通常在
37°C 下培养24-48 小时。
5.观察：观察培养基上是否有细菌或真菌形成的典型菌落。
根据菌落的形态、颜色等
特征初步判断细菌或真菌的种类。
6.进一步鉴定：对初步检测出的菌落进行进一步的鉴定，可以进行革兰氏染色、生化
测试或分子生物学技术等。
7.结果分析：根据鉴定结果判断样本中是否存在病原微生物，并进行相应的治疗或进
一步检查。
注意：血液培养操作需要严格遵守无菌操作规范，避免交叉污染和误判结果。
在实验过程中，确保实验室环境的清洁和消毒，以减少外部细菌的干扰。
血培养操作指南
山东省立医院血培养操作指南当微生物侵入血液迅速繁殖超出机体免疫系统清除这些微生物得能力时形成菌血症或真菌血症（统称血流感染），并可感染血管外组织, 临床上应该进行急症处理,应尽快采集血液进行培养。
血培养就是采集患者血液标本并接种到培养瓶中，用以发现、识别引起菌血症或真菌血症得病原微生物，就是诊断菌血症与真菌血症得基本而重要得方法。
血培养结果对感染性疾病得诊断、治疗与预后都有极为重要得临床意义。
1、标本得采集与运送1、1 血培养得临床指征（须100%送检率）：1、1、1发热（≥38℃）或低温（≤36 ℃）伴下列一项：A 寒战；B 肺炎；C 留置导管超过5天；D 白细胞>1、8万/mm3;；E 感染性心内膜炎；F 收缩压低于90mmHg；G 无其她原因可以解释得感染；H PCT或CRP升高；1、1、2发热≥39、5 ℃注意事项：1、怀疑脑膜炎患者应同时进行血培养；2、对新生儿可疑菌血症,还应同时做尿液与脑脊液培养。
3、老年菌血症患者可能不发热或体温不低，如伴有身体不适、肌痛或卒中，可能就是感染性心内膜炎得重要指征。
1、1、2 血培养得标本采集时机：只要怀疑患者有血流感染得可能，在考虑使用抗菌药物之前，都应立即采集血培养标本。
若患者已行抗菌药物治疗，则应选择含有抗菌药物吸附物得培养瓶，并在下一次抗菌药物应用前采血培养。
细菌通常在寒战与发烧前1小时入血，此时为采集血培养标本进行病原菌培养得最佳时机。
1、1、3 血培养得次数：要求：对怀疑菌血症、真菌血症得患者，推荐同时或短时间间隔（10分钟内）从不同部位（如双臂）采集2～3套血培养标本，做到“双瓶双侧”。
如有必要，可同时或短时间间隔内从下肢静脉采血接种第三套培养瓶。
在采集血培养后得2至5天内，不需要重复采集血培养只有在疑似感染性心内膜炎或导管相关性感染患者得连续性菌血症时在不同时间点采血才有必要。
说明：以一个需氧瓶与一个厌氧瓶为一套血培养，作为常规血培养组合。
血培养方法学
血培养方法学
血培养是一种常用的微生物诊断方法，用于检测血液中存在的细菌感染。
下面是血培养的一般方法学步骤：
1. 血液采集：首先要采集患者的血液样本，通常使用无菌针和无菌试管采集静脉血。
采集前要进行消毒。
2. 原液处理：将采集的血液样本倒入无菌试管中，一般是
10～20毫升。
如果血液样本较稀，可加入适量的无菌生理盐
水稀释。
3. 培养基选择：将血液样本接种于适合培养细菌的含有富营养物的培养基内。
常用的培养基有肉汤、布鲁菌培养基和三联培养基等。
4. 培养条件：将接种好的培养基放入培养箱中，保持适宜的温度和氧气条件。
一般常温培养或体温培养，有些特定细菌需要氧气气氛，有些则需要无氧气氛。
5. 培养时间：通常培养时间为24-48小时，但也可能需要更长
时间，特别是对于一些特殊细菌如真菌。
6. 结果判断：观察培养基上是否有细菌生长。
如果有细菌生长，会形成菌落或者液体浑浊。
接着要进行细菌鉴定，通过形态特征、生理和生化反应等方法来确定细菌的种类。
7. 抗生素敏感性测试：如果需要，可以进一步进行抗生素敏感
性测试，以确定细菌对不同抗生素的敏感程度。
总的来说，血培养方法学是一种基于培养细菌的技术，通过专门的培养基和培养条件，可以检测血液中存在的细菌感染，并进行细菌鉴定和药物敏感性测试。
这种方法可以帮助医生诊断感染病因并选择合适的治疗方案。
血液培养标准操作规程
10临床意义
3.3标本拒收
3.3.1血培养瓶破裂或明显污染。
3.3.2培养瓶标识与检验申请单不符。
3.3.3用过期培养瓶采集标本，采血量不足等。
3.3.4对不合格标本，应及时通知采集人员重新留取标本。
3.4标本保存
采集标本后立即送检，不能及时送检的可室温放置，切勿放冰箱。冬季血培养瓶在送检过程应采取一定的保暖措施。
4试剂、仪器
4.1革兰氏染液、氧化酶试剂、3%触酶、血琼脂平板、巧克力平板、沙保罗平板及相关生化试剂等。
4.2恒星BC-60血液细菌培养仪、恒星HX-21细菌鉴定药敏分析仪，成人血培养瓶，厌氧血培养瓶、儿童血培养瓶、恒星细菌鉴定药敏分析试剂板。
4.3接种针、接种环、红外灭菌器、显微镜、电热恒温箱、CO2恒温培养箱、生物安全柜等。
4.4试剂有效期和使用参照试剂说明书。
5细菌鉴定及药敏质控
参见《微生物组内质量的控制程序》。
6检验步骤
接收标本后，立即对标本进行编号登记。门诊病人登记联系方式
6.1自动化培养
6.1.1置全自动血培养仪中。当标本有细菌生长时，仪器发出阳性报警，应立即用无菌注射器抽取瓶内培养液作直接涂片格兰染色，镜检，将结果向临床医生报告，同时转种血琼脂平板，并进行直接药敏试验，置35℃、5%CO2培养箱培养18-24h。若涂片为酵母样真菌时转接沙保罗培养基。从琼脂平板挑去菌落进行涂片染色及触酶和氧化酶实验。根据初步分出的菌属选不同的鉴定及药敏卡片上机进行细菌鉴定和药敏试验。
8.4传染病（伤寒沙门菌）报院感科及医务科。
8.5传染病菌株保存（伤寒沙门菌）交疾病控制中心复核
血培养操作规范PPT课件
➢相同时间采血 ➢检出时间有2-3个小时差异 ➢对于导管相关的菌血症和非导管相关的菌血症
很高的敏感性和特异性
Blot, et al., Lancet 354:1071, 1999
Malgrange, et al., Journal of Clinical Microbiology 39: 274, 2001
2.用注射器无菌穿刺取血后，勿换针头（如果 行第二次穿刺，应换针头）直接注入血培养瓶
3.按厂商推荐的方法采血
徐英春，倪语星等。血培养操作规范，上海科学技术出版社，2002,1-31 33
质量保证
静脉穿刺和培养瓶的接种
4.轻轻颠倒混匀培养瓶以防血液凝固 5. 培养瓶立即送实验室，不要冷藏
34
“Can Time-to-Positivity help diagnose patients with Catheter-related Bacteremia?”
需要抽取多少份血培养样本？
抽取2-3份血培养样本可使败血症病原菌检出率 达到 ~99%
败血症患者在初期千万不要（NEVER draw only 1 blood）仅抽取一套血培养
注意：“份”是指单独的静脉穿刺的数量。
19
怀疑急性原发性菌血症 真菌菌血症 脑膜炎 骨髓炎 关节炎 肺炎
采血份数
2或3份血培养
100 90 80 70 60 50 40 30 20 10 0 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60
ml
16
采血量 血液和肉汤的比例1:51:10
•血液含各种抑制细菌生长因子 •稀释血液可减少这些因子亚抑制细菌生长的水平 •血液中的抗生素会稀释了 •血液：肉汤<1：5可能会抑制细菌生长，不应注入过 量的血液
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（二） 操作流程 流程名称：血培养操作流程 2. 用物准备齐全，按医嘱备用物。 沟通
血培养操作技术
（一） 操作规范
工作目标 遵医嘱为患 者采集血培 养， 标本采集 时间及容器 符合检查要 求，无污染， 操作规范， 确 保患者安全。 规范要点 标准
1． 严格执行查对制度、 无菌技术操作原则、 标本 1. 患者 / 家属对 采集原则、标准预防原则。 所做的解释 2． 评估患者的病情、 抗生素使用情况、 准备血培 和护理表示 养基。 理解和满意。 3． 告知患者/家属采血的目的、方法及采血后的 2. 采 集 标 本 方 注意事项。 法正确， 标本 4． 根据医嘱、 评估结果选择恰当的血培养基和采 符合检验要 血量。 求。 5． 采血过程中严格无菌技术操作，防止污染。 3. 标 本 送 检 和 6． 在采血本上准确记录采血时间、采血人姓名。 异常结果回 7． 采血后，标本马上送检验室，防止标本变质、 报及时， 异常 被污染。 情况得到及 8． 医疗废物安“感染性医疗垃圾”处理。 时处理 。