大鼠急性肾缺血再灌注损伤模型的构建及分析
阿魏酸钠对肾脏缺血再灌注损伤大鼠肾脏组织病理学影响的实验研究
参考文献 ：
［］ ａａ ｗ ｌ． ｌ ｕａ ａｉ ｏ ｏｔ ｅｕ ｅｒ ｉ ｅｒ ｌ — １ Ｎｋｇａ ａ Ａ Ｍｏ ｃｌ ｂｓ ｆｓ ｎａ ｏｓｒ ￣ｓ ｎｏ ｎｕｏ ａ － ａ ｅ ｒ ｓ ｐ ｎ ｇ ｏｆ ｂｓ
ｔ ａ ｒｌ ｏ ｎｕｏｒｐｉ ｓ ｎｌ ａｄｇｎｔ ａｎｒ ａｔ ｓＪ ． ｕ ｅｌ ｏ ：ｏ ｆ ｅｒｔ ｈｅ ｉ ａｓ ｅｅ ｅｂｏｍ ｉｅ［］ Ｈ ｍ Ｃ ｌ ｍ ｅ ｏ ｇ ｎ ｉ ｌｉ ，
Ａ ｓ ａｔＯ ｊｃ ｖ Ｔ ｖｓｇｔ ｔｅｅｅｔ ｆ ｏｉ ｒ ａ ｅｏ ａｉ ｔｎｐｔｏ ｇ ｔ ｉ ｅ ｈｃ ａ ｘｅ — ｂｔ ｃ： ｂｅ ｅ ｏｉ ｅ ｉ ｅ ｈ ｆ ｃ ｏ ｓ ｕ ｆ ｔ ｔ ｔ ｔ ｒ ｎ ａ ｏ ａ ｌ ｙｏ ｒ ｄ ｙｗ ｉ ｗｓｅｐｒ ｒ ｉ ｔ ｎ ｔａ ｄ ｍ ｅｄ ｅ ｏ ｈ ｇ ｚｉ ｈｏ ｆ ａｋｎ ｈ ｉ ｅｃｄｉ ｈｍａｒ ｅｆ ｉ ｊ ｙ Ｍｅ ｏｓ ０ｒ ｓ ｅｅｄ ｔｂｔ ｕ ｒ ｐ ｔａｄｍ．ｈ ｒ ｏ ａ ｃｎ ｏ ｇ ｕ ． ｅ ｎｅ ｃｅ ｉ ｅ ｒ ｓ ｎｉ￣ ． ｔ ｄ ４ ｔ ｗ ｒ ｉｒ ｕｅ ｔｆ ｒ ｏ ｓ ｎｏ Ｔ ｅｆｓ ｉｎｒ ｌ ｏｔｌ ｒ ｐＴ ｓ ｐ ｕ ｏ ｎ ｈ ａ ｓｉ ｄ ｏ ｏ ｇ ｕ ａ ｒ ｉ ｔｓ ｍ ｒ ｏ ｈ
阿魏酸钠对大 鼠肾脏缺 血再灌 注损伤有保护作用 。
文 献标 识 码 ： Ａ
关键词 ： 阿魏酸钠 ； 血再 灌注 ； 缺 病理学
Ｔｈ ｘ ｒｍｅ ｅ ｅ ｒ ｈ ｂｏ ｔｔ ｅ ｅ ｅ ｔｏ ｏ ｉ ｅ ｕａ ｅ ｔ ｈｅ ｏ ｇ ｎｉａｉ ｎ ｐ ｈｏｏ ｙ ｏ ａ ｄ ｙ ｗｈｉｈ ｗａ ｘ ｒ－ ｅ ｅ ｐｅ ｉ ｎｔｒ ｓ ａ ｃ ａ ｕ ｈ ｆ ｃ ｆｓ ｄｕｍ ｆ ｒ ｌｔ ｏ ｔ ｒ ａ ｚ ｔｏ ａｔ ｌｇ ｆｒ ｔｋｉｎｅ ｃ ｓ ｅ ｐｅ ｉ
钙卫蛋白在肾脏缺血再灌注损伤大鼠中的表达及其作用
钙卫蛋白在肾脏缺血再灌注损伤大鼠中的表达及其作用陈萍祯;朱晔;张慧涛;徐晓嫦;郑晶;贾宁;林宇静;李玲玲;张桦【摘要】目的：探讨钙卫蛋白（ CALP）在肾脏缺血再灌注损伤（ IRI）大鼠中的表达及其在炎症反应中的作用。
方法：50只雄性SD大鼠随机分为IRI组和假手术组（ sham组），每组25只。
各组分别于缺血再灌注后6 h、12 h、24 h、48 h和72 h观察肾脏病理改变，检测大鼠血清尿素氮（BUN）和肌酐（SCr）水平，ELISA法检测大鼠血清CALP、肿瘤坏死因子（ TNF）－α和白细胞介素（ IL）－6的含量，免疫组织化学法和Western blot法分别检测大鼠肾脏CALP、Toll样受体4（ TLR4）和NF－κB p65蛋白表达水平。
结果：IRI组大鼠肾脏呈现不同程度的肾小管上皮细胞和间质损伤，伴炎细胞浸润。
血清BUN、SCr、CALP及促炎细胞因子TNF－α、IL－6的含量在各时点均显著高于sham组（P＜0．05）。
CALP、TLR4和NF－κB p65主要表达于肾小管上皮细胞胞质中，在IRI组呈高表达，在各时点各因子的表达与sham组相比均显著增强（ P＜0．05）。
结论：肾脏IRI大鼠的血清CALP、TNF－α和IL－6水平升高， CALP、TLR4和NF－κBp65在肾组织中表达增强。
CALP在大鼠肾脏IRI的炎症反应中可能起重要作用。
%[ ABSTRACT] AIM:To investigate the expression of calprotectin( CALP) in the rats with renal ischemia-reperfu-sion injury( IRI) .METHODS:Male Sprague-Dawley rats were randomly divided into sham operation and IRI group ( n=25 in each group) .Blood samples and the kidneys were obtained at 6 h, 12 h, 24 h, 48 h and 72 h after reperfusion.The pathological changes of the kidneys were observed.The serum concentrations of blood urea nitrogen ( BUN) and serum cre-atinine (SCr) were measured.The serum levels of CALP, tumor necrosis factor-α(TNF-α) and interleukin-6 (IL-6) were detected by ELISA, and the expression of CALP, Toll-like receptor 4 ( TLR4) and NF-κB p65 in the renal tissues were de-termined by the methods of immunohistochemistry and Western blot.RESULTS: Different serial ischemia changes were observed in the renal tissues, mainly in the renal tubular epithelial cells and the mesenchyma, with the infiltration of in-flammatory cells.The serum levels of BUN, SCr, CALP, TNF-αand IL-6 in IRI group were markedly increased as com-pared with sham group (P<0.05).The protein expression of CALP, TLR4 and NF-κB p65 in the renal tubular epithelial cells in IRI group was greatly enhanced in comparison with that in sham group( P<0.05) .CONCLUSION:The serum concentrations of CALP, TNF-αand IL-6, and the protein expression levels of CALP, TLR4 and NF-κB p65 in the renal tissue are significantly increased in the rats with IRI, suggesting that calprotectin plays an important role in the inflamma-tion in rats with IRI.【期刊名称】《中国病理生理杂志》【年(卷),期】2016(032)007【总页数】6页(P1317-1322)【关键词】肾脏;缺血再灌注损伤;钙卫蛋白;Toll样受体4【作者】陈萍祯;朱晔;张慧涛;徐晓嫦;郑晶;贾宁;林宇静;李玲玲;张桦【作者单位】中山大学附属第五医院肾内科，广东珠海519000;中山大学附属第五医院肾内科，广东珠海519000;中山大学附属第五医院肾内科，广东珠海519000;中山大学附属第五医院肾内科，广东珠海519000;中山大学附属第五医院肾内科，广东珠海519000;中山大学附属第五医院肾内科，广东珠海519000;中山大学附属第五医院病理科，广东珠海519000;中山大学附属第五医院中心实验室，广东珠海519000;中山大学附属第五医院肾内科，广东珠海519000【正文语种】中文【中图分类】R363.2+1肾脏缺血再灌注损伤(ischemia-reperfusion injury，IRI)是引起急性肾损伤(acute kidney injury，AKI)的常见原因，也是心肺复苏、肾移植、多种类型休克、造影剂肾病等临床事件中不可避免的重要环节。
老年大鼠肾缺血再灌注后肺损伤一氧化氮合酶的变化与意义
的表达 ， 同时检 测肺 组 织 中 ＭＤ ＭＰ Ｗ／ 和 ＮＯ。 ／ 。 值 ， 组织 形 态学观察 以评价 肺损 Ａ、 Ｏ、 Ｄ 一 ＮＯ 一 肺
陕西 医学 杂志 ２ １ ０ ０年 ４月第 ３ ９卷第 ４ 期
４１ １
老年 大 鼠 肾缺 血再 灌 注后 肺损 伤 一氧 化氮 合 酶 的变化 与意义
华北煤 炭 医学院 生理教研 室 （ 山 ０ ３０ ） 张 伟 夏 晓红 王燕凌 王 惠娟 苗智 慧 唐 ６００ 摘 要 目的 ： 究大鼠 肾缺血／ 研 再灌 注后 急性肺损 伤 时 ， 内皮 型一 氧化 氮合酶 （ＮＯＳｖ ｓｉ ａｅ ｈ ｅ ｐ ｅｓｏ ａ ｄ ｏｅ ｆ ｉｄ ｃｂｅ ｊｃｉ ： ｎ ｅｔｇ ｔ ｔ ｅ ｘ ｒ ｓｉｎ ｎ ｒ ｌ ｏ ｎ ｕ ｉ ｌ ｖ ＮＯＳ （ＮＯＳ） ａ ｄ ｉ ｎ
ｅ ｄ ｔ ｅｉｌ ｎ ｏｈ ｌ ａ ＮＯＳ（ ＮＯＳ）ｉ ｃ ｔ ｕ ｇｉｊｒ ｏｌ ｗｉｇｒ ｎ ｌｓ ｈ ｍ ｉ ｒ ｐ ｒｕ ｉｎ（ ５ ｉ／ ４ ｅ ｎａ ｕ ｅｌｎ ｕ ｙｆ ｌ ｎ ｏ ｎ ｅ ａ ｉｃ ｅ ａ ｅ ｅｆ ｓｏ ４ ｍ ｎ ２ ｈ）ｉ ａｓ Ｍ ｅｈ ｄ ： ｎ ｒｔ． ｔｏ ｓ
ｔ ｓ ｅｏ ｅ ｃ ｒ ｕ ｓｓ ｂｅ ｔｄｔ ｓ ａ ｆ ｏ ｔｎ ｆ Ｄ ｉ ｕ ｆ ａ ｈｇ ｏ ｐｗａ ｕ ｊｃｅ ｏａ ｓ ｙｏ ｎ ｅ ｔ Ａ， Ｏ ， ／ ｎ ｓ ｃ ｏＭ ＭＰ Ｗ Ｄ ａ ｄＮＯ２ ／ Ｏｓ ．Ｔｈ ｕｍｏ ａｙ 一Ｎ 一 ｅｐ ｌ ｎ ｒ
“分心木”水提物对大鼠单侧肾缺血-再灌注损伤的防护作用
“分心木”水提物对大鼠单侧肾缺血-再灌注损伤的防护作用作者：张伟陈雪洁刘蓉肖朝江沈磊田新雁姜北来源：《中国民族民间医药·下半月》2022年第02期【摘要】目的：運用模型大鼠探究民族民间药物分心木（DJF）水提物预处理对单侧肾缺血-再灌注损伤（RIRI）的防护作用。
方法：SD大鼠随机分为对照组、模型组、DJF水提物高、低剂量组。
DJF水提物高、低剂量组在建模前，每天分别给予不同剂量的DJF水提物，连续用药14 d，对照组和模型组以相同方式灌胃等体积的蒸馏水。
DJF水提物组和模型组进行缺血-再灌注处理，对照组只分离肾动脉。
24 h后，取血和肾脏组织。
检测各组大鼠血清肌酐（Cr）、尿素氮（BUN）、丙二醛（MDA）、超氧化物歧化酶（SOD）的水平，肾脏组织黄嘌呤氧化酶（XOD）的活力，H&E染色观察各组肾组织病理结构变化。
结果：与模型组相比，分心木水提物高剂量组，可显著降低Cr、BUN、MDA的含量及抑制XOD的活性，提高SOD的活力，明显改善肾脏结构。
结论：分心木水提物具有抑制XOD活性、调节氧化应激的功效，且可一定程度改善肾缺血-再灌注损伤后的肾功能。
【关键词】分心木;水提物;肾缺血-再灌注损伤;氧化应激;黄嘌呤氧化酶【中图分类号】R285.5【文献标志码】 A【文章编号】1007-8517（2022）04-0025-04Protective Effect of the Aqueous Extract of Diaphragma Juglandis Fructus on Unilateral Renal Ischemia-reperfusion Injury in RatsZHANG Wei1CHEN Xuejie1LIU Rong1XIAO Chaojiang1SHEN Lei1TIAN Xinyan2JIANG Bei11.Institute of Materia Medica， Dali University， Dali 671000， China;2. Basic Medical College， Dali University， Dali 671000， ChinaAbstract：Objectives To investigate protective effect of aqueous extract of the folk medicine Diaphragma Juglandis Fructus （DJF） on rat model with unilateral renal ischemia reperfusion injury （RIRI）. Methods SD rats were randomly divided into control group， model group， high-dose and low-dose DJF aqueous extract groups. The DJF groups were given different doses of DJF aqueous extract for 14 consecutive days before the model was constructed. The control group and the model group were given the same volume of distilled water in the same way. The groups of DJF aqueous extract and model group were treated with ischemia-reperfusion. In the control group， only the renal artery was isolated. After 24 hours， blood and kidney tissues were taken. Then detect the contents of Cr， BUN， MDA， SOD， and the activities of XOD， renal tissues were taken for H&E staining to observe renal pathological changes in each group.Results Compared with model group， high-dose group of DJF aqueous extract significantly reduces contents of Cr， BUN， MDA， inhibits XOD activity， promotes SOD activity and improves renal structure. Conclusion Aqueous extract of Diaphragma Juglandis Fructus possesses ability of suppressing XOD activity and regulating oxidative stress response， and can improve renal function after RIRI to a certain extent.Keywords：Diaphragma Juglandis Fructus; Aqueous Extract; Renal Ischemia-Reperfusion Injury; Oxidative Stress; Xanthine Oxidase肾缺血-再灌注损伤（Renal ischemia reperfusion injury，RIRI）是指在肾脏缺血的基础上恢复血流后，损伤反而加重的现象，是引发急性肾损伤和肾衰竭的重要因素[1]。
辛伐他汀对肾缺血再灌注损伤大鼠心肌细胞凋亡的影响
辛伐他汀对肾缺血再灌注损伤大鼠心肌细胞凋亡的影响目的观察辛伐他汀预处理对肾缺血再灌注损伤大鼠远程器官细胞凋亡的影响。
方法采用夹闭双侧肾动静脉45分钟后去夹再灌的方法复制肾缺血再灌注损伤（RI/RI）模型。
36只SD大鼠隨机分成3组：（1）假手术组；（2）肾缺血再灌注组；（3）辛伐他汀组，每组12只。
取心肌组织测定乳酸脱氢酶（LDH）、肌酸激酶（CK）活性，TUNEL法检测细胞凋亡率，蛋白免疫印迹检测NF-kB蛋白表达。
结果与假手术组比，肾缺血再灌注组LDH、肌CK活性增高，细胞凋亡率升高，NF-kB表达增多，差异有统计学意义（P＜0.05）。
与肾缺血再灌注组相比辛伐他汀组LDH、CK活性降低，胞凋亡率降低，差异有统计学意义（P＜0.05），NF-kB表达降低。
结论辛伐他汀对RIRI大鼠心肌损伤有改善作用，可能与凋亡基因NF-kB表达有关。
标签：辛伐他汀；细胞凋亡；NF-kB他汀类药物是三羟基三甲基戊二酰辅酶A还原酶抑制剂，目前普遍用于治疗高脂血症。
近年来发现，他汀类药物除降血脂作用外，还有抗炎作用，对肾脏有保护功能等其他非降脂方面的作用，在防治心脏疾病方面也日益重视[1]。
但辛伐他汀预处理对远程器官的影响的研究尚不多见。
本实验就此进行了初步研究。
1 资料与方法1.1 一般资料成年健康雄性SD（河北省实验动物中心）；辛伐他汀（杭州上虞京新药业有限公司）；LDH、CK（南京建成生物制品公司）；NF-kB（Santa cruz biotechnology）。
成年健康雄性SD大鼠36只，体重16～230 g，在20～26℃实验室安静饲养两天后随机分为3组：（1）假手术组；（2）肾缺血再灌注组；（3）辛伐他汀组。
每组12只。
分组后，辛伐他汀组每日给予辛伐他汀20 mg/kg灌胃，持续2周。
假手术组和缺血再灌组每日给予等量的生理盐水灌胃。
两周之后复制动物模型。
1.2 方法10%水合氯醛腹腔麻醉，开腹，暴露双侧肾动、静脉。
普罗布考对肾脏缺血再灌注损伤大鼠的保护作用及机制
普罗布考对肾脏缺血再灌注损伤大鼠的保护作用及机制杨成;任星峰;彭隽【摘要】目的观察普罗布考对缺血再灌注大鼠肾脏氧化应激损伤的保护作用,同时探讨其作用机制.方法雄性SD大鼠30只,随机分为假手术组(S组)、缺血再灌注组(IR组)、普罗布考治疗组(P+IR组),每组10只.P+IR组大鼠每天用普罗布考(500 mg/kg)灌胃,S组和IR组大鼠每天用等量温开水灌胃.1周后制备肾缺血再灌注大鼠模型:3组大鼠都摘除右肾,IR组和P+IR组用无创动脉夹夹闭左侧肾动脉,30 min 后松夹恢复血流再灌注.再灌注后S组和IR组每天温开水灌胃,P+ IR组每天普罗布考灌胃,连续1周.1周后处死所有大鼠,留取血及肾组织标本,检测大鼠各项血液生化指标,观察肾组织病理学改变.结果与IR组相比,P+IR组血尿素氮(BUN)、血肌酐(SCr)、血脂水平明显降低(均 P<0.05),血清和肾组织中SOD活性明显上升、MDA 含量明显下降(均 P<0.05),肾组织病理损伤减轻,肾指数明显改善(P<0.05).结论普罗布考能提高缺血再灌注损伤大鼠血及肾组织中SOD活性,改善肾功能,降低血脂水平,减轻肾组织病理损伤,发挥肾脏保护作用.%Objective The aim of the study was to investigate the protective effect of probucol on oxidative stress injury in rats with ischemia-reperfusion injury(IRI)and its mechanism. Methods Thirty male Sprague-Dawley rats were randomly di-vided into sham operation group(S group),ischemia-reperfusion group(IR group),and probucol treatment group(probucol+IR group,P+IR group).Rats in the S and IR groups were fed with warm water every day,and rats in P+IR group were treated with probucol.After 1 week,rat model of renal ischemia and reperfusion was established.Right kidneys of the rats were re-moved.In IR and P+ IR groups,the left renal artery was clamped with a non-invasiveartery clamp,and after 30 minutes the blood vessels restored patency by loosening the clamp.After reperfusion,the S and IR groups were perfused with warm water every day,and the P+IR group was treated with probucol for 1 week.After 1 week,all the rats were sacrificed and the blood and kidney tissue specimens were taken.The blood biochemical indexes of the rats were measured,and the pathological changes of the kidneys were observed.Results The levels of blood urea nitrogen(BUN),serum creatinine(SCr)and blood lipids in P+ IR group were significantly lower than those in IR group(all P<0.05);in P+IR group,the level of superoxide dismutase(SOD)in serum and renal tissue was increased significantly(allP<0.05),meanwhile,the levels of malondialdehyde(MDA)were significantly decreased (P<0.05).In P+IR group,the pathological damage of kidney tissue was reduced,and renal index was significantlyimproved(P<0.05).Conclusion Probucol can increase the activity of SOD in blood and kidney of rats with IRI,improve renal function,reduce the level of blood lipids,reduce the pathological injury of renal tissue,and play a role in renal protection.【期刊名称】《华中科技大学学报（医学版）》【年(卷),期】2017(046)006【总页数】5页(P660-664)【关键词】普罗布考;肾脏;缺血再灌注;氧化应激【作者】杨成;任星峰;彭隽【作者单位】中国人民解放军武汉总医院肾内科,武汉 430070;中国人民解放军武汉总医院肾内科,武汉 430070;中国人民解放军武汉总医院肾内科,武汉 430070【正文语种】中文【中图分类】R691.6在日常生活中，各种突发事件、自然灾害以及战争伤导致的多器官损伤中，急性肾损伤(acute kidney injury，AKI)约占67%，其发病率和死亡率一直居高不下。
急性心肌缺血再灌注损伤大鼠模型制备方法的改进与评价
ｔｅ ｉｃｓ ｌｏ ｅ ｉ ｇｉ ｈ ｎ ｉａ ｐ ｎｎ ｍｍｅ ｉ ｔｌ． ｈ ｈ ｎ ｅｏ ｅ ｌｃｒ ｃ ｒ ｉｇ ａ ｆｌａ Ｉｃ ｕ ｄ ｂ ｅ ｒｄ ｄ ａ ｅｉ ｄ ｘ ｏ ｅ ｄ ａｅｙ Ｔ ｅ ｃ ａ ｇ ｆ ｈ ｅ ｅ ｔ ａｄ ｏ ｒ ｍ ｏ ｄ Ｉ ｏ ｌ ｅ ｒ ｇ ａ ｅ ｓｔ ｎ ｅ ｆ ｈ ｔ ｏ ｅ ｈ ｔ
陈业农 周逸平 １ 汪克 明 蔡 荣林 王 月兰 李 晓民
中图 分类 号 ： ２５ ５ 文 献 标 识 码 ： 文章 编 号 ：０ ４—７ ５ ２０ ） ３ ３ ９—０ Ｒ ８ ． Ａ １０ ４ Ｘ（０ ８ ０ —０ ５ ３
【 摘要 】 目的 改进和完善大 鼠急性心肌缺血再灌注损 伤动物模 型的制备， 简化手术操作步骤 ， 提高模型成
ｔ ａ ｄ ａ ｓ ｌ ｎ ｅ ｈｅｌｆ ｏｏｎ ｒ ｒｅ ｔ ｈ ｅ ｄ ａ ｄ ｒ ｔｒ ｅ ｈ ｅ ｒ ｏ ｔｅ ｔ ｏ ａ ｉ ａ ｉ ｈｅ ｌ ｍｐ ｈｅｃ ｒ ｉｃ ｍｕ ｃｅ ｕ ｄ ｒｔ ｅ ｃ ｒ ａｙ ａ ｒ ｗｉｈ ａｔ ｒ ａ ｎ ｅｕ ｎ ｄ ｔｅ ｈ ａ ｔｔ ｈ ｈ ｒ ｃｃｃ ｖｔ ｔ ｎｃ ａ ｔ ｔ ｙ ｙ
后的方法 能大大降低手术难度 ，提高模型成功率和动物成 活率 ，准确地复制心肌缺血再灌注损伤 的实验模
型 ， 化 实 验 操 作 步骤 。 简
【 键词 】 大 鼠 关
心肌缺血再灌注
动物 实 验模 型
Ｉ ｐ ｖｎｇ ｎｄ Ｅｖ ｕａ ｉ ｔ ｅ ｈｏ ｏ ｔ ｌｓ ｎｇ ｍ ｒｏ ｉ ａ ａｌ ｔｎｇ ｈｅ Ｍ ｔ ｄ ｆ Ｅｓａｂｉｈｉ Ｒａ ｏｄ ｌ ｆ Ａ ｃ ｅ Ｍ ｙ ａｒ ｉ ｌ ｔＭ ｅ ｓ ｏ ｕｔ ｏｃ ｄ ａ Ｅｓ ｈ ｍ ｉ ｐｅ － ｃ ｅ ａ Ｒｅ ｒ ｆ ｉ ｎ ｕｓｏ ＣＨＥＮ ｅｎ ｒ Ｙ — ｏｔ ｇ，ＺＨＯＵ － ｎ Ｙｉ ｐｉｇ，ＷＡＮＧ Ｋｅｍ ｉｇ，ｅ ｌ — ｎ ｔａ
异丙酚对大鼠肾脏缺血再灌注损伤的保护作用
采用石 蜡切 片 ，Ｐ免 疫 组 化试 剂 盒 （ 京 中杉生 化 Ｓ 北 公 司） 检测 ＩＡ １ 白在 肾皮 质 的表 达 ： 蜡 切片 Ｃ Ｍ－蛋 石 经烤 片 、 度酒 精 脱蜡 ，．％ Ｈ ０ 孵 育 １ ｉ 梯 ０３ ： ５ｍｎ以
猝灭 内源性 过 氧化 物 酶活 性 ，％ Ｂ Ａ封 闭血清 消 ５ Ｓ 除 非特异性 染 色 ， 人 山羊 抗 大 鼠 ＩＡ １Ｉ 美 加 Ｃ Ｍ． ｇ Ｇ（
缺 血再 灌 注 （Ｒ） 伤 是 导致 肾功 能 不 全 的 最 Ｉ 损 常 见原 因之一 。研 究 认 为 ， 化应 激 诱 导 的炎 症 级 氧
联反 应是 导致 Ｉ 脏 器损伤 的重要 因素 ， Ｒ后 而血管 内
（ Ａ） 谷胱甘 肽过氧 物酶 （ Ｓ ｅ ） 部分 用 １％ ＭＤ 、 Ｇ Ｈ—ｘ ； ０ 甲醛 固定 ， 石蜡包 埋行 免疫 组化 检测 ； 部分冻存 于 一
ａｎ后 ｒｉ 取 下血 管 夹 ， 果 肾脏从 暗 紫 色转 成 红 色 说 如 明 Ｉ 伤模 型 建 立 成功 。Ｃ组 仅 行 腹部 正 中切 口 Ｒ损
后依次加入生物素化抗山羊 Ｉ 过氧化物酶结合 ｇ Ｇ、 的抗 生物素蛋 白链 菌素 工 作 液孵 育 ３ ｉ，Ａ ０ｍｎ Ｄ Ｂ显
色， 苏木素 复 染 ， 脱水 、 明 、 透 中性 树胶 封 片 ， 下观 镜 察、 拍照 。ＩＡＭ一 肾小 球 和 问 质 的 阳性 染 色 面 Ｃ １在 积 、 密度 采用 Ｌｉ ｗｎＳａｄｒ ２６图像 分 析 光 ｅｃ Ｑ ｉ ｔ ａ Ｖ ． ａ ｎ ｄ
系统 进行定 量分析 。 １２ ５ Ｒ — Ｃ ． ． Ｔ Ｐ Ｒ方 法检 测 肾组织 ＩＡ １ｍＲ Ａ 的 Ｃ Ｍ一 Ｎ 表达 研磨 组 织标 本 ， Ｔｉ ｌ 以 ｒ ｏ 试剂 提 取 Ｒ Ａ。上 ｚ Ｎ 下 游 引 物 序 列 ：Ｃ Ｍ一 ： Ｇ Ｃ Ｔ Ｃ １ Ａ Ａ － Ｉ Ａ １ ５一 Ｃ Ｇ Ｃ Ａ ］ Ｃ Ｃ
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大鼠急性肾缺血再灌注损伤模型的构建及分析
摘要】目的：对腹部切口构建急性肾缺血再灌注损伤动物模型予以优化，构建
急性肾缺血再灌注损伤模型的新途径。
方法：大鼠取俯卧位予以固定，将腹部垫起，在背部正中偏右一厘米处切开皮肤，开口为三厘米，切开腰背筋膜肾周脂肪
组织暴漏在外，因此已进入腹膜后间隙。
通过拉钩支撑切口，通过钝性游离脂肪
组织右肾与肾蒂漏出，在此基础上分离右肾动脉直到腹主动脉，通过棉签向腹主
动脉底端游离，方可发现左肾动脉。
隔绝举措：无损伤动脉夹隔绝双肾动脉，滞
留四十五min，松开无损伤动脉夹，查看肾灌注无异常后缝合切口。
结果：实验
组一只Sprague-Dawley由于术中出血而死亡，其他十五只术后存活，实验组的手
术成功率超过九十三个百分点，伪手术组及对照组Sprague-Dawley术后均存活。
实验组serum creatinine 与BUN显著超过伪手术组及对照组，检测结果表明实验
组Sprague-Dawley第一天、第四天与第七天的serum creatinine与BUN逐渐降低，且P＜0.05，即术后肾功能慢慢得到恢复。
结论：此次研究我们所构建的大鼠急
性肾缺血再灌注模型具有较强的稳定性，可以很好的匹配于急性肾缺血再灌注损
伤研究。
【关键词】大鼠；急性肾缺血；再灌注损伤模型；构建；分析
【中图分类号】R3 【文献标识码】A 【文章编号】
1007-8231（2017）25-0349-02
分析细胞及其因子在急性肾损伤中的功能，同时分析药物对急性肾损伤的治
疗过程所需构建急性肾缺血再灌注损伤动物模型。
目前的建模模式包括腹部切口
与侧腹部切口。
腹部切口对胃肠道功能具有一定的影响，同时也可能造成腹腔感染；侧腹部切口要破坏侧腹部肌群，同时肾蒂的暴漏不完全。
此次研究通过背部
切口，切开腰背筋膜进入腹膜后间隙，隔绝双侧肾动脉，成功构建大鼠急性肾缺
血再灌注损伤模型。
此举措相对便捷，其特点为手术创伤小、不会对胃肠道造成
较大的影响同时不易出现并发症。
文章将以大鼠急性肾缺血再灌注损伤模型的构
建及分析作为切入点，在此基础上予以深入的探究，相关内容如下所述。
1.材料及方法
1.1 材料
随机选择三十二只Sprague-Dawley，平均体重为二百二十克，通过一般饲料
喂养。
试剂与设备包括：6.94%（±0.47）CCI3CH（OH）2；3.8%（±0.5）POM；无损伤动脉夹；显微手术设备；serum creatinine；BUN检测试剂盒；MDA检测试剂盒；Eclipse 50i 显微镜；ultrospec4300pro 分光光度计。
1.2 方法
大鼠急性肾缺血再灌注损伤模型的构建。
麻醉方式：6.94%（±0.47）CCI3CH （OH）2，0.3克/千克，通过腹腔注射。
游离肾动脉：大鼠取俯卧位予以固定，
将腹部垫起，在背部正中偏右一厘米处切开皮肤，开口为三厘米，切开腰背筋膜
肾周脂肪组织暴漏在外，因此已进入腹膜后间隙。
通过拉钩支撑切口，通过钝性
游离脂肪组织右肾与肾蒂漏出，在此基础上分离右肾动脉直到腹主动脉，通过棉
签向腹主动脉底端游离，方可发现左肾动脉。
隔绝举措：无损伤动脉夹隔绝双肾
动脉，滞留四十五min，松开无损伤动脉夹，查看肾灌注无异常后缝合切口。
此次研究我们将三十二只Sprague-Dawley随机分成三组，即实验组十六只、
伪手术组八只以及对照组八只。
实验组通过上述举措构建大鼠急性肾缺血再灌注
损伤模型；伪手术游离左、右侧肾动脉后不予以夹闭处理，其余步骤与实验组相同；对照组Sprague-Dawley的饲养方式等无差异，仅用于对比。
1.3 观察标准
术后第一天、第四天、第七天予以采血，检测serum creatinine与BUN水平
评估肾功能，而在术后第一天及第七天三组各随机选择三只处死，并采集肾组织，制备9.5%（±0.64）肾组织匀浆检测丙二醛饱和度；选择部分肾组织通过3.8%
（±0.4）POM予以固定，经C25H32包埋后制成四微米切片，在此基础上予以苏
木精-伊红染色法染色，同时行肾小管坏死半定量分析。
1.4 统计学方法
此次研究统计择取SPSS16.0软件，多组样本均数对比择取ANOVA方差予以
分析，P≤0.05即对比有显著的统计学差异。
2.结果
实验组一只Sprague-Dawley由于术中出血而死亡，其他十五只术后存活，实
验组的手术成功率超过九十三个百分点，伪手术组及对照组Sprague-Dawley术后
均存活。
实验组serum creatinine 与BUN显著超过伪手术组及对照组，检测结果
表明实验组Sprague-Dawley第一天、第四天与第七天的serum creatinine与BUN
逐渐降低，且P＜0.05，即术后肾功能慢慢得到恢复。
众所周知肾脏丙二醛水平在很大程度上体现了机体中脂质过氧化的水平，能
够间接一线组织细胞受损状态。
实验组术后第一天Sprague-Dawley肾丙二醛显著
超过对照组，且P＜0.05，所以此建模模式能够造成大鼠肾损伤。
实验组术后的
第七天丙二醛值呈降低之势，不过依然超过对照组。
在行术后的第一天，我们对三组Sprague-Dawley分别取肾，肉眼见实验组的
肾包膜紧张，有显著的肾肿胀现象，切片后予以苏木精—伊红染色法。
术后第一天在光镜下发现，肾小管上皮细胞出现肿胀，个别区域发生坏死以及溶解现象，
肾间质出血同时伴有明显的炎细胞浸润，伪手术组的肾组织无显著改变；通过透
射电镜检查表明实验组Sprague-Dawley肾组织发生一系列的损伤性变化，肾小管
出现坏死的情况，线粒体肿胀、同时溶酶体呈几何形递增。
在术后第七天，可见
实验组肾形态无显著改变，苏木精—伊红染色法见肾小管上皮肿胀有所缓解，发
生灶性坏死，电镜检查表明依然存在损伤性变化，肾小管上皮细胞存在异常正常，伪手术组的肾组织无显著变化。
3.讨论
此次研究通过背侧切口逐层切开皮肤与腰背筋膜，在此基础上深入腹膜后间隙，游离双侧肾动脉并钳夹，构建大鼠急性肾缺血再灌注损伤模型。
背侧入路能够依附于单侧肾钳夹与对侧肾切除的操作去构建急性肾缺血再灌
注损伤模型。
背侧切口能够暴漏同侧的肾动脉，在此次研究过程中我们发现，经
左侧切口显露右肾动脉相对困难，而右侧背部切口则可以很好的显露双侧肾动脉。
我们还可将背部皮肤予以游离，在左侧背部皮下进行切口，进而辅助一侧肾钳夹
与对侧肾切除。
肾静脉管壁薄同时和肾动脉贴服在一起，在钝性分离肾动脉的过
程中动作需缓慢精细。
综上所述，通过背侧切口的建模举措具有一定的可靠性，且成功率高，不用
通过特殊训练就能够熟练掌握，同时利于Sprague-Dawley术后第一时间恢复。
此
次研究我们所构建的大鼠急性肾缺血再灌注模型具有较强的稳定性，可以很好的
匹配于急性肾缺血再灌注损伤研究。
【参考文献】
[1]艾娜，谢席胜，樊均明，龙琼先，王宝福，王彦江.大鼠肾缺血再灌注损伤模型改良手术方式结果与评价[J].中国中西医结合肾病杂志，2013年02期.
[2]李苏童，王汉民，李嫚，刘广厚，何丽洁，陈光磊，张鹏.缺血后处理对缺血再灌注损伤大鼠肾脏HIF-1α的影响[J].中国血液净化，2014年05期.
[3]余晓东，廖波，邓显忠，姜果，朱平宇，鲁栋梁，唐铁龙，杨雪松，陈双全，程树林.一种新型实用的大鼠肾缺血再灌注损伤模型的建立[J].重庆医学，2012年13期.
[4]陈宗平.HIF-1α基因在大鼠缺血—再灌注肾组织中表达的意义以及高压氧、丹参酮ⅡA对其表达影响的实验研究[D].遵义医学院，2015年.。