临床输血学检验—HDN

ABO HDN
ABO新生儿溶血病 0型母亲——A型或B型婴儿 多为第一胎 Rh新生儿溶血病 Rh阴性母亲——Rh阳性婴儿 很少为第一胎
临床特点
发生频率 发生的母子血型
发生胎次
下一胎情况 临床表现 黄疸 贫血 肝脾大 晚期贫血
ABO溶血病
Rh溶血病
常见
不常见
主要发生在母O型 胎儿为A型或B型
发病病因：
胎儿从父亲遗传来的红细胞抗原恰为母亲所缺少,胎儿 红细胞通过胎盘进入母体血循环刺激母体产生相应的血 型抗体（IgG）。
此抗体又可通过胎盘进入胎儿血循环与胎儿、（新生 儿）红细胞相结合，发生特异性抗原抗体反应，使红细 胞破坏而发生溶血现象。
• 抗体性质： IgG • 多发生于ABO和Rh两个血型系统 抗A，抗B，抗D，抗E
溶血RBC、Hb下降，网织红和有核红升高。
❖ 生化检查：胆红素升高，以未结合胆红素为主。 ❖ 溶血三项检测：
直接抗人球蛋白试验、游离抗体筛查和抗体释放试验。
溶血三项—直抗试验：
实验原理：
检测新生儿红细胞上是否存在免疫性抗体； 患者体内若有与红细胞抗原相应的不完全抗体存在，可与红细 胞结合。但因不完全抗体分子小，不能有效地连接红细胞，仅 能使红细胞处于致敏状态，加入抗球蛋白血清，与红细胞上吸 附的不完全抗体结合，在致敏红细胞之间搭桥。
溶血三项—直抗试验：
结果判定：
阴性：红细胞完全沉于底部。 阳性：红细胞不同程度地分散于凝胶柱中。
临床意义：
观察患儿RBC有无被免疫抗体致敏,一旦发现新生儿红细胞 直抗阳性，即成为诊断新生儿溶血病有力证据。
注意事项：
由于新生儿A(B)抗原密度比成人低,结合在红细胞上抗 体往往较少,ABO HDN患儿直抗试验常常得到阴性或弱阳 性（≤1+）ห้องสมุดไป่ตู้果。Rh HDN为常为强阳性(≥2+)。是区别 ABO和Rh HDN主要标志。 基于上述原因，应注意： 对于微弱的凝集，也应报告结果（可报弱阳性） ABO HDN既使直抗和游离试验均为阴性，第三项放
Bc
Oc
+
－
－
－
+
－
+
+
－
+/－
+/－
+
－
－
－
结果判定
有游离的抗-A抗体 有游离的抗-Ｂ抗体 有游离的抗-A,抗-B或抗-A,B抗体 有游离的ABO系统以外的抗体 无游离的抗体
注意事项:
检出游离抗体的类型必须与红细胞上表达的抗
溶血三项—直抗试验
抗人球试管法 微柱抗人球卡法
方法试剂选择
直抗试验
直抗试验
溶血三项—直抗试验：
操作步骤： 将患者红细胞制备成0.8～1.0% RBC悬液 （ 0.5mlLiss+5ul压积RBC)，待用。 准确吸取上述制备好的RBC悬液50ul加入微柱凝胶孔中。 置孵育器孵育15分钟。 离心10分钟后观察结果。
散实验必须要进行。
。
溶血三项－游离抗体
实验原理： 用间接coombs试验检测新生儿血清中的血型抗体,如果 检出的抗体能够和新生儿红细胞反应,则新生儿可能患溶 血症。
溶血三项－游离抗体
操作步骤：
将50ul浓度为0.8～1.0%标准的A（B）、O细胞分 别加入已标注的微柱凝胶孔中。
向各孔中分别加入患儿的血清25ul。 置孵育器孵育15分钟。
100ul,从第2支试管吸取稀释液100ul加入第3管,依 次作倍比稀释,保留第10管稀释液备用; 向1～9管中各入5% (A、B或O) RBC悬液50ul； 用适当的技术来检查（聚凝胺、抗人球、酶法等），肉眼观察
结果。
主要检查项目：
产后检查：
❖ 新生儿血型鉴定（ ABO、Rh ） ❖ 血常规检测：
◆ ABO溶血
胎儿红细胞溶血轻
◆ Rh溶血
胎儿红细胞溶血重
胎儿血中胆红素↑ 胎儿重度贫血
髓外造血↑
胎盘 母亲肝脏
低蛋白血症 心力衰竭
娩出时黄疸不明显
胎儿全身水肿
肝脾肿大
新生儿处理胆红素↓ 新生儿黄疸
血清UCB过高 血脑屏障
胆红素脑病
实验室检查
产前检查 产后检查
主要检查项目:
产前检查:
❖ 夫妇血型检查(ABO、Rh) ❖ 抗体筛检 ❖ 血型IgG抗体效价测定
临床输血学检验
新生儿溶血病
南京医科大学第一附属医院 江苏省人民医院输血科
江苏省临床用血质控中心 周小玉
概念：
新生儿溶血病（Haemolytic Disease of Newborn， HDN)系指母胎血型不合引起的母亲对新生儿（或胎儿）红 细胞发生同种免疫反应引起的溶血性疾病。
我国以ABO血型不合造成ABO-HDN比较多见，Rh血型不合 造成Rh-HDN比较少见，其他系统血型不合造成HDN更少见 。
离心10分钟后观察结果。
′ 37℃孵育15
观察结果
1030r/min,10′
溶血三项－游离抗体
结果判定：
阴性：红细胞完全沉于底部。 阳性：红细胞不同程度地分散于凝胶柱中。
临床意义：
游离试验是检测新生儿血清中的血型抗体，具体分析见 下表：
溶血三项－游离抗体
新生儿血清中游离抗体检查
与指示细胞反应
Ac
连续检查发现效价持续升高，则表明胎儿受害的可能性增大
❖ 羊水检查：测定羊水胆红素水平，估计胎儿溶血程度 ❖ B型超声检查：了解胎儿有无水肿。
IgG抗体效价测定
原理：
父母血型预测胎儿的血型，判断HDN发生的可能性 IgG是唯一能通过胎盘的免疫球蛋白，目的检测IgG类
性质的抗体（如IgG抗A、抗B、抗D等） 排除IgM抗体的干扰（二巯基乙醇或二硫苏糖醇）
母缺少任一Rh抗原 有该Rh抗原
胎儿却具
第一胎可发病（约半数）一般发生在第二胎；第一胎也可发 病
不一定
大多数更严重
较轻
较重，严重者甚至死胎
生后第2～3天出现
24小时内出现并迅速加重
轻
可有严重贫血或伴心力衰竭
很少发生
多有不同程度的肝脾增大
很少发生
可发生，持续至生后3～6周
症状与体症：
❖ 贫血 ❖ 黄疸 ❖ 水肿 ❖ 肝脾肿大 ❖ 全身表现
IgG抗体效价测定—方法和试剂
✓ 凝聚胺法 ✓ 抗人球试管法
微柱卡法
酶法
方法试剂选择 IgG抗体效 价测定
1、二巯基乙醇（商 品化）2、试剂细胞
IgG抗体效价测定
操作步骤：
取10支小试管，编号为1，2…10； 另取小试管1只，加入待检血清和2-Me（0.1M）各200ul，置
37℃温育10分钟，取出后待用。 向第2～10支试管中各加入NS100ul； 向第1,2支试管中各加入2-Me处理过的血清(抗D测定除外)