鹤望兰炭疽病菌的生物学特性及杀菌剂的药效研究

福建农业学报２１（３）：２０３　２０６，２００６　Ｆｚｏｉａｎ　Ｊｏｕｒｎａｌ　ｔｌｆ　Ａｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌ　Ｓｃｉｅｎｃｅｓ　文章编号：１００８—０３８４（２００６）０３—０２０３—０４　

鹤望兰炭疽病菌的生物学特性及杀菌剂的药效研究　林清洪，林光荣，刘福平，章　宁，黄维南　（福建省亚热带植物研究所，福建厦门　３６１００６）　摘要：鹤望兰（Ｓｔｒｅｌｉｔｚｉａ　ｒｅｇｉｎａｅ）炭疽病病原菌经分离培养、接种试验，鉴定其病原菌为炭疽菌属胶孢炭疽菌　（　ｌｌｅｔｏｔｒｉｆｈｕｍ　ｇｌｏｅ０５　ｐｏｒｉｏｉｄｅｓ）。病原菌生长发育的温度在１ｏ～３５　ｃ，最适温度为２５　Ｃ。病菌要求较高的湿度，相　对湿度９０　以上有利于分生孢子萌发。它能有效利用多种碳源，但以葡萄糖、甘露醇为最佳，而甘油、葡萄糖利　于产孢；在氮源中．以对磷酸二氢铵、尿素利用为佳，其中磷酸二氢铵最适合病菌产孢，而蛋白胨、硫酸铵不利　病菌生长及产孢。室内试验结果表明，５Ｏ　咪鲜胺，５Ｏ　多菌灵以及７Ｏ　甲基硫菌灵５００倍、ｉ　０００倍、１　５００倍　液均能有效抑制该病菌的生长。田间试验结果表明，５Ｏ　咪鲜胺１　０００倍液防治效果最好，防效为８０．７　，７０　甲　基硫菌灵ｉ　０００倍液防效为７１．６　。　关键词：鹤望兰炭疽病；病原菌；生物学特性；杀菌剂药效　中图分类号：Ｓ　４３２．４４　文献标识码：Ａ　Ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ　ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｓｔｉｃｓ　ｏｆ　ａｎｔｈｒａｃｎｏｓｅ　ｏｆ　Ｓｔｒｅｌｉｚｉａ　ｒｅｇｉｎａｅ　ａｎｄ　ｃｏｎｔｒｏｌ　ｅｆｆｉｃｉｅｎｃｉｅｓ　ｏｆ　ｆｕｎｇｉｃｉｄｅｓ　ａｇａｉｎｓｔ　ｔｈｅ　ｐａｔｈｏｇｅｎ　Ｉ　ＩＮ　Ｑｉｎｇ—ｈｏｎｇ，ＬＩＮ　Ｇｕａｎｇ—ｒｏｎｇ，ＬＩＵ　Ｆｕ—ｐｉｎｇ，ＺＨＡＮＧ　Ｎｉｎｇ，ＨＵＡＮＧ　Ｗｅｉ—ｎａｎ　（Ｆｕｊｉａｎ　Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ　ｏｆ　Ｓｕｂｔｒｏｐｉｃａｌ　Ｂｏｔａｎｙ，Ｘｉａｍｅｎ，Ｆｕｊｉａｎ　３６１００６，Ｃｈｉｎａ）　Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｔｈｅ　ｐａｔｈｏｇｅｎ　ｉｓｏｌａｔｅｄ　ｆｒｏｍ　ａｎｔｈｒａｃｎｏｓｅ　ｏｆ　Ｓｔｒｅｌｉｚｉａ　ｒｅｇｉｎａｅ　ｗａｓ　ｉｄｅｎｔｉｆｉｅｄ　ａｓ　Ｃｏｌｌｅｔｏｔｒｉｃｈｕｍ　ｇｌｏｅｏｓｐｏｒｉ—　ｏｉｄｅｓ　Ｐｅｎｚ．Ｔｈｅ　ｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅ　ｒａｎｇｅ　ｆｏｒ　Ｃｏｌｌｅｔｏｔｒｉｃｈｕｍ　ｇｌｏｅｏｓｐｏｒｉｏｉｄｅｓ　ｇｒｏｗｔｈ　ｗａｓ　１　０—３５　Ｃ．Ｔｈｅ　ｏｐｔｉｍｕｍ　ｗａｓ　２５　Ｃ．Ｔｈｅ　ｒｅｌａｔｉｖｅ　ｈｕｍｉｄｉｔｙ　ｆｏｒ　ｅｏｎｉｄｉａ　ｇｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ　ｒａｎｇｅｄ　ｆｒｏｍ　９Ｏ　一１００％．Ｔｈｅ　ｆｕｎｇｕｓ　ｇｒｅｗ　ｂｅｔｔｅｒ　ｉｎ　ｇｌｕｃｏｓｅ　ａｎｄ　ｍａｎｎｉｔｏｌ　ａｓ　ｔｈｅ　ｃａｒｂｏｎ　ｓｏｕｒｃｅｓ，ａｎｄ　ｉｎ　ａｍｍｏｎｉｕｍ　ｐｈｏｓｐｈａｔｅ　ｍｏｎｏｂａｓｉｃ　ａｎｄ　ｕｒｅａ　ａｓ　ｔｈｅ　ｎｉｔｒｏｇｅｎ　ｓｏｕｒｃｅｓ；ｇｌｕ—　ｃｏｓｅ　ａｎｄ　ｇｌｙｃｅｒｉｎ　ａｓ　ｃａｒｂｏｎ　ｓｏｕｒｃｅｓ　ａｎｄ　ａｍｍｏｎｉｕｍ　ｐｈｏｓｐｈａｔｅ　ｍｏｎｏｂａｓｉｃ　ａｓ　ｎｉｔｒｏｇｅｎ　ｓｏｕｒｃｅｓ　ｗｅｒｅ　Ｓ　ｕｉｔａｂｌｅ　ｆｏｒ　ｔｈｅ　ｓｐｏｒｕｌａｔｉｏｎ　ｏｆ　ｔｈｅ　ｐａｔｈｏｇｅｎ．Ｈｏｗｅｖｅｒ，ｐｅｐｔｏｎｅ　ａｎｄ　ａｍｍｏｎｉｕｍ　ｓｕｌｆａｔｅ　ａｓ　ｎｉｔｒｏｇｅｎ　ｓｏｕｒｃｅ　ｗｅｒｅ　ｎｏｔ　ｂｅｎｅｆｉｃｉａｌ　ｆｏｒ　ｔｈｅ　ｇｒｏｗｔｈ　ａｎｄ　ｓｐｏｒｕｌａｔｉｏｎ　ｏｆ　ｔｈｅ　ｐａｔｈｏｇｅｎ，５０％ｐｒｏｃｈｌｏｒａｚ　ｍａｎｇａｎｅｓｅ　ＷＰ，５Ｏ　ｃａｒｂｅｎｄａｚｉｍ　ｗＰ，７ｏ％ｔｈｉｏ—　ｐｈａｎａｔｅ　ｍｅｔｈｙｌ　ＷＰ（５００　ｔｉｍｅｓ，１　０００　ｔｉｍｅｓ，１　５００　ｔｉｍｅｓ）ｃｏｕｌｄ　ｉｎｈｉｂｉｔｅ　ｅｆｆｅｃｔｕａｌｌｙ　ｔｈｅ　ｇｒｏｗｔｈ　ｉｎ　Ｌａｂ．Ｉｎ　ｔｈｅ　ｆｉｅｌｄ，　ｔｈｅ　ｒｅｓｕｌｔｓ　ｓｈｏｗｅｄ　ｔｈａｔ　ｃｏｎｔｒｏｌ　ｅｆｆｉｃｉｅｎｃｉｅｓ　ｏｆ　５０　ｐｒｏｅｈｌｏｒａｚ　ｍａｎｇａｎｅｓｅ　ＷＰ　１０００　ｔｉｍｅｓ　ｗａｓ　ｔｈｅ　ｂｅｓｔ（８０．７　），　ｔｈｅ　ｃｏｎｔｒｏｌ　ｅｆｆｉｃｉｅｎｃｙ　ｏｆ　７０　ｔｈｉｏｐｈａｎａｔｅ　ｍｅｔｈｙｌ　ｗＰ（１０００　ｔｉｍｅｓ）ｗａｓ　７１．６　．　Ｋｅｙ　ｗｏｒｄｓ：ａｎｔｈｒａｃｎｏｓｅ　ｏｆ　Ｓｔｒｅｌｉｚｉａ　ｒｅｇｉｎａｅ；Ｃｏｌｌｅｔｏｔｒｉ￣。ｈｕｍ　ｇｌｏｅｏｓｐｏｒｉｏｉｄｅｓ；ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ　ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｓｔｉｃｓ；ｃｏｎｔｒｏｌ　ｅｆｆｉ—　ｅｉｅｎｅｉｅｓ　ｏｆ　ｆｕｎｇｉｃｉｄｅ　

鹤望兰（Ｓｔｒｅｌｉｔｚｉａ　ｒｅｇｉｎａｅ）亦称极乐鸟花、天　堂鸟花，其花形似仙鹤矗立，花色艳丽，花开时，犹　如仙鹤翘首远望。在原产地（南非）人们把它看作　“幸福”、“自由”和“吉祥”的象征。鹤望兰花叶并　美，无论是作为切花栽培、盆栽观赏、盆栽陈列或　南方庭园布置均倍受欢迎［１　Ｊ。据笔者在本所及厦　门万石植物园等地调查，鹤望兰炭疽病发病严重，株　发病率为９ｏ　，叶发病率为７ｏ％，严重危害了鹤望　兰的栽培及观赏。关于鹤望兰炭疽病国内有过报　道嘲，但不涉及病原菌种类鉴定。我们对该病菌进行　分离培养、病原菌鉴定、生物学特性及杀菌剂药效　研究，为有效防治该病害提供科学依据。　ｌ材料与方法　１．１　组织分离　从本所鹤望兰花圃及厦门万石植物园采集病　叶，于室内按常规方法进行组织分离和纯化，直至　获得纯菌种，并按文献［３，４］的方法，进行形态特　征观察、病原菌鉴定。　１．２接种试验　选择无病株健叶，用毛笔沾浓孢子悬液涂刷叶　片，用湿脱脂棉保湿，以清水处理为对照，定期观　

收稿日期：２００６－－０２－－２０初稿；２００６－－０８－－ｌ１修改稿　作者简介：林清洪（１９５６－－），男，副研究员，主要从事植物保护及生物农药研究。　

维普资讯 http://www.cqvip.com ２０４　福建农业学报　第２１卷　察症状出现。　１．３病菌的生物学特性　１．３．１温度对病原菌生长影响病菌在定量１５　ｍｌ　的ＰＤＡ平板上培养５　ｄ后，用无菌打孔器打取直径　为３　ｍｍ的菌饼，菌丝面朝下接种于定量１５　ｍｌ的　ＰＤＡ平板正中，然后置于５¨Ｃ、１０　Ｃ、１５℃、２０℃、　２５　Ｃ、３０　Ｃ和３５℃的不同温度下培养５　ｄ后，参照文　献［５，６］的方法测量菌落直径并观察菌落特征，每　处理设５个重复。　１．３．２　湿度对病原菌孢子萌发的影响　在１０　ｃｍ　直径的密闭容器内用不同浓度的硫酸溶液控制　２５．０　、３５．０　９／６、５０．０　９／６、７５．６　９／６、９０．０　、９８．０　和１００　９／５（无菌水）的不同湿度，将孢子涂抹在载玻　片上放入容器，２５　Ｃ下培养２４　ｈ后镜检孢子数１００　个，重复２次，参照文献［５，６］的方法统计孢子萌发　率。　１．３．３碳、氮源对病原菌生长发育的影响试验用　的基础培养基的组成为ＫＣ１　０．５　ｇ、ＦｅＳＯ　０．０１　ｇ、　Ｋ２ＨＰＯ４　１．０　ｇ、ＭｇＳＯ４・７Ｈ２Ｏ　０．０５　ｇ、琼脂１８　ｇ、　水１　０００　ｍｌ。在以氮源作培养试验时，基础培养基以　蔗糖作碳源，供试的氮源：尿素、蛋白胨、硝酸铵、　硫酸铵、磷酸二氢铵，分别折算以每升２　ｇ纯氮素进　行配制。在以碳源作培养试验时，基础培养基中加　硝酸钾作氮源。供试的碳源：甘油、葡萄糖、乳糖、　淀粉、甘露醇。按每升３０　ｇ纯碳分ＩＩＩＩ入含有硝酸　钾的基础培养基中。以ＰＤＡ为对照（ＣＫ），上述培　养基定量每皿１５　ｍｌ，每个处理５次重复，参照文献　［５，６］的方法分别于５　ｄ、８　ｄ后测量菌落直径及１２　ｄ后计数平皿中分生孢子盘数、相对产孢量，观察菌　落形态特征。　１．４不同杀菌剂对病原菌生长的影Ⅱ向　室内试验设置５种药剂，供试药剂有５０　咪鲜　胺ＷＰ（施保功，拜耳作物科学公司产），５０　９／５多菌　灵ＷＰ（上海升联化工有限公司产），７０　９／５甲基硫菌　灵ｗＰ（甲基托布津，日本曹达株式会社产），７０　代森锰锌ｗＰ（江苏利民化工有限公司产），７５　百　菌清ｗＰ（北京华戎生物激素厂），将供试药剂分别　用无菌水（百菌清、咪鲜胺）、盐酸（多菌灵）、二　甲基亚矾（代森锰锌）、甲醇（甲基硫菌灵）配成一　定浓度的母液，加入到不同量的ＰＤＡ培养基中，制　成５００倍、１　０００倍、１　５００倍含药培养基，以加入　等体积的无菌水、甲醇、盐酸和二甲基亚矾的ＰＤＡ　平板为对照，３个浓度水平共１５个处理，每个处理　５次重复，２５　Ｃ下培养８　ｄ后，参照文献［８，９］的方　法，测量菌落生长直径，计算抑制率并观察菌落特　征。　生长抑制率（　）一１一（处理菌落直径一菌　饼直径）／（对照菌落直径一菌饼直径）　１．５不同杀菌剂对鹤望：兰炭疽病田间药效测定　在本所花卉室鹤望兰试验圃进行杀菌防效试　验。杀菌剂种类为：５０　咪鲜胺ｗＰ、５０　多菌灵　ＷＰ、７０　甲基硫菌灵ＷＰ、浓度为１　０００倍液进行　喷药处理，以清水为对照，３次重复，每重复１０丛。　待新叶尚未发病时，用纸标签挂住，并进行第一次　喷药，共施３次，间隔７　ｄ。于最后一次施药后３０　ｄ　进行调查，取不同方向调查４０片叶，参照文献　［７，８］的方法记录发病程度，计算平均病情指数、防　治效果。病叶分级标准：０级：无病斑；１级：每叶　病斑１～２个；３级：每叶病斑３～４个；５级：每叶　病斑５～６个；７级：每叶病斑７～８个；９级：每叶　病斑８个以上。　

２　结果与分析　２．１症状　病斑部位多数发生在叶部边缘、叶尖，少数感　染叶中部、苞叶。初发病部为淡褐色小点，慢慢发　展成半圆形或不规则。后期病斑中间灰褐色，其上　散生黑色小点，以叶正面居多，边缘褐色隆起，病　斑外围有明显淡黄色圈。后期数个病斑可相互扩展　为大斑块。　２．２病原菌鉴定　致病性测定结果表明，人工接种后出现的症状　与自然发病的症状一致，从接种发病的植株叶上再　分离获得原菌株，证实分离菌是鹤望兰炭疽病的致　病菌。取明显病征的新鲜病组织进行徒手切片或在　ＰＤＡ培养基上组织分离培养后进行病原菌鉴定，结　果该病原菌是炭疽菌属胶孢炭疽菌（ｃｏ　ｒ　如　ｇｌｏｅｏｓｐｏｒｉｏｉｄｅｓ），分生孢子盘呈盘状或垫状，生于寄　主植物表皮下，散生，成熟后不规则开裂，直径１３０　

～１７５　ｍ。分生孢子长椭圆形、无色、单胞、表面　光滑、顶端钝圆，有的有油球，大小为１．０～１７．５　ｍ　×４．２～５．０　ｍ。　２．３不同温度对病原菌生长的影响　不同温度试验结：果如表１，病原菌生长温度在１０　～３５℃，最适为２５＿Ｃ，５　Ｃ和高于３５　Ｃ不能生长；１０ｌＣ　温度条件下病菌培养５　ｄ菌落直径平均为１．２９　ｃｍ；　在３５℃温度条件下仅在接种菌块周围长出稀疏的丛　生状菌丝，培养５　ｄ后菌落直径平均为０．３　ｃｍ，且菌　落增厚。