支原体快速检测试剂盒
1医学检验毕业论文 (三种肺炎支原体检测法的临床应用分析)
毕业论文 题目：三种肺炎支原体检测法的临床应用分析 地市: 学校: 准考证号: 考生姓名: 王莹 指导老师: 二〇一八年八月十四日
三种肺炎支原体检测法的临床应用分析 摘要 目的探讨肺炎支原体（MP）咽拭子快速液体培养法、咽拭子聚合酶链反应（PCR）法和血清MP被动凝集法（MP-Ab）等方法在儿童MP感染诊断治疗过程中的敏感性方法采用3MP检测法对362例临床拟诊呼吸道（非细菌性）感染的患儿的咽拭子和血清标本进行配对研究，每患儿取咽拭子做快速培养和PCR，同时取血清做MP-Ab检测，对3种方法的检测结果与临床诊断治疗病例进行回顾性分析。结果回顾临床病例诊断MP感染患儿152例。MP快速培养法检出阳性78例，阳性率为51.3%，病程为（4.5±2.6）天；PCR法检测出阳性103例，阳性率为67.8%，病程为（6.2±3.5）天；MP-Ab法检测出阳性127例，阳性率83.5%，病程（8.1±4.5）天。结论 3种MP检测法的敏感性与病程有相关性，临床医生应根据患儿病程选取检测方法，以提高阳性检出率和敏感性。 关键词肺炎支原体，快速培养法，咽拭子聚合酶链反应，血清抗体，配对研究
目录 前言 (4) 第一章文献综述 (5) §1.1 肺炎支原体的定义 (5) §1.2 肺炎支原体的发病机制 (5) §1.3 肺炎支原体的分类 (5) §1.4 肺炎支原体的临床表现 (5) §1.5 肺炎支原体的临床诊断 (5) §1.6 肺炎支原体的实验室检查 (6) 第二章材料和方法 (7) §2.1 样本 (7) §2.2方法概述 (7) §2.3临床诊断MP感染的诊断标准 (7) §2.4实验方法 (7) §2.5统计学方法 .................................................................... .. (8) 第三章结果 (9) 第四章讨论 (10) 结论 (11) 参考文献 (11) 附录 (12) 错误！未定义书签。
《PCR法支原体检测试剂盒》选购注意事项
《PCR法支原体检测试剂盒》选购注意事项 （2016年10月16日） 目前，PCR法支原体检测仍然是支原体快速检测领域被客户选购最多的方法。目前，商业化的PCR法支原体检测方法就有好几种，各优缺点分述如下： ●方法（1）：不带内参基因的普通PCR法支原体检测试剂盒。该试剂盒含 有2条引物，不带内参基因。通过30-35轮的普通PCR直接检测。需要通过琼脂糖电泳分析检测结果，整个检测过程耗时3-4小时。缺点：无法区分真阴性样品和由于细胞代谢产物抑制导致的假阴性样品（二者，支原体特异条带均为阴性）。 ●方法（2）：带内参基因的普通PCR法支原体检测试剂盒。该试剂盒含有 2条引物，带内参基因。通过30-35轮的普通PCR直接检测。需要通过琼脂糖电泳分析检测结果，整个检测过程耗时3-4小时。优点：可以区分真阴性样品（内参条带为阳性而支原体特异条带为阴性）和由于细胞代谢产物抑制导致的假阴性样品（内参条带和支原体特异条带均为阴性）。 ●方法（3）：巢式PCR法支原体检测试剂盒。该试剂盒含有4条引物，一 般不带内参基因。第一轮，用2条外引物通过30轮的PCR扩增后；第二轮，取少量第一轮的扩增产物作为模板，用2条内引物再进行30轮的PCR 扩增。需要通过琼脂糖电泳分析检测结果，整个检测过程耗时6-8小时。 缺点：耗时太久，容易产生假阳性。 ●方法（4）：定量PCR法支原体检测试剂盒。该试剂盒含有2条引物，不 带内参基因。通过40轮的定量PCR检测。无需通过琼脂糖电泳分析检测结果，整个检测过程耗时2-3小时。缺点：无法区分真阴性样品和由于细胞代谢产物抑制导致的假阴性样品（二者，均显示为没有扩增）。
人型支原体阴性正常吗
人型支原体阴性正常吗 可能当我们偶尔听到人型支原体这一名字时会十分陌生，其实人型支原体是一种微生物，而如果人体感染了这种微生物的话就会引起一系列的不适，如果不及时治疗还会给身体造成很多的危害。因此对有相关症状的患者要做及时检查，那么人型支原体阴性正常吗？ 人型支原体阴性正常吗 人型支原体阴性是正常的。人型支原体（M.hominis，MH），人型支原体是支原体的一种，它存在于泌尿系和生殖器中，可以引起泌尿系的感染和生殖器的炎症，如果您担心的话，可以来院做相关检查，明确是否有感染。 无细胞壁及前体，细胞器极少。DNA的G+C含量低，菌体内具有非常小的染色体组，其分子量约为45×108，菌体细胞大小约为0.2-0.3μm，很少超过1.0μm。由三层蛋白质和脂质组成的膜样结构以及一层类似毛发结构组成。支原体由二分裂繁殖，形态多样。支原体用普通染色法不易着色，用姬姆萨染色很浅，革兰染色为阴性。 人型支原体可在鸡胚绒毛尿囊膜上或细胞培养中生长。用培养基培养。营养要求比细菌高。由于它没有细胞壁，因此对影响细胞壁合成的抗生素等不敏感，可抑制或影响支原体的蛋白质合成，特别是含PHMB杀菌成分的洁阴洗液有杀伤支原体作用，支原体对热抵抗力差，通常55℃经15分钟处理可使之灭活。石碳酸，来苏儿易将其杀死。在培养基中置入脲素并以硫酸锰作指示剂极易与其他支原体作出鉴别。 人型支原体感染有什么危害 支原体是非淋性尿道炎的一种特殊类型，是微生物。支原体感染临床表现为：“尿黄，尿道口微红，尿频，尿不尽，尿道痛，烧灼感”等症状。人型支原体，其特点是生长时需要类固醇物质。人型支原体菌落较大，直径在300～1000微米，典型的菌落具有“油煎蛋”的外观。长期的或反复的衣原体和支原体感染会破坏子宫颈和输卵管内的内膜层，造成不孕。衣原体和支原体的感染大多数是通过性行为传染的，有杜绝互相传染而反复感染，就应该对性伴侣同时治疗。 人型支原体感染后会导致患者身体出现多种不适的症状，人型支原体阴性的检查结果就说明了患者并没有真正的感染上这种微生物，这是一件值得高兴的事情。并且在生活中我们也要注意做好这种疾病的预防，这样才能远离疾病给我们身体带来的危害。
肺炎支原体IgM抗体检测SOP
肺炎支原体IgM抗体检测SOP 一、检验目的 规范实验室人员操作，以保证实验结果的准确性。 二、预期用途 该产品用于定性检测血清、血浆或全血中的肺炎支原体IgM抗体。是引起社区获得性呼吸道感染的主要病原体之一，可以导致支气管炎和非典型性肺炎。主要引起人非典型肺炎、气管炎及支气管炎，多经口和呼吸道等途径传播，多发于儿童和青年人。MP感染已占小儿呼吸道疾病30%以上，且有增加趋势。人体感染肺炎支原体后，能产生特异性IgM和IgG抗体。IgM 抗体出现早，一般在感染后1周出现，3~4周达高峰，以后逐渐降低。再次感染或重复感染后，常在1-2周内出现较高水平的IgG抗体。MP肺炎与一般呼吸道感染和肺炎的临床症状没有明显区别，MP感染早期诊断有利于MP肺炎的治疗。血青学诊断法是临床常用的主要诊断方法之一，灵敏度和特异性适中，常用的主要有酶联免疫吸附试验和凝集试验。 三、检验原理 本产品以胶体金作为指示标记，用胶体金标记抗人IgM单抗，以基因工程技术表达肺炎支原体P1蛋白抗原标被硝酸纤维素膜，应用“间接法”免疫层析技术原理，检测的肺炎支原体感染病人血清、血浆或全血中的肺炎支原体抗体IgM,在检测过程中，若样本中存在肺炎支原体抗体gM, 则肺炎支原体抗体1gM与样本吸附垫中的胶体金一抗人IgM单抗结合物形成复合物，复合物沿硝酸纤维素膜移动到检测区，与检测线上包被的肺炎支原体P1蛋白抗原结合，多余的未被结合的结合物继续移动到质控区，与质控线上包被的羊抗鼠IgG 抗体结合，反应膜上出现1条红色的检测线和1条红色的质控线；若样本中不存在肺炎支原体抗体IgM,则胶体金一抗人IgM单抗结合物直接沿硝酸纤维素膜移动到质控区，与质控线上包被的羊抗鼠IgG抗体结合，仅形成一条红色的质控线。 四、主要组成成份 1、试剂盒组分 包括肺炎支原体1gM抗体检测卡，样品稀释液。 1.1、检测卡主要组分：包括金标垫和硝酸纤维素检测膜，金标垫内包被有胶体金标记的抗人IgM单克隆抗体；硝酸纤维素检测膜的检测线上包被有基因工程技术表达的肺炎支原体P1蛋白抗原，质控线上包被有羊抗鼠IgG抗体。
《支原体清除试剂》使用说明书
《支原体清除试剂》使用说明书 关于支原体 支原体（Mycoplasma）是一种没有细胞壁的原核生物，大小约0.1 - 0.6微米。目前，已发现的支原体品种有100多种。由于支原体直径较小，经常可以穿过实验室常规的0.20微米孔径的除菌滤膜，高压过滤时，甚至可以穿过0.10微米孔径的除菌滤膜，造成细胞的支原体污染。 细胞培养的支原体污染来源主要有：（1）细胞之间的交叉污染，这是支原体污染的最主要原因；（2）细胞培养操作人员的口腔、皮肤等。（3）细胞培养用的组分，如血清、培养液等； 哺乳动物细胞的培养，支原体污染是个世界性的问题。目前，世界各国细胞系支原体污染的平均比例为30-60%，有些国家甚至高达80-90%。支原体污染几乎可以改变细胞的所有参数，导致实验结果的不准确、甚至完全错误。从2013年开始，《Nature》期刊已正式要求投稿的文章，如涉及细胞培养都要进行支原体检测，以保证所用的细胞没有支原体污染。相信会有越来越多的高水平期刊将做出同样的支原体检测要求。 科佰产品 货号名称规格价格货期CBP50044 支原体清除试剂（1000x）1ml 900.00 现货 产品用途 该产品专用于消除那些被支原体和某些无细胞壁的细菌感染的细胞系。在小型或大型细胞培养中，也可以直接添加到液体培养基中来预防支原体及常见的细菌污染。该产品仅用于基础研究，非临床用品。 运输和储存 该产品在2-8℃下运输，收到产品后请放于-20℃保存，该条件下，至少可以保存2年。推荐分装保存于-20℃。 使用方法 1) 从-20C冰箱中取出支原体去除试剂，室温融化； 2) 将50-100万个细胞铺到60 mm的细胞培养皿内，加入4 mL含支原体清除试剂的正常 细胞培养液（按1:1000比例加入）； 3) 每2-3天更换细胞培养液，加入新鲜的含支原体清除试剂的正常细胞培养液。期间如 果细胞密度过大，请保持细胞密度适当（贴壁细胞可能需要胰酶消化），并更换新的培养皿； 4) 处理15天后，可以用支原体检测试剂盒(恒温法#CBP50041；PCR法#CBP50042； 发光法#CBP50043)进行检测，检测支原体是否杀灭完全。如果仍有支原体残留，可以考虑再处理6天；
肺炎支原体抗体检测(被动凝集法)
肺炎支原体抗体检测 （被动凝集法） 1.目的：规范实验室肺炎支原体抗体检测操作。 2.范围： xxxx院xxxx科 3.测定原理： 将肺炎支原体（Mac株）的细胞膜成分致敏人工载体明胶粒子制造而成。这种致敏粒子和样本中的肺炎支原体抗体进行反应发生凝集，由此可以检测出血清和血浆中的肺炎支原体抗体，并且用来测定抗体的效价。 4.标本： 4.1采用正确医用技术收集血清/血浆样本，血浆样本推荐使用肝素钠抗凝血浆，枸橼酸钠和EDTA抗凝剂。 4.2样本中的沉淀物和悬浮物，红细胞等其它有形成分可能会影响试验结果，应离心除去，并确定样本未变质方可使用。 4.3严重溶血或脂血的样本不能用于测定。 4.4样本收集后在室温放置不可超过8小时；如果不在8小时内检测需将样本放置在2~8℃的冰箱中；若需48小时以上保存或运输，则应冻存于-20℃以下，避免反复冻融。使用前恢复到室温，轻轻摇动混匀。 5.试剂：珠海丽珠试剂股份有限公司提供的试剂。 5.1试剂盒在2℃—10℃储存，防止冷冻，避免强光照射，有效期12个月。 5.2 试剂盒开启使用后，冷冻干燥品配好后，2℃—10℃保存可使用7日，使用前必须做对照试验。 5.3试剂组成 5.3.1血清稀释液（液体）：用于稀释样品和复溶致敏粒子和未致敏粒子。 5.3.2致敏粒子（冷冻干燥）：肺炎支原体（Mac株）抗原致敏的明胶粒子。使用时加入规定量的血清稀释液。复溶后的试剂含有0.9%的致敏粒子。 5.3.3未致敏粒子（冷冻干燥）鞣化的明胶粒子冻干制品。使用时加入规定量的血清稀释液。 5.3.4阳性对照血清（液体）肺炎支原体（Mac株）抗体阳性的兔血清用血清稀释液1:10 稀释后的制品。 6.临床标本测定 6.1试剂的准备 6.1.1溶解液（液体）：按照测定操作规则使用。 6.1.2血清稀释液（液体）：按照测定操作规则使用。 6.1.3致敏粒子（冷冻干燥）：加入一定量的溶解液进行调制。请在使用前30分钟于室温（15~30℃）下进行调制。 6.1.4未致敏粒子（冷冻干燥）：加入一定量的溶解液进行调制。请在使用前30分钟于室温（15~30℃）下进行调制。 6.1.5阳性对照血清（液体）：按照操作规则使用。 6.2 手工操作步骤 6.2.1 用微量滴管将血清稀释液滴入微量反应板第1孔中，共计4滴（100ul），从第2孔至第8孔（或更多）各滴入1滴（25ul）血清稀释液。 6.2.2 用微量移液管取样品25ul至第1孔中，然后用微量加样器或微量移液管以倍比稀释的方式从第1孔稀释至第8孔中（或更多）。 6.2.3用试剂盒中提供的滴管在第2孔中加入1滴(25ul)未致敏粒子，用另一个滴管向第3
人型支原体感染是什么
人型支原体感染是什么 我们常说支原体衣原体，其实这是性/病的一类，在划分细点，支原体还可以分为解脲支原体、人型支原体、肺炎支原体，而衣原体中最多见的是沙眼原体。临床很多的患者被检查出有解脲支原体，而检查出有人型支原体的比较在少数。于是很多人对自身检查出人型支原体阳性不懂是什么意思？ 人型支原体感染，和解脲支原体一样是生殖道支原体感染的一种，主要可以通过血培养和生殖泌尿道分泌物培养而检测出，若是为阳性就是表明有感染，其中，分泌物的培养多准确点，以MH-DNA阳性表现有感染。若是有症状的患者或是无症状的备孕夫妻是需要治疗的，治疗上可服用妇炎丸治疗。 人型支原体既不是细菌也不是病毒，是介乎于细菌和病毒之间的病原体，是人类泌尿生殖道最常见的寄生菌，同时也是一种条件致病菌，就是在特定的环境下可以致病。这里的特定的环境下，可以是在人体抵抗力差的时候致病，也可以是在长期的抗生素大剂量使用下，导致体内的菌群失调下致病。 人型支原体感染是怎么得的？ 人型支原体主要通过性接触或分娩时经产道感染人体，前者多是在有过多人性/交史或者有过不洁性/交史的成人身上，后者多是有过人型支原体感染的孕妇顺产的婴儿身上。 人型支原体感染有什么危害的？ 人型支原体由于只对粘膜细胞敏感，尤其是对男性的尿道粘膜和女性的宫颈粘膜、尿道粘膜敏感，它不侵入机体组织与血液，而是在泌尿生殖道上皮细胞黏附并定居后，通过不同机制引起细胞损伤，引起粘膜发生炎性反应和炎性细胞浸润，从而导致一些类的生殖道疾病、泌尿道疾病，甚至是直接减低男女的生育能力。 女性有人型支原体感染，前期表现是支原体宫颈炎，此时经过妇炎丸治疗多是会取得满意的效果。若是此阶段没有重视或是治疗方法不对，支原体会继续感染，进入生殖道后可附着于细胞膜受体上，引起粘膜发生炎性反应和炎性细胞浸润，以巨噬细胞及中性粒细胞等炎性细胞为主，被激活的巨噬细胞产生大量的肿瘤坏死因子和干扰素、白介素等细胞因子，使宿主细胞结构和机能受损，造成子宫颈管内膜的慢性炎症，且易逆行传播至子宫内膜及输卵管粘膜使其受损。 人型支原体的治疗，若是经抗生素治疗效果不佳或者已经产生耐药性，建议转为中药的治疗同时，需要多注重个人生活卫生，保持良好的个人卫生!最好不好进行房事，以免交叉感染！
肺炎支原体检测方法的选择
肺炎支原体检测方法选择的几个注意点 肺炎支原体（MP ），主要引起咽炎及支气管炎，少数累及肺。以其顶端结构与宿主细胞上受体结合粘附于上皮细胞上，一般为表面感染，除穿透支原体外（艾滋病人感染）大多不侵入血液。产生有毒代谢产物如外毒素或过氧化氢等引起发热及局部细胞损伤。 选择检测方法的注意事项： 1.临床常用全血（指尖血）或血清（橘黄管）检测IgM 来判定肺炎支原体的感染，但是，抗体检测只是各种实验室方法的一种，尚有其他方法可用，如培养及DNA 检测，每种方法各有利弊，对不同病程各有针对性。 2.每一种实验结果都需要另外一种实验结果来验证，正常人咽部或支气管可携带MP ，所以不能用一种实验数据来下诊断。 3.初次感染时， IgM 、IgG 都会产生，再次感染时，有时IgM 不产生。 4.儿童由于初次感染几率大，常能产生IgM ，成人由于机体可能感染过多次，常不产生IgM 。 5. 检测方法的选择需要根据病程确定： <6个月 6-12个月 1-9岁 IgM + IgM — 年龄对IgM 抗体产生的影响
抗体 抗原 MP感染不同时段产物的比较 由此图可以看出： a.感染早期，7天之内以检测抗原为主，宜培养或DNA检测： 培养为“金标准”，据国内文献显示，快速培养法阳性率为24%；PCR--DNA检测为96%。美国一篇文献显示，培养阳性率为5%，DNA为57%。 b.早期未产生抗体，导致延误治疗，后期抗体阳性，病原体消失，导致过用抗生素。 c.7天之后可检测IgM抗体； d.IgM可持续较长时间，感染后三个月抗体浓度依然较高，有的可以终生阳性，如果短时间内检测抗体，常不能分辨是否为MP现症感染或其他感染。 e.感染早期宜病原体筛查，此时抗体尚未产生，可导致延误治疗；中后期适宜抗体检测，主要用于回顾性验证试验，此时病原体消失，可导致过用抗生素。
肺炎支原体抗体
简易卡 一.【肺炎支原体抗体（IgG）检验方法】 1.将待测血清样本和试剂盒，恢复至室温（20～37℃）. 2.取出反应板，于反应板孔中滴入血清二滴，静置，待血清完全吸入. 3.在20分钟内观察反应板孔中现象. 三.【单纯疱疹检验方法】 1.用一次性真空采血针与抗凝采血管抽取静脉血2-5 ml，轻轻颠倒混匀8-10次，3000r/min 离心10-15分钟，分离血浆. 2.取出反应板，用吸管吸取样本垂直加入，2-3滴. 3.15分钟内观察反应板孔中现象. 七.【革兰氏染色的检验方法】 目的： 1.涂片：取灭过菌的载玻片于实验台上，用移液器吸取10ul待检样品滴在载玻片的中央，用移液器分别吸取10ul金黄色葡萄球菌和大肠埃希菌位于待检品的两侧（中间要有足够的空间），分别作为阴阳性对照。用无菌接种环将液滴涂布成均匀的薄层，涂布面不宜过大。 2.干燥：将标本面向上，手持载玻片一端的两侧，小心地在酒精灯火焰高处微微加热，使水分蒸发，但切勿紧靠火焰或加热时间过长，以防标本烤枯而变形。 3.固定：固定常常利用高温，手持载玻片的一端，标本向上，在酒精灯火焰处尽快的来回通过2-3次，共约2-3秒种，并不时以载玻片背面加热触及皮肤，不觉得烫为宜（不超过60℃），放置待冷后，进行染色。 4.初染：在涂片薄膜上滴加革兰氏结晶紫试剂1-2滴，使染色液覆盖涂片，染色约1min。 5.水洗：斜置载玻片，用洗瓶小股水流冲洗，直至洗下的水呈无色为止。 6.媒染：取1-2滴革兰氏碘液滴在涂片薄膜上，使染色液覆盖涂片，染色约 1min。 7.水洗：斜置载玻片，用洗瓶小股水流冲洗，直至洗下的水呈无色为止。 8.脱色：斜置载玻片，滴加革兰氏脱色剂脱色，至流出的脱色剂不现紫色为止，大约需时20-30S，随即水洗。
人型支原体感染有什么症状
人型支原体感染有什么症状 随着现在的精神文化生活日渐丰富，人们的思想观念与西方日益接轨，人型支原体这种主要依赖于性传播的疾病日渐猖獗，在成人男女中发病率特别高，特别是女性朋友，感染人型支原体的几率和感染的严重程度都比男性要高。那么人型支原体感染有什么症状，缘何爱盯上女性呢? 女性人型支原体感染症状 其实女性人型支原体感染是一种妇科炎症，主要通过性接触传播。一般来说，女性如果有支原体感染的情况，会有以下症状： 1、早期的女性人型支原体感染，患者会出现尿道口红、肿、痒、刺痛、白带增多的情况;少数患者无明显症状; 2、女性人型支原体感染一段时间后，可引起宫颈炎、子宫内膜炎或输卵管及卵巢炎，这时候，患者会出现畏寒、发热、恶心、呕吐、纳差、腹痛、腹泻及白带增多等情况;有些患者伴有尿急、尿痛及尿频。 3、如果女性患人型支原体感染时间较长，没有得到及时治疗，膝、腕、踝及肘等关节会有肿胀、疼痛及活动受限的情况，严重的话甚至可能发生脓毒性关节炎。 4、人型支原体感染严重者，或者免疫力异常低下的女性，还可伴发心肌炎、心内膜炎及淋菌性脑膜炎等。 5、女性人型支原体感染，若前庭大腺受侵，可出现外阴红肿、疼痛及破溃流脓等情况。 女性感染人型支原体后，症状还是比较明显的，一旦出现了早期感染症状，要及时去医院检查治疗，以免耽误治疗，引发严重的后果。那么女性为什么容易感染人型支原体，症状为何比男性重，其实这是由于女性的生理结构决定的，我们继续往下看。 人型支原体感染爱盯上女性的原因 1、女性尿道短，仅约3～5cm，直而宽，尿道括约肌薄弱，且尿道口大，细菌易上行侵入膀胱。而女性膀胱排空不如男性完全，残余尿量较多，尿液在膀胱内停留时间过长，有利于细菌滋生。 2、女性尿道口距阴道、肛门近，尿路上皮细胞对细菌粘附性及敏感性较男性为高，月经血也是细菌良好的培养基，如不注意外阴清洁则细菌容易滋生，受到外界的感染。
支原体染色试剂盒
支原体染色检测试剂盒 简介： 支原体染色检测试剂盒(Mycoplasma Stain Assay Kit)是一种经典的利用DNA 荧光染色法检测支原体污染的试剂盒，其原理是当细胞发生凋亡时，染色质会固缩，Hoechst 染色后在荧光显微镜下观察，正常细胞的细胞核呈正常的蓝色，而凋亡细胞的细胞核会呈致密浓染，或呈碎块状致密浓染，颜色有些发白。 Leagene Hoechst Staining Kit 经常用于培养的贴壁或悬浮细胞以及组织切片的细胞凋亡检测。该试剂盒检测细胞含量范围一般为0.1～1×106之间。 组成： 自备材料： 1、 可观察蓝光的荧光显微镜或激光共聚焦显微镜 2、 PBS 或生理盐水 3、 载玻片、盖玻片 4、 预冷固定液：预冷的70%乙醇或4%多聚甲醛 操作步骤(仅供参考)： (一)贴壁细胞 1、取洁净盖玻片在乙醇中浸泡，无菌超净台内吹干或用无菌的PBS 或生理盐水洗涤3次，再用细胞培养液洗涤。将盖玻片置于6孔板或其他培养皿内，接种细胞培养过夜，使融合率约为50%～80%。 2、加入干预条件使细胞发生凋亡后，吸尽培养液，加入Hoechst 固定液，固定10分钟或更长时间(可4℃过夜)。 3、去除固定液，用PBS 或生理盐水洗，每次3min ，吸尽液体。洗涤时宜用摇床，或手动晃动。 4、加入Hoechst 染色液，孵育。也宜用摇床，或手动晃动数次。 5、弃染色液，PBS 或生理盐水洗2次，每次3min ，吸尽液体。洗涤时宜用摇床，或手 编号 名称 DA0140 100T Storage 试剂(A): Hoechst 固定液 50ml RT 试剂(B): Hoechst 染色液 50ml -20℃ 避光 试剂(C): 荧光封片剂 5ml 4℃ 避光 使用说明书 1份
生物发光法和qPCR法检测支原体
支原体检测试剂盒(MycoAlert Mycoplasma Detection Kit) 定义：支原体（mycoplasma），又称霉形体，没有细胞壁的原核生物，为目前发现的最小的最简单的原核生物。支原体细胞中唯一可见的细胞器是核糖体（支原体是原核细胞，原核细胞的细胞器只有核糖体）。它对许多抗生素具有抗性，如类胸膜肺炎微生物。 一.支原体污染成为细胞培养的重大隐患: 1．研究表明，世界范围内超过15%的培养细胞都有支原体污染。2．支原体污染会对细胞造成多方面的影响，包括代谢、免疫或生化特性、生长状况、以及细胞存活等多方面的改变。 3．支原体污染会影响实验结果的稳定性、可靠性和准确性。 4．支原体难以检测，同时也很难消除。支原体能轻易地通过标准滤膜，同时也能拮抗绝大多数的抗生素，给细胞培养造成巨大损失。 二.常规检测才能有效避免细胞支原体污染: 1．常规性的进行支原体检测是保证细胞培养中不受到支原体污染影响的唯一途径。 2．传统的支原体检测方法需要在特殊的选择性培养基作用下对样品进行培养，时间往往达数周，费时，费力并且无法获得足够的灵敏度和特异性。 三检测原理 美国Lonza MycoAlert Mycoplasma Detection Kit支原体检测试剂盒是利用支原体酶的这一特定活性，进行选择性的生物化学检测。这些酶的存在提供了一种快速的筛选操作，能灵敏地检测出样本中的
支原体污染。这些存活的支原体被溶解，然后释放出来的酶与支原体检测试剂盒中提供的底物发生催化反应，将ADP转化成ATP。通过测量样品中添加底物前后ATP的含量，可以得到一个比率，该比率指示支原体是否存在。如果这些酶不存在，第二次读数相对于第一次读数就没有增加；如果酶与底物进行特异性反应，就会导致ATP含量上升。ATP含量的上升通过生物发光化学反应可以检测到，其公式如下：Luciferase ATP + Luciferin + O2 ——————> Oxyluciferin + AMP Mg 2+ + PPi + CO2 + LIGHT 这个反应的发生是在室温(18°C～22°C)进行的，也是荧光素酶反应的最佳温度。 在支原体检测试剂盒的检测原理中，最后通过分光光度计读数，由于发出光的强度与ATP的浓度成线性关系，因此可检测支原体的污染问题。
肺炎支原体及其快速培养法概要
肺炎支原体及其快速培养法 支原体是一类缺乏细胞壁的原核细胞型微生物，它既不同于细菌，也不同于病毒，是介于细菌和病毒之间，能在无活细胞的人工培养基上生长繁殖的最小微生物。它广泛分布于自然界，与人类、nbsp;动植物的疾病有密切的关系。支原体的种类繁多，造成的危害非常广泛。 作者：罗三艳作者单位：412001 湖南株洲，株洲田心医院检验科支原体是一类缺乏细胞壁的原核细胞型微生物，它既不同于细菌，也不同于病毒，是介于细菌和病毒之间，能在无活细胞的人工培养基上生长繁殖的最小微生物。它广泛分布于自然界，与人类、动植物的疾病有密切的关系。支原体的种类繁多，造成的危害非常广泛。目前证明对人体有致病作用的支原体有肺炎支原体、解脲支原体、人型支原体、生殖支原体等几种，但临床以肺炎支原体最为常见［1］。肺炎支原体主要以飞沫传播，引起儿童、青少年呼吸道感染、咽炎、气管炎、肺炎等。近年肺炎支原体感染病例明显增多并有局部流行的趋势，早期诊断极为重要。 1 肺炎支原体的实验室检测方法目前，肺炎支原体的实验室检测方法有支原体分离培养、 PCR法检测质粒核酸、抗体检测、支原体快速培养法、分子生物学方法等。支原体细胞分离培养可获得肺炎支原体，可以确诊。由于支原体分离培养要求苛刻，一般医院实验室难以推广。此法阳性率低，需时3 周甚至更长时间，对临床快速诊断意义不大。PCR法检测质粒核酸快速、特异、敏感，但需昂贵设备，不易普及，且方法过于敏感，容易受污染。传统的冷凝集法检测肺炎支原体的IgM 抗体，方法简单、易行，但其敏感性和特异性均较差，易受病程影响。ELISA 检测支原体抗体法较为简便、可靠。由于发病初期，机体中尚未产生抗体不能被检出，发病时间较长此法才有意义。而快速培养法正以其简单、快速、经济、无创伤等优点，被越来越多的临床实验室所推广，也被越来越多的患者所接受。 2 肺炎支原体快速培养法肺炎支原体快速培养法是利用肺炎支原体的代谢产物使培养基液体中的指示剂颜色发生改变来判断其生长，标本中的其他支原体和细菌则被培养基中的青霉素和醋酸陀抑制［2］。此法操作简便、快速、无痛苦。先从冰箱中取出快速培养基，复温，按常规方法采集患者咽拭标本，将标本棉签浸入培养液，沿瓶壁挤压棉签，取出棉签、丢弃。旋紧瓶盖，登记标本号，35℃～37℃孵育24～ 48h，观察结果。培养基由红色变为绿色、黄色，且仍保持清晰透明，说明有肺炎支原体生长，明显混浊变色者不能视为阳性。培养液颜色不变，应判为无肺炎支原体生长。我院检验科是从2007年4月份开始展开此项检测，共检测293 例疑似肺炎支原体感染病例，阳性病例161 例，阳性率54.9%，及早为临床诊断、治疗肺炎支原体感染提供了依据。 3 讨论近年来，肺炎支原体感染明显上升，危害较大，其临床表现常无特异性，易与一般病毒性感冒相混淆。临床医生为了尽快缓解患者的症状，需根据患者症状、体征及肺炎支原体的相关检测，及早诊断、治疗。快速培养法不受病程影响，感染初期就可检测出肺炎支原体。有资料报道，在肺炎支原体检测的各种方法中，该法阳性病例病程最短，提示病程时间较短的患者选择此法检测的阳性率较高。快速培养法是诊断肺炎支原体的金标准 ［2］。肺炎支原体快速培养法采咽拭标本，采集标本前，用生理盐水漱口。所采集的标本应迅速接种，若不能及时接种，室温保存不超过2h。使用
人型支原体的预防措施
主持人：各位网民朋友，大家晚上好，欢迎登陆中国生殖健康网，今天我们请到的专家是北京中医药大学附属东方医院皮肤性病科主任李元文，今天的话题是衣原体和支原体感染的中医药治疗。首先请专家给我们做一下讲解，之后回答网民朋友的问题。 李元文：说起衣原体和支原体的感染，我们就想到了性病中最常见的非淋菌性的尿道炎，或者是非淋菌性的宫颈炎，这个病是非常常见的，有人认为发病率在目前的状态下可能是排在第一位的，也有人认为他是仅次于淋病，或者是梅毒，总之发病率非常高的一种性病。由支原体和衣原体感染引起的这种非淋菌性的尿道或者是宫颈炎，是一种危害非常大的性病，为什么这么说呢？一般的性病，危害性首先是局部可以出现炎症的损害，或者我们叫感染，表现就是泌尿或生殖道的疼痛，灼热、红肿，或者是脓性分泌物，这样的话引起泌尿生殖道的炎症反应，这是第一个危害。第二个危害，由衣原体和支原体感染引起的泌尿生殖道的炎症，往往逆行从前尿道向后尿道转化，比如说男性出现了衣原体、支原体感染的前列腺炎以及精囊炎，女性出现宫颈炎，慢性的疾病可能引起不孕不育，因为泌尿生殖道的炎症，特别是慢性的炎症，可能引起不孕不育。[20:03:44] 李元文：在支原体感染的患者中，由于支原体和精子的结合，导致了精子活动度的下降，以及精子质量明显的下降，或者是出现早产、流产的情况，所以大家感觉到，有衣原体和支原体感染引起的性病，它的危害性是比较大的。所以说这种病往往引起慢性的损害，很多患者感觉到轻微的自觉症状，使得治疗延误，比如说有的患者感染了支原体数年，但是他并不知道，他没有意识到，因为症状很轻微，比如说女性患者只感觉到我的白带稍微多一些，或者是腹部隐隐作痛，她认为是不是着凉，或者是月经前不规则的出血，是不是慢性的炎症，到妇科检查，往往有一些宫颈的糜烂，宫颈的炎症，或者是不典型增生，这时候导致的延误治疗，使得病情复杂化，所以说这个病的危害性和后果，我们经常也有认识不足的问题。所以我今天就这个话题讲一下治疗，在讲治疗前，我想重点让大家明白，什么样的症状要检查。[20:06:01] 李元文：性病绝大多数是通过性途径传播的，比如说不洁的性交，当然性传播的途径不是每个人都非常清楚，我给大家举个例子，我的一个病人，有支原体的感染多长时间不知道，怎么感染不知道，有的女性患者也可能有无辜性的感染，比如说夫妻俩，如果是丈夫有所谓的嫖娼史，但是没有把这种情况告诉妻子，妻子又出现了支原体、衣原体的感染，症状又不是很明显，所以很难给自己断定我就是感染了支原体，也不可能积极主动地寻求治疗。所以说，我们讲治疗前，我们给大家先讲一下什么样的情况应该检查支原体。对男性患者，如果出现尿道有不适的症状，包括了尿频、尿急、尿痛，以及尿道口的灼热、瘙痒，或者是憋不住尿，有这种感觉的时候，考虑是否有支原体的感染。 主持人：比如说这两天有这种症状，或者说一周有，之后就没有了，或者说这种症状是持续性的？ 李元文：由衣原体、支原体感染引起的尿道炎，往往是慢性的尿道炎，它绝对不会说两三天症状就消退了，往往是断断续续，比如说1周前有明显的症状，但是1周后可能减轻了，但是过一段时间又出现了，这时就一定要小心，这就符合慢性、复发性感染的疾病症状，男性就是尿频、尿急、尿痛，尿道的灼热、不适，会阴的酸胀、不适，这时就要考虑到是不是有衣原体、支原体的感染。如果发现自己有不舒服的症状，观察到尿道口在晨起的时候，尿道口有一些清晰的，或者是粘滞的分泌物的时候，一定要高度怀疑是衣原体、支原体的感染。
支原体试检测剂盒使用说明书(中文版)
支原体检测试剂盒使用说明书 1.试剂：支原体检测试剂盒由武汉源深生物科技有限公司提供。 2.实验方法: 巢式PCR的方法检测支原体污染： A.待检细胞汇合率在90％以上时取100 μL细胞上清液到离心管内 B.95o C孵育5分钟 C.短暂高速离心15秒钟左右 D.试剂盒里的组份： 引物混合物(Primer Mix) 20 μL 阳性对照DNA (Positive Control DNA) 15 μL 阴性对照(Internal Control DNA) 20 μL 巢式PCR一共需要做2轮PCR，本检测方法不受其他来源（如所培养细胞）DNA的影响，不但提高了检测的灵敏度，同时也提高了特异性。 (1)第一轮PCR: PCR 混合物： 向0.2 mL PCR薄壁管中依次加入以下组分， 盖紧管盖，轻弹管壁混匀，稍加离心。 E.热循环程序： 将准备好的PCR管放入PCR仪，运行如下程序。 PCR 混合物： 向0.2 mL PCR薄壁管中依次加入以下组分，
盖紧管盖，轻弹管壁混匀，稍加离心。 F. 热循环程序： 将准备好的PCR 管放入PCR 仪，运行如下程序。 试验结果： 2％ 琼脂糖凝胶电泳，TBE 缓冲液，PCR 产物及Marker 均点样10μL ，于50V 下电泳1hr ，EB 染色15min ，紫外灯下观察。 电泳结果见下图： 图中泳道M 为DNA Marker ，1和2为待检测细胞系的第一轮PCR 产物 (1st )，3和4为待检测细胞系的第二轮PCR 产物 (2nd ), 其中1、3为阳性对照管PCR 产物，2、4为阴性对照PCR 产物。 阳性对照管在200bp 左右，和300-400 bp 处各有一条带，证明本次实验准确可靠 (不同的支原体Mycoplasma, such as M. fermentans, M. hyorhinis, M. arginini, M. orale, M. hominis, M. arthritidis, M. hyopneumoniae and Acholeplasma laidlawii 的保守区的片段长度不一，大概在200-400 bp 之间)。 M 1 2 3 4
肺炎支原体肺炎的诊断
肺炎支原体肺炎的诊断 空军总医院刘春灵 支原体是介于细菌和病毒之间的一类缺乏细胞壁、呈高度多型性、能通过滤菌器、可在无生命培养基中生长繁殖的最小原核细胞型微生物。迄今分离到的支原体已达150余种，已确定与人类疾病关系最大的有3种，肺炎支原体（mycoplasma pneumonia, MP）是其中的一种。MP在国内外都是儿童和成人呼吸道感染的重要病原体之一，主要导致肺炎，所有肺炎的15-20%，约50%的儿童和青少年肺炎是由MP引起的.因此MP肺炎（MP pneumonia,MPP）是常见病和多发病。但迄今为止，MPP仍缺乏快速、可靠的诊断试验，因而临床确诊困难。 MPP的诊断包含两个层面：临床诊断（经验性）和结合了实验室病原学检测的确定诊断。 一、MPP临床诊断：根据流行病学、临床症状、体征、实验室辅助检查等特点经验性综合判断而出。MPP有着不同于一般感染性疾病的的特点：一般肺炎多发于冬季，MPP一年四季均可发病，但多发生于夏秋季节；临床症状大多只有发热和咳嗽；外周血白细胞总数大多不高；疾病早期X线检查即可出现肺炎，约10%-20%的病例会出现肺不张；因MP无细胞壁，临床常用的、作用于细胞壁的、安全性高的治疗肺炎的药物如β-内酰胺类的青霉素类、头孢类抗生素对其无作用；因此易被误诊为病毒性肺炎。综合上述特点，可作出初步的经验性临床诊断。 二、实验室病原学诊断：包括直接病原体检测和血清学检测。下面介绍几种常用或经典的MP实验室诊断方法。 （一）直接病原体检测：主要有MP分离培养和聚合酶链反应（PCR）法检测MP-DNA。检测用标本可取自可疑患者呼吸道的痰、咽拭子、鼻咽吸出物、支气管肺泡灌洗液、胸水等。 1、MP分离培养与鉴定： MP很挑剔，培养基的营养要求比一般细菌高，生长速度慢，较一般细菌难培养；分离培养需要10-14天，而通常需要2-5周才能生长成肉眼可见的菌落。通过生化反应和免疫学方法进行鉴定。还有其它影响因素，如MPP无细胞壁，对环境的影响更为敏感，易被灭活；标本采集后接种到培养基的过程也是培养可能失败的一个环节。由于其费时、费力、阳性率低，实际临床已经弃用此方法，目前主要用于研究性项目。
肺炎支原体感染的血清学检验
肺炎支原体感染的血清学试验 参考范围： 补体结合试验(CF) <1:8 代谢抑制试验(M1) 阴性 问接血凝试验(PHA) 阴性 酶联免疫吸附试验(ELISA) 阴性 MG链球菌凝集试验<1:40 临床评价： 1．肺炎支原体（MP）是主要的病原性支原体之一，在临床上主要引起上呼吸道感染、气管艾气管炎及支原潍肺炎。过去称为“原发性非典型性肺炎”的病原体中，MP最为常见。约有80％的慢性支气管炎患者合并MP感染。肺炎病例中约有10％～20％由MP引起。MP感染后，可用各种血清学试验检测体内产生的特异性抗体，有助于疾病的诊断。 2．测定病人血清中特异性抗体，常用的方法有CF、MI、PHA和ELISA等，其中CF 试验是诊断支原体肺炎最常应用的方法。支原体有较强的补体结合反应，单份血清抗体效价>1：6 4或恢复期较急性期抗体滴度增加4倍以上即有诊断价值。一般补体结合抗体在感染后7～9天开始上升，3～4周达到高峰，维持4～6个月。问接血凝试验在MP感染的急性期即可出现阳性，血凝抗体可存在数年。代谢抑制试验可测定MP脂多糖胞膜抗原的相应抗体，方法敏感且特异性强。这种抗体的出现较上二者为迟。ELISA所用抗原为MP表面P蛋白，采用间接法检测特异IgM抗体，具有早期诊断意义。 MG链球菌凝集试验是检测患者血清中MG链球菌凝集素效价的一种方法。MG链球菌是从某些原发性非典型性肺炎病人的呼吸道或肺部分离出的一种非溶血性菌株，约有40％～50％的支原体肺炎患者恢复期血清中常产生MG链球菌凝集素，本试验呈阳性，故检测患者血清内凝集素效价对支原体肺炎有辅助诊断意义。本试验还有助于与病毒性肺炎的鉴别，病毒性肺炎不出现MG链球菌凝集反应。 3．采用分离培养的方法检测患者痰、咽拭等标本中的MP，对支原体肺炎具有病原确诊意义，但需要2周以上时间，且阳性率不等，在临床上不能早期、快速诊断。寒冷凝集试验是一种非特异性反应，在临床上常用作支原体肺炎的辅助诊断，约有50％以上病例可出现冷凝集抗体。应用PCR技术检测患者呼吸道分泌物和支气管肺泡冲洗物中MP的DNA，是敏感、特异且快速的实验室诊断方法。 4．影响本试验结果的因素 (1)CF试验的敏感性和特异性不高，所用的MP糖脂抗原可与许多微生物、植物及人体组织有交叉反应。 (2)MG链球菌凝集试验在某些严重感染性疾病也可呈阳性。 寒冷凝集试验 参考范围： 寒冷凝集试验 临床评价： 1．寒冷凝集素是由I抗原刺激机体产生的一种非特异性抗体，属IgM类，在0～10℃的寒冷情况下，能与O型人红细胞或自身红细胞的膜抗原结合，产生凝集现象。此种凝集反应具有可逆性，若将已凝集的红细胞再放置于37℃时，凝集现象即可消失。支原体肺炎患者血清中常可出现高效价的寒冷凝集素，寒冷凝集试验可用于测定该抗体的效价，有助于支原体肺炎的诊断。 2．寒冷凝集素大多在发病后1～2周开始出现，以后继续增高，于病程3～4周达到
支原体
支原体（mycoplasma）感染是一种性接触传播疾病。支原体可存在于健康携带者，而在性乱者、同性恋、妓女、淋病患者中检出率较高。性伴数越多，性活跃指数越大，感染率越高。 目录 1基本概述 2流行病学 3病原学 4检查诊断 1. 4.1 血常规 2. 4.2 x线检查 3. 4.3 直接涂片镜检 4. 4.4 快速抗原检测 5. 4.5 衣原体分离 6. 4.6 血清学检全 7. 4.7 PcR技术 5感染概率 概述 从人体分离的16种支原体中，5种对人有致病性，即肺炎支原体（M.pneumoniae）、解脲支原体（Ureaplasma urealyticum）、人型支原体（M.homins）、生殖支原体 （M.genitalium）及发酵支原体（M.fermentans）。脲解支原体属（ureaplasma）含脲解支原体等体、脲解支原体及人型支原体等对人有致病性。肺炎支原体是呼吸道感染、肺炎的主要原因。脲解支原体、人型支原体则引起泌尿生殖道感染（即支原体感染）。 支原体（mycoplasma）是细胞外生存的最小微生物。是一类缺 支原体模型 乏细胞壁的原核细胞型微生物，大小一般在0.3-0.5um之间，呈高度多形性，有球形、杆形、丝状、分枝状等多种形态。它不同于细胞，也不同于病毒。种类繁多、分布广泛、造成的危害相当大，涉及人、动物、植物及昆虫等多个领域，给人类健康和科研工作带来不利影响。
支原体是一种不同与细菌和真菌的另一类微小病原体，支原体属有80余种，与人类有关的支原体有肺炎支原体（MP），人型支原体（MH）、解脲支原体（UU）和生殖支原体（MG），前者引起肺炎，后三者引起泌尿生殖道感染。 支原体、衣原体感染人体后，首先侵入柱状上皮细胞并在细胞内生长繁殖，然后进入单核巨噬细胞系统的细胞内增殖。由于支原体、衣原体在细胞内繁殖，导致感染细胞死亡，同时尚能逃避宿主免疫防御功能，得到间歇性保护。支原体、衣原体的致病机理是抑制被感染细胞代谢，溶解破坏细胞并导致溶解酶释放，代谢产物的细胞毒作用，引起变态反应和自身免疫。 2流行病学 2000年我国研究者骆丹等用PCR法对广东、昆明、上海、南京、广州等地区患性传播性疾病（STD）的妇女进行了生殖器支原体（Mh）的检测，结果其总阳性检出率为16.05%，对照组（未患STD）仅为1.79%；广东、昆明地区的阳性检出率分别是21.69%和19.20%，显著高于上海、南京等地区。2001年西班牙对不孕患者的研究发现，47.3%的不孕妇女有感染史，而解脲支原体（Uu）和Mh的分离率分别为23.5%和408%。西非2000年对孕妇的横断面研究证实，妊娠期妇女生殖道的支原体检出率为73%，其中Uu22%、Mh20%。国外有学者报道在13—19岁患STD的青少年，支原体检出率为50%，显著高于成年对照组的检出率28%。总之，支原体的检出率和支原体类型、地区和人群有关。孕妇、性生活活跃的年轻人、STD 患者是支原体感染的高危人群。 3病原学 目前已知的支原体有80多种。从人体分离出的主要种类有：人型支原体（Mh）、解脲支原体（Uu）、灵长类支原体、生殖器支原体、穿透支原体、亲脂支原体、肺支原体等。电镜下支原体呈烧瓶状或梨形，菌体长0.6—0.7μm，靠近底部宽0.3—0.4μm，顶部末端宽0.06—0.08μm，末端向下延伸有约7nm的茸毛，没有细胞壁，对干燥敏感，其代谢产物的堆积不利于其生长繁殖。不同的支原体具有不完全相同的生物学特征。 4检查诊断
肺炎支原体检测的SOP内容
HQBJS/MYXM-9-2015 SOP文件B9.1【检验目的】 肺炎支原体是人类原发性支原体肺炎的病原体，经呼吸道感染。多发生于儿童、青年，发病初期临床症状不明显，隐性感染和轻型感染较多，也可致严重肺炎，出现头痛、发热、咳嗽等，本试验用胶体金法定性检测人血清中的肺炎支原体IgM 抗体。 B9.2【检验原理】 用肺炎支原体抗原固相硝酸纤维素膜，应用渗滤式间接法原理，检测血清中肺炎支原体抗体。 B9.3【样本要求】 血清样品不能溶血，应为新鲜血清或2℃～8℃条件保存不超过3天。高脂血症血清不能使用。 B9.4【样本采集】 不抗凝血2ml，避免溶血、混浊、或脂血标本 B9.5【试剂盒主要组成成份】 斑点反应板：40块（或20块） 试剂A： 1瓶, 约10ml 试剂B: 1瓶,约8ml, 胶体金标记物 B9.6【储存条件及有效期】 产品应储存在2℃～8℃条件中，不能冷冻；有效期8个月。
HQBJS/MYXM-9-2015 SOP文件 B9.7【检验方法】 滴入二滴试剂A于反应板中央孔中，待完全渗入； 滴入100μl血清于反应板孔中，待完全渗入； 滴加三滴试剂B于反应板孔中，待完全渗入； 渗入三滴试剂A于反应板孔中，待完全渗入。 B9.8【结果解释】 阳性：反应板孔中出现红色圆斑和清晰的红色质控线，为肺炎支原体抗体阳性； 阴性：反应板孔中只显现清晰的红色质控线，为肺炎支原体抗体阴性；失效: 反应板孔中未显现红色质控线，为操作失误或试剂失效。 B9.9【检验方法的局限性】 本试剂试验仅用于检测肺炎支原体抗体而非直接检测肺炎支原体，因而阳性结果并不能确诊是肺炎支原体感染。对患者状况的诊断应结合患者临床体征与症状和试验结果的综合分析。 抗体含量低的血清样品，不能被检测出来是可能的。部份肺炎支原体感染的患者，不产生抗体或产生少量的抗体。此时，可能显示阴性结果。 试验结果可疑时，应用培养基进行培养确诊。