黄芪皂苷薄层色谱成分
黄芪皂苷薄层色谱成分
黄芪皂苷是一种神经保护剂，广泛应用于治疗脑血管疾病和神经系统疾病。它是一种含有黄酮苷的复合物，具有多种生物活性。研究表明，黄芪皂苷主要包括以下几种成分：
1. 黄酮苷类成分
黄芪皂苷中主要含有黄酮苷类成分，包括芦丁、异鼠李糖苷、芹菜苷等。这些成分具有一定的抗氧化和抗炎作用，可以有效减轻脑血管疾病和神经系统疾病的症状。
2. 毒扁豆皂苷成分
黄芪皂苷中还含有毒扁豆皂苷成分，包括毒扁豆皂苷A和B。这些成分具有一定的抗菌和抗病毒作用，可以防止疾病的发生和传播。
3. 生物碱类成分
黄芪皂苷中含有生物碱类成分，包括短柱茎碱、赤石脑碱等。这些成分具有一定的神经保护作用，可以改善脑血流灌注、增加脑微循环，从而缓解神经系统疾病的症状。
4. 多糖类成分
黄芪皂苷中还含有多糖类成分，包括中性多糖、酸性多糖等。这些成
分可以刺激机体免疫系统，增强机体免疫力，预防疾病的发生和传播。
总之，黄芪皂苷是一种具有多种生物活性的复合物，对治疗脑血管疾
病和神经系统疾病具有重要的作用。在今后的医学研究中，我们需要
进一步探究黄芪皂苷的成分和作用机制，以更好地应用于临床实践中。
薄层色谱法在中药复方制剂中的应用
薄层色谱法在中药复方制剂中的应用 薄层色谱法又简写为TLC，常用于中药成方制剂中有效成分的定性鉴别。由于该方法鉴别专属性强，使用设备简单，易于操作，故应用广泛，在目前的药品质量标准定性鉴别中（如中国药典和国家食品药品监督管理局标准），已大大地超过了显微鉴别、理化鉴别和光谱鉴别。 下面对薄层色谱法在中药复方制剂中的应用做一些分析： 一、医院制剂由于其自身的特殊性，如只能在本院销售，生产和检验设备简陋，生产量小，剂型和品种相对较多，生产中常以水煎煮为主。故在选择处方中的薄层定性药材时，应以选择水溶性成分为先。如芍药苷、栀子苷、黄芪甲苷、龙胆苦苷、人参皂苷等苷类或绿原酸、阿魏酸等易溶于水的有机酸类成分。 二、仔细分析处方。选择方中薄层定性的药材，应先选取以粉碎入药的药材。因为这部分药材中的有效成分一般没被破坏，特别是一些含有挥发性成分的药材，如薄荷、香附、荆芥等，在薄层层析中以药材作为对照品，很容易鉴别出来。 三、对处方中含有多糖类或淀粉质较多的药材，如麦冬、北沙参、党参等，可采取先酸解后用有机溶剂提取的方法。经这样处理后，薄层层析斑点一般都比较清晰，药检所复核时往往容易通过。 四、在使用展开剂时，在同等条件下，应选择无毒或毒性较小的有机溶剂。如选用环己烷而不选用正己烷，选用甲苯而不选用苯。以减少有机溶剂毒性对人体的侵害。 五、对样品的取样量不宜太大。如果取样量太大，点样时往往因样品的浓度太高而造成点样困难，展开时斑点又不易分离而使薄层图谱不清晰。 六、对中药复方制剂的液体剂型，提取分离方法应溶剂法，用适宜的有机溶剂提取。如是提取水溶性成分，应考虑对样品进行脱脂处理。对酒剂、酊剂或搽剂中含有的样品，应先在水浴上蒸去后再作下一步的处理。如液体剂型不宜用有机溶剂提取，也可采用先将药液置水浴上蒸干（或加入适量硅藻土分散），再用有机溶剂提取的方法。 七、对中药复方制剂的固体剂型，提取分离方法可选用超声提取法、回流提取法或溶剂提取法（应先将样品加定量水溶解）等。超声提取方法简单，所需时间短，
黄芪甲苷的含量测定研究进展
黄芪甲苷的含量测定研究进展 摘要黄芪甲苷是中药黄芪的主要有效成分，含量测定方法较多，其测定方法主要有高效液相色谱法、薄层扫描法、荧光法等。 关键词黄芪甲苷含量测定研究进展 黄芪为常用中药,性温,味甘,具有补气固表、利尿托毒、排脓、敛疮生肌之功能,用于气虚乏力、食少便溏、中气下陷、久泄脱肛、便血崩漏、表虚自汗、气虚水肿、久溃不敛、慢性肾炎、蛋白尿、糖尿病等症[1]。现代药理研究表明,黄芪具有器官保护、免疫调节、强心、降糖、抗衰老、抗炎抗病毒等作用[2]。近年来，对黄芪甲苷的含量测定方法的研究很多，本文就几种常用方法进行介绍。 1.高效液相色谱法(HPLC法) HPLC法因其分离度好、灵敏性高，适用范围广等优点，已广泛用于黄芪甲苷所 产生的的含量测定、稳定性、药理和临床研究中。 1.1HPLC-UV法：黄芪甲苷属于四环三萜类皂苷，紫外末端吸收λmax=200.08nm,紫外检测灵敏度低，干扰因素多[3]，目前HPLC法是最常用的检测器是紫外检测器,闵庆璐等[4]采用HPLC-UV法测定丹黄祛瘀片中黄芪甲苷的含量，色谱柱为Kromasil C18 柱（250mm×4.6mm）,流动相乙腈-水(32:68)，流速1.0ml/min,检测波长203nm。结果线性范围0.066~0.330mg/ml(r=0.9993)回收率为95.0%~105.0%,平均回收率100.1%（RSD= 2.0%，n=9）。 1.2HPLC-示差折光检测法：由于黄芪甲苷在紫外区仅有微弱的末端吸收，溶剂 噪音对结果有较大的影响，且其前处理繁杂。池玉梅等[5]应用HPLC-示差折光检 测法测定黄芪精口服液中黄芪甲苷的含量，色谱柱为Hypersil ODS 2（4.6mm×200mm,5μm）,流动相为甲醇-水（67:33），结果线性范围1~5μg/ml,回收率为98.1%，RSD为2.02%。该方法简单方便，重现性好，灵敏度高，结果准确可靠。 1.3RP-HPLC法：翟海云等[6]采用RP-HPLC法测定复方补气养血口服液中黄芪甲苷的含量，色谱柱Agilent C18（150mm×4.6mm,5μm）,流动相乙腈-水（60:40），流速1.0ml/min，检测波长203nm。结果黄芪甲苷的线性范围为0.34~3.40μg （r=0.9999）,平均加样回收率为100.8%（n=6）,RSD为1.47%。该方法简便可行，重复性好，可用于复方补气养血口服液中黄芪甲苷的含量测定。贺福元等[7]采用反向高效液相色谱法对大鼠血浆补阳还五汤中黄芪甲苷的含量进行了测定，并进行了药动学研究。采用C18柱（4.6mm×250mm,5μm），检测波长：203nm,流 动相：乙腈-水（35:65），结果血浆样品中黄芪甲苷的线性范围为2.4~12μ g,r=0.9996,回收率为100.2%，RSD为1.100%。该法快速、简便、准确。 1.4HPLC-ELSD法：HPLC-ELSD法的原理是恒定流速的洗脱液进入检测器后，首先被高压气流雾化，雾化形成的小液滴进入蒸发室，流动相及低沸点的组分被蒸发，剩下高沸点组分的小液滴进入散射池，光束穿过散射池时被散射，散射光被光电管接收形成电信号，散射光由光电倍增管收集得到响应。响应大小决定由被分析物质的颗粒的数量和大小，而不受流动相溶剂的干扰；不要求被检测组分有特定的化学结构[8]。金平等[9]采用HPLC-ELSD法测定黄芪泡腾片中黄芪甲苷的含量。 采用十八烷基硅烷键合硅胶柱（4.6mm×250mm,5μm），流动相：水：乙腈（68:32），漂移管温度80℃，流速2.7L/min。结果黄芪甲苷为1.112~6.672μg时呈良好的线性关系，平均回收率为99.56%（RSD=1.67%）3批样品每片含黄芪甲苷均在 2.00mg以上。结论该方法准确可靠、重现性好、可用于黄芪泡腾片中黄芪甲苷 的含量测定。王鹏等[10]采用高效液相色谱-蒸发光散射测定蒙古黄芪中黄芪甲苷
黄芪皂苷类提取
黄芪皂苷的提取与纯化 1.黄芪的有效成分 黄芪化学成分的研究，始于上世纪 50 年代初期，迄今为止，已从黄芪类中药中分离出了几十种活性成分。经药理学研究表明：黄芪主要含有黄芪皂甙类、黄芪多糖类、黄酮类、氨基酸类及少量微量元素类。肖容等人对黄芪中氨基酸进行了提取，得到 15 种氨基酸并测出其含量。根据日本、前苏联和中国学者的研究，黄芪中的黄酮或黄酮类似物约二十种左右，大多属于黄酮，异黄酮和异黄烷类化合物，从黄芪中分离的黄酮具有抗缺血和改善血相作用，是天然抗氧化剂家族中的重要成员之一，它具有很强的清除自由基和抑制脂质过氧化特性。黄芪中主要的有效成分为黄芪皂甙和黄芪多糖。 2. 黄芪皂甙 2.1 皂甙的分类及性质 皂甙是由皂甙元和糖组成，依据甙元的结构将皂甙分为两大类，其一为甾体皂甙，另一类为三萜皂甙。甾体皂甙结构中大多不含羧基而呈中性，而三萜皂甙根据水解后结构分成四环三萜皂甙和五环三萜皂甙两大类，结构中可见羧基，因此酸性皂甙多属此类。 黄芪中含有大量的皂甙类及三萜类化合物，约有50多种左右，它们大多属于四环三萜类，其中含量较多的为黄芪皂甙Ⅳ，即黄芪皂甙甲苷。皂甙的溶解度随其分子中连接糖数目不同而不同。一般可溶于水，易溶于热水、热甲醇及热乙醇，不溶于乙醚等极性小的有机溶剂，具有溶血作用，可被酶或酸溶液水解，水解后的糖多为葡萄糖、半乳糖、鼠李糖及其他五碳糖。 2.2 皂甙的提取 (1) 正丁醇萃取法
皂甙在水饱和正丁醇或戊醇中溶解度大，且能与水分成两相，可利用此性质从皂甙水溶液中用丁醇或戊醇提取皂甙，与亲水性大的糖、蛋白质等分离。具体方法用亲水性强的正丁醇为溶剂在水溶液中作两相萃取，皂甙转溶于正丁醇，一些亲水性强的杂质如糖、蛋白质、鞣质等仍留在水中，与皂甙分离。 (2) 甲醇提取-乙醚沉淀法 甲醇提取含皂甙植物，过滤，回收绝大部分甲醇，冷却甲醇浓缩液，利用皂甙不溶于乙醚的特性，加入等体积的乙醚，摇匀，析出大量白色沉淀，静置，倾出上清液，再加入乙醚，又有白色沉淀产生，如此重复，直到加入乙醚无沉淀产生为止。把沉淀物干燥，得黄色粗皂甙，如其纯度不合要求，可以再溶于甲醇，加乙醚沉淀。此法流程简单，能耗少，易于操作，但溶剂消耗量大。 (3) 水提取-无水乙醇溶解法 水提取皂甙，过滤，浓缩，真空干燥，粉碎，得棕色粗皂甙。利用皂甙可溶于热无水乙醇，而糖类、蛋白质等杂质不溶原理，采用热无水乙醇把粗皂甙粉中的皂甙溶解出来，回收部分乙醇，冷却，静置，即有大量的白色皂甙析出。此法所得的皂甙纯度很高，但溶剂和电能消耗大，皂甙得率不高。 (4) 大孔树脂法 用水或醇类提取皂甙去杂后，用少量水溶解粗皂甙，上大孔树脂柱，先用水冲洗柱子，乙醇洗脱，皂甙主要被60-80%乙醇洗脱出来，收集这部分的洗脱液，浓缩至干，得精制皂甙，淡黄色。大孔树脂对物质的吸附是以范德华力为主的，非极性分子形式的杂质容易被吸附，而且树脂内部具有很多大小适当的孔穴，在一定程度上可以依照分子量的大小进行分离。分离过程中，一些无机盐，低分子量的糖在大孔树脂中由于极性的原因不被吸附而容易被水洗脱。蛋白质、中分子量及大分子量的多糖类被低浓度的乙醇除去。通过大孔树脂后，已经得到纯度较高、质感较
HPLC法测定归芪补血口服液中黄芪甲苷的含量共5页文档
HPLC法测定归芪补血口服液中黄芪甲苷的含量1材料与仪器 试剂：95％乙醇；无水乙醇；氯仿；正丁醇；丙酮；无水乙醚；盐酸；碳酸钡；乙酸酐。上述所有的剂都是分析纯。仪器：UV-2401P紫外分光光度仪，TG328B光电分析天平；CKQ-250DE型数控超声波清洗器。Gilentlloo 高效液相色谱仪；HH-S2系列恒温水浴锅；FTIR一8400S型红外光谱仪；GSP-84-02型磁力恒温搅拌器，上述仪器都是由岛津公司生产。 2检测的方法与取得的结果 2.1对黄芪甲苷的提取归芪补血口服液50ml加入6倍体积量(V／V) 的60％乙醇，NaOH饱和溶液调节pH至12，温度：调节至60°，通过加热回流提取2次，最终得到提取液200ml，之后通过减压浓缩获取到浓缩液约100ml。通过重复的浓缩液萃取，最终得到黄芪甲苷粗品约25.0mg，通过HPLC检测纯度超过80％。之后再次进行反相硅胶C-18常压色谱柱分离，并通过60％甲醇洗脱，最终获得黄芪甲苷纯品约13.5mg，在实际的检测中HPLC检测纯度符合药典标准。详细的数据可以参照具体HPLC图与主峰含量，附件为图1与表1。经过扫描的结果显示，黄芪甲苷在325nm 处显示出的波长处吸收最强，这时其灵敏度较高。将峰面积积分值为纵坐标，而将对照品浓度为横坐标，以横纵坐标为标准，绘制标准曲线。得到回归方程：黄芪甲苷Y=13.614X-1.4897，r=0.9999。线性范围为10.2-102ug ／mL。 图1黄芪甲苷纯品HPLC色谱图 2.2相关样本的准备工作在检测中，把3份样品放置在20ml的容量瓶
中，这三份样品具有不同的生产日期，并且都经过了抽提，将提取液大约15ml浸泡，在室温条件下，放置大约4h，放置后通过超声提取30min，在进行了过滤后，将得到的滤液于物理蒸干溶剂，对过滤的残渣用6 mL甲醇一甲酸进行溶解，之后放置在固定容量为5ml的容器瓶中，将温度调至4°以下进行保存，等待检测。 2.3测量的精密度和测量准确度提取混合对照品溶液20 mL，对样品溶液进行HPLC检测，检测过程中连续进样6次，然后得到黄芪甲苷面积的相对标准偏差分别为0.59％，检测结果显示出该方法测量的精度十分准确。从已知精密度的黄芪甲苷样品中，取三份样品，通过样品来准备跟处理方法制备计算回收率，经过计算得知结果分别为95.9％、94.5％和95.0％，通过这组数据可以得知，这样的测量收率高。 2.4进行稳定性试验将3份样品通过制备方法制备溶液后，然后进行0h，1d，2d，3d时的进样测定，通过检测得到的结果显示，3份样品溶液在3d范围内，都能保证性质的基本稳定。 2.5对含量的测定分别通过精密的仪器西区3份黄芪甲苷样品的提取液20mL，然后进样，对测定的结果数据进行记录。 3讨论 本研究所测定的黄芪甲苷属于黄芪制剂当中的一种主要的活性成，它在临床上已经得到证实，具有抗炎降压的功效，也有镇痛镇静的功能。近年来，许多学者通过现代药理学发现，黄芪甲苷一方面可以改善及优化白细胞的变形能力，另一方面可以改善提高心肌收缩与舒张的功能，也可以提升胰岛素在机体中的分泌能力，及清除机体自由基等。目前黄芪制剂中
第八讲 皂苷分析
第八讲皂苷分析 一、结构与分析 ■结构与分类 ·皂苷的含义及分布★ ·皂苷的分类★★★ 皂苷根据水解后苷元的结构类型分为两大类 甾体皂苷三萜皂苷 ■皂甙元、糖、糖醛酸或有机酸 五环三萜
二、分布 ■甾体皂苷菝契，穿山龙，土茯苓，麦冬 ■三萜皂苷人参，三七，甘草，柴胡，黄芪，桔梗，地榆 三、性质 ■性状 ■溶解度 溶于水、醇，不溶于非极性有机溶剂 ■水解性 较其他苷难，可酸水解或酶水解 ■酸碱性 甾体皂甙呈中性 三萜皂甙显弱酸性 鉴别方法 ■泡沫反应 中性皂甙碱性条件下的泡沫较酸性条件稳定 酸性皂甙在酸碱性条件下无差异 ■溶血反应 ■沉淀反应 重金属 中性盐：硫酸铵、醋酸铅-----酸性皂甙 碱性盐：氢氧化钡、碱式醋酸铅-----中性皂甙 ■显色反应 硫酸、硝酸、醋酐--硫酸、醋酸--乙酰氯 色谱法 ■TLC 极性基团越多，展开剂极性越强 含量测定 ■比色法 ■紫外分光光度法 ■薄层色谱扫描法 ■高效液相色谱法 HPLC-ELSD法测定黄芪中黄芪甲苷的含量 1.药材来源：本品为豆科植物蒙古黄芪Astragalus membranaceus (Fisch.) Bge. var. mongholicus (Bge.) Hsiao或膜荚黄芪A. membranaceus (Fisch.) Bge.的干燥根。 2. 主要化学成分：含皂苷、黄酮及多糖成分等。皂苷类成分包括黄芪皂苷I~VIII及大豆皂苷I; 黄酮类成分有芒柄花素、毛蕊异黄酮及其苷类等。 ①色谱条件 ■岛津LC-10A高效液相色谱仪 ■Alltech ELSD 500蒸发激光散射检测器 ■色谱柱为大连依利特ODS柱(4.6mm×250mm)； ■流动相: 乙腈－水(36: 64)，流速为0.8ml/min, ■漂移管温度：100℃，氮气流速：2.74ml/min； ■进样量20μl。
黄芪皂苷iii结构式
黄芪皂苷iii结构式 黄芪皂苷III是一种常见的化合物，属于黄芪皂苷类物质。黄芪皂苷III的结构式如下： 黄芪皂苷III的化学式为C42H68O14，分子量为804.98 g/mol。它是一种三萜皂苷，主要存在于中药黄芪中。 黄芪皂苷III具有多种药理活性，被广泛应用于中医药领域。它具有抗炎、抗氧化、免疫调节等作用。黄芪皂苷III还具有保护肝脏、抗肿瘤、抗疲劳等功效。 黄芪皂苷III的药理活性主要通过多种途径发挥作用。首先，黄芪皂苷III可以抑制炎症反应，减轻炎症症状。其次，黄芪皂苷III 具有抗氧化作用，可以清除自由基，防止细胞损伤。此外，黄芪皂苷III还可以调节免疫系统功能，增强机体免疫力。最重要的是，黄芪皂苷III可以抑制肿瘤细胞的生长和扩散，对肿瘤具有一定的抑制作用。此外，黄芪皂苷III还可以提高机体的抗疲劳能力，减轻疲劳症状。 黄芪皂苷III的药效机制主要与其化学结构有关。黄芪皂苷III的结构中含有糖苷键和三萜骨架。糖苷键使得黄芪皂苷III具有良好的水溶性，易于被机体吸收。三萜骨架则是黄芪皂苷III发挥药理活性的关键部分，它与多种靶点相互作用，发挥不同的生物学效应。黄芪皂苷III作为一种天然产物，具有较好的安全性和耐受性。在
临床应用中，黄芪皂苷III可通过口服、注射等途径给药，常与其他药物联合应用，以增强疗效。 黄芪皂苷III是一种具有广泛药理活性的化合物，其结构式为C42H68O14。黄芪皂苷III在中药黄芪中含量丰富，具有抗炎、抗氧化、免疫调节、保护肝脏、抗肿瘤、抗疲劳等多种药理作用。黄芪皂苷III的药效机制与其化学结构密切相关。作为一种天然产物，黄芪皂苷III安全有效，临床应用广泛。黄芪皂苷III的研究对于深入了解其药理活性和开发相关药物具有重要意义。
黄芪皂苷的概念
黄芪皂苷的概念 黄芪皂苷是一种从黄芪中提取出来的有效成分，属于皂苷类化合物。黄芪，也称黄耆，是一种中药材，具有滋补气血、提高免疫力、抗疲劳等多种药理作用。黄芪皂苷作为黄芪的主要活性成分之一，具有广泛的药理活性和临床应用。下面将详细介绍黄芪皂苷的概念及其相关内容。 一、黄芪皂苷的来源和提取方法 黄芪皂苷主要存在于黄芪的根部，黄芪根部经过适当的处理和提取，可以得到富含黄芪皂苷的提取物。黄芪皂苷的提取方法主要有超声波提取、水提取、乙醇提取等。其中，乙醇提取法是目前应用最广泛的一种提取方法。 二、黄芪皂苷的化学成分 黄芪皂苷是一种含有糖苷结构的化合物，由两部分组成：一部分是糖苷部分，主要由葡萄糖、鼠李糖等单糖组成；另一部分是皂苷骨架，主要由甾体或三萜类物质组成。黄芪皂苷的结构因其所含的单糖和皂苷骨架的不同而有所差异，目前已经分离出的黄芪皂苷主要有黄芪皂苷A、黄芪皂苷B、黄芪皂苷C等多种类别。 三、黄芪皂苷的药理作用 1. 免疫调节作用：黄芪皂苷可以增强机体的免疫功能，促进淋巴细胞的增殖和活化，提高免疫球蛋白的合成，增强巨噬细胞的吞噬能力，从而增强机体的免疫力。 2. 抗疲劳作用：黄芪皂苷可以抑制乳酸的积累，改善乳酸代谢，提高机体的耐
力和抗疲劳能力。 3. 抗氧化作用：黄芪皂苷具有抗氧化作用，可以清除体内自由基，减少氧化应激，保护细胞免受氧化损伤。 4. 抗炎作用：黄芪皂苷可以抑制炎症反应，减轻炎症细胞的浸润和炎症因子的释放，对炎症性疾病具有一定的治疗作用。 5. 保护肝脏作用：黄芪皂苷可以抑制肝脏内氧化应激和自由基的生成，减少肝脏受损，促进肝细胞的修复和再生。 四、黄芪皂苷的临床应用 1. 提高免疫力：黄芪皂苷可以作为免疫调节剂，用于增强机体的免疫功能，预防和治疗免疫缺陷性疾病、反复感染等问题。 2. 抗疲劳和增加体力：黄芪皂苷可以作为补气药物应用于体力透支、疲劳群体，提高身体抗疲劳能力和耐力。 3. 抗氧化和延缓衰老：黄芪皂苷可以作为抗氧化剂应用于抗衰老和防治氧化应激相关疾病，如动脉粥样硬化、老年痴呆症等。 4. 辅助治疗炎症性疾病：黄芪皂苷可以作为辅助治疗药物应用于炎症性疾病，如风湿性关节炎、溃疡性结肠炎等。 5. 保护肝脏和治疗肝病：黄芪皂苷可以作为辅助治疗药物应用于肝病，如肝炎、肝硬化等。 五、黄芪皂苷的副作用和注意事项 黄芪皂苷属于中草药，一般情况下副作用较小，并且具有良好的安全性。使用过
黄芪化学成分
1 黄芪的化学成分 黄芪的化学成分众多, 主要含皂苷类、黄酮类、多糖类及氨基酸类等, 另外还含有蔗糖、黏液质、苦味素、胆碱、甜菜碱、叶酸等。屠鹏飞等[ 2]对黄芪进行了较系统的化学成分研究, 到目前为止已分离得到32种化合物, 鉴定了其中的14种化合物, 包括4种异黄酮[芒柄花素( X-64)、芒柄花素-7-O--D葡萄糖苷( K-12-1)、毛蕊异黄酮( X-100-21)和毛蕊异黄酮-7-O-?-D葡萄糖苷], 2种异黄烷[ ( 3R) -8, 2"-二羟基- 7, 4*-二甲氧基异黄烷( X-66)、2", 3" 4"-三甲氧基异黄烷-7-O-?-D-葡萄糖苷], 1种紫檀烷[ ( 6aR, 11aR) 9, 10- 二甲氧基紫檀烷-3-O-?-D-葡萄糖苷( X-186) ], 1种皂苷[黄芪甲苷( h-29) ], 6种其它类成分[ ?-谷甾醇( E-191)、5-甲基- 呋喃甲醛( X-30)、5?甲氧基?2?吡咯甲醛( X-67)、1, 3, 5-三烯-1, 6-己二醇( E-32-10-17)、2, 4-二烯- 己二酸( E-32-19-14)和尿嘧啶核苷( h-33-7) ]。其他化合物正在鉴定中。 图1 黄芪的HPLC-APCI-MS（A）和HPLC-DAD（B）色谱指纹图谱 Fig. 1 Chromatographic fingerprints of Astragali Radix by HPLC-APCI-MS (A) and by HPLC-DAD (B) 表1 黄芪HPLC-DAD-MS 指纹图谱中各色谱峰的保留时间、质谱和紫外光谱数据 峰号t/min λmax/nm 质谱(m/z) 化合物 1 17.336 258, 288 447, 285 calycosin-7-O-β-D-glycoside 2 20.730 280, 325 217 3 22.752 280, 325 224 4 26.642 280, 32 5 489, 285 5 30.390 250, 300 431, 269 ononin 6 34.898 248, 288 285 calycosin 7 40.733 230, 282 301 8 44.394 250, 300 269 formononetin 9 44.394 280 303 (3R)-7,2′-dihydroxy,4-dimethoxyisoflavone 10 53.372 230 295, 293, 348 11 55.662 –295, 227, 311 12 61.692 –245 13 62.250 –313, 295, 277 14 64.555 –279 15 65.001 –297, 279, 315 16 65.483 –279 17 65.884 –297, 279, 315 18 66.585 –437, 455, 419 astragaloside IV
黄芪显微鉴别和薄层色谱法鉴别
黄芪显微鉴别和薄层色谱法鉴别 一黄芪简介 黄芪作为常用的补气中药，其药材为豆科植物蒙古黄芪 Astragalus membranaceus （Fisch.）Bge. var. mongholicus （Bge.）Hsiao 或膜荚黄芪 Astragalus membranaceus （Fisch.）Bge.的干燥根。饮片加工方法，除去杂质，大小分开，洗净，润透，切厚片，干燥。晒干。功善补气固表，利尿托毒，排脓，敛疮生肌。用于气虚乏力，食少便溏，中气下陷，久泻脱肛，便血崩漏，表虚自汗，气虚水肿，痈疽难溃，久溃不敛，血虚痿黄，内热消渴；慢性肾炎蛋白尿，糖尿病。 二黄芪显微鉴别 粉末黄白色。纤维成束或散离，壁厚，表面有纵裂纹，初生壁常与次生壁分离，两端常断裂成须状，或较平截。具缘纹孔导管无色或橙黄色，具缘纹孔排列紧密。石细胞少见，类三角形、圆形、长圆形或形状不规则，壁较厚。薄壁细胞中含淀粉粒。木栓细胞表面观类多角形或类方形，垂周壁薄，有的细波状弯曲。 黄 芪 纤 维 束 黄 芪 木 栓 细 胞
黄芪导管 黄芪石细胞 黄芪淀粉粒
三薄层色谱法鉴别 取黄芪粉末2g，加甲醇20ml，加热回流1小时，滤过，滤液加于中性氧化铝柱（100〜120目，5g，内径为10〜15mm)上，用40 %甲醇100ml洗脱，收集洗脱液，蒸干，残渣加水30ml使溶解，用水饱和的正丁醇振摇提取2次，每次20ml，合并正丁醇液，用水洗涤2次，每次20ml，弃去水液，正丁醇液蒸干，残渣加甲醇0.5ml使溶解，作为供试品溶液。另取黄芪对照药材2g,同法制成对照药材溶液。再取黄芪甲苷对照品，加甲醇制成每lml含lmg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法(中国药典2015年版通则0502)试验，吸取上述三种溶液各2µl，分别点于同一硅胶G 薄层板上，以三氯甲烷-甲醇-水(13∶7∶2)的下层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10%硫酸乙醇溶液，在105℃加热至斑点显色清晰。供试品色谱中，在与对照药材色谱和对照品色谱相应的位置上，日光下显相同的棕褐色斑点；紫外光灯(365nm)下显相同的橙红色荧光斑点。 日光下紫外灯光365nm下
黄芪的化学成分
黄芪的化学成分 黄芪的化学成分 1.膜荚黄芪含黄酮、皂甙类成分。黄酮类成分如芒柄花黄素、3'-羟基芒柄花黄素（毛蕊异黄酮）及其葡萄糖甙、2'，3'-二羟基-7，4'-二甲氧基异黄酮、7，2'-二羟基-3'，4'-二甲氧基异黄烷及其葡萄糖甙、7，3'-二羟基-4'，5'-二甲氧基异黄烷、3-羟基-9，10-二甲氧基紫檀烷及其葡萄糖甙等。其中有些成分具较强的抗氧化活性。皂甙类成分有黄芪皂甙Ⅰ～Ⅷ及大豆皂甙Ⅰ；黄芪甲甙（即黄芪皂甙Ⅳ）与黄芪乙甙。[1] 2.蒙古黄芪含黄芪多糖。芒柄花黄素R=H7，3'-二羟基-4'，5'-二甲氧基异黄烷毛蕊异黄酮R=OH黄芪皂甙ⅧR=xyl （xyl=xylose，木糖；gal=galactose，半乳糖； glcA=glucuronicacid大皂甙甙ⅠR=galglcA=glucuronicacid 葡糖醛酸；rha=rhamnose，鼠李糖）。 黄芪的药理功用 黄芪具有补气固表，利尿托毒，排脓，敛疮生肌的功效。用于气虚乏力，食少便溏，中气下陷，久泻脱肛，便血崩漏，表虚自汗，痈疽难溃，久溃不敛，血虚萎黄，内热消渴。《本经》记载：“主痈疽，久败疮，排脓止痛。补虚，小儿百病。”《日华子本草》记载：“助气壮筋骨，长肉补血。” 增强非特异性免疫功能 黄芪能显著增加血液中的白细胞总数，促进中性粒细胞及巨噬细胞的吞噬功能和杀菌能力。黄芪水煎液小鼠灌胃给药能明显增强脾脏NK细胞的活性，这一过程与诱生干扰素同时发生。黄芪多糖也能刺激NK细胞的增殖，并使细胞体变大。黄芪对NK细胞活性的促进作用主要是通过诱导淋巴细胞产生7-干扰
素所介导的，黄芪对NK细胞活性的促进作用与其诱导的抗病毒活性相平行。黄芪在体外与小鼠脾脏细胞一起培养，也能诱生γ-干扰素。对大黄造成的脾虚小鼠黄芪水煎液和黄芪多糖，给药后，均能恢复其脾脏产生IL-2的能力。黄芪并能增强外周血淋巴细胞对IL-2的反应性，使外周血淋巴细胞受 IL-2刺激后其增殖指数增高。 增强特异性免疫功能 黄芪能明显增强细胞免疫，促进PHA、COnA、PWM（美洲商陆）引起的淋巴细胞转化。黄茂对6OCo一次性全身照射小鼠脾脏抗体生成细胞释放溶血素量、血清溶菌酶量，有增加作用。对迟发型超敏反应及红细胞C3b受体花环率、红细胞一免疫复合物的花环形成率，均有不同程度的促进或增强作用。 另外，虽然从黄芪中提取的黄芪多糖等成分具有明显的免疫增强作用，但免疫抑制作用较强的成分也是从黄芪中提取的。 增加红细胞数 黄芪多糖能升高正常大鼠红细胞的比容，增加红细胞数。对血虚证模型大鼠或小鼠，黄芪和黄芪多糖均能升高红细胞比容或血红蛋白含量医学教育网搜|索整理。黄芪还能防治因辐射而造成的小鼠外周血白细胞总数、骨髓有核细胞数的减少，可促进造血干细胞的分化和增殖。 对肝的作用 小鼠灌胃黄芪水煎液能明显促进3H-亮氨酸掺入小鼠血清和肝脏蛋白质的速率，而对蛋白质含量无影响，即可以显著促进血清和肝脏蛋白质的更新。可增加脾脏蛋白质合成，并使脾脏细胞增生，胞浆内含大量粗面内质网。黄芪对糖代谢呈双向调节作用，能显著降低葡萄糖负荷后小鼠的血糖水平，对抗肾上腺
黄芪成分、质量检测及现代药理研究进展
黄芪成分、质量检测及现代药理研究进展 黄芪味甘、性平，为常用传统中药，以根供药用，具有补气固表、利尿托毒、排脓、敛疮生肌等功能.现代研究发现，黄芪含有多种皂甙、黄酮、多糖，以及氨基酸、亚油酸、生物碱、胆碱等复杂的化学成分，黄芪多糖、皂甙、黄酮等化合物具有较强的生物活性，随着中药药理研究及应用的快速发展，黄芪的药理作用得到人们更多的认识，为了保证中药临床疗效、安全性与质量的稳定性，中药指纹图谱得到越来越广泛的应用，本文就黄芪的主要化学成分、质量检测手段、现代药理作用及临床应用研究做简要介绍. 标签：黄芪化学成分指纹图谱药理作用 黄芪，又称北芪、元芪或黄耆，豆科，多年生草本植物.黄芪的化学成分，已分离出的有黄芪多糖、黄芪皂苷、黄酮、多种氨基酸、微量元素、胡萝卜素、叶酸等，其中黄芪多糖、皂甙、黄酮等化合物具有较强的生物活性，有多种药理作用.但是中药材黄芪由于产地、采收季节和生长年限的不同而存在差异，这些差异使得不同来源的同种黄芪的化学组成也可能不同，这就必然影响到中医的临床疗效和中药的实验研究.因此能够全面反应中药所含化学种类和数 1 黄芪的化学成分 黄芪的化学成分主要有黄酮类、皂苷类和多糖类等[1]. 多糖类化合物有葡聚糖、杂多糖，葡聚糖有水溶性葡聚糖和水不溶性葡聚糖两类，黄酮类化合物有黄酮、异黄酮、异黄烷和紫檀烷四类，黄芪所含黄酮主要为黄酮类.皂苷类化合物有黄芪皂苷和大豆皂苷，目前从黄芪及其同属近缘植物中已分离出40多种皂甙.黄芪中所含的氨基酸类物质共25种.另外黄芪中还含有单糖、蛋白质、核黄素、叶酸，正十六醇等成分，以及钪，铬，钴，铜，硒，钼，铯，铁，锰，锌，铷等14种人体必需的微量元素. 2 构建中药黄芪指纹图谱的主要技术手段 由于中药的成分十分复杂，现阶段不能做到对每种药味和每种成分的逐一鉴定，因此，一种能够使中药的检出尽可能多地反映其全貌的方法-指纹图谱技术，已经越来越多地受到各国的重视. 目前中药指纹图谱的手段主要是色谱法和光谱法，这其中包括高效液相色谱法（HPLC）气相色谱法（GC），薄层色谱法（TLC），高效毛细管电泳技术（HPCE），紫外光谱法（UV）、红外光谱法（IR）：以及核磁共振法（NMR），X射线衍射法（XRD），高速逆流色谱法，DNA指纹图谱，联用指纹图谱等，以及圆二色指纹图谱及化学振荡指纹图谱等新发展的检测手段[2]. 近年来对黄芪药材指纹图谱的研究以色谱法为主，其中包括HPLC-UV，HPLC-ELSD，HPLC-MSD等方法.
高效液相色谱法分析和制备黄芪中的黄芪甲苷含量
高效液相色谱法分析和制备黄芪中的黄芪甲苷含量 张文敬;张倩;张涛;穆祥;胡格 【摘要】[目的]本试验利用高效液相色谱法分析和制备黄芪水煎液中的黄芪甲苷并通过质谱对收集到的组分进行鉴定.[方法]分析型色谱条件为色谱柱为EcliPseXDB-C18 (150 mm×4.6 mm,5 μm)柱,流动相为乙腈-水,梯度洗脱,柱温25℃,流速0.8 mL/min,检测波长254 nm,进样量20μL.制备型色谱条件为色谱柱为Hypersil C18(20 mm×300 mm,10μm)柱,流速10 mL/min,进样量2 mL,其他同分析型色谱.质谱分析法为电喷雾离子化(electrospray ionization,ESI)源,源电压3.5 kV,正、负离子检测,鞘气(N2)流速80a.u.,辅助气(N2)流速15 a.u.,碰撞气体为氦气,毛细管温度350℃,毛细管电压±5V.采用全离子扫描方式,扫描范围50～2 000 m/z.[结果]经分析型色谱得标准曲线回归方程为A=0.1717 C+0.4657,r=0.9996,在0.01～0.2 mg/mL范围内线性关系良好.制备型色谱方法得到的峰型较好,峰间隔适当,能 够将相邻组分分离.收集保留时间为26 min的组分,经分析型色谱和ESI-MSn鉴定该组分为黄芪皂甙Ⅳ (astragaloside Ⅳ),即黄芪甲苷,且纯度可达95％.[结论]该方 法精密度高、稳定性可靠、重现性好、加样回收率高,收集到的成分准确,纯度高,适用于黄芪中黄芪甲苷的分析和制备. 【期刊名称】《北京农学院学报》 【年(卷),期】2016(031)003 【总页数】6页(P80-85) 【关键词】黄芪;黄芪甲苷;高效液相色谱法 【作者】张文敬;张倩;张涛;穆祥;胡格
应用基于LC—TOF—MS分析的质量亏损过滤方法筛选黄芪注射液中的皂苷类成分
应用基于LC—TOF—MS分析的质量亏损过滤方法筛选黄芪注射液 中的皂苷类成分 采用液相色谱与四极杆飞行时间质谱（LC-TOF-MS）联用技术分析黄芪注射液（HI）样品，获取正负离子模式下HI中化学成分的LC-TOF-MS分析数据。根据前期相关文献报道，建立黄芪皂苷类化合物的质量亏损过滤（MDF）方法，用于系统筛选HI中所含有的皂苷类成分。每个筛选化合物的存在需由不少于2个准分子离子进行确认。最后依据其母离子和子离子信息对所筛选的化合物进行初步鉴定。最终共从HI中筛选并初步鉴定出62个皂苷类化合物，其中15个为新发现的皂苷类化合物。鉴定结果提示，乙酰化、氢化、去氢化、甲氧基化和水化可能为HI中皂苷所涉及的主要转化反应。该研究丰富了黄芪化学物质基础研究内容，同时也表明基于LC-TOF-MS分析的MDF方法，是一种可行且有效的中药成分系统筛选工具。 标签：黄芪注射液；黄芪皂苷；质量亏损过滤；LC-TOF-MS；转化反应 [Abstract] The samples of Huangqi injection （HI）were analyzed by liquid chromatography coupled with quadrupole time-of-flight mass spectrometry （LC-TOF-MS），and both positive and negative ion modes were employed to obtain the LC-TOF-MS analysis information of chemical compounds in HI. Then the mass defect filtering （MDF）approach，which was developed based on the previously published articles，was utilized to rapidly screen the astragalosides from the obtained LC-TOF-MS data. Each screened astragaloside was confirmed by the presence of no less than 2 quasi-molecular ions. All the screened astragalosides were then tentatively assigned according to the parent ion and daughter ion information. Finally，a total of 62 astragalosides were screened and characterized from the HI samples，including 15 new detected ones. The identification results indicated that acetylation，hydrogenation，dehydrogenation，methoxylation and hydration might be the major conversion reactions involved in the formation of the astragalosides. The LC-TOF-MS-based MDF approach was proved to be a feasible and efficient tool to screen the chemical constituents in complex matrices such as herbal medicines. [Key words] Huangqi injections；astragalosides；mass defect filter；LC-TOF-MS；conversion reactions. 明確中药中所含有的化学成分信息，是阐明中药的药效物质基础，评价中药质量和安全性的前提和基础。高效液相-飞行时间质谱（LC-TOF-MS）联用技术非常适用于中药化学成分定性分析，特别是非目标性系统性定性分析[1-2]。然而，由于中药成分复杂，其LC-TOF-MS分析数据信息异常丰富，如何对其快速有效解析，以准确全面地提取中药成分信息一直是研究者的一大挑战。近年来，质量亏损过滤（mass defect filtering，MDF）方法作为一种TOF-MS等高分辨质谱数