酸性染料比色法测定黄连中总生物碱的含量
酸性染料比色法测定黄连解毒汤中总生物碱的含量

( 江苏省 昆山市 中医医院 , 江苏 昆 山 2 1 5 3 0 0 )
摘要 : 目的 建 立黄连解毒汤 中总生物碱 的含量 测定方法 。方法
用正 交试验对反应条件进行 优选 。结果
采用 酸性 染料 比色法测定黄连解毒汤 中总生 物碱 含量 , 并 利
酸性 染料 比色 法显 色 的最 佳条 件 为 p H=3 . 2的柠檬 酸一柠 檬酸 纳缓 冲溶 液 1 0 . 0 该 方法简便 易行 , 灵敏 度高 , 具有 一定 的专属性 和
黄连解毒 汤原载于《 外 台秘要》 , 由黄连 、 黄芩 、 黄柏 和栀 子组成 , 为清热 解毒 的代 表方 , 也是 临床 上较 为 常用 的 基本 方。化学成分 与药理研 究表 明 , 生物碱 类成分 是其 有效 部位
之一 _ l 。本文 首次采用酸性 染料 比色法 剖, 以盐酸 小檗碱
Ke y wo r d s : a c i d d y e c o l o r i me t y; r Hu a n g l i a n J i e d u De c o c t i o n; t o t a l a l k lo a i d s ; b e r b e r i n e h y d r o c h ! o r i d e
t e n t s o f t o t l a a l k lo a i d s w e r e d e t e m i r n e d b y a c i d d y e c o l o r i me t r y . Re s u l t s Ac i d d y e c o l o r c o n d i t i o n s : w e r e a s f o l l o ws p H 3 . 2 c i t r a t e b u f f e r 1 0 . 0 mL, b r o mo c r e s o l p u r p l e l i q u i d 1 . 0 mL, c h l o r o f o m r e x t r a c t i o n t w i c e , 5 mL e a c h t i me , a n d t h e wa v e l e n g t h w a s s e t a t 4 0 5 a m. T h e l i n — e a r r a n g e o f b e r b e r i n e h y d r o c h l o r i d e w a s 0 . 0 2 2~0 . 1 1 1 g ・L一 1 ,T h e me a n r e c o v e r y w a s 1 0 1 . 1 7 %, a n d R S D w a s 1 . 9 1 %( n= 9 ) . C o n - c l u s i o n T h i s me t h o d i s s i mp l e , s e n s i t i v e a n d a c c u r a t e wi t h g o o d r e p r o d u c i b i l i t y .
黄连总生物碱的提取纯化及含量测定

黄连总生物碱的提取纯化及含量测定张中华;赵亚兰【摘要】目的:建立黄连醇提物、黄连总生物碱的提取纯化及含量测定.方法:黄连粗粉用22倍量70%乙醇提取,提取液回收乙醇,浓缩成干膏;取部分干膏用1 0倍量0.5%硫酸溶解、静置、过滤,酸水液加石灰乳调pH至10~ 12,过滤,滤液加浓HCL调pH为1~2,再加入药液量6%~ 10%的氯化钠盐析,放置,过滤,得沉淀A 与滤液A;将沉淀A溶于1 0倍量热水,加石灰乳调pH8.5 ~9,趁热过滤,再将滤液加HCL调至pH 2~3,放置,过滤,沉淀水洗至中性,抽干,将得到的总生物碱反复用热水溶解处理.将滤液A加氨水调至pH 8~9,放置,过滤,再将沉淀用乙醇重结晶,得小檗胺;用紫外分光光度法定总生物碱含量.结果:得黄连干膏,黄连总生物碱(纯度为92.84%) 15.8 9,小檗胺1.5g;盐酸小檗碱在浓度为0.579 μg/mL~8.682 μg/mL 范围内,线性方程为A=81.159C-0.02 2,r=0.999 9,浓度与吸光度呈现良好的线性关系.结论:制备黄连醇提物及黄连中总生物碱的方法简便易操作;盐酸小檗碱的含量测定方法稳定性好,精密度较高,重现性好,操作简便.【期刊名称】《西部中医药》【年(卷),期】2018(031)004【总页数】4页(P49-52)【关键词】黄连;总生物碱;提取纯化;紫外-可见分光光度法【作者】张中华;赵亚兰【作者单位】甘肃省中医院药学部,甘肃兰州730050;甘肃省中医院药学部,甘肃兰州730050【正文语种】中文【中图分类】R284黄连为毛茛科植物黄连(Coptis.chinensis Franch.)、三角叶黄连(Copfis.deltoidea C.Y.Chenget Hsiao)或云连(Coptis.teeta wall)的干燥根茎,作为中药始载于东汉《神农本草经》,被列为上品[1]。
其性寒味苦,可清热燥湿,泻火解毒。
黄连中生物碱的提取分离及检识

黄连中生物碱的提取分离及检识(杨翊涵中药学一班 1302010138)【摘要】黄连为多年生草本植物,是我国传统中药,在我国中西部地区分布广泛,具有清热燥湿,泻火解毒等功效,其根、茎味极苦,苦味源于所含的多种生物碱。
本文总结整理了黄连中小檗碱提取分离实验过程的步骤方法,注意事项,并且整理了黄连中生物碱的有效成分、存在形式,生物碱的溶解性规律,以及实验过程中各种提取液,添加试剂的目的、原理与效果。
【关键词】黄连生物碱小檗碱提取分离检识1.1黄连有效成分黄连为毛茛科黄连属植物黄连(coptis chinensis Eraneh)、三角叶黄连(coptis deltoidca C.Ycheng et Hsiao)或云连(coptiteetoidesC.Y.cheng)的干燥根茎。
黄连具有清热燥湿、清心除烦,泻火解毒的功效。
黄连的有效成分主要是生物碱,已分离出的主要生物碱有小檗碱(berberine)、掌叶防己碱(palmatine)、黄连碱(jatrorrhizine)等。
其中小檗碱含量最高,可达10%左右,是以盐酸盐的状态存在于黄连中。
小檗碱有很强的抗菌作用,已广泛地应用于临床,掌叶防己碱也作药用,其抗菌性能和小檗碱相似。
1.2小檗碱小檗碱为黄色针状结晶,mp为145℃,游离的小檗碱能缓缓溶于水(1:20)及乙醇中(1:100),易溶于热水及热醇,难溶于乙醚,石油醚、苯、三氯甲烷等有机溶剂,其盐在水中溶解度很小,尤其是盐酸盐。
盐酸盐为l:500,枸橼酸盐1:125,酸性硫酸盐1:100,硫酸盐l:30,但在热水中都比较容易溶解。
2.1实验原理生物碱是植物中含氮的碱性有机化合物,大都有明显的生理活性,是许多中草药中的有效成分。
它们是人类对植物研究得最早最多的一类有效成分,现已分离出有六千余种。
这些生物碱在植物体内一般均与有机酸或无机酸结合成盐而存在,只有弱碱性生物碱往往呈游离状态,还有一些是与糖结合成苷而存在。
酸性染料比色法测定延胡索中总生物碱的含量 (1)

酸性染料比色法测定延胡索中总生物碱的含量一、目的要求掌握酸性染料比色法测定延胡索中总生物碱含量的原理和方法。
二、基本原理在适当的介质中,生物碱(B )可与氢离子(H +)结合成阳离子(BH +),一些酸性染料,如溴百里酚蓝、溴酚蓝、溴甲酚紫或溴甲酚绿等,在此条件下可解离成阴离子(In -)。
上述阳离子与阴离子定量地结合成有色配位物(BH +In -)离子对,可以定量地溶于某些有机溶剂,在一定波长处测定该溶液有色离子对的吸光度,即可计算出生物碱含量。
++−→←+BH H B-++−→←In H HIn有机相水相)()(__In BH In BH In BH ⋅−→←⋅−→←+++-+三、实验方法对照品溶液的配制 取延胡索乙素对照品约2mg ,精密称定,置25ml 量瓶中,加三氯甲烷溶解并稀释至刻度,摇匀,即得。
供试品溶液的配制 取延胡索粉末约0.5g ,精密称定,置50ml 具塞锥形瓶中,加少量氨水湿润(约20滴),密塞放置15分钟,精密加乙醚-三氯甲烷-甲醇(25:8:2.5)混合溶剂25ml ,轻轻摇匀,称重,冷浸一周,称重,补足重量,滤过,精密吸取续滤液10ml ,置25ml 具塞锥形瓶中,水浴加热挥干溶剂,精密加入三氯甲烷10ml ,使完全溶解,摇匀,即得。
测定法 精密量取对照品溶液和供试品溶液1ml ,分别置分液漏斗中,各精密加三氯甲烷9ml ,再分别加溴甲酚绿溶液5ml ,振摇3分钟后,静置使分层;同法制备空白溶液。
分取上述三种溶液的三氯甲烷液,在410nm 的波长处测定吸光度,按下式计算,即得。
%100%)1(25(%)⨯-⨯⨯=水分含量样对对样W C A A式中 A 样与A 对分别为供试品溶液与对照品溶液吸光度;C 对为对照品溶液中延胡索浓度,g/ml ;W 样为取样量,g 。
四、思考题1.酸性染料比色法的影响因素有哪些?2.本法中使用的溶剂均有挥发性,操作中应注意哪些事项?。
酸性染料比色法测定千里光总生物碱含量

海科导超声仪器公 司)R 一0 0 ; E 30 旋转蒸发器( 上海 亚荣生化仪器厂 )F B 型万能粉碎机 ( ;Y 5 天津市泰
斯 特仪 器有 限责任 公 司 )L 4 2型离 心 机 ( 京 医 ;D — 北 用 离心 机厂 )p S 2C型数 字酸 度 计 ( ;H 一 5 梅特 勒 仪器 有 限公 司 ) 试剂 均为 分析 纯 。
[ src]O jcie T e r n ett l lis otn i Sncosad n u h一 m Meh d : s gteoy a iea Abtat bet : odt miet a a ao netn ee i cn esB c . v e h ol k d c Ha . to s U i xm tn s n h r
密 加 入 7 %乙 醇 1 L超 声 溶 解 千 里 光 总 碱 , 0 0m 冷
1 . 0
mL , 25 项 操作 “ ”
.
, 4 2l 在 2 m波 长 处测 定 吸光 度 , q _ 计
算 回收率 , 结果 见表 l 。
表 1 回收 率 实验结 果
却, 补重 , 作为千里光样品储备溶液。
21 加样 回收率 实验 精 密称 取适 量千里光药 . 1 材 , 9份 , 表 1 别 精 密 加 入 氧 化苦 参 碱 对 照 共 按 分
品溶液(. 5m /L , 01 g )每个梯度平行操作 3 , 3 m 份 按
“ 4 项方法制备样品储备液 , 2 ” 精密取上述溶液
.
取2 , 次 每次 1 , . h 过滤 , 5 合并提取液 , 回收乙醇 , 得 浸 膏。加 3 倍量 2 %盐酸至浸膏中, 超声溶解 , 加适 量石油醚分 2次进行脱脂 , 脱脂后 的酸水液加氨水 调 p =0 用氯仿萃取 2 , H 1, 次 合并氯仿液 , 加蒸馏水 洗涤氯仿液 , 回收氯仿得千里光总碱。精密称定 , 精
中药复方黄连丸中生物碱的含量测定方法及提取工艺研究

取10 mg的黄连提取物用甲醇溶解并定溶T 10 mL容量瓶中 得1 mg/mL黄连样品液,然后从中取出1 mL用甲醇定溶于10mL 的容量瓶t{1得0,1 mg/mL的黄连样品液。 2.3紫外吸收光谱与测定波长的选择 取盐酸小檗碱对照品溶液和黄连样品液分别在200 nm至600 nlTl处进行紫外光谱扫描,经过分析盐酸小檗碱和黄连样品都在 348 nm处有最大吸收峰,所以此处选为测定波长。
《
划 装 整
1仪器与试剂
UV757CRT紫外可见分光光度汁(卜.海精密仪器有限公司), ARl530电子天平(美国奥豪斯公司1。 盐酸小檗碱对照品f中国生物制品检定所)、黄连、地黄、甲 醇(分析纯)。
2实验方法与结果
2.1黄连的提取 称取黄连药材2.014 g加入20 mL水浸泡0.5 h,将浸泡过的 黄连放入烧瓶中分别沸水浴回流提取(1 h,0.5 h),过滤,合并两 次滤液,置蒸发皿r扣蒸干,得到黄连提取物。 2.2溶液的配制 2.2.1对照品溶液的配制 精密称取盐酸小檗碱溶液溶解于甲醇并用甲醇定浴于25
Materials Science,Beijing lnstitude ofTechnology,Zhuhai 519085,China)
Abstract:A new analytic method
average recovery rate to
to determine the content of alkaloids in Rhizoma coptidis by ultraviolet spectrophotometer was jntroduced in the Paper.The iS 99.69%.and the relative standard deviation iS 0.925%By the orthogonal test compound Coptis pill best extraction conditions for accession 12 times the amount ofwater extraction for 1 5 h,extracted twice;Conclusion:This method iS simple.rapid.accurate.can be directly measured without separation the
黄连中生物碱的提取分离及检识

黄连中生物碱的提取分离及检识标准化管理处编码[BBX968T-XBB8968-NNJ668-MM9N]黄连中生物碱的提取分离及检识(杨翊涵中药学一班 1302010138)【摘要】黄连为多年生草本植物,是我国传统中药,在我国中西部地区分布广泛,具有清热燥湿,泻火解毒等功效,其根、茎味极苦,苦味源于所含的多种生物碱。
本文总结整理了黄连中小檗碱提取分离实验过程的步骤方法,注意事项,并且整理了黄连中生物碱的有效成分、存在形式,生物碱的溶解性规律,以及实验过程中各种提取液,添加试剂的目的、原理与效果。
【关键词】黄连生物碱小檗碱提取分离检识1.1黄连有效成分黄连为毛茛科黄连属植物黄连(coptis chinensis Eraneh)、三角叶黄连(coptis deltoidca C.Ycheng et Hsiao)或云连(coptiteetoidesC.Y.cheng)的干燥根茎。
黄连具有清热燥湿、清心除烦,泻火解毒的功效。
黄连的有效成分主要是生物碱,已分离出的主要生物碱有小檗碱(berberine)、掌叶防己碱(palmatine)、黄连碱(jatrorrhizine)等。
其中小檗碱含量最高,可达10%左右,是以盐酸盐的状态存在于黄连中。
小檗碱有很强的抗菌作用,已广泛地应用于临床,掌叶防己碱也作药用,其抗菌性能和小檗碱相似。
1.2小檗碱小檗碱为黄色针状结晶,mp为145℃,游离的小檗碱能缓缓溶于水(1:20)及乙醇中(1:100),易溶于热水及热醇,难溶于乙醚,石油醚、苯、三氯甲烷等有机溶剂,其盐在水中溶解度很小,尤其是盐酸盐。
盐酸盐为l:500,枸橼酸盐1:125,酸性硫酸盐1:100,硫酸盐l:30,但在热水中都比较容易溶解。
2.1实验原理生物碱是植物中含氮的碱性有机化合物,大都有明显的生理活性,是许多中草药中的有效成分。
它们是人类对植物研究得最早最多的一类有效成分,现已分离出有六千余种。
这些生物碱在植物体内一般均与有机酸或无机酸结合成盐而存在,只有弱碱性生物碱往往呈游离状态,还有一些是与糖结合成苷而存在。
黄连不同炮制品中总生物碱含量的测定

黄连不同炮制品中总生物碱含量的测定作者:胡爽等来源:《安徽农业科学》2015年第10期摘要[目的]建立紫外-分光光度法测定黄连不同炮制品中总生物碱含量的方法。
[方法]采用60%乙醇加入10倍量,加热回流提取1 h,提取3次;使用U-3010型紫外-可见分光光度计;测定波长为345 nm。
[结果]总生物碱在不同黄连炮制品中含量不同。
[结论]该方法操作简单、重现性好、所测结果稳定,可用于黄连药材及不同炮制品的质量控制。
关键词紫外-分光光度法;黄连;炮制品;总生物碱;含量中图分类号S567.5+2文献标识码A文章编号0517-6611(2015)10-087-02黄连是临床广为使用的一味中药,其为毛茛科植物黄连、三角叶黄连或云连的干燥根茎,其味苦、性寒,归心、脾、大肠经,具有清热燥湿、泻火解毒等功用。
近年来,黄连炮制品种类较多,地理分布也较广泛,因此其药材质量不易控制。
该试验采用紫外-分光光度法,对黄连及炮制品药材中的总生物碱含量进行测定[1],对其质量监控具有重要意义。
1材料与方法1.1材料1.1.1仪器。
紫外-可见分光光度计(安捷伦U-3010型),HH-4数显恒温水浴锅(天津汇科仪器设备有限公司),AS3120A超声波清洗器(杭州汇尔仪器有限公司),AR2140电子分析天平(上海力衡仪器仪表有限公司)。
1.1.2试药。
黄连药材均由四川购进,小檗碱对照品由成都普思生物科技有限公司提供,甲醇、乙醇等均为分析醇。
1.1.3炮制品制备。
黄连炮制品均由黄连药材,参照《中药炮制学》[2]、《中华人民共和国药典》[3]、《中药炮制学辞典》[4]进行制备。
1.2方法1.2.1对照品溶液的制备。
精密称取盐酸小檗碱对照品4.001 mg,将其置于25 ml容量瓶,加入适量甲醇盐酸溶液(100∶1)[5],待溶解后稀释至刻度,摇匀,配制成浓度为0.160 1 mg/ml备用;精密吸取浓度为0.160 1 mg/ml的盐酸小檗碱对照品溶液1.05 ml至25 ml的容量瓶中,向其加入0.05 mol/L 的H2SO4溶液定容[6],制得对照品溶液,其浓度为0.006 73mg/ml。
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黄 连 为 毛 茛 科 植 物 黄 连 ( ot cies Cpi hnni s s Fac . 、 角 叶 黄 连 ( ot eo e . . hn rnh ) 三 Cpidl i aC Y C eg s td
e H i ) 云连 ( ot e l ) t so或 a Cpi t t Wa . 的干 燥 根茎 , se a 1 具
d tr n d a . 1 / . o c u i n h sa l h d meh d i s l hg l e s ie a c r t n e r d c b e w ih c n b s d ee mie s0 1 2 g g C n l so :T ee tb i e t o i e, ih y s n i v , c u a ea d rp o u i l , h c a e u e s s mp t frd tr n t n o e t tlak l is i o t hn n i. o e emiai ft oa lao d n C p i e i e ss o h s Ke r s Acd c d e c lrmer y wo d : i i y oo i t y;Co t h n n i ;t t l ao d p i c ie s s s oa ak li s l
12 试药 黄连药材购于四川雅安, . 盐酸小檗碱对 照品( 中国药 品生物制 品检定所 , 含量测定 用 , 批 号 :173200 ) 澳 甲酚绿 ( 海展 云 化工 有 限 10 1-028 , 上 公司) 枸橼酸 ( , 分析纯 , 上海化学试剂有限公司) ,
磷 酸氢 二钠 ( 分析 纯 , 广东 汕头 市 西 陇 化工 厂 ) 甲 , 醇( 色谱 纯 , 山东 禹王实 业 有 限公 司 ) 水 为蒸 馏 水 , ,
有限公 司) S B I循环水 式 多用 真空 泵 ( ,H —1 I 郑州 长 城 科 工 贸有 限公 司 ) 。
标更为合理。 目 前总生物碱的含量测定方法虽然较 多, 如高效液相色谱法、 紫外分光光度法 、 紫外薄层
层 析法 、 滴定法 、 量 法 和 酸性 染 料 比色法 等 , 是 重 但
试 品和对 照 品在 p 4 0的缓 冲溶 液 中吸 收度 最 大 , H.
21 试剂 .
p 40枸 橼 酸. 酸 氢 二钠 缓 冲 液 的 配 H. 磷
制: 枸橼 酸 2 1g加水 溶 解成 10 冰箱 保存 为 甲 0 0ml 液 ; 酸氢 二 钠 7 . 3 磷 1 6 g加 水 溶 解 成 1 0 l 乙 00m 为
碱( e e n ) 巴马 汀 ( a an ) 黄 连 碱 ( o一 br r e 、 bi pl t e 、 mi cp tie 、 in )表小 檗碱 (pbreie 和 药根 碱 (a ori s eiebr ) n jt r z r h. i ) 甲基 黄 连 碱 ( oei) 多 种 生 物 碱 , 有 n造成误差而导致重
现性 差 , 高效 液相 色 谱法 则 有 操 作 繁 琐 、 费 大 耗 等 不足 , 而本实 验 建立 的酸性 染 料 比色 法 测定 黄 连
基金项 目: 国家重点基础研究发展计划 (7 9 3计划 )基金资助项 目( 06 B 0 72 2 0 C 5 40 ) ¥ 通讯作 者: 刘红宁 , 教授 , 博士生 导师 。T l(7 1 7 18 7 E m i logig ao .oic e:0 9 ) 18 5 , — a : nnn @yhotn.n lh
抗菌 、 降血糖 、 抗肿 瘤 、 心 律失 常 、 抗 抗血 小板 聚集 等 活性 ]因此 以黄 连 总 生 物 碱 的含 量 作 为 药 用 指 ,
岛津公司)p S3 ,H 一C型 p H计 ( 上海虹益仪器仪表有 限公 司 )T 3 A十万 分之一 天 平 ( ,G 2 北京 赛 多利斯 仪 器 系统 有 限公 司 ) 旋转 蒸 发仪 ( 门精 艺兴 业科 技 , 厦
江 西 中 医 学 院 学 报 2 0年 8月 第 22卷 第 4期 1 0
J OURN AL OF fNG JA XIUNl RsTY oF T M2 1 12 o4 vE l C 00Vo.2 N .
4.1 ~ 1 68 76 6.
m l r = 0. 9 t e a e a e r c v r s 1 0. , 99 7,h v r g e o ey wa 0 1% , D 1 4% ,h oa l l is fo Co i hie i r RS .8 t e tt lakaod rm ptsc n nss we e
中总生 物碱 含量 的方 法 , 敏度 高 , 作 简 便 , 现 灵 操 重 性好 , 更适 合于 总生物 碱 的含量测 定 。
1 仪 器与试 药
有清热燥 湿 , 泻火 解 毒 的功 效 … , 主 要 含 有 小 檗 其
11 仪 器 .
u 25 V一50型紫外 可见分 光光 度计 ( 日本
・
3 ・ 2
徐 国良等 : 酸性染料 比色法测定黄连 中总生物碱的含量
氯仿 为分析 纯 , 乙醇为 9 % 。 5
2 方 法与结 果
5份 , 分别 加 入 p 3 64 04 4,. ,. 各 H . ,. ,. 4 8 5 2的枸 橼 酸 一 酸氢 二 钠 缓 冲液 至 2m , 加 入 p 3 6 4 0 磷 l再 H . ,. , 44,. ,. . I 852的枸橼 酸 - 酸氢 二钠 缓 冲液配制 的溴 4 磷 甲酚绿溶 液 15m , 余 按 照 22 3项 下测 定 方 法 . l其 .. 进 行 测定 , 在在 47n 1 m处测 定 吸收度 。实验表 明供