青麻叶大白菜核基因雄性不育性遗传模式的研究
胶州大白菜核基因雄性不育系转育研究
胶 州大 白菜核 基 因雄 性 不 育 系转 育研 究
吕艳 玲 ， 陶承 光 ， 王 鑫
（． 阳农 业 大 学 园 艺 学院， 阳 １（ ６ ；２辽 宁 省农 业 科 学 院， 阳 １｛ ６ ） １沈 沈 １ １１ ． ｉ ） 沈 １１ １ － ）
摘 要 ： 杂 交种 绿 星 ５ 以 ８的 不育 株 作 不育 源 ， 育 新 的 核 基 因 雄性 不 育 系 ， 解 决具 有 １０ 转 以 ０ ％不 育 株率 的 大 白菜 核 基 凶 型雄 性 不育
系转 育 难 的 问题 。 大 白菜 核 基 因 雄性 不 育 复等 位 基 因 遗 传假 说 为 依 据 ， 用常 规 有 性 杂交 、 交和 自交 等方 法 实 旌转 育 。 两代 以 采 回 经 回 交 ， 成 了含 有 待转 育 亲 本胶 白 ｌ 遗 传基 凶 的 雄性 不育 系 及 其相 应 的 甲型 “ Ｅ 系 ” 临 时保 持 系 。利 用 杂交 种绿 星 ５ 育 号 两 Ｊ 和 ｝ ８的不
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维普资讯
沈 阳农 业大学 学报 ，０ ８ ０ ，９４ ：０ — ０ ２ ０ — ８ ３ （１４ ０ ４ ３
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青麻叶大白菜遗传多样性研究与杂交种纯度分子鉴定的开题报告
青麻叶大白菜遗传多样性研究与杂交种纯度分子鉴定的开题报告一、选题背景青麻叶大白菜是蔬菜中的重要品种之一，具有较高的经济和营养价值。
在我国种植面积和产量均居于前列。
然而，由于长期的种植，青麻叶大白菜的遗传多样性逐渐降低，品种间的差异度越来越小，导致品种生长势下降、抗病能力降低，产量和质量逐渐下降。
同时，杂种优势逐渐显现，对于提高种植效益和质量具有重要意义。
但实际种植中，如何快速、准确地鉴别杂交种的纯度，成为了当前亟须解决的问题。
因此，本文立足于以上问题，探究青麻叶大白菜的遗传多样性状况以及杂交种纯度的分子鉴定方法。
二、研究内容与技术路线1.青麻叶大白菜遗传多样性状况研究（1）建立青麻叶大白菜遗传多样性研究的分析方法，选取主要的遗传标记进行分析。
（2）采集不同地域和不同品种的青麻叶大白菜样品，对其进行DNA 提取，并利用PCR扩增与分析选取标记。
（3）分析所选标记在不同品种之间和不同地域之间的多样性和差异性，评估青麻叶大白菜品种的遗传背景和多样性值。
（4）将所得数据进行多元分析，包括聚类分析、主成分分析和判别分析等，进一步评估不同品种的遗传距离和区别度。
2.杂交种纯度分子鉴定研究（1）建立杂交种纯度分子检测方法，选取与青麻叶大白菜亲缘关系较近的种或品种进行对照。
（2）采集不同品种的杂交种和亲本样品，对其进行DNA提取，并利用PCR扩增所选标记，采用聚合酶链反应技术分析。
（3）分析所选标记在杂交种和亲本之间的差异性和一致性，利用分子鉴定技术确定杂交种的纯度。
（4）根据所得数据进行可视化分析，包括聚类分析、主成分分析和热图绘制等，进一步评估杂交种和亲本之间的遗传距离和区别度。
三、研究意义及预期成果本文旨在深入了解青麻叶大白菜品种的遗传多样性状况，为品种保护和种质利用提供理论和数据支持。
同时，对于杂交种纯度分子鉴定的研究和方法，也具有重要的应用意义。
本文预期能够获得以下成果：（1）建立青麻叶大白菜遗传多样性研究和杂交种纯度分子检测方法，为种质资源的保护和利用提供技术支持。
大白菜_em_hau_em_胞质雄性不育系的鉴定及不育相关基因结构分析
园艺学报 2012，39（3）：469–476 http: // www. ahs. ac. cn Acta Horticulturae Sinica E-mail: yuanyixuebao@大白菜hau胞质雄性不育系的鉴定及不育相关基因结构分析施展，万正杰*，徐跃进，李雪红，邹瑞昌（华中农业大学园艺林学学院，华中农业大学园艺植物生物学教育部重点实验室，武汉 430070）摘 要：采用染色体压片法和形态观察法，对大白菜hau胞质雄性不育材料6w-9605A的2个遗传世代（F1和BC6）的染色体数和花器官进行鉴定。
结果表明：F1染色体数为28条；BC6染色体数为20条，与白菜的染色体数相同。
6w-9605A的花药呈三角形，干瘪无花粉，败育彻底。
利用芸薹属作物雄性不育基因线粒体保守序列设计3对引物，在6w-9605A中扩增出867 bp的片段。
基因预测显示，在线粒体基因atp6的下游产生1个新的开放阅读框为orf288，与目前报道的芸薹属作物细胞质雄性不育相关基因orf224、orf138等均不相同，这种新的基因结构特点极有可能就是大白菜hau胞质不育系6w-9605A产生不育的原因。
关键词：大白菜；雄性不育；hau胞质；不育基因中图分类号：S 634.1 文献标识码：A 文章编号：0513-353X（2012）03-0469-08 Characterization of the Chinese Cabbage hau Cytoplasmic Male-sterile Line and Sequence Analysis of the Fertility-related GeneSHI Zhan，WAN Zheng-jie*，XU Yue-jin，LI Xue-hong，and ZOU Rui-chang（College of Horticulture and Forestry，Huazhong Agricultural University，Education Ministry Key Laboratory of Horticultural Plant Biology，Huazhong Agricultural University，Wuhan 430070，China）Abstract：The male-sterility of the Chinese cabbage（Brassica campestris L. ssp. pekinensis）line 6w-9605A，a cytoplasmic male-sterile line，was studied in this research. Chromosome squashing revealed that the chromosome numbers in the F1 and BC6 of 6w-9605A were 28 and 20，respectively，and morphologic observation in the BC6 of 6w-9605A showed that the anthers of this line were degenerated and completely abortive. Further，primers were designed based on the conserved sequence of known cytoplasmic male sterility genes in the Brassica species，and a new open reading frame（ORF）of 867 base pairs was amplified from 6w-9605A. Sequence analysis showed that this ORF located downstream from the mitochondrial gene apt6 and was predicted as orf288. Sequence alignment demonstrated that the ORF is different from the sterile genes of pol CMS and ogu CMS，and it may cause the sterility of 6w-9605A.Key words：Chinese cabbage；male-sterility；hau cytoplasm male-sterile line；infertility genes收稿日期：2011–12–19；修回日期：2012–02–21基金项目：中央高校基本科研业务费专项资金项目（2009QC027）；湖北省自然科学基金项目（2010CBB01703）* 通信作者Author for correspondence（E-mail：wanzj@）致谢：本文得到华中农业大学植物科学学院李再云教授的修改，在此表示感谢。
白菜雄性不育相关新基因BcMF1的克隆和功能验证的开题报告
白菜雄性不育相关新基因BcMF1的克隆和功能验证的开题
报告
一、选题背景和意义
随着工业化进程的不断加速和城市化程度的提高，我国的农业生产面临越来越多的问题，其中包括耕地的减少、水资源的浪费和化肥农药的过度使用等，使得传统的
农业生产方式难以满足现代化的需求。
而作为经济作物中非常重要的一种蔬菜，白菜
的栽培也需要应用高科技手段来提高生产效率和品质，在此过程中，遴选和培育新品
种就显得尤为重要。
因此，对于白菜中的基因进行研究和探究，不仅能够对白菜的品
质和产量进行提高，还可以为其他经济作物的研究提供一定的参考。
二、研究内容
白菜中的雄性不育基因是我们研究重点，本次研究将克隆白菜中的BcMF1基因，对该基因进行功能验证，并探究该基因在雄性不育过程中的作用机理。
三、研究流程
1.设计引物，克隆BcMF1基因
2.构建表达载体，转化大肠杆菌
3.提取重组蛋白并进行纯化，体外酶活性测试
4.构建植物表达载体，转化白菜进行功能验证
5.通过基因组学和转录组学手段研究BcMF1基因在雄性不育中的作用机理
四、预期成果
1.成功克隆白菜雄性不育相关新基因BcMF1
2.对该基因在雄性不育过程中的作用机理进行探究，为白菜的遴选和培育提供参考依据。
大白菜细胞质雄性不育育性恢复基因的分子标记的开题报告
大白菜细胞质雄性不育育性恢复基因的分子标记的开题报告1. 研究背景和意义：大白菜是我国北方地区最常见的蔬菜之一，也是全球最重要的蔬菜作物之一。
然而，大白菜种植过程中往往会出现花粉不育或低育的现象，导致产量降低。
细胞质雄性不育（CMS）是其中一种造成花粉不育的原因，它是由于细胞质中大量存在的不育因子，与核基因不同，是以孟德尔遗传规律无法解释的方式遗传。
因此，研究CMS是解决花粉不育问题的重要方向之一。
近年来，研究表明，许多CMS植物中的育性恢复基因（Rf）可以通过基因克隆和分子标记技术进行鉴定和筛选，从而为育性恢复基因的遗传转化和利用提供了重要的理论依据。
因此，本研究旨在利用分子标记技术，鉴定大白菜中的Rf基因，探究CMS的遗传机理，并为解决大白菜生产中的花粉不育问题提供一定的理论基础和实践指导。
2. 研究内容：（1）大白菜中CMS材料的筛选和鉴定：通过观察花粉染色体行为和营养器官的发育情况，筛选出大白菜中的CMS材料，并进行鉴定。
（2）Rf基因分子标记的筛选：利用已报道的Rf基因序列信息和大白菜的基因组数据库，筛选适合大白菜的Rf基因分子标记和引物，进行PCR扩增和测序分析。
（3）Rf基因的克隆和功能鉴定：利用PCR扩增和测序结果进行Rf基因的克隆，建立Rf基因的表达载体，并进行功能鉴定实验，从而验证Rf基因在大白菜CMS育性恢复中的作用。
3. 研究方法：（1）大白菜材料的准备和筛选：从不同的大白菜品种中筛选出具有CMS特性的材料，并进行鉴定和筛选。
（2）分子标记的筛选和设计：利用已报道的Rf基因序列信息和大白菜的基因组数据库，筛选适合大白菜的Rf基因分子标记和引物。
（3）PCR扩增和测序分析：对PCR扩增的产物进行测序分析，得到Rf基因的序列信息和分子标记的特征。
（4）Rf基因的克隆和功能鉴定：利用PCR扩增和测序结果进行Rf 基因的克隆，建立Rf基因的表达载体，并进行功能鉴定实验，验证其在大白菜CMS育性恢复中的作用。
大白菜细胞质雄性不育的分子生物学研究
Ｄ ＮＡ 具有典 型 的天 然 Ｄ ＮＡ 分 子 的 标 准 紫外 吸收
光谱 特点 ， Ａ ／ Ⅲ在 １ ７ １ ９之 间 ， ／ 。 其 一 Ａ ．— ． Ａ 。Ａ ｓ 。 在 １ ８ ２ ０之 间 ， ＮＡ 产 量 为 ４ ０ ｇ ｇ叶 片 。且 ．～ ． Ｄ ０， ／ ￣
Ｃ ） ＭＳ 是作物 杂种优 势利 用的一 条 重要途径 。对 其
２ 大 白菜 Ｒ Ｐ Ａ Ｄ扩增体 系的优化 研究 以大 白菜青 麻 叶、 玉青 、 ４ １ ３ １ —７自交 系及 太 白 菜异 源胞质不 育 系 Ｃ ３ １ — ７为材 料 ， 用 Ｐ ＭＳ ４ １ 使 Ｅ 公 司生 产 的 Ｔ ｅｍａ Ｃ ｃ ｒ４ ０ ｈ ｒ ｌ ｙ ｌ ８ ０型 Ｐ Ｒ 仪 ， ｅ Ｃ 对影 响大 白菜 Ｒ Ｄ扩增 的因素进 行 了比较研究 ， ＡＰ 确定
机 制 的研 究不 仅具有 重要 的 理论 意 义 ， 且具 有 重 而 要 的应用价 值 对 太 白菜 而 言 ， 用 Ｃ 利 ＭＳ最 关 键 的环 节是 要育成 不育 系和其 相应 的保持 系。利用不 育 系 和其它材料 杂交 产生 Ｆ 代种 子 ｛ 不育系 和保 用
用该 法提取 的太 白菜 Ｄ ＮＡ 适于进行 Ｒ Ｐ Ａ Ｄ分析
持 系杂交来 繁殖 不 育系 ； 持 系 自交 繁 殖 种子 。但 保
采用 常规的方 法 来选 育不 育 系和 其 相 应 的保 持 系
周期 长 、 见效慢 ， 不能满 足生 产发展 的需 要 。现 代 远
生 物技 术 为创 造新 的 不 育系 和 保持 系 提 供 了便 利 。 本 论 文 对 大 白 菜 细 胞 质 雄 性 不 育 的 分 子 机 理 和 Ｒ Ｄ分 析的有关 问题 进行 了研究 。结论 如下 ： ＡＰ １ 大 白菜基 因组 Ｄ Ａ提取 方法的 比较研 究 Ｎ
大白菜细胞核基因互作雄性不育系选育繁殖制种技术[发明专利]
![大白菜细胞核基因互作雄性不育系选育繁殖制种技术[发明专利]](https://img.taocdn.com/s3/m/9034891604a1b0717ed5ddc4.png)
专利名称：大白菜细胞核基因互作雄性不育系选育繁殖制种技术
专利类型：发明专利
发明人：张书芳,宋兆华,赵雪云
申请号：CN89100421.1
申请日：19890127
公开号：CN1044380A
公开日：
19900808
专利内容由知识产权出版社提供
摘要：从大白菜“7501”自然群体中发现细胞核显性雄性不育基因Rf及其显性上位雄性可育基因Ms的互作遗传规律。
依据雄性不育两用系中可育株自交是否发生育性分离将雄性不育两用系区分
为“甲型”和“乙型”，育成了大白菜细胞核基因互作雄性不育系88A及其杂交种“F8801”。
88A 不育性稳定，不育株率达到100％，且经济性状好，结实力高、配合力强。
“F8801”品质好、抗病、高产，比省统一对照增产30.4％，在此基础上提出了大白菜细胞核基因互作雄性不育系的繁殖制种技术措施。
申请人：沈阳市农业科学研究所
地址：辽宁省沈阳市皇姑区黄河大街8段
国籍：CN
代理机构：农牧渔业部专利事务所
代理人：陈如明
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花心大白菜核基因雄性不育系的创制
Ｓ ｕ ｉ ｓ ｏ ｅ ｄ ｎ ｆ Ｇｅ ｅｉ ａ ｅ Ｓ ｅ ｉ ｎ ｎ ｔ ｄ ｅ ｎ Ｂｒ ｅ ｉ ｇ ｏ ｎ ｔ Ｍ ｌ ｔ ｒｌ Ｌｉ ｅ ｉ ｃ ｅ
１１ 材 料 ．
供 试 核不 育源 材料 为 白菜 核不 育 系 ０ ｓｌ ０ 转 育 目标 品 系为宫 古 花蕊 Ｙ ２ ６ｘ １ ； ０。
１２ 方 法 ．
试 验 于 ２ ０ ～ ０ ０年在 辽 宁 省十 字 花科 遗 传 育种 试 验 基地 进 行 。春 季 ２月 ［ 句播 种 ，八 盘 育 曲 ，经 约 ０６２ １ ｝ Ｉ
ＧＭＳ ，ｗｈ ｃ ｏ ｔ ｉ ｅ ｉ ｌｒ ｂ ｔ ｎｃ ｌｃ ａ ａ ｔｒ ｔ Ｙ０ ｎ ｈ ｓｅｉ ｔ ｒ ｑ ｅ ｃ ｎ ｔ ｒ ｉ ｅ ｒ ｅ ｗ ｒ ａｌ ０ ，， ｓ ４ ｉ ｈ ｃ ｎ ａｎ ｄ ｓｍｉ ｏ ａ ｉａ ｈ ｒ ｃｅ ｓ ｗｉ ａ ｈ ２ ａ ｄ ｔ ｅ ｔ ｒ ｉ ｆ ｕ ｎ ｙ ａ ｄ ｓｅ ｉ ｔ ｄ ｇ ｅ ｅ ｅ ｌ ０ ％ ｖ ｌｙ ｅ ｌｙ １ ｋ ａ
该 不育 系杂 交 ， Ｙ ２为轮 回亲 本连 续 回交 ， 终从 回交后 代 中选 育 新 的核 基 凶雄性 不 育系 、 以 ０ 最 甲型 两 Ｈ 系和 ｊ
临时保 持 系 ， 制 了不育 株 率和 不育 度均 为 １０ 创 ０ ％的宫 古花 蕊核 基 凶雄性 不育 系 Ｇ ＭＳ。
１ 材 料 与 方 法
沈 阳农 业 大学 学报 ，０ ｌ ０ ，２３ ：５ — ６ ２ １ 一 ６ ４ （）３ ８ ３ ０
Ｊ ｕ ｎ ｌ ｏ ｈ ｎ ａ ｇ Ａｇｉｕ ｕ ａ ｎ ｖ ｒｉ ２ ｌ ０ ４ （） ３ ８ ３ ０ ｏ ｒ ａ ｆ Ｓ ｅ ｙ ｎ ｒｃ ｈ ｒｌ Ｕ ｉｅ ｓ ｙ，０１ 一 ６， ２ ３ ： ５ — ６ ｔ