复合酶制剂对梅花鹿营养与增茸效果的试验研究

复合酶制剂对梅花鹿营养与增茸效果的试验研究
项目可行性报告
一、立项的背景和意义
梅花鹿属我国一类保护的特种经济动物，除具有较高的观赏价值外，还有极高的药用价值，是我国传统最重要的药用动物之一。

我国传统中医学认为鹿制品具有：“主阳萎、补虚、止腰疼、鼻衄、折伤、狂犬伤、和洒服治肺痿吐血、崩中带下。

诸气痛欲危者饮之立愈，大补虚损益精血，解痘毒、药毒”等功效。

现代医学临床研究表明鹿制品还具有治心悸、失眠、健忘、风湿和类风湿等功效[1]。

由于良好的药用价值，我国许多地区建立了梅花鹿养殖场，据调查全国31个省（区、市）有近万家大小不等的养殖场共圈养繁殖梅花鹿超过45万头。

圈养梅花鹿最多的省是吉林省，养殖场5985家，目前存栏量278000头，浙江省有养殖场118家，存栏量13994头[2]。

梅花鹿是草食反刍动物，农作物秸秆、红薯藤蔓、花生秧都是梅花鹿的食物；一般养殖场种植苜蓿、小麦草、天竺草、三叶草、狼尾草、苏丹草、爬拉草等牧草作为梅花鹿的粗饲料。

由于良好的应用效果，酶制剂作为一种新型饲料添加剂越来越受到人们的重视。

长期的研究和生产实践证明，在猪和家禽的日粮中添加酶制剂能够去除日粮中的抗营养因子，最大限度的提高营养物质的利用率和消化率，促进动物生长，防止疾病，并且能够补充猪和家禽内源酶的不足[3，4]；纤维素等酶制剂在奶牛、肉牛、羊等反刍动物中也有促进饲料利用率、促进生长的作用[5-7]。

本项目研究复合酶制剂及其对梅花鹿的营养以及增茸效果的影响，确定梅花鹿饲养复合酶制剂中酶的种类、配比，以提高梅花鹿的饲料利用率，促进其生长代谢以及鹿茸的生产，将极大地促进梅花鹿养殖业的发展。

二、国内外研究现状和发展趋势
我国对梅花鹿的利用和饲养历史悠久。

先秦时代，我国劳动人民就能利用猎捕到的鹿产品做药用。

最古老的药物学专著《神农本草经》和明朝李时珍所著《本草纲目》中对鹿茸都有详细地记载。

我国是世界上养鹿最早的国家，但真正以经济利用目的进行饲养始于清代，根据历史资料考察，1733年（雍正11年）吉林省就已开始养鹿。

我国大规模的驯养繁殖是
在1949年以后，主要是为了满足国内中医药和保健品生产的需要［8］。

酶制剂作为一种新型饲料添加剂的出现以及在饲料业中的应用所取得的显著效果，越来越受到人们的重视。

通过长期的研究和生产实践证明，在猪和家禽的日粮中添加酶制剂具有明显的效果，它能够去除日粮中的抗营养因子，最大限度的提高营养物质的利用率和消化率，促进动物生长，防止疾病，并且能够补充猪和家禽内源酶的不足［5,6］。

外源性酶制剂可在消化之前对饲料起作用或是通过增强养分在瘤胃或后段消化道的消化作用。

消化之前酶通过消化饲料结构性抗消化因子或将其以单糖的形式降解释放出来而起作用，结构性抗消化因子本身可以限制瘤胃微生物消化，在瘤胃中，外源性消化酶可能是直接对饲料起作用或可能间接地刺激瘤胃微生物的消化酶活而起作用。

外源性酶可能在后段消化道仍然保持酶活从而促进纤维在后段消化道的消化，或通过降低后段消化道食糜粘性来间接增加对养分的吸收［9］。

酶制剂作为饲料添加剂在奶牛、肉牛、羊等反刍动物中都具有良好的应用效果。

Hristov 等报道，在日粮中添加纤维素酶和木聚糖酶可提高可溶性糖的含量(P<0.05)和降低中性洗涤纤维的含量(P<0.05)，但对干物质消失率和瘤胃发酵影响较小，在此试验中还发现，日粮中直接添加酶要好于真胃灌注的效果，这也说明瘤胃微生物并不是影响酶应用效果的主要原因。

Yang等报道，在泌乳牛日粮中添加纤维素酶和木聚糖酶，不但提高了有机物质和中性洗涤纤维的消化率，而且微生物蛋白质的合成量也相应增加，添加酶提高了奶牛产奶量，产奶量的提高幅度与酶的添加量有关，泌乳奶牛日粮中分别添加酶制剂1 g/kg和2 g/kg，奶牛产奶量从23.7 kg/d分别增加到24.6 g/kg和25.6 kg/d，但对乳成分的影响较小。

Beauchemin等报道，用含有纤维素酶和木聚糖酶的饲粮饲喂奶牛，增加了奶牛整个消化道内营养物质和微生物氮的消化率，但对瘤胃内养分消化的影响较小。

奶牛瘤胃内并不能够产生足够的非淀粉多糖分解酶，加酶可改善反刍动物对纤维及其他养分的消化率，促进奶牛对日粮营养物质的利用，提高奶牛的生产性能。

在奶牛饲养中使用酶制剂能提高饲料干物质和纤维的消化率，如在基础日粮中添加0.104%格林酶或0.022%康能酶饲喂荷斯坦高产泌乳奶牛，均能显著提高奶牛产奶量(P<0.05)，提高幅度分别为7.0%和26.8%，平均产奶量分别增加了1.03 kg/d和3.97 kg/d［11-15］。

当在玉米芯、青贮玉米、青贮燕麦或苜蓿干草中加入淀粉酶、蛋白水解酶和纤维素酶后饲喂育肥牛时，牛的日增重、饲料利用率分别比对照组提高6.8%-24.0%和6.0%-21.2%。

在玉米和苜蓿干草中加入由4种酶和已烯雌酚组成的混合添加剂饲喂育肥牛，结果育肥牛的日增重比对照组提高14 0%。

以后的许多研究进一步肯定了外源酶的添加能够提高肉牛的平均
日增重和饲料转化率。

所有这些早期的试验研究给外源酶在牛日粮中的应用提供了许多有价值的依据［9］。

目前，国内外对酶制剂在家禽和猪饲料中应用研究已经相当深入和广泛，并已形成了猪和家禽的饲料酶制剂工业。

但就反刍动物而言，由于其消化道及其中的微生物组成的复杂性，使得酶制剂在反刍动物中的应用研究和开发还处于初步阶段，还需大量的试验研究来根据不同的日粮确定最适宜的酶及其添加量。

随着科学技术的发展，通过DNA重组技术可有效地提高外源酶的发酵水平、作用效果及开发新的酶制剂。

酶制剂在反刍动物中的应用将会更有效的提高饲料利用率及其生产性能，在反刍动物养殖业中的应用前景广阔。

主要参考文献
［1］雷乔波梅花鹿的养殖现状和发展前景经济动物学报，2007,11（1）：61-62
［2］梦梦，尹峰全国梅花鹿养殖状况调查野生动物杂志，2008，29（1）：47-49
［3］杨久仙，张金柱，郭保海，等复合酶制剂对蛋用种鸡产蛋、繁殖性能及消化率影响的研究中国畜牧兽医，2009，3（3）：32-36
［4］李祥，焦喜兰，李振田高纤维日粮添加复合酶制剂对猪消化率与生产性能的影响河南农业科学，2006，（9）：119-122
［5］何立荣，李爱华酶制剂在奶牛日粮中的研究与应用进展农业科学研究，2010，31（3）：59-64
［6］金加明，吴宝霞纤维素酶和酵母菌处理小麦秸秆喂育肥羊试验饲料研究，2007，（9）：45-46
［7］陈侠甫，裴相元，尹清强，等. 纤维素酶曲添加剂对鹿茸产盘及饲料消化率的影响. 兽医大学学报，1990,10（4）：382-386
［8］高秀华，杨福合梅花鹿营养研究进展草食家畜，1998，（1）：29-33
［9］张彦双，杨红建，张根军反刍动物饲用酶制剂研究与应用进展饲料广角，2004，（11）：22-25
［10］徐文杰，王利忠梅花鹿在南方的饲养技术研究浙江畜牧兽医，2005，（3）：40 ［11］Hristov AN, Mcallister TA. Intraruminal supplementation with increasing levels of exogenous polysaccharide - degrading enzymes: effects on nutrient digestion in cattle fed barley grain diets. Journal of Animal Science,2000,78:477-487.
［12］Yang WZ, Beauchemin KA. Effects of enzyme feed additives on extent of digestion
and milk production of lactating dairy cows. J Dairy Sci, 1999,82:391-403. ［13］Beauchemin KA, Yang WZ. Effecs of grain source and enzyme additive or grain source on site and extent of nutrient digestion in dairy cows. J Dairy Sci,1999,82:378-390.
［14］张建文,王国生,高占琪,等.复合酶对育肥羊饲料消化率的影响[J].甘肃农业大学学报,1998,33(4):366-369.
［15］李长慧,韩生明.两种酶制剂对泌乳奶牛生产性能的影响[J].黑龙江畜牧兽医,2006(3):27-28.
三、项目主要研究开发内容和技术关键
主要研究内容为：
1、青草、秸秆等粗饲料成分的研究
分析喂饲的青草、秸秆等粗料的纤维素、蛋白质、脂肪、矿物元素素等成分的含量，为复合酶制剂的配制提供基础。

2、复合酶制剂的配制与喂养试验
根据喂饲饲料（包括粗料和精料）的成分含量，将蛋白酶、葡聚糖酶、纤维素酶、木聚糖酶、植酸酶等按不同的酶活进行复配，制备梅花鹿饲养用复合酶制剂并进行喂养试验，测定采食量、消化情况、植酸磷残留情况、膘情、茸势、茸质、产茸量以及血液生化指标，并根据喂养试验确定复合酶制剂中不同酶种及含量的最佳组成。

技术关键：
1、根据喂养试验确定复合酶制剂中不同酶种及含量的最佳组成。

创新点：
本项目首次根据梅花鹿喂饲饲料的特点、成分以及梅花鹿的生长代谢与产茸情况，研制复合酶制剂，从而提高梅花鹿饲料利用率、改善营养并达到增茸的效果。

四、预期目标（主要技术经济指标、应用或产业化前景）
1、主要技术经济指标
（1）复合酶制剂达到以下指标： 酸性蛋白酶≥1000U/g 木聚糖酶≥15000 U/g β-葡聚糖酶≥5000 U/g 纤维素酶≥2500 U/g 植酸酶≥5000 U/g
（2）经济指标：项目实施期间，梅花鹿饲养规模达到800头，年产值150万元。

2、项目成果的应用或产业化前景
梅花鹿属我国特种经济动物，由于良好的药用价值，我国许多地区建立了梅花鹿养殖场，据调查全国31个省（区、市）有近万家大小不等的养殖场共圈养繁殖梅花鹿超过45万头。

圈养梅花鹿最多的省是吉林省，养殖场5985家，目前存栏量278000头，浙江省有养殖场118家，存栏量13994头。

酶制剂可有效地提高反刍动物对营养物质的利用率和消化率，促进动物生长，防止疾病，本项目根据梅花鹿饲料的特点，研究确定梅花鹿养殖用复合酶制剂，用于提高梅花鹿的饲料利用率，促进其生长代谢以及鹿茸的生产，将极大地促进梅花鹿养殖业的发展，应用前景广阔。

五、研究方案、技术路线、组织方式与课题分解
技术路线：
梅花鹿粗饲料
营养成分分析
确定复合酶组成与配比
喂养试验
复　配纤维素酶、木聚糖酶、蛋白酶、植酸酶等
饲料利生长状产茸情血液生
研究方案：
1、青草、秸秆等粗饲料成分的研究
对养殖场所栽培的牧草（苜蓿、小麦草等）以及周边的青草定期取样进行成分分析。

指标主要有：粗纤维、蛋白质、脂肪、矿物元素（Ca,Cu,Fe,Zn,P等）等。

测定方法：
（1）粗纤维：酸碱洗涤法；
（2）蛋白质：凯氏定氮法；
（3）脂肪：索氏抽提法；
（4）矿物元素（Ca,Cu,Fe,Zn,P等）：原子吸收分光光度法；
2、复合酶制剂的配制
根据喂饲饲料（包括粗料和精料）的成分含量，将蛋白酶、葡聚糖酶、纤维素酶、木聚糖酶、植酸酶等按不同的酶活进行复配，制备梅花鹿饲养用复合酶制剂。

3、喂养试验
将二至八锯龄产茸鹿随机分组，每10只为一组单独饲养。

试验期间严格记录饲料添加量、粪便排泄量、脱帽时间、茸势及产茸量，并分析粪便中粗纤维、蛋白、植酸磷等指标。

同时，定期采集梅花鹿的血液进行生化分析，测定的指标包括：血清总蛋白浓度（考马斯亮蓝比色法），血清白蛋白浓度（溴甲酚绿比色法），丙氨酸氨基转移酶、门冬氨酸氨基转移酶和磷酸肌酸酶（改良赖氏法测定）、超氧化物歧化酶（清除自由基法），血液氨基酸组成（HPLC 法）。

课题的分解与组织形式：
本项目为专业从事梅花鹿养殖加工的企业联合高等学校共同申请，企业方由总经理负责，承担牧草的采集、梅花鹿的饲养等方面的工作；学校方组织动物营养、酶工程、分析化学等专业的博士、教授承担牧草成分分析、复合酶配制、梅花鹿血液指标分析等相关研究工作。

具体地，拟将本项目分为“粗饲料营养成分分析”、“复合酶制剂的配制”、“复合酶制剂对梅花鹿营养与增茸效果的试验研究”等三个子项目开展研究，每个子项目设立负责人，配置专业人员开展研究，由专人负责，将研究工作层层落实，同时又相互协作，确定用于梅花鹿养殖的复合酶制剂及其组方。

六、计划进度安排
计划进度安排如下表所示。

起始年月任务要求
养殖场所栽培的牧草以及周边的青草定期取样进行纤维素、蛋白2011.03至2011.12
质、脂肪、矿物元素、维生素等成分的分析。

蛋白酶、葡聚糖酶、纤维素酶、木聚糖酶、葡聚糖酶等单酶的购2012.01至2012.03
买与复配。

复合酶制剂的喂养试验，包括饲料利用率、产茸量、梅花鹿血液2012.04至2013.06
生化指标的测定。

七、现有工作基础和条件
1、项目申请单位
2、项目合作单位
项目合作单位是浙江省及所在地政府重点建设大学，为理、工、文、经、管等多学科综
合性大学，近年来在各级主管部门的支持下，从国内外引进了一大批具有较高水平的博士、教授，同时从大型企业引进了一批工程、生产经验丰富的高级工程师，科技开发氛围浓郁。

本项目人员组成集合了大学的学科与人员优势，组成了由动物营养、酶工程、生物化学、微
生物学、发酵工程等多专业博士、教授参与的研究团队，进行复合酶制剂对梅花鹿营养与增
茸效果的试验研究，以提高饲料利用率，为本项目的顺利实施提供了技术支持。

八、经费预算（万元）
课目名称预算金额其中申请科技经费
设备费
材料费35 18 测试化验加工费10 5
燃料动力费10 0
差旅费 5 2
会议费0 0
人员劳务费12 4
专家咨询费0
合作、协作交流费0
出版、文献、信息传播、知
2 1
识产权事务费
管理费0 0
其他开支 6 0 总计80 30。