一种复合微生物酶制剂的配制
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申请号：201110173000.8申请日：2011-06-24
申请(专利权)人泸州品创科技有限公司
地址646000 四川省泸州市龙马潭区南光路9号泸州老窖广场泸州品创科技有限公司
发明(设计)人张宿义 方军 易彬 卢中明 敖宗华
主分类号C12G3/02(2006.01)I
分类号C12G3/02(2006.01)I C12R1/01(2006.01)NC12R1/865(2006.01)N
公开(公告)号102286322A
公开(公告)日2011-12-21
专利代理机构成都虹桥专利事务所 51124
代理人柯海军 武森涛(10)申请公布号 CN 102286322 A(43)申请公布日 2011.12.21
CN 102286322 A*CN102286322A*
(21)申请号 201110173000.8
(22)申请日 2011.06.24
C12G 3/02(2006.01)C12R 1/01(2006.01)C12R 1/865(2006.01)(71)申请人泸州品创科技有限公司地址646000 四川省泸州市龙马潭区南光路9号泸州老窖广场泸州品创科技有限公司
(72)发明人张宿义 方军 易彬 卢中明敖宗华
(74)专利代理机构成都虹桥专利事务所 51124代理人柯海军 武森涛
(54)发明名称复合微生物酶制剂及其制备方法(57)摘要本发明涉及复合微生物酶制剂及其制备方法，属于微生物领域。本发明所要解决的技术问题是提供一种生产复合微生物酶制剂的方法，该复合微生物酶制剂可以用于酒糟的发酵生香，从而提高生产的白酒品质。本发明生产复合微生物酶制剂的方法包括如下步骤：a、己酸菌液的制备；b、窖泥富集菌液的制备；c、窖泥功能菌的制备：己酸菌液与窖泥富集菌液混合，接种于窖泥功能菌培养基中，32～36℃下培养22～27d，得到窖泥功能菌液，干燥，得到干制窖泥功能菌；d、干制窖泥功能菌以菌干重计、生香酵母、B类酶促物质、红曲酯化酶按重量配比1∶0.25～0.35∶1～2∶0.30～0.45混合，得到复合微生物酶制剂。(51)Int.Cl.(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请
权利要求书 2 页 说明书 5 页CN 102286332 A1/2页
21.生产复合微生物酶制剂的方法，其特征在于包括如下步骤：
a、己酸菌液的制备：己酸菌菌种经过复壮、扩大培养，得到己酸菌液；
b、窖泥富集菌液的制备：取窖泥中的菌种进行培养，得到窖泥富集菌液；
c、窖泥功能菌的制备：己酸菌液与窖泥富集菌液混合，接种于窖泥功能菌培养基中，
32～36℃下培养22～27d，得到窖泥功能菌液，干燥，得到干制窖泥功能菌；
其中，己酸菌液与窖泥富集菌液中的菌种干重重量之比为1∶1～5；所述窖泥功能菌
培养基为：窖皮泥100～150重量份，糟醅700～800重量份，中温大曲100～200重量份，
乙醇7.2～13.8重量份，硫酸铵0.27～0.69重量份，培养基含水量为30～60wt％，pH4～
7；
d、干制窖泥功能菌以菌干重计、生香酵母、B类酶促物质、红曲酯化酶按重量配比
1∶0.25～0.35∶1～2∶0.30～0.45混合，得到复合微生物酶制剂；
其中，所述的红曲酯化酶由产酯红曲霉经发酵培养而制得；
所述的B类酶促物质采用下述方法制备而成：以浓香型白酒生产的丢糟为基质，加入
对丢糟质量5～15％的高温大曲，和丢糟质量5～15％的黄水过滤后所得的滤渣，发酵5～
15天，然后干燥、粉碎，制得水分≤15wt％的粗酶制剂。
2.根据权利要求1所述的生产复合微生物酶制剂的方法，其特征在于：a步骤中的己酸
菌菌种采用下述方法进行复壮、扩大培养：
将己酸菌菌种接入无菌水中，于经过75～85℃保温8～10min，然后接种于己酸菌种
子培养基中32～36℃下培养7～8d，再于己酸菌扩大培养基中30～35℃下扩大培养5～
7d；
其中，己酸菌种子培养基为：以蒸馏水1000mL计，乙酸钠0.5％，酵母膏0.1％，磷酸
氢二钾0.04％，硫酸铵0.05％，硫酸镁0.02％，碳酸钙1％，乙醇2％，121℃灭菌20min，
pH6.5～7；
己酸菌扩大培养基为：以蒸馏水1000mL计，硫酸铵0.04％，糟醅浸提液40％，乙酸钠
0.7％，碳酸钙0.8％，乙醇0.5％，121℃灭菌20min，pH6-6.5。
3.根据权利要求1或2所述的生产复合微生物酶制剂的方法，其特征在于：b步骤中窖
泥富集菌液采用下述方法制备得到：
以窖泥1g计，用无菌水稀释约100倍，于75～85℃回流热处理25～35min后，取10mL
窖泥菌液接种入1000mL窖泥富集液培养基中，32～37℃恒温培养3～5d，培养结束后选择
发酵旺盛的菌种作为原始菌种再进行扩大培养；
所述窖泥富集液培养基为：以蒸馏水1000mL计，葡萄糖3％，蛋白胨2％，牛肉膏
1.5％，磷酸氢二钾0.05％，碳酸钙2％，乙酸钠0.5％，121℃灭菌20min，pH6～6.5。
4.根据权利要求1～3任一项所述的生产复合微生物酶制剂的方法，其特征在于：c步
骤中的pH值采用黄水进行调节。
5.根据权利要求1～4任一项所述的生产复合微生物酶制剂的方法，其特征在于：c步
骤中，接种时，己酸菌液与窖泥富集菌液中的菌种总量为培养基质量的2～6％，己酸菌液
与窖泥富集菌液中的菌种干重重量之比为1∶3～4；所述窖泥功能菌培养基为：窖皮泥
120～130重量份，糟醅730～750重量份，中温大曲140～160重量份，乙醇9.9～11.44
重量份，硫酸铵0.396～0.52重量份，培养基含水量为40～50wt％，pH5～6
。权 利 要 求 书CN 102286322 ACN 102286332 A2/2页
36.根据权利要求1～5任一项所述的生产复合微生物酶制剂的方法，其特征在于：c步
骤所得窖泥功能菌液于40～60℃下干燥至含水量为5～25wt％，得到干制窖泥功能菌。
7.根据权利要求6所述的生产复合微生物酶制剂的方法，其特征在于：c步骤所得窖泥
功能菌液于45～50℃下干燥至含水量为10～15wt％。
8.根据权利要求1～7任一项所述的生产复合微生物酶制剂的方法，其特征在于：d步
骤中所述的干制窖泥功能菌以菌干重计、生香酵母、B类酶促物质、红曲酯化酶的重量配比
为1∶0.25～0.30∶1.5～1.7∶0.35～0.40。
9.由权利要求1～8
任一项的方法生产的复合微生物酶制剂。权 利 要 求 书CN 102286322 ACN 102286332 A1/5页
4复合微生物酶制剂及其制备方法
技术领域
[0001] 本发明涉及复合微生物酶制剂及其制备方法，属于微生物领域。
背景技术
[0002] 中国传统白酒以其独特的固态发酵工艺和产品风格，在世界六大蒸馏酒中占有重
要的地位。泸型酒作为浓香型白酒的代表在中国白酒市场中占有巨大的市场份额，成为中
国白酒中最有影响力的一个典范。
[0003] 浓香型曲酒独特的生产工艺特点是“泥窖固态发酵、续糟配料、混蒸混烧”。窖泥是
浓香型曲酒酿造的基础，其质量的优劣直接影响着浓香型白酒的质量。窖泥中微生物区系
极为复杂，栖息着大量的己酸菌、丁酸菌、乳酸菌等窖泥功能菌，对产生浓香型白酒的典型
风格起着十分重要的作用。在泥窖中栖息着大量微生物，这些微生物是在白酒生产过程中
收集、驯化而成，并形成了在泥窖环境下的微生物生态。这个微生物生态是动态平衡的，各
种微生物在这一生态中发挥着独特的作用，加速这个生态的形成和维持这个生态的稳定是
酿酒工作长期的任务。
[0004] 传统发酵技术和现在生物技术的结合使固态白酒的发酵得到了进一步的发展，但
在白酒生香发酵中依然有很多未能攻克的难题，如：在发酵后期酯化力下降，上层糟醅和窖
中间的糟醅由于长时间未与窖泥接触，糟醅发酵不充分、产酯率低等。
[0005] 针对上述问题，目前常用的解决办法有：
[0006] ①从工艺上改进，以延长发酵周期。一般采用翻沙和双轮底法，但翻沙工艺存在操
作复杂，窖池利用率低，母糟活力会因翻沙而受损失等问题。而双轮底法发酵周期很长。
[0007] ②回泥发酵或者夹层窖泥发酵法。其操作比较烦琐，回泥量不好控制，长时间使用
会导致泥浆渗入母糟中，使母糟板结对发酵和生香不利。
[0008] ③添加酯化酶促进产酯。此法在浓香型白酒生产中多应用于双轮底或翻沙的酯化
(因其酸高、乙醇高)或者窖外酯化生香。但是在发酵糟或灌窖中应用效果不明显(与对照
无甚差异)，具体原因可能是底物浓度初始不够，或受其他微生物的影响，或条件不适造成。
发明内容
[0009] 本发明所要解决的技术问题是提供一种生产复合微生物酶制剂的方法，该复合微
生物酶制剂可以用于酒糟的发酵生香，从而提高生产的白酒品质。
[0010] 本发明生产复合微生物酶制剂的方法包括如下步骤：
[0011] a、己酸菌液的制备：己酸菌菌种经过复壮、扩大培养，得到己酸菌液；
[0012] b、窖泥富集菌液的制备：取窖泥(年代越久的老窖中的窖泥中的有益菌种越丰
富，因此，优选10年以上的窖池的窖泥)中的菌种进行培养，得到窖泥富集菌液；
[0013] c、窖泥功能菌的制备：己酸菌液与窖泥富集菌液混合，接种(本发明中，均可以按
常规的菌种接种方法接种)于窖泥功能菌培养基中，32～36℃下培养22～27d，得到窖泥
功能菌液，干燥，得到干制窖泥功能菌
；说 明 书CN 102286322 ACN 102286332 A2/5页
5[0014] 其中，己酸菌液与窖泥富集菌液中的菌种干重重量之比为1∶1～5；所述窖泥
功能菌培养基为：窖皮泥(窖皮泥即封窖泥，是用于封窖的粘土)100～150重量份，糟
醅700～800重量份，中温大曲(在制曲过程中，最高品温控制在50～60℃而制成的大
曲)100～200重量份，乙醇7.2～13.8重量份，硫酸铵0.27～0.69重量份，培养基含水
量为30～60wt％，pH4～7；
[0015] d、干制窖泥功能菌以菌干重计、生香酵母(生香酵母又称产酯酵母，主要属于产
膜酵母和假丝酵母，大多为异型汉逊酵母及少数小圆型酵母属)、B类酶促物质、红曲酯化
酶按重量配比1∶0.25～0.35∶1～2∶0.30～0.45混合，得到复合微生物酶制剂；
[0016] 其中，所述的红曲酯化酶由产酯红曲霉(常规的产酯红曲霉或红曲酯化霉都适用
于本发明)经发酵培养而制得；
[0017] 所述的B类酶促物质采用下述方法制备而成：以浓香型白酒生产的丢糟为基质，
加入对丢糟质量5～15％的高温大曲(在制曲过程中，最高品温控制大于60℃而制成的大
曲即为高温大曲)，和丢糟质量5～15％的黄水(白酒发酵过程，逐渐渗于窖池底部的棕黄
色液体)过滤后所得的滤渣，发酵5～15天，然后干燥、粉碎，制得水分≤15wt％的粗酶制
剂。
[0018] 其中，上述a步骤中的己酸菌菌种可以采用常规方法进行复壮、扩大培养，优选采
用下述方法进行复壮、扩大培养：
[0019] 将己酸菌菌种接入无菌水中，于经过75～85℃保温8～10min，然后接种于己酸
菌种子培养基中32～36℃下培养7～8d(培养至菌种处于旺盛代谢期)，再于己酸菌扩大
培养基中30～35℃下扩大培养5～7d；
微生物酶制剂在农业生产中的应用
微生物酶制剂在农业生产中的应用
1. 引言
微生物酶制剂是由微生物发酵产生的酶制成的一种生物制剂，具有高效、环保、无毒性等优点。在农业生产中，微生物酶制剂的应用正在逐渐受到重视。本文将从不同方面介绍微生物酶制剂在农业生产中的应用。
2. 微生物酶制剂对土壤改良的作用
土壤是农业生产的重要基础，而微生物酶制剂可以通过改善土壤结构、提升土壤肥力等方式来促进农作物的生长和发育。首先，微生物酶制剂中的纤维素酶可以分解植物废弃物中的纤维素，促进植物废弃物的分解和土壤有机质的积累。其次，微生物酶制剂中的磷解酶可以分解土壤中的有机磷，转化为植物可吸收的无机磷，提高土壤中磷的利用率。此外，微生物酶制剂中的氮酶和硝化酶可以分解有机氮，使其转化为植物可吸收的无机氮，提高土壤中氮的利用效率。
3. 微生物酶制剂对农作物的营养吸收的影响
微生物酶制剂还可以通过促进农作物的根系发育和提高根系对养分的吸收能力来提高农作物的产量和品质。例如，微生物酶制剂中的植物生长激素可以刺激农作物的根系生长，增加根系与土壤的接触面积，提高根系对养分的吸收能力。此外，微生物酶制剂中的脲酶可以分解农作物体内的尿素，将其转化为植物可吸收的氨氮，提高氮的利用率。
4. 微生物酶制剂对农作物病虫害的控制
微生物酶制剂中的一些酶可以产生抗菌、抗虫的活性物质，从而对农作物病虫害的控制起到积极的作用。例如，微生物酶制剂中的淀粉酶可以分解昆虫体内的淀粉，干扰昆虫的正常生理功能，达到防治昆虫病虫害的效果。此外，微生物酶制剂中的蛋白酶可以分解昆虫体内的蛋白质，损害昆虫的组织器官，起到防治病虫害的作用。
5. 微生物酶制剂对农业废弃物的利用
农业生产中产生的废弃物对环境造成了严重的污染和浪费。而通过微生物酶制剂的应用，可以将农业废弃物转化为有机肥料或发酵床材料，从而实现农业资源的循环利用。例如，微生物酶制剂中的纤维素酶可以降解秸秆等植物废弃物，将其转化为有机肥料。此外，微生物酶制剂中的蛋白酶可以分解畜禽粪便中的蛋白质，将其转化为发酵床材料，用于菇类等农产品的生产。
酶工程实验指导
0
酶工程
实验指导
西南农业大学农学与生物科技学院
2009年3月
1 实验一 产蛋白酶菌株的分离
一、 实验目的
学习胞外生产微生物菌种的分离选择，熟悉分离菌种的基本操作。
二、 实验原理
工业上常用的生产酶的微生物有许多，重要的有枯草杆菌和真菌中的曲霉等等，它们都能产生耐热的芽孢或分生孢子，分离这类菌种时可采取先进行一定的热处理杀灭其它营养细胞，提高该菌株的相对数目。根据胞外酶能分泌到培养基的特点，采用一定的方法在培养基上形成单菌落分泌的酶形成的“水解透明圈”，可对产酶的微生物的产酶能力（活力）进行初步估计、分离高产酶的微生物。
三、试剂、仪器
高压灭菌锅，天平，无菌超净工作台，培养皿（8套/组）、试管（2支/组）、三角瓶、烧杯、酵母膏，蛋白胨，NaCl、琼脂粉，奶粉
三、 操作步骤
1、 带菌土壤的热处理 称取1g带菌土壤湿润后放入80℃烘箱处理30min。
2、 分离选择培养基的配制，各组按下列比例配制120ml培养基：
奶粉2g ， 自来水 50ml，装入50ml三角瓶
琼脂1.8g ， NaCl 0.5g，自来水70ml，装入100ml三角瓶
自来水50ml，装入50ml三角瓶
取50ml烧杯一个，放入5支带帽5ml离心管，灭菌备用。
分别封口，常规灭菌（121℃、20min）,灭菌后待冷却至不太烫手时混合上述液体，按无菌操作要领迅速倒平板8个，其中4个加有0.2ml不同稀释倍数（操作5）的样品液（菌悬液），迅速混合冷却形成平板，余4个平板冷却后用于涂布筛选。
3、 稀释制备菌液， 取5支灭菌带帽5ml离心管，各加入无菌水3.6ml备用；将热处理过的土壤放入无菌50ml烧杯中，加入无菌水10ml，搅拌后静置片刻，上层液体为微生物悬液，按下法稀释微生物悬液：
在第一支试管中加入0.4ml微生物悬液，混合均匀后再取0.4ml到第二支试管中混合，从第二支试管中再取0.4ml到第三支试管中，以此类推。
微生物酶制剂在污水处理中的应用研究
微生物酶制剂在污水处理中的应用研究
污水治理是一项重要的环保事业，在城市建设和发展中扮演着至关重要的角色。污水处理的核心任务是将废水中有害物质转化为对人类和环境无害的物质，包括有机物和无机物的去除、氮磷的脱除、重金属离子的去除等等。而微生物酶制剂在污水处理中可以发挥很大的作用。
一、微生物酶制剂的应用优势
微生物酶作为一种天然的生物催化剂，通过催化废水中大量的污染物质的降解，从而达到净化水质的目的。它的应用优势主要包括以下几个方面：
1. 高效性：微生物酶几乎可以在任何条件下执行化学反应，对废水中的有机物、氮磷等污染物具有高效反应能力，可以快速转化为有益的物质，从而达到净化水质的目的。
2. 低成本：微生物酶制剂的生产和使用成本相对较低，可以在不增加额外成本的情况下提升污水处理效能。
3. 无污染：微生物酶制剂是一种天然的环境友好型生物制剂，不会对环境产生污染，对人体也没有害处。可以通过生物降解的方式实现水质净化。
二、微生物酶制剂的应用领域 1. 生活污水处理：微生物酶制剂可以用于生活污水的处理，如厕所、厨房、洗衣房等，可以将其中的有机物质、氮磷等污染物质降解为可再利用的物质。
2. 工业废水处理：微生物酶制剂可以用于工业废水的处理，如印染、造纸、制药、制革等产业中的废水处理。通过微生物酶制剂的应用可以有效地将废水中的污染物质转化为有益物质，降低其对环境的危害。
3. 农村污水治理：微生物酶制剂可以用于农村污水的治理，如农田灌排、农户粪便等，可以有效地提高污水的净化效率。
三、微生物酶制剂的应用案例
1. 微生物酶制剂在生活污水处理中的应用案例：在江苏省南京市浦口区创新园区生活污水处理厂中，通过引进微生物酶制剂技术，将每吨污水的COD去除率提高了20%以上，水质有效提高。
2. 微生物酶制剂在工业废水处理中的应用案例：在某些造纸厂、印染厂使用微生物酶制剂技术处理废水后，其废水治理效果显著提高，COD和浊度去除率均达到90%以上，水质明显提高。
酶制剂在酱油生产中应用
酶制剂在酱油生产中的应用
摘要：酱油酿造中起主要作用的是各种酶。淀粉酶是时酿造酱油生产中淀粉质原料进行作用，形成酱油中还原糖，糊精等成分，增强酱油固型物以及提供酒精发酵、有机酸发酵的原料成分。蛋白酶是将大豆蛋白质水解成低分子蛋白胨、朊、多肽及氨基酸，使酱油含有多肽和氨基酸，成为营养丰富含有鲜味的调味品。纤维素酶是水解纤维素使之变成葡萄糖，同时纤维素酶具有对植物细胞壁的溶解破坏作用，使植物细胞中内含物得到充分利用。通过添加这几种酶，明显提高了原料利用率，改善了酱油风味。生物技术在酿造酱油生产中将得到大力的发展。
关键词：生物技术 酱油 酶制剂
1、传统酱油酿造工艺的改进方向
我国传统的酿造酱油是采用自然多菌株酵，各种粮食原料也以自然形态为底物，又经“酱”和“晒油”的长时问日晒处理，因此，有它的殊风味。所以，酿制酱油的天数过少，对产品质不一定有利，正如“催熟的瓜不甜”一样，值得们思考。
有观点认为：“现在的发酵工艺(技术)不是发酵工程，因为是自然底物，又是复合发酵，可变因素太多，无法建立数学模型。”而有的观点认为：“从酱油的液体构造变化来看，因长时间发酵，分子间的结合趋于紧密，分子热运动能量减少……。从酱油的化学变化来看，因长时问发酵，酱油中的多种成分发生了一定程度的变化……，使成品酱油达到新的平衡。”有的专家分析说：“世界传统发酵食品，总体工业化程度不高。”因此用短时间的酶法水解，而达到长时间发酵的效果在技术上必须要有新的突破。
酱油酿造采用现代工艺来达到传统晒油的风味，这个过程的实质，是既发扬了传统酱油生产工艺的特点，又克服了传统酱油生产工艺的不足，所以，要经过艰苦的努力进行研究。
对于酿造酱油来说，这个商品的属性，是开门七件事之一，普通百姓对它是“熟悉、习惯、信任的一个商品。同时它又是一个微利、廉价、实用的商品，价格不能高。所以，酱油酿造所用的酶制剂或固定化技术装备等成本不能高，不能和生物药品、生物制品相比，也不能和生物高档日用品相比。要从实际出发，使酱油酿造工业用得起，用得上，才能推动传统产品的生产规模化、现代化。
饲用酶制剂的酶活检测方法及评定
饲用酶制剂的酶活检测方法及评定
随着我国畜牧业的发展和生物工程技术的不断进步，酶制剂在饲料工业中的应用越来越多。由于酶制剂能够消除饲料中的某些抗营养因子的负面作用，提高饲料消化率，改善动物生产性能，降低生产成本，因此日益受到饲料界的重视。
但是，由于酶制剂来源比较复杂、分子结构不明确，分离提纯困难等多种原因，使这类产品有国家标准的不多，即使有国标也存在一些问题。给广大养殖用户和生产企业带来很大不便。本文简单介绍一下常用的酶活测定方法及测定过程的影响因素，仅供广大饲料工作者提供参考。
1 酶制剂的定义及分类
所谓的酶制剂就是通过产酶微生物发酵工程
或含酶的动、植物组织提取技术生产加工而成，具
有一种或多种底物清楚的酶催化活性，有助于改
善动物对饲料营养成分的消化、吸收等，并有功效
的生物学评定依据，符合安全性要求，作饲料添加
剂用的酶制剂产品（NY/T 722-2003）。工业上应用
的酶制剂大多为水解酶，按作用底物的不同，可分
为淀粉酶、蛋白酶、脂肪酶、植酸酶、木聚糖酶、果
胶酶、葡聚糖酶、纤维素酶等。按动物体内是否分
泌，分为消化酶和非消化酶两大类。消化酶指动物
自身能够分泌的淀粉酶、蛋白酶和脂肪酶等，在幼
龄动物或特殊生理阶段时，动物也存在消化酶分
泌不足需要外源供给的情况。非消化酶是指动物
自身不能够分泌或很少分泌，必须由外源供给的
酶，这类酶能消化动物自身不能消化的物质或降
解一些抗营养因子，主要有植酸酶、木聚糖酶、果
胶酶、葡聚糖酶、纤维素酶等。
2 常见的酶活测定方法
通常酶制剂活性的检测是采用实验室分析手
段来进行评价，它可以用来筛选优质酶制剂、确定
复合酶制剂的最佳组方及确定产品的最佳添加量
等，酶制剂实验室评价技术是目前饲料厂家应用
最为广泛的一种方法。其操作相对简单，检测所用
时间短，便于生产实践应用。酶活测定结果虽不能
完全反映酶的使用效果，但通过检测至少可以避
免使用劣质的酶制剂。我国饲料工业标准中已经
酶制剂的制备
酶制剂的制备
全文共四篇示例，供读者参考
第一篇示例：
酶制剂是一种应用于生物工程领域的重要生物催化剂，广泛应用于食品、医药、农业等领域。酶制剂的制备主要通过菌种培养、酶提取和纯化、酶活力测定等步骤完成。本文将详细介绍酶制剂的制备的各个环节及其相关技术。
一、菌种培养
1. 选择菌株：酶制剂的制备首先要选择适合生产目标酶的菌株。常见的菌种有大肠杆菌、酵母菌、真菌等。
2. 培养条件：菌种培养需要控制适当的温度、PH值、营养液成分等条件。常用的培养基有LB培养基、YP培养基等。
3. 菌种培养：将选定的菌株接种到含有适当培养基的培养皿中，进行静态或摇床培养，通过控制时间和条件，使菌株在培养基中生长繁殖。
二、酶提取和纯化
1. 酶提取：将培养好的菌株经过离心、过滤等方法将酶提取出来。不同的酶可采用不同的提取方法，如超声波法、冻融法、离心法等。 2. 酶纯化：提取出的酶一般含有其他杂质，需要经过一系列纯化步骤进行纯化。纯化的方法包括离子交换层析、凝胶渗透层析等。
三、酶活力测定
1. 酶活力测定：通过测定酶的活性来评估酶的品质。常用的测定方法有比色法、荧光法、密度法等。
2. 酶活性稳定性：除了测定酶的活性，还需要考虑酶的活性稳定性，即在不同温度、PH值下酶的活性是否保持稳定。
四、酶制剂配方设计
1. 酶活性强化：根据不同的应用需求，可以对酶进行改良，提高其催化性能和特异性。
2. 辅酶添加：在制备酶制剂的过程中，有时需要添加一些辅酶或辅因子来增强酶的活性。
五、酶制剂的应用
1. 食品工业：酶制剂广泛应用于食品加工领域，如发酵剂、酶改良剂等。
2. 医药工业：酶制剂可用于药物合成、酶促反应等，对于特定靶标的酶抑制具有重要意义。
3. 农业领域：酶制剂在农业生产中起着促进土壤改良、提高作物产量等作用。 酶制剂的制备是一个涉及多学科知识的复杂工程，需要科研人员在菌种培养、酶提取和纯化、酶活力测定等方面进行深入研究，以提高酶制剂的生产效率和品质。希望本文的介绍能对读者有所帮助，同时也能促进酶制剂的在生物工程领域的更广泛应用。
酶制剂生产工艺流程
酶制剂生产工艺流程
酶制剂是一种通过微生物发酵或经酶工程技术获得的含有活性酶的制剂，广泛应用于食品加工、制药、环保等领域。下面我将介绍一个典型的酶制剂生产工艺流程，该工艺流程包括酶源选择、发酵、提取和纯化四个主要步骤。
首先是酶源选择。酶制剂的酶源可以是微生物，如细菌、真菌或酵母，也可以是动物和植物。选择合适的酶源是生产成功的关键。根据所需的酶种类和活性，从自然环境或文库中获取酶源菌株，并进行筛选和鉴定。
接下来是发酵。选定的酶源菌株被接种到发酵培养基中，经过培养和发酵过程使其大量生长和产酶。发酵培养基的组成要根据酶源和酶的特性进行优化，包括碳源、氮源、无机盐和生长因子等。培养过程中需要控制好温度、pH值、氧气供应和搅拌速度等参数，以提高酶产量和酶活性。
然后是提取。发酵液中含有目标酶以及其他杂质。提取的目的是将酶从发酵液中分离出来。常用的提取方法有离心、超滤、沉淀和溶剂萃取等。提取过程中需要注意温度、pH值和浓度等因素的控制，以避免酶的失活或降解。
最后是纯化。经过提取的酶溶液中还含有一些杂质，如蛋白质、聚合物、有机物等。纯化的目的是去除这些杂质，以获得纯净、活性高的酶制剂。常用的纯化方法有凝胶过滤、离子交换、亲和层析和柱层析等。纯化过程中需要根据酶的性质选择适当的操作条件，如温度、pH值、流速和溶液浓度等。
整个酶制剂生产工艺流程需要严格控制各个步骤的条件和操作，以确保酶的活性和稳定性。在实际操作过程中还需要进行工艺优化和工艺监控，以提高酶的产量和质量，并保证产品的一致性和稳定性。
随着生物技术和酶工程的发展，酶制剂生产工艺也在不断创新，如采用基因重组技术获得高效表达的目标酶，或利用高通量筛选技术快速筛选酶源菌株。这些新技术的应用将进一步提高酶制剂的生产效率和酶的性能，推动酶制剂产业的发展。
饲料添加剂 复合酶制剂
ICS
福建科佳奇迈生物工程有限公司企业标准 Q/LYKJ
Q/LYKJ 001 —2009
代替Q/LYKJ 001-2005
饲料添加剂 复合酶制剂
2009-12-26发布 2009-12-29实施
福建科佳奇迈生物工程有限公司 发布 Q/LYKJ 001 -2009
I 前 言
本标准是对Q/LYKJ 001 -2005标准进行的修订；本标准与Q/LYKJ 001 -2005 相比变化如下：
——规范性引用文件增加引用GB/T 13082-1991、GB/T 17480 -2008、GB/T 18869 -2002、
JJF 1070 -2005、NY/T 722 -2003；
——规定了混合均匀度，其相应试验方法执行NY/T 722 -2003；
——卫生指标执行NY/T 722 -2003；
——净含量试验方法采用JJF 1070 -2005《定量包装商品的净含量计量检验规则》；
——采样、水分、砷、铅、沙门氏菌的试验方法采用最新国家标准；
——试验方法增加镉、大肠杆菌、黄曲霉毒素B1 的试验方法。
本标准的附录A、附录B、附录C、附录D是规范性附录。
本标准由福建科佳奇迈生物工程有限公司提出并批准。
本标准由福建科佳奇迈生物工程有限公司起草。
本标准主要起草人：谢小新、罗明、林耀江。
本标准首次发布日期：2005年8月28日，第一次修订日期：2009年12月26日。本标准自实施之日起代替Q/LYKJ 001 -2005。
Q/LYKJ 001 -2009
1 饲料添加剂 复合酶制剂
1 范围
本标准规定了饲料添加剂 复合酶制剂的要求、试验方法、检测规则、标志、标签、包装、运输、贮存和保质期。
本标准适用于本公司以小麦麸、大豆饼（粕）和有机盐等为主要原料，以黑曲霉作为产酶微生物，经一菌多酶发酵工艺生产的饲料添加剂 复合酶制剂。
2 规范性引用文件
下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注日期的引用文件，其随后所有的修改单（不包括勘误的内容）或修订版均不适用于本标准，然而，鼓励根据本标准达成协议的各方研究是否可使用这些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件，其最新版本适用于本标准。
微生物酶制剂生产流程
- 1 - 微生物酶制剂生产流程
中文：微生物酶制剂生产流程
一、 晶体育种和细胞培养：
1、 从有机物源（如蔗糖）中收集富含微生物细胞的高纯度晶体悬液；
2、 将悬液种类到培养皿中，并保持适宜的温度和湿度，以育种和培养微生物细胞；
3、 观察晶体生长、菌种育种、液体培养和固体培养；
4、 将晶体培养断裂并保存，用于生产。
二、 酶制剂的生产：
1、 在适宜的温度、湿度和氧气浓度下，在细胞培养液中加入氯化钠，改变液体环境条件，以较低的温度和pH值来代谢酶；
2、 将酶回收有结晶体的悬液，收集反应液以获取原细胞培养液；
3、 将原细胞培养液调整为适宜的pH，用离心机将其分离，以提取酶；
4、 将分离的酶结晶，收集结晶体，用离心机再次分离酶，以获得酶制剂；
5、 将酶制剂用水或溶液冲洗，以清除杂质，并使其达到最终生产标准。
三、 酶制剂制备前的检测：
1、 检查微生物细胞培养液的活力，并分析模拟培养液；
2、 检查原细胞培养液中微生物的浓度； - 2 - 3、 检查细胞悬液和酶的浓度，以确定育种过程中酶的生产效果。
四、 酶制剂的最终制备
1、 使用超过60℃的高温水和酶，使其稳定；
2、 按照规定的浓度将酶加入制备液，维持良好的稳定性；
3、 加入抗氧化剂，保证酶活性；
4、 按照不同的标准要求，将酶制剂装入容器；
5、 检查完成的酶制剂，确保纯度和活性，达到生产标准。
微生物制备复合酶制剂的研究进展
２００７年第７期 中国食物与营养 Ｆｏｏｄ ａｎｄ Ｎｕｔｒｉｔｉｏｎ ｉｎ Ｃｈｉｎａ
微生物制备复合酶制剂的研究进展
郭凤莲，陈存社
（北京工商大学化学与环境工程学院，北京 １ ０００３７）
摘要：从酶制剂的发展历史、微生物复合酶制剂的生产方式、影响因素和复合酶制剂最新的研究成果以及１ ６Ｓｔ
ＥＮＡ菌种鉴定技术在菌种筛选中的应用等几个方面做了综述，并提出了今后的发展方向，指明微生物制备复合酶制
剂有巨大的发展潜力。
关键词：复合酶；微生物发酵；研究进展；１ ６Ｓｔ ＲＮＡ
酶是一种具有催化活ｌ生的蛋白质，因此，酶具有催
化剂的特点，同时，酶具有蛋白质的属性。酶作为一种
食品添加剂具有很多优点： （１）酶催化的反应能够在
常温常压下进行，而且具有很高的效率和专一性，它不 会有任何有害残留物质； （２）其用量小，经济合算； （３）酶反应条件温和、易操作、能耗低，还可避免因
剧烈操作所造成营养成分的损失。因此，酶的应用正日 益受到人们的重视…。
酶的制备主要有２种方法，即直接提取法和微生物
发酵生产法。早期的酶制剂是以动植物作为原料，从中
作者简介：郭凤莲（１９７９～ ），女，内蒙人，在读硕士研究生，主要从事微生物发酵技术的研究。
的熟食间必须安装空调，室温保持在１８￣Ｃ以下；安装紫 录、ＣＣＰ监控记录等。 毒灯；有防蝇防尘防鼠设施；做到专人、专室、 ５ 小结
专用具。 ’一 ⑥回热：对隔夜、隔餐的卤菜要回锅重新加热。卤
肉加热中心温度关键限值应大于７０￣Ｃ。
４ ＨＡＣＣＰ的执行及监测记录
为保证ＨＡＣＣＰ计划的良好运行，应制定良好的操
作规范（ＧＭＰ）、卫生操作规程（ＳＳＯＰ）以及相应的 支持性文件。①建立监测系统：建立监测系统必须明确
监控人、监控检测内容、检测方法等，如用探针式温度
计测量卤菜内部温度，利用检测室检测蔬菜药物残留情
况。②建立纠偏措施：当ＣＣＰ偏离关键限值时，根据引 起偏离的原因采取不同的纠正措施，使ＣＣＰ重新在受控