细菌耐药监测方法和意义共68页
抗菌药物细菌耐药监测与预警制度
抗菌药物细菌耐药监测与预警制度抗菌药物细菌耐药监测与预警制度是维护公众健康的关键性工作之一、随着抗菌药物的广泛使用，细菌耐药现象逐渐显现，对人类的健康和治疗带来了极大的挑战。
为了及时掌握和预警细菌耐药情况，制定监测与预警制度显得尤为重要。
一、抗菌药物细菌耐药监测的目的和意义1.及时掌握细菌耐药情况：监测细菌耐药情况能够从根本上了解不同地区的细菌耐药现状，及时采取相应的预防和控制措施。
2.评估抗菌药物疗效：监测细菌耐药情况有助于评估不同抗生素的疗效，为合理使用抗菌药物提供依据。
3.指导临床诊治：了解不同细菌对不同抗生素的敏感性，可以指导临床医生选择合适的抗生素进行治疗，提高治疗效果。
4.提高公众健康意识：通过抗菌药物细菌耐药监测结果的公布，可以提高公众对细菌耐药问题的认识和预防意识，减少盲目使用抗生素的情况。
二、抗菌药物细菌耐药监测的内容和方法1.监测对象：包括不同类型的细菌，如革兰阳性菌、革兰阴性菌、厌氧菌以及真菌等。
2.监测指标：评估细菌对不同抗生素的敏感性，包括最小抑菌浓度（MIC）和耐药率等指标。
3.监测方法：采用标准化的实验方法，如药物敏感试验、双扩散试验等。
同时，也可以通过基因测序技术对细菌的耐药基因进行检测。
4.监测样本：可从临床患者的感染部位、医院环境中采集样本，并确保样本的代表性。
三、抗菌药物细菌耐药预警的意义和作用1.及时发现新的耐药问题：抗菌药物细菌耐药预警系统能够及时监测细菌耐药情况，并对新发现的耐药机制进行研究，及时发现新的耐药问题并做出预防和控制措施。
2.提高公众警戒意识：通过耐药预警结果的发布，可以提高公众对细菌耐药问题的关注和警惕，减少滥用抗生素的情况。
3.指导抗菌药物的合理使用：通过耐药预警结果的分析，可以指导医生对抗菌药物的合理使用，避免不必要的使用和滥用。
四、建立抗菌药物细菌耐药监测与预警制度的重要性1.提高公众健康水平：抗菌药物细菌耐药监测与预警制度的建立有助于及时掌握细菌耐药情况，减少细菌耐药带来的公共卫生问题，保障公众的健康。
细菌耐药性检测方法
细菌耐药性检测方法1、细菌耐药表型检测：判断细菌对抗菌药物的耐药性可根据NCCLS标准，通过测量纸片扩散法、肉汤稀释法和E试验的抑菌圈直径、MIC值和IC值获得。
也可通过以下方法进行检测：（1）耐药筛选试验：以单一药物的单一浓度检测细菌的耐药性被称为耐药筛选试验，临床上常用于筛选耐甲氧西林葡萄球菌、万古霉素中介的葡萄球菌、耐万古霉素肠球菌及氨基糖苷类高水平耐药的肠球菌等。
（2）折点敏感试验：仅用特定的抗菌药物浓度（敏感、中介或耐药折点MIC），而不使用测定MIC时所用的系列对倍稀释抗生素浓度测试细菌对抗菌药物的敏感性，称为折点敏感试验。
（3）双纸片协同试验：双纸片协同试验是主要用于筛选产超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）革兰阴性杆菌的纸片琼脂扩散试验。
若指示药敏纸片在朝向阿莫西林/克拉维酸方向有抑菌圈扩大现象（协同），说明测试菌产生超广谱β-内酰胺酶（4）药敏试验的仪器化和自动化：全自动细菌鉴定及药敏分析仪如：Vitek-2、BD-Pheonix、Microscan等运用折点敏感试验的原理可半定量测定抗菌药物的MIC值。
2．β-内酰胺酶检测：主要有碘淀粉测定法（iodometric test）和头孢硝噻吩纸片法（nitrocefin test）。
临床常用头孢硝噻吩纸片法，β-内酰胺酶试验可快速检测流感嗜血杆菌、淋病奈瑟菌、卡他莫拉菌和肠球菌对青霉素的耐药性。
如β-内酰胺酶阳性，表示上述细菌对青霉素、氨苄西林、阿莫西林耐药；表示葡萄球菌和肠球菌对青霉素（包括氨基、羧基和脲基青霉素）耐药。
3．耐药基因检测：临床可检测的耐药基因主要有：葡萄球菌与甲氧西林耐药有关的MecA 基因,大肠埃希菌与β-内酰胺类耐药有关的blaTEM、blaSHV、blaOXA基因，肠球菌与万古霉素耐药有关的vanA、vanB、vanC、vanD基因。
检测抗菌药物耐药基因的方法主要有：PCR扩增、PCR-RFLP分析、PCR-SSCP 分析、PCR-线性探针分析、生物芯片技术、自动DNA 测序4．特殊耐药菌检测（1）耐甲氧西林葡萄球菌检测：对 1цg苯唑西林纸片的抑菌圈直径≤10㎜，或其MIC≥4цg/ml的金黄色葡萄球菌和对1цg苯唑西林纸片的抑菌圈直径≤17㎜，或MIC≥0.5цg/ml 的凝固酶阴性葡萄球菌被称为耐甲氧西林葡萄球菌（MRS）。
《细菌耐药性监测》课件
本课件将介绍细菌耐药性及其监测。细菌耐药性是细菌对抗生素的耐药能力， 对公共卫生和临床治疗都具有重要影响。
细菌耐药性的定义
细菌耐药性是指细菌对抗生素或其他药物的抵抗力，使其在治疗时无法有效消除细菌感染。
细菌耐药性监测的重要性
公共卫生
监测细菌耐药性可以帮助制 定有效的公共卫生政策，预 防细菌感染的传播和扩散。
细菌耐药性监测的挑战和困境
新的耐药机制
细菌不断进化，产生新的耐药 机制，挑战现有的监测方法和 治疗策略。
数据收集和分析
大规模数据的收集和分析是一 项复杂的任务，需要跨学科的 合作和高效的数据管理。
多样性和流动性
细菌耐药性具有多样性和流动 性，跨越国界和领域，需要全 球合作应对。
细菌耐药性监测的未来发展方向
1
基因测序技术
Hale Waihona Puke 利用高通量基因测序技术，快速识别细菌耐药性基因，实现快速监测和定位。
2
大数据分析
应用人工智能和机器学习算法，对大规模的耐药性数据进行分析和预测，提高监 测效率。
3
新型抗生素研发
加强新型抗生素的研发和推广，应对不断变化的细菌耐药性。
细菌耐药性监测的应用和意义
指导治疗
根据细菌耐药性监测结果，指导临床医生选择最有效的抗生素治疗细菌感染。
临床治疗
监测细菌耐药性可以指导临 床医生选择合适的抗生素治 疗细菌感染，提高治疗效果。
药物开发
监测细菌耐药性可以为研发 新的抗生素和药物提供数据 支持，应对不断变化的细菌 耐药性。
常见的细菌耐药性监测方法
1 药敏试验
通过培养细菌和敏感试验 药物，确定细菌对抗生素 的敏感度和耐药性。
检验科细菌耐药性监测标准操作程序SOP文件
检验科细菌耐药性监测SOP文件一、耐甲氧西林葡萄球菌（Methicillin-Resistant Staphylococci,MRS）MRS是引起临床感染的常见病原菌，同时也是引起医院感染的重要病原菌之一，其耐药特点是耐受甲氧西林的同时，还对临床广泛应用的多种抗生素呈现多重耐药，因而该菌所致感染已成为临床治疗的一大难题。
（一）MRS测定方法1、纸片扩散法接种物：直接悬液法从非选择琼脂平皿上挑取少许单个菌落至无菌生理盐水调至浓度0.5 McFarland,具体操作同常规纸片法药敏试验。
苯唑西林纸片，1R g/片，检测MRS平板应置于35℃ （而不是37℃）孵育24h （而不是16〜18h）。
结果判断：金黄色葡萄球菌：S：三13mm；I：11〜12mm；R:W10mm。
凝固酶阴性葡萄球菌：S：三18mm；R W17mm。
对于苯唑西林纸片周围的抑菌圈内有任何小菌落或稀薄“菌膜”生长都应列为MRS。
2、琼脂筛选法：如果纸片试验结果中介时，可做琼脂筛选法，培养基为MH琼脂+6R g/ml苯唑西林+4%NaCl,调整菌液浓度0.5McFarland,于35℃孵育24h,凡有任何生长即使一个菌落均报MRS。
（二）MRS监测意义对于MRS,应报告对所有头抱菌素类和其他B -内酰胺酶类耐药，喹喏酮类药物，除氟哌酸外，环丙氟哌酸，氟嗪酸有较好抗菌活性（耐药率10〜23%之间），利福平敏感率在90%以上，未见耐万古霉素菌株，但已有万古霉素中介金黄色葡萄球菌。
二、高水平耐药的肠球菌（HLAR）及耐万古霉素的肠球菌（VRE）（一）药敏测定方法1、常规测定方法：采用K-B纸片扩散法，头抱菌素不用做（均为耐药），氨苄，庆大霉素，替考拉宁，万古霉素一定要做。
2、高水平氨基糖甙类耐药性测定：⑴高含量纸片扩散法：通常测定庆大霉素和链霉素的高度耐药性，具体操作如常规纸片法药敏试验。
药敏纸片：庆大霉素：120R g/片；链霉素300p g/片结果判断：R：W6mm；I：7~9mm；S：三10mm⑵含单一高浓度抗生素琼脂平皿法：稀释法：庆大霉素：R：三500R g/ml；链霉素：R：2000p g/ml3、万古霉素耐药性测定：纸片扩散法，具体操作如常规纸片法药敏试验，万古霉素纸片为：30p g/片，检测平皿置35℃24h （而不是16〜18h）,并注意抑菌圈内有无小菌落或薄膜生长。
加强细菌耐药性监测的紧迫性及意义
细菌耐药性监测的意义及紧迫性临床致病菌耐药性的普遍存在，以及耐药水平的越来越高，给健康系统带来了极大的危害。
在最近召开的第四届全国抗菌药物临床药理学术会议上，专家们均认为：细菌耐药问题巳成为人类所面临的公共卫生范畴，具有灾难性的难题。
由于滥用抗菌药物，更加速了细菌耐药基因蔓延的速度。
细菌耐药性的产生使人们不能得到有效的治疗，患病和发生流行病的时间延长，死亡的危险性增大，使其它人感染的危险性增加。
因对耐药菌治疗所需费用为敏感菌的100倍，从而使抗感染的治疗费用急剧增加，如美国为对付耐药菌所使用抗感染药物的费用每年增加100亿美元，同时为开发新抗菌药要耗费400亿美元，其中仅因耐金葡菌所致感染每年要多耗费1.22亿美元，院内感染每年要多耗费45亿美元。
更为严重的是，耐药性细菌所致的感染，导致较高的死亡率。
如在一项关于儿童肿瘤病人的研究中，由产ESBLs细菌所致的感染引起或直接导致了15%(2/13)的病人死亡。
在一次医院内爆发流行，在可提供治疗及愈后资料记录的病人中的初步死亡率达53%(23/43) 。
因此，控制细菌耐药性已是刻不容缓。
为了有效地预防和控制耐药细菌的出现和传播，想要通过不断地生产出新的抗生素来抑制细菌的耐药性是不现实的，多年来经历证明，抗生素新品种从研制到生产要投入大量人力物力，而且需要很长的时间周期，远远不及细菌对一种新投入使用抗菌药物产生耐药的时间。
细菌与抗生素之间就如同国际著名的专家Dr David Livermore所形容一样：这是一场“猫捉老鼠的比赛”，即为了克服耐药性抗生素结构连续被修饰，生产出新类型抗生素，但接着细菌反复适应，通过靶位修饰，产生β-内酰胺酶，不渗透性和溢出机制而发生耐药，要想通过不断地生产出新的抗生素来抑制细菌是不现实的。
有效地预防和控制耐药细菌的出现和传播，最重要的方法是对细菌进行耐药性监测，不断监测流行的菌株和他们的耐药方式。
这不仅是判断临床耐药感染严重性和决定医院抗生素使用政策的一个基本手段，也是国家数据资料的需要。
医院细菌耐药监测与预警制度
医院细菌耐药监测与预警制度随着医疗技术的不断发展，抗生素在治疗感染性疾病中发挥了巨大的作用。
然而，近年来，细菌耐药问题日益严重，已成为全球公共卫生领域面临的重大挑战。
为了有效应对细菌耐药问题，保障患者用药安全，提高医疗质量，医院应建立健全细菌耐药监测与预警制度。
一、细菌耐药监测的目的和意义细菌耐药监测是指对临床分离的细菌进行耐药性检测，了解细菌耐药现状、趋势及变迁规律，为临床合理使用抗生素提供科学依据。
细菌耐药监测具有重要意义：1. 促进抗生素的合理使用，降低耐药菌株的产生。
2. 提高临床治疗效果，降低患者治疗费用。
3. 预防感染传播，保障公共卫生安全。
4. 为国家细菌耐药管理政策制定提供数据支持。
二、细菌耐药监测与预警制度的主要内容1. 组织架构成立细菌耐药监测与预警组织，由医院领导、临床科室、微生物室等相关人员组成。
明确各成员职责，确保监测工作的顺利进行。
2. 监测范围与对象监测范围包括全院各临床科室，监测对象为临床分离的各类细菌。
3. 监测方法与流程（1）临床微生物室负责收集各科室送检的细菌标本，并进行细菌分离、鉴定。
（2）对分离出的细菌进行耐药性检测，包括纸片扩散法、微量稀释法等。
（3）将耐药性检测结果进行统计分析，定期发布细菌耐药监测报告。
4. 预警机制（1）设立细菌耐药预警指标，如耐药率、多重耐药率等。
（2）当细菌耐药率超过预警指标时，及时向临床科室发出预警通知。
（3）临床科室根据预警信息，调整抗生素使用策略，减少耐药菌株的产生。
5. 培训与宣传（1）组织细菌耐药监测相关培训，提高医务人员对细菌耐药的认识。
（2）开展细菌耐药宣传活动，提高患者及公众的抗菌意识。
6. 质量控制（1）建立细菌耐药监测质量控制体系，确保监测数据的准确性。
（2）定期对微生物室进行质控检查，确保实验方法、设备、试剂等符合要求。
三、细菌耐药监测与预警制度的实施与评价1. 制定详细的实施计划，明确监测周期、报告时间等。
细菌耐药的监测方法
细菌耐药的监测方法一、细菌耐药监测的方法定义 AST 是一个检测细菌耐药性的是一个检测细菌耐药性的体外抑菌试验（ART）AST目的：检出细菌对抗生素的耐药性，预测临床治疗结果。
AST:（1）手工试验 1.纸片扩散法(S,I,R)2.稀释法(MIC)3. E test(MIC)（2）自动仪器 Vitek，Microscan，Phoenix（3）分子试验 PCR直接检测mecA基因（4）酶试验 Nitrocefin、ESBL检测(一)常规药敏试验1.细菌耐药表型检测：判断细菌对抗菌药物的耐药性可根据NCCLS标准，通过测量纸片扩散法、肉汤稀释法和E试验的抑菌圈直径、MIC值和IC值获得。
也可通过以下方法进行检测：（1）耐药筛选试验：以单一药物的单一浓度检测细菌的耐药性被称为耐药筛选试验，临床上常用于筛选耐甲氧西林葡萄球菌、万古霉素中介的葡萄球菌、耐万古霉素肠球菌及氨基糖苷类高水平耐药的肠球菌等。
（2）折点敏感试验：仅用特定的抗菌药物浓度（敏感、中介或耐药折点MIC），而不使用测定MIC时所用的系列对倍稀释抗生素浓度测试细菌对抗菌药物的敏感性，称为折点敏感试验。
（3）双纸片协同试验：双纸片协同试验是主要用于筛选产超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）革兰阴性杆菌的纸片琼脂扩散试验。
若指示药敏纸片在朝向阿莫西林/克拉维酸方向有抑菌圈扩大现象（协同），说明测试菌产生超广谱β-内酰胺酶（4）药敏试验的仪器化和自动化：全自动细菌鉴定及药敏分析仪如：Vitek-2、BD-Pheonix、Microscan等运用折点敏感试验的原理可半定量测定抗菌药物的MIC值。
2．β-内酰胺酶检测：主要有碘淀粉测定法（iodometric test）和头孢硝噻吩纸片法（nitrocefin test）。
临床常用头孢硝噻吩纸片法，β-内酰胺酶试验可快速检测流感嗜血杆菌、淋病奈瑟菌、卡他莫拉菌和肠球菌对青霉素的耐药性。
如β-内酰胺酶阳性，表示上述细菌对青霉素、氨苄西林、阿莫西林耐药；表示葡萄球菌和肠球菌对青霉素（包括氨基、羧基和脲基青霉素）耐药。
(推荐)细菌耐药性检测方法
细菌耐药性检测方法1、细菌耐药表型检测：判断细菌对抗菌药物的耐药性可根据NCCLS标准，通过测量纸片扩散法、肉汤稀释法和E试验的抑菌圈直径、MIC值和IC值获得。
也可通过以下方法进行检测：（1）耐药筛选试验：以单一药物的单一浓度检测细菌的耐药性被称为耐药筛选试验，临床上常用于筛选耐甲氧西林葡萄球菌、万古霉素中介的葡萄球菌、耐万古霉素肠球菌及氨基糖苷类高水平耐药的肠球菌等。
（2）折点敏感试验：仅用特定的抗菌药物浓度（敏感、中介或耐药折点MIC），而不使用测定MIC时所用的系列对倍稀释抗生素浓度测试细菌对抗菌药物的敏感性，称为折点敏感试验。
（3）双纸片协同试验：双纸片协同试验是主要用于筛选产超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）革兰阴性杆菌的纸片琼脂扩散试验。
若指示药敏纸片在朝向阿莫西林/克拉维酸方向有抑菌圈扩大现象（协同），说明测试菌产生超广谱β-内酰胺酶（4）药敏试验的仪器化和自动化：全自动细菌鉴定及药敏分析仪如：Vitek-2、BD-Pheonix、Microscan等运用折点敏感试验的原理可半定量测定抗菌药物的MIC值。
2．β-内酰胺酶检测：主要有碘淀粉测定法（iodometric test）和头孢硝噻吩纸片法（nitrocefin test）。
临床常用头孢硝噻吩纸片法，β-内酰胺酶试验可快速检测流感嗜血杆菌、淋病奈瑟菌、卡他莫拉菌和肠球菌对青霉素的耐药性。
如β-内酰胺酶阳性，表示上述细菌对青霉素、氨苄西林、阿莫西林耐药；表示葡萄球菌和肠球菌对青霉素（包括氨基、羧基和脲基青霉素）耐药。
3．耐药基因检测：临床可检测的耐药基因主要有：葡萄球菌与甲氧西林耐药有关的MecA 基因,大肠埃希菌与β-内酰胺类耐药有关的blaTEM、blaSHV、blaOXA基因，肠球菌与万古霉素耐药有关的vanA、vanB、vanC、vanD基因。
检测抗菌药物耐药基因的方法主要有：PCR扩增、PCR-RFLP分析、PCR-SSCP 分析、PCR-线性探针分析、生物芯片技术、自动DNA 测序4．特殊耐药菌检测（1）耐甲氧西林葡萄球菌检测：对 1цg苯唑西林纸片的抑菌圈直径≤10㎜，或其MIC≥4цg/ml的金黄色葡萄球菌和对1цg苯唑西林纸片的抑菌圈直径≤17㎜，或MIC≥0.5цg/ml 的凝固酶阴性葡萄球菌被称为耐甲氧西林葡萄球菌（MRS）。