实验3-糖耐量
化物酶反应，造成结果假性偏低。
因红细胞的酵解将导致测定结果偏低，建议测
定样品以草酸钾-氟化钠做抗凝剂以抑制糖酵解。
严重黄疸、溶血及乳糜样血清应先制备无蛋白 血滤液，然后再进行测定。
OGTT临床意义
1.诊断妊娠期糖尿病（GDM）。 2.诊断糖耐量减退病 3.无法解释的肾病，视网膜病，随机血糖
以测得的血清葡萄糖浓度为纵座标，时间为横座标， 绘制成糖耐量曲线图。
口服葡萄糖耐量曲线
OGTT对DM相关状态的判定指标（静脉血糖mmo1/L）
相关状态 正常糖耐量 FPG 服糖后2h ＜6.1 ＜7.8 IFG 6.1~6.9 ＜7.8 IGT ＜7.0 7.8~11.0 DM ≥7.0 ≥11.1
计算:
血清葡萄糖（mmol/L）=（A测定/A标准）*C标准
单位换算：葡萄糖mmol/L * 18=葡萄糖 mg/dL
将各次血糖测定结果，与相应的时间绘制
成糖耐量曲线图，进行分析。
注意事项
加样准确，加样后立即摇匀。
反应结束，冷却至室温后及时比色。
实验前受试者应充分休息，避免体力活动，试验
中亦不能吸烟、喝咖啡，以免影响实验结果。
葡萄糖氧化酶对β -D葡萄糖高度特异，溶液中葡
萄糖约36%为α 型，64%为β 型。葡萄糖的完全氧 化需要α 型到β 型的变旋反应。新配制的葡萄糖标 准液主要是α 型，故需放置2h以上（最好过夜）， 待变旋平衡后方可应用。
注意事项
葡萄糖氧化酶法可以直接测定脑脊液葡萄糖含 量，但不能直接测定尿液葡萄糖含量。因为尿 液中尿酸等干扰性物质浓度过高，可干扰过氧
<7.8mmol/L.
4.人群筛查.
OGTT是一种负荷试验，在明确诊断后不易再用。
实验仪器及试剂
小试管 7支 5.0ml吸管 1支 加样器 1支 722分光光度计
实验操作步骤
空白管 （ B） 标准管 （S） 测定管 （T0） 测定管 （T1） 测定管 （T2） 测定管 （T3） 测定管 （T4）
血清 （ml）
葡萄糖 标准液 （ml） 蒸馏水 （ml） 工作试 剂（ml）
——
——
——
0.020
0.020
——
0.020
——
0.020
——
0.020
——
0.020
——
0.020 2.50
—— 2.50
—— 2.50
—— 2.50
—— 2.50
—— 2.50
—— 2.50
混匀，置37℃水浴中，保温20min，在波长500nm处比色，以空白管调零，读 取标准管及测定管吸光度。然后分别计算出葡萄糖浓度C0、C1、C2、C3、C4
其它己糖转变
ห้องสมุดไป่ตู้
.口服葡萄糖耐量试验
• OGTT是口服一定量葡萄糖后，作系列血浆葡萄 糖测定，以评价机体对血糖调节能力的标准方法。 • WHO推荐法，葡萄糖75g，对于小孩，按1.75g/kg 体重计，总量不超75g。清晨空腹坐位取血后，用 水250~300ml溶解5min内饮完，之后30min取血1 次，共4次，历时2h。 • 临床上常用的方法是清晨空腹抽血后，开始饮葡 萄糖水后30min、60min、120min和180min分别测 定静脉血浆葡萄糖。
实 验 目 的
1.掌握血糖测定原理 2.掌握OGTT的测定方法及 临床应用 3.熟悉OGTT曲线绘制、 分析及临床意义
血糖的代谢途径
来源
食物中糖消化吸收 肝糖原分解
血糖3.9-6.1mmol/L
去路
彻底氧化分解 合成肝、肌糖原 合成脂肪、氨基酸 转变为其它糖及衍生物 超过肾糖阈（尿糖）
非糖物质异生作用
动物糖耐量实验实验报告
动物糖耐量实验实验报告本实验旨在研究不同动物对糖耐量的差异，并分析其可能的原因。
实验器材：1. 实验动物：小鼠、大鼠、猫、狗；2. 玻璃器皿：用于饲养动物和实验过程中的操作；3. 糖水：用于实验过程中的给药。
实验步骤：1. 将实验动物随机分为四组，每组10只。
分别装入玻璃器皿中，饲养一周，以适应新环境；2. 在实验开始前，将每只动物进行空腹检测，测量其血糖水平，并记录；3. 给每组动物分别饮用一定浓度的糖水，一小时后，再次测量其血糖水平，并记录；4. 根据实验结果，分析不同动物对糖耐量的差异，并进一步分析可能的原因；5. 记录实验数据，并统计分析。
实验结果：实验结果表明，不同动物对糖耐量存在明显差异。
小鼠在饮用糖水后，血糖水平上升较缓慢，且在一小时后恢复正常；大鼠与小鼠类似，但血糖水平上升速度稍快；猫的血糖水平上升速度较快，且在一小时后仍保持较高水平；而狗的血糖水平则极快上升，且在一小时后仍处于相对较高的水平。
分析与讨论：1. 动物的体质差异：不同动物的体质差异可能是导致糖耐量差异的一个重要原因。
小鼠和大鼠在体型上较小，并且具有较高的新陈代谢速率，因此比猫和狗更容易转化和消耗糖分。
猫由于体型大且较为静态，新陈代谢速度较慢，导致血糖水平上升速度较快。
狗则是运动量大的动物，消耗能量较多，对糖分的转化速度更快，导致血糖水平极快上升。
2. 食性差异：动物的饮食习惯也可能影响其对糖的耐量。
小鼠和大鼠是杂食动物，平时的饮食中包含的糖分较少，因此对糖的耐量较高；猫是肉食性动物，主要通过摄取肉类蛋白质来满足能量需求，对糖的转化能力较弱；狗则是杂食性动物，食物中的糖分含量较高，因此对糖的转化速度更快。
3. 基因差异：动物的基因差异也可能影响其对糖的耐量。
各种动物具有不同的基因组，其中某些基因可能与糖的代谢和转化有关。
这些基因的差异可能导致不同动物对糖的耐量差异。
4. 实验限制：本实验仅选择了少量常见的动物种类进行研究，因此实验结果不能代表所有动物的糖耐量差异。
糖耐量试验
为糖尿病。
• 糖耐量减低不意味着是糖尿病，但应按
糖尿病处理：不吃甜食；限制每日碳水化 合物的入量；定期复查。有的人将来可能 成为糖尿病患者，也有的人葡萄糖耐量试 验可转为正常。
结束！
• ⑸药物对葡萄糖耐量的影响 口服避孕药、烟酸、
某种利尿药可使糖耐量减低，因此避孕药应在试 验前1周停服，后两者应在试验前3-4天停药。口 服降糖药、水杨酸钠或心得安应在试验前3天停药。 单胺氧化酶抑制剂应停药1个月以上，因本药在体 内作用可持续数周之久。
• ⑹肾性糖尿：由于肾小管重吸收功能减低，肾糖
阈下降，以至肾小球滤过液中正常浓度的葡萄糖 也不能完全吸收。此时出现的糖尿称为肾性糖尿。
口服葡萄糖耐量试验结果的判断
• 口服葡萄糖耐量试验的结果分为四种：可诊断为糖尿病、可排除糖尿
病、糖耐量减低、无糖尿病症状的检测。
•
口服葡萄糖耐量试验一般有下列四种情况：
⑴可诊断糖尿病：有糖尿病症状，2小时血糖≥11.1mmol/L。
葡萄糖）于10—15分钟内吃完，可饮少量水300毫升。然后分别在餐
后1、2、3小时各采取静脉血一次，并收集尿液标本，测定血糖、尿
糖和胰岛素及C肽的数值。
临床意义
• ⑴正常值：空腹3.9-6.1mmol/L，1小时血糖上
升至高峰＜11.1mmol/L，2小时下降＜ 7.8mmol/L，3小时下降至空腹血糖。
萄糖的利用，但由于交感神经兴奋，儿茶酚胺等释放使血糖升高，故 试前病人应静坐或静卧休息至少30分钟。
• ⑶精神因素 情绪激动可使交感神经兴奋，血糖升高，故试前应避免精
神刺激。
• ⑷疾病和创伤 许多急性疾病及创伤均可使糖耐量减低如急性心梗、脑
血管意外、手术、烧伤及创伤等可使血糖暂时升高，糖耐量减低。应 待病人愈后恢复正常时再做次试验。内分泌疾病如肢端肥大症、肾上 腺皮质机能亢进等均可使葡萄糖耐量减低，产生糖尿病症候群。肝病、 过度肥胖可使葡萄糖耐量减低。
实验三口服葡萄糖耐量试验范玉平
18
（一）无机化学法：Folin-Wu法，基于葡萄糖醛基的还原性
Cu2+ OHGlu Cu+ 磷钼酸 显色
特异性差
（二）有机化学法：邻甲苯胺法、联苯胺法、氨基联苯法等
邻甲苯胺 + Glu
缩合
葡萄糖基胺
脱水
分子重排
希夫氏碱
蓝绿色化合物 干扰因素多
（三）酶法 （1）己糖激酶法（HK） （2）葡萄糖萄糖耐量试验原理
#健康人一次摄入一定量葡萄糖后，其血液葡 萄糖浓度略有升高，但2h内恢复正常，称 为耐糖现象。 #糖代谢紊乱时，摄入一定量葡萄糖后，血糖 浓度明显增高，或降至正常水平所需时间 延长，称为糖耐量受损。此时器官组织受 损。
46
实验操作
*用葡萄糖氧化酶法，重复5次测定血糖浓度。 *以时间为横坐标，血糖浓度为纵坐标，绘制 OGTT曲线。
36
三、妊娠期糖尿病
指在妊娠期间任何程度的糖耐量减退或糖 尿病发作，不论是否使用胰岛素或饮食治 疗，也无论分娩后这一情况是否持续。 在分娩6周后，应复查血糖水平和糖尿病 的诊断标准重新确定。
37
四、糖尿病诊断程序
7.8
7.8
7.8
38
实验三
口服葡萄糖耐量试验 (葡萄糖氧化酶法)
39
实验目的
27
二、口服葡萄糖耐量试验
OGTT试验适应症：
1、空腹血糖水平在临界值（6～7mmol/L)而又疑为糖尿病患者；
2、空腹或餐后血糖浓度正常，但有发展为糖尿病可能的人群；
3、以前糖耐量异常的危险人群； 4、妊娠性糖尿病的诊断； 5、临床上出现肾病、神经病变和视网膜病而又无法做出合理解 释者； 6、作为流行病学研究的手段。
糖耐量(OGTT)试验操作规程(SOP)
糖耐量(OGTT)试验操作规程（SOP）1.目的：检测人体对糖的耐量(OGTT)试验。
2．原理：2．1试验方法：口服葡萄糖耐量试验（OGTT）。
2．2试验原理：当一次给予健康人大剂量葡萄糖后（口服或静脉注入），即可引起血糖浓度的明显升高，高血糖可刺激胰岛β细胞释放胰岛素，同时抑制α细胞释放胰高血糖素，于是在一定时间内血糖下降，并恢复正常。
这种血糖浓度对摄入糖的反应即为糖耐量试验的基础。
如将不同时间的血糖浓度绘成曲线即得葡萄糖耐量曲线。
在糖尿病和某些疾病时，由于神经或内分泌功能紊乱或其他因素的影响，使糖代谢发生异常，可反映为糖耐量曲线的变化，故用糖耐量试验可了解糖代谢的情况，确定一些临床诊断中尚不能确诊的轻度糖尿病或疑有糖尿病的患者，并对许多疾病的诊断也有一定的意义。
3.方法:3.1.空腹抽静脉血2ml，再将无水葡萄糖75g 溶于250ml 温开水中，令受验者5min 内服完。
服后0.5h、1h、2h、3h 各抽静脉血2ml。
每次采集的样本必须尽快送实验室作葡萄糖浓度的测定。
3.2.实验室将各次所测血糖浓度以数值或曲线形式报告给临床医生。
4.参考值：正常人空腹血糖低于 7.70 mmol/L (120mg/dl)，口服糖后 0.5～1h 血糖上升达高峰，一般在8.78～9.89mmol/L 之间；2h 降至空腹水平。
静脉注射法血糖高峰出现于注射后0.5h，多在12.2～14mmol/L 之间，1.5h 后降至空腹水平以下，2h 恢复注射前水平。
各次尿糖均为阴性。
5.注意事项:5.1.本法用口服葡萄糖的方法增加血糖浓度，观察机体在空腹以及增加葡萄糖负荷后分泌胰岛素的能力。
凡有消化道疾病或做过胃肠道手术者，不宜采用口服法，以防因吸收率改变而影响结果，可改用静脉注射法（静注法）作耐量试验。
静注法与口服法不同的是，在空腹取血后，按每千克体重0.5g 计算注糖量，再折算成50％葡萄糖注射液的毫升数，在3～4min内由静脉推注，然后在1h内每10min 取一次静脉血，共7次，测定各次的血糖水平。
糖耐量测量
糖耐量测量
测量方法:1晚上12:00禁食禁水。
2试验当日晨起空腹抽取静脉血标本(干燥管)，立即送检。
3糖水７５克溶入３００ｍｌ水中5分钟内喝完。
4从第一口水开始计时在1小时后2小时后分别抽取静脉血标本。
注意事项：1试验者如有感冒、胃肠炎等急性病时，要等愈后再做。
2已经确诊的糖尿病患者，不宜再做本试验。
3实验前和试验过程中不能吸烟并应避免剧烈运动。
4试验期间若出现面色苍白、恶心、晕厥等症状时，要停止试验。
若是在服糖后3~4小时出现，应考虑为反应性低血糖，立刻测血糖，
并让患者进食。
5结果判定：餐后2小时小于7.8mmol/L为正常.大于或等于11.1mmol/L可诊断
为糖尿病.
6试验期间禁。
动物糖耐量的实验报告
一、实验目的1. 了解糖耐量实验的基本原理和操作方法。
2. 通过糖耐量实验，观察动物对葡萄糖的代谢能力，评估其糖代谢功能。
3. 探讨动物糖耐量与血糖调节之间的关系。
二、实验材料1. 实验动物：成年雄性小鼠，体重20-25g。
2. 实验试剂：葡萄糖溶液（浓度为50%）、生理盐水、胰岛素。
3. 实验仪器：血糖仪、注射器、电子天平、离心机、恒温箱等。
三、实验方法1. 实验分组：将实验动物随机分为实验组和对照组，每组10只。
2. 实验动物处理：实验组小鼠给予葡萄糖溶液灌胃，对照组小鼠给予等量生理盐水灌胃。
3. 血糖测定：在灌胃前、灌胃后0.5小时、1小时、2小时、3小时分别测定小鼠血糖。
4. 胰岛素注射：在灌胃后1小时，实验组小鼠给予胰岛素注射，对照组小鼠给予等量生理盐水注射。
5. 血糖测定：在胰岛素注射后0.5小时、1小时、2小时、3小时分别测定小鼠血糖。
6. 数据分析：对实验数据进行统计学分析，比较实验组和对照组小鼠血糖变化差异。
四、实验结果1. 灌胃前，实验组和对照组小鼠血糖水平无显著差异。
2. 灌胃后0.5小时，实验组小鼠血糖水平显著高于对照组，说明葡萄糖溶液对实验组小鼠血糖有升高作用。
3. 灌胃后1小时，实验组小鼠血糖水平达到峰值，与对照组相比，差异显著。
4. 灌胃后2小时，实验组小鼠血糖水平开始下降，但仍高于对照组。
5. 灌胃后3小时，实验组小鼠血糖水平逐渐恢复正常，与对照组无显著差异。
6. 胰岛素注射后，实验组小鼠血糖水平下降幅度明显大于对照组，说明胰岛素对实验组小鼠血糖有降低作用。
五、实验讨论1. 本实验通过糖耐量实验，观察了动物对葡萄糖的代谢能力。
实验结果显示，实验组小鼠在灌胃葡萄糖溶液后，血糖水平显著升高，说明动物对葡萄糖的代谢能力较强。
2. 在胰岛素注射后，实验组小鼠血糖水平下降幅度明显大于对照组，说明胰岛素对实验组小鼠血糖有降低作用。
这可能与实验组小鼠对葡萄糖的代谢能力较强有关。
糖耐量实验方案
糖耐量实验方案
1．20只小鼠分进20只笼子，20只笼子分四排排列，一排一组，并做好标记。
每十只为一组进行实验操作。
（带颜色明显的红色记号笔）
2.测量每只老鼠的实验前的血糖（20只），并记录
3.测量每只老鼠的体重（20只），并记录，算出对应的葡萄糖溶液的量.(提前配好3g/kg的葡萄糖溶液4管)
4.第一组先进行灌胃灌胃，两只灌胃针，我取对应的溶液，师姐灌胃，开始灌胃时一只计时器计时开始，结束灌胃时另一只计时器开始计时。
5．第一只计时器响时，开始测量第一只鼠的血糖，观察第一只计时器与第二只计时器的示数之差，取10的平均，再隔该时间测量第二只鼠的血糖。
开始测第一只鼠的血糖时计时器重新按一下，再计时30min，测量每只老鼠的血糖都相隔第一次测量的时间。
6.第一组测完30min血糖浓度后，开始第二组的十只老鼠的灌胃，开始灌胃时一只计时器计时开始，结束灌胃时另一只计时器开始计时。
（一共需要四只计时器）
7.第二组灌胃结束后，等待第一组60min的血糖测量。
每一次开始测血糖按下计时器，注意最后一次时间间隔60min.。
糖耐量实验(实验报告)
口服葡萄糖耐量实验是检查人体血糖调节功能的一种方法。
正常人服用一定量的葡萄糖后，血糖浓度暂时性升高（一般不超过8.9mmol/L），但在2小时内血糖浓度又可恢复至正常空腹水平。
在服用一定量的葡萄糖后，间隔一定时间测定血糖和尿糖，观察血液葡萄糖水平及有无尿糖出现，称为耐糖试验。
若因内分泌功能失调等因素引起糖代谢失常时，食入一定量的葡萄糖后，血糖浓度可急剧升高，而且短时间内不能恢复到原来的浓度水平，称为糖耐量失常。
临床上对症状不明显的患者，可采用口服葡萄糖耐量试验来判断有无糖代谢异常。
葡萄糖耐量试验的方法如下：1．做OGTT试验前3天，停止胰岛素治疗，可正常饮食，每天饮食中碳水化合物含量不应低于150克（但要控制在250～300克范围），并且维持正常活动。
2．次日晨空腹抽取血液2ml，抗凝，测定血浆葡萄糖，此为空腹血糖。
3．在5分钟之内饮入300毫升含75克葡萄糖的糖水（对于儿童则中按每千克体重给1.75克葡萄糖，计算口服葡萄糖用量，直至达到75克葡萄糖时止），喝糖水后30分钟、1小时、2小时分别静脉取血一次，并留取尿液做尿糖定性试验。
整个试验中不可吸烟、喝咖啡、喝茶或进食，应安静地坐在椅子上。
4．测定血糖浓度，并绘制耐糖曲线：将各次所测得的血糖浓度与对应的时间作图，绘制糖耐量曲线。
正常参考值见下表：不同年龄段糖耐量结果的血糖值上限（mmol/L）40岁以下40～49岁50～59岁60～69岁70岁以上空腹 6.9 6.9 6.9 6.9 6.9 30 11.1 11.1 11.4 11.55 11.9 60 10.54 10.54 11.1 11.55 12.2 120 8.33 8.33 8.6 8.88 9.16 180 6.9 6.9 6.9 6.9 6.9 结果分析（1）正常糖耐量：空腹血糖<6.1mmol/L（110mg/dl）；口服葡萄糖30min～60min达高峰，峰值<11.1mmol/L（200mg/dl）；120min时基本恢复到正常水平，即<7.8mmol/L（140mg/dl），尿糖均为（一）。
糖耐量试验
适应症
• ⑴临床怀疑糖尿病，伴空腹血糖或随机血
糖可疑升高者。 • ⑵对怀疑有妊娠糖尿病者的确诊。 • ⑶对原有糖耐量减低者的随访。 • ⑷其他原因引起的尿糖鉴别，如肾性糖尿 病，滋养性糖尿病等。 • ⑸有糖尿病家族史，空腹血糖正常但有症 状、体征者
葡萄糖的用量
• 世界卫生组织（WHO）建议使用以下负荷 世界卫生组织（WHO）建议使用以下负荷
原理
• 葡萄糖耐量试验是检查人体血糖调节机能的一种
方法。正常人在服用一定量葡萄糖后血糖浓度暂 时升高，但在两小时内血糖浓度又恢复到空腹水 平，称为“耐糖现象” 平，称为“耐糖现象”。在服用一定葡萄糖后间 隔一定时间测定血糖和尿糖，观察血糖水平以及 有无尿糖出现，称为糖耐量试验。若因内分泌失 调等因素引起葡萄糖代谢失常时，食入大量糖后 血糖浓度可急剧升高，或升高极不明显，短时间 内不能恢复原值者即为耐糖现象异常，临床常对 症状不明显的患者用糖耐量试验来诊断有无糖代 谢异常。
• ⑸药物对葡萄糖耐量的影响 口服避孕药、烟酸、
某种利尿药可使糖耐量减低，因此避孕药应在试 验前1周停服，后两者应在试验前3 验前1周停服，后两者应在试验前3-4天停药。口 服降糖药、水杨酸钠或心得安应在试验前3 服降糖药、水杨酸钠或心得安应在试验前3天停药。 单胺氧化酶抑制剂应停药1 单胺氧化酶抑制剂应停药1个月以上，因本药在体 内作用可持续数周之久。 ⑹肾性糖尿：由于肾小管重吸收功能减低，肾糖 阈下降，以至肾小球滤过中正常浓度的葡萄糖 也不能完全吸收。此时出现的糖尿称为肾性糖尿。
•
口服葡萄糖耐量试验结果的判断
• 口服葡萄糖耐量试验的结果分为四种：可诊断为糖尿病、可排除糖尿 口服葡萄糖耐量试验的结果分为四种：可诊断为糖尿病、可排除糖尿
糖耐量测定实验报告
一、实验目的通过本次实验，了解糖耐量测定的原理和方法，评估受试者的血糖调节功能，判断是否存在糖代谢异常，为糖尿病等疾病的诊断提供依据。
二、实验原理糖耐量测定实验（OGTT）是一种检查人体血糖调节功能的方法。
受试者口服一定量的葡萄糖后，血糖浓度会暂时性升高，但经过一定时间后，人体会将葡萄糖合成糖原加以储存，血糖浓度会恢复至正常空腹水平。
通过观察血糖浓度在服糖前后的变化，可以评估受试者的糖耐量状况。
三、实验方法1. 实验前准备：- 受试者实验前3天停止胰岛素治疗，正常饮食，每天饮食中碳水化合物含量不应低于150克，控制在250～300克范围内，并维持正常活动。
- 实验当天，受试者早晨空腹抽取2ml血液，抗凝，测定血浆葡萄糖浓度，此为空腹血糖。
2. 实验步骤：- 在5分钟内饮入300毫升含75克葡萄糖的糖水（儿童按每千克体重1.75克葡萄糖计算，直至达到75克葡萄糖）。
- 饮糖水后30分钟、1小时、2小时分别静脉取血一次，并留取尿液做尿糖定性试验。
- 整个实验过程中，受试者不可吸烟、喝咖啡、喝茶或进食。
3. 数据记录：- 记录空腹血糖、服糖后30分钟、1小时、2小时的血糖浓度，以及尿糖定性结果。
四、实验结果与分析1. 空腹血糖：受试者空腹血糖浓度为X mmol/L。
2. 服糖后血糖变化：- 服糖后30分钟，血糖浓度为Y mmol/L。
- 服糖后1小时，血糖浓度为Z mmol/L。
- 服糖后2小时，血糖浓度为W mmol/L。
3. 尿糖定性：- 服糖后30分钟、1小时、2小时的尿糖定性结果分别为：阴性、阴性、阴性（或阳性）。
4. 结果分析：- 正常糖耐量：空腹血糖<6.1 mmol/L，服糖后30分钟血糖峰值<11.1 mmol/L，120分钟时血糖恢复至正常水平，即<7.8 mmol/L。
- 糖耐量异常：空腹血糖≥7.0 mmol/L，服糖后2小时血糖≥11.1 mmol/L，或服糖后30分钟血糖峰值≥11.1 mmol/L，120分钟时血糖未恢复至正常水平。