园艺植物育种学实验指导书(2013.3)

园艺植物育种学总论实验指导书

黄桂香编著

广西大学农学院园艺系

2013年3月

目录

实验一园艺植物花粉生活力测定(3h) (3)

（一）果树花粉生活力测定 (3)

（二）蔬菜花粉生活力测定 (6)

实验二、三园艺植物开花习性观察及有性杂交育种(6h) (7)

（一）果树开花习性观察及有性杂交育种 (7)

（二）蔬菜开花习性观察及有性杂交育种 (8)

实验四、园艺植物品种描述及鉴别(3h) (10)

（一）番茄品种描述及鉴别 (10)

（二）荔枝品种描述及鉴别 (13)

实验五、种胚分离培养技术(3h) (16)

实验六、园艺植物选择育种(3h) (17)

实验七、园艺植物品种调查及育种方案的制订(6h) (20)

实验八、园艺植物花粉单核期观察(3h) (20)

实验一、园艺植物花粉发芽试验及生活力测定

内容一：果树花粉发芽试验及花粉生活力测定

一、目的要求

练习并掌握果树花粉发芽试验及花粉生活力测定技术

二、材料用具

供试花粉、氯化钙、硼酸、琼脂、蔗糖、凹玻片、棉花、染色瓶、蒸馏水、显微镜、计数器、天平、载玻片、盖玻片、烧杯、镊子、水浴锅、玻璃杯、玻棒、冰箱、温箱、干燥器等。联苯胺、α—萘酚、碳酸钠、酒精、过氧化氢、氯化三苯基四氮吡、磷酸氢二钠、磷酸二氢钾、量筒、量瓶、滴瓶等。

安全提示：因联苯胺、α—萘酚、氯化三苯基四氮唑为易制毒化学品，操作时要按规范要求，避免人体直接接触，注意安全。

三、说明

在有性杂交工作中，常因杂交亲本组合的花期不遇，或亲本植株异地而必须预先收集父本花粉，花粉应贮藏在低温(0—4℃)，干燥(相对湿度0—4%)不受阳光直射(或黑暗)的环境下，可以较长时间地保持花粉的生活力，经贮藏或外地采来的花粉，在授粉之前，必须检验花粉的生活力，以确定花粉发芽的可靠程度，这对检验杂交后的效果，具有重要意义。

花粉人工发芽的效果与培养基的配制是否适合有很大关系，培养基常用不同浓度的蔗糖和琼脂1%及蒸馏水配制而成，不同果树的花粉对蔗糖浓度要求不同。一般柑桔花粉要求蔗糖浓度以10—15%为宜；苹果及梨以10—15%为宜，桃以10%为宜。通过控制蔗糖浓度的高低可调节培养基的渗透压，防止播种的花粉在培养基上发生破裂现象。培养基一般以微酸性为宜，pH值相应调整在6—5.2之间，发芽温度控制在20—25℃，并需要空气和较高的湿度。如在培养基中加入少量，更可促进花粉发芽。

的硼酸和维生素B

1

测定花粉生活力，同样是检查花粉的质量，因为做花粉发芽试验时，操作较复杂，设备要求较高，需时也较长。为了简易而迅速地测定花粉的生活力，也有用化学染色的方法测定花粉生活力，但此种方法有一个很大的缺点，就是不能真实地反映出有发芽力的花粉究竟有多少，因为即使染上色的花粉也不一定都具有生活力。所以一般常用而且较为可靠的方法仍然是采用花粉发芽试验，而染色法作为一种粗略的快速测定，还是比较简便的。

四、方法和步骤

(一)花粉发芽试验

(1)培养基的配制：在100毫升蒸馏水中，加入琼脂1克，蔗糖(按果树花粉种类不同的比例加入)和0.01g的硼酸共同置于烧杯中加热煮沸，使琼脂和蔗糖等充分溶解于水中，在加热过程中，由于水分蒸发，必须加入失去的水分，才能保持准确的浓度，然后将烧杯置于水浴锅中(或盛热水的烧杯中)备用，以防培养基冷却凝固

(2)发芽床的装置：用玻棒将冷却前(约50℃)的培养基滴入凹玻片的凹孔中(1—2滴)，要求培养基表面必须园正，待其凝固后用作播种花粉之发芽床。

(3)播种花粉用接种丝或头发沾上花粉(花粉事先收集使之干燥，贮藏于干燥器中置于冰箱内)少许，均匀地播种于培育基表面，播种时要防止花粉成团堆集

于培育基上；也要防止花粉埋入培养基过深，影响花粉发芽。播种后要在显微镜下检查，花粉分布是否均匀。花粉堆积过多难以计数，而过少则影响发芽。以每一视野中（10×10）分布有100—200粒左右花粉为宜。播种完毕后，将凹玻片插入染色瓶中(染色瓶底事先放入少量的脱脂棉，并加入适量的无菌水)，盖上瓶盖。再在染色瓶上贴上标签，注明花粉种类，蔗糖浓度，采集时间，播种时间，工作者姓名等。然后置于温箱中（温度调至25—28℃左右）。

(4)播种后的检查：播种根据树种不同，隔不同时间在显微镜下，检查花粉发芽情况、苹果、梨、桃在3—4小时后检查第一次，以后每隔2—4小时检查一次（北方可适当缩短2次之间的时间），柑桔在24小时检查一次。每次检查三个视野（最好能固定视野检查。如不能固定视野检查，则每次检查的视野不能重复）。同时用计数器统计出花粉总粒数及发芽粒数，直至花粉粒数不再增加为止，花粉发芽标准，以花粉管伸长超过花粉直径为准。

(二)花粉生活力测定

1、B、C夏尔达考夫染色法：具有生活力的花粉粒中，含有过氧化物酶，它能促使过氧化物放出活性氧，这种氧是在花粉萌发时，进行的许多综合反应时所必需的。因此，通过对过氧化物酶的测定，可间接地判断花粉是否具有生活力。

(1) 预先配制下列溶液

① 0.20克联苯胺溶于100毫升50%酒精溶液中。

② 0.15α-萘酚溶于100毫升之50%酒精溶液中。

③ 0.25克碳酸钠溶于100毫升之蒸馏水中。

以上三溶液分别装入棕色瓶中贮藏备用(或用量瓶放在暗色避光处)，使用时将上述三种溶液等量混合，配成混合液，装于棕色滴瓶中备用。

④在使用前配好0.3%过氧化氢溶液，装于棕色滴瓶中备用。

(2) 操作步骤：

在载玻片上加入少量待测花粉，然后在花粉上滴一小滴混合液和一小滴过氧化氢溶液，用玻棒把花粉和溶液充分混合，再盖上盖玻片(盖上后常出现很多气泡，不要把气泡认为花粉)，经过3—4分钟后，在显微镜下检查被染色和未染色

的花粉粒数，因联苯胺被氧化后呈兰色，α—苯酚被氧分后呈红色，同时被氧化则呈紫红色，因此联苯胺，α—苯酚和过氧化氢的混合液同时参与作用下，凡具生活力的花粉因含有过氧化物酶使过氧化氢释放出氧，从而使花粉染成红色。生活力愈强的花粉染色愈深，不具生活力的花粉则呈黄色和无色。

(3) 观察和测定结果：

每片观察三个视野，总数不少于500粒左右，统计出具有生活力的花粉粒的%。

2、氯化三苯基四氮唑(简称T、T、C)染色法：具有生活力花粉的脱氢酶，在催化去氢的过程中，把氢转移到它的物质上去，使用T、T、C与催化过程中产生的氢结合，使具有生活力的花粉粒变成红色。

(1) 预先配制下列溶液：

①磷酸盐缓冲液：在100毫升的蒸馏水中，溶解0.8323克的磷酸氢二钠(Na

2

HPO

4 2H

2

O)和0.273克的磷酸二氢钾(KH

2

PO

4

)，调整PH值为7.17。

② T、T、C溶液：称取0.02—0.05克的T、T、C溶解在10毫升的磷酸盐缓

冲溶液中，溶液配好后，装入棕色滴瓶内，置于暗处。

(2) 操作步骤：

①取少量花粉放在载玻片上，并在花粉上滴1—2滴配制液，用玻棒混合后，盖上盖玻片。

②将此盖玻片置于恒温箱中(35—40℃)约15—20分钟。

③在显微镜(10×10)下观察，凡具有生活力的花粉粒呈红色，部分失去生活力的呈淡红色，无色的是死的和不育的花粉粒。

(3) 观察和测定结果：

内容二蔬菜花粉生活力测定及发芽试验

一、实验目的

练习各种蔬菜花粉生活力测定的基本方法；了解不同蔬菜作物的花粉贮存条件对其生活力的影响。

二、原理

1、生活力测定

将花粉用某种化学药品直接染色，根据花粉形态和染色情况判断花粉生活力有无或强弱的方法。常用的方法有I

—KI溶液染色法，氯化三苯四氮唑法(TTC)，

2

—KI溶液染色法。

过氧化物酶测定法等，本试验采用I

2

2、发芽试验法

是将花粉播到培养基上，使其吸收水和少量营养物质，观察发芽情况，判断花粉生活力。此法是最直观可靠的。

三、实验材料和用具

1、试材：白菜、黄瓜、茄子等蔬菜作物的新鲜花粉或贮藏花粉。

2、用具及药品：载玻片、盖玻片、显微镜、光照培养箱、镊子、培养皿、

—KI溶液等。

凹玻片、染色缸、培养基、I

2

四、实验步骤

(一)生活力的测定

1、采样：采集成熟的新鲜花粉或贮存过的花粉。

,全部溶解后定容成100毫升，

2、染色液配制：先溶解2gKI，后加入1gI

2

即制成含I为2%的母液，用前按需要稀释即可。

3、染色：因正常花粉一般可积累比较多的淀粉，而败育花粉则不积累淀粉，

—KI对淀粉的特异染色反应可区分开来，正常的花粉呈蓝黑色，败育的利用I

2

花粉呈黄褐色。(注：很小粒花粉视为败育)。

4、统计及计算。

1、采样：采集成熟的新鲜花粉或贮存过的花粉。

2、培养基制备：①成分：蔗糖10%~12%+硼酸0.01%+琼脂0.5%。

②煮溶

③滴定

④冷却。

3、播种：用解剖针等尖细物将花粉均匀地播在培养基表面(勿弄破表面)。

4、培养：在25~28℃下，培养48小时。

5、镜检：在10×10倍下镜检。统计结果填表2。

实验二、园艺植物开花习性观察及有性杂交育种

内容一果树的开花习性观察及有性杂交育种

一、实验目的

本实验通过教师讲解、现场观察、实际操作，使学生了解供试园艺植物的花器构造、开花习性并掌握有性杂交技术。

二、实验方法及步骤

(1) 观察供试园艺植物的花器构造、开花习性。

（2）确定杂交组合：根据当地的育种目标，在掌握亲本性状的遗传倾向，品种开花早晚等前提来确定杂交组合。

杂交亲本的选配，原则上要符合育种目标的要求，在经济性状上做到取长补短，在组合的选配中母本更为重要，最好具备下列条件：优点较多，缺点较少的生产品种，单胚性类型或平均胚数较少的品种，父本应具有花粉生活力强，某些相对性状(如翼叶、胚的颜色)具有显性，但雄蕊退化的品种不能作父本，对于高度自花授粉的无性胚占优势的柑桔类，杂交组合宜适当增多，每杂交组合的花朵数应不少于200朵。

(3) 花粉采集与贮藏：父本花粉应在母本去雄前采集备用。

采集花粉宜在晴天露水干后进行，一般应采含苞待放的花蕾为好，用镊子将花药取下，置于培养皿内摊开，除去花丝、标名花粉名称，放置干燥条件下直至花药开裂，散出大量花粉，然后将花粉收集在指形管内，用棉花塞好，置于干燥器内，放在低温避光的环境下保存备用。

(4) 母本树、花枝及花朵的选择：

母本树：宜选具有该品种的典型性、丰产优质、树势中庸、抗性强的植株。

花枝：一般结果母枝以春梢和早秋梢发育而成的为佳，并注意选择树冠中部外围，发育健壮的较斜生正常结果枝，但选枝还须根据品种结果习性具体而定。

花朵：有叶单顶花或有叶总状花序顶部的花着果率高，无叶花序则在每一果枝上留2—5朵即将开放的正常花作为杂交用，其余花朵全部摘除。

(5) 去雄和套袋

母本花朵在杂交授粉前必须去雄，掌握花苞待放，花药未开裂前去雄，用镊子将花瓣剥开。然后将花药全部完整的除去，注意勿伤花柱及子房，更不能使花药破裂而引起自花授粉，去雄后为防止异花授粉，必须立即套袋隔离。

当一个组合去雄完毕，所用镊子用70%酒精消毒，以便进行另一组合时再用。

(6) 授粉

有些果树（如柑桔类）花朵的雌蕊具有早熟性，故去雄后的当天或第二天即可授粉，一般去雄后1—3天内均可授粉，最好去雄后马上授粉，可简化手续，结实率也较高，授粉最好在晴天无风的上午（9—11时）进行，授粉时用毛笔或授粉匙在指形管内沾取花粉。轻轻涂在去雄花朵的柱头上，授毕立即套袋，挂上标签，标签上应注明组合名称，去雄杂交日期，杂交花朵数及杂交者姓名等。

(6) 杂交后的管理

授粉后9—10天，柱头已变褐，枯萎，即可除去纸袋，然后按记载表内容统计杂交效果。在果实最后一次生理落果后，还需统计一次杂交结实率，采前落果严重的地区，对杂交果实还需套上沙布袋，以免杂交果实掉落；果实完全成熟后，按组合采回杂交果实。

三、结果及记录

内容二番茄的开花习性观察及有性杂交技术

一、实验目的

本实验的目的是了解番茄花器构造及掌握番茄有性杂交方法。

番茄是自花授粉作物，但在自然情况下，也常常会出现异花授粉现象。异花授粉率的大小决定于栽培条件及品种间的花器构造。在人工交配时，番茄的各个品种之间很易杂交，杂交一朵花所结种子数很多，去雄及授粉也较为简便，所以人工有性杂交是目前番茄杂种生产的主要方法。

番茄为两性花，花瓣5-7片，雄蕊5-7条，合生成为筒状，雌蕊在筒的中央，呈线状，种子很多。开花最适宜的温度为25℃，花开放时首先从黄绿色花蕾中

露出花冠(露冠)，逐渐张开花冠，然后花冠反卷，最后花冠凋谢。自露冠至盛开约2-3天，自露冠至凋谢需5-6天，花在初开及盛开时花粉均已成熟，杂交用将开而未开花朵的柱头授粉最为适宜，但柱头在蕾期即露冠前1-2天已有授粉能力，并在开花后保持4天左右，花粉的生活力在低温干燥及黑暗的条件下一般可保持8-10天。

二、材料及用具

番茄植株，小镊子，刀片，酒精，培养皿，小放大镜，纸袋，标签，曲别针，软性铅笔，棉花等。

三、方法与步骤

1、取盛开的花，纵切解剖，观察花器的结构，特别注意雌蕊的所在位置。

2、母本花朵的选择：选取花萼全裂，花冠裂片半开，花瓣展开呈30°角的花蕾，此时花药尚未开裂，其色由绿开始转黄。花蕾太小，不利于操作，座果率和结籽数受影响；花蕾过大，有可能已经自交。

3、去雄：用小镊子的一边，小心插入雄蕊筒的中心将之夹紧，轻轻向上提，这样就可以将雄蕊取出去。切勿弄破花粉囊及刺伤雌蕊。去雄后，用小放大镜检查雌蕊柱头，看有没有花粉粘在柱头上，如若没有，这花就可以作杂交之用。

4、父本花朵选择：在用作父本品种的植株中，选取花全开，花冠完全展开，且向外反卷，呈浅黄色，花药呈现橙黄色，花药有裂缝的花。一般在晴天上午10时以后，或阴天中午花粉量最多，生活力也强。

5、采粉：将花萼及花冠全部除掉后，用小镊子插入雄蕊筒内的基部，将之夹紧，轻轻向上提，将雄蕊取出，并将之展开，用左手大拇指及食指将花药基部夹紧(花药裂口面向大拇指的指甲)，然后用右手轻轻敲花药之背，使花粉全部落在左手大拇指指甲上，这些花粉可作杂交之用。

6、授粉：是将花粉放在柱头上，其方法是将已去雄而作为母本的花，用右手执之，将左手大拇指指甲的花粉涂在柱头上。授粉后再用小放大镜观察柱头表面花粉数量是否足够，花药是否均匀铺开。在授粉工作全部完毕后，在杂交花柄处挂牌，用铅笔写上母本及父本名称、杂交日期及时间、杂交人姓名。授粉一周后，子房开始很快膨大。

授粉时母本的花龄对子房受精能力有一定影响。据报道，当天开放的花授粉后，其座果率、单果种子产量和种子千粒重最高；其次是开花前1天和后1天的；花后3天的最低。

一天内授粉时间与田间气温有关，气温在22.8—28.5℃时，结果率45.1—61.1%，气温30.5℃时，结果率17.1%(赵邦勤，1983)。

7、检查：杂交工作结束后要经常检查母本植株，摘除所有未去雄的花和它们所结的果实。对无限生长类型的品种，要打顶，使养分集中，促进果实中种子发育，待结成果实时进行观察，计算授粉后结果率和平均单果种子数。

番茄有性杂交记录表

实验四园艺植物品种描述及鉴别

内容一、番茄品种描述及鉴别

一、目的要求

1、学习品种（资源）形态特征的描述方法；

2、根据品种的主要形态特征，练习鉴别品种的方法。

3、识别一些主要品种。

二、材料与用具

材料：若干番茄品种。

用具：钢卷尺、卡尺、扩大镜、果刀、粗天秤、手持测糖仪、铅笔、记录本等。

三、说明

品种形态特征研究的对象是植株，枝与芽，叶与花，果实包括种子等器官的综合表现即品种特征。品种特征的鉴别主要通过观察、记载和描述。每一个品种都具有它一定的品种特征，即品种典型性。因此，品种的形态特征是鉴别品种的主要依据之一。由于果实是番茄栽培的目的产品，是育种选择的主要对象。所以品种特征在很大程度上是以果实作为鉴别依据。当品种在植株形态上不易区别时，可在果实上明显地辨别出来。

育种工作者无论在进行引种，选种或育种工作，都必须对种质资源和选种材料进行研究，但为了研究原始材料，首先就要能识别各种原始材料。育种是以栽培品种或有关野生类型作为原始材料的，所以现有的主要品种是育种的最主要的原始材料。因此，识别品种、鉴别品种是育种工作者必须具备的基础知识。在育种工作过程中，熟悉品种特征不仅能判断品种优劣，掌握选择标准，还可以通过各性状的研究，了解品种间的亲缘关系，作为提供选配杂交亲本的依据。在良种繁殖中，为了确定品种的真实性和纯度，也需要熟悉各品种的形态特征。

四、番茄品种的分类

番茄品种很多，按开花结果习性可分有限生长型和无限生长型两类；按成熟期分为早熟种、中熟种和晚熟种等。

普通番茄的园艺学分类，大体上可以从植株的生长习性、叶型、

果实大小、颜色等不同的角度进行分类。如：

1.按照植株的生长习性分类

按照植株的生长习性分类，可以分为无限生长型、有限生长型及半有限生长型三类。

(1)无限生长型：植株无限生长，一般采用单秆整枝法。在条件适宜的情况下，主枝高度可达2米以上，能结果十多穗，宜作露地栽培或温室长周期栽培。

(2)有限生长型：在主干3～5层时花序封顶，生长点变成花序，不再向上生长，依靠叶腋或花序下部抽生侧枝生长，侧枝生长1～2个花序后顶端又变成花序而封顶，如此反复，再从叶腋形成侧芽生长。因此，该类型品种的番茄植株较矮，大多也较早熟，一般株高1米左右，可行2～3秆整枝，立较矮的或简易的支架，或不立支架。该类型品种宜作小棚栽培或大棚双层覆盖栽培、露地简易支架密植栽培或无支架栽培。

(3)半有限生长型：半有限生长型是指具有无限生长趋势的有限生长类型的品种。

2.按照果实大小分类

按照果实大小分类，可分为大番茄、串番茄和樱桃形番茄。大番茄是指目前生产中一般性的果实在130～250克或以上的品种。串番茄是指类似于葡萄的一串番茄，一般为5～7只，其中4～6只基本上一起成熟。串番茄的果形较小，一般为100～130克，目前该类型的番茄品种还须依靠进口。樱桃形番茄的果实较小，一般单果重10～20克，也有50～60克的。

3.按照果实颜色分类

按照果实颜色分类，有大红的、粉红的、金黄的、橙黄的、淡黄的、咖啡色的等，这些都是自然界本身就存在的番茄品种。

此外，番茄品种按熟性分类，有早熟种、中熟种和晚熟种。按照果实的主要用途，可分为鲜食和加工贮藏两种。鲜食品种主要是适口性好，果形、颜色也好。加工品种则注重果肉的颜色及果肉果汁的糖酸比。其他还可以按叶型、果实形状等来分类。

番茄的品质要求：一般以果形端正，无裂口、虫咬，成熟适度，酸甜适口，肉肥厚，心室小者。宜选择成熟适度的番茄，不仅口味好，而且营养价值高。

五、观察记载项目（部分）

1、田间形状

生长习性：无限生长、有限生长

株型：蔓性、半蔓性、直立蔓性、半蔓性、直立

叶型：普通叶型、薯叶型、复宽叶型、复细叶型

丰产性（单花序果数）：番茄植株单个花序可结果实的数目。单位为“个”。成熟期：

2、果实性状描述规范（以下项目以第二穗果实成熟期，番茄第二穗果达到商品成熟度为描述时期）

成熟果色：黄白、浅黄、黄、橘黄、绿、粉红、红、深红、黄底绿条

果面棱沟：无、轻、中、重

果面茸毛：无、稀、中、密

果顶形状：深凹、微凹、圆平、微凸、凸尖

果肩：无、有

果肩形状：平、微凹、深凹

果肩色：浅绿、绿、深绿

绿果肩大小：小、中、大

商品果纵径：果蒂至果顶的直线长度。单位为cm。

商品果横径：与纵径垂直的最大横切面的直径。单位为cm。

果形：扁平、扁圆、圆形、高圆、长圆、卵圆、桃形、梨形、长梨形果梗洼大小：果梗洼的最大直径。单位为cm。

果洼处木栓化大小：果洼处木栓化的最大直径。单位为cm。

果实横切面形状：圆形、等边多边形、不规则形状

果肉色：黄白、浅黄、黄、粉红、红、绿

胎座胶状物质颜色：黄白、黄、黄绿、绿、粉红、红

果肉厚：单位为cm。

心室数：单位为个。

果皮色：无色、黄、红

单果重：在第三穗果实成熟期，单个正常商品果实的重量。单位为g。肉质：软、面、沙

风味：甜、酸甜、甜酸、酸

注：实验结果分析要求：

1、对各品种进行品质综合评价（优、中、差）

2、品种改良建议

内容二荔枝品种描述及鉴别

一、目的要求

1、学习品种（资源）形态特征的描述方法；

2、根据品种的主要形态特征，练习鉴别品种的方法。

3、识别一些主要品种。

二、材料与用具

材料：若干荔枝品种。

用具：钢卷尺、卡尺、扩大镜、果刀、粗天秤、手持测糖仪、铅笔、记录本等。

三、说明

品种形态特征研究的对象是树体，枝与芽，叶与花，果实包括种子等器官的综合表现即品种特征。品种特征的鉴别主要通过观察、记载和描述。每一个品种都具有它一定的品种特征，即品种典型性。因此，品种的形态特征是鉴别品种的主要依据之一。由于果实是栽培的目的产品，是人类选择的主要对象。所以品种特征在很大程度上是以果实作为鉴别依据。当品种在植株形态上不易区别时，可在果实上明显地辨别出来。

果树育种工作者无论在进行引种，选种或育种工作，都必须对果树的原始材料和选种材料进行研究，但为了研究原始材料，首先就要能识别各种原始材料。育种是以栽培品种或有关野生类型作为原始材料的，所以现有的主要品种是育种的最主要的原始材料。因此，识别品种、鉴别品种是育种工作者必须具备的基础知识。在育种工作过程中，熟悉品种特征不仅能判断品种优劣，掌握选择标准，还可以通过各性状的研究，了解品种间的亲缘关系，作为提供选配杂交亲本的依据。在良种繁殖中，为了确定品种的真实性和纯度，也需要熟悉各品种的形态特征。

四、荔枝品种描述及鉴别项目

品种名称

树龄

来源

植株特征

(1) 树性：乔木、小乔木、灌木、直立、开张、下垂。

(2) 树形：园头形、扁园形、长园形、半园形、园锥形、倒园锥形、披散形。

(2)新梢：长度：平均长(cm)、粗度(cm)、节间长(cm)、颜色：黄绿、绿、淡紫、深紫

(3)叶（偶数羽状复叶）

小叶：互生或对生

大小(长、宽)

色泽

形状(披针形、椭圆形、菱形、卵圆形、尖卵圆形、倒卵圆形)

叶缘(全缘、波状、弧曲齿牙)

叶脉(正面明显、中等，不明显或背面明显，中等，不明显)。

嫩叶颜色：绿、淡紫、紫、深紫。

果实特征：

（1）果实大小：85克以上为特大果,25—34.9克为大果,16—24.9克为中果,16克以下为小果。果横径(阔、厚)纵径以10个果平均计。

（2）果重：克，以１０个果平均计。

（3）整齐度：整齐—果实大小基本一致；不整齐—果实大小不一致。

（4）形状：圆形、卵圆形、椭圆形、长卵圆形、长椭圆形、心形、长心形等。

（5）果色：淡红、鲜红、红、彩红、暗红、淡紫红、紫红、玫瑰红、绿色、绿色带微红、红色带微绿、淡红色带微黄。

（6）龟裂片：以果实中部龟裂片为准。龟裂片有大小及形状两项目。形状又分为：锥尖

状突起、乳状隆起、平滑、微凹。龟裂片排列整齐与否，有无夹杂小龟裂片。（7）裂片峰：、以果实中部裂片峰为准。有锐尖、楔形、钝、平滑、微尖、毛尖等形状。（8）裂纹：深、浅、阔、窄；明显、不明显。

（9）缝合线：深、浅、阔、窄；明显、不明显。

（10）果皮：厚、薄、韧、脆。十个果皮平均重：克

（11）果肩：耸起、平、斜、一高一低。

（12）果顶：浑圆、钝圆、尖圆。

（13）果梗直径：粗、中、细。

（14）果蒂直径：大、中、小。长度单位为毫米。

（15）种柄：大、中、小；深、阔。长度单位为毫米。

（16）果肉颜色：蜡白、黄褐色。

（17）肉厚：十个果实的纵剖面,量果中部肉最薄一边及肉最厚一边。

（18）肉质：脆、韧、软、硬；粗、细。褐色部分：多、中、少。

（19）果汁：多、中、少。

（20）风味：浓甜、甜、清甜、淡、甜酸适度、微酸、酸、极酸、微涩、异味。

（21）可食部分占全果重的百分比：果重减去皮和核重除以果重乘以100。

（22）可溶性固形物的百分比：用手持测糖计测定。

（23）香气：微香、无香、特殊香味。

（24）品质：极上、上、上中、中、下。

（25）含酸量的测定、含糖量的测定：

（26）维生素C的测定：

（27）贮运能力：可能贮藏天数。

（28）加工性能：制干、制糖水罐头的成数及品质。

种子:

（1）大小：大、中、小。长度单位为厘米（长、阔、厚）。

（2）形状：长椭圆形、椭圆形、狗牙形、不规则形。

（3）尖端：尖、钝。核纹：有、无。色泽：黄褐、褐、黑褐。

果顶

形状

实验五柑桔种胚分离培养

一、实验目的

柑桔种子的多胚性和珠心胚的生长优势现象，给有性杂交育种工作带来了很大的困难，为了有效地增加有性胚(合子胚)的成苗率，克服珠心胚的干扰，提高杂种率或为了增加珠心胚的出苗率，获得更多的珠心苗，为进一步开展珠心系选种创造条件。

二、方法

1、材料及用具：柑桔种子、恒温箱、烧杯、镊子、瓷盘、粗天秤、纱布。

2、药品：红汞、蒸馏水(或无菌水)。

3、步骤

(1) 将种子放入烧杯中，加入适量的清水浸种约2小时。

(2) 将已浸2小时的种子取出，用镊子轻轻从种子的合点开始除去内外种皮，放入烧杯内，加入600倍的红汞溶液约15分钟。

(3) 将已消毒的种子取出，浸入无菌水中30分钟后，各胚将自然松开。

(4) 用镊子将每一粒种子的胚分开，置于瓷盘中(同一粒种子的胚按大、小排列成一排)。置于恒温室或恒温箱中(保持26—28℃)3—5天后统计其发芽率。

柑桔种胚发芽率统计表

实验六园艺植物选择育种

一、目的要求：

了解龙眼、荔枝、枇杷等园艺植物优良单株选种的标准，学习根据选种目标进行优良单株选择的方法。

二、材料和用具

结果三年以上的果园，管理水平中上，树势强健，无严重的病虫害，产量比较稳定，果穗较紧凑，座果率较高，符合选种目标的优良单株作选择的材料。

用具：米尺、枝剪、毛笔、铅笔、标签、采果袋、油漆、卡尺、天平、测糖仪、托盘、果刀、记载表、照相机等。

三、说明

龙眼、荔枝、枇杷是我区重要的亚热带果树，是我国加入WTO后最具市场竞争力的果树之一。但目前龙眼、荔枝、枇杷品种存在产量不稳定、成熟期过于集中、缺乏优良的早熟、特早熟及晚熟等优良品种等问题，又由于生育期长，杂交育种等育种技术研究较少，加上龙眼、荔枝、枇杷目前存在大量的实生树，生产上多采用无性繁殖，个体之间存在差异。因此，有目的的进行经常性选种，可保持优良品种的种性并及时发现优良变异单株，具有重大意义。

四、方法和步骤

1、熟悉和掌握选种标准及方法。

2、实地调查、采样、测定

在确定田间初选单株前，应尽量了解该单株的立地条件、树势、栽培管理情况及历年表现，并根据选种标准进行目测及简单的估产，随机采果（在树冠东、南、西、北、上、下进行随机采样），实验室进行果实品质的鉴定。

3、根据各单株的记载资料及评分结果，确定入选单株，作进一步选种材料。

表一果树优良单株选种田间记载表

表二果树优良单株选种果实品质鉴定记录表

附表二优质龙眼的指标

实验七园艺植物品种调查及育种方案的制订

一、目的意义

通过对园艺植物品种的特性、结构、良种比例及品质与价格的关系等项目的调查分析，了解当前我国或我区的园艺品种现状及品种结构状况，提出可行的育种方案，训练学生解决生产实际问题的能力。

二、材料和用具

1、材料：园艺植物产品

2、用具：米尺、枝剪、毛笔、铅笔、标签、采果袋、油漆、卡尺、天平、测糖仪、托盘、果刀、记载表、照相机等。

三、实验步骤和方法

1、自选一种园艺植物，查阅相关资料，了解其经济生物学特性；

2、到果园、菜地和市场进行该园艺植物品种的特性、结构、良种比例及品质与价格的关系等项目的调查分析；

3、选取具有代表性的品种样品进行品质测定；

4、撰写约1000字的调查报告及育种计划

（要求：(1)对所调查的品种和项目进行总结比较；（2）根据调查结果，选其中一个品种，制订出育种方案）

实验八园艺植物花粉单核期观察

一、实验目的

在单倍体育种技术花药培养中，花药的发育时期与花药组织培养的成功有很大关系，本实验的目的就是学习掌握鉴定园艺植物花粉单核期的方法。了解花粉发育与花芽外部形态发育的对应时期，为花药培养适期采样接种提供依据。二、实验原理

园艺植物（被子植物）的花粉发育过程可以分为四个阶段。

（一）四分孢子阶段的四分孢子期：

1.花粉母细胞经过减数分裂形成四个小细胞，这四个小细胞在显微镜下呈四角体连接在一起——花芽稍膨大。

（二）单核阶段：

这个阶段指从四分孢子分开至小孢子第一次有丝分裂为止

1.单核早期：细胞圆球形，核居正中，细胞质浓度均匀，颜色浅，无液泡——花芽继续膨大

2.单核中期：小孢子壁出现发芽沟，逐渐出现孔沟。细胞核居中，出现小的液泡，细胞质浓度不均匀，染色较深——花芽膨大。

3.单核后期：中小液泡合并成大液泡，将细胞核压至靠近细胞壁的边缘——花芽膨大。

4.单核末期：大液泡消失或缩小，核逐渐移至中央，但此时细胞核比单核早期明显增大——淀粉含量增多。

（三）有丝分裂期

细胞核进行有丝分裂，经历前中后期，分裂成两个细胞，一大一小．—萼