离子对分配色谱法测定复方磺胺甲恶唑片中两组分的含量
复方磺胺甲恶唑的含量测定
高效液相色谱法测定复方磺胺甲噁唑片的含量［实验目的］1掌握高效液相色谱法测定复方磺胺甲噁唑片的含量的基本原理2掌握高效液相色谱仪的操作及注意事项［实验原理］结构特点：苯环（紫外吸收）、芳伯胺基（重氮化-偶合反应）、磺酰胺基上的活泼氢有一定酸性，可与碱成盐或与重金属离子反应。
分子式：C10H11N3O3S 分子质量：253.28。
本品为白色结晶性粉末。
熔点167℃，易溶于稀盐酸；氢氧化钠溶液或氨水，几乎不溶于水。
无臭，味微苦。
外标法是以待测组分的纯品作为对照品，以供试品中待测组分的峰面积或峰高进行定量分析，本实验采用峰面积进行定量。
分别精密量取一定量的对照品和供试品配制成溶液，分别进相同的体积的对照品溶液和供试品溶液，在完全相同的色谱条件下进行色谱分析，测定峰面积。
［实验仪器、试剂］仪器：75-4型紫外可见分光光度计 (上海分析仪器厂 )，高效液相色谱仪，色谱柱，超声波清洗仪，紫外吸收检测器，无油隔膜真空泵，抽滤装置，电子分析天枰，称量纸，研钵，容量瓶（100ml,50ml,25ml,10ml），漏斗，滤纸，烧杯，玻璃棒，移液枪试剂：复方磺胺甲噁唑片(山东新华制药股份有限公司 ,批号 0412073 )，甲氧苄啶，磺胺甲噁唑，甲醇（色谱纯）,水（超纯水），乙腈(色谱纯)，三乙胺 (色谱纯)，醋酸溶液（1→100），［实验步骤］1.色谱条件与系统适用性试验：填充剂：十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂流动相：水-乙腈-三乙胺（799∶200∶1）（用醋酸溶液（1→100）调节pH值至5.9±0.1）检测波长：254nm流速：1.0mL/min进样量：20ul理论塔板数：按甲氧苄啶计算应不低于2000，甲氧苄啶与磺胺甲噁唑峰之间的分离度应大于 5.0。
甲氧苄啶峰与磺胺甲噁唑峰的拖尾因子均不得过2.0。
2.测定法2-1溶液的配制2-1-1对照品储备液的配制：取磺胺甲噁唑200mg，精密称定，置50ml容量瓶中，加甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，备用。
实验六复方磺胺甲恶唑片含量测定课件
结果与讨论
结果总结
对实验结果进行总结，概述复方磺胺甲恶唑片的含量测定结果。
结果解释
根据实验结果，对复方磺胺甲恶唑片的含量进行解释，分析可能的 影响因素。
讨论
根据实验结果，对复方磺胺甲恶唑片的含量测定方法、实验过程等 方面进行讨论，提出改进意见和建议。
05 实验结论
实验总结
实验原理
通过高效液相色谱法，利用不同物质在色谱柱上的吸附或溶解 能力不同，在流动相与固定相之间，将不同的物质分离出来。
色谱条件设置
根据实验原理和仪器说明书，设置色谱柱、流动相、检 测波长等参数。
样品测定
分别进样对照品溶液和样品溶液，记录色谱图，测量各 组分的峰面积或峰高。
数据处理
根据峰面积或峰高，计算各组分的含量。
02 实验材料与设备
实验材料
对照品：磺胺甲恶唑和甲 氧苄啶
实验用水：超纯水
流动相：磷酸盐缓冲液
试剂：氢氧化钠、盐酸、 甲醇等
胺甲恶唑片的含量。
误差分析
03
对计算过程中可能产生的误差进行分析，评估结果的准确性。
结果可靠性分析
重复性实验
为了验证结果的可靠性，需要进行重复性实验， 并对多次实验结果进行比较和分析。
对照实验
通过设置对照组，对比实验组和对照组的结果， 判断实验结果的可靠性。
数据检验
采用合适的统计方法对实验数据进行检验，如t检 验、F检验等，以确定结果的可靠性。
测定步骤
3. 根据吸光度和标准曲线，计算出复 方磺胺甲恶唑片中主要成分的浓度。
4. 根据浓度计算出样品中药物的含量。
04 结果分析与讨论
数据处理与结果计算
数据处理
01
将实验过程中收集的数据进行整理、筛选和清洗，确保数据的
高效液相色谱法测定复方磺胺甲恶唑片中SMZ、TMP的含量
高效液相色谱法测定复方磺胺甲恶唑片中SMZ、TMP的含量吕璐;石向群;郑由敏;周凯凤;孙利利【摘要】目的建立测定复方磺胺甲恶唑片中磺胺甲恶唑(SMZ)和甲氧苄啶(TMP)含量的高效液相色谱(HPLC)法.方法色谱柱C18 (5 μm,4.6 mm × 150 mm),以0.03 mol/L磷酸(含0.2%三乙胺)-甲醇为流动相进行梯度洗脱,流速1.0 ml/min,检测波长为240 nm,柱温40℃,峰面积外标法.结果 SMZ在20～100 μg/ml有良好的线性,r=0.993 1;TMP在4～20 μg/ml有良好的线性,r=0.996 6.结论此法简单、专属性强、重现性好、结果准确,可作为该片剂质量控制的参考方法.【期刊名称】《卫生职业教育》【年(卷),期】2011(029)008【总页数】2页(P110-111)【关键词】高效液相色谱法;复方磺胺甲恶唑片;SMZ含量;TMP含量【作者】吕璐;石向群;郑由敏;周凯凤;孙利利【作者单位】九江学院基础医学院,江西,九江,332000;九江学院基础医学院,江西,九江,332000;九江学院基础医学院,江西,九江,332000;九江学院基础医学院,江西,九江,332000;九江学院基础医学院,江西,九江,332000【正文语种】中文【中图分类】G424.31复方磺胺甲恶唑片是临床常用的磺胺类抗菌消炎药，其主要成分为磺胺甲恶唑（SMZ）和甲氧苄啶（TMP）。
《中国药典》（2000年版）采用等吸收双波长分光光度法对2组份分别进行测定。
另有文献报道采用倍率减差双波长法、三波长法、吸收度线性线合法、双波长比值光谱法等方法测定其含量，但均存在操作或计算较为繁琐的缺点。
现采用高效液相色谱法，对2组份SMZ、TMP同时进行测定。
高效液相色谱仪（瓦里安Varian Prostar 230 SDM/325 UV）；液相工作站（Varian Star 6.4）；电子分析天平（赛多利斯Sartorius CP324S）；高速离心机（中佳HC-2518）；超声波清洗机（宁波新芝生物）；无油隔膜真空泵（天津奥特赛恩斯）。
CPA矩阵分光光度法同时测定复方磺胺甲噁唑片两组分含量
CPA矩阵分光光度法同时测定复方磺胺甲噁唑片两组分含量陈伟;罗红斌;林新华
【期刊名称】《光谱实验室》
【年(卷),期】2004(021)004
【摘要】应用CPA矩阵分光光度法,不经分离直接测定复方磺胺甲噁唑片中两组分含量.选取220、228、254、260、261nm 5个波长作为CPA矩阵程序的最佳波长点,磺胺甲噁唑的平均回收率和相对标准偏差分别为:99.7%和0.85%;甲氧苄氨嘧啶为99.9%和1.1%.
【总页数】3页(P643-645)
【作者】陈伟;罗红斌;林新华
【作者单位】福建医科大学药学系,福州市交通路88号,350004;福建医科大学药学系,福州市交通路88号,350004;福建医科大学药学系,福州市交通路88号,350004【正文语种】中文
【中图分类】O657.32
【相关文献】
1.P—矩阵分光光度法测定苯酚水杨酸酊的两组分含量 [J], 金卫民;张凌
2.CPA矩阵法测定复方氯丙嗪中二组分含量 [J], 叶青;黄河舟
3.卡尔曼滤波分光光度法同时测定复方磺胺甲(口恶)唑片两组分含量 [J], 陈伟;罗红斌;林新华
4.CPA矩阵法测定肺保三效片中六组分含量 [J], 黄喜茹;张振华;刘伟娜;郭栋;魏建层
5.统计模拟分光光度法测定复方制剂组分含量的研究───小儿复方苯巴比妥片组分含量测定新方法的制订 [J], 王玺;卢静华;周炬;朱舸;毕开顺;杜立颖;罗旭
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复方磺胺甲恶唑片中磺胺甲恶唑的含量测定
验证性试验实验十八复方磺胺甲噁唑片中磺胺甲恶唑的含量测定一、实验目的1.掌握双波长法的基本原理。
2.掌握复方制剂不经分离直接测定各组分含量的方法。
3.熟悉紫外分光光度仪的使用。
二、仪器与试药1.仪器Mettler AL204电子天平 752型紫外－可见分光光度仪研钵定量滤纸（直径10cm）胖肚移液管规格：25mL容量瓶规格：25mL 、100mL 刻度移液管规格：10mL2.试药复方磺胺甲噁唑片规格：含磺胺甲噁唑（SMZ） 0.4g、甲氧苄啶（TMP） 0.08ｇ95%乙醇氢氧化钠硫酸三、实验原理1.双波长分光光度法（1）双波长分光光度法消除干扰吸收的基本原理在干扰组分的吸收光谱上吸收系数相同的两个波长处，若被测组分的吸收系数有显著差异，则可用于消除干扰吸收，即直接测定混合物在此两波长处的吸收度之差值，该差值与被测物浓度成正比，而与干扰物浓度无关。
用数学式表达如下：ΔA（λ1λ2）=A a+b1-A a+b2=A a1-A a2+A b1-A b2=ΔE.a C a.L+ΔE b.C b.L若b为干扰物，所选波长λ1λ2处的E b相等，所以ΔE b=0则ΔA混=ΔE a.C a.L与干扰物浓度无关。
（2）双波长法测定复方磺胺甲噁唑片中SMZ含量的原理复方磺胺甲噁唑片是含磺胺甲基异噁唑（SMZ）及甲氧苄啶（TMP）的复方制剂。
在0.1mol/L 氢氧化钠液中，SMZ在257nm波长处有一最大吸收峰，TMP在257nm和304nm波长处为等吸收点，而SMZ在这两波长处的吸收度差异大，见下图。
所以测得样品在257nm和304nm波长处的吸收度差值ΔA与SMZ浓度成正比，与TMP浓度无关。
四、实验内容1.工作曲线的制备（1）标准贮备液的配制分别精密称取磺胺甲基异噁唑对照品0.1g ，置100mL 容量瓶中，加入50m L 95%乙醇溶解后，以0.1mol/L 氢氧化钠液稀释至刻度，吸取10mL 置100mL 容量瓶中，以0.1mol/L 氢氧化钠液稀释至刻度，得标准贮备液（100μg /mL ）。
复方磺胺甲恶唑片含量测定
中，加0.01mol/l氢氧化钠溶液稀释至刻度，摇匀，在254nm
的波长处测定吸收度，按磺胺嘧啶（C10Hl0N4O2S）的吸收系
数（
E 1% 1cm
）为866计算出每片的溶出量，限度为标示量的70％，
应符合规定。
计算公式如下：
19
A 1% 稀释倍数 溶液总体积
溶出量％＝
E 1% 1cm
➢ 与芳醛在酸性溶液中缩合：生成有色的希夫碱。
3
3
二、磺胺类药物的鉴别
1．化学鉴别法 （1）铜盐反应
4
可初步区别结构类似的磺胺药
4
磺胺类药物与铜盐的反应
药物名称
加入硫酸铜试液后的现象
磺胺甲噁唑 磺胺异噁唑 磺胺嘧啶 磺胺多辛
生成草绿色沉淀 呈淡棕色，放置析出暗绿色絮状沉淀 生成黄绿色沉淀，放置后变为紫色 生成黄绿色沉5淀，放置后变淡蓝色
磺胺异噁唑 取 供 试 品 约 0.5g ， 精 密 称 定 ， 加 二 甲 基 甲 酰 胺 40ml溶解后，加偶氮紫指示液3滴，用甲醇钠滴定 液(0.1mol/L)滴定，至溶16液恰显蓝色，并将滴定的 结 果 用 空 白 试 验 校 正 。 每 1ml 甲 醇 钠 滴 定 液 (0.1mol/L)相当于26.73mg的C11H13N3O3S。
图16-1 磺胺嘧啶的红外吸收光谱
9
三、磺胺嘧啶的检查
1．溶液澄清度与颜色的检查 有色的氧化产物——偶氮苯化合物
H3N2C4HNO2S
NN
SO2NHC4N2H3
方法：比色法
要求：澄清无色；如显色10 ，与黄色3号标准比色 液比较，不得更深。
10
2．有关物质的检查 目的：控制药物的纯度。 方法：薄层色谱法，主成分自身对照法 杂质的限度：0.5％。 3．干燥失重
复方磺胺甲恶唑片有效成分含量测定方法的研究
复方磺胺甲恶唑片有效成分含量测定方法的研究
万仁忠;晁储禄
【期刊名称】《山东畜牧兽医》
【年(卷),期】1999(000)003
【摘要】采用转换曲线分光光度法可同时测定复方磺胺甲恶唑片中磺胺甲恶唑和甲氧苄啶的含量，在２７６～２８８ｎｍ范围，上述２者的平均回收率分别为９９．８４％和１００．３９％，ＣＶ分别为０．３９％和０．７６％。
【总页数】2页(P7-8)
【作者】万仁忠;晁储禄
【作者单位】山东农业大学兽药研究所;山东农业大学兽药研究所
【正文语种】中文
【中图分类】S859.2
【相关文献】
1.冬凌草药材及其制剂有效成分含量测定方法研究进展 [J], 樊东升;陈洁忠;王艳丽;田瑞昌
2.比卡鲁胺片有效成分含量测定方法研究 [J], 孙宏宇;李伟
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5.基于超高效液相-四极杆飞行质谱联用技术的牛黄清感胶囊有效成分含量测定方法研究 [J], 庄岩;遆铁军;霍金海;朱立刚;赵雪莹;周有财;王伟明
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复方磺胺甲恶唑片含量测定
18
磺胺嘧啶片的溶出度测定
检查方法：
取供试品照溶出度测定浆法，以盐酸溶液
(9→1000)1000ml 为 溶 剂 ， 转 速 为 100r/min ， 依 法 操 作 ， 经
60分钟，取溶液5ml滤过，精密量取续滤液1ml，置50ml量瓶
➢ 与金属离子生成沉淀：铜盐沉淀的颜色随N1取代 基的不同而异，有的还有颜色变化过程，常用于磺 胺类药物的鉴别。
➢ 芳伯氨基反应：可发生重2 氮化-偶合反应，产生有 色沉淀
2
➢ N1上的芳杂环取代基具有碱性，可与有机碱沉淀剂 反应：生成沉淀。
➢ 乙酰化反应：芳伯氨基经醋酐酰化后（即乙酰化）， 在显微镜下观察，都具有特殊的结晶形状，可做鉴 别反应。
14
计算公式：
25.03V cNaNO2 103
磺胺嘧啶含量%
0.1
100%
W
主要条件：（1）加入适量KBr
（2）酸的种类及用量
芳胺∶盐酸＝1∶2.5~6
（3）室温条件下15滴定 （4）滴定速度
（5）指示终点的方法 药典采用永停法
15
2．非水溶液滴定法
含磺酰亚氨基－SO2－NH－R，其N上的H具有 一定酸性（R吸电子效应越强，N上的H越易失去， 酸性越强），故可用非水酸碱滴定法测定。
5
（2）重氮化-偶合反应
A r N H2 HClN ,a NO2 重 氮盐OH ,β 萘酚 橙黄色— 猩红色的偶氮染料
6
6
（3）芳伯氨基与芳醛的缩合反应
Ar NH 2 芳醛 H 有色希夫氏碱
芳醛： 对二甲氨基苯甲醛、香草醛、水杨醛等
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摘 要； 目的
结果
建 立离子对 分配 色谱法测定 复方磺胺 甲口 片中磺胺 甲口 恶唑 恶唑 和 甲氧 苄啶 的含 量 。方 法 流动相 为甲醇 ：
０３ 磷 酸 二 氢钾 ｛ ． ５ ｌＬ 四丁 基 溴 化 钹 （５ ４ ５ 。 ＳＣｌ 为 色 谱 柱 。 温 ２ ℃ ， ．４ ０ ０ｍｏ／ ５ ５： ）ＯＤ 。 柱 柱 ５ 流速 １Ｏ ／ ｎ 检 测 波 长 ２ ０ ｍ。 ． ｍｌｍｉ。 ４ｎ
磺 胺 甲 嚼 唑 在 ４ ～２ ｏ ｇ ｍｌｒ ． ９ ９ 、 ｏ Ｏ ／ （—Ｏ ９ ９ ） 甲氧 苄 啶 在 ８ ｏ ｇ ｍｌｒ ． ９ ８ 的 浓 度 范 围 内 呈 线 性 关 系 。 均 回收 率 分 别 ～４ ／ （ ＝Ｏ ９ ９ ） 平 该 法专 属 性 强 ， 作 简 便 ， 果 准 确 。 操 结
１２ 试 药 ．
精 密 称 取 磺胺 甲 嘿 唑 对 照 品 ４ ｍｇ 甲氧苄 啶对 ０ ，
照 品 ８ ， ５ ｍｌ ｍｇ 置 ０ 容量 瓶 中 ， 甲醇 适 量 使 溶 ， 流 加 用
动相稀 释至 刻度 ， 摇匀 ， 储备 液 。精 密量取 该储 备液 作
１ ０ １ ５ ２ ０ ２ ５ ３ ０ ３ ５ ４ ０和 ５ ０ 置 ２ ｍｌ ． 、． 、． 、． 、． 、． 、 ． ． ｍｌ ０ 容
成代 谢遭 到双重 阻 断 ， 协 同作 用 ， 强磺 胺 药抗菌 活 有 增 性， 使抑 菌 作用 转 为杀 菌 作用 ， 减少 耐 药 菌株 产 生 ， 临
床主要 用 于敏 感菌 所 致 的小 儿 急性 中耳炎 、 人 慢性 成
速 １ Ｏ ／ ｎ 检 测波 长 ２ ０ ｍ， ． ｍｌｍｉ ， ４ ｎ 进样 量 ２ ９ 。理论 板 ０１
Ｄｅ ｅ ｍ ｉ ａ ｉ ｎ ｏ ｗｏ ｃ ｍ ｐｏ ｎｔ ｆ ｃ ｍ ｐ ｕｎｄ ｓ ｆ ｍ ｅ ｈｏ ａ ｏ ｅ ｂ ｔ ｒ ｎ ｔｏ ｆｔ ｏ ｎｅ ｓｏ ｏ ｏ ｕｌａ ｔ ｘ ｚ ｌ ｙ
ｉ ｎ— ｉ ｒ ｉｉ ｎ ｃ ｒ ｍ ａ ｏ ｒ ｐｈｙ ｏ ｐａ ｒ ｐａ ｔｔｏ ｈ ｏ ｔｇ ａ
贺 玉峰
Ｈ ｅ Ｙ ｕ ｆ ｎｇ —ｅ
（ 南 省 三 门峡 市 药 品检 验 所 。 三 门峡 ４ ２ ０ ） 河 ７０ ０
（ ａ ｍｅ ｘ ａ Ｉ ｓ ｉ ｔ ｏ ｕ ｎ ｒ ｌ Ｓ ｎ ｎ ｉ ４ ２ ０ ） Ｓ ｎ ｎ ｉ ｎ ｔ ｕ ｅ ｆ ｒＤｒ ｇ Ｃｏ ｔｏ ， ｔ ａ ｍｅ ｘ ａ ７ ０ ０
磺胺 甲 唑 （ 国 药 品 生 物 制 品 检 定 所 ， 号 中 批
０ ２ ５ ３ ， ０ ５ ９ ０ ） 甲氧 苄 啶 （ 国药 品生 物 制 品 检定 所 ， 中 批 号 １ ０ １２ ０ ０ ） 甲醇 （ 谱 纯 ） 磷 酸 二 氢 钾 （ 析 ０ ３ ０ ３ ４ ， 色 ， 分 纯 ） 四丁 基 溴化 铵 （ 析 纯 ） 复 方 磺胺 甲 曙 唑 片 （ ， 分 ， 市
２ ３ 线性关 系 ．
支气 管炎 、 尿道 感染 、 肠道 感染 等 。本 文采 用离 子对分
配 色谱 法测 定 复方 磺 胺 甲 嗯 唑 片主要 成 分磺 胺 甲曝
唑、 甲氧苄 啶 的含量 ， 方法 准确 、 简便 、 可靠 。
１ 仪器 与试药
１ １ 仪 器 ．
Ｉ 一０ １ ＡＴ 高效 液相 色谱仪 （ Ｃ 日本 岛津 ） Ｓ Ｄ １ Ａ ，Ｐ 一０
可见 紫外检 测器 （ 日本 岛津 ） Ｎ２ ０ ， ０ ０数据工 作 站 （ 江 浙 大学 智 能 信 息 研 究所 ） ９ Ｓ ２ ２ Ｄ Ｓ Ｓ分 析 天 ， ２ Ｍ一 ０ Ａ— Ｒ—Ｃ 平（ 士 Ｐ ｅｉ ） ＵＶ一 ６ 瑞 ｒｃ ａ ， ｓ ２ ５分光光 度计 （ 日本 岛 津） 。
维普资讯
中 国 抗 生 素 杂 志 ２０ ０ ６年 １月 第 ３ 卷 第 １ １ 期
・５ ・ ９
文 章 编 号 ： ０ １ ８ ８ （ ０ ６ Ｏ 一 ０ ９ｏ １ ０ — ６ ９ ２ ０ ） ｌ０ ５ － ２
离 子对 分 配 色谱 法 测 定 复 方磺 胺 甲 唑片 中两 组 分 的 含 量
售 ） 。 ２ 方 法 和 结 果
量瓶中， 加流 动相 稀 释至刻 度 ， 匀 。照高效 液相 色谱 摇
法 ， 样 ２ ， 录色谱 图 ， 进 Ｏ ｌ记 以峰面 积 （ 对 浓度 （ 作 ） Ｃ）
图进行 统计 学处理 ， 回归 方程 分别 为 ： 磺 胺 甲嘿 唑 甲氧苄 啶 Ａ—１ ４ ２ ． ０ ×１ ． １ ＋１ ９ ５ ０Ｃ
为 １０ ３ 、０ ． ； Ｓ 分别 为 ０ ２ 、． ２ 。 结 论 ０ ． ％ １０ ６ Ｒ Ｄ ． ９ ０ ３
关 键 词 ： 离子 对 分 配 色 谱 法 ； 磺 胺 甲［ 唑 ； 甲 氧 苄 啶 ； 含 量测 定 瑶
中 国分 类 号 ： ２ ． Ｒ９ ７ ２ 文献标识码 ： Ａ
复方 磺胺 甲嗯 唑片 是磺 胺 甲曙 唑 与 甲氧 苄 啶的
复方制 剂 ， 甲氧苄 啶 与磺 胺药 合 用 可使 细 菌 的 叶酸合
１０ ５ ｍｍ，５ｃ ； 动相 为 甲醇 ； ． ４ 磷酸 二氢 钾 ： ｂ ｍ） 流 ０ ３
０ ０ ｍｏ／ 四丁基 溴化 铵 （ ５： ５：５ ； ． ５ ｌＬ ５ ４ ） 柱温 ２ 流 ５ Ｃ；
数按 磺胺 甲 曝 唑峰 计算 不低 于 ３ ０ ， ０ ０ 按峰 面积外 标法
计算 。 ２ ２ 检 测波 长确定 ． 文献Ｅ选 用 ２ ０ ｍ 或 ２ ４ ｍ［ 为检 测 波 长 。经 ４ｎ ５ｎ 试 验 比较 ， 因处 方 中 甲氧 苄 啶 的 量很 少 ， ２ ０ ｍ 处 在 ４ｎ 甲 氧 苄 啶 峰 面 积 更 大 ， 测 灵 敏 度 更 高 ， 选 用 检 故 ２ ０ ｍ 为检 测波 长 。 ４ｎ