酒精代谢酶基因多态性与酒精性肝病关系研究探讨_薛成荣
酒精性肝病的遗传易感性研究现状 杨馥宁
Ｋ ｅ ｙｗ ｏ ｒ ｄ ｓ ： ｌ ｉ ｖ ｅ ｒ ｄ ｉ ｓ ｅ ａ ｓ ｅ ｓ ，ａ ｌ ｃ ｏ ｈ ｏ ｌ ｉ ｃ ；ｇ ｅ ｎ ｅ ｔ ｉ ｃｐ ｒ ｅ ｄ ｉ ｓ ｐ ｏ ｓ ｉ ｔ ｉ ｏ ｎｔ ｏ ｄ ｉ ｓ ｅ ａ ｓ ｅ ；ｐ ｏ ｌ ｙ ｍ ｏ ｒ ｐ ｈ ｉ ｓ ｍ ，ｓ ｉ ｎ ｇ ｌ ｅ ｎ ｕ ｃ ｌ ｅ ｏ ｔ ｉ ｄ ｅ ；ｒ ｅ ｖ ｉ ｅ ｗ
ｄ ｏ ｉ ： １ ０ ． ３ ９ ６ ９ ／ ｊ ． ｉ ｓ ｓ ｎ ． １ ０ ０ １－ ５ ２ ５ ６ ． ２ ０ １ ７ ． ０ ２ ． ０ ３ ９ 收稿日期： ２ ０ １ ６－ ０ ９－ １ ８ ； 修回日期： ２ ０ １ ６－ １ ０－ １ ２ 。 作者简介： 杨馥宁（ １ ９ ９ ０－ ） ， 女， 主要从事临床检验诊断学与免疫学 方面的研究。 通信作者： 黄晶， 电子信箱： ｊ ｌ ｕ ｈ ｕ ａ ｎ ｇ ｊ ｉ ｎ ｇ １ ＠１ ２ ６ ． ｃ ｏ ｍ 。
Ｏ Ｒ＝ ２ ． ７ ９ ， ９ ５ ％Ｃ Ｉ ： １ ． １ ３ ６ ． ９ ２ ， Ｐ＝ ０ ． ０ ２ ６ ； Ｏ Ｒ 相关（ ＝ ３ ． ５ ０ ， ９ ５ ％Ｃ Ｉ ： １ ． ７ ３ ７ ． ０ ８ ， Ｐ＝ ０ ． ０ ０ １ ） 。研究表明 Ｓ Ｏ Ｄ ２基因多态性可增加对酒精性肝硬化的易感性， 提示氧化应激在酒精性肝硬化发展过程中具有重要 作用。 谷胱甘肽 Ｓ － 转移酶（ Ｇ Ｓ Ｔ ） 是体内生物转化最重 要的Ⅱ相代谢酶， 参与机体解毒并具有抗氧化作用。
Ｒ ｅ ｓ ｅ ａ ｒ ｃ ｈｐ ｒ ｏ ｇ ｒ ｅ ｓ ｓ ｉ ｎｇ ｅ ｎ ｅ ｔ ｉ ｃｓ ｕ ｓ ｃ ｅ ｐ ｔ ｉ ｂ ｉ ｌ ｉ ｔ ｙｔ ｏａ ｌ ｃ ｏ ｈ ｏ ｌ ｉ ｃｌ ｉ ｖ ｅ ｒｄ ｉ ｓ ｅ ａ ｓ ｅ
外周血PNPLA3 rs738409基因多态性与非酒精性脂肪性肝病遗传易感性研究
∗基金项目:贵州省自然科学基金资助项目(编号:715232)作者单位:550002贵阳市贵州省骨科医院内科(李伟,钟璟,韦隽);贵州医科大学附属医院内科(黄宇)第一作者:李伟,男,39岁,大学本科,医师㊂E-mail:gzdwtg@ 通讯作者:黄宇,E-mail:wsql-bio@ ㊃非酒精性脂肪性肝病㊃外周血PNPLA3rs738409基因多态性与非酒精性脂肪性肝病遗传易感性研究∗李伟,黄宇,钟璟,韦隽㊀㊀ʌ摘要ɔ㊀目的㊀分析patatin样磷脂酶结构域蛋白3(PNPLA3)rs738409基因多态性与非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)遗传易感性的关系㊂方法㊀2017年11月~2019年11月我院诊治的162例NAFLD患者和同期体检的100例健康人,采用聚合酶链式反应-限制性片段长度多态性检测外周血PNPLA3rs738409位点多态性㊂结果㊀NAFLD组PNPLA3基因rs738409位点GG基因型频率为37.0%,G等位基因频率为58.3%,显著高于健康人(分别为11.0%和34.0%,P<0.05),而GC和CC基因型频率分别为42.6%和20.4%,C等位基因频率为41.7%,与健康人的46.0%㊁43.0%和66.0%比,差异无统计学意义(P>0.05);73例GG基因型的NAFLD患者血清ALT和AST水平分别为(118.5ʃ20.3)U/L和(85.2ʃ14.7)U/L,显著高于65例GC基因型患者[分别为(93.3ʃ16.4)U/L和(59.6ʃ10.3)U/L,P<0.05]或24例CC基因型患者[分别为(65.9ʃ11.8)U/L和(31.9ʃ5.5)U/L,P<0.05];GG和GC基因型NAFLD患者血清TG水平分别为(2.0ʃ0.5)mmol/L和(1.6ʃ0.4)mmol/L,均显著高于CC基因型NAFLD患者[(1.1ʃ0.2)mmol/L,P<0.05]㊂结论㊀本研究结果提示PNPLA3rs738409基因多态性与NAFLD遗传易感性有关,其影响机制有待进一步研究明确㊂㊀㊀ʌ关键词ɔ㊀非酒精性脂肪性肝病;patatin样磷脂酶结构域蛋白3;单核苷酸多态性;易感性㊀㊀DOI:10.3969/j.issn.1672-5069.2022.02.019㊀㊀Correlation of PNPLA3rs738409gene polymorphism to genetic susceptibility of patients with nonalcoholic fatty liver disease㊀Li Wei,Huang Yu,Zhong Jing,et al.Department of Internal Medicine,Guizhou Orthopedics Hospital,Guiyang550002,Guizhou Province,China㊀㊀ʌAbstractɔ㊀Objective㊀The aim of this study was to analyze the correlation of rs738409gene polymorphism of patatin likephospholipase domain containing protein3(PNPLA3)to genetic susceptibility of patients with nonalcoholic fatty liver diseases(NAFLD).Methods㊀162patients with NAFLD and100healthy persons were recruited in our hospital between November2017and November2019.The peripheral blood PNPLA3rs738409locus polymorphism was detected by polymerase chain reaction-restriction fragment length polymorphism.Results㊀The frequencies of GG genotypes and the frequencies of G alleles at rs738409locus of PNPLA3gene in patients with NAFLD were37.0%and58.3%,both significantly higher than11.0%and34.0%(P<0.05)in healthy individuals,while the frequencies of GC and CC genotypes were42.6%and20.4%,the frequency of C allelewas41.7%,all not significantly different compared to46.0%,43.0%and66.0%in the control(P>0.05);serum alanineaminotransferase and aspartate aminotransferase levels in73NAFLD patients with GG genotype were(118.5ʃ20.3)U/L and(85.2ʃ14.7)U/L,both significantly higher than[(93.3ʃ16.4)U/L and(59.6ʃ10.3)U/L,respectively,P<0.05]in65patients with GC genotype or[(65.9ʃ11.8)U/L and(31.9ʃ5.5)U/L,respectively,P<0.05]in24patients with CC genotype;serum triglyceride levels in patients with GG and GC genotypes were(2.0ʃ0.5)mmol/L and(1.6ʃ0.4)mmol/L,bothsignificantly higher than[(1.1ʃ0.2)mmol/L,P<0.05]in NAFLD patients with CC genotype.Conclusion㊀Our findings suggestthat the PNPLA3rs738409gene polymorphism might be related to genetic susceptibility of individuals to NAFLD,and themechanism involved needs further studied.㊀㊀ʌKey wordsɔ㊀Nonalcoholic fatty liver diseases;Patatin like phospholipase domain containing protein3;Single nucleotidepolymorphism;Susceptibility㊀㊀非酒精性脂肪性肝病(nonalcoholic fatty liverdisease,NAFLD)是一种常见的肝病,在世界范围内发病率大约为25%[1]㊂随着肥胖㊁2型糖尿病和高血压等发生率不断上升,NAFLD患病率亦呈上升趋. All Rights Reserved.势[2]㊂NAFLD发病机制尚不明确,通常认为是由遗传因素和环境因素等多种因素共同作用所致[3]㊂不断有研究指出,基因多态性与NAFLD遗传易感性有关[4]㊂patatin样磷脂酶结构域蛋白3(patatin like phospholipase domain containing protein3,PNPLA3)是patatin样磷脂酶家族成员之一㊂国外文献[5,6]报道,PNPLA3rs738409基因多态性与NAFLD患病有关㊂但国内有关PNPLA3rs738409基因多态性与NAFLD遗传易感性的报道并不多见㊂本研究通过分析外周血PNPLA3rs738409基因多态性探讨了其与NAFLD遗传易感性关系,旨在为发现我国NAFLD 患者新的遗传危险因素,从而为尽早识别易感人群提供线索㊂1㊀资料与方法1.1研究对象㊀2017年11月~2019年11月我院诊治的NAFLD患者162例,男性52例,女性110例;年龄为33~71岁,平均年龄为(52.1ʃ9.1)岁㊂NAFLD 诊断符合‘非酒精性脂肪性肝病防治指南(2018年版)“的标准[7],影像学检查确定存在脂肪肝的表现㊂排除标准:(1)合并药物性肝损伤㊁自身免疫性肝病㊁病毒性肝炎;(2)严重的器质性疾病;(3)长期饮酒且酒精摄入量为男性>140g/周,女性>70g/周㊂选择同期体检的健康人群100例,男性36例,女性64例;年龄为32~72岁,平均年龄为(52.5ʃ9.3)岁㊂纳入健康人群无糖尿病㊁心脏病㊁高血压㊁肝肾功能异常和不饮酒㊂两组研究对象均签署知情同意书,本研究方案符合‘赫尔辛基宣言“及其准则,并通过我院医学伦理委员会审核㊂1.2临床资料的收集㊀收集入选对象性别㊁年龄㊁身高㊁体质量㊁腰围和臀围,计算体质指数(BMI)=体质量(kg)/身高2(m2),腰臀比=腰围(cm)/臀围(cm)㊂常规检测血生化指标㊂1.3外周血PNPLA3rs738409基因测序和分型㊀采用聚合酶链式反应-限制性片段长度多态性(poly-merase chain reaction-restriction fragment length poly-morphism,PCR-RFLP)法检测外周血PNPLA3 rs738409位点多态性,取外周静脉血3mL,立即置入EDTA抗凝管中,采用全血基因组DNA提取试剂盒(购于深圳子科生物科技有限公司)提取基因组DNA㊂调整DNA浓度为50ng/μL,行PCR扩增(试剂盒购于上海百奥生物科技有限公司),PCR扩增体系为:Taq Buffer5.0μL,10mM dNTP1.0μL,Taq酶0.5μL,DNA模板1.0μL,上游引物和下游引物各1.0μL,ddH2O10.5μL,总体积为20μL㊂PCR扩增程序为:95ħ预变性5min,95ħ变性30s,58ħ退火1min,72ħ延伸1min,35个循环,72ħ终止延伸10min㊂对扩增产物进行电泳和纯化,将纯化产物送至上海生工有限公司测序(美国ABI公司的ABI PRISM3730测序仪),从而确定该样本的基因型㊂PNPLA3rs738409位点上游引物:5'-CCTGAAGTC-CGAGGGTGT-3',下游引物:5'-CGGGTAGCCTG-GAAATAG-3',扩增产物为387bp,引物由上海生工有限公司合成㊂1.4统计学分析㊀应用IBM SPSS Statistics24.0统计学软件分析数据,计数资料以(%)表示,采用x2检验;计量资料以(xʃs)表示,采用单因素方差分析或独立样本t检验,P<0.05为差异具有统计学意义㊂2㊀结果2.1一般资料㊀NAFLD组体质指数㊁腰臀比以及血清TG㊁HDL-C㊁LDL-C㊁ALT㊁AST㊁GGT和ALP水平显著高于对照组(P<0.05,资料未列出)㊂2.2PNPLA3基因型Hardy-Weinberg遗传平衡情况㊀PNPLA3rs738409位点基因型包括GG㊁GC和CC 型三种基因型㊂经Hardy-Weinberg检验,NAFLD组与对照组人群PNPLA3基因分布符合Hardy-Weinberg遗传平衡定律,具有群体代表性(P>0.05,表1)㊂表1㊀PNPLA3基因型Hardy-Weinberg遗传平衡检验(%)分析多态性位点基因型例数统计值P值PNPLA3rs738409GG71(27.1) 3.8880.143GC115(43.9)CC76(29.0)2.3两组PNPLA3基因rs738409位点多态性分布比较㊀NAFLD组PNPLA3基因rs738409位点GG基因型和G等位基因分布频率显著高于对照组(P< 0.05,表2)㊂2.4不同PNPLA3rs738409基因型NAFLD患者血生化指标比较㊀不同PNPLA3rs738409基因型的NAFLD患者血清ALT和AST水平比较,差异有统计学意义(P<0.05),GG和GC基因型NAFLD患者血清ALT和AST水平显著高于CC基因型NAFL患者(P<0.05,表3)㊂2.5不同PNPLA3rs738409基因型NAFLD患者血脂和相关指标比较㊀GG和GC基因型NAFLD患者血. All Rights Reserved.清TG水平显著高于CC基因型NAFLD患者(P< 0.05),GG基因型血清TG水平显著高于GC基因型(P<0.05,表4)㊂表2㊀两组PNPLA3基因rs738409位点基因型分布(%)比较例数基因型GG GC CC等位基因G CNAFLD16260(37.0)①69(42.6)33(20.4)189(58.3)①135(41.7)对照组10011(11.0)46(46.0)43(43.0)68(34.0)132(66.0)㊀㊀与对照组比,①P<0.05表3㊀不同PNPLA3rs738409基因型NAFLD患者血生化指标(xʃs)比较基因型例数ALT(U/L)AST(U/L)GGT(U/L)ALP(U/L) GG73118.5ʃ20.3①②85.2ʃ14.7①②90.0ʃ17.671.2ʃ13.2 GC6593.3ʃ16.4①59.6ʃ10.3①87.5ʃ16.070.6ʃ13.4 CC2465.9ʃ11.831.9ʃ5.589.4ʃ16.268.8ʃ13.0㊀㊀与CC基因型比,①P<0.05;与GC基因型比,②P<0.05表4㊀不同PNPLA3rs738409基因型NAFLD患者血脂和相关指标(xʃs)比较基因型例数TG(mmol/L)HDL-C(mmol/L)LDL-C(mmol/L)BMI(kg/m2)腰臀比GG73 2.0ʃ0.5①② 1.3ʃ0.4 3.4ʃ0.725.9ʃ3.00.9ʃ0.2 GC65 1.6ʃ0.4① 1.3ʃ0.4 3.2ʃ0.625.1ʃ2.70.9ʃ0.1 CC24 1.1ʃ0.2 1.3ʃ0.5 3.3ʃ0.425.4ʃ2.90.9ʃ0.1㊀㊀与CC基因型比,①P<0.05;与GC基因型比,②P<0.05 3㊀讨论NAFLD是一种常见的慢性肝病㊂在过去几十年间,我国NAFLD发病率呈现不断增长的趋势,且越来越低龄化,可能与我国人口饮食结构㊁生活方式转变和物质生活水平提高关系密切[8]㊂有证据[9]表明,NAFLD与肥胖㊁胰岛素抵抗㊁代谢综合征和遗传多态性密切相关,是由环境因素和遗传因素共同作用的结果㊂目前认为,NAFLD发病经典机制为肝脏 二次打击 学说,基于肝细胞内TG过度沉积的 初次打击 和由炎症因子㊁氧化应激同时参与的进一步加重肝细胞坏死所引起的肝纤维化过程㊂近年来,全基因组关联研究分析和候选基因研究从分子水平上加深了对NAFLD发病机制的理解[10]㊂PNPLA3位于22q13.31,编码一个481个氨基酸组成的非分泌性蛋白,具有酰基水解酶活性,属于非Ca2+依赖的patatin样磷脂酶家族[11]㊂PNPLA3在N端具有类似于patatin的结构域,即高度保守序列Gly-X-Ser-X-Gly,对甘油(三酰甘油㊁二酰基甘油和单酰基甘油)具有水解酶活性,在脂代谢稳态过程中发挥着至关重要的作用[12]㊂PNPLA3基因在人体肝脏组织表达最丰富,但PNPLA3蛋白的生物学功能尚未完全阐明㊂国外已开展的研究表明PNPLA3基因rs738409多态性与NAFLD遗传易感性有关,但其影响NAFLD的具体作用机制有待深入探究㊂全基因组关联研究显示,PNPLA3基因rs738409位点C >G是拉美裔㊁非裔美国人和欧洲裔美国人NAFLD 发生的危险因素[13]㊂对多个种族人群的进一步研究证实了PNPLA3rs738409I148M对NAFLD易感性的影响[14,15]㊂本研究结果显示,NAFLD患者PNPLA3基因rs738409位点GG基因型和G等位基因分布频率显著高于健康人群,编码GG基因型和G 等位基因携带者NAFLD遗传易感性明显增加㊂体外实验证实PNPLA3蛋白具有水解甘油三脂的生物学功能,但其在体内的生物学活性尚不明确㊂动物实验研究[16]表明,PNPLA3对小鼠肝脏甘油三酯水解具有抑制作用㊂此外,与PNPLA3(I148M)相关的脂肪变性是由PNPLA3在肝脏脂滴上的积累引起的,PNPLA3在肝脏脂滴上的积聚是肝脏脂肪变性的基础[17]㊂故PNPLA3蛋白可能更多参与脂肪合成过程而非脂肪分解过程,而PNPLA3基因rs738409位点C突变为G,导致148位异亮氨酸突变为蛋氨酸,PNPLA3基因rs738409位点多态性改变了PNPLA3蛋白活性中心结构,使得酶活性中心被掩盖,进而影响脂肪合成和水解过程,最终导致肝脏脂质沉积㊂研究[18]也表明,PNPLA3基因rs738409位点非同义替换突变(C>G)与肝脏脂肪沉积增加具有相关性,GG基因型人群肝脏脂肪含量显著升高㊂文献研究[19]亦发现,PNPLA3特定位点点突变可显著影响PNPLA3蛋白功能活性,其中最重要的突变即为PNPLA3rs738409位点突变,且G等位基因发生肝硬化的几率是C等位基因的3.9倍,G 等位基因与脂肪变性㊁小叶炎症㊁NAFLD活性评分. All Rights Reserved.和纤维化也有显著相关性㊂本研究结果也发现,GG 和GC基因型NAFLD患者血清ALT㊁AST㊁TG水平显著高于CC基因型NAFLD患者,GG基因型高于GC基因型,故携带GG和GC基因型NAFLD患者肝功能损伤可能更加严重,其TG水平更高,肝脏脂质积累更多㊂PNPLA3基因rs738409位点等位基因C 突变为G,削弱其对脂肪代谢的调节作用,从而导致脂质异位沉积和胰岛素抵抗㊂血清ALT和AST水平上升可能与携带GG和GC基因型NAFLD患者肝细胞损伤以及肝脏炎症活动更加严重有关㊂但三种基因型NAFLD患者血清GGT㊁ALP㊁HDL-C㊁LDL-C㊁BMI㊁腰臀比比较,差异无统计学意义,提示PNPLA3rs738409基因多态性与NAFLD疾病严重程度的关系可能较复杂,有待进一步研究㊂一项分析PNPLA3rs738409多态性与NAFLD易感性的研究[20]发现,PNPLA3rs738409位点CG/GG基因型增加了巴西受试者NAFLD患病风险,且PNPLA3 rs738409位点GG基因型与非酒精性脂肪性肝炎患者肝酶升高和纤维化有关㊂总之,G等位基因可能是NAFLD遗传易感性的重要影响因素,即PNPLA3 rs738409基因多态性与NAFLD遗传易感性存在关联性㊂研究报道[21]表明,PNPLA3I148M变异体与NAFLD发病风险显著相关,CG基因型增加发病机会2.092倍,GG基因型增加4.566倍㊂故PNPLA3 rs738409基因多态性可能在NAFLD发病过程中发挥着关键作用,但PNPLA3rs738409基因突变可能并不仅仅是单纯的功能丧失,其能否单独引起脂肪肝还有待深入研究㊂通过深入研究PNPLA3基因在NAFLD发病过程中的作用机制,为深入阐明NAFLD 遗传易感性及其发病的分子机制提供了新的方向,从而有助于筛选NAFLD高危人群,做到尽早预防㊁诊断和个体化治疗㊂综上所述,PNPLA3rs738409基因多态性与NAFLD遗传易感性有关㊂该项研究将有助于指导尽早识别NAFLD易感人群,从而为NAFLD防治提供方向㊂ʌ参考文献ɔ[1]Cotter TG,Rinella M.Nonalcoholicfatty liver disease2020:the stateof the disease.Gastroenterology,2020,158(7):1851-1864. [2]Perumpail BJ,Khan MA,Yoo ER,et al.Clinical epidemiology anddisease burden of nonalcoholic fatty liver disease.World J Gastroen-terol,2017,23(47):8263-8276.[3]Pierantonelli I,Svegliati-Baroni G.Nonalcoholic fatty liver disease:basic pathogenetic mechanisms in the progression from NAFLD to NASH.Transplantation,2019,103(1):1-13.[4]Tang S,Zhang J,Mei TT,et al.Association of PNPLA3rs738409G/C gene polymorphism with nonalcoholic fatty liver disease in chil-dren:a meta-analysis.BMC Med Genet,2020,21(1):163-172.[5]Tikhomirova AS,Kislyakov VA,Baykova IE,et al.Clinical-mor-phological parallels of the PNPLA3gene polymorphism in patients with nonalcoholic fatty liver disease.Ter Arkh,2018,90(2): 85-88.[6]Dai G,Liu P,Li X,et al.Association between PNPLA3rs738409polymorphism and nonalcoholic fatty liver disease(NAFLD)suscep-tibility and severity:A meta-analysis.Medicine(Baltimore),2019, 98(7):14324-14332.[7]中华医学会肝病学分会脂肪肝和酒精性肝病学组,中国医师协会脂肪肝专家委员会.非酒精性脂肪性肝病防治指南(2018年版).实用肝脏病杂志,2018,21(2):177-186.[8]Martin K,Hatab A,Athwal VS,et al.Geneticcontribution to non-alcoholic fatty liver disease and prognostic implications.Curr Diab Rep,2021,21(3):8-16.[9]Lombardi R,Iuculano F,Pallini G,et al.Nutrients,genetic factors,and their interaction in non-alcoholic fatty liver disease and cardio-vascular disease.Int J Mol Sci,2020,21(22):8761-8786. [10]Jiang ZG,Tapper EB,Kim M,et al.Geneticdeterminants of circu-lating lipoproteins in nonalcoholic fatty liver disease.J Clin Gastroen-terol,2018,52(5):444-451.[11]Wu JT,Liu SS,Xie XJ,et al.Independent and joint correlation ofPNPLA3I148M and TM6SF2E167K variants with the risk of coronary heart disease in patients with non-alcoholic fatty liver dis-ease.Lipids Health Dis,2020,19(1):29-36.[12]宁宝烁,李异玲.PNPLA3对肝细胞和肝癌细胞脂质代谢的影响.实用肝脏病杂志,2020,23(2):154-158.[13]Romeo S,Kozlitina J,Xing C,et al.Genetic variation in PNPLA3confers susceptibility to nonalcoholic fatty liver disease.Nat Genet, 2008,40(12):1461-1465.[14]Walker RW,Belbin GM,Sorokin EP,et al.A common variant inPNPLA3is associated with age at diagnosis of NAFLD in patients from a multi-ethnic biobank.J Hepatol,2020,72(6):1070-1081.[15]Liu WY,Zheng KI,Pan XY,et al.Effect of PNPLA3polymorphismon diagnostic performance of various noninvasive markers for diagnosing and staging nonalcoholic fatty liver disease.J Gastroenterol Hepatol,2020,35(6):1057-1064. [16]Wang Y,Kory N,BasuRay S,et al.PNPLA3,CGI-58,andinhibi-tion of hepatic triglyceride hydrolysis in mice.Hepatology,2019,69(6):2427-2441.[17]BasuRay S,Wang Y,Smagris E,et al.Accumulation of PNPLA3onlipid droplets is the basis of associated hepatic steatosis.Proc Natl Acad Sci U S A,2019,116(19):9521-9526.[18]Qadri S,Lallukka-Brück S,Luukkonen PK,et al.The PNPLA3-I148M variant increases polyunsaturated triglycerides in human adipose tissue.Liver Int,2020,40(9):2128-2138. [19]Alam S,Islam MS,Islam S,et al.Association of single nucleotidepolymorphism at PNPLA3with fatty liver,steatohepatitis,and cirrho-sis of liver.Indian J Gastroenterol,2017,36(5):366-372. [20]Mazo DF,Malta FM,Stefano JT,et al.Validation of PNPLA3poly-morphisms as risk factor for NAFLD and liver fibrosis in an admixed population.Ann Hepatol,2019,18(3):466-471. [21]Chen LZ,Ding HY,Liu SS,et bining I148M and E167K va-riants to improve risk prediction for nonalcoholic fatty liver disease in Qingdao Han population,China.Lipids Health Dis,2019,18(1): 45-51.(收稿:2021-04-29)(本文编辑:刘波). All Rights Reserved.。
中国汉族人群酒精性肝病候选基因单核苷酸多态性的关联分析研究
中国汉族人群酒精性肝病候选基因单核苷酸多态性的关联分析研究目的:酒精性肝病（Alcoholic Liver Disease,ALD）是一种由大量饮酒引起的慢性肝病,遗传机制在其发病中起重要作用。
近期新英格兰杂志中发现HSD17B13rs72613567等位基因减轻了由PNPLA3 P.I148M变异体遗传易感性对肝损伤造成的风险,由于ALD患者种族之间的差异性,有必要在中国汉族人群验证,本研究的目的是探讨基因多态性候选基因HSD17B13、ALDH2以及OAS1的单核苷酸多态性（Single-Nucleotide Polymorphisms,SNP）与中国汉族人群ALD患者的遗传易感性。
方法:本研究为多中心大样本研究,共有769例ALD患者和767例健康对照参与其中,采用基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱（Matrix-Assisted Laser Desor ption/Ionization Time of Flight Mass Spectrometry,MALDI-TOF MS）方法对以下基因的5个SNP位点进行基因分型:HSD17B13（rs72613567、rs117111943、rs6834314）,ALDH2 rs671,OAS1rs11066453,使用PLINK 1.07软件进行关联分析。
结果:HSD17B13基因的rs6834314的等位基因及基因型在两组之间存在统计学差异(P=8.2×10<sup>-3</sup>;P=0.02),在加性模型、显性模型和隐性模型下均有统计学差异(P=8×10<sup>-3</sup>;P=0.04;P=0.02);rs117111943的等位基因在两组间的差异有统计学意义(P=9×10<sup>-3</sup>),其基因型在两组之间无统计学差异,在加性模型下有统计学差异(P=6×10<sup>-3</sup>)而在显性模型、隐性模型下不存在统计学差异;SNP位点rs72613567的等位基因和基因型在疾病组和对照组之间的差异均有统计学意义（P=0.01,P=0.04）,在加性模型、显性模型下两组有统计学差异（P=0.01;P=0.03）,在隐性模型下不存在统计学差异（P=0.06）;ALDH2 rs671的等位基因在疾病组和对照组之间的差异有统计学意义(P=4.18×10<sup>-43</sup>),其基因型两组之间无统计学差异,在加性模型下均有统计学差异(P=1.21×10<sup>-42</sup>),在显性模型、隐性模型下不存在统计学差异;OAS1 rs11066453的等位基因在疾病组和对照组之间的差异有统计学意义(P=5.70×10<sup>-12</sup>),其基因型在两组之间无统计学差异,在加性模型下有统计学差异(P=4.74×10<sup>-18</sup>),在显性模型、隐性模型下两组间不存在统计学差异结论:本研究发现,HSD17B13基因多态性位点rs6834314与rs72613567与中国汉族人群ALD具有明显关联性,ALDH2 rs671在中国汉族ALD人群有潜在的相关,OAS1 rs11066453以及HSD17B13 rs117111943在中国汉族人群均与ALD未存在很明显的易感性。
ACAT1和MTNR1B基因多态性与非酒精性脂肪性肝病易感性的关系
·脂肪性肝病·DOI：10.12449/JCH240410 ACAT1和MTNR1B基因多态性与非酒精性脂肪性肝病易感性的关系马磊1，胡欣欣1，赵波1，万强1，周林1，赵真真2a，辛永宁2b1 青岛市城阳区人民医院感染科，山东青岛 2661092 青岛市市立医院 a.临床研究中心， b.感染科，山东青岛 266071通信作者：辛永宁，*******************（ORCID：0000-0002-3692-7655）摘要：目的 本研究拟探讨乙酰辅酶A乙酰转移酶1（ACAT1）和褪黑激素受体1B（MTNR1B）基因多态性与非酒精性脂肪性肝病（NAFLD）疾病易感性的关系。
方法 本研究共纳入2020年12月—2022年6月就诊于青岛市市立医院的健康体检者164例、NAFLD患者228例。
采用PCR及测序的方法对ACAT1 rs1044925、rs1157651和MTNR1B rs10830963基因多态性进行基因分型，并采集空腹静脉血进行生化检测。
符合正态分布的计量资料两组间比较采用成组t检验；非正态分布的计量资料两组间比较采用Mann-Whitney U非参数检验；计数资料两组间比较采用χ2检验。
结果 ACAT1 rs1044925、rs1157651和MTNR1B rs10830963基因型分布在NAFLD及健康对照组间无统计学差异（P值均>0.05），ACAT1 rs1044925 AA 基因型携带者的LDL水平明显高于C等位基因携带者（Z=−2.08，P=0.04），MTNR1B rs10830963 G等位基因携带者空腹血糖水平明显高于CC基因型携带者（Z=−3.01，P<0.01）。
结论 ACAT1 rs1044925、rs1157651和MTNR1B rs10830963多态性与NAFLD易感性无明显相关，ACAT1 rs1044925和MTNR1B rs10830963位点分别与LDL和空腹血糖水平有关。
酒精代谢
专论与综述
乙醛脱氢酶２（ＡＬＤＨ２）基因研究进展及其与饮酒行为的关系
罗怀容１１２，张亚平１
（１中国科学院昆明动物研究所，昆明６５０２２３｝２中国科学院研究生院，北京１０００３ ９）
摘要：亚洲人群中普遍存在突变型的乙醛脱氢酶２（ＡＬＤＨ２＊２）。此酶突变后活性缺失，导致乙醛在肝脏内大 量累积使突变携带者在喝酒后会有脸红等不适反成，因此这可能影响他们的饮酒行为。由于ＡＬＤＨ２＊２等位基
ｉｎ
ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ
ｓｅｘ，ａｇｅ
ａｎｄ ｇｅｏｇｒａｐｈｙ，ｗｅｒｅ ａｌｓｏ
ｇｅｎｏｔｙｐｅｓ
ｏｆ
ＡＬＤＨ２
Ｃｈｉｎｅｓｅ ｐｙｄｅ ｄｅｈｙｄｒｏｇｅｎａｓｅ ２；Ｉｘ）／ｙｍｏｒＤｌｌｌｓｍｉ ｄｒｉｎｋｉｎｇ ｂｅｈａｖｉｏｒ
酗酒很明显是关系到世界各国家或地区公民健康的一
研究等表明，遗传固素在饮酒行为中也起到了决定性作用ｏ］。 对许多与酒精中毒关系密切的候选基因例如ＣＹＰ＇２Ｅ（细胞色
收稿日期
基金项目
９００３
０２—１０；修回日期：２００ａ—０６
２０ ｂｙＮａｔｉｏｎａｌＮａｔｕｒａｌ ＳｃｉｅｎｃｅＦｏｕｎｄａｔｉｏｎ
国家自然科学基金和云南省自然科学基金资助项目［Ｓｕｐｐｏｒｔｅｄ
品是纯合性突变；而当两对引物都能扩增出ＰＣＲ产物时，则
样品为杂台子。扩增结果在一般的检测胶如琼脂糖凝胶电 泳中检测即可清晰地分辨出。针对ＡＬＤＨ２＊２单碱基突变 特征．后来我们叉利用ＡＢＩ（Ａｐｐｌｉｅｄ ＢｉｏｓｙｓｔｅｔＪｌｓ公司）的 ＳＮｔｌ检测技术和变性高教液相色谱技术等对其在中国人群 中进行了大规模检测（罗怀容等，未发表资料），另外，有的实 验室已在进行微矩阵技术口”和ＡＢＩ的ＴａｑＭａｎ技术进行 ＡＬＤＨ２＊２的检测（Ｋｅｎｎｅｔｈ Ｋ．Ｋｉｄｄ．个人交流）。
酒精代谢相关酶基因多态性与冠心病及其危险因素的关联
酒精代谢相关酶基因多态性与冠心病及其危险因素的关联邹萍;陈宋明【期刊名称】《汕头大学医学院学报》【年(卷),期】2012(25)2【摘要】流行病学调查表明,适量饮酒对心血管系统具有保护作用,此种保护作用可能受酒精代谢相关酶基因遗传变异效应的修饰影响。
影响酒精代谢的主要酶为乙醇脱氢酶(ADH)和乙醛脱氢酶(ALDH)。
其中,ADH2～3和ALDH2存在功能性多态性位点,可影响体内酒精代谢速度。
目前有许多研究不同地区不同种族酒精代谢相关酶基因多态性与冠心病及其危险因素关联的报道,然而结论却不尽一致。
本文就ADH2～3和ALDH2基因多态性与冠心病及其危险因素的关联性作一综述。
【总页数】3页(P116-118)【关键词】乙醇脱氢酶;乙醛脱氢酶;基因多态性;冠心病;危险因素【作者】邹萍;陈宋明【作者单位】汕头大学医学院第一附属医院心血管内科【正文语种】中文【中图分类】R446.112【相关文献】1.急性冠状动脉综合征患者同型半胱氨酸与亚甲基四氢叶酸还原酶基因多态性及其与冠心病其它危险因素的相关分析 [J], 尹春琳;徐东;魏嘉平;郝恒剑;谭静;郭丽娟;王艳玲;夏经钢;范振兴2.血管紧张素转换酶基因多态性与冠心病发病危险因素相关性研究 [J], 陈明;劳绮云;王继文;陈次滨;吴沃栋3.产后抑郁与去甲肾上腺素代谢酶基因多态性的关联及危险因素分析 [J], 马嘉慧;黄振东;汪赛赢;郑珊珊;段开明4.乙醛脱氢酶2基因多态性在冠心病患者传统危险因素之间的相关性研究 [J], 帕丽达·阿布来提;李辉;刘莎莎;李雯;沙吉旦·阿不都热衣木;高颖5.中国汉族人群对氧磷酶Q192R基因多态性与冠心病的相关性及危险因素对基因型影响的研究 [J], 刘京荣;邢旭东;刘焕荣;秦浩因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
乙醛脱氢酶2基因多态性与肝脏疾病
乙醛脱氢酶2基因多态性与肝脏疾病邵爽;刘春燕;孙晶;董洪静;李艳清;高沿航【期刊名称】《世界华人消化杂志》【年(卷),期】2017(25)33【摘要】肝脏疾病是我国主要疾病负担之一,随着多重因素的影响,我国慢性肝脏疾病构成比发生了显著变化,酒精性肝病的发病率呈现逐年上升趋势.乙醛脱氢酶2(acetaldehyde dehydrogenase 2,ALDH2)是酒精代谢的关键酶,全球约8%的人口存在ALDH2的基因变异,主要集中在东亚地区.ALDH2基因变异会影响其对乙醛的催化活性,使高毒性代谢产物乙醛在体内蓄积,对机体产生多方影响.ALDH2基因变异与包括酒精性肝病在内的多种肝脏疾病相关性有待深入探讨与明确.本文对ALDH2基因多态性与肝脏疾病新近研究进展进行回顾与总结,以期为未来更好阐明东西方肝脏疾病特点以及改进防治策略提供帮助.【总页数】6页(P2981-2986)【关键词】乙醛脱氢酶2;基因多态性;肝脏疾病【作者】邵爽;刘春燕;孙晶;董洪静;李艳清;高沿航【作者单位】吉林大学第一医院肝胆胰内科;长治医学院附属和平医院消化内科【正文语种】中文【中图分类】R155.1【相关文献】1.乙醛脱氢酶2基因多态性与心血管疾病 [J], 张文丽;张丹;祝振忠2.乙醛脱氢酶2基因多态性与心血管疾病的研究进展 [J], 魏刚;房万菊;周湘忠;赵树武3.乙醛脱氢酶2(ALDH2)基因多态性与酒精相关疾病的研究进展 [J], 邱礼佳;林贞葵;陈慧怡;李金花;林梦琴;梁少明;刘伟4.乙醛脱氢酶2基因多态性与心血管疾病的研究进展 [J], 林加龙;裴海峰;徐伍;李运明;张信琴;徐瑞;李秀川;汪雄;王永华;李公任5.乙醛脱氢酶2基因多态性在人群中的分布特点及其与肝脏生化学及脂质代谢之间的关系 [J], 毛春杰;李颖怡;郭翠芬;章瑞南;汪余勤;曹海霞因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
代谢相关脂肪性肝病患者SLCO1B1_和APOE_基因多态性与脂代谢紊乱关系研究
∗基金项目:湖北省卫健委科研项目(编号:WJ2019Q037)作者单位:430000武汉市华中科技大学同济医学院附属梨园医院检验科第一作者:熊印祥,男,35岁,大学本科,初级技师㊂E-mail: xiong3521@通讯作者:刘巧,E-mail:iuqiaohk@ ㊃非酒精性脂肪性肝病㊃代谢相关脂肪性肝病患者SLCO1B1和APOE基因多态性与脂代谢紊乱关系研究∗熊印祥,宦丽君,刘巧㊀㊀ʌ摘要ɔ㊀目的㊀分析代谢相关脂肪性肝病(MAFLD)患者有机阴离子转运蛋白1B1(SLCO1B1)和载脂蛋白E(APOE)基因多态性与脂代谢紊乱的关系㊂方法㊀2018年8月~2021年8月我院诊治的MAFLD患者121例和同期健康体检者150例,常规检测血清总胆固醇(TC)㊁甘油三酯(TG)㊁高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)和低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)水平,采用PCR-荧光探针法检测外周血SLCO1B1和APOE基因型㊂结果㊀MAFLD组血清TC㊁TG和LDL-C水平分别为(5.8ʃ2.3)mmol/L㊁(2.9ʃ1.4)mmol/L和(3.3ʃ1.5)mmol/L,均显著高于健康人ʌ分别为(4.8ʃ1.2)mmol/L㊁(1.5ʃ1.3)mmol/L和(2.6ʃ1.1)mmol/L,P<0.05ɔ;MAFLD组SLCO1B1基因∗1a/∗1a和∗1a/∗1b基因型频率分别为8.3%和35.5%,显著高于健康人的2.7%和23.3%(P<0.05),而∗1b/∗1b基因型频率为32.2%,显著低于健康人的46.0%(P<0.05);MAFLD组APOE基因ε3/3基因型频率和E3基因表型频率分别为69.4%和71.9%,显著高于健康人的56.7%和58.7%(P<0.05),而ε3/4基因型频率和E4基因表型频率分别为17.4%和18.2%,均显著低于健康人的29.3%和30.7%(P<0.05);26例SLCO1B1基因B型患者血清TC㊁TG和LDL-C水平分别为(6.4ʃ1.2)mmol/L㊁(3.5ʃ2.2)mmol/L和(3.8ʃ0.8)mmol/L,均显著高于92例A型患者ʌ分别为(5.5ʃ1.3)mmol/L㊁(2.6ʃ3.3)mmol/L和(3.0ʃ1.2)mmol/L,P<0.05ɔ或3例C型患者ʌ分别为(4.6ʃ0.3)mmol/L㊁(2.6ʃ0.9)mmol/L和(2.5ʃ0.2)mmol/L,P<0.05ɔ;87例APOE基因E3型血清TG和LDL-C水平分别为(3.2ʃ1.6)mmol/L和(3.4ʃ1.1)mmol/L,显著高于12例E2型ʌ分别为(2.7ʃ1.8)mmol/L和(2.8ʃ0.8)mmol/L,P<0.05ɔ或22例E4型ʌ分别为(2.3ʃ0.7)mmol/L和(3.0ʃ1.2)mmol/L,P<0.05ɔ㊂结论㊀MAFLD患者SLCO1B1和APOE基因多态性与脂代谢紊乱密切相关,值得深入研究㊂㊀㊀ʌ关键词ɔ㊀代谢相关脂肪性肝病;单核苷酸多态性;溶质载体有机阴离子转运蛋白家族成员1B1;载脂蛋白E;脂代谢㊀㊀DOI:10.3969/j.issn.1672-5069.2023.02.014㊀㊀Polymorphism of SLCO1B1and APOE genes is correlated to lipid metabolism in patients with metabolic-associated fatty liver diseases㊀Xiong Yinxiang,Huan Lijun,Liu Qiao.Clinical Laboratory,Liyuan Hospital,Affiliated to Tongji Medical College,Huazhong University of Science and Technology,Wuhan430000,Hubei Province,China㊀㊀ʌAbstractɔ㊀Objective㊀The aim of this study was to explore the gene polymorphisms of solute carrier organic anion transporter family member1B1(SLCO1B1)and apolipoprotein E(APOE)to lipid metabolism in patients with metabolism-associated fatty liver diseases(MAFLD).Methods㊀121patients with MAFLD and150healthy persons were encountered in our hospital between August2018and August2021.Peripheral blood total cholesterol(TC),triglyceride(TG),high-density lipoprotein cholesterol(HDL-C)and low-density lipoprotein cholesterol(LDL-C)levels were detected,and SLCO1B1and APOE gene phenotypes in the two groups were determined.Results㊀Serum TC,TG and LDL-C levels in patients with MAFLD were (5.8ʃ2.3)mmol/L,(2.9ʃ1.4)mmol/L and(3.3ʃ1.5)mmol/L,all significantly higher than[(4.8ʃ1.2)mmol/L,(1.5ʃ1.3) mmol/L and(2.6ʃ1.1)mmol/L,respectively,P<0.05];the frequency of SLCO1B1genotyp∗1a/∗1a and∗1a/∗1b in patients with MAFLD were8.3%and35.5%,both significantly higher than2.7%and23.3%(P<0.05),while the frequency of phenotype∗1b/∗1b were32.2%,significantly lower than46.0%(P<0.05)in the healthy persons;the frequency of APOEgenotypeε3/3and the frequency of E3phenotype in patientswith MAFLD were69.4%and71.9%,both significantly higherthan56.7%and58.7%(P<0.05),while the frequencies ofgenotypeε3/4and phenotype E4were17.4%and18.2%,bothsignificantly lower than29.3%and30.7%(P<0.05)in healthyindividuals;serum TC,TG and LDL-C levels in26MAFLDpatients with SLCO1B1genotype B were(6.4ʃ1.2)mmol/L,(3.5ʃ2.2)mmol/L and(3.8ʃ0.8)mmol/L,all significantly higher than[(5.5ʃ1.3)mmol/L,(2.6ʃ3.3)mmol/L and(3.0ʃ1.2)mmol/L,respectively,P<0.05]in92patients with genotype A or[(4.6ʃ0.3)mmol/L,(2.6ʃ0.9)mmol/L and(2.5ʃ0.2)mmol/L,respectively,P<0.05]in3patients with genotype C;serum TG and LDL-C levels in87patients with APOE genotype E3were(3.2ʃ1.6)mmol/L and(3.4ʃ1.1)mmol/L,both significantly higher than[(2.7ʃ1.8)mmol/L and(2.8ʃ0.8)mmol/L,respectively,P<0.05]in12patients with genotype E2or[(2.3ʃ0.7)mmol/L and(3.0ʃ1.2)mmol/L, respectively,P<0.05]in22patients with genotype E4.Conclusion㊀The gene polymorphisms of SLCO1B1and APOE in patients with MAFLD are closely related to lipid metabolism disorders,and needs further investigation.㊀㊀ʌKey wordsɔ㊀Metabolism-associated fatty liver disease;Single nucleotide polymorphism;Solute carrier organic anion transporter family member1B1;Apolipoprotein E;Lipid metabolism㊀㊀代谢相关脂肪性肝病(metabolic-dysfunction-as-sociated fatty liver disease,MAFLD)是目前排名第一位的慢性肝病,已在2020年被亚太肝病学会建议替代术语非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)[1]㊂该病的特点为在无过量饮酒和其他肝损伤因素的情况下,超过5%肝细胞表现出脂肪变性[2]㊂作为一种多系统代谢紊乱性疾病,MAFLD通常与2型糖尿病㊁血脂异常㊁代谢综合征和肥胖相关[3]㊂既往研究[4]认为,机体血脂水平的变化可能与某些基因有关㊂溶质载体有机阴离子转运蛋白家族成员1B1(solute carrier organic anion transporter family member1B1, SLCO1B1)基因编码一种摄入转运蛋白,可能在脂代谢过程中起关键作用[5]㊂载脂蛋白E(apolipoprotein E,APOE)是一种多功能蛋白,可通过与乳糜微粒和低密度脂蛋白受体结合介导血清极低密度脂蛋白的清除,从而影响脂代谢过程[6]㊂本研究分析了MAFLD患者外周血SLCO1B1和APOE基因多态性变化及其与脂代谢紊乱的关系,现报道如下㊂1㊀资料与方法1.1研究对象㊀2018年8月~2021年8月我院诊治的MAFLD患者121例,男性61例,女性60例;年龄为16~65岁,平均年龄为(40.5ʃ6.3)岁㊂诊断符合‘非酒精性脂肪性肝病防治指南(2018年版)“的标准[7]㊂排除标准:(1)合并因药物㊁自身免疫和肝炎病毒感染等因素所致的脂肪肝;(2)排除既往有酗酒史或现阶段仍过量饮酒(男性饮酒量每周超过140g,女性饮酒量每周超过70g);(3)心肝肺肾等器官功能障碍;(4)恶性肿瘤㊂另外,选择同期健康体检者150例,男性76例,女性74例;年龄为18~64岁,平均年龄为(39.1ʃ5.7)岁㊂全部研究对象签署知情同意书,本研究方案经我院医学伦理委员会批准㊂1.2脂代谢指标检测㊀使用美国BECKMAN公司提供的AU5800全自动生化分析仪检测血清总胆固醇(total cholesterol,TC)㊁甘油三酯(triglyceride,TG)㊁高密度脂蛋白胆固醇(high-density lipoprotein choles-terol,HDL-C)和低密度脂蛋白胆固醇(low-density lipoprotein cholesterol,LDL-C)水平㊂1.3外周血SLCO1B1和APOE基因多态性检测㊀采用聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR) -荧光探针法检测,具体操作步骤如下:(1)抽取空腹外周静脉血3mL,迅速置入乙二胺四乙酸二钾抗凝管中,采用全血基因组DNA提取试剂盒(离心柱法,由上海尚宝生物科技有限公司提供)提取基因组DNA㊂采用NanoDrop2000超微量分光光度计测量样品DNA浓度和纯度㊂根据DNA浓度,将样品溶液稀释至5~15ng/μL,保存于-20ħ冰箱,备用;(2)使用武汉友芝友医疗科技有限公司提供的PCR 扩增试剂盒行PCR扩增㊂SLCO1B1基因检测试剂盒由SLCO1B1ˑ1b反应液㊁SLCO1B1ˑ5反应液㊁弱阳性对照和空白健康人成;APOE基因检测试剂盒由APOE2反应液㊁APOE4反应液㊁弱阳性对照和空白健康人成㊂将待测样品DNA㊁弱阳性对照和空白对照分别加入已有2种PCR反应液的反应管中,上机检测㊂PCR扩增程序为:37ħ10min;95ħ预变性5min;95ħ变性15s,60ħ退火1min,40个循环㊂采集荧光信号,根据样本检测结果进行判定,从而确定各样本基因多态性㊂SLCO1B1可分为A型(∗1a/∗1a㊁∗1a/∗1b㊁∗1b/∗1b)㊁B型(∗1a/∗15㊁∗1b/∗15)和C型(∗15/∗15);APOE可分为E2型(ε2/2㊁ε2/3)㊁E3型(ε3/3㊁ε2/4)和E4型(ε4/4㊁ε3/4)㊂1.4统计学分析㊀应用SPSS26.0统计学软件分析数据,计数资料以%表示,采用x2检验,计量资料以(xʃs)表示,多组间比较行单因素方差分析,两组间比较行独立t检验,P<0.05表示差异具有统计学意义㊂2㊀结果2.1两组血脂指标比较㊀MAFLD组血清TC㊁TG和LDL-C水平显著高于健康人,差异有统计学意义(P <0.05,表1)㊂表1㊀两组血脂指标(mmol/L,xʃs)比较例数TC TG HDL-C LDL-C MAFLD1215.8ʃ2.3①2.9ʃ1.4①1.1ʃ0.33.3ʃ1.5①健康人150 4.8ʃ1.2 1.5ʃ1.3 1.2ʃ0.3 2.6ʃ1.1㊀㊀与健康人比,①P<0.052.2两组SLCO1B1和APOE基因多态性分布比较㊀MAFLD组SLCO1B1基因∗1a/∗1a㊁∗1a/∗1b基因型频率显著高于健康人(P<0.05),而∗1b/∗1b 基因型频率显著低于健康人(P<0.05,表2); MAFLD组APOE基因ε3/3基因型频率和E3基因表型频率显著高于健康人(P<0.05),而ε3/4基因型频率和E4基因表型频率显著低于健康人(P< 0.05,表3)㊂表2㊀两组SLCO1B1基因多态性分布(%)比较例数基因型∗1a/∗1a∗1b/∗1b∗15/∗15∗1a/∗1b∗1a/∗15∗1b/∗15基因表型A型B型C型MAFLD12110(8.3)①39(32.2)①3(2.5)43(35.5)①10(8.3)16(13.2)92(76.0)26(23.4)3(2.5)健康人1504(2.7)69(46.0)4(2.7)35(23.3)16(10.7)22(14.7)108(72.0)38(25.3)4(2.7)㊀㊀与健康人比,①P<0.05表3㊀两组APOE基因多态性分布(%)比较例数基因型ε2/2ε3/3ε4/4ε2/3ε2/4ε3/4基因表型E2型E3型E4型MAFLD1211(0.8)84(69.4)①1(0.8)11(9.1)3(2.5)21(17.4)①12(9.9)87(71.9)①22(18.2)①健康人1500(0.0)85(56.7)2(1.3)16(10.7)3(2.0)44(29.3)16(10.7)88(58.7)46(30.7)㊀㊀与健康人比,①P<0.052.3不同SLCO1B1和APOE基因表型的MAFLD患者血脂水平比较㊀SLCO1B1基因B型MAFLD患者血脂水平显著高于A型或C型(P<0.05,表4); APOE基因E3型MAFLD患者血清TG和LDL-C水平显著高于E2或E4型(P<0.05,表5)㊂表4㊀不同SLCO1B1基因表型的MAFLD患者血脂(mmol/L,xʃs)比较基因表型例数TC TG HDL-C LDL-C A型925.5ʃ1.3 2.6ʃ3.3 1.1ʃ0.3 3.0ʃ1.2 B型266.4ʃ1.2①3.5ʃ2.2①1.2ʃ0.2 3.8ʃ0.8①C型3 4.6ʃ0.3 2.6ʃ0.90.9ʃ0.1 2.5ʃ0.2㊀㊀与其他两组比,①P<0.05表5㊀不同APOE基因表型的MAFLD患者血脂(mmol/L,xʃs)比较基因表型例数TC TG HDL-C LDL-C E2型125.9ʃ1.2 2.7ʃ1.8 1.2ʃ0.3 2.8ʃ0.8 E3型875.8ʃ1.3 3.2ʃ1.6①1.1ʃ0.3 3.4ʃ1.1①E4型225.7ʃ1.5 2.3ʃ0.7 1.0ʃ0.2 3.0ʃ1.2㊀㊀与其他两组比,①P<0.053㊀讨论MAFLD以肝脂肪变性为病理学特点,但患者并无过量饮酒史[8]㊂血脂异常是导致MAFLD发生的重要危险因素,但其具体发病机制尚未明确[9]㊂既往有研究[10]表明,MAFLD是一种代谢-遗传-环境相关性疾病㊂由此可见,遗传因素在MAFLD的发生发展过程中起着至关重要的作用㊂SLCO1B1也被称为有机阴离子转运蛋白家族成员1B1(organic anion transporter family member1B1, OATP1B1),是一种在肝脏中特异表达的摄入转运蛋白,负责内源性和外源性物质的转运[11]㊂SLCO1B1由SLCO1B1基因编码,该基因位于染色体12p12.1,长度约11kb㊂SLCO1B1基因的两个常见单核苷酸多态性(single-nucleotide polymorphisms,SNPs)为388A>G(rs2306283)和521T>C(rs4149056),这2个SNPs可结合产生4种不同的单倍型,即∗1a(388A-521T)㊁∗1b(388G-521T)㊁∗5(388A-521C)和∗15(388G-521C)[12]㊂到目前为止,有关SLCO1B1的研究多集中于其多态性对口服降糖药物㊁他汀类药物和抗肿瘤药物的药代动力学㊁疗效和副作用的影响[13]㊂本研究结果显示,MAFLD组SLCO1B1∗1a/∗1a㊁∗1a/∗1b基因型频率显著高于健康人,而∗1b/∗1b基因型频率显著低于健康人,表明SL-CO1B1基因多态性可能与MAFLD易感性有关㊂∗1a/∗1a㊁∗1a/∗1b基因型可能是MAFLD的风险基因,而∗1b/∗1b基因型可能是MAFLD的保护基因㊂有报道表明,SLCO1B1基因∗1a/∗1a㊁∗1b/∗1b㊁∗1a/∗1b和∗1b/∗15四种基因型的MAFLD患者之间血清TG和HDL-C水平存在显著性差异,基因型∗1a/∗1a和∗1a/∗1b系患心血管疾病的风险基因,而基因型∗1b/∗1b则系保护基因,提示SLCO1B1可能参与了TG和HDL-C代谢调节[14]㊂SLCO1B1基因多态性可降低他汀类药物的药代动力学,继而影响治疗疗效[15]㊂APOE是一种主要由肝脏合成的多态性蛋白质,可与乳糜微粒㊁HDL-C和LDL-C结合,通过调节这些脂蛋白与特定受体结合,参与其转运和代谢,从而在调节机体脂代谢方面发挥重要作用[16]㊂APOE由位于19号染色体上的APOE基因编码,包括两种常见的SNPs,即388T>C(rs429358)和526C >T(rs7412),这些SNPs可形成3种单倍型,如ε2 (388T-526T)㊁ε3(388T-526C)和ε4(388C-526C),及6种基因型,如ε2/ε2㊁ε2/ε3㊁ε2/ε4㊁ε3/ε3㊁ε3/ε4何ε4/ε4[17]㊂既往研究[18]表明,APOE 基因多态性在肝脏疾病的发生发展过程中起着重要作用㊂本研究结果显示,MAFLD组APOE基因ε3/3基因型频率和E3基因表型频率显著高于健康人,而ε3/4基因型频率和E4基因表型频率显著低于健康人,提示携带APOE基因ε3/3基因型和E3基因表型者更容易发生MAFLD㊂与ε2和ε3携带者相比,ε4携带者血清LDL-C水平显著升高,但与ε3和ε4携带者相比,ε2携带者血清LDL-C水平显著降低,提示APOE基因多态性可能参与调节脑梗死患者脂代谢[19]㊂因此,有效控制血脂水平可能对MAFLD的防控和治疗具有积极的意义,检测APOE基因多态性有助于为更好地控制血脂水平提供分子靶向治疗依据㊂研究认为,APOE基因多态性能够影响缺血性脑梗死患者他汀类药物的降脂效果,其中ε2和ε3携带者血脂降低效果明显,而ε4携带者血脂降低效果较差[20],临床应根据个体情况进行针对性的给药㊂ʌ参考文献ɔ[1]候萌萌,苑喜微,王一奇,等.超声衰减参数在代谢相关脂肪性肝病诊断中的应用研究.中华肝脏病杂志,2022,30(3):290-296. [2]徐春玲,苗重昌,刘雨成,等.应用MRI多回波水脂分离技术评估代谢相关性脂肪性肝病患者肝脏脂肪含量的临床意义.实用肝脏病杂志,2021,24(2):220-223.[3]Ahadi M,Molooghi K,Masoudifar N,et al.A review of non-alco-holic fatty liver disease in non-obese and lean individuals.J Gastro-enterol Hepatol,2021,36(6):1497-1507.[4]Ereqat S,Cauchi S,Eweidat K,et al.Association of DNA methyla-tion and genetic variations of the APOE gene with the risk ofdiabetic dyslipidemia.Biomed Rep,2022,17(1):61-70. [5]Wu X,Gong C,Weinstock J,et al.Associations of the SLCO1B1polymorphisms with hepatic function,baseline lipid levels,and lipid-lowering response to simvastatin in patients with hyperlipi-demia.Clin Appl Thromb Hemost,2018,24(9):240-247. [6]Liu Q,Wu H,Yu Z,et al.APOE geneε4allele(388C-526C)effects on serum lipids and risk of coronary artery disease in southern Chinese Hakka population.J Clin Lab Anal,2021,35(9):e23925.[7]中华医学会肝病学分会脂肪肝和酒精性肝病学组,中国医师协会脂肪性肝病专家委员会.非酒精性脂肪性肝病防治指南(2018年更新版).实用肝脏病杂志,2018,21(2):177-186.[8]吕璐,平凡,李玉秀.他汀类药物治疗非酒精性脂肪性肝病获益及风险.中华内分泌代谢杂志,2021,37(11):1042-1048. [9]吴滔,邹耀威,马剑达,等.类风湿关节炎患者非酒精性脂肪性肝病的特征及相关因素分析.中华预防医学杂志,2022,56(5): 574-582.[10]Dabravolski SA,Bezsonov EE,Baig MS,et al.Mitochondrial muta-tions and genetic factors determining NAFLD risk.Int J Mol Sci, 2021,22(9):4459-4488.[11]Wu Y,Fang F,Wang Z,et al.The influence of recipient SLCO1B1rs2291075polymorphism on tacrolimus dose-corrected trough con-centration in the early period after liver transplantation.Eur J Clin Pharmacol,2021,77(6):859-867.[12]Song G,Chung JE,Yee J,et al.Effects of SLCO1B1andSLCO1B3genetic polymorphisms on valsartan pharmacokinetics in healthy Korean volunteers.J Pers Med,2021,11(9):862-874.[13]Favela-Mendoza AF,Rodríguez-Rodríguez BG,Rojas-Prado E,et al.Prevalence of protective haplotypes of the SLCO1B1gene for statin transport in Mexican populations.Per Med,2021,18(6): 533-540.[14]Mo Q,Huang S,Ma J,et al.Association between SLCO1B1poly-morphism distribution frequency and blood lipid level in Chinese a-dults.Br J Biomed Sci,2021,78(1):23-27.[15]Park JW,Kim JM,Lee HY,et al.CYP3A5∗3and SLCO1B1c.521T>C polymorphisms influence the pharmacokinetics of atorvastatin and2-hydroxy atorvastatin.Pharmaceutics,2022,14(7):1491-1501.[16]Zhou T,Li H,Zhong H,et al.Association of apoE gene polymor-phisms with lipid metabolism in renal diseases.Afr Health Sci, 2020,20(3):1368-1381.[17]王娟,杨柳,权乾坤,等.老年人载脂蛋白E基因多态性和血脂代谢与心脑血管病的相关性研究.中华老年医学杂志,2020,39(8):883-886.[18]Nascimento JCR,Matos GA,Pereira LC,et al.Impact of apoli-poprotein E genetic polymorphisms on liver disease:An essential re-view.Ann Hepatol,2020,19(1):24-30.[19]Wu H,Huang Q,Yu Z,et al.The SNPs rs429358and rs7412ofAPOE gene are association with cerebral infarction but not SNPs rs2306283and rs4149056of SLCO1B1gene in southern Chinese Hakka population.Lipids Health Dis,2020,19(1):202-210.[20]席宁,王永辉,周静,等.ApoE基因多态性对缺血性脑梗死患者他汀类降脂药物治疗效果的影响.中华医学遗传学杂志,2022, 39(1):94-98.(收稿:2022-10-12)(本文编辑:刘波)。
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
148
中国卫生产业·第九卷·第一期·中
medical laboratory sciences
医学检验
CHINA HEALTH INDUSTRY
对于遗传性的因素与酒精性肝病间
的关系,一直是临床争议的话题,本文通
过观察探讨酒精代谢酶基因多态性与酒
精性肝病关系,总结其临床价值如下。
1 资料与方法
1.1 一般资料
选取我院2008年12月至2010年12月
诊断为酒精性肝病(ALD)的患者50例,
设为观察组A,男39例,女11例,年龄在
45～71岁,平均年龄为55.3岁;选择有
酗酒史的人群120例,设为观察组B,男
81例,女39例,年龄在44～70岁,平均年
龄为54.6岁;再选择同期体检健康的人
群120名,设为对照组,男67例,女53例,
年龄在47～73岁,平均年龄为56.1岁;
观察比较3组人群酒精代谢酶基因的细
胞色素P4502E1(CYP2E1)、乙醛脱氢酶
2(ALDH2)、乙醇脱氢酶3(ADH3)的基因
型及基因频率。3组人群从年龄、性别等方
面比较无显著差异(
P
＞0.05),具有可比
性。
1.2 方法
1.2.1 DNA制备 对白细胞采取饱
和酚法进行DNA提取。
1.2.2 PCR扩增 选择反应参数为
在94ºC下进行5min预变性,在94ºC下进
行1min变性,在52ºC下进行1min退火,
在72ºC下进行1min延伸,共进行35个循
环过程,然后在72ºC下进行7min延伸,对
ADH3上的SspI位点、ALDH2上的MboII
位点多态性引物进行检测。选择反应参数
为在94ºC下进行5min预变性,在94ºC下
进行1min变性,在60ºC下进行1min退火,
在72ºC下进行1min延伸,共进行35个循
环过程,然后在72ºC下进行7min延伸,对
CYP2E1上的Pst I或Rsa I位点多态性引
物进行检测
[1]
。
1.2.3 酶切 分别采取Pst I、
MboII、SspI对PCR产物进行消化过夜,再
使用4%的琼脂糖凝胶进行电泳。
1.3 统计学方法
本组基因型及基因频率的数据采取
卡方软件V1.61版本检验,以
P
＜0.05为
有统计学意义。
2 结果
3组人群中的CYP2E1、ADH3的Pst I
或Rsa I位点的等位基因分布比较无明显
差异(
P
＞0.05),无统计学意义。ALDH2的
3种基因型在观察组A、B和对照组间分布
比较皆存在一定差异(
P
＜0.05),具有统计
学意义。ALDH2的2种等位基因在观察组
A、B与对照组间的分布比较存在一定差
异(
P
＜0.05),具有统计学意义。ALDH2的
2种等位基因在观察组A、B间的分布比较
无明显差异(
P
＞0.05),无统计学意义。
3 讨论
酒精在人体肝内需要经3个酶系统
进行氧化,包括(1)经细胞质内的乙醇脱
氢酶(A DH);(2)经微粒体乙醇氧化系
统内的细胞色素P4502E1(CYP2E1);(3)
经过氧化物酶体内的过氧化物酶。其中
以CYP2E1与ADH为酒精代谢过程中
的主要酶,均具有基因多态性,由于不同
的基因个体对酶活性的表达存在差异,
会对机体对于酒精的易感性产生影响。
本文中统计发现,ALDH2组中的基因
型ADH2×1/2×1和ADH2×1/2×2在
ALD及有酗酒史的人群中分布对比正常
人群存在显著差异,而CYP2E1组中的基
因型ADH3×1/3×2和ADH3×2/3×2
在ALD、有酗酒史及正常人群中分布均
偏低,而ADH2×2/2×2则在ALD、有酗
酒史的人群中皆无0检出率,因此,携带
ADH2×2杂合子的人群在长期酗酒的情
况下,其患ALD的风险性明显增高
[2]
。
综上所述,酒精代谢酶基因多态性
与酒精性肝病的发生及发展有密切的关
系,CYP2E1、ALDH2和ADH3均与酒精
依赖有密切的关系,在酒精性肝病的发生
及发展中其重要的推动作用,具有重要的
临床意义。
参考文献
[1] 周文婷,李景鹏,崔羽,等.乙醇代谢酶基
因多态性与酒精性肝病关系[J].现代生
物医学进展,2007,17(9):1323～1325.
[2] 卿笃信,酒精代谢酶与酒精性肝病的关
系研究进展[J].国外医学·生理、病理科
学与临床分册[J].2006,23(3):310～312.
【收稿日期】2011-12-18
酒精代谢酶基因多态性与酒精性肝病关系研究探讨
薛成荣
(福建省福安市甘棠卫生院 福建福安 355009)
【摘要】目的 观察探讨酒精代谢酶基因多态性与酒精性肝病关系。方法 选取我院2008年12月至2010年12月诊断为酒精性肝病
(ALD)的患者50例,设为观察组A,选择有酗酒史的人群120例,设为观察组B;再选择同期体检健康的人群120名,设为对照组,观察
比较3组人群酒精代谢酶基因的细胞色素P4502E1(CYP2E1)、乙醛脱氢酶2(ALDH2)、乙醇脱氢酶3(ADH3)的基因型及基因频率。
结果
ALDH2的3种基因型在观察组A、B和对照组间分布比较皆存在一定差异(
P
＜0.05),具有统计学意义。ALDH2的2种等位基因
在观察组A、B与对照组间的分布比较存在一定差异(
P
＜0.05),具有统计学意义。结论 酒精代谢酶基因多态性与酒精性肝病的发
生及发展有密切的关系,CYP2E1、ALDH2和ADH3均与酒精依赖有密切的关系意义。
【关键词】酒精代谢酶基因多态性 酒精性肝病 基因型 基因频率
【中图分类号】R2 【文献标识码】A 【文章编号】1672-5654(2012)01(b)-0148-01