ID柱使用-溶剂切换
PLgel凝胶色谱柱使用指南.
PLgel凝胶色谱柱使用指南为了尽可能延长一根凝胶色谱柱的寿命，请在使用前仔细阅读本说明。
本说明仅针对PL公司的PLGel凝胶色谱柱，如果您使用的是其它类型或其它公司的凝胶色谱柱，请注意并不是所有内容均适用。
柱子安装一般使用1/16”不锈钢管来连接柱子，0.010”内径适用于分析柱，0.020”内径适用于制备，连接管线应该尽量短来避免死体积，会造成系统性能下降。
柱连接接头应使用与Parker 兼容的1/16”锥箍和螺母，详见图1，请按照GPC柱的使用方向来连接，螺母应当在手拧紧后用扳手再拧1/4圈就足够了，过分拧紧并不会改善密封，反而会损坏螺纹造成泄漏。
图 1Compatible Connectors在图1中的X＝0.090”，约等于2.28毫米，螺母的最小长度应为0.210”，约为5.33毫米，请不要使用Waters和Rheodyne公司的产品，他们与PL的柱子并不兼容。
图 2在安装柱子时，请不要将扳手放在图2所示X处，应当放在柱未端六角处。
在与其它的柱子相连之前，建议将柱子与泵相连，用少量流动相清洗一下连接管内部和接头。
流速对于传统的7.5毫米内径的GPC柱子，1.0ml/min是一个最优化的流速，当柱子的内径增加或减少时，应当适当调整体积流速来保证等效的线速度。
表1给了大家一个推荐的流速，然而对于一些高粘度的流动相，应当适当减小或升高温度，如果要更换溶剂，流速要逐渐升高，无论如何，都不要在超过柱子的最大压力下使用柱子（详见表3）。
表 1柱型 适用流速 (ml/min) 建议流速 (ml/min)PLgel 7.5mm ID PLgel MiniMIX 4.6mm ID PLgel Prep 25mm ID 0.5 – 1.50.2 – 0.55.0 – 20.01.00.310.0样品制备及进样根据样品的分子量来优化样品浓度毫无疑问是最好的方式。
宽分布样品通常可以比窄分布样品使用更大的浓度。
色谱柱溶剂置换
色谱柱溶剂置换
色谱柱溶剂置换是指将色谱柱中的旧溶剂逐渐替换为新溶剂的过程。
这个过程通常用于改变色谱柱的流动相，以适应不同的分析需求或柱寿命的延长。
色谱柱溶剂置换的步骤如下：
1. 准备新的溶剂：根据需要更改的流动相的组成，准备相应的新溶剂。
2. 移除旧溶剂：将色谱柱与旧溶剂的流动相连接，并使用泵或手动推进旧溶剂从色谱柱中排除出去。
3. 进行溶剂置换：将新溶剂与色谱柱连接，并逐步推进新溶剂，使其逐渐替代旧溶剂。
这个过程通常需要一段时间，以确保旧溶剂完全被新溶剂替代。
4. 检查柱的稳定性：在溶剂置换完成后，需要检查色谱柱的稳定性，以确保柱效不受干扰，并达到所需分离效果。
5. 调整流速和梯度：根据新溶剂的性质，可能需要调整色谱流速和梯度程序，以获得最佳的分析结果。
色谱柱溶剂置换的目的是确保色谱柱中的旧溶剂被完全排除，并将新溶剂适当地替代，以实现良好的分离和分析效果。
同时，溶剂置换也可以延长柱寿命，减少旧溶剂对柱的影响，提高柱的稳定性和分离性能。
Kinetex使用说明
流速
Kinetex™核-壳色谱柱在传统LC仪器的压力限制内能良好地 运行，而且在UHPLC仪器上有与亚-2µm颗粒相当的性能。 不过，您还可以参考以下几点来达到最优良的Kinetex™核壳色谱柱效能和最大限度的好处： • 缩小进样前的样品扩散
色谱柱使用注意事 项和优化说明
• Kinetex™ HILIC色谱柱稳定于pH 2 至 7.5，可用于典型的 HILIC流动相 (乙腈/缓冲盐水溶液的混合物)。
Kinetex™ 2.6 µm 传统 3 µm 传统 5 µm
流动相限制
• Kinetex™ C18色谱柱稳定于pH 1.5 至 10，可用于典型 的反相流动相（甲醇水、乙腈水或适当的缓冲盐水溶液/ 甲醇或缓冲盐水溶液/乙腈的混合物)。 • Kinetex PFP色谱柱稳定于pH 1.5 至 8，可用于典型的 反相流动相（甲醇水、乙腈水或适当的缓冲盐水溶液/甲 醇或缓冲盐水溶液/乙腈的混合物)。
延长柱寿命
Phenomenex建议（尤其是从复杂基质中萃取样品时）使用 KrudKatcher™在线超滤器来延长Kinetex™色谱柱的寿命。 在理想情况中，样品必须完全溶解至流动相内或使用约 0.20μm孔隙度的针式过滤器过滤。
货号 AF0-8497 产品描述 HPLC KrudKatcher 在线超滤器 0.5 µm 孔隙度 x 0.004 in. ID 单位 3 pk
色谱柱标签上的箭头表明流动方向。Phenomenex建议使 用UHPLC/HPLC Sure-Lok™手拧PEEK阳性螺母接头来安装 Kinetex™柱至 LC系统上。便捷的单件设计(AQ0-8503) 使压力能耐受至12,000psi (827bar)。方便的手拧螺母收紧 工具(AQ0-8508)可帮助实现不漏连接。
PW系列色谱柱使用说明书
1. 简介 TSKgel PW 系列色谱柱是东曹株式会社开发的高效液相色谱柱，主要用于水相高效凝胶过滤色谱
（GFC），适用于各类水溶性物质。该类色谱柱适用于水溶性合成聚合物、低聚物以及生物物质，如多 糖、核酸、蛋白质、肽等的分析或制备。
请仔细阅读本使用说明书，确保正确、有效地使用该类色谱柱。
表 1 应用领域
注意
■ 使用环境必须通风良好 如果通风不良，易燃或有毒溶剂可能会导致火灾、爆炸或中毒。
■ 请勿喷洒溶剂 溶剂发生喷洒或泄露可能会导致火灾、触电、中毒、受伤以及腐蚀。 清除漏出的溶剂时，请佩戴合适的护具。
■ 请佩戴护目镜和防护手套 有机溶剂和酸属于有害物质，切勿直接接触皮肤。
■ 请小心处理包装 处理不当可能会导致产品破裂或溶剂飞溅。
冲液，醋酸盐缓冲液。 水溶液的盐浓度一般应该保持在 0.5 M 以下，防止粘度上升（盐增多引起）和沉淀（温度变化引
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起）。另外，使用不锈钢色谱柱时，为了延长色谱柱的寿命，应尽量避免接触卤离子。如果使用了此类 盐溶液进行了测量，请在测量后，按照 5-3 项的内容清洗色谱柱。
6-2-3 有机溶剂 PW 系列色谱柱可以使用水溶性有机溶剂的水溶液，如甲醇、乙醇和乙腈。PW 系列凝胶在通常的
4-2 进液方向 请按图 2 上标签所示的箭头方向使用色谱柱。长时间反向使用色谱柱会降低色谱柱的性能。
4-3 防止气泡进入色谱柱 在设备上安装或取下色谱柱时，注意不要在色谱柱内混入气泡。安装色谱柱之前，请务必清除所
有管路中的气泡。如果在色谱柱中混入了气泡，则会形成沟槽而降低色谱柱的性能。
4-4 安装 取下色谱柱进口侧的保护塞后，如果末端接头处发生溶剂漏出，请按以上方法将色谱柱小心地连
4-5 串联色谱柱 串联多根色谱柱时，请按上述方法根据孔径由大到小的顺序进行连接，这样可以首先分离出分子
岛津液相操作指南
本系统由LC2010液相色谱系统（柱温箱、紫外检测器、四元低压梯度输液泵、真空脱气机、系统控制器）、SPD-M10Avp二极管阵列检测器及CLASS-VP 色谱工作站组成。
1开机分别打开2010系统和SPD－M10Avp二极管阵列检测器电源开关，仪器进入自检状态，待自检完成后，再打开CLASS-VP色谱工作站。
2CLASS-VP色谱工作站的使用2.1 打开CLASS-VP色谱工作站2.1.1 开机界面选择Instrument 1，进入主界面。
2.1.2主界面2.1.3 功能栏可以对柱温箱、流路、自动进样器、输液泵进行控制2.2系统设置单击系统控制面板任一图标或选择菜单【Method】→【Instrument Setup】即可进入系统设置面板。
在系统设置面板中设置输液泵、柱温箱及自动进样器等工作参数。
设置完毕单击【Apply】按钮，更新设置。
【Pumps】选单进行四元低压梯度泵的设置，【Oven】选单进行柱温箱温度设置，【Time Programe】选单可以设置时间程序。
点击系统控制面板中的图标弹出PDA设置对话框，可以对检测器进行设置。
系统可以同时检测4种不同波长的色谱数据。
PDA设置界面2.3进样单击控制按钮或系统控制面板中图标，进行单针进样；单击制按钮或系统控制面板中图标，进行样品组进样。
单针进样时，弹出单针进样对话框，输入样品及实验信息，按【Start】确认。
样品组进样时，弹出样品组进样对话框，选择已编辑的样品组，按【Start】确认。
单针进样对话框样品组进样对话框2.4样品组的编辑单击系统控制面板在菜单栏中如图中的图标操作2.5数据保存操作完成后，数据自动存入样品方法中指定的路径。
2.6报告2.6.1 查看报告 2.6.2 打印报告2.6.3 编辑报告格式单击菜单【Custom Report】项，出现报告编辑窗口，在窗口空白处单击鼠标右键，弹出快捷菜单，可对报告定制编辑。
单击鼠标右键报告编辑窗口3 实验完毕后，应使用适当溶剂（水、甲醇等）冲洗流路，待冲洗干净冲洗适宜时间后，依次关闭CLASS-VP色谱工作站、LC－2010液相色谱仪。
4.柱切换高效液相色谱法的原理和特点。
4.柱切换高效液相色谱法的原理和特点。
柱切换高效液相色谱法（Column Switching High Performance Liquid Chromatography，简称CSP-HPLC）是一种高效的液相色谱法，是在传统的HPLC法基础上发展而来的一种新型色谱技术。
它通过柱与柱之间的切换，实现多种不同性质的样品成分的分离与净化，具有快速、高效、简便和灵敏度高等优点。
CSP-HPLC的原理CSP-HPLC采用的是柱切换技术，它由前截取柱和后分离柱组成。
在前截取柱中，样品与气体或液体混合后，通过固定在柱中的吸附剂或阴离子交换剂进行固相萃取，此时某些物质难以被吸附剂或阴离子交换剂吸附，即相对亲水性强，轻易流失，其他物质被吸附固定在柱上。
前截取柱的主要作用是去除样品中的成分杂质和过量物质，只保留目标物质，样品成分经前截柱处理后再将其引入到后分离柱中。
后分离柱则是通过不同类型、不同规格和不同度数的固定相材料实现异构体的之间的分离。
在后分离柱中，一般采用反相柱，如C18固定相材料，随后根据目标物质的性质选择优化的色谱条件进行分离并测定。
CSP-HPLC的特点1. 高效快速：CSP-HPLC在柱与柱之间的切换过程中，分离后的样品迅速能被重新治理分离，从而使分析时间大大缩短，分离效率迅速提升。
2. 灵敏度高：CSP-HPLC样品经过固相萃取后，可以去除试样中的干扰物，同时提取出样品中的目标成分，使得分析结果具有更好的稳定性和准确性。
3. 适用范围广：CSP-HPLC可以应用于多种化合物的分析。
例如化学反应中残留物质的分析、药物中杂质成分的分析、特定成分的分离、食品添加物的分析等等。
同时，由于CSP-HPLC的自动收集技术，可实现对单一成分、多组分及矩阵中目标物质的不同形态的定位选择进行加工处理。
4. 降低溶剂消耗量：CSP-HPLC的柱切换技术可以降低溶剂消耗量，减少了对环境的影响。
总之，柱切换高效液相色谱法是一种快速、高效、灵敏度高的液相色谱法，它在传统的HPLC法基础上实现了多种不同性质的样品成分的分离和净化，成为当今青睐的分析方法之一，并得到广泛应用。
大赛璐手性柱使用注意事项
Normal Phase
CHIRALPAK® AD-3/AD-H/AD CHIRALPAK® AS-3/AS-H/AS CHIRALPAK® AY-3/AY-H CHIRALPAK® AZ-3/AZ-H CHIRALCEL® OD-3/OD-H/OD CHIRALCEL® OJ-3/OJ-H/OJ CHIRALCEL® OZ-3/OZ-H CHIRALCEL® OX-3/OX-H CHIRALCEL® OB-H/OB CHIRALCEL® OC-H/OC CHIRALCEL® OA CHIRALCEL® OG CHIRALCEL® OF CHIRALCEL® OK
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Part. 1-6
几个常见问题
Q1：甲醇、乙腈能不能用作流动相？ 可用100%甲醇或乙腈作流动相，但必须用异丙醇或乙醇完全置换掉 正己烷才可以。 Q2：手性柱可以倒接使用吗？ 只有在柱子出现问题后，正接冲洗无效，可考虑倒接冲洗；一直按 箭头方向使用有利于柱子的稳定性。 Q3：样品可以直接用甲醇溶解进样吗？ 对烷烃溶解度差的样品，可用醇先溶解，再用流动相稀释；如析出， 建议用键合型手性柱或反相手性柱分析。
Normal Phase
CHIRALPAK® AD-3/AD-H/AD CHIRALPAK® AS-3/AS-H/AS CHIRALPAK® AY-3/AY-H CHIRALPAK® AZ-3/AZ-H CHIRALCEL® OD-3/OD-H/OD CHIRALCEL® OJ-3/OJ-H/OJ CHIRALCEL® OZ-3/OZ-H CHIRALCEL® OX-3/OX-H CHIRALCEL® OB-H/OB CHIRALCEL® OC-H/OC CHIRALCEL® OA CHIRALCEL® OG CHIRALCEL® OF CHIRALCEL® OK
液相色谱柱的使用注意事项及再生
液相色谱柱的使用注意事项及再生1、色谱柱的使用说明：（1）、色谱柱使用前注意事项：色谱柱的储存液无特殊说明，均为评价报告所示的流动相。
在使用前，一定要注意色谱柱的储存液与要分析样品的流动相是否互溶。
在反相色谱中，如用高浓度的盐或缓冲液作洗脱剂，应先用10％左右的低浓度的有机相洗脱剂过渡一下，否则缓冲液中的盐在高浓度的有机相中很容易析出，堵塞色谱柱。
（2）、流动相：流动相中所使用的各种有机溶剂要尽可能使用色谱纯，配流动相的水最好是超纯水或全玻璃器皿的双蒸水。
如果将所配得流动相再经过0.45μm的滤膜过滤一次则更好，尤其是含盐的流动相。
另外，装流动相的容器和色谱系统中的在线过滤器等装置应该定期清洗或更换。
以常规硅胶为基质的键合相填料通常的PH值适用范围是2.0-8.0，BDS C18适合于碱性化合物，PH值适用范围为2.0-10.0。
当必须要在PH值适用范围的边界条件下使用色谱柱时，每次使用结束后立即用适合于色谱柱储存并与所使用的流动相互溶的溶剂清洗，并完全置换掉原来所使用的流动相。
（3）、样品：样品也要尽可能清洁，可选用样品过滤器或样品预处理柱（SPE）对样品进行预处理；若样品不便处理，要使用保护柱。
在用正相色谱法分析样品时，所有的溶剂和样品应严格脱水。
2、色谱柱的保存（1）、反相色谱柱每天实验后的保养：使用缓冲液或含盐的流动相，实验完成后应用10%的甲醇/水冲洗30分钟，洗掉色谱柱中的盐，再用甲醇冲洗30分钟。
注意：不能用纯水冲洗柱子，应该在水中加入10%的甲醇，防止将填料冲塌陷。
（2）、长期保存色谱柱：如色谱柱要长时间保存，必须存于合适的溶剂下。
对于反相柱可以储存于纯甲醇或乙腈中，正相柱可以储存于严格脱水后的纯正己烷中，离子交换柱可以储存于水（含防腐剂叠氮化钠或柳硫汞）中，并将购买新色谱柱时附送的堵头堵上。
储存的温度最好是室温。
3、色谱柱的再生因为色谱柱是消耗品，随着使用时间或进样次数的增加，会出现色谱峰高降低，峰宽加大或出现肩峰的现象，一般来说可能是柱效下降。
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1.柱子使用前的冲洗
柱子在使用前，务必确认仪器及柱子当前的溶剂体系
1）正相手性柱（正己烷/醇体系）-仪器为反相体系（缓冲盐和有机相）
先不接柱子，仪器接上两通，用纯水将仪器所有管路（包括进样器清洗管路等）冲洗60ml 以上，过渡掉之前的缓冲盐和有机相；接着用乙醇或异丙醇冲洗60ml以上，过渡掉之前的水；再用实验的流动相冲洗60ml以上，过渡掉之前的醇；最后接上柱子。
2）反相手性柱-仪器为正相体系
先不接柱子，仪器接上两通，用乙醇或异丙醇冲洗60ml以上，过渡掉之前的正相溶剂；接着换成纯水，冲洗60ml以上，过渡掉之前的醇；再换成实验的流动相，冲洗60ml以上，过渡掉之前的水；最后接上柱子。
特殊柱子使用前的冲洗：
a．键合柱用于反相
确认键合柱的出厂保存溶剂，如为烷烃/醇，使用前务必将此体系过渡掉，不接柱子，反相仪器先用水过渡（＞60ml）；再用乙醇或异丙醇过渡之前的水（＞60ml）；然后接上柱子，低流速（乙醇-0.4ml/min左右，异丙醇-0.2ml/min左右，柱压必须低于5Mpa），冲洗20倍柱体积以上（15cm-30ml，25cm-50ml）；换成水-甲醇=10/90、水-甲醇=40/60、水-甲醇=80/20顺序冲洗，最后换上实验用的流动相。
2.柱子使用后的冲洗与保存
1）传统正相（正己烷/乙醇/异丙醇）
使用完含添加剂的流动相后，先用同比例不含添加剂的中性流动相冲洗20倍柱体积，除去添加剂，然后用出厂保存溶剂保存。
例：ADH柱实验流动相是正己烷/异丙醇/二乙胺=75/25/0.1，先用正己烷/异丙醇=75/25冲洗，去除二乙胺添加剂，再用正己烷/异丙醇=90/10的出厂保存溶剂保存。
2）非传统正相（二氯甲烷、乙酸乙酯等）
使用完含添加剂的流动相后，先用同比例不含添加剂的中性流动相冲洗20倍柱体积，除去添加剂，如当前流动相与出厂保存溶剂不互溶，请用合适的互溶溶剂过渡柱子，最后保存在出厂保存溶剂里。
例：IA柱实验流动相是二氯甲烷/甲醇/二乙胺=80/20/0.1，先用二氯甲烷/甲醇=80/20冲洗，去除二乙胺添加剂，再用甲基叔丁基醚过渡柱子，最后用正己烷/异丙醇=90/10的出厂保存溶剂保存。
3）常规反相（缓冲盐、有机相）
使用完有缓冲盐的流动相后，先用同比例水-有机相冲洗20倍柱体积，确保样品都从柱子上洗脱；再用高比例水-有机相（推荐水-有机相=80/20）冲洗20倍柱体积，确保缓冲盐从柱子中去除，最后用出厂保存溶剂保存。
如长期不用，建议用水-乙腈=10/90的高比例有机相溶液保存，以免细菌滋生。