色谱柱的维护及注意事项

合集下载

色谱柱的使用注意事项及维护 色谱柱如何操作

色谱柱的使用注意事项及维护 色谱柱如何操作

色谱柱的使用注意事项及维护色谱柱如何操作在日常分别分析工作中,色谱柱的正确使用和维护特别紧要,色谱柱使用是否得当,直接影响色谱柱的寿命,稍有不慎就会降低柱效、缩短使用寿命甚至损坏。

在色谱操作过在日常分别分析工作中,色谱柱的正确使用和维护特别紧要,色谱柱使用是否得当,直接影响色谱柱的寿命,稍有不慎就会降低柱效、缩短使用寿命甚至损坏。

在色谱操作过程中,需要注意下列问题,以维护色谱柱。

(1)柱子在装卸、更换时,动作要轻,接头拧紧要适度。

必需防止较强的机械振动,以免柱床产生空隙。

(2)假如仪器用来做仪器分析,样品种类有限,但分析次数多,则不妨为每一类常规分析配置一根专用柱,这样有助于延长柱子的寿命。

(3)避开压力和温度的急剧变化及任何机械震动。

温度的蓦地变化或者使色谱柱从高处掉下都会影响柱内的填充情形;柱压的蓦地上升或降低也会冲动柱内填料,因此在调整流速时应当缓慢进行,在阀进样时阀的转动不能过缓。

(4)应渐渐更改溶剂的构成,特别是反相色谱中,不应直接从有机溶剂更改为全部是水,反之亦然。

(5)如使用柱温掌控装置时,应注意在通人流动相后才能升温。

(6)一般说来色谱柱不能反冲,只有生产者指明该柱可以反冲时,才可以反冲除去留在柱头的杂质。

否则反冲会快速降低柱效。

(7)选择使用适合的流动相,以避开固定相被破坏。

有时可以在进样器前面连接一个预柱,分析柱是键合硅胶时,预柱为硅胶,可使流动相在进入分析柱之前预先被硅胶“饱和”,避开分析柱中的硅胶基质被溶解。

(8)避开将基质多而杂的样品尤其是生物样品直接注人柱内,需要对样品进行预处理或者在进样器和色谱柱之间连接一个保护柱。

保护柱一般是填有相像固定相的短柱。

保护柱可以而且应当常常更换。

(9)常常用强溶剂冲洗色谱柱,清除保留在柱内的杂质。

在进行清洗时,对流路系统中流动相的置换应以相混溶的溶剂渐渐过渡,每种流动相的体积应是柱体积的20倍左右,即常规分析需要50—75mL。

(10)保存色谱柱时应将柱内充分乙腈或甲醇,柱接头要拧紧,防止溶剂挥发干燥。

液相色谱柱维护保养及仪器冲洗

液相色谱柱维护保养及仪器冲洗

液相色谱柱维护保养及仪器冲洗注意:每个色谱柱使用之前都要阅读一下使用说明书;色谱柱维护保养是很重要的,关系到色谱柱的使用寿命和检测结果的准确性,所以任何人用过色谱柱之后,一定要对色谱柱进行保养,管理人员和使用者互相监督;总的原则是色谱柱要轻拿轻放,避免损坏填料;另外没有使用的情况下,一定要保证两端的堵头封好;对于具体的色谱柱,下面列出常用色谱柱维护保养的具体方法和注意事项,以便使用者参考;min缓慢升高到min不接检测器冲洗色谱柱30分钟后,将色谱柱与检测器连上,流速调为ml/min冲洗色谱柱60分钟,然后不断降低有机相的比例如80%、50%、10%甲醇或乙腈各冲洗至少30分钟;若色谱柱暂时不用,则将色谱柱保存在高比例有机相中如80%甲醇或乙腈,或者参考该色谱柱使用说明书中建议的溶剂中;色谱柱使用时应用与分析流动相相同比例的有机溶剂将缓冲盐溶液换成水冲洗色谱柱15分钟,然后再换成流动相进行样品分析;样品分析完后,色谱柱维护与保养方法:流动相中若含酸、碱、盐类物质,则要先用10%甲醇或乙腈冲洗,min的流速冲洗至少30min,再用80%甲醇或乙腈冲洗至少30min,柱子保存在80%甲醇或乙腈里具体问题具体分析,洗脱程序可以是梯度洗脱程序,注意如果最后色谱柱保存的是高有机相,第二天用之前一定要用高水相过渡一下,再换成流动相;如柱子长时间未用,则柱子保存在100%的甲醇或乙腈里;对于含有离子对试剂的流动相如庚烷磺酸钠和十二烷基磺酸钠等,柱子应采用梯度洗脱,一般用乙腈-水系统水:90-10;乙腈:10-90冲洗时间要稍长些,然后保存于90%乙腈;需要特别强调的是,目前所有的C18柱均不能用纯水进行长时间1小时以上冲洗,除非有专门耐水的专用柱,否则,用纯水长时间冲洗色谱柱,会导致色谱柱的固定相流失和相塌陷,损坏色谱柱;大多数反相色谱柱的pH稳定范围是2~8,有的pH稳定范围会宽,具体pH稳定范围参照色谱柱说明书,当分析条件的pH值偏小或偏大时,可选择pH稳定范围宽的柱子进行分析,否则,会损坏色谱柱;在每次进行样品分析时,要保证流动相包括盐、缓冲盐、酸等与色谱系统及柱内的保存液要互溶,如不能互溶,则需要用一定比例的有机溶剂不低于10%或与分析流动相相当的有机溶剂对柱子进行过渡,否则,流动相中的盐会在系统与柱内析出,影响样品分析或损坏柱子;硅胶柱、正相手性色谱柱包括AS-H、AD-H、OD-H系列,5DMB、5TBB系列,OA 系列如OA-3100、OA-3300对于未启用的新的色谱柱,在保证系统是正相的情况下,可先用异丙醇小流速流速为~min冲洗色谱柱约15分钟,然后换上正相流动相平衡进行色谱分析;硅胶柱及正相手性柱不能过水相对于sepax系列的硅胶柱,可以过低比例的水相有机相不低于50%,接上色谱柱之前要保证液相色谱系统中的所有管路为正相流动相如是不含盐的反相溶液如水/乙腈;水/甲醇,先用异丙醇冲洗所有管路,然后用正相流动相冲洗所有管路,最后再接上色谱柱;若反相流动相中含有缓冲盐如缓冲盐/乙腈;缓冲盐/甲醇,先用纯水冲洗HPLC系统,然后用异丙醇冲洗所有管路,最后用正相流动相冲洗,再接上色谱柱;使用结束后,先用异丙醇冲洗色谱系统与色谱柱,再用色谱级的正己烷冲洗色谱柱,或者直接用正己烷-异丙醇90:10冲洗,并保存在正己烷-异丙醇90:10中;如长时间未用,则保存在正己烷中;需要特别强调的是,冲洗硅胶柱时,不能用纯水或含水的有机溶剂或缓冲盐体系冲洗色谱柱,只能用纯有机溶剂冲洗色谱柱对于sepax系列的硅胶柱可以用不低于50%有机相冲洗色谱柱,最后保存在纯的有机溶剂中;在进行样品分析前,一定要保证流动相与色谱系统及色谱柱柱内的保存液要互溶,如不互溶,则需要用异丙醇过度,否则,会影响色谱系统与损坏柱子;反相手性色谱柱如:CHIRALCEL OZ-3R:同C18柱阴离子柱和阳离子柱:目前常见的阴子柱有waters IC-Pak TM anion,阳离子柱有磺酸基阳离子柱与waters阳离子交换柱钙型;对于waters IC-Pak TM anion 和waters阳离子交换柱钙型,新柱子使用前用高纯水小流速min缓慢升高到min冲洗约30分钟,然后再换成流动相平衡色谱柱;在冲洗色谱柱之前,要保证整个色谱系统为纯水相;对于磺酸基阳离子柱含有硅胶基柱的,使用前用甲醇或乙腈小流速冲洗30分钟,然后高纯水替换系统冲洗,然后接上色谱柱;分析完样品后,对于waters IC-Pak TM anion和waters阳离子交换柱钙型用高纯水冲洗色谱柱,色谱柱最后保存在纯化水中;对于磺酸基阳离子柱,用50%的乙腈或甲醇冲洗色谱柱30分钟,最后保存在甲醇或乙腈中参照柱子说明书;冲洗所用流速根据柱子耐压情况进行调整;需要特别强调的是waters IC-Pak TM anion和waters阳离子交换柱钙型是不能过有机相纯有机溶剂或有机溶液,否则会损坏色谱柱;氨基柱、氰基柱、苯基柱及C8柱目前所使用的氨基柱、氰基柱、苯基柱及C8柱基本都是使用反相系统,其操作方法与维护保养与C18相同;对于新碰到的别的型号的色谱柱,如本规程没有说明时,要参照色谱柱说明书具体问题具体分析;液相仪器的冲洗1、冲洗色谱系统具体情况具体分析,可针对缓冲盐浓度较高的流动相一般做完试验冲洗完色谱柱后,换上两通,将各通道放于10%乙腈中冲洗至少30分钟若原色谱系统中流动相含盐,则用高纯水有时候用温水效果更好冲洗至少30分钟后再用10%乙腈冲洗;若仪器长时间不用,则将仪器保存于80%乙腈中; 2、清洗进样针、柱塞杆洗针液应选择能较好溶解样品的溶剂如该样品在70%甲醇中溶解,则洗针液应选择70%甲醇或更高比例的甲醇;清洗柱塞杆的溶剂为了清洗流动相中析出的盐,一般选择低比例的有机相,如10%甲醇或乙腈;3、仪器的钝化色谱泵溶剂过滤头、进出口阀及管路包括进样器和检测池若被污染,系统应做清洗和钝化处理;一般采用30%磷酸水溶液作为清洗剂,用6mol/L硝酸作为钝化剂,先清洗再钝化;清洗的目的是去除不锈钢管路及系统内的污垢;钝化的目的是使不锈钢管路的内表面形成光滑均匀的氧化膜;30%磷酸水溶液制备:取85%浓磷酸35ml与65ml水混匀;6mol/L硝酸的制备:取浓硝酸40ml与60ml水混匀;方法:将色谱柱取下,用两通连接进样器和检测器,将所有吸滤头放入高纯水中,以min流速过渡至少30分钟,待管路中有机溶剂洗脱干净;再换用30%磷酸清洗系统约45分钟,再换高纯水冲洗,直至出口水pH值约为6~7用pH试纸测试,清洗完成;然后换用6mol/L硝酸冲洗系统约45分钟,再换高纯水冲洗,直至出口水pH值约为6~7,钝化完成;用纯甲醇过渡,浸润泵头及管路,备用;。

反相色谱柱维护

反相色谱柱维护

反相色谱柱维护一、定期清洗色谱柱为了保持反相色谱柱的性能和延长其使用寿命,应定期清洗色谱柱。

清洗时应使用专门的清洗溶剂,以去除残留的杂质和污染物。

清洗频率取决于使用频率和流动相的种类,一般建议至少每三个月清洗一次。

二、避免使用强酸、强碱或高浓度有机溶剂强酸、强碱或高浓度有机溶剂可能会损坏反相色谱柱的固定相,因此在使用过程中应尽量避免。

如果必须使用这些溶剂,应先进行充分的试验,以确保对色谱柱的影响在可接受范围内。

三、定期检查色谱柱的固定相是否流失固定相的流失可能会影响色谱柱的性能,因此应定期检查色谱柱的固定相是否流失。

如发现固定相流失,应及时更换色谱柱。

四、使用合适的流动相流动相的选择对反相色谱柱的性能和使用寿命有着重要影响。

应选择与固定相兼容的流动相,以避免对色谱柱造成损害。

同时,应避免使用含有大量缓冲液的流动相,以减少对色谱柱的腐蚀。

五、避免将色谱柱暴露在高温或阳光直射下高温或阳光直射可能会影响反相色谱柱的性能和使用寿命,因此应避免将色谱柱暴露在这些环境中。

如果必须将色谱柱暴露在高温或阳光直射下,应采取适当的保护措施。

六、每次使用后,应冲洗色谱柱以去除残留物质每次使用反相色谱柱后,应冲洗色谱柱以去除残留的杂质和污染物。

这样可以延长色谱柱的使用寿命,并提高其性能。

七、色谱柱储存时应避免交叉污染不同类型和品牌的反相色谱柱应分别存放,以避免交叉污染。

同时,储存环境应保持干燥、清洁和通风良好。

对于长时间不使用的色谱柱,应定期检查其性能以确保其完好无损。

酰胺色谱柱的日常维护

酰胺色谱柱的日常维护

酰胺色谱柱的日常维护
酰胺色谱柱的日常维护主要包括以下几个方面:
1. 储存:正确储存色谱柱是维护其使用寿命的重要因素。

色谱柱应避免阳光直射和高温环境,最好在4摄氏度下储存。

2. 清洗:在使用前和使用后,可以通过适当的清洗来去除可能附着在色谱柱上的杂质。

可以使用合适的洗涤剂进行清洗,然后用纯水或溶剂冲洗干净。

3. 系统预处理:在进行柱液相色谱前,可以进行系统预处理以确保柱子的稳定性和可靠性。

预处理包括用纯溶剂进行刷洗柱子,平衡柱子,以及进行标准溶液的运行来检验色谱柱的性能。

4. 避免冲击:在操作过程中要避免对色谱柱施加冲击力,避免损坏柱子的填充剂和固定相。

5. 定期更换:根据使用频率和实验需求,酰胺色谱柱可以在一定的使用周期后进行更换。

过时的柱子可能会导致分离效果下降或分辨率降低。

总之,正确的储存和日常维护可以延长酰胺色谱柱的使用寿命,并保证分析结果的准确性和可靠性。

色谱柱的使用说明

色谱柱的使用说明

1、色谱柱的使用说明:(1)色谱柱使用前注意事项:色谱柱的储存液无特殊说明,均为评价报告所示的流动相。

在使用前,一定要注意色谱柱的储存液与要分析样品的流动相是否互溶。

在反相色谱中,如用高浓度的盐或缓冲液作洗脱剂,应先用10%左右的低浓度的有机相洗脱剂过渡一下,否则缓冲液中的盐在高浓度的有机相中很容易析出,堵塞色谱柱。

(2)流动相:流动相中所使用的各种有机溶剂要尽可能使用色谱纯,配流动相的水最好是超纯水或全玻璃器皿的双蒸水。

如果将所配得流动相再经过0.45μm的滤膜过滤一次则更好,尤其是含盐的流动相。

另外,装流动相的容器和色谱系统中的在线过滤器等装置应该定期清洗或更换。

以常规硅胶为基质的键合相填料通常的PH值适用范围是2.0-8.0,BDS C18适合于碱性化合物,PH值适用范围为2.0-10.0。

当必须要在PH值适用范围的边界条件下使用色谱柱时,每次使用结束后立即用适合于色谱柱储存并与所使用的流动相互溶的溶剂清洗,并完全置换掉原来所使用的流动相。

(3)样品:样品也要尽可能清洁,可选用样品过滤器或样品预处理柱(SPE)对样品进行预处理;若样品不便处理,要使用保护柱。

在用正相色谱法分析样品时,所有的溶剂和样品应严格脱水。

2、色谱柱的保存(1)反相色谱柱每天实验后的保养:使用缓冲液或含盐的流动相,实验完成后应用10%的甲醇/水冲洗30分钟,洗掉色谱柱中的盐,再用甲醇冲洗30分钟。

注意:不能用纯水冲洗柱子,应该在水中加入10%的甲醇,防止将填料冲塌陷。

(2)长期保存色谱柱:如色谱柱要长时间保存,必须存于合适的溶剂下。

对于反相柱可以储存于纯甲醇或乙腈中,正相柱可以储存于严格脱水后的纯正己烷中,离子交换柱可以储存于水(含防腐剂叠氮化钠或柳硫汞)中,并将购买新色谱柱时附送的堵头堵上。

储存的温度最好是室温。

3、色谱柱的再生因为色谱柱是消耗品,随着使用时间或进样次数的增加,会出现色谱峰高降低,峰宽加大或出现肩峰的现象,一般来说可能是柱效下降。

色谱柱的使用操作规程是

色谱柱的使用操作规程是

色谱柱的使用操作规程是色谱柱是色谱分析中非常重要的工具,正确的使用操作规程可以确保色谱柱的寿命和分析结果的准确性。

以下是一份详细的色谱柱使用操作规程,共计1200字。

1. 色谱柱保存和准备1.1 色谱柱的保存:色谱柱通常由玻璃或者金属制成,应当避免与湿气、灰尘以及高温的环境接触。

保存时,应当将色谱柱放置在干燥、清洁且温度适宜的地方。

避免长时间曝光于阳光下。

储存条件的稳定性对于保持色谱柱的性能至关重要。

1.2 色谱柱的检查:在使用色谱柱之前,应当对其进行检查,确保柱身无破损、裂纹或者污染。

同时,应当检查色谱柱的规格和批号是否与实验所需完全匹配。

1.3 色谱柱的条件适应:某些色谱柱在使用之前需要进行条件适应。

一般的做法是,在使用之前进行几个小时的溶剂通过柱操作,以确保色谱柱的平衡状态,并且清除可能影响分析结果的残留物。

2. 连接色谱柱2.1 连接前准备工作:在连接色谱柱之前,应当确保色谱仪的泵和检测器已经打开,工作正常。

同时,应当确保带压装样器、流量计、接头等设备已经准备就绪。

2.2 连接色谱柱:先将附近日期较长的色谱柱拆下来,再将新的色谱柱连接上。

连接时,要注意使用适当的扭力,防止柱子变形或者破裂。

2.3 采用适当的接头:连接色谱柱时,要使用适当的接头和密封件,确保无泄露、无死角,以及良好的稳定性。

3. 柱子的清洗3.1 色谱柱的初始化:在首次使用某个新的色谱柱之前,必须进行初始化。

一般的做法是通过注入溶剂来清洗色谱柱,直到溶剂的出图稳定为止。

3.2 溶剂的选择:在清洗色谱柱时,应选择与待测样品相同的溶剂或者相似的溶剂,以确保能够有效清除之前的样品残留物,并且不影响下一个样品的分析。

3.3 清洗的步骤:一般的清洗步骤包括预洗、洗脱和再平衡。

预洗时,可以使用较强的溶剂,如甲醇或者乙醇,以清除可能附着在色谱柱上的杂质。

洗脱时,可以使用更强的溶剂进行清洗,如乙腈或者丙酮。

再平衡时,可以使用溶剂与待测样品相同的溶剂,以使色谱柱恢复到平衡状态。

色谱柱使用注意事项及维护和修理保养

色谱柱使用注意事项及维护和修理保养

色谱柱使用注意事项及维护和修理保养色谱作为一种分别技术与方法,自本世纪初起已经有100多年的历史了,现在已经成为分析化学学科中的一个紧要的分支。

随着科技的进展,生产生活的需要,使得色谱技术也得到进一步的进展。

将来不断有新的联用的技术得到应用。

色谱柱的维护与保养的紧要性概括为9点:1.柱子在任何情况下不能碰撞、弯曲或猛烈震动;2.当柱子和色谱仪联结时,阀件或管路确定要清洗干净;3.要注意流动相的脱气;4.避开使用高粘度的溶剂作为流动相;5. 进样样品要提纯;6.严格掌控进样量;7.每天分析工作结束后,要清洗进样阀中残留的样品;8.每天分析测定结束后,都要用适当的溶剂来清洗柱;9.若分析柱长期不使用,应用适当有机溶剂保存并封闭。

色谱柱的保养色谱柱是装填有固定相用以分别混合组分的柱管。

多为金属或玻璃制作。

有直管形、盘管形、U形管等形状。

色谱作为一种分别技术与方法,自本世纪初起已经有100多年的历史了,现在已经成为分析化学学科中的一个紧要的分支。

在人类进入新时代之际,人们面临着在信息科学、生命科学、材料科学、环境科学等领域的快速进展的挑战,在这些领域人才的需求成为国家高度进展的至关紧要的因素。

色谱柱在使用前,可以进行柱的性能测试,并将结果保存起来,作为今后评价柱性能变化的参考。

但要注意:柱性能可能由于所使用的样品、流动相、柱温等条件的差异而有所不同;另外,在做柱性能测试时是依照色谱柱出厂报告中的条件进行,只有这样,测得的结果才有可比性。

我们在对色谱柱使用前进行测试以后,我们要依据不同的情况对色谱柱进行保养:①反相色谱柱每天试验后的保养:使用缓冲液或含盐的流动相,试验完成后应用10%的甲醇/水冲洗30分钟,洗掉色谱柱中的盐,再用甲醇冲洗30分钟。

注意:不能用纯水冲洗柱子,应当在水中加入10%的甲醇,防止将填料冲塌陷。

②长期保存色谱柱:如色谱柱要长时间保存,必需存于合适的溶剂下。

对于反相柱可以储存于纯甲醇或乙腈中,正相柱可以储存于严格脱水后的纯正己烷中,离子交换柱可以储存于水中,并将购买新色谱柱时附送的堵头堵上。

c18色谱柱的使用及维护

c18色谱柱的使用及维护

c18色谱柱的使用及维护
C18色谱柱是一种常用的反相色谱柱,广泛应用于药物分析、
环境监测等领域。

下面是关于C18色谱柱的使用和维护的一
些建议:
1. 使用前注意:
- 检查色谱柱是否有损坏或污染,如果有,应更换色谱柱。

- 预处理色谱柱:通过一定条件下的溶剂流动,去除色谱柱
中的杂质和气泡,一般使用一种使色谱柱略干的有机溶剂,如甲醇或乙醇。

- 将色谱柱连接到色谱仪装置上,根据操作手册设置适当的
条件。

2. 使用过程中的注意事项:
- 避免使用过高或过低的流速,以免损坏色谱柱。

- 避免溶剂温度过高,应控制在色谱柱规定的温度范围内。

- 避免使用有机溶剂或样品溶液中有大量盐类。

- 避免样品浓度过高,以免柱子内超出静电容量发生电吸附。

3. 维护:
- 使用后,应用适当的溶剂清洗色谱柱,去除残留的样品和
溶剂,一般使用纯水或略带酸性的溶液。

- 在使用中,避免发生气泡堵塞现象,如有气泡,可进行紧
急处理。

- 定期检查色谱柱的性能和状态,如柱效、重复性和分离度等,根据需要更换或维修色谱柱。

- 注意避免色谱柱与空气长时间接触。

总的来说,使用C18色谱柱时要注意合理设置条件,避免过高的流速和温度,以及样品浓度过高。

使用后要及时清洗,并定期检查和维护色谱柱的性能,以确保分析结果的准确性和稳定性。

  1. 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性,平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
  2. 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
  3. 3、如文档侵犯您的权益,请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间:9:00-18:30)。

色谱柱的维护
更换色谱柱滤网和玻璃棉过滤片(同时可以修补色谱柱)
注意:在取出反相柱芯的滤网和玻璃片之前,应该将色谱柱充分用水和甲醇/乙腈冲洗,而且修补工具的头部也应该蘸取少量的甲醇/乙腈,以避免在取出滤网和玻璃棉滤片时带出柱子内的填料。

1.将修补工具中的2套入柱芯的顶端
2.将修补工具中的3轻轻地旋入已套着2的柱芯中,并顺时针方向旋转到旋紧
3.一手握柱芯,另一只手轻轻地向外拉3,取出柱芯顶端的滤网
4.用一个小铲子轻轻地取出滤网下面的玻璃棉以及被污染的填料
5.将新的填料用甲醇润湿,然后填入挖去的部位,压平
6.照(左图)装上新的玻璃棉滤网,并用修补工具中的4将玻璃棉压入柱芯顶端
7.柱芯顶端套上2,然后参照(左图)将滤网放入
8.压紧,然后取下2,再用4将滤网的边缘压平
平衡色谱柱反相色谱柱在经过出厂测试后是保存在乙腈/水中的。

请一定确保您所使用的流动相和乙腈/水互溶。

由于色谱柱在储存或运输过程中可能会干掉,因此在用流动相分析样品之前,应使用10-20倍柱体积的甲醇或乙腈平衡色谱柱;如果您所使用的流动相中含有缓冲盐,应注意用纯水"过渡"。

硅胶柱或极性色谱柱在经过出厂测试后是保存在正庚烷中的。

如果该色谱柱需要使用含水的流动相,请在使用流动相之前用乙醇或异丙醇平衡
如何平衡色谱柱?
平衡过程中,将流速缓慢地提高
用流动相平衡色谱柱直到获得稳定的基线(缓冲盐或离子对试剂度如果较低,则需要较长的时间来平衡)
色谱柱的再生进行色谱柱再生时,应使用一个谦价的泵,我们建议最好不使用您的高效液相色谱仪上的泵。

表1 建议用来冲洗的溶剂体积
色谱柱尺寸柱体积所用溶剂的体积
125-4 1.6ml 30ml
250-4 3.2ml 60ml
250-10 -20ml 400ml
请根据下表选择您的再生方法:
极性固定相(如Si,NH2*,DIOL基色谱填料)的再生:
正庚烷→氯仿→乙酸乙酯→丙酮→乙醇→水**
非极性固定相(如反相色谱填料RP-18,RP-8,CN等)的再生:
水→乙腈→氯仿(或异丙醇)→乙腈→水
0.05M稀硫酸可以用来清洗已污染的色谱柱
注意:
在对NH2改性的色谱柱进行再生时,由于NH2可能成铵根离子的形式存在,
因此应该在水洗后用0.1M的氨水冲洗,然后再用水冲洗至碱溶液完全流出。

**如果简单的有机溶剂/水的处理不能够完全洗去硅胶表面吸附的杂质,用
0.05M稀硫酸冲洗非常有效。

色谱柱的维护
1.使用预柱保护分析柱(硅胶在极性流动相/离子性流动相中有一定的溶解
度)
2.大多数反相色谱柱的pH稳定范围是2-7.5,尽量不超过该色谱柱的pH
范围
3.避免流动相组成及极性的剧烈变化
4.流动相使用前必须经脱气和过滤处理
5.如果使用极性或离子性的缓冲溶液作流动相,应在实验完毕柱子冲洗干
净,并保存大乙腈中
6.压力升高是需要更换预柱的信号

报。

相关文档
最新文档