色谱柱的使用和维护
色谱柱的使用注意事项及维护 色谱柱如何操作

色谱柱的使用注意事项及维护色谱柱如何操作在日常分别分析工作中,色谱柱的正确使用和维护特别紧要,色谱柱使用是否得当,直接影响色谱柱的寿命,稍有不慎就会降低柱效、缩短使用寿命甚至损坏。
在色谱操作过在日常分别分析工作中,色谱柱的正确使用和维护特别紧要,色谱柱使用是否得当,直接影响色谱柱的寿命,稍有不慎就会降低柱效、缩短使用寿命甚至损坏。
在色谱操作过程中,需要注意下列问题,以维护色谱柱。
(1)柱子在装卸、更换时,动作要轻,接头拧紧要适度。
必需防止较强的机械振动,以免柱床产生空隙。
(2)假如仪器用来做仪器分析,样品种类有限,但分析次数多,则不妨为每一类常规分析配置一根专用柱,这样有助于延长柱子的寿命。
(3)避开压力和温度的急剧变化及任何机械震动。
温度的蓦地变化或者使色谱柱从高处掉下都会影响柱内的填充情形;柱压的蓦地上升或降低也会冲动柱内填料,因此在调整流速时应当缓慢进行,在阀进样时阀的转动不能过缓。
(4)应渐渐更改溶剂的构成,特别是反相色谱中,不应直接从有机溶剂更改为全部是水,反之亦然。
(5)如使用柱温掌控装置时,应注意在通人流动相后才能升温。
(6)一般说来色谱柱不能反冲,只有生产者指明该柱可以反冲时,才可以反冲除去留在柱头的杂质。
否则反冲会快速降低柱效。
(7)选择使用适合的流动相,以避开固定相被破坏。
有时可以在进样器前面连接一个预柱,分析柱是键合硅胶时,预柱为硅胶,可使流动相在进入分析柱之前预先被硅胶“饱和”,避开分析柱中的硅胶基质被溶解。
(8)避开将基质多而杂的样品尤其是生物样品直接注人柱内,需要对样品进行预处理或者在进样器和色谱柱之间连接一个保护柱。
保护柱一般是填有相像固定相的短柱。
保护柱可以而且应当常常更换。
(9)常常用强溶剂冲洗色谱柱,清除保留在柱内的杂质。
在进行清洗时,对流路系统中流动相的置换应以相混溶的溶剂渐渐过渡,每种流动相的体积应是柱体积的20倍左右,即常规分析需要50—75mL。
(10)保存色谱柱时应将柱内充分乙腈或甲醇,柱接头要拧紧,防止溶剂挥发干燥。
色谱柱的使用和维护

色谱柱的使用和维护色谱柱是一种用于分离混合物的重要工具,广泛应用于化学分析、环境检测、药物研发等领域。
为了保证色谱柱的正常使用和延长其寿命,以下将介绍色谱柱的使用和维护方法。
一、色谱柱的使用1.色谱柱的激活新购买的色谱柱通常需要进行激活处理,以去除柱内杂质和保证柱的稳定性。
常见的激活方法包括使用最终使用的溶剂/流动相进行洗脱或者使用强极性溶液进行反向激活。
激活后,需用洗脱溶剂或流动相进行平衡。
2.样品的前处理样品的前处理对色谱柱的使用和维护至关重要。
首先,要确保样品的纯度和浓度,以避免对色谱柱产生污染。
其次,对于有机溶剂溶解的样品,最好使用过滤器进行过滤,以防止固体颗粒和杂质进入色谱柱。
3.流动相的选择正确选择和配置流动相对于色谱柱的使用非常重要。
根据需要分离的组分特性,选择合适的流动相性质和组成,并根据需要进行酸碱调节、添加缓冲剂等。
此外,注意保持流动相的流速稳定,并定期更换或再生。
4.检测器的设置根据需要检测的组分,选择合适的检测器并进行适当的设置。
常见的检测器包括紫外-可见吸收光谱仪(UV-Vis)、荧光检测器、质谱仪等。
在使用检测器前,要确保其正常工作并进行校准。
5.流量控制使用色谱仪时,应保持流量的稳定性。
定期检查和校准流量控制器,并调整至适当的设置,以确保色谱柱正常运行。
6.色谱条件的优化根据分析需要,在保证分离效果的前提下,进行色谱条件的优化。
包括优化流速、温度、柱渗透性、梯度洗脱程序等,以提高分离效果和保护色谱柱。
二、色谱柱的维护1.洗脱和平衡每次使用完色谱柱后,应进行洗脱以去除残留的样品和杂质,并用适当的溶剂进行平衡。
洗脱和平衡步骤的操作要轻柔,避免使用高压流动相进行冲洗。
对于一些特殊样品,如蛋白质和多肽,可以使用具有较强亲和性的溶剂进行洗脱和平衡。
2.色谱柱的储存条件当色谱柱暂时不使用或需要长期储存时,应注意以下几点:首先,将色谱柱从设备上拆卸下来,用纯净溶剂充分洗脱并平衡,保证柱内干净;其次,封闭柱两端,避免进入灰尘和空气,可以使用柱塞或盖子进行封闭;最后,将柱放置在干燥、阴凉的地方存放,避免受到阳光直射和高温。
【色谱柱】色谱柱的维护方法 色谱柱维护和修理保养

【色谱柱】色谱柱的维护方法色谱柱维护和修理保养色谱柱的使用寿命,除了与所分析的样品和流动相及使用频率有关系外,最紧要的是与日常的维护紧密相关。
色谱柱的使用寿命紧要是柱效和柱压两个指标来衡量,假如一支色谱柱柱效太低或柱压太高,通常被认为该色谱柱已经结束。
因此,延长色谱柱使用寿命的关键是,除去引起柱效下降和柱压上升的因素。
以下是色谱柱的维护方法:一、流动相的PH应在使用的范围内流动相超过其PH范围将会导致硅胶基质流失和键合相碳链断裂,使柱效下降,使用寿命变短。
由于流动相的PH掌控不当而对色谱柱造成的损害,通常很难是色谱柱恢复,因此必需认真对待,严格掌控流动相的PH值。
二、去除样品和流动相中的固体颗粒样品和流动相中含有的固体颗粒物质会堵塞色谱柱筛板,筛板被堵住不仅会引起柱压的上升,而且也会引起柱效下降,由于筛板的堵塞会引起液流不均,导致色谱峰型拖尾、变宽,从而使柱效下降。
因此,建议使用超纯水和色谱纯试剂,在分析样品前对样品进行针筒过滤,流动相过0、45μm滤膜。
三、使用保护柱或在线过滤器样品和流动相经过滤后并不能完全除去固体颗粒物质,由于泵的磨损、密封圈和管路的老化也会产生固体颗粒物质,这些固体颗粒被流动相带入色谱柱,堵塞筛板,导致柱压上升、柱效下降。
保护柱和在线过滤器上都有筛板,其孔径与色谱柱孔径相同,因此可以阻拦固体颗粒物质到达色谱柱,有效防止色谱柱筛板的堵塞。
由于柱压上升在分析故障中占很大比例,因此,除对样品和流动相进行过滤外,建议您在色谱柱进样端加上保护柱或在线过滤器。
假如色谱柱柱压上升是由于进样端筛板被堵引起的,可选择以下方式进行补救:1、先在色谱柱前加上保护柱或在线过滤器,然后用甲醇、水=20/80ml/min反向冲色谱柱180min、2、先在色谱柱进样端加上保护柱或在线过滤器,然后反向使用。
四、正确使用缓冲盐缓冲盐通常易溶于水,难溶于有机溶剂,因此缓冲盐使用不当会使其析出,堵塞填料基质上的微孔和颗粒间的空隙,使填料板结,柱压上升;同时阻拦了基质上键合的碳链自由伸展,使色谱柱的保留本领下降,柱效降低。
相色谱柱的保养与维护

相色谱柱的保养与维护
相色谱柱是高精度仪器,需要进行专业的保养与维护,以保证其正常使用和延长使用寿命。
以下是相色谱柱的保养与维护方法:
1.保持干燥:相色谱柱应该存放在干燥、阴凉、通风的地方。
2.避免受力:安装相色谱柱时,应该根据操作手册准确安装,不强行扭曲、移动或者碰撞柱子。
以免影响柱内填料的均匀性。
3.避免受污物:在使用相色谱柱之前,需要清洁检查进样口,以保证样品的干净度。
另外,避免塞入颗粒物质。
4.定期清洁:使用过程中的一些尘垢,会附着在柱外表面。
可以用专用清洗剂或者乙醇进行清洗。
不可使用有机溶剂。
5.恰当使用:相色谱柱在使用过程中,需要根据操作手册进行良好的操作,避免流速过快、被串染、被污染等影响柱子使用寿命的问题。
6.正确仓储:在不使用相色谱柱时,应当拆下接头,用压板杆和塞子封闭固定孔、流出口,避免灰尘、水分等杂质污染柱子。
总之,保养相色谱柱的关键是要注意细节、方法科学,以保证柱子完好可用、长寿。
液相色谱柱的使用和维护保养

液相色谱柱的使用和维护保养液相色谱柱是一种广泛使用的分离技术,可用于分离和测定复杂混合物中的组分。
由于液相色谱柱具有精确分离、操作简便、分离效率高等特点,因此,越来越多的实验室都开始使用该技术。
在使用液相色谱柱时,正确的维护保养非常关键。
本文将介绍液相色谱柱的使用方法和维护保养技巧,以便确保您的分离实验能够得到最佳的结果。
一、液相色谱柱的使用1. 准备工作使用液相色谱柱之前,必须先进行预备工作。
这包括:清洗和准备液相色谱柱以免携带有污染物。
准备需要分离和测定的样品。
准备适当的流动相。
流动相必须符合样品的性质。
液相色谱柱的流动相应该是无色的,纯净的水或相应的缓冲液,并具有必要的缓冲能力。
根据柱的尺寸来选择适当的样品注射量。
2. 柱的装配通常情况下,液相色谱的柱是由管状的柱壳、填充柱节、柱端固定件和柱段之间的密封件组成。
在对柱进行装配的时候,对组件应该加强检查以保证每一个元件的质量。
柱被放置在可控压力的色谱装置中,直到达到设定的温度,流动相通过柱床高度。
在样品通过柱床的过程中,要确保流动相的速度恰好足够将所有的组分都分开并在规定的时间内溶出。
3. 分析过程准备工作完成后,可以开始进行样品的分离实验。
在整个过程中,以下措施应予以注意:在样品从样品室进入色谱柱之前,流动相必须在柱中流动。
否则,在注入样品时,将有空气囤积在柱床中,会在透射检测器处产生噪音。
更换液相色谱柱的流动相时需要小心,因为对于一些化学品来说,即使是微量的杂质也会对结果产生影响。
如果发现柱床粘住或困住,不应使用力量来拉动柱子,而应该使用相反方向的流动相,以使样品回到某一个位置,并反向流动一会,这样可以避免样品损坏柱子床。
二、液相色谱柱的维护保养液相色谱分析的成功与否,除了预备工作和分析过程外,还与样品的制备、取样位置以及样品进入液相色谱柱中的流动相的条件等因素有关。
因此,经常做好液相色谱柱的保养工作,可以有效防止柱子损坏,延长其寿命并保证实验结果的准确。
色谱柱使用注意事项及维护和修理保养

色谱柱使用注意事项及维护和修理保养色谱作为一种分别技术与方法,自本世纪初起已经有100多年的历史了,现在已经成为分析化学学科中的一个紧要的分支。
随着科技的进展,生产生活的需要,使得色谱技术也得到进一步的进展。
将来不断有新的联用的技术得到应用。
色谱柱的维护与保养的紧要性概括为9点:1.柱子在任何情况下不能碰撞、弯曲或猛烈震动;2.当柱子和色谱仪联结时,阀件或管路确定要清洗干净;3.要注意流动相的脱气;4.避开使用高粘度的溶剂作为流动相;5. 进样样品要提纯;6.严格掌控进样量;7.每天分析工作结束后,要清洗进样阀中残留的样品;8.每天分析测定结束后,都要用适当的溶剂来清洗柱;9.若分析柱长期不使用,应用适当有机溶剂保存并封闭。
色谱柱的保养色谱柱是装填有固定相用以分别混合组分的柱管。
多为金属或玻璃制作。
有直管形、盘管形、U形管等形状。
色谱作为一种分别技术与方法,自本世纪初起已经有100多年的历史了,现在已经成为分析化学学科中的一个紧要的分支。
在人类进入新时代之际,人们面临着在信息科学、生命科学、材料科学、环境科学等领域的快速进展的挑战,在这些领域人才的需求成为国家高度进展的至关紧要的因素。
色谱柱在使用前,可以进行柱的性能测试,并将结果保存起来,作为今后评价柱性能变化的参考。
但要注意:柱性能可能由于所使用的样品、流动相、柱温等条件的差异而有所不同;另外,在做柱性能测试时是依照色谱柱出厂报告中的条件进行,只有这样,测得的结果才有可比性。
我们在对色谱柱使用前进行测试以后,我们要依据不同的情况对色谱柱进行保养:①反相色谱柱每天试验后的保养:使用缓冲液或含盐的流动相,试验完成后应用10%的甲醇/水冲洗30分钟,洗掉色谱柱中的盐,再用甲醇冲洗30分钟。
注意:不能用纯水冲洗柱子,应当在水中加入10%的甲醇,防止将填料冲塌陷。
②长期保存色谱柱:如色谱柱要长时间保存,必需存于合适的溶剂下。
对于反相柱可以储存于纯甲醇或乙腈中,正相柱可以储存于严格脱水后的纯正己烷中,离子交换柱可以储存于水中,并将购买新色谱柱时附送的堵头堵上。
色谱柱的使用及如何进行日常维护

色谱柱的使用及如何进行日常维护
色谱柱的正确使用和维护十分重要,稍有不慎就会降低柱效、缩短使用寿命甚至损坏。
在色谱操作过程中,需要注意下列问题,以维护色谱柱。
1、避免压力和温度的急剧变化及任何机械震动。
温度的突然变化或者使色谱柱从高处掉下都会影响柱内的填充状况;柱压的突然升高或降低也会冲动柱内填料,因此在调节流速时应该缓慢进行,在阀进样时阀的转动不能过缓(如前所述)。
2、应逐渐改变溶剂的组成,特别是反相色谱中,不应直接从有机溶剂改变为全部是水,反之亦然。
3、一般说来色谱柱不能反冲,只有生产者指明该柱可以反冲时,才可以反冲除去留在柱头的杂质。
否则反冲会迅速降低柱效。
4、选择使用适宜的流动相(尤其是pH),以避免固定相被破坏。
有时可以在进样器前面连接一预柱,分析柱是键合硅胶时,预柱为硅胶,可使流动相在进入分析柱之前预先被硅胶”饱和”,避免分析柱中的硅胶基质被溶解。
色谱柱的使用管理方法

色谱柱的使用管理方法色谱柱是色谱技术中的关键组成部分,用于分离混合物中的化合物。
为了确保色谱柱的有效使用和延长其寿命,需要采取一些管理方法。
以下是色谱柱使用管理的一些建议:1.适当的操作和维护:操作人员应该接受专业的培训,了解正确的色谱柱使用方法。
保持色谱系统的良好维护,包括定期检查和清洁。
2.样品预处理:在进样之前,对样品进行适当的预处理,如过滤、稀释或提取,以防止样品中的杂质损害色谱柱。
3.使用适当的溶剂和流动相:选择与分析目标相适应的溶剂和流动相,以减少对色谱柱的影响。
使用纯度高的溶剂,并在必要时进行去离子水处理。
4.避免过高的流速:避免使用过高的流速,以减少色谱柱的磨损和提高分辨率。
请参考制造商的建议,确定适当的流速范围。
5.避免过高的温度:控制色谱柱的温度,避免过高的温度,以防止柱内物质的蒸发和减缓柱寿命。
6.使用保护柱:在进样前使用保护柱,以保护主色谱柱,延长其使用寿命。
保护柱通常易于更换和成本相对较低。
7.正常使用和保管:避免碰撞和振动,确保色谱柱处于垂直位置。
当不使用时,将色谱柱存储在适当的条件下,以防止污染。
8.定期性能评估:定期对色谱柱进行性能评估,例如使用标准物质进行系统透明度和分辨率的测试。
根据性能评估的结果,可以及时调整操作条件或更换色谱柱。
9.记录使用历史:记录每次使用的详细信息,包括溶剂、流速、温度等条件。
这有助于分析柱的使用历史,及时发现问题并采取纠正措施。
10.定期更换:尽管色谱柱的使用寿命取决于多种因素,但定期更换柱是确保分析结果准确性和重复性的关键步骤。
根据制造商的建议和实际使用情况,制定定期更换计划。
通过遵循这些管理方法,可以最大限度地提高色谱柱的使用寿命,确保色谱分析的准确性和可靠性。
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二、如何平衡色谱柱?
新色谱柱,应首先用0.2ml/min的流速将色谱 柱平衡过夜,然后将流速升高到1.0ml/min冲洗 30分钟,以便将色谱柱的填料充分平衡至最佳 状态。这样可以保证色谱柱的使用寿命,并且 保证在以后的使用中,获得分析结果的重现性。 平衡过程中,将流速缓慢地提高 用流动相平衡色谱柱直到获得稳定的基线(缓 冲盐或离子对试剂度如果较低,则需要较长的 时间来平衡)
五、色谱柱的维护 1. 使用预柱保护分析柱(硅胶在极性流动相/ 离子性流动相中有一定的溶解度) 2. 大多数反相色谱柱的pH稳定范围是2~7.5, 尽量不超过该色谱柱的pH范围 3. 避免流动相组成及极性的剧烈变化 4. 流动相使用前必须经脱气和过滤处理 5. 如果使用极性或离子性的缓冲溶液作流动 相,应在实验完毕将柱子冲洗干净,并保存 在乙腈中 6. 压力升高是需要更换预柱的信号
再生方法: 1.极性固定相的再生: 正庚烷 氯仿 乙酸乙酯
: 水 乙腈 氯仿(或异丙醇) 乙腈 水
3. 0.05M稀硫酸可以用来清洗已污染的色谱柱
四、注意: 1.在对NH2改性的色谱柱进行再生时,由于 NH2可能成铵根离子的形式存在,因此应该 在水洗后用0.1M的氨水冲洗,然后再用水冲 洗至碱溶液完全流出。 2.如果简单的有机溶剂/水的处理不能够完 全洗去硅胶表面吸附的杂质,用0.05M的硫 酸冲洗非常有效。
HPLC日常维护(二)
——色谱柱的使用和维护
每天用足够的时间来平衡色谱柱,会在处理 问题方面获得最大的“补偿”, 而且色谱柱的寿命也会变得更长!
一定得做!
新的色谱柱在使用之前进行性能测试,即使 用色谱柱附带的检验报告上的测试条件和样 品来测定该色谱柱的柱效。并且,在以后的 使用中,应时常对色谱柱进行测试。
一、平衡色谱柱 1.反相色谱柱
经过出厂测试后保存在乙腈/水中。 在用流动相分析样品之前,应使用10~20倍 柱体积的甲醇或乙腈平衡色谱柱; 如果所使用的流动相中含有缓冲盐,应注 意用纯水“过渡”。
2. 硅胶柱或极性色谱柱
经过出厂测试后保存在正庚烷中。 如果该色谱柱需要使用含水的流动相,在使 用流动相之前用乙醇或异丙醇平衡。
三、色谱柱的再生 色谱柱在使用一段时间后柱效会下降,这 时可以考虑对色谱柱进行再生。 进行色谱柱再生时,应使用一个廉价的泵, 我们建议:最好不使用您的高效液相色谱仪 上的泵。 建议用来冲洗的溶剂体积 色谱柱尺寸 柱体积 所用溶剂的体积 125*4mm 1.6ml 30ml 250*4mm 3.2ml 60ml 250*10mm 20ml 400ml