DHPLC系统工作原理及其应用

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PLC组成及工作原理

PLC组成及工作原理

PLC组成及工作原理PLC(可编程逻辑控制器)是一种用于工业自动化控制的专用计算机,广泛应用于各种生产线和工业设备中。

PLC的组成和工作原理是实现其自动化控制功能的关键。

本文将详细介绍PLC的组成和工作原理。

一、PLC的组成PLC主要由以下几个组成部分构成:1.中央处理器(CPU):是PLC的核心部件,负责执行各种控制任务。

CPU通常包括控制单元和数据处理单元。

控制单元用于解析和执行程序指令,数据处理单元用于处理输入输出数据。

2.输入模块:负责将外部信号(如传感器、开关等)转换为数字信号,供CPU 处理。

输入模块通常包括接口电路和信号转换电路。

3.输出模块:负责将CPU处理后的数字信号转换为外部控制信号,控制执行器(如电机、阀门等)。

输出模块通常包括接口电路和功率放大电路。

4.存储器:用于存储PLC程序、数据和中间结果。

存储器通常包括只读存储器(ROM)和随机存储器(RAM)。

ROM存储PLC的固定程序,RAM存储运行时的数据和中间结果。

5.通信接口:用于与其他设备(如人机界面、上位机等)进行通信,实现数据交换和远程监控。

二、PLC的工作原理PLC的工作原理可以总结为以下几个步骤:1.扫描输入:PLC周期性地扫描输入模块,读取外部信号状态。

输入信号经过接口电路和信号转换电路转换为数字信号,供CPU处理。

2.执行程序:CPU根据预先编写的程序指令,对输入信号进行逻辑运算和控制计算。

程序指令包括逻辑运算指令、定时器指令、计数器指令等。

根据运算结果,CPU决定输出模块的状态。

3.更新输出:CPU根据程序指令的运算结果,更新输出模块的状态。

输出信号经过接口电路和功率放大电路转换为控制信号,控制执行器的工作。

4.循环扫描:PLC不断循环执行上述步骤,实现对工业设备的自动化控制。

扫描周期根据具体的应用需求而定,一般在几毫秒到几十毫秒之间。

三、PLC的优势PLC相比传统的继电器控制系统具有以下几个优势:1.可编程性:PLC可以通过编写程序指令来实现各种复杂的控制功能,灵活性高。

plc计数器的工作原理及应用

plc计数器的工作原理及应用

PLC计数器的工作原理及应用1. PLC计数器的概述PLC(可编程逻辑控制器)计数器是一种用于对输入脉冲信号进行计数并将计数结果输出的特殊功能模块。

它是PLC的重要组成部分之一,广泛应用于自动化控制系统中。

计数器可以根据设定的规则对输入的脉冲信号进行计数,并根据计数结果执行相应的控制操作。

2. PLC计数器的工作原理PLC计数器通常包括一个计数输入、一个复位输入和一个计数输出。

计数输入接收外部脉冲信号,复位输入用于清零计数器,计数输出将计数结果反馈到PLC系统中进行处理。

计数器具有两种工作模式:正向计数和反向计数。

2.1 正向计数模式在正向计数模式下,当计数器接收到脉冲信号时,计数值将递增。

当计数值达到设定的上限时,计数器将输出一个信号,并根据设定的规则执行相应的操作,如触发其他动作或改变输出状态。

计数器可以根据需求设定计数范围及增量大小。

2.2 反向计数模式在反向计数模式下,当计数器接收到脉冲信号时,计数值将递减。

当计数值达到设定的下限时,计数器将输出一个信号,并根据设定的规则执行相应的操作。

反向计数模式常用于倒计时或一些反向步进控制。

3. PLC计数器的应用场景PLC计数器广泛应用于各种自动化控制系统中,以下列出了几个常见的应用场景:3.1 产线计数在生产线上,PLC计数器可以用于统计产品的生产数量。

通过连接传感器或编码器,计数器可以接收到产品通过的信号,并实时计数。

一旦达到设定的目标数量,计数器将触发停机信号,通知操作员进行下一步操作。

3.2 进料控制在一些包装机械、物料输送系统中,PLC计数器被用于控制物料的进料速度。

通过控制进料电机的工作时间或脉冲信号的频率,计数器可以实时监测物料进料的数量,以保持恒定的供给速率。

3.3 机器循环计数在一些机械设备中,如注塑机、冲压机等,PLC计数器常用于记录机器的循环次数。

通过监测输入信号的变化,计数器可以准确地记录机器的运行情况,并根据设定的条件进行报警或维护。

PLC原理及应用技术ppt课件

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央 ⑴微处理器CPU 编程
通信
C电PU作为整个PLC的核器心接起着总指接挥口的作用,
是PLC源的运算和控制中心。。口 ⑵存储器R中A央M/ROM

存储器是具有记忆功能的半导体电路,用来 存放系统程序、处用理户程序、系逻辑变统量和总其它一线些
课程简介
本课程的学习目的
掌握PLC的组成及工作原理, 熟悉PLC的指令系统,掌握PLC的 各种功能。具备PLC控制系统硬 件设计、软件编程和调试的基本 能力,为走向工作岗位练就一身 本领。
课题一 PLC概述
学习内容
一、PLC的产生与发展 二、PLC的组成 三、PLC的基本工作原理 四、PLC的性能、特点及分类 五、PLC的控制功能
第一代PLC(1969~1972年):大多用一位机开发, 用磁芯存储器存储,只具有单一的逻辑控制功能,机种 单一,没有形成系列化。
第二代PLC(1973~1975年):采用了8位微处理器及 半导体存储器,增加了数字运算、传送、比较等功能,能实 现模拟量的控制,开始具备自诊断功能,初步形成系列化。
课题一 PLC概述
第三代PLC(1976~1983年):随着高性能微处理器及 位片式CPU在PLC中大量的使用,PLC的处理速度大大提高, 从而促使它向多功能及联网通信方向发展,增加了多种特殊 功能,如浮点数的运算、三角函数、表处理、脉宽调制输出 等,自诊断功能及容错技术发展迅速。
第四代PLC(1983年~现在):不仅全面使用16位、32 位高性能微处理器,高性能位片式微处理器,RISC(reduced instruction set computer)精简指令系统CPU等高级CPU,而 且在一台PLC中配置多个微处理器,进行多通道处理,同时 生产了大量内含微处理器的智能模块,使得第四代PLC产品 成为具有逻辑控制功能、过程控制功能、运动控制功能、数 据处理功能、联网通信功能的真正名符其实的多功能控制器。

第四章 可编程序控制器(PLC)原理与应用)

第四章     可编程序控制器(PLC)原理与应用)
表4-3 按PLC的功能分类
分类 低档机 主要功能 具有逻辑运算、定时、计数、移位及自诊断、监控 等基本功能。有些还有少量模拟量I/O功能和算术运 算等功能 应用场合 开关量控制、定时、计数控制、顺序控制等场合, 有模拟量I/O功能的低档PLC应用更广 适用于既有开关量又有模拟量的较为复杂的控制 系统,如过程控制、位置控制等
年份 第一代1969~1972 第二代1973~1975 功能特点 逻辑运算、定时、计数、中小规模集成电路CPU,磁芯 存储器 增加算术运算、数据处理功能,初步行程系列,可靠性 进一步提高 增加复杂数值运算和数据处理,远程I/O和通信功能, 采用大规模集成电路,微处理器,加强自诊断、容错技 术 高速大容量多功能,采用32位微处理器,编程语言多样 化,通信能力进一步完善,智能化功能模块齐全 取代继电器控制 能同时完成逻辑控制,模拟量控制 适应大型复杂控制系统控制需要并用于联网、通信、 监控等场合 构成分级网络控制系统,实现图像动态过程监控, 模拟网络资源共享 应用范围
输 入 继 电 器
05 06 1000~1715 07 08 09 10 11 12 13 14
15
主机
15
15
扩Ⅰ
15
15
扩Ⅱ
15
15
扩Ⅲ
15
表4-7 输出继电器区域(共128点)
名称 范围 20CH 00 01 02 03 04 21CH 00 01 02 03 04 05 06 07 (08) (09) (10) (11) (12) (13) (14) 22CH 00 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 13 14 继电器地址通道 23CH 00 01 02 03 04 05 06 07 (08) (09) (10) (11) (12) (13) (14) 24CH 00 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 13 14 25CH 00 01 02 03 04 05 06 07 (08) (09) (10) (11) (12) (13) (14) 26CH 00 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 13 14 27CH 00 01 02 03 04 05 06 07 (08) (09) (10) (11) (12) (13) (14)

plc单片机的原理及应用

plc单片机的原理及应用

PLC单片机的原理及应用概述PLC(Programmable Logic Controller,可编程逻辑控制器)是一种专门用于工业自动化控制的电气设备。

它采用单片机作为核心控制器,通过编程来实现对各种工业设备的控制和监控。

本文将介绍PLC单片机的原理及应用。

PLC单片机的原理PLC单片机的原理主要包括以下几个方面:1.硬件结构:PLC单片机通常由中央处理器、存储器、输入/输出模块、通信模块等组成。

中央处理器是PLC单片机的核心,负责指令的执行和数据的处理;存储器用于存储程序和数据;输入/输出模块用于与外界设备进行数据交互;通信模块用于实现PLC单片机之间或与外部计算机的通信。

2.编程软件:PLC单片机的编程软件通常采用基于图形化的编程语言,如梯形图、功能块图等。

程序员通过编程软件可以编写控制逻辑,包括输入、输出的条件判断、运算、计时、计数等。

3.工作原理:PLC单片机根据编写的控制逻辑程序,通过输入模块获取外部设备的状态信息,经过程序处理后,通过输出模块控制外部设备的动作。

PLC单片机的工作流程一般为:输入采集 -> 程序执行 -> 输出控制。

PLC单片机的应用PLC单片机广泛应用于各行各业的自动化控制系统中,主要包括以下几个领域:1.工业生产线控制:PLC单片机可以用于控制各种生产设备,如机械臂、输送带、机床等。

通过编写控制逻辑,可以实现生产过程的自动化,提高生产效率和质量。

2.家庭自动化:PLC单片机可以用于家庭自动化控制系统的控制中心。

通过与各种设备的连接,如照明设备、空调、电视等,可以实现智能家居的控制,提高居住的舒适度和便利性。

3.交通信号控制:PLC单片机可以用于交通信号的控制。

通过连接传感器、计时器等设备,实现交通信号的智能控制,提高交通流量的效率,减少交通事故。

4.能源管理:PLC单片机可以用于能源管理系统的监控与控制。

通过与能源设备的连接,如发电机、变压器等,可以实现对能源的监测和优化控制,提高能源利用效率和减少能源浪费。

PLC原理与应用技术ppt课件

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27
7. 模拟量输出模块(D/A、AO)
D/A作用:将计算机内部的数字信号转化为现场仪表可以接收的标准信号4~20mA等
如: 12位数字量(0~4095) → 4~20mA 2047 对应的转换结果: 12mA
调节阀 变频器
……
执行器控制信号
4~20mA 0~10mA 1~5VDC 0~10VDC
0~4095 0~1023
……
工程化转换
工程量
0~100℃ ?~??kPa
……
CPU
软件实现
硬件滤波 如:RC滤波
软件滤波 如:中值滤波
软件RC滤波 ……
25
A/D组成:一般是由多路转换开关、前置放大器、采样保持器、ADC(Analog to
Digital Converter)等组成
输入信号1
多路 转换
11
存储器、存储空间的分配--系统程序存储区
系统程序存储区中存放着相当于计算机操作系统 的系统程序。它包括监控程序、管理程序、命令解 释程序、功能子程序、系统诊断程序等。由制造厂 商将其固化在EPROM中,用户不能够直接存取。它 和硬件一起决定了该PLC的各项性能。
12
存储器、存储空间的分配--系统RAM存储区
直流、交流负载(隔离、功率放大)
2) 晶体管集电极输出:高速小功率
直流负载
3) 双向可控硅输出:高速大功率
交流负载
23
以继电器形式为例
继电器输出
PLC





电J


输出接口电路
Y
COM +-
交流电源或 直流电源
24
6. 模拟量输入模块(A/D、AI)

PLC技术在电气工程及其自动化控制中的应用分析

PLC技术在电气工程及其自动化控制中的应用分析

PLC技术在电气工程及其自动化控制中的应用分析1. 引言1.1 背景介绍PLC技术在电气工程及其自动化控制中的应用分析引言在过去,传统的电气控制系统多采用硬质逻辑控制器或者继电器进行控制,这种方式存在着控制逻辑复杂、维护困难、扩展性差等问题。

而PLC技术的出现,为工程师们提供了一种更加灵活、可靠且易于维护的控制方案。

通过编程软件编写控制逻辑,并通过PLC控制器来执行这些逻辑,可以实现对生产过程的准确控制和监测。

PLC技术的快速发展不仅促进了工业自动化水平的提高,也为电气工程领域带来了新的发展机遇。

本文将对PLC技术在电气工程及自动化控制中的应用进行详细分析,探讨其优势和未来的发展趋势。

1.2 研究目的本文旨在探讨PLC技术在电气工程及其自动化控制中的应用分析。

具体研究目的包括:深入了解PLC技术的基本原理和特点,探讨PLC在电气工程中的具体应用案例和效果,分析PLC在自动化控制领域中的优势和局限性,以及通过案例分析来验证PLC技术的实际应用价值。

通过本研究,旨在为相关领域的工程师和研究人员提供有关PLC技术在电气工程及其自动化控制中的应用经验和技术指导,促进PLC技术的进一步发展和应用,推动相关领域的技术创新与发展,提升工程领域的自动化水平和效率,为工程及生产实践提供更加可靠、高效的解决方案。

1.3 研究意义PLC技术在电气工程及其自动化控制中的应用已经成为现代工业生产的重要组成部分。

通过深入研究PLC技术的应用,可以更好地掌握电气工程和自动化控制的核心知识和技能,提高工程师在相关领域的实际操作和应用能力。

同时,研究PLC技术还有助于推动工业生产的数字化、智能化和自动化转型,提高生产效率、降低成本、提升产品质量。

此外,随着社会经济的发展和现代工业的快速变革,PLC技术的应用范围将越来越广泛,对于促进产业升级、推动新技术的应用和推广以及推动工程技术的发展都具有重要意义。

因此,对PLC技术在电气工程及其自动化控制中的应用进行深入研究与探讨,不仅有助于推动行业的技术发展和创新,还能够为工程师和相关从业人员提供更多的学习和实践机会,增强他们的竞争力和发展前景。

PLC控制系统概述

PLC控制系统概述

PLC控制系统概述PLC(Programmable Logic Controller)即可编程逻辑控制器,是一种用来控制工业过程的电子设备。

PLC控制系统是现代工业自动化领域中最常用的控制技术之一,它可以代替传统的继电器控制系统,在许多领域中具有广泛的应用,如工业生产线、能源管理系统、交通信号控制等。

本文将对PLC控制系统的基本概念、工作原理、应用领域和发展趋势进行详细阐述。

一、PLC控制系统的基本概念PLC控制系统是由可编程控制器(PLC)、输入/输出设备(I/O)、人机界面(HMI)以及各种传感器和执行器组成的,它可以根据程序控制输入设备接收到的信号,再根据特定的逻辑规则控制输出设备的动作。

PLC通过控制逻辑来实现对工程过程的自动化控制,具有高度的可编程性和灵活性。

二、PLC控制系统的工作原理PLC控制系统工作的基本原理是输入、输出和控制运算:首先,通过传感器将实时数据转换为电信号,然后这些信号被输入到PLC中;PLC通过内部的逻辑运算对输入信号进行分析和处理,根据预设的控制程序生成输出信号;最后,输出信号通过输出设备控制执行器的动作,实现对被控对象的控制。

三、PLC控制系统的应用领域PLC控制系统在工业自动化领域中具有广泛的应用。

它可以用来控制各种工业生产过程,如流水线生产、装配工艺、化工过程等,可以实现对工业设备的自动化控制。

此外,PLC控制系统还用于能源管理系统、交通信号控制、建筑物自动化等领域。

四、PLC控制系统的发展趋势随着科技的不断发展,PLC控制系统也在不断演进。

一方面,PLC的性能逐渐提升,从最初的16位到现在的32位和64位,处理能力和存储容量大大增加,可以处理更复杂的控制任务;另一方面,PLC逐渐融入各种网络通信技术,如以太网、无线通信等,实现与其他系统的互联互通;此外,PLC控制系统的人机界面也在不断改进,从最初的LED数码显示器到现在的触摸屏、工控机等,提高了操作和监控的便利性。

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・综述与专论・生物技术通报BIOTECHNOLOGY BULLETIN2006年增刊

DHPLC系统工作原理及其应用李莉 王翀 陈瑶生(华南农业大学动物科学学院,五山 510642)

摘 要: 变性高效液相色谱(DHPLC)是一种高通量筛选DNA序列变异的新技术,从该仪器设备的组成、工作原理、基本操作方法、主要技术特点等作一综述,并对其在基因组领域的应用如SNP分析、双链DNA片段分析、微卫星分析、mRNA定量分析、引物纯度检测等方面及在医学、遗传学方面的应用作了较详细的综述。关键词: DHPLC 原理 应用

WorkingPrinciplesandApplicationofDHPLCSystemLiLi WangChong ChenYaosheng(CollegeofAnimalScience,SouthChinaAgriculturalUniversity,Guangzhou510642)

Abstract: DenaturingHighPerformanceLiquidChromatography(DHPLC)isakindofhighthroughoutnewtech2niquetodetectthemutationoftheDNAsequence.Thestructureoftheinstrument,workingPrinciples,basicmanipulatingmethodandmaintechnicalcharacteristicwerereviewed.Theapplicationsinthemedicine,geneticsandgenomedomainsuchasanalysisofSNP,thefragmentofdoublestrains,microsatellite,thequantitativemRNA,thepuredetectionoftheprime,etalwerereviewedindetail.Keywords: DHPLC Principle Application

基金项目:国家自然科学基金资助(30300249) 作者简介:李莉(19822),女,硕士研究生,专业方向:动物遗传育种与繁殖,电话:020285280277

通讯作者:王翀(19682),女,博士,副教授,主要研究方向:分子遗传学,电话:020285285703,E2mail:betty@scau.edu.cn

变性高效液相色谱(denaturinghighperformanceliquidchromatography,DHPLC)是一种新的高通量筛选DNA序列变异的新技术,这一技术最先由美国Stanford大学Oefner及Underhill等于1995年报道,美国Transgenomic公司采用该原理制造专利化仪器,专利产品为WAVEµDNA片段分析系统(WAVEµDNAfragmentanalysissystem)。1.1 仪器主要组成部分硬件部分:变性高效液相色谱仪(WAVEµ3500HT):WAVEµL27100型四元梯度溶液注入系统(含四元梯度泵),WAVEµL27250型Peltier可冷却、加热自动进样器,WAVEµL27300plus型高精度Peltier柱箱,WAVEµL27400型紫外/可见光检测器,WAVEµL2700在线去气装置:四通道,样品池(可容纳4个96孔PCR板,以便进行大规模分析筛查),WAVE

µ

Maker数据工作站系统(硬件)等。

软件部分:MicrosoftWindows

µ

NT操作系统,

HSMD27000数据工作站控制接口软件,WAVEµ

Maker核苷酸片段分析系统专用软件包。1.2 DHPLC基本原理及其应用用离子对反向高效液相色谱法:①在不变性的温度条件下,检测并分离分子量不同的双链DNA分子或分析具有长度多态性的片段,类似RFLP分析,

也可进行定量RT2PCR及微卫星不稳定性测定(MSI);②在充分变性温度条件下,可以区分单链

DNA或RNA分子,适用于寡核苷酸探针合成纯度分析和质量控制;③在部分变性的温度条件下,变异型和野生型的PCR产物经过变性复性过程,不仅分别形成同源双链,同时也错配形成异源双链,根据柱子保留时间的不同将同源双链和异源双链分离,2006年增刊李莉等:DHPLC系统工作原理及其应用从而识别变异型。根据这一原理,可进行基因突变检测、单核苷酸多态性分析(SNPs)等方面的研究。1.3 DHPLC基本操作方法在进行DHPLC检测之前应设定仪器的参数:①设定dsDNA分离柱的温度,对于部分变性的温度,导入所要检测的DNA序列,WAVE系统中的WAVEµMaker软件可根据待分析片段的DNA序列很方便地预测出柱温。另外斯坦福大学Tm计算网站(http://insertion.stanford.edu/melt.html)提供的Melt软件也可辅助温度选择,解链曲线是确定柱温的最佳参考依据,但WAVEµMaker还可提供更有用的其它信息,最为重要的是分析单一片段中存在的多个解链域。因为一般软件预测的是整个序列的平均解链温度,这只是一系列合适温度条件的中点,最适检测温度还取决于期望检出变异所在区域的局部解链温度。对于dsDNA片段大小、微卫星及mR2NA的定量分析,直接采用50℃的柱温,就是很理想的检测温度。对于RNA和Oligo的检测分析,80℃也是很合适的柱温,不需要另外找软件分析处理。②设定流动相A液和B液的组成:A液含0.1mol/L的TEAA、0.1mol/L的EDTA、0.1%的乙腈。B液含25%乙腈、0.1mol/L的TEAA、0.1mol/L的ED2TA,至于运行时A液与B液的配合比例则视检测的目的不同而有所不同。③设定紫外检测器的波长为260nm。④设定自动加样器的取样样本号、进样量等。⑤根据研究的需要,设定将运行的程序名称并存盘。⑥设定实验结果储存的文件夹、文件名等。1.4 DHPLC主要技术特点DHPLC检测技术的主要特点是:①高通量(highthroughout)检测,适合大规模的SNP筛查及微卫星分型的分析。②自动化程度高:减轻劳动强度,提高检测效率。③灵敏度及特异度均较高:与直接测序相当,检测未知的SNP可达95%以上,已有许多学者进行了DHPLC相关的方法学比较研究,均提示其敏感性和特异性可达96%~100%,明显高于常用的DGGE、CCM、CSGE、SSCP等变异检测技术[5,7,8,26,27,32],目前只有基于毛细管电泳技术发展起来的荧光单链构像多态性分析(F2SSCP)在敏感性和特异性方面能与DHPLC相媲美[12]。④所检测的DNA或RNA片段的长度变动范围广,较适合大片段DNA的筛查。⑤快速:每份样本的检测时间不超过10min,对于高通量的洗脱柱,3min便可检测一个样品。⑥相对价廉:平均每检测一份样本的费用约为10元人民币。将数份样品混合后组成样品池,成本可进一步降低。⑦检测结果以图表显示,

直观易判断。1.5 DHPLC应用1.5.1 SNP检测 在部分变性温度情况下(柱温在53~78℃之间),DHPLC可进行基因突变的检测和未知SNPs筛查。基于异源双链的形成,一个杂合子个体的PCR产物一定含有野生型和突变型两种DNA,并且两者的比例为1∶1,将PCR产物进行变性复性过程,杂交会形成同源双链和异源双链。同样,当把野生型和突变型PCR产物混合后,进行变性复性过程,杂交后也会出现4种情况(图1),它们不仅形成同源双链,同时也错配形成异源双链,异源双链由于碱基对不匹配,在部分变性的温度条件下,

就会在不匹配的碱基对处部分解链,由于单链DNA

带负电荷减少,结合力弱,因此,异源双链比同源双链先洗脱出来,根据柱子保留时间(retentiontime)的差异将同源双链和异源双链分离(图2)。据此可检测反相柱(reverse2phasecolumns)中单个碱基置换、插入或缺失杂合二倍体的片段,可检测DNA片段大小在80~1000bp范围的单碱基突变,对于未知的SNP和单个核苷酸突变,系统检测的准确率大于96%,对于已知的SNP和单个核苷酸突变,系统检测的准确率大于99.9%。对于基因突变的检测及SNP的检测也是DHPLC的最主要用途。鉴于此,中外许多研究者利用DHPLC系统进行了基因突变的研究[16,24,25,27,31,34]、未知SNPs筛查[2,6,10,23,24,33]。

图1 通过杂交形成同源和异源双链

121生物技术通报Biotechnology Bulletin

2006年增刊

图2 同源双链与异源双链在柱子上保留时间不同而分离1.5.2 双链DNA片段分析 在非变性温度条件下(柱温50~52℃),DHPLC主要有三个方面的应用:

①双链DNA片段的分析与纯化;②微卫星的分析;

③RT2PCR产物的定量分析。在非变性温度下,DNA双链不解开,由于PCR

产物片段大小的不同,在柱子内停留的时间也有差异,小片段的DNA分子首先被洗脱出来,通过紫外吸收光(260nm)检测,WAVE

µ

Maker核苷酸片段分

析系统专用软件包将其转换为不同的峰型,参照分子量标准,通过软件系统便可读出PCR产物的不同

图3 DHPLC系统和琼脂糖凝胶电泳对HaeⅢ酶切质粒pUC18分析图谱比较片段大小。DHPLC区分DNA片段大小的灵敏度很高,每个峰能检测到0.5ng的DNA样品,且对产物的大小分辨率可达到1%的水平,即100bp左右的DNA可分离出其相差1bp的片段,1000bp左右能分离相差10bp的片段大小,分离范围广,约50~2000bp内的片段大小均能很好分辨,图3展示了用HaeⅢ酶切质粒pUC18后的琼脂糖凝胶电泳图谱和DHPLC系统分析图谱,对于采用琼脂糖凝胶电泳不能分离较接近的片段,如257bp和267bp,DH2PLC系统能有效分离,对于所需片段可根据峰的位置用Transgenomic自动收集器对DNA片段进行纯化、回收一步完成,回收产物可用于进一步的测序或克隆等。Huber等(1995)[19]用DHPLC系统快速而精确地分析了烷基化物多个负粒子DNA片段的大小。1.5.3 微卫星分析 由于微卫星核心序列重复数的差异是形成多态性的基础,引发微卫星位点发生突变的原因主要为“滑链错配”,这将导致微卫星的等位基因之间会产生几个或十几个碱基的差异,且等位基因呈共显性,利用其等位基因片段大小的差异,便可通过DHPLC系统将其不同的基因型区分开。图4展示了用DHPLC系统和PAGE胶对微卫星PCR产物检测分析对照。Devaney和Marino

(2000)[11]利用DHPLC分析了人HUMTH01位点的

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