滋养层细胞
滋养层细胞与流产的关系
２． 细胞凋亡与流产
２．１ 滋 养 层 细 胞 结 构 完 整 是 胚 胎 发 育 的 重 要 条 件 ， 也 与 植 入 与 分 娩 有 关 。滋 养细胞凋亡和增殖的平衡与妊娠维持有 关， 其关系失衡可能是发生自然流产的 原因之一。其中细胞凋亡尤其是合体滋 养细胞的凋亡可能起更重要的作用。细 胞凋亡是细胞主动死亡的过程， 它在胎 盘绒毛组织结构分化及功能完善等方面 起重要的作用。它的加速可能导致流产 发生。细胞凋亡在反复自然流产患者绒 毛 中 的 表 达 阳 性 细 胞 数 明 显 增 多 。Ｖａｄｉｌｌｏ 等报道： 随着反复自然流产的发生， 孕三 月内的人绒毛组织中的细胞凋亡较正常 早 孕 明 显 增 强 。凋 亡 明 显 增 加 时 ， 胎 盘 屏 障的完整性被破坏， 从而导致流产的发 生。其中因合体滋养细胞凋亡的增加所 致胎盘屏障通透性的增加可能在流产的 发生中起到了更重要的作用。
正常妊娠是以母体趋向型细胞因子参与的体液免疫应答为主而病理性妊娠如不明原因的习惯性流产是以th型细胞因子参与的细胞首都医科大学附属北京妇产医院100006滋养层细胞与流产的关系因溶液治疗结果治疗组总有效率为100对照组总有效率80
首 都 医 药 临床医学
ＣＡＰ ＩＴＡＬ ＭＥＤＩＣＩＮＥ
滋养层细胞疾病
小结
妊娠第12周
妊娠第21周
葡萄胎
胎盘绒毛发育成熟：双层的滋养 层（细胞和合体滋养层）→仅留下 合体滋养层，间质↑ 葡萄胎：细胞和合体滋养层持续 存在且增生，Re绒pro毛duc间tive质sy水stem肿disease
绒毛膜癌(绒癌)
Choricocarcinoma 来源
50%葡萄胎后 25%自然流产 20%正常分娩后 5%早产、异位妊娠后
Reproductive system disease
不形成绒毛结构 癌组织无间质、血管 两种滋养层细胞组成
Reproductive system disease
二种瘤细胞＋“三无”特点
合
细
体
胞
滋
滋
养
养
层
层
样
样
瘤
瘤
细
细
胞
胞
Reproductive system disease
两种滋养层细胞组成
完全性葡萄胎： 所有绒毛呈葡萄状 部分性葡萄胎： 葡萄状绒毛+ 正常绒毛
伴或不伴有胎儿或其附属器官
Reproductive system disease
正常胎盘绒毛 绒毛高度水肿，透明薄壁水泡，R有ep蒂rod相uct连ive ，sys形tem似dis葡eas萄e
葡萄胎
绒毛高度水肿，透明薄壁水泡，有蒂相连，形似葡萄
绒毛间质
A→ ←B
细胞滋养层c增生(A)
合体细Rep胞rod滋uct养ive层syscte增m 生dise(aBse)
A
B 绒毛间质
细胞滋养层c增生(A)
合体细Rep胞rod滋uct养ive层syscte增m 生dise(aBse)
滋养层细胞培养其他细胞原理
滋养层细胞培养其他细胞原理
滋养层细胞培养是一种常见的细胞培养方法，它主要用于提供适合生长、繁殖和分化的细胞生长环境，帮助其他细胞在体外进行增殖和生长。
滋养层细胞通常是一种特定类型的细胞，比如成纤维细胞或骨髓间充质干细胞等，这些细胞具有较强的增殖能力和黏附能力，并且能够分泌一系列细胞因子和信号分子，包括营养物质、生长因子、细胞外基质等，这些分子对其他细胞的生长和分化起到重要的调控作用。
滋养层细胞培养的原理主要包括以下几个方面：
1. 提供黏附基质：滋养层细胞在培养表面释放的细胞外基质可以提供一个黏附基质，其他细胞可以附着在这个基质上，从而有利于细胞生长和增殖。
2. 提供营养物质：滋养层细胞通常能够分泌多种营养物质，包括氨基酸、糖类、维生素等，这些物质可以满足其他细胞的生长需要。
3. 分泌生长因子：滋养层细胞能够分泌多种生长因子，如表皮生长因子（EGF）、胰岛素样生长因子（IGF）等，这些生长
因子可以刺激其他细胞的增殖和分化。
4. 调控信号传导：滋养层细胞通过分泌细胞因子和其他信号分子，与其他细胞进行相互作用，影响细胞的生长和分化，调控
特定细胞类型的命运。
综上所述，滋养层细胞培养通过提供适合的生长环境和生长因子，帮助其他细胞在体外进行增殖和生长，促进细胞的分化和功能发挥。
这是一种常见的细胞培养方法，被广泛应用于生物医学研究和细胞治疗等领域。
饲养层细胞、成纤维细胞、滋养层细胞
中文名称：饲养层细胞大鼠胚胎干细胞在饲养层细胞上培养英文名称： feeder layer cell定义：在细胞培养中起分化抑制作用的单层贴壁细胞所属学科：细胞生物学（一级学科）；细胞培养与细胞工程（二级学科）所谓饲养层细胞就是指一些特定细胞（如颗粒细胞、成纤维细胞、输卵管上皮细胞等已在体外培养的细胞），经有丝分裂阻断剂（常用丝裂霉素）处理后所得的细胞单层。
是细胞培养，尤其是胚胎干细胞培养常用的生长增殖促进剂和分化抑制剂。
成纤维细胞成纤维细胞是结缔组织中最常见的细胞，由胚胎时期的间充质细胞分化而来。
根据细胞不同的功能活动状态，将细胞分为成纤维细胞和纤维细胞二型：成纤维细胞是功能活动旺盛的细胞，细胞和细胞核较大，轮廓清楚，核仁大而明显，细胞质弱嗜碱性，具明显的蛋白质合成和分泌活动；纤维细胞（fibrocyte）功能活动不活跃，细胞轮廓不明显，核小体着色深，核仁不明显，细胞质少。
此二型细胞可互相转化。
在结缔组织中，成纤维细胞还以其成熟状态—纤维细胞的形式存在，二者在一定条件下可以互相转变。
不同类型的结缔组织含成纤维细胞的数量不同。
通常，疏松结缔组织中成纤维细胞的数量比同样体积的致密结缔组织中所含成纤维细胞的数量要少，故分离培养成纤维细胞多以真皮等致密结缔组织为取材部位。
在国王学院研究人员一项针对小鼠的研究中，发现小鼠皮肤中的成纤维细胞至少有两种类型：一种是结缔组织上层的成纤维细胞，它们是皮肤毛囊形成所必须；另一种则是结缔组织下层中的成纤维细胞，这部分细胞负责制造大部分的皮肤胶原纤维，触发受损皮肤的修复。
通过皮肤表皮信号的刺激可增加成纤维细胞的数量，而成纤维细胞数量的增多有助于伤口愈合过程中毛囊的形成，进而降低皮肤愈合后落下疤痕的几率。
研究表明，皮肤的厚度和成分会随着年龄增加而改变，老年人的皮肤很容易受伤，且不易愈合，这很可能是因为上层皮肤成纤维细胞缺失所致，假设找到方法刺激这些细胞生长，就有可能恢复皮肤的弹性，同样还能刺激毛囊形成，减少疤痕。
女性生殖系统疾病—滋养层细胞疾病(病理学课件)
5.葡萄胎一经确诊要立即给予彻底清宫。
2023/8/21
分类： ①继发性：大多数，与妊娠有关； ②原发性：与妊娠无关（罕见）。
好发年龄：20~30岁女性 性质：高度恶性
2023/8/21
绒毛膜癌(choriocarcinoma)
一、病因及发病机制
1.绝大多数与妊娠有关（1年内）： 50%继发于葡萄胎后； 25%继发于自然流产后； 20%继发足月分娩后； 5%继发于早产、异位妊娠后。
侵蚀性葡萄胎（invasive mole）
一、病因及发病机制
1.继发于葡萄胎：多数发生在葡萄胎清宫术 后6个月内，发病率为10%~15%。 机制：水泡状绒毛直接浸润至子宫肌层
提示1：葡萄胎必须彻底清宫！ 提示2：清宫后动态观察血、尿HCG！ 2.开始即为侵蚀性葡萄胎（极少数）
2023/8/21
侵蚀性葡萄胎（invasive mole）
5.绒癌对化疗敏感，预后较好。
一、病因及发病机制 二、病理变化 三、临床病理联系 四、预后
2023/8/21
葡萄胎(hydatidiform mole)
概念：发生于妊娠期胎盘绒毛的良性病变,妊 娠后胎盘绒毛滋养细胞增生，间质高度水肿， 形成大小不一的水泡，水泡间相连成串，形状 似葡萄，亦称水泡状胎块（HM）。
1.局部直接蔓延； 2.血道转移：绒癌侵袭破坏血管的能力很强， 早期即可发生。
①顺血流方向→肺（70%）、肝（20%）、 脑、脾、肾、肠等；
②逆血四、临床病理联系
1.阴道不规则出血 ：继发于肿瘤出血坏死；可发 生在葡萄胎清宫后、流产或分娩数月后。 2.子宫增大：瘤体逐渐增大引起； 3.血、尿HCG显著增高：肿瘤细胞产生大量HCG。 4.腹痛：癌组织侵袭、穿破子宫壁或子宫腔积血 引起。 5.转移引起的症状：肺转移→咯血、胸痛；脑转 移→头疼、呕吐、偏瘫、昏迷；肾转移→血尿。
滋养层细胞的制备
1．器材眼科镊子；眼科剪；平皿；200目筛；小烧杯；细胞计数板；离心管2．试剂双抗；DMEM(DMEM/F12)；FBS；胰蛋白酶(0.25%)；Ⅰ-胶原酶(0.1%)；PBS；75%酒精；0.4%台盼蓝；3．方法步骤3.1．滋养层的分离(1)将剥离下的组织放入75%酒精中10s，用含双抗的PBS冲洗2次，取出组织放入含有双抗的PBS缓冲液中，4℃保存，6-8 小时内带回实验室。
(2)将采集的胎盘样品用75%的酒精表面消毒后迅速的移入到新鲜的含双抗的PBS缓冲液中冲洗2-3次，移入无菌间内的超净工作台内。
无菌双抗PBS缓冲液冲洗3 次，用眼科剪小心剥离胎膜、尿囊膜、毛细血管等与绒毛膜紧密相连组织，无菌双抗PBS缓冲液冲洗3次。
(3)用眼科剪剪成1-3mm3的组织小块，含双抗的PBS悬浮沉淀漂洗3 次，每次3 min。
加入等体积于组织样品的0. 25 %胰蛋白酶消化液，37℃恒温震荡箱消化10 min，弃上清。
再加入等样品20-30 倍的0.25%胰蛋白酶和0. 1 %胶原酶1:1 复合消化液，37℃消化30 min，收集上清液。
将剩余组织再次加入复合消化液 5 min，直至大部分组织被消化成细胞悬液，收集每次消化后的上清液加入等体积含10%血清的培养基终止消化。
(4)将所得到的细胞悬液通过200 目的不锈钢筛网。
(5) 1200 r/min,离心5 min,用完全培养基重悬离心沉淀的细胞,将细胞悬液浓度调整至5~6X105个/mL。
(6)置于37℃5% CO2培养箱中培养；隔日更换培养基一次以去除血细胞和其它无法贴壁的成分，待细胞贴壁后更换培养液，此后每3d 更换培养液1 次。
直至首次传代。
3.2．滋养层的纯化与传代纯化过程与传代培养同时进行。
当原代培养的滋养层细胞贴壁生长到90%以上汇合度时应进行传代。
首次传代前24 小时更换培养液。
(1)反复贴壁法将原代培养的细胞用0. 25%胰蛋白酶消化后，制成不含血清的细胞悬液，接种到培养瓶内，静止20 min；镜下观察部分细胞贴壁（稍加摇荡也不浮起），由于在无血清培养液内成纤维细胞比上皮细胞贴壁快，此时的贴壁细胞主要为成纤维细胞，上皮细胞大多数悬浮在培养液内，然后将培养液（含未贴壁细胞）吸到另一培养瓶内，加入含血清的培养液继续培养；再次制备不含血清的细胞悬液，重复以上操作传代培养3 次，可获得较高浓度的胎盘滋养层细胞。
饲养层与滋养层的区别,饲养层细胞的定义
饲养层与滋养层的区别，饲养层细胞的定义饲养层是在细胞培养皿上铺展开的饲养细胞层，滋养层是哺乳动物围绕胚泡形成的胚外层上皮，将来形成绒毛的外层，和母体组织共同组成胎盘。
滋养层为哺乳类早期胚泡壁的单层细胞所形成的薄膜，是因为以后从母体摄取胎儿营养起重要作用而有此名。
饲养层的成纤维细胞胞体较大，胞质弱嗜碱性，胞核较大呈椭圆形，染色质疏松着色浅，核仁明显。
一、饲养层与滋养层的区别1、饲养层是在细胞培养皿上铺展开的饲养细胞层；滋养层是哺乳动物围绕胚泡形成的胚外层上皮，以后可以形成绒毛的外层，和母体组织共同组成胎盘。
简单来说前者是体外细胞培养中的细胞层，而后者是胚胎的一部分，属于体内细胞。
2、滋养层是哺乳类早期胚泡壁的单层细胞所形成的薄膜，由于它为以后从母体摄取胎儿营养起重要作用而得此名。
基因诊断时，通常可以取少量滋养层细胞诊断是否患有遗传病，这样就不会影响胎儿发育。
3、饲养层的成纤维细胞胞体非常大，胞质弱嗜碱性，胞核较大呈椭圆形，染色质比较疏松着色浅，核仁比较明显。
电镜下，其胞质可以看到丰富的粗面内质网、游离核糖体和发达的高尔基复合体，说明它具有合成和分泌蛋白质的功能。
成纤维细胞可以合成和分泌胶原纤维、弹性纤维、网状纤维及有机基质。
二、饲养层细胞的定义1、饲养层细胞就是指一些特定的细胞（比如颗粒细胞、成纤维细胞、输卵管上皮细胞等已在体外培养的细胞），经过有丝分裂阻断剂（常用丝裂霉素）处理后得到的细胞单层，一般铺在明胶层上（也可不铺），饲养层细胞大部分可用于MEF（小鼠胚胎成纤维细胞）。
2、不管是ES细胞或EG细胞，原代或初期培养阶段一般都需要依赖于能分泌它们在体外存活增殖所必需的生长因子的饲养层细胞。
不同类型的饲养层细胞分泌的生长因子都会有一些差异，但都要求在培养过程中的饲养层细胞不分裂不增殖而仍保持代谢活性。
妊娠滋养层细胞疾病
影响：绒癌病例各器官转移发生率高，转移方 式主要有3种：①局部静脉栓塞性转移，栓子经 子宫静脉、阴道静脉或其他盆腔静脉逆行栓塞 而转移;②血行远处转移;③淋巴转移，但较少见。 现今多方报道，恶性滋养细胞肿瘤可随血运转 移人体各器官、各部位。除头发和指甲绒癌合 并妊娠尚可转移至胎儿。
病因：观点一：葡萄胎属于一种病理性妊娠，胎儿因发育 障碍而死亡，绒毛内血液循环不复存在，母体进入 绒毛的液体不能运送而积蓄在绒毛间质内，绒毛水 肿、胀大。 观点二：葡萄胎属于一种肿瘤性疾病，有胎盘滋养 层的细胞肿瘤增生所致。 近年研究显示，染色体异常起重要作用。
病理变化：
肉眼观：水泡状胎块、大小不一，水泡壁薄，透明，内含粘 性液体，水泡问充满血液及凝血块。仅限于子宫腔内，不侵 入肌层。 镜下观：绒毛间质水肿而肿大;间质血管稀少或消失;滋养细 胞有不同程度的增生
病理变化：
肉眼观：出血性坏死，子 宫不规则增大，子宫腔内 可见一个或多个息肉状蓝 紫色结节，表面可溃烂。
镜下观：由异常增生的细 胞滋养层细胞和合体滋养 层细胞组成，癌细胞成团、 成片状或条索状排列。常 有核分裂象，没有绒毛结 构，舞血管及间质，只是 与侵袭性葡萄胎的主要区 别。病灶周围常见大片出 血、坏死。
临床表现：葡萄胎清宫 后仍持续性不规则出血。
影响：侵袭性葡萄胎也 易引起肺或阴道转移， 偶见脑转移、肝脾等其 他脏器的转移，转移灶 病理所见与子宫原发灶 病变基本相似，也可见 水泡样组织、出血坏死 等或镜下可见绒毛结构 或阴影。
三、绒毛膜癌
定义：绒毛膜癌是滋养层细胞的高度恶性肿 瘤，简称绒癌。
特点：滋养层细胞失去了原有绒毛和葡萄胎 结构，细胞团块侵袭邻近组织，并侵入血 管腔通常肿瘤呈扩张性、离心性生长，常 伴有广泛的出血及坏死。活的肿瘤细胞只 存在于肌层的界面处，形成环绕中央出血 和坏死的一个薄层。血管浸润明显，因绒 癌无内在的间质性血管。典型的生长方式 是重演了绒毛前的滋养细胞形成，但也可 出现其他生长方式。
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滋养层细胞
科技名词定义
中文名称：滋养层细胞
英文名称：trophoblast;trophoblastic layer
定义：哺乳动物胚泡的外层细胞，不能发育成胚体，只能发育成胚外结构。
所属学科：遗传学（一级学科）；发育遗传学（二级学科）
本内容由全国科学技术名词审定委员会审定公布
在胚胎发育成桑椹胚后，桑椹胚进一步发育，细胞开始出现分化。
聚集在胚胎的一端，个体较大的细胞，称为内细胞团（innercellmass，ICM），将来发育成胎儿的各种组织，而沿透明带内壁扩展和排列的，个体较小的细胞，称为滋养层细胞，它们将来发育成胎膜和胎盘。
所以做基因诊断时，通常取少量滋养层细胞诊断是否患有遗传病，这样不会影响胎儿发育。
滋养层
科技名词定义
中文名称：滋养层
英文名称：trophoblast
定义：哺乳动物围绕胚泡形成的胚外层上皮。
将来形成绒毛的外层，和母体组织共同组成胎盘。
所属学科：细胞生物学（一级学科）；细胞分化与发育（二级学科）
本内容由全国科学技术名词审定委员会审定公布
滋养层
滋养层trophoblast为哺乳类早期胚泡壁的单层细胞所形成的薄膜。
是因为以后从母体摄取胎儿营养起重要作用而有此名。
植入时滋养层局部增生肥厚（极端滋养层）侵着于子宫壁的组织内，并将一部分子宫壁溶解吸收。
内胚层和中胚层分化之后，它虽然相当于外胚层，但与胚体形成部的胎儿外胚层是有区别的，所以有称滋养外胚层（trophectoderm）的。
滋养外胚层不久被胚外体壁中胚层贴附，这样合起来的两层（广义的体壁层）称为滋养膜（滋养层和滋养膜使用上不一定明确区别）。
又滋养膜相当于卵生羊膜类的浆膜，所以也仍可称为浆膜。
在人的滋养层一部分形成发达的海绵状构造，包围于植入胚的周围。
称此为合体滋养层（sy-
ncytialtrophoblast）或海绵滋养层（spongiotro- phoblast）。
相反，而与胚胎直接相邻的一层称为细胞滋养层（cytotrophoblast）。
海绵滋养层将成为合胞体，认为它能吸收与其相接腔中的母体组织分解物。