微生物实验操作
微生物实验室操作规程【SOP】2024
正文内容：1. 培养基和试剂的制备和保存1.1 培养基的制备- 确保实验室用水质量符合要求，执行水质监测。
- 配制培养基时，按照配方的比例准确称量和混合各种成分。
- 制备后的培养基要经过高温高压灭菌处理，并记录相关信息。
1.2 试剂的准备与保存- 确保试剂的纯度和质量。
- 试剂的保存应遵循相应的储存条件，如低温、干燥、避光等。
2. 微生物实验室的清洁和消毒2.1 实验台面和设备的清洁- 实验结束后，及时清洁实验台面和设备，移除残余的微生物和污渍。
- 使用合适的清洁剂和消毒剂，遵循正确的清洁和消毒程序。
2.2 垃圾处理和废弃物管理- 将实验室生活垃圾与实验废弃物分类投放，遵循垃圾分类和废物管理的要求。
- 在实验室内配备明显的废弃物容器，并定期清理和更换。
3. 生物安全操作和防护3.1 实验室内的个人防护- 实验室工作人员应穿戴实验室指定的个人防护装备，包括实验服、手套、口罩等。
- 定期检查和更换个人防护装备，确保其完好无损。
3.2 操作台上的生物安全柜使用- 使用生物安全柜操作时，按照正确的使用方法进行操作。
- 养生物安全柜使用后，要及时清洁和消毒。
4. 微生物实验的准备和操作4.1 实验准备- 在进行微生物实验前，要仔细阅读实验方案和相关文献，了解实验目的和操作步骤。
- 准备所需的培养基、试剂、设备等，并确认其完整性和有效期。
4.2 微生物实验操作- 操作前要洗手并戴好手套，保持操作台面的清洁。
- 严格按照实验方案的指导进行操作，确保实验过程的准确性和可重复性。
- 实验过程中注意观察实验样品的变化，并记录相关数据和观察结果。
5. 实验数据记录和结果分析5.1 数据记录- 在实验过程中，实验人员要及时、准确地记录实验数据和观察结果。
- 记录的数据要清晰可辨，并加以正确的标注和注释，以便后续的数据分析和结果验证。
5.2 结果分析与总结- 在实验完成后，仔细整理和分析实验数据，得出结论并进行结果的可靠性评估。
微生物检测操作流程
微生物检测操作流程《微生物检测操作流程》微生物检测是一项重要的实验室技术，用于检测和鉴定各种微生物，包括细菌、真菌、病毒等。
本文将介绍一般的微生物检测操作流程。
一、样品采集与处理1. 样品选择：根据实验目的选择适当的样品类型，如水样、食品样、土壤样等。
2. 采集样品：采集样品时要注意避免污染和交叉污染。
3. 处理样品：根据具体情况，对样品进行处理，如稀释、研磨、过滤等。
二、培养基的制备1. 选择合适的培养基：根据待检微生物的特性选择适当的培养基类型。
2. 制备培养基：按照标准的配方和操作规程制备培养基。
三、菌落计数1. 加样和摇匀：将样品加入培养基中，并充分摇匀。
2. 培养：将培养基装入培养皿或培养瓶中，进行恒温培养。
3. 菌落计数：根据菌落的外观、形态等特征，进行菌落计数。
四、纯化和鉴定1. 提取纯种菌：从培养基上选取单个菌落，进行传代培养，获得纯种菌。
2. 形态鉴定：通过观察微生物的形态特征，如形状、大小、颜色等，进行初步鉴定。
3. 生理生化特性鉴定：通过对微生物的生理生化特性进行检测，如氧需求性、产气性、酶活性等，进一步鉴定。
五、分子生物学检测（可选）1. 提取DNA/RNA：采用适当的方法提取待检微生物的DNA或RNA。
2. PCR扩增：利用聚合酶链式反应（PCR）扩增目标序列。
3. 凝胶电泳：将PCR产物进行凝胶电泳分析，确定目标序列的存在与否。
六、结果分析与报告1. 结果解读：根据实验结果判断待检微生物是否合格。
2. 报告编写：撰写实验报告，包括实验方法、结果、分析和结论。
3. 结果验证：可以进行复核实验或委托第三方实验室进行验证。
以上即是一般的微生物检测操作流程，不同类型的微生物检测可能会有一些差异。
在实验中，操作人员应严格遵循操作规程，做好实验安全和样品处理，保证检测结果的准确性和可靠性。
《微生物学实验》操作步骤
实验一培养基的制备与灭菌实验步骤：（一）伊红美蓝培养基（EMB，用成品，分离大肠杆菌用）每组1瓶，250 ml三角瓶×200 ml培养基。
按成品说明称量、放入搪瓷杯，加水，加热完全溶化，倒入三角瓶，塞棉花塞，牛皮纸封口，包扎，作标记（培养基名称、批次组别、日期，下同），灭菌。
（二）营养琼脂培养基（即牛肉膏蛋白胨培养基，用成品，分离芽孢杆菌用）每组1瓶，250 ml三角瓶×200 ml培养基，方法同上，灭菌。
（三）PDA培养基（即马铃薯蔗糖培养基，分离酵母菌、根霉用）每组1瓶，250 ml三角瓶×200 ml培养基。
培养基配方：马铃薯20%、蔗糖（白砂糖）2%、琼脂 2%，加水至所需体积，pH自然。
配制方法：马铃薯去皮，称量，切成小方块，放入搪瓷杯，加水适量，煮沸20 min，取汁液，补水至所需体积，加入蔗糖（白砂糖），加热溶化，最后加入琼脂（琼脂要预先单独用水浸泡，然后挤干再加入），加热至琼脂完全溶化，分装三角瓶，塞棉花塞，牛皮纸封口，包扎，灭菌。
培养基统一高压蒸汽灭菌（121℃25 min）。
（四）无菌平皿准备（下次实验倒平板用）每组10套，报纸包扎，高压蒸汽灭菌（121℃25 min）后，置干燥箱80℃烘干1 h。
（五）枯草样预处理及预培养（下次实验分离芽孢杆菌用）枯草样预处理：每组1瓶。
100 ml三角瓶＋自来水约50 ml，加5%可溶性淀粉，溶解。
枯草若干，剪短，浸入三角瓶水中，牛皮纸封口，包扎，置水浴中煮沸10 min，然后置培养箱30℃预培养3～7 d。
（六）葡萄样（或其它水果）酵母菌预培养（下次实验分离酵母菌用）每组1瓶。
葡萄（或其它水果）适量，捏碎，皮渣与汁液一起放入250 ml 三角瓶（装量1/2～2/3），封口，置培养箱25℃预培养3～7 d，观察自然发酵过程。
实验二微生物的分离与纯化实验步骤：（一）污水中大肠杆菌的分离（稀释倒平板法）1）用三角瓶取污水样适量。
微生物实验技术操作手册
微生物实验技术操作手册一、实验介绍微生物实验技术操作手册旨在为研究人员提供详细的实验步骤和操作指南，以确保实验的准确性和可重复性。
本手册涵盖了微生物实验的基本原理、实验材料和设备的准备、实验步骤以及结果分析等内容。
通过遵循本手册的操作指南，研究人员可以顺利进行微生物实验，并获得可靠的实验结果。
二、实验材料和设备准备1. 实验材料：- 微生物培养基：根据实验需要选择适当的培养基，如LB培养基、TSB培养基等。
- 微生物菌种：根据实验目的选择所需的微生物菌种。
- 试剂：如抗生素、染料等。
- 培养皿、试管、移液器等实验器材。
2. 实验设备：- 培养箱：用于控制培养温度。
- 离心机：用于离心培养物。
- 恒温振荡器：用于培养物的摇床培养。
- 显微镜：用于观察微生物的形态和结构。
三、实验步骤1. 准备工作：- 消毒操作台和实验器材：使用适当的消毒剂对操作台和实验器材进行消毒处理，以确保实验环境的无菌。
- 培养基制备：按照培养基配方准备培养基，并进行高压灭菌处理。
- 微生物菌种制备：选择适当的菌种进行预培养，以获得足够的菌量。
2. 培养操作：- 接种：将预培养的菌种接种到含有适当培养基的培养皿或试管中。
- 培养条件控制：根据菌种的生长要求，设置适当的培养温度、pH值和培养时间。
- 培养物观察：使用显微镜观察培养物的生长情况，并记录相关数据。
3. 实验操作：- 抗生素敏感性实验：将不同浓度的抗生素添加到含菌培养基中，观察菌落的生长情况，以确定菌株对抗生素的敏感性。
- 染色实验：使用适当的染料对微生物进行染色，观察染色后的微生物形态和结构。
四、结果分析根据实验操作所获得的结果，进行相应的数据分析和结果解读。
通过比较不同实验组的结果，可以得出结论并提出相应的讨论。
五、注意事项- 操作前需仔细阅读实验操作手册，并按照操作指南进行实验。
- 严格遵守实验室的安全操作规程，佩戴适当的个人防护装备。
- 实验过程中保持实验环境的无菌和洁净。
微生物常用实验3篇
微生物常用实验第一篇：细菌涂片染色实验细菌涂片染色实验是微生物学中最基本的实验之一。
通过染色方法，使细菌变得可见，便于观察形态、结构、数量等特征，有利于研究其生长、代谢、致病性等方面。
下面，我们来介绍细菌涂片染色实验的具体步骤：一、制备细菌涂片1.取出培养基上生长良好的细菌菌落，用不锈钢嵌片环沿中心点轻压一下。
2.将嵌片环中的菌落涂匀于无菌载玻片上，制备成直径约1厘米的薄片。
3.待载玻片上的细菌涂片晾干，并用火焰消毒。
二、涂片染色1.用火焰将铺有细菌涂片的玻片烤干。
2.将烤干的玻片浸入甲醇中，固定一分钟，再用水漱洗。
3.将玻片浸入碘酒中，固定一分钟，再用水漱洗。
4.将玻片浸入乙醇中，使背景颜色褪去，再用水漱洗。
5.将玻片浸入洋红染色液中，染色时间不超过1分钟。
6.用水冲洗干净，晾干后可以在显微镜下观察。
通过细菌涂片染色实验，我们可以直观地观察到细菌的形态、大小、聚集情况、颜色等，有助于鉴定细菌种类，并进一步深入研究其生物学特性。
第二篇：厌氧培养实验厌氧菌是一类生长需要在完全无氧条件下进行的微生物。
在许多疾病的发病机制中，厌氧菌都发挥着重要作用，因此，研究厌氧菌对于认识疾病的发病机制具有极其重要的意义。
下面，我们来介绍厌氧培养实验的具体步骤：一、制备厌氧培养基制备厌氧培养基是进行厌氧菌培养的关键。
具体操作步骤如下：1.准备培养基，并在其中加入培养菌株所需的配方和其他适宜的添加剂。
2.将培养基分装到无菌针筒或暗口瓶中。
3.在体积的一半至三分之二处加入去氧剂（一般为Thioglycolate或Dithiothreitol）。
二、厌氧细菌接种与培养1.准备厌氧细菌培养物的接种种子。
一般情况下，把生长适应在厌氧条件下的细菌进行分生处理来获得设计数量的细胞，并将其重新悬浮在与培养基相同的缓冲液中。
2.在无氧条件下接种厌氧菌，避免暴露于空气中。
可以通过使用瓶盖和橡胶塞的局部替代或全封闭气密容器的方法来实现无氧条件。
微生物培养实验方法_
微生物培养实验方法_一、选材和操作环境1.选材：根据实验目的，选择适当的微生物进行培养。
可以选择广谱微生物培养基来适应多种微生物的生长，或者选用特定的微生物培养基来培养其中一种特定的微生物。
2.操作环境：为了避免实验污染和交叉感染，实验室应该严格执行无菌操作，使用无菌操作台进行培养实验。
二、无菌技术1.灭菌：使用高压蒸汽灭菌器或者乙醇灭菌器将培养器具、培养基和植物培养基灭菌，以杀灭存在的菌种。
2.无菌操作：将培养器具放在无菌操作台上，进行接种、移植以及采样等操作，确保操作过程中不受外界菌种污染。
三、液体培养实验1.静态培养：在无菌培养基中接种微生物，放入试管或培养瓶中，静置培养。
根据需求，可以在静态培养过程中添加适量的养分补充剂。
2.摇床培养：将含有微生物的培养基放在摇床上进行培养，设置合适的温度和摇动速度，可以促进微生物的生长和代谢。
3.发酵罐培养：将含有微生物的培养基放入发酵罐中进行大规模培养。
控制发酵罐内的温度、pH值、氧气供应等条件，可以实现微生物的高密度培养。
四、固体培养实验1.平板培养：将含有微生物的培养基倒入培养皿中，使其均匀分布在培养皿表面，待其凝固后，将微生物接种于其上。
培养过程中可以观察到微生物的孤悬、菌落的形成和生长情况。
2.涂布法：将含有微生物的培养基均匀涂布在玻璃片、培养皿或者培养瓶内壁上，形成薄膜状，待其凝固后，进行微生物的接种。
3.动植物体内培养：将微生物接种在动植物的体内，如动物的腹腔、皮肤或者植物的叶片、根系等，利用动植体提供的养分来满足微生物的生长需求。
五、检测微生物生长和代谢特性1.可视方法：通过观察培养基上微生物的生长情况、菌落的形态和颜色等，判断微生物的生长情况。
2.双抗法：使用特定的抗体和染料来染色微生物，使其表现出不同的颜色或者形态，以便于鉴别和分析微生物。
3.生化检测方法：通过检测微生物在培养基上产生的特定代谢产物，如酶活性、气体产生等，来评估微生物的生长情况和代谢特性。
微生物操作规程
微生物操作规程
《微生物操作规程》
微生物操作是实验室中常见的操作，但由于微生物具有一定的危害性，因此对微生物操作有严格的规程。
以下是对微生物操作规程的一些要点：
1. 穿着适当的防护装备：在进行微生物操作时，实验人员应该穿着适当的防护装备，包括实验服、手套、口罩和护目镜等。
这可以有效预防微生物和其代谢产物对皮肤和呼吸系统造成危害。
2. 操作实验室的卫生消毒：在进行微生物操作前，需要对实验室进行必要的卫生消毒，确保操作环境的清洁与无菌环境。
3. 严格的操作流程：在进行微生物操作时，需要严格按照规程进行操作，避免出现操作失误导致微生物泄漏或污染的情况发生。
4. 正确处理微生物废弃物：在微生物操作结束后，实验人员需要将微生物废弃物进行正确处理，避免对环境和人体造成危害。
5. 定期进行培训和检查：对从事微生物操作的实验人员需要进行定期的培训和检查，以提高其微生物操作的安全性和准确性。
总之，微生物操作规程是保证微生物操作安全的基础，严格遵
守微生物操作规程可以有效预防微生物的危害，并保障实验人员和环境的安全。
微生物检测操作规程
微生物检测操作规程《微生物检测操作规程》一、目的微生物检测操作规程旨在规范微生物检测实验的操作流程，确保检测结果的准确性和可靠性。
二、适用范围本规程适用于实验室内进行微生物检测实验的操作人员，包括但不限于食品、医药、环境等领域的微生物检测。
三、操作流程1. 实验前准备（1）检查所需物品和设备的完整性和清洁度；（2）准备好所需的培养基、培养皿、移液器等实验用品；（3）佩戴实验服和手套，保持操作环境清洁。
2. 样品处理（1）按照标准操作程序采集样品，并确保准确记录样品信息；（2）样品处理前进行必要的预处理，如稀释、离心等。
3. 培养和检测（1）按照操作规程在培养基上均匀涂布样品；（2）标注培养皿的信息，包括样品编号、培养基种类、培养温度等；（3）放置在适当的培养温度下培养一定时间；（4）观察培养皿的生长情况，记录培养时间和结果。
4. 结果分析（1）根据培养结果进行初步鉴定和计数；（2）必要时进行进一步的分离、鉴定和鉴定。
四、质控要求（1）实验操作人员应具备相应的微生物检测知识和技能，并接受相关的培训；（2）严格遵守操作规程，确保实验操作的准确性和一致性；（3）定期对实验室设备、试剂和培养基等进行检查和质量控制，确保其完好和有效。
五、记录和报告实验过程中产生的数据和结果应当及时记录，并进行审查和验证。
对于检测结果，应当制作详细的技术报告，包括检测方法、样品信息、结果分析和结论等内容。
六、实施本规程由实验室主管负责组织实施，并由实验室操作人员严格遵守。
七、附则本规程自发布之日起施行，如有变动将另行制定修订，并及时通知相关人员。
以上即为《微生物检测操作规程》的内容，希望广大实验室操作人员严格按照规程执行，确保微生物检测工作的准确性和可靠性。
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油镜的使用和维护目的：掌握油镜的使用与维护，熟悉油镜的使用原理。
材料：显微镜，拭镜纸，液体石蜡油，二甲苯原理：油镜的透镜极小，工作焦距最短，光线通过玻璃和空气，由于介质密度不同发生折射，射入镜筒的光线极少，视野暗，物象不清晰。
如在玻片与镜头（透镜）之间加上折光率和玻片（n=1.52）相近的香柏油（n=1.515）就可减少光线的折射，加强视野的亮度，获得清晰的物象。
步骤：显微镜油镜的使用和维护1.将显微镜平稳地安放在实验台适宜处。
识别油镜头：标有100×、OIL、HI等字样。
2. 打开电源，用低倍镜对光，打开光圈，调节聚光镜的位置，使视野光线充足。
3. 标本上加镜油一滴，转动粗螺旋，使油镜头缓缓下降，用眼从侧面观察，直到油镜头浸入油中接近玻片为止。
4. 从目镜观察，同时徐徐转动粗螺旋提升，见模糊物象后再用细螺旋调节，直到见到清晰物象为止。
5. 观察完毕，粗螺旋提高镜头，取下标本片，油镜头使用后立即用擦镜纸擦净镜头上的油。
如油已干，可在擦镜纸上滴少许二甲苯擦拭，并立即用另一擦镜纸擦去二甲苯，因二甲苯能溶解镜头上的固定胶以致使镜头脱落。
6.将镜头转呈“八”字，调低聚光器，对号送入柜子内存放。
革兰染色目的：掌握革兰染色的原理及操作。
材料：干净玻片，接种环，葡萄球菌和大肠杆菌18-24h 培养后的混合菌液，酒精灯，一套革兰染液原理：主要为细胞壁结构的差异。
G+三维肽聚糖结构的交联度大，通透性低，脂质少或无，酒精作用使孔径缩小；而G-肽聚糖为二维疏松结构，薄，外膜含大量脂质，易被酒精溶解，使细胞壁通透性增高，结晶紫-碘复合物被酒精溶解而脱色。
步骤：1. 细菌标本的制作（1）涂片：无菌操作。
取一接种环混合细菌悬液，涂布成直径约1cm的涂片，涂片应薄而均匀。
（2）干燥：涂片最好在室温中自然干燥。
必要时可将标本面向上，放在酒精灯上方微火处干燥。
（3）固定：标本面向上，在酒精灯火焰外焰按钟摆的速度来回通过3次，放置待冷后染色。
固定的目的是杀死细菌，使细菌与玻片黏附较牢固。
菌体蛋白质变性后，提高与染料的亲和力。
2. 革兰染色（1）初染：滴加结晶紫染液1-2滴于涂片上，1min 钟后用自来水缓缓冲洗。
（2）媒染：滴加碘液1-2滴，1min后用自来水缓缓冲洗。
（3）脱色：加95%酒精数滴，摆动玻片使酒精与细菌充分接触，约20-30s后，立即用自来水缓缓冲洗。
（4）复染：滴加稀释碳酸品红液，30-60s后，自来水缓缓冲洗。
用吸水纸吸干后，用油镜观察。
镜检后，载片放入消毒缸。
细菌特殊结构的观察目的：观察并掌握细菌的形态及特殊结构。
材料：细菌鞭毛、芽孢、荚膜的标本片；革兰阳性菌、革兰阴性菌染色标本片示教：革兰阳性菌：葡萄球菌，紫色革兰阴性菌：大肠杆菌，红色细菌鞭毛细菌芽孢细菌荚膜细菌的分布目的：了解细菌在自然界中的分布情况。
材料：普通琼脂平板培养基、血平板、镊子、无菌棉拭子、革兰染液。
操作步骤：1.空气中细菌的检查（1）采用沉降法：取普通琼脂平板培养基1只，任意置一处，启盖约15分钟，再盖上，37oC培养24小时，观察有无细菌生长。
（2）结果判定：培养基表面可见多种大小、形态不一的菌落。
2. 皮肤表面细茵检查(1)采用涂抹法: 先在平板底面用记号笔分成两区，作标记，将未消毒的手指在平板的1／2处表面轻轻涂抹划线，然后用碘酒、乙醇擦拭手指皮肤，用消毒后的手指在平板另一1／2处进行涂抹，操作完毕，置37℃培养24小时后，取出观察结果。
(2)结果判定：培养基表面有几种大小及形态不同的菌落生长，注意比较消毒前后细菌的生长情况。
3.咽喉部细茵检查(1)用无菌棉拭子在咽喉部涂抹后，涂在血平板上，并划线分离，37oC培养24小时后观察结果。
注意观察平板上菌落种类以及是否有溶血现象，并可挑取菌落进行革兰染色检查。
口腔微生物检查也可用无菌牙签直接挑取少量牙垢，制成涂片，进行革兰染色检查。
(2)结果判定：血平板表面有大小和形态不同的菌落，有的菌落周围可见溶血环。
牙垢涂片镜检可见革兰阳性菌和革兰阴性菌。
紫外线杀菌实验目的：掌握紫外线杀菌的原理，熟悉紫外线杀菌实验的操作。
材料：大肠杆菌，琼脂平板，无菌回形状纸片，接种环，镊子，紫外灯.原理：紫外线波长范围为240～280nm,最适的波长为260nm，这与DNA吸收光谱范围相一致。
其杀菌原理是紫外线易被核蛋白吸收，使DNA的同一条螺旋体上相邻的碱基形成胸腺嘧啶二聚体，从而干拢DNA的复制，导致细菌死亡或变异。
紫外线特点：紫外线的穿透能力弱，不能通过普通玻璃、尘埃。
步骤：1.平板密集划线接种。
2.在平板上贴无菌回形纸片。
3.UV照射30min（打开平板盖子）。
4.取出回形纸，将回形纸放入消毒缸中。
5.37oC培养24h后观察结果。
细菌代谢产物观察和生长现象目的：掌握细菌代谢产物的检测和结果的判断。
熟悉细菌在各种培养基中的生长现象。
材料：各种生化管，大肠杆菌、伤寒杆菌、产气杆菌、变形杆菌等。
原理：不同菌的酶系统不同，对底物的代谢产物也不同，用生化的实验方法可将产物检测出来，从而对细菌鉴定。
步骤：一、细菌代谢产物观察1. 糖发酵实验将大肠杆菌、伤寒杆菌分别接种在葡萄糖发酵管内，37℃培养18-24h进行观察。
培养基中指示剂为溴甲酚紫。
如能分解葡萄糖，则产酸，培养基由原来的紫色变为黄色，记录符合为“+”。
如同时还产生气体，则其中倒置的小管中有气泡出现，记录符合为“⊕”。
如能分解乳糖，则产酸，培养基由原来的紫色变为黄色，记录符合为“+”。
如同时还产生气体，则其中倒置的小管中有气泡出现，记录符合为“⊕”。
如培养基未变色，仍为紫色，则表明细菌不能分解乳糖不能分解乳糖。
记录符合“-”。
2.枸橼酸盐利用实验该培养基中提供的唯一碳源是枸橼酸钠。
指示剂是澳麝香草酚兰。
分别接种大肠杆菌和产气杆菌，37℃培养24h进行观察.若斜面有菌落出现，培养基由原来的绿色变为深兰色，表明细菌能利用枸橼酸钠，记录符合“+”，反之“-”。
3.靛基质吲哚产生实验能产生色氨酸酶的细菌，可分解蛋白胨水培养基中的色氨酸，产生靛基质。
将大肠杆菌和产气杆菌分别接种在蛋白胨水培养基中，37℃培养48h后，每管各加吲哚试剂（对二甲基氨基苯甲醛）3-4滴，若出现红色化合物-玫瑰色吲哚，表明靛基质产生阳性“+”；反之为阴性：“-”。
4. 硫化氢产生实验有的细菌能分解含硫氨基酸（胱氨酸、半胱氨酸）产生硫化氢。
将大肠杆菌和变形杆菌分别接种在这样的培养基中，37℃培养18-24h。
若培养基中出现黑色沉淀物即为阳性“+”，表明产生的硫化氢与培养基中的铅盐(或铁盐)结合，生成黑色的硫化铅（或硫化铁）。
二、细菌生长现象1、在液体培养基上生长情况(1)表面生长：液体清晰，细菌生长在液面形成菌膜。
如枯草杆菌。
(2)混浊生长：液体均匀混浊，或有少量沉淀。
如大肠埃希菌。
(3)沉淀生长：液体清晰，细菌生长在管底，形成沉淀。
如链球菌。
2、在固体培养基上的生长情况(1)菌苔：在琼脂斜面培养基上长成菌苔。
(2)菌落：在平板上形成肉眼可见的细菌集团，称为菌落。
观察时要注意菌落的大小、形状、表面形状、边缘是否整齐、透明度、颜色等，可作为鉴别细菌的依据之一。
(3)色素：水溶性色素和脂溶性色素。
3、在半固体培养基上的生长情况有鞭毛的细菌，由于能运动，在半固体培养基内沿穿刺线弥漫性生长，使穿刺线变得模糊不清。
无鞭毛的细菌，因为不能运动，接种生仍没穿刺生长，穿刺线与周围界限清楚。
凝集实验（玻片法）目的：掌握抗原抗体反应的基本原理和特异性，熟悉凝集反应的操作。
材料：伤寒杆菌A－F群O多价血清、志贺氏痢疾多价血清、生理盐水、未知菌、玻片。
原理：颗粒性抗原（凝集原）与相应的抗体（凝集素）直接结合，在一定的条件下形成肉眼可见的凝集现象。
如红细胞ABO血型的测定，测定细菌的细菌凝集实验。
步骤：1.取清洁载物玻片一张，用蜡笔划为三格，并注明号码。
于第一格和第二格内各加约30ul伤寒杆菌A－F 群O多价血清及志贺氏痢疾多价血清，第三格内滴加约30ul生理盐水。
2. 用接种环挑取待检菌种少许，分别均匀地涂抹于1、2、3格内的液体中。
接种环每次使用前后均需经酒精灯火焰烧灼灭菌。
3. 轻轻摇动玻片，数分钟后用肉眼观察结果，出现灰白色凝集颗粒者即为阳性反应；仍为均匀混悬液者为阴性反应。
如结果不够清晰，可将玻片放于低倍显微镜下观察。
沉淀反应（双扩散）目的：掌握抗原抗体反应的基本原理和特异性，熟悉沉淀反应的操作。
材料：干净玻片，玻璃蜡笔、打孔器、微量加样器、正常人血清IgG、羊抗人IgG原理：将抗原与抗体分别加到电解质凝胶板相邻的两孔中，抗原与抗体双方自由扩散，在最适当比例处形成抗原抗体复合物（沉淀线）。
步骤：1.制板：取干净玻片一片，用蜡笔分为三格，用吸管将4－5ml加热溶化的1.5%食盐琼脂充盈中格，制备琼脂板。
2. 打孔：待琼脂板凝固后，用打孔器打孔。
孔间距约为5mm。
3. 封底：将打好孔的琼脂板凝板过火焰三次。
4. 加样：用微量加样器在三孔中加入生理盐水，正常人血清IgG和马抗人IgG。
每孔加入约10μl。
注意：加样时勿使液体溢出和孔内出现气泡。
5. 扩散：将琼脂板放入湿盘内，置37℃温箱中（均保持水平位置），于24小时后观察结果。
药敏实验(纸片法)目的：掌握纸片法药敏实验方法，熟悉微生物培养，了解抗生素对细菌的作用机制。
了解含药纸片的制备材料：大肠埃希菌，普通琼脂培养基，无菌镊子，打孔器(直径6cm)，抗生素纸片。
原理：药物在琼脂上扩散，形成浓度涕度，在一定的浓度下，对细菌抑制或杀死，浓度过低，则不能抑制或杀死。
从而形成一定大小的抑菌圈。
步骤：1.平板上密集划线接种。
2.贴4-5种含抗生素的纸片于平板上。
药片与平板边缘相距至少1.5cm，药片之间相距至少2cm。
3. 37oC培养24h后观察结果。
测量抑菌圈直径大小，判断敏感性。
消毒剂对细菌的影响目的：掌握含药纸片的制备。
熟悉微生物培养，了解消毒剂对细菌的作用机制。
材料：大肠埃希菌，普通琼脂培养基，无菌镊子，打孔器(直径6cm)，滤纸纸片(直径约6 mm)，70%酒精，金星消毒水，紫药水、红药水。
原理：药物在琼脂上扩散，形成浓度涕度，在一定的浓度下，对细菌抑制或杀死，浓度过低，则不能抑制或杀死。
从而形成一定大小的抑菌圈。
步骤：1.平板上密集划线接种细菌。
2. 将无菌干燥的滤纸片放入各种消毒剂中浸湿，在容器边缘沥干，即为含药的滤纸片。
3. 将以上含药滤纸片贴于平板上，每块贴4种。
药片与平板边缘相距至少1.5cm，药片之间相距至少2cm。
4. 37oC培养24h后观察结果。
测量抑菌圈直径大小，判断抑菌效果。
（此材料来自精品课程）。