第八章分子生物学常用技术的原理及其应用及人类基因组学

第八章分子生物学常用技术的原理及其应用及人类基因组学

测试题

一、名词解释

1．分子杂交

2．Southernblotting

3．Northernblotting

4．Westernblotting

5．dotblotting

6．DNA芯片技术

7．PCR

8．功能性克隆

9．转基因技术

二、填空题

1．Southernblotting用于研究、Northernblotting用于研究，Westernblotting用于研究。

2．PCR的基本反应步骤包括、和三步。

3.在PCR反应体系中，除了DNA模板外，还需加入、、和。

4．Sange法测序的基本步骤包括、、和。

5．目前克隆致病相关基因的主要策略有、、。

6．血友病第Ⅷ因子基因的首次克隆成功所采用的克隆策略是，而DMD致病基因的克隆所采用的克隆策略是。

三、选择题

A型题

1.经电泳分离后将RNA转移到硝酸纤维素(NC)膜上的技术是：

A．SouthernblottingB．Northernblotting

C．WesternblottingD．dotblotting E．insituhybridization

2.不经电泳分离直接将样品点在NC膜上的技术是

A．SouthernblottingB．Northernblotting

C．WesternblottingD．Dotblotting

E．insituhybridization

3.经电泳分离后将蛋白质转移到NC膜上的技术是

A．SouthernblottingB.Northernblotting C．WesternblottingD．dotblotting E．insituhybridization

4.经电泳后将DNA转移至NC膜上的技术是A．SouthernblottingB．Northernblotting C．WesternblottingD．Easternblotting E．insituhybridization

5.PCR的特点不包括

A．时间短，只需数小时B．扩增产物量大

C.只需微量模板D．用途非常广泛

E.底物必须标记

6．用于PCR的DNA聚合酶必须

A．耐热B．耐高压C.耐酸D．耐碱E.耐低温7．PCR反应过程中，模板DNA变性所需温度一般是A．95︒CB．85︒CC．75︒CD．65︒CE．55︒C 8．PCR反应过程中，退火温度一般是

A．72︒CB．85︒CC．75︒CD．65︒CE．55︒C 9.PCR反应过程中，引物延伸所需温度一般是A．95︒CB.82︒CC．72︒CD．62︒CE．55︒C

10．PCR反应体系不包括

A.模板DNAB．TaqDNA聚合酶

C.上、下游特异性引物A、BD．ddNTP

E．含Mg2+的缓冲液

11．PCR的循环次数一般为

A．5～10次B．10～15次C．15～20次

D．20～25次E．25～30次

12．PCR反应体系与双脱氧末端终止法测序体系不同的是缺少A．模板B．引物C.DNA聚合酶

D．ddNTPE．缓冲液

13．Sanger法测序不需要

A．Klenow小片段B．引物C.dNTP

D．标记dNTPE．ddNTP

14．Sanger法测序的基本步骤不包括

A．标记模板B．模板一引物杂交C．电泳

D．引物的延长与合成阻断E．放射自显影直读图15．Sanger法测序的四个反应体系中应分别加入不同的A．模板B．引物C标记dNTP

D．DNA聚合酶E.ddNTP

16．人类基因组计划的主要研究内容不包括

A．遗传图分析B．物理图分析C．转录图分析

D.序列图分析E．蛋白质功能分析

17．1996年，英国科学家克隆的Dolly羊所采用的技术是A．转基因技术B．核转移技术C．基因剔除技术

D．肽核酸技术E.反义核酸技术18．Maxam—Gilbert法与Sanger法测序的共同点是均需

A.引物B．Klenow大片段C.ddNTP

D.化学裂解试剂E．电泳后放射自显影读图

19．Sanger法测序所得直读图像中，由终点至始点所读序列为A．待测DNA5'到3'的碱基序列

B．待测DNA3'到5'的碱基序列

C．待测DNA互补链3'到5'的碱基序列

D．待测DNA互补链5'到3'的碱基序列

E．引物5'到3'的碱基序列

20．PCR实验的特异性主要取决于：

A．DNA聚合酶的种类B.反应体系中模板DNA的量C．引物序列的结沟和长度D．四种dNTP的浓度

E.循环周期的次数

21．基因剔除(knockout)的方法主要被用来研究

A．基因的结构B．基因的功能C.基因的表达

D．基因的调控E．基因的突变

22.反义核酸作用主要是

A．封闭DNAB．封闭RNAC．降解DNA

D．降解DNAE．封闭核糖体的功能

23．有关Sanger法测序的叙述，不正确的是

A．只需标记一种dNTP

B.一般应去除DNA聚合酶I的5'到3'外切酶活性

C．与dNTP相比阻断剂应尽可能的多

D．反应时间不必太长

E.应采用超薄高压电泳

B型题

(1—5)

A．NorthernblottingB．dotblottingC．Westernblotting

D.Southernblotting

E.insituhybridizanon

1.．用限制性内切酶酶切后进行电泳分离，再将DNA转移到NC膜上杂交的技术是2．电泳分离后将RNA转移至NC膜上杂交的技术是

3．电泳分离后将蛋白质转移至NC膜上，与标记蛋白杂交的技术是

4．不经电泳直接将样品点在NC膜上杂交的技术是

5.在组织切片上直接与探针杂交的技术是

(6—8)

A．95︒CB．85︒CC．72︒CD．65︒CE．55︒C

6．PCR变性温度一般是

7．PCR退火温度一般是

8．PCR引物延伸温度一般是

(9—12)

A．TaqDNA聚合酶B.反转录酶C．K1cnow大片段D．末端核苷酸转移酶E．Klenow 小片段

9．同聚物加尾连接需要

10．PCR需要

11．Sanger法测序需要

12．由mRNA合成cDNA需要

X型题

1.PCR反应体系中含有

A．特异性引物B．Klenow大片段C.dNTP

D．ddNTPE．35S-α-dATP

2.PCR技术的反应步骤包括：

A．退火B.复性C.变性D．引物延伸E．引物终止

3．DNA链末端合成终止法反应体系中含有