两种聚腺苷二磷酸核糖聚合酶1抑制剂对人肝癌细胞株HepG2增殖和凋亡的影响
摘要 ： 目的 观察 聚腺 苷二磷酸核糖聚合酶 （ Ｐ Ａ Ｒ Ｐ ）一１ 抑 制剂 Ａ Ｇ一 ０ １ ４ ６ ９ ９和 Ａ Ｚ Ｄ ２ ２ ８ １ 对 人肝癌 细胞 株 Ｈ ｅ ｐ Ｇ ２细胞抑 制作
ＤＵ Ｓ ｅ ｎ ｒ ｏ ｎ ｇ， ＭＡ Ｏ Ｘ ｉ ａ ｏ ｒ ｏ ｎ ｇ， Ｘ Ｉ Ａ Ｏ Ｐ ， ｅ ｔ ａ １ ．（ Ｔ ｈ ｅ Ｆ ｉ ｒ ｓ ｔ Ｃ ｌ ｉ ｎ ｉ ｃ ａ ｌ Ｍｅ ｄ ｉ ｃ ａ ｌ Ｃ ｏ ｌ ｌ ｅ ｇ ｅ ， Ｌ ａ ｎ ｚ ｈ ｏ ｕ Ｕ ｎ ｉ ｖ ｅ ｒ ｓ ｉ ｔ ｙ ， Ｌ ａ ｎ ｚ ｈ ｏ ｕ ７ ３ ０ ０ ０ ０ ， Ｃ ｈ ｉ ｎ ａ ） Ａｂ ｓ ｔ ｒ ａ ｃ ｔ ： Ｏ ｂ ｊ ｅ ｃ ｔ ｉ ｖ ｅ Ｔ ｏ ｏ ｂ ｓ ｅ ｒ ｖ ｅ ｔ ｈ ｅ ｉ ｎ ｈ ｉ ｂ ｉ ｔ ｏ ｒ ｙ ａ ｎ ｄ ｐ ｒ ｏ —ａ ｐ ｏ ｐ ｔ ｏ ｔ ｉ ｃ ｅ ｆ ｆ ｅ ｃ ｔ ｓ ｏ ｆ ｔ ｗ ｏ ｐ ｏ ｌ ｙ （ Ａ Ｄ Ｐ— ｒ ｉ ｂ ｏ ｓ ｅ ）ｐ ｏ ｌ ｙ ｍ ｅ ｒ ａ ｓ ｅ（ Ｐ Ａ Ｒ Ｐ一１ ）ｉ ｎ ｈ ｉ ｂ ｉ ｔ ｏ ｒ ｓ ，
Ｈ ｅ ｐ Ｇ ２细胞 凋亡 ， ４ ８ ｈ时凋 亡 率 最 高 达 （ ３ １ ． ０ ０± ２ ． １ ３ ） ％， 明显 高 于 对 照 组 （ ０ ． ９ ０ ０± ０ ． ０ １ ３ ） ％， 二 者 差异 有 统 计 学 意 义 （ Ｐ＜ ０ ． ０ １ ） 。
３ ０ 、 ５ ０ １ ｘ ｍ ｏ ｌ ／ Ｌ的 Ａ Ｇ一 ０ １ ４ ６ ９ ９作用 Ｈ ｅ ｐ Ｇ ２细胞 ４ ８ ｈ后 的 ｃ ａ ｓ ｐ ａ ｓ ｅ ３和 ｃ ａ ｓ ｐ ａ ｓ ｅ ８蛋 白水平相对 于正常对照组显著增 加。结论
度依赖 性， 但Ｈ ｅ ｐ Ｇ ２细胞对两种 Ｐ Ａ Ｒ Ｐ一１ 抑制剂 的敏感性不 同， 用Ｍ Ｔ Ｆ法检测 ４ ８ ｈ Ａ Ｇ一 ０ １ ４ ６ ９ ９和 Ａ Ｚ Ｄ ２ ２ ８ １的 Ｉ Ｃ ５ ｎ 分 别约 为 ２ ０ 、 ４ ０ ０ ｍ ｏ Ｌ ／ Ｌ 。因 Ａ Ｚ Ｄ ２ ２ ８ １ 不敏感 ， 未做 流式细胞术和 Ｗｅ ｓ ｔ ｅ ｎ ｒ Ｂ ｌ ｏ ｔ 法 检测细胞 凋亡。用 １ ０ 、 ３ ０ 、 ５ ０ ｍ ｏ Ｌ ／ Ｌ的 Ａ Ｇ一 ０ １ ４ ６ ９ ９能诱 导
Ｅｆ ｆｅ ｃ ｔ ｓ ｏ ｆ Ｐ Ａ ＲＰ — － １ ｉ ｎ ｈ ｉ ｂ ｉ ｔ ｏ ｒ ｓ ＡＧ — － ０ １ ４ ６ ９ ９ ａ ｎｄ ＡＺＤ２ ２ ８１ ｏ ｎ ｐ ｒ ｏ ｌ ｉ ｆ ｅ ｒ ａ ｔ ｉ ｏ ｎ ａ ｎｄ ａ ｐ ｏ ｐｔ ｏ ｓ ｉ ｓ ｏ ｆ ｈｕ ｍａ ｎ ｈｅ ｐ ａ ｔ ｏ ｍａ ｃ ｅ ｌ ｌ ｌ ｉ ｎ ｅ Ｈｅ ｐＧ２
杜森荣 ． ．． ． ， 等．两种聚腺苷二磷酸核糖聚合酶 ． ． １ 抑制剂对人肝癌细胞 株 Ｈ ｅ ｐ Ｇ ２增殖和凋亡的影响
ｎ ｎ
两 种 聚 腺 苷二 磷 酸 核 糖 聚 合 酶 １ 抑 制 剂 对 人 肝 癌 细 胞 株 Ｈ ｅ ｐ Ｇ ２增 殖 和 凋 亡 的 影 响
杜森 荣 ，毛 小荣 ， 肖 萍 ，陈 红
Ｈｅ ｐ Ｇ２ ｃ ｅ ｌ ｌ ａ ｐ ｏ ｐ ｔ ｏ ｓ ｉ ｓ ，ａ ｎ ｄ ｔ ｏ ｐ ｒ ｏ ｖ ｉ ｄ ｅ ａ ｎ ｅ ｗ ｔ ｈ ｅ ｒ ａ ｐ ｅ ｕ ｔ ｉ ｃ ｔ ａ ｒ ｇ ｅ ｔ ｆ ｏ ｒ ｈ ｅ ｐ ａ ｔ ｏ ｍａ ．Ｍｅ ｔ ｈ ｏ ｄ ｓ Ｔ ｈ ｅ ｅ ｆ ｆ ｅ ｃ ｔ ｓ ｏ ｆ ｄ ｉ ｆ ｆ ｅ ｒ ｅ ｎ ｔ ｃ ｏ ｎ ｃ ｅ ｎ ｔ ｒ ａ ｔ ｉ ｏ ｎ ｓ ｏ ｆ ＡＧ 一 ０ １ ４ ６ ９ ９ ａ ｎ ｄ Ａ Ｚ Ｄ２ ２ ８ １ ｏ ｎ Ｈｅ ｐ Ｇ ２ ｃ ｅ ｌ ｌ ｐ ｒ ｏ ｌ ｉ ｆ ｅ ｒ ａ ｔ ｉ ｏ ｎ ｗ ｅ ｒ ｅ ｄ ｅ ｔ ｅ ｒ ｍｉ ｎ ｅ ｄ ｂ ｙ ＭＴＦ ａ ｓ ｓ ａ ｙ ．Ｔ ｈ ｅ ｃ ｅ ｌ ｌ ａ ｐ ｏ ｐ ｔ ｏ ｓ ｉ ｓ ｒ ａ ｔ ｅ ｗ ａ ｓ ｍｅ ａ ｓ ｕ ｒ ｅ ｄ ｂ ｙ ｌ ｆ ｏ ｗ ｃ ｙ ｔ ｏ ｍｅ ｔ ｒ ｙ ．
用和凋亡 ， 初 步探讨 Ｐ Ａ Ｒ Ｐ一１抑制剂诱 导 Ｈ ｅ ｐ Ｇ ２细胞凋亡的机制 ， 为肝癌提 供一种新 的治疗靶 点。方法 Ｍ１ Ｔ ｒ 实验 观察不 同浓
度的Ａ Ｇ一 ０ １ ４ ６ ９ ９和 Ａ Ｚ Ｄ ２ ２ ８ １对 Ｈ ｅ ｐ Ｇ ２细 胞 增 殖 的影 响 ， 用流 式 细 胞 术 检 测 Ｈ ｅ ｐ Ｇ ２细 胞 凋 亡 率 ； Ｗｅ ｓ ｔ ｅ ｒ ｎ Ｂ ｌ ｏ ｔ 法 检测 ｃ ａ ｓ ｅ ｐ ａ ｓ ｅ ３和 ｃ ａ ｓ ｅ ｐ ａ ｓ ｅ ８蛋 白表达 水平 。组 问 比较 采 用 ｔ 检 验 。 结果 Ａ Ｇ ０ １ ４ ６ ９ ９和 Ａ Ｚ Ｄ ２ ２ ８ １ 均有抑制 Ｈ ｅ ｐ Ｇ ２细 胞 增 殖 的作 用 ， 且 具 有 时 间 和 浓
关键词 ： 肝肿瘤 ； 聚Ａ Ｄ Ｐ核糖聚合酶类 ； 酶抑制剂 ； Ｈ ｅ ｐ Ｇ ２细胞 ； 细胞增殖 ； 细胞凋亡
中图分类号 ： Ｒ ７ ３ ５ ． ７ 文献标志码 ： Ａ 文 章编 号 ： １ ０ ０ １— ５ ２ ５ ６ （ ２ ０ １ ５ ） ０ ６— ０ ９ 制 剂 Ａ Ｇ一 ０ １ ４ ６ ９ ９和 Ａ Ｚ Ｄ ２ ２ ８ １ 均 能抑制 Ｈ ｅ ｐ Ｇ ２细 胞 增 殖 ， 但 敏感 性不 同 ， Ａ Ｇ一 ０ １ ４ ６ ９ ９可 诱 导 Ｈ ｅ ｐ Ｇ ２细 胞 凋 亡 ， 通 过 上 调
ｃ ａ ｓ ｐ ａ ｓ ｅ ３和 ｃ ａ ｓ ｐ ａ ｓ ｅ ８蛋 白水 平 来 诱 导 细 胞 凋 亡 。
ＡＧ 一０１ ４６ ９９ ａ ｎ ｄ ＡＺＤ２２ ８１，ｏ ｎ ｈ ｕｍａ ｎ ｈ ｅ ｐ ａ ｔ ｏ ｍａ Ｈｅ ｐ Ｇ２ ｃ ｅ ｌ ｌ ｓ ａ ｎ ｄ ｐ ｒ ｅ ｌ ｉ ｍｉ ｎａ ｒ ｉ ｌ ｙ ｅ ｘ ｐ ｌ ｏ ｒ ｅ ｔ ｈ ｅ ｍｅ ｃ ｈ ａ ｎｉ ｓ ｍ ｂ ｙ ｗｈ ｉ ｃ ｈ ＡＧ 一０１ ４６ ９ ９ ｉ ｎｄ ｕｃ ｅ ｓ
香叶木素诱导人肝癌HepG2细胞凋亡及周期阻滞的机制研究
香叶木素诱导人肝癌HepG2细胞凋亡及周期阻滞的机制研究杨阳;林满洲;黄艺文;陈明【摘要】Objective To study the effect of Diosmetin on cell proliferation, cell apoptosis and cell cycle ar-rest in human hepatocellular carcinoma HepG2 cells, and dissect the underlying mechanism. Methods MTT assay was performed to detect the viability of HepG2 cells under different levels of Diosmetin. The cell apoptosis rate and cell cy-cle arrest were analyzed by flow cytometry (FCM). Western blot was applied to measure the protein levels of P53, Bcl-2, Bax, Cleaved-caspase3, Cleaved-caspase8, Cleaved-PARP, Bak, cdc2, cyclinB1, P21. Results Diosmetin treat-ment on HepG2 cells significantly inhibited cell proliferation and induced cell apoptosis (P<0.05). FCM results showed that Diosmetin treatment significantly promoted cell cycle arrest in G2/M phase in HepG2 cells (P<0.05), with the pro-portion of cells in G0/G1 phase significantly reduced. Besides, Diosmetin significantly downregulates Bcl-2, cdc2, cy-clinB1, and up-regulated Bax, Cleaved-caspase3, Cleaved-caspase8, Cleaved-PARP, Bak, P53, P21. Conclusion Dios-metin inhibits HepG2 cell proliferation and induces cell apoptosis by activation of p53/Bcl-2 pathway. Meanwhile, Dios-metin treatment induces G2/M cell cycle arrest in HepG2 cell by down-regulation of cell cycle related protein cdc2, cy-clinB1 and up-regulation of P53, P21.%目的研究香叶木素对人肝癌HepG2细胞的增殖、凋亡及周期阻滞的影响并揭示其分子机制.方法 MTT方法检测不同浓度香叶木素对肝癌HepG2的细胞活力的影响;流式细胞术检测不同浓度香叶木素处理对HepG2细胞周期阻滞及细胞凋亡的作用;Western blot检测香叶木素处理对细胞p53、Bcl-2、Bax、Cleaved-cas-pase3、Cleaved-caspase8、Cleaved-PARP、Bak、cdc2、cyclinB1、p21等细胞周期调节或细胞凋亡相关蛋白表达的调节.结果香叶木素能显著抑制人肝癌HepG2细胞的增殖并且诱导细胞凋亡(P<0.05);流式细胞术对细胞周期检测示:香叶木素处理HepG2细胞,使G0/G1期细胞比例显著降低,而G2/M期细胞比例显著升高(P<0.05).香叶木素可下调HepG2细胞中抗凋亡蛋白Bcl-2、cdc2、cyclinB1的蛋白表达,上调p53、p21、Bax、Bak,Cleaved-caspase3、Cleaved-caspase8、Cleaved-PARP等促凋亡蛋白.结论香叶木素在体外实验能通过激活p53/Bcl-2细胞凋亡通路抑制人肝癌HepG2细胞的增殖及促进细胞凋亡,同时通过上调p53、p21下调cdc2、cyclinB1诱导细胞G2/M周期阻滞.【期刊名称】《海南医学》【年(卷),期】2016(027)003【总页数】4页(P354-357)【关键词】香叶木素;细胞凋亡;细胞周期阻滞;肝癌【作者】杨阳;林满洲;黄艺文;陈明【作者单位】广东医学院附属医院肝胆外科,广东湛江 524001;广东医学院附属医院肝胆外科,广东湛江 524001;广东医学院附属医院肝胆外科,广东湛江 524001;广东医学院附属医院肝胆外科,广东湛江 524001【正文语种】中文【中图分类】R735.7肝细胞癌是常见的恶性肿瘤之一，我国肝癌患者多有肝炎肝硬化背景，手术切除率低，为延长肝癌患者生存期，化学药物治疗仍是一个重要措施，临床上化疗药物主要是通过诱导细胞凋亡来消除肿瘤细胞，其疗效过程中如何与抑制细胞增殖，诱导细胞凋亡的水平有关。
抑制miR-21-5p表达通过靶向FOXP2调控肺癌细胞增殖和凋亡
殖情况 ２５％胰蛋白酶消化肺癌细胞，调整细胞浓 度为 ２×１０４个 ／ｍｌ，接种于 ６孔板中，分别转染 ｍｉＲ ２１５ｐｍｉｍｉｃ、ａｎｔｉｍｉＲ２１５ｐ、ｐｃＤＮＡＦＯＸＰ２及 其 阴 性序 列 或 共 转 染 ａｎｔｉｍｉＲ２１５ｐ、ｓｉＦＯＸＰ２；转 染 ４８ｈ后弃去旧培养基，加入 ＭＴＴ２０μｌ混匀，培养 ４ｈ；然 后 每 孔 加 ＤＭＳＯ 溶 液 １００μｌ混 匀，培 养 １５ｍｉｎ；采用酶标仪检测吸光值，每组 ３个复孔。 １２７ 流式细胞仪检测细胞凋亡 转染后 Ａ５４９ 细胞培 养 ４８ ｈ后，弃 去 培 养 基，磷 酸 盐 缓 冲 液 （ＰＢＳ）清洗 ２次；加入 ５００μｌ１×结合缓冲液，５μｌ ＡｎｎｅｘｉｎＶＦＩＴＣ，避光孵育 １５ｍｉｎ；加入 ２５μｌＰＩ， 孵育 ５ｍｉｎ，流式细胞仪检测细胞凋亡情况。 １３ 统计学方法 采用 ＳＰＳＳ２２０软件进行 ｔ检 验、单因素方差分析。
崔艳红等 抑制 ｍｉＲ２１５ｐ表达通过靶向 ＦＯＸＰ２调控肺癌细胞增殖和凋亡 第 １４期
·３０７３·
２ｍｉｎ，９５℃ １５ｓ，６０℃ ２０ｓ，７２℃ ２０ｓ，共 ４０个循环； 反应体系为 ２０μｌ：２×ＳＹＢＲＭｉｘ１０μｌ，上下游引物各 ０５μｌ，１０×ｃＤＮＡ模板 １μｌ，Ｈ２Ｏ８μｌ。引物序列： ｍｉＲ２１５ｐ：正义链 ５′ＧＴＧＣＡＧＧＧＴＣＣＧＡＧＧＴ３′，反 义 链 ５′ＧＣＣＧＣＴＡＧＣＴＴＡＴＣＡＧＡＣＴＧＡＴＧＴ３′；Ｕ６： 正义链 ５′ＣＴＣＧＴＴＣＡＣＧＡＡＴＴＴＧＣＣＴ３′，反义链 ５′ ＴＣＡＣＧＡＡＴＴＴＧＣＧＴ３′；ＦＯＸＰ２：正义链 ５′ＧＧＴＣＡＴ ＧＡＣＣＣＣＴＧＡＴＴＡＧＧ３′， 反 义 链 ５′ＡＧＴＣ ＣＴＣＴＡＧＡＧＧＣＴＴＣＡＴ３′；βａｃｔｉｎ：正 义 链 ５′ＣＡＧ ＣＧＡＣＡＣ ＣＣＡ ＣＴＣ ＣＴＣ３′，反 义 链 ５′ＴＧＡ ＧＧＴ ＣＣＡＣＣＡＣＣＣＴＧＴ３′。分别以 Ｕ６、βａｃｔｉｎ为 ｍｉＲ ２１５ｐ、ＦＯＸＰ２的内参基因计算相对表达量。 １２３ Ｗｅｓｔｅｒｎ印迹检测蛋白表达情况 肺癌细胞 株以 ５×１０４ 个 ／ｍｌ接种于 ６孔板中贴壁培养 ２４ｈ， 收集细胞，ＲＩＰＡ裂 解 液 冰 上 裂 解 ５ｍｉｎ提 取 总 蛋 白，测定总蛋白浓度，蛋白与样品缓冲液混合后煮沸 ５ｍｉｎ变性蛋 白；１０％ 十 二 烷 基 硫 酸 钠聚 丙 烯 酰 胺 凝胶电 泳 （ＳＤＳＰＡＧＥ）跑 胶，转 膜 至 聚 偏 氟 乙 烯 （ＰＶＤＦ）膜，５％脱脂奶封闭 １５ｈ；一抗 ４℃孵育过 夜，ＴＢＳＴ清洗 ３次 ／５ｍｉｎ；稀释二抗室温孵育 １ｈ， ＴＢＳＴ清洗 ３次／５ｍｉｎ；ＥＣＬ显影液显影，ＧＩＳ凝胶成像 仪采集图片，以 ＧＡＰＤＨ为内参计算蛋白表达水平。 １２４ 双荧光素酶实验检测 ｍｉＲ２１５ｐ对 ＦＯＸＰ２ 的影响 扩增 ＦＯＸＰ２基因的转录本 ３′ＵＴＲ，构建野 生型 ＦＯＸＰ２３′ＵＴＲ（ＷＴｐＧＬ３ＦＯＸＰ２３′ＵＴＲ）质粒； 采用定点突变技术，将 ３′ＵＴＲ上的与 ｍｉＲＮＡ结合 的核心区域突变构建突变型 ＦＯＸＰ２３′ＵＴＲ（ＭＵＴ ｐＧＬ３ＦＯＸＰ２３′ＵＴＲ）质粒；将两种质粒分别转染至 肺癌细胞，转染 ４８ｈ后检测荧光强度。 １２５ 细胞转染 转染前 ２４ｈ将细胞接种于 ２４ 孔板中，使细胞贴壁密度约 ８０％。设计并合成 ｍｉＲ ２１５ｐｍｉｍｉｃ、ａｎｔｉｍｉＲ２１５ｐ及 其 对 应 阴 性 序 列，使 用 ｌｉｐ２０００将合成序列分别转染肺癌细胞，空白对照 （ＮＣ）组不做任何处理，无血清 ＤＭＥＭ 培养 ６ｈ，换 完全培养基培养 １８ｈ后进行功能试验，并继续培养 筛选稳定低表达 ｍｉＲ２１５ｐ的细胞株。
Cdk1在HepG2细胞的表达及活性对肝癌细胞凋亡的影响
Cdk1在HepG2细胞的表达及活性对肝癌细胞凋亡的影响李瑞;郑亚莉;周学兵;王炜【摘要】目的观察Cdk1蛋白表达及其活性对肝癌细胞凋亡的影响.方法克隆Cdk1基因质粒和Cdk1siRNA,并将其转染到肝癌HepG2细胞中,另外应用roscovintine(Cdks的抑制剂)刺激细胞,然后给予紫外线(UV)照射.用Western Blot检测转染的Cdk1蛋白的表达,用核素标记测定其活性;用HO 33342(Hoechst 33342)的免疫荧光染色细胞核判断细胞凋亡的情况.分析Cdk1蛋白表达及活性对肝癌细胞凋亡的影响.结果 Cdk1可以在HepG2良好地表达;Cdk1siRNA可以有效地沉默Cdk1的表达;roscovintine可抑制Cdk1的活性;细胞凋亡率在roscovintine刺激细胞时最高比较Cdk1转染细胞组和Cdk1siRNA转染细胞组(P ＜0.01),在Cdk1转染细胞高于Cdk1siRNA转染细胞组(P＜0.01)和空载体转染细胞组(P＜0.05),在Cdk1siRNA转染细胞最低.结论过度表达Cdk1可以增加肝癌细胞死亡,抑制肝癌的增殖.抑制Cdk1活性可更有效增加肝癌细胞死亡,抑制肝癌的增殖,可望成为研究和探讨肝癌靶点之一.【期刊名称】《宁夏医科大学学报》【年(卷),期】2011(033)006【总页数】5页(P521-524,封4)【关键词】Cdk1;siRNA;细胞凋亡;激酶活性【作者】李瑞;郑亚莉;周学兵;王炜【作者单位】宁夏医科大学,银川750004;宁夏回族自治区第一人民医院,银川750021;宁夏医科大学,银川750004;宁夏回族自治区第一人民医院,银川750021【正文语种】中文【中图分类】R735.7细胞的异常生长和凋亡的减低是导致肿瘤发生发展的重要原因。
肿瘤细胞的失控性快速生长是由于细胞周期异常和细胞凋亡下调引起的。
细胞周期素依赖性蛋白激酶(Cdks)在细胞分裂过程中发挥着重要的作用。
PARP抑制剂抗肿瘤机制和耐药机制研究
PARP抑制剂抗肿瘤机制和耐药机制研究PARP抑制剂是一类用于治疗特定类型肿瘤的药物。
它们通过抑制多聚腺苷二磷酸核糖酶（PARP）的活性，干扰了细胞对DNA的修复机制，从而导致肿瘤细胞死亡。
PARP抑制剂的抗肿瘤机制和耐药机制是目前研究的热点课题之一PARP酶是一种通过多个DNA修复途径参与DNA单链断裂的修复和维护DNA完整性的酶，在细胞DNA损伤修复过程中具有重要作用。
PARP抑制剂通过抑制PARP酶的活性，阻断了DNA修复途径，引起PARP-1和PARP-2激酶的高度激活，导致细胞死亡。
1.合成致死（synthetic lethality）：PARP抑制剂在特定情况下能够选择性地杀死BRCA1/2缺失肿瘤细胞。
BRCA1/2蛋白负责细胞DNA双链断裂的修复，而BRCA1/2基因突变会导致DNA双链断裂修复的损害。
当PARP酶被抑制时，细胞无法修复DNA双链断裂，进而导致细胞凋亡。
2.免疫调节作用：PARP抑制剂通过增强肿瘤细胞的抗原表达和促进肿瘤细胞的免疫细胞浸润，增强免疫细胞对肿瘤的杀伤作用。
3.转录调节：PARP抑制剂能够通过调节转录活性间接影响DNA修复和细胞周期调控基因的表达，进而影响肿瘤细胞的增殖和凋亡。
尽管PARP抑制剂在肿瘤治疗方面取得了显著的进展，但耐药问题仍然存在。
耐药机制主要包括以下几个方面：1.重新激活DNA修复途径：肿瘤细胞可以通过增加细胞内其他DNA修复酶的表达和提高DNA修复过程中的效率来逃避PARP抑制剂的作用。
2.BRCA1/2突变补偿机制：细胞可以通过BRCA1/2突变的互补修复机制来避免细胞死亡。
例如，一些肿瘤细胞可能会突变其他DNA修复酶来弥补BRCA1/2缺失的功能。
3.PARP的点突变：肿瘤细胞可以通过点突变改变PARP酶的构象，降低PARP抑制剂对其的结合亲和力，从而减少PARP抑制剂的效果。
4.细胞死亡抑制途径：肿瘤细胞可能通过增加抗凋亡蛋白的表达或激活其他存活途径来抵抗PARP抑制剂诱导的细胞凋亡。
中药抗肝癌作用机制的研究进展
９１０ ｐｍｏｌ／Ｌ苦参碱和２２７ Ｉｍａｏｌ／Ｌ盐酸川芎嗪），结
传统中药参与肝癌的综合治疗对改善患者症状
性肿瘤细胞，而是诱导其分化为正常或接近正常的
细胞。郭霞等口１以人肝癌ＢＥＬ．７４０２细胞为研究对
象，探讨黄芩苷对细胞分化的影响，结果显示，经 黄芩苷作用后该细胞趋于成熟分化。与对照组相比，
涉及凋亡基因的大量表达，核转录因子（ＮＦ）一心表
达下调，端粒酶活性抑制及Ｃａｓｐａｓｅ途径的激活。 １．４抑制肿瘤血管生成 肿瘤新生血管生成与肿瘤的生长及其转移密切 相关。肝癌是典型的富血管性恶性肿瘤，阻断肿瘤 血供有望成为肝癌治疗的突破１：３［１４】。樊讯等ｎ列观 察麝黄消瘤方对肝癌Ｈ２：模型小鼠肝癌细胞侵袭和
黄芩苷组的丫＿谷氨酰转移酶（）＇－ＧＴ）比活力、胎盘
型碱性磷酸酶（ＰＡＬＰ）活性及甲胎蛋白（ＡＦＰ）分泌 量明显较低，碱性磷酸酶（ＡＬＰ）比活力、白蛋白分 泌及细胞内环磷腺苷（ｃＡＭＰ）含量明显较高。同时， 研究还显示，随着黄芩苷浓度的增加和作用时间的 延长，ＢＥＬ．７４０２细胞Ｇ。／Ｇ。期比例逐步增高，Ｓ期 细胞减少。这些生化指标的变化均提示黄芩苷能诱 导肝癌细胞分化，且与细胞周期调节密切相关。王
肝癌细胞的凋亡，且效果明显，如吡霜（三氧化二
砷，Ａｓ２０，）能够显著抑制人肝癌细胞株ＨｅｐＧ２的 增生，并诱导其凋亡。Ａｓ：Ｏ，诱导的肝癌细胞凋亡
通过Ｃａｓｐａｓｅ一３途径实现，伴随着Ｃａｓｐａｓｅ．３和聚腺
间和剂量依赖性。郭昱等Ｈ１应用ＭＴＴ比色法观察
菜豆植物凝集素对肿瘤细胞增殖的抑制作用
菜豆植物凝集素对肿瘤细胞增殖的抑制作用作者：金雯燕韦思雨李佳楠来源：《科教导刊》2016年第26期摘要从已测定凝集素含量的56个菜豆品种中筛选具有代表性的菜豆品种，分离纯化菜豆植物凝集素，MTS法分析其对人乳腺癌细胞（MCF7、231）及肝癌细胞（HEPG2）生长的影响。
结果显示菜豆植物凝集素能抑制这三种肿瘤细胞的增殖，且抑制作用呈明显剂量-效应关系。
说明菜豆植物凝集素具有一定的体外抗肿瘤活性，可进一步筛选高凝集素含量菜豆品种作为分离纯化凝集素的原料，为抗肿瘤药物的研究奠定实验基础。
关键词菜豆植物凝集素 MTS分析抗肿瘤中图分类号：Q946 文献标识码：A DOI：10.16400/ki.kjdkz.2016.09.079Analysis on Inhibition of Tumor Cell ProliferationInduced by Kidney Bean LectinJIN Wenyan，WEI Siyu， LI JiananDepartment of Biotechnology， School of Life Science， Jianghan University， Wuhan，Hubei 430056）Abstract The kidney bean lectin was purified by methods of homogenization， centrifugation，ultrafiltration and ammonium sulfate precipitation. Two human breast cancer cell line （MCF7，231） and one liver cancer cell line （HEPG2） were cultured in vitro and treated with kidney bean lectin. MTS assay was used for detecting the inhibition of tumor cell proliferation.The results showed that there was a significant difference in the inhibition ratio of proliferation after treated by kidney bean lectin. The result also indicated that the inhibition was dose dependent. This study will provide a theoretical basis and technical methods for the genetic improvement of kidney bean quality and utilization.Key words kidney bean lectin； MTS assay； anti-tumor凝集素是一种可从植物、无脊椎动物和高等动物中提取的糖蛋白或结合糖的蛋白，因其能凝集红血球（含血型物质），故称其为凝集素。
顺铂作用于人肝癌细胞系HepG2后肿瘤干细胞标志物增加
顺铂作用于人肝癌细胞系HepG2后肿瘤干细胞标志物增加赵小鸽;田美丽;杨阳;童冬冬;陈伟【摘要】目的探讨顺铂(cisplatin)作用于人肝癌细胞系HepG2后细胞增殖能力和周期的变化,及残余细胞中CD133、ABCG2及ICAM-1表达量的变化.方法以人肝癌细胞系HepG2为研究对象,分别采用MTT比色法和PI染色法检测不同浓度cisplatin作用后细胞增殖能力及细胞周期分布的变化;免疫荧光法检测cisplatin对肿瘤干细胞标志物表达量的影响.结果不同浓度cisplatin作用后均可明显抑制HepG2细胞的增殖.进一步研究发现,分别使用4 mg/L和2mg/L的cisplatin作用48 h后对HepG2细胞周期Go/G1期及S期有显著影响,cisplatin处理使残留HepG2细胞中CD133、ABCG2及ICAM-I的表达量明显升高.结论 HepG2细胞中存在的小部分肝癌干细胞能够逃脱cisplatin的杀伤作用,此种逃避过程的发生可能是临床上肝癌经治疗后复发的重要原因.【期刊名称】《西安交通大学学报（医学版）》【年(卷),期】2015(036)001【总页数】4页(P89-92)【关键词】顺铂;肝癌;肿瘤干细胞;细胞增殖;细胞周期【作者】赵小鸽;田美丽;杨阳;童冬冬;陈伟【作者单位】西安交通大学医学院环境与疾病相关基因教育部重点实验室、生物医学基础研究中心,陕西西安710061;西安交通大学医学院第一附属医院肿瘤放疗科,陕西西安710061;西安交通大学医学院遗传学与分子生物学系,陕西西安710061;西安交通大学医学院遗传学与分子生物学系,陕西西安710061;中国人民解放军南京军区南京总医院,江苏南京210002【正文语种】中文【中图分类】R735.7肝细胞癌是我国常见的恶性肿瘤，临床治疗效果不甚显著，复发率和死亡率高。
近年来，研究人员提出了与肿瘤增殖、转移和复发密切相关的肿瘤干细胞(cancer stem cells, CSCs)学说[1]。
聚腺苷二磷酸核糖聚合酶作用
聚腺苷二磷酸核糖聚合酶作用-概述说明以及解释1.引言1.1 概述概述:聚腺苷二磷酸核糖聚合酶，即RNA聚合酶，是一种重要的酶类蛋白质，在细胞内具有多种重要的生物学功能。
它参与了RNA的合成过程，是转录的关键酶。
在细胞内，RNA聚合酶不仅参与了基因的转录和表达调控，还影响了细胞的生长、发育和分化。
因此，深入了解RNA聚合酶的作用机制与作用范围，对于揭示细胞功能的调控机制、疾病的发生发展以及药物的研发具有重要意义。
本文将对聚腺苷二磷酸核糖聚合酶作用进行系统的介绍和分析，以期能够对该领域的研究和应用提供一定的参考和启发。
1.2 文章结构文章的结构主要包括引言、正文和结论三个部分。
在引言部分，我们将简要介绍聚腺苷二磷酸核糖聚合酶的作用，以及本文的目的和文章结构。
正文部分将详细阐述聚腺苷二磷酸核糖聚合酶的作用、作用机制和作用范围。
结论部分将对前文进行总结，探讨聚腺苷二磷酸核糖聚合酶作用的应用前景，并展望其可能的发展方向。
1.3 目的本文旨在深入探讨聚腺苷二磷酸核糖聚合酶的作用机制及其作用范围，以期加深对该酶的理解。
同时，通过对其作用机制的分析，可以为相关领域的科研工作者提供理论依据，为该酶在医学和生物技术领域的应用提供更多可能性。
希望通过本文的研究，能够为聚腺苷二磷酸核糖聚合酶的进一步研究和应用提供有益的参考和启发。
2.正文2.1 聚腺苷二磷酸核糖聚合酶的作用聚腺苷二磷酸核糖聚合酶（polyadenosine diphosphate ribose polymerase, PARP）是一种重要的酶，其主要作用是在DNA修复和基因转录调控过程中起着关键作用。
PARP作用于细胞核和细胞质中，参与了一系列细胞生命活动，包括DNA修复、基因表达、转录调控、凋亡、细胞增殖和细胞分化等过程。
具体来说，PARP在DNA修复中的作用是通过修复DNA单链断裂，防止其演变为双链断裂，并保护DNA免受损伤。
PARP还能调控基因的转录，从而影响细胞的功能和特性。
NU7026对人肝癌细胞HepG2生物学行为的影响
[收稿日期]㊀2020-11-27[修回日期]㊀2021-02-11[基金项目]㊀湖南省教育厅科学研究重点项目(19A429)[作者简介]㊀李娟,硕士研究生,研究方向为放射医学,E-mail 为lijuan9508@㊂通信作者黄波,博士,硕士研究生导师,副教授,研究方向为放射医学,E-mail 为huangbo0930@㊂㊃基础医学㊃DOI :10.15972/ki.43-1509/r.2021.03.011NU7026对人肝癌细胞HepG2生物学行为的影响李娟,颜宇龙,万丹婷,李蕊,周美艳,周洁,黄波(南华大学公共卫生学院,湖南省衡阳市421001)[关键词]㊀NU7026;㊀肝癌;㊀HepG2细胞;㊀增殖;㊀迁移[摘㊀要]㊀目的㊀探讨NU7026对HepG2细胞的影响,为治疗肝癌提供理论基础㊂方法㊀用NU7026作用HepG2细胞,将实验分为空白组㊁对照组和NU7026组㊂CCK8实验检测NU7026对肝癌HepG2细胞存活率的影响㊂生长曲线实验和克隆实验检测HepG2细胞增殖能力,划痕实验检测HepG2细胞迁移能力,流式细胞术检测HepG2细胞凋亡和周期㊂结果㊀与0μmol /L 组和DMSO 组比较,15μmol /L 和20μmol /L NU7026作用于HepG2细胞,细胞存活率明显下降(P <0.05);与DMSO 组相比,10μmol /L NU7026作用于HepG2细胞24㊁48㊁72h 后,细胞存活率下降(P <0.05);10μmol /L NU7026作用HepG2细胞,细胞增殖能力和迁移能力下降(P <0.05),细胞凋亡率增加(P <0.05),细胞周期无明显改变㊂结论㊀NU7026能抑制HepG2细胞增殖能力和迁移能力可能与促进细胞凋亡有关㊂[中图分类号]㊀R735.7[文献标识码]㊀AEffect of NU 7026on the biological behavior of human hepatocarcinoma cell HepG 2LI Juan,YAN Yulong,WAN Danting,LI Rui,ZHOU Meiyan,ZHOU Jie,HUANG Bo (School of Public Health ,University of South China ,Hengyang ,Hunan 421001,China )[KEY WORDS ]㊀NU7026;㊀liver cancer;㊀HepG2cell;㊀proliferation;㊀migration [ABSTRACT ]㊀㊀Aim ㊀To explore the effect of NU7026on HepG2cells,and provide a theoretical basis for the treat-ment of liver cancer.㊀㊀Methods ㊀HepG2cells were treated with NU7026,and the experiment was divided into the blank group,the control group and the NU7026group.㊀The CCK8assay was used to detect the effect of NU7026on the survival rate of HepG2cells.㊀The growth curve assay and clone formation assay were used to detect the proliferation ability of HepG2cells,and the scratch assay was used to detect the migration ability of HepG2cells.㊀Finally the cellular apopto-sis and cell cycle were tested by flow cytometry.㊀㊀Results ㊀Compared with the 0μmol /L group and the DMSO group,after 15μmol /L and 20μmol /L NU7026treated on HepG2cells,the cell survival rate was significantly decreased (P <0.05);Compared with the DMSO group,after treating HepG2cells with 10μmol /L NU7026for 24,48,and 72hours,the cell survival rate was significantly decreased (P <0.05);After 10μmol /L NU7026treated HepG2cells,the cell prolif-eration and migration ability decreased (P <0.05),the apoptosis rate was significantly increased (P <0.05),but the cell cycle did not change significantly.㊀㊀Conclusion ㊀NU7026can inhibit the proliferation and migration of HepG2cells,which may be related to the promotion of cell apoptosis.㊀㊀肝癌是世界上最常见的恶性肿瘤之一,2015年中国肝癌发病人数为37.0万人,发病率为26.92/10万,死亡人数32.6万,死亡率23.72/10万[1]㊂原发性肝癌发病隐匿,病程短,发展迅速,当前主要治疗手段有手术切除㊁放射治疗㊁药物治疗㊁肝移植等㊂但肝癌易复发㊁易转移,预后差,且对放化疗具有抵抗性,寻求治疗肝癌的药物具有重要意义㊂原发性肝癌中最常见的肝癌组织类型是肝细胞癌[2]㊂本文探讨了NU7026抑制DNA-PKcs 对肝癌细胞的增殖㊁迁移能力的影响,为治疗肝癌提供理论依据㊂1㊀材料和方法1.1㊀材料㊀㊀肝癌细胞(HepG2)由军事科学医学院周平坤研究员惠赠㊂HepG2细胞在含10%胎牛血清(杭州四季青公司)的DMEM培养基(Gibco),37ħ㊁5%CO2培养箱中培养㊂NU7026(LY293646,C17H15NO3)购于MCE公司,纯度为99.95%㊂细胞凋亡试剂盒㊁细胞周期试剂盒购于南京凯基公司㊂1.2㊀CCK8实验取处于指数生长期的HepG2细胞,用含10%胎牛血清的培养液配成单个细胞悬液接种于96孔板中,加入适量的细胞悬液(约7000~8000个/孔),待细胞贴壁后,分别用5㊁10㊁15㊁20μmol/L NU7026进行处理,设3个复孔,继续培养24㊁48㊁72h,每孔加入10μL CCK8溶液,孵育1h,用酶联免疫检测仪测定450nm波长处的光密度值(OD),计算细胞存活率㊂细胞存活率(%)=(实验组OD值-空白孔OD值)/(空白组OD值-空白孔OD值)ˑ100%㊂1.3㊀生长曲线实验按2ˑ104个/孔细胞接种于6孔细胞培养板, 10μmol/L NU7026处理细胞每组设3个复孔,每隔24h计数1次,连续计数3天,以时间为横坐标,细胞数为纵坐标绘制生长曲线图㊂1.4㊀克隆实验将细胞接种于6cm细胞培养皿,10μmol/L NU7026处理细胞,10天后弃掉培养基,PBS洗2遍,加入固定液3mL,固定30min;再加入3mL Gi-emsa染色30min,最后用流水缓慢冲洗,晾干㊂计数含50个细胞以上的克隆数,克隆形成率(%)=克隆数/[实验组接种细胞数ˑ(对照组克隆数/对照组接种细胞数)]ˑ100%㊂1.5㊀划痕实验将细胞接种在6孔细胞培养板中,细胞贴壁后用200μL无菌的枪头尖端在每孔相同位置做线性划痕,再用PBS轻轻冲洗2~3遍,10μmol/L NU7026处理细胞,分别在0㊁24㊁48㊁72h后于显微镜下拍照观察划痕,采用Image J软件观察计算细胞划痕面积,面积愈合率(%)=(0h划痕面积-培养后划痕面积)/0h划痕面积ˑ100%㊂1.6㊀细胞凋亡与细胞周期试验将细胞接种于6孔细胞培养板,10μmol/L NU7026处理细胞,按照说明书步骤进行,1h内用流式细胞仪检测细胞凋亡情况㊂取适量HepG2细胞接种于6cm细胞培养皿中,用10μmol/LNU7026处理0㊁4㊁8㊁12㊁24h后收样㊂按照说明书步骤进行,用流式细胞仪检测细胞周期㊂1.7㊀统计学分析采用SPSS18.0进行统计分析,数据以xʃs表示,多组间用单因素方差分析,P<0.05为差异有显著性㊂2㊀结㊀果2.1㊀不同浓度NU7026对HepG2细胞活性的影响随着NU7026浓度的增加,HepG2细胞存活率下降㊂与0μmol/L组和DMSO组比较,15μmol/L 和20μmol/L NU7026作用HepG2细胞后,细胞存活率下降(P<0.05;图1);10μmol/L NU7026作用HepG2细胞24㊁48㊁72h后,与DMSO组细胞存活率比较,差异有显著性(P<0.05),与0μmol/L 组细胞存活率比较,差异无显著性(P>0.05);查阅文献[3]及根据前期研究[4],本研究中10μmol/L NU7026对HepG2细胞没有明显的毒性作用,故选择10μmol/L NU7026进行后续实验㊂将实验分为空白组㊁对照组(0.1%DMSO)和NU7026组(10μmol/L NU7026)㊂图1㊀CCK8检测不同浓度NU7026对HepG2细胞活性的影响a为P<0.05,与0μmol/L组比较;b为P<0.05,与DMSO组比较㊂2.2㊀各组HepG2细胞增殖能力比较NU7026作用HepG2细胞72h后,NU7026组细胞数明显低于对照组(P<0.05;图2);NU7026组细胞克隆数少于对照组,克隆形成率明显降低(P< 0.05;图2)㊂图2㊀各组HepG2细胞增殖能力的比较A 为培养10天后克隆实验细胞分布图(Giemsa 染色)和柱状图;B 为细胞生长曲线图㊂a 为P <0.05,与空白组比较;b 为P <0.05,与对照组比较㊂2.3㊀各组HepG2细胞迁移能力NU7026作用细胞24h 后,与对照组相比,面积愈合率无明显差异(P >0.05);NU7026作用细胞48h后,划痕面积比对照组稍大,面积愈合率无明显差异(P >0.05);但在作用72h 后,NU7026组划痕面积大于对照组,面积愈合率明显降低(P <0.05;图3)㊂图3㊀各组HepG2细胞迁移能力比较A 为细胞划痕实验迁移(200ˑ);B 为细胞划痕愈合率折线图㊂a 为P <0.05,与空白组比较;b 为P <0.05,与对照组比较㊂2.4㊀各组HepG2细胞的凋亡与周期NU7026作用HepG2细胞24㊁48㊁72h 后,细胞凋亡率增加(P <0.05;图4)㊂随着NU7026作用时间增加,HepG2细胞凋亡率逐渐增加㊂NU7026作用HepG2细胞12h 后,出现了轻微的G2/M 阻滞现象,但细胞周期未出现明显改变(图5)㊂3㊀讨㊀论肝癌在全球恶性肿瘤发病谱中排第六,其中中国肝癌新发病例数将近占全球发病的一半[5]㊂DNA-PKcs 是一种相对分子质量约为470kDa 的丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶,与共济失调毛细血管扩张症基因(Ataxia telangiectasia mutated,ATM)㊁RAD3相关蛋白(Ataxia telangiectasiaand Rad3-related protein,ATR)同属于磷酸酰肌醇3-激酶相关蛋白激酶(PIKK)家族㊂DNA-PKcs 和ATM 在DNA 双链断裂修复中起着重要的作用,ATR 主要参与DNA 单链断裂修复㊂DNA-PKcs 不仅参与淋巴细胞的V(D)J 重组和类别转换重组,保护染色体末端,而且DNA-PKcs 响应胰岛素信号传导,促进肝脏中碳水化合物转化为脂肪酸[6-7]㊂DNA-PKcs 抑制剂有渥曼青霉素㊁NU7441㊁NU7026㊁IC 化合物等㊂NU7026对DNA-PKcs 抑制性特异度高,能有效抑制DNA-PKcs Ser2056磷酸化[4]㊂本研究通过生长曲线实验和克隆实验检测图4㊀各组HepG2细胞凋亡比较A 为细胞凋亡图;B 为细胞凋亡率柱状图㊂a 为P <0.05,与空白组比较;b 为P <0.05,与对照组比较㊂图5㊀各组HepG2细胞周期的比较A 为流式细胞术检测细胞周期图;B 为细胞周期占比图㊂细胞增殖能力,表明NU7026抑制DNA-PKcs 将降低HepG2细胞增殖能力,与其他研究结果相一致㊂用siRNA 介导肝癌HepG2细胞中DNA-PKcs 沉默,细胞增殖速度减慢,且高表达DNA-PKcs 可通过AKT /GSK3/c-myc 信号通路调节肝癌细胞增殖[8]㊂同样用siDNA-PKcs 转染肝癌耐药细胞Bel-7402/5-Fu 后,细胞增殖能力降低,可能抑制DNA-PKcs 后胸腺嘧啶合成酶(TS)表达下降,从而抑制DNA 合成,细胞增殖生长变慢[9]㊂但也有研究表明NU7441抑制DNA-PKcs 促进肺成纤维细胞中SSEA4+间充质祖细胞增殖[10]㊂沉默DNA-PKcs 不仅抑制骨肉瘤MG-63细胞增殖,而且也抑制细胞迁移和侵袭[11]㊂本文结果显示抑制DNA-PKcs 能降低HepG2细胞迁移能力㊂有研究表明将沉默DNA-PKcs 的HepG2细胞移植到裸鼠中,其肿瘤生成率明显降低[8]㊂DNA-PKcs通过RhoA/ROCk2通路调节基质金属蛋白酶-2和磷酸化肌球蛋白轻链2表达,促进体内外骨肉瘤细胞迁移和侵袭[12]㊂也有研究发现ITGA5和SDC4基因与DNA-PKcs可能对细胞迁移侵袭运动具有互相调节作用[13]㊂本研究用NU7026抑制DNA-PKcs24㊁48㊁72h, HepG2细胞凋亡增加,与其他研究结果一致㊂有研究表明沉默DNA-PKcs后,通过线粒体凋亡途径促进肝癌耐药细胞Bel-7402/5-Fu凋亡[14]㊂也有研究表明沉默DNA-PKcs后,有丝分裂细胞纺锤体异常,胞质分裂失败,有丝分裂延长等,最终导致细胞有丝分裂灾变而凋亡[15]㊂用TDR将HeLa细胞同步化至G1期后释放,沉默DNA-PKcs的HeLa细胞在6h出现明显的G2/M期阻滞,表明抑制DNA-PKcs会引起G2/M期阻滞[16]㊂用nocodazole同步化细胞后释放,抑制HeLa细胞DNA-PKcs,H3-pS10阳性细胞增加,表明细胞阻滞在有丝分裂期[17]㊂也有研究表明沉默MG-63细胞DNA-PKcs48h,细胞周期无明显改变[11]㊂在本研究中NU7026抑制DNA-PKcs对HepG2细胞周期无明显改变,可能是因为细胞DNA 损伤不严重,DNA修复时间较短,细胞能较快地通过周期检查点,故未出现明显G2/M期阻滞㊂综上所述,NU7026能抑制HepG2细胞增殖能力和迁移能力,其机制可能与促进细胞凋亡有关㊂[参考文献][1]郑荣寿,孙可欣,张思维,等.2015年中国恶性肿瘤流行情况分析[J].中华肿瘤杂志,2019,41(1):19-28.[2]龙晓兰,张万勇,吴勇军,等.Cofilin-1与肝癌细胞迁移侵袭能力的相关性研究[J].中南医学科学杂志, 2019,47(6):571-575.[3]AMREIN L,LOIGNON M,GOULET A C,et al.Chloram-bucil cytotoxicity in malignant B lymphocytes is synergisti-cally increased by2-(morpholin-4-yl)-benzo[h]chomen-4-one(NU7026)-mediated inhibition of DNA double-strand break repair via inhibition of DNA-dependent protein kinase [J].J Pharmacol Exp Ther,2007,321(3):848-855.[4]黄波,龙颖,唐艳,等.NU7026对肝癌细胞放射增敏作用及机制研究[J].辐射研究与辐射工艺学报,2013, 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肝细胞癌中糖异生代谢异常的研究进展
2肝细胞癌中糖异生代谢异常的研究进展罗赛芳，马向明，曹立瀛华北理工大学附属开滦总医院肝胆外科，河北唐山０６３０００摘要：肿瘤在有氧环境中仍然进行糖酵解以加速对肿瘤微环境中的葡萄糖摄取和产生大量乳酸，为肿瘤细胞增殖提供所需的核苷酸、脂质和蛋白质的生物分子前体，以及可抑制免疫细胞的功能而促进肿瘤细胞的转移。
糖异生代谢作为糖酵解的逆反应在肝细胞癌中处于抑制状态，尤其是丙酮酸羧化酶、磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶、果糖－１，６－二磷酸酶１和葡萄糖－６－磷酸酶４个关键限速酶的表达下调，通过促进有氧糖酵解及其分支途径而促进肝细胞癌的生长和增殖，同时也与肝细胞癌患者的总生存期和预后相关，被认为是肝细胞癌的抑制因子。
基于此，本文总结了糖异生代谢关键酶在肝细胞癌发生发展中的变化及其作用机制，并分析了其在肝细胞癌中相关研究的不足和未来方向，期望为肝细胞癌的治疗提供新思路。
关键词：癌，肝细胞；糖原异生；代谢基金项目：河北省２０２０年度医学科学研究课题计划（２０２０１２８５）ＲｅｓｅａｒｃｈａｄｖａｎｃｅｓｉｎａｂｎｏｒｍａｌｇｌｕｃｏｎｅｏｇｅｎｅｓｉｓｉｎｈｅｐａｔｏｃｅｌｌｕｌａｒｃａｒｃｉｎｏｍａＬＵＯＳａｉｆａｎｇ，ＭＡＸｉａｎｇｍｉｎｇ，ＣＡＯＬｉｙｉｎｇ．（ＤｅｐａｒｔｍｅｎｔｏｆＨｅｐａｔｏｂｉｌｉａｒｙＳｕｒｇｅｒｙ，ＫａｉｌｕａｎＧｅｎｅｒａｌＨｏｓｐｉｔａｌＡｆｆｉｌｉａｔｅｄｔｏＮｏｒｔｈＣｈｉｎａＵｎｉ ｖｅｒｓｉｔｙｏｆＳｃｉｅｎｃｅａｎｄＴｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，Ｔａｎｇｓｈａｎ，Ｈｅｂｅｉ０６３０００，Ｃｈｉｎａ）Ｃｏｒｒｅｓｐｏｎｄｉｎｇａｕｔｈｏｒ：ＣＡＯＬｉｙｉｎｇ，ｃａｏｌｉｙｉｎｇ１５３＠１２６．ｃｏｍ（ＯＲＣＩＤ：００００－０００３－３６６２－５９６１）Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｔｕｍｏｒｓｓｔｉｌｌｐｅｒｆｏｒｍｇｌｙｃｏｌｙｓｉｓｉｎｔｈｅａｅｒｏｂｉｃｅｎｖｉｒｏｎｍｅｎｔｔｏａｃｃｅｌｅｒａｔｅｔｈｅｕｐｔａｋｅｏｆｇｌｕｃｏｓｅａｎｄｐｒｏｄｕｃｅａｌａｒｇｅａｍｏｕｎｔｏｆｌａｃｔｉｃａｃｉｄｉｎｔｕｍｏｒｍｉｃｒｏｅｎｖｉｒｏｎｍｅｎｔ，ｐｒｏｖｉｄｅｂｉｏｍｏｌｅｃｕｌａｒｐｒｅｃｕｒｓｏｒｓｏｆｎｕｃｌｅｏｔｉｄｅｓ，ｌｉｐｉｄｓ，ａｎｄｐｒｏｔｅｉｎｓｆｏｒｔｕｍｏｒｃｅｌｌｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎ，ａｎｄｉｎｈｉｂｉｔｔｈｅｆｕｎｃｔｉｏｎｏｆｉｍｍｕｎｅｃｅｌｌｓａｎｄｐｒｏｍｏｔｅｔｈｅｍｅｔａｓｔａｓｉｓｏｆｔｕｍｏｒｃｅｌｌｓｉｎａｃｉｄｉｃｅｎｖｉｒｏｎｍｅｎｔ．Ｇｌｕｃｏｎｅｏｇｅｎｅｓｉｓ，ａｓｔｈｅｒｅｖｅｒｓｅｒｅａｃｔｉｏｎｏｆｇｌｙ ｃｏｌｙｓｉｓ，ｉｓｉｎｈｉｂｉｔｅｄｉｎｈｅｐａｔｏｃｅｌｌｕｌａｒｃａｒｃｉｎｏｍａ，ｅｓｐｅｃｉａｌｌｙｔｈｅｄｏｗｎｒｅｇｕｌａｔｅｄｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｏｆｔｈｅｆｏｕｒｋｅｙｒａｔｅ－ｌｉｍｉｔｉｎｇｅｎｚｙｍｅｓｐｙｒｕｖａｔｅｃａｒｂｏｘｙｌａｓｅ，ｐｈｏｓｐｈｏｅｎｏｌｐｙｒｕｖａｔｅｃａｒｂｏｘｙｋｉｎａｓｅ，ｆｒｕｃｔｏｓｅ－１，６－ｄｉｐｈｏｓｐｈａｔｅ１，ａｎｄｇｌｕｃｏｓｅ－６－ｐｈｏｓｐｈａｔａｓｅ４，ｗｈｉｃｈｐｒｏｍｏｔｅｓｔｈｅｇｒｏｗｔｈａｎｄｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎｏｆｈｅｐａｔｏｃｅｌｌｕｌａｒｃａｒｃｉｎｏｍａｂｙｐｒｏｍｏｔｉｎｇａｅｒｏｂｉｃｇｌｙｃｏｌｙｓｉｓａｎｄｉｔｓｂｒａｎｃｈｅｄｐａｔｈｗａｙｓ，ａｎｄｍｅａｎｗｈｉｌｅ，ｉｔｉｓａｌｓｏａｓ ｓｏｃｉａｔｅｄｗｉｔｈｔｈｅｏｖｅｒａｌｌｓｕｒｖｉｖａｌｔｉｍｅａｎｄｐｒｏｇｎｏｓｉｓｏｆｐａｔｉｅｎｔｓｗｉｔｈｈｅｐａｔｏｃｅｌｌｕｌａｒｃａｒｃｉｎｏｍａａｎｄｉｓｃｏｎｓｉｄｅｒｅｄａｎｉｎｈｉｂｉｔｏｒｆｏｒｈｅｐａｔｏｃｅｌｌｕｌａｒｃａｒｃｉｎｏｍａ．Ｔｈｅｒｅｆｏｒｅ，ｔｈｉｓｒｅｖｉｅｗｓｕｍｍａｒｉｚｅｓｔｈｅｃｈａｎｇｅｓａｎｄｍｅｃｈａｎｉｓｍｏｆａｃｔｉｏｎｏｆｔｈｅｋｅｙｅｎｚｙｍｅｓｏｆｇｌｕｃｏｎｅｏｇｅｎｅｓｉｓｉｎｔｈｅｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔａｎｄｐｒｏｇｒｅｓｓｉｏｎｏｆｈｅｐａｔｏｃｅｌｌｕｌａｒｃａｒｃｉｎｏｍａａｎｄａｎａｌｙｚｅｓｔｈｅｓｈｏｒｔｃｏｍｉｎｇｓａｎｄｆｕｔｕｒｅｄｉｒｅｃｔｉｏｎｓｏｆｒｅｌａｔｅｄｒｅｓｅａｒｃｈｉｎｈｅｐａｔｏｃｅｌｌｕｌａｒｃａｒｃｉｎｏｍａ，ｓｏａｓｔｏｐｒｏｖｉｄｅｎｅｗｉｄｅａｓｆｏｒｔｈｅｔｒｅａｔｍｅｎｔｏｆｈｅｐａｔｏｃｅｌｌｕｌａｒｃａｒｃｉｎｏｍａ．Ｋｅｙｗｏｒｄｓ：Ｃａｒｃｉｎｏｍａ，Ｈｅｐａｔｏｃｅｌｌｕｌａｒ；Ｇｌｕｃｏｎｅｏｇｅｎｅｓｉｓ；ＭｅｔａｂｏｌｉｓｍＲｅｓｅａｒｃｈｆｕｎｄｉｎｇ：２０２０ＭｅｄｉｃａｌＳｃｉｅｎｃｅＲｅｓｅａｒｃｈＰｒｏｊｅｃｔＰｌａｎｏｆＨｅｂｅｉＰｒｏｖｉｎｃｅ（２０２０１２８５）ＤＯＩ：１０．３９６９／ｊ．ｉｓｓｎ．１００１－５２５６．２０２２．０９．０４２收稿日期：２０２２－０２－２３；录用日期：２０２２－０４－０５通信作者：曹立瀛，ｃａｏｌｉｙｉｎｇ１５３＠１２６．ｃｏｍ 据２０２０年全球癌症数据统计，肝癌是世界上第三大致死性癌症，占癌症死亡总数的８．３％，也是我国第二大致死性癌症，死亡率为１３％［１］。