牛奶中酪蛋白的提取
实验5酪蛋白的制备
试剂：0.2 mol/L HAc-Na buffer、
01
95%乙醇、乙醚
02
器材：离心机、水浴锅、pH计
03
试剂与器材
四、操作方法
10mL牛奶 预热 调pH至4.7 室温冷却 离心得 沉淀 于离心管内悬浮 离心 得沉淀 于离心管内去脂肪 漏斗过滤 滤干 洗涤 洗涤（脂肪完毕） 带 滤纸烘干 称重 计算。
五、计算 实际获得百分率= ╳ 100% 六、注意事项 1、牛奶与缓冲液要预热 2、缓冲液要缓加缓搅 3、在滤纸上样品的脱脂过程要搅动，不得 破滤纸 4、实验环境要保持空气流通，门窗要开
酪蛋白质量（g） 10mL 牛奶
实验十 酪蛋白的制备
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ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ
目的要求
学习从牛乳中制备酪蛋白的原理和方法。
原理
牛奶含有半乳糖、蛋白质、脂肪成份。蛋白质中的酪蛋白通过等电点沉淀，再通过离心而获得，糖类小分子由于处于清液中而分离，沉淀物中所含的脂肪通过有机溶剂抽提而去除，最终得到纯白色、晶状酪蛋白。
在酪蛋白制备时为什么要用醋酸缓冲液 调pH到4.8？
01
乙醚、乙醇作用是什么？
02
思考题
酪蛋白和乳蛋白素的提取流程
酪蛋白和乳蛋白素的提取流程下载温馨提示:该文档是我店铺精心编制而成，希望大家下载以后，能够帮助大家解决实际的问题。
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1. 准备原料，新鲜牛奶或脱脂牛奶。
酪蛋白检测实验报告
一、实验目的1. 掌握酪蛋白的提取方法。
2. 学习利用等电点沉淀法检测酪蛋白的含量。
3. 了解蛋白质的沉淀、溶解等性质。
二、实验原理酪蛋白是牛奶中的主要蛋白质，含量约为35g/L。
酪蛋白是一种含磷蛋白质的混合物，其等电点为4.7。
在等电点时，酪蛋白的溶解度最低，会以沉淀形式从牛奶中析出。
本实验通过调节牛奶的pH值至酪蛋白的等电点，使酪蛋白沉淀，然后通过离心、洗涤等步骤提取酪蛋白，并利用沉淀重量法检测酪蛋白的含量。
三、实验材料与试剂1. 材料：新鲜牛奶2. 试剂：- 95%乙醇- 无水乙醚- 0.2mol/L pH 4.7醋酸-醋酸钠缓冲液- 0.2mol/L氢氧化钠溶液- 0.1mol/L盐酸溶液- 精密pH试纸或酸度计- 离心机- 烧杯- 温度计- 研钵- 天平四、实验步骤1. 酪蛋白提取- 取50mL新鲜牛奶于150mL烧杯中，用热水浴加热至40℃，维持此温度，边搅拌边加入稀醋酸溶液约2mL，观察白色沉淀析出。
- 继续搅拌并使悬浊液冷却至室温，然后将混合物转入离心杯中，于3000r/min离心15min。
- 离心完毕后，弃去上清液，得到酪蛋白沉淀。
2. 酪蛋白洗涤- 将酪蛋白沉淀用少量去离子水洗涤2次，弃去上清液。
- 用95%乙醇洗涤沉淀2次，弃去上清液。
- 用无水乙醚洗涤沉淀2次，弃去上清液。
3. 酪蛋白干燥- 将洗涤后的酪蛋白沉淀置于研钵中，用研棒轻轻研磨，使酪蛋白沉淀充分干燥。
- 将干燥后的酪蛋白沉淀转移到称量瓶中，于105℃烘干2小时，取出，置于干燥器中冷却至室温，称量。
4. 酪蛋白含量测定- 取一定量的酪蛋白沉淀，加入0.1mol/L盐酸溶液，使酪蛋白溶解。
- 将溶液转移至容量瓶中，定容至刻度线，摇匀。
- 取一定量的溶液，加入0.2mol/L氢氧化钠溶液，使溶液pH值调至4.7，观察酪蛋白沉淀析出。
- 将沉淀转移至离心杯中，于3000r/min离心15min。
- 弃去上清液，称量沉淀重量，计算酪蛋白含量。
牛乳中酪蛋白的制备
思考题
1．制备高产率纯酪蛋白的关键是什么？
ห้องสมุดไป่ตู้
牛乳中酪蛋白的制备
操作方法
1．将25mL牛奶加热至40℃。在搅拌下慢慢加入预热至40℃、 pH4.7醋酸缓冲液25mL。用精密试纸调pH值至4.7。
2. 将上述悬浮液冷却至室温。离心10min(3000r/min)弃 去上清液，得酪蛋白粗制品。
3．用水洗沉淀两次，离心5min(3000r/min)，弃去上清液。
3．用乙醇洗沉淀1次，离心5min(3000r/min)，弃去上清 液。用乙醇—乙醚混合液洗沉淀1次。最后用乙醚洗沉淀1次， 各离心5min(3000r/min) 。
4．将沉淀摊开在表面皿上，风干；得酪蛋白纯品。
5．准确称重，计算含量酪蛋白g/100mL牛乳（g%）,并和 理论含量为3.5g/100mL牛乳相比较，求出实际得率。
分离酪蛋白实验报告(3篇)
第1篇一、实验目的1. 理解牛奶中酪蛋白的提取原理。
2. 掌握等电点沉淀法提取酪蛋白的实验操作。
3. 学习利用pH值调节牛奶中的蛋白质状态，实现酪蛋白的分离。
二、实验原理牛奶中的主要蛋白质为酪蛋白，含量约为3.5%。
酪蛋白是一种含磷蛋白质，其等电点为4.7。
在等电点附近，酪蛋白的溶解度最低，因此可以通过调节牛奶的pH 值，使酪蛋白沉淀出来，从而实现与其它蛋白质的分离。
三、实验材料与试剂1. 材料：新鲜牛奶、pH计、离心机、烧杯、玻璃棒、滤纸等。
2. 试剂：0.2mol/L醋酸-醋酸钠缓冲液（pH 4.7）、95%乙醇、无水乙醚等。
四、实验步骤1. 样品准备：取50mL新鲜牛奶于150mL烧杯中。
2. pH值调节：用pH计测定牛奶的pH值，并逐渐加入0.2mol/L醋酸-醋酸钠缓冲液（pH 4.7），边加边搅拌，直至牛奶pH值达到4.7。
3. 沉淀形成：继续搅拌，使牛奶中的酪蛋白沉淀，并静置10分钟。
4. 离心分离：将混合液转入离心杯中，以3000r/min的速度离心15分钟。
5. 收集沉淀：弃去上清液，收集离心杯中的酪蛋白沉淀。
6. 洗涤沉淀：向沉淀中加入适量95%乙醇，搅拌后静置5分钟，过滤去除杂质。
7. 重复洗涤：重复步骤6，共洗涤3次，以去除酪蛋白中的杂质。
8. 干燥沉淀：将洗涤后的酪蛋白沉淀转移至干净的烧杯中，在60℃下烘干至恒重。
五、实验结果与分析1. 通过实验，成功从牛奶中提取了酪蛋白。
2. 通过pH值调节，实现了酪蛋白的沉淀分离。
3. 洗涤步骤有助于去除酪蛋白中的杂质，提高纯度。
六、实验结论1. 等电点沉淀法是一种有效的酪蛋白提取方法。
2. 通过pH值调节，可以实现酪蛋白的分离。
3. 洗涤步骤有助于提高酪蛋白的纯度。
七、实验讨论1. 实验过程中，pH值的调节对酪蛋白的沉淀效果有重要影响。
若pH值偏离等电点，则会影响酪蛋白的沉淀效果。
2. 洗涤步骤有助于去除酪蛋白中的杂质，但过度洗涤会导致酪蛋白的损失。
酪蛋白制作实验报告
一、实验目的1. 了解酪蛋白的来源和性质。
2. 掌握从牛奶中提取酪蛋白的原理和方法。
3. 熟悉等电点沉淀法提取蛋白质的实验操作。
二、实验原理酪蛋白是牛奶中主要的蛋白质，含量约为35g/L。
酪蛋白是一种含磷蛋白质的混合物，其等电点为4.7。
在等电点时，酪蛋白的溶解度最低，容易从溶液中沉淀出来。
通过调节牛奶的pH值至酪蛋白的等电点，使酪蛋白沉淀，然后进行离心、洗涤、干燥等步骤，可以得到纯酪蛋白。
三、实验材料与试剂1. 材料：新鲜牛奶2. 试剂：95%乙醇、无水乙醚、0.2mol/L pH4.7醋酸-醋酸钠缓冲液3. 器具：离心机、抽滤装置、精密pH试纸或酸度计、电炉、烧杯、温度计四、实验步骤1. 酪蛋白粗提（1）取100mL新鲜牛奶，加热至40℃。
（2）在搅拌下，缓慢加入预热至40℃的0.2mol/L pH4.7醋酸-醋酸钠缓冲液100mL。
（3）用精密pH试纸或酸度计调节pH值至4.7。
（4）将混合液冷却至室温，离心15分钟。
（5）弃去清液，得到酪蛋白粗制品。
2. 酪蛋白纯化（1）用水洗涤沉淀3次，离心10分钟，弃去上清液。
（2）在沉淀中加入30mL 95%乙醇，搅拌。
（3）将悬浊液转移至布氏漏斗中抽滤。
（4）用乙醇-乙醚混合液清洗沉淀2次。
（5）最后用乙醚清洗沉淀2次，抽干。
五、实验结果与分析通过上述实验步骤，成功从牛奶中提取了酪蛋白。
实验过程中，观察到以下现象：1. 当pH值调节至4.7时，酪蛋白开始沉淀。
2. 经过离心、洗涤、干燥等步骤，得到纯酪蛋白。
六、实验结论1. 本实验成功从牛奶中提取了酪蛋白，证明了等电点沉淀法提取蛋白质的可行性。
2. 通过实验，掌握了酪蛋白的制备原理和实验操作方法。
3. 酪蛋白是一种重要的蛋白质资源，具有广泛的应用前景。
七、实验注意事项1. 在实验过程中，注意保持实验环境的清洁，避免污染。
2. 调节pH值时，应缓慢加入酸碱溶液，避免剧烈反应。
3. 离心速度不宜过快，以免损坏离心机。
酪蛋白的实验报告
一、实验目的1. 学习从牛奶中提取酪蛋白的原理和方法。
2. 掌握等电点沉淀法提取蛋白质的操作技巧。
3. 了解酪蛋白的性质和特征。
二、实验原理酪蛋白是牛奶中的主要蛋白质，含量约为3.5%。
它是一种含磷蛋白质，具有等电点为4.7的特点。
在等电点时，酪蛋白的溶解度最低，因此可以通过调节牛奶的pH值至酪蛋白的等电点，使其沉淀出来。
沉淀物经过离心、洗涤、干燥等步骤，可以得到纯净的酪蛋白。
三、实验材料与试剂1. 材料：新鲜牛奶、离心机、烧杯、温度计、pH计、抽滤装置、布氏漏斗、玻璃棒等。
2. 试剂：95%乙醇、无水乙醚、0.2mol/L pH4.7醋酸-醋酸钠缓冲液、蒸馏水等。
四、实验步骤1. 酪蛋白的提取（1）取50mL新鲜牛奶于150mL烧杯中，用热水浴加热至40℃，维持此温度，边搅拌边加入2mL稀醋酸溶液，观察白色沉淀的形成。
（2）继续搅拌并使悬浊液冷却至室温，然后将混合物转入离心杯中，于3000r/min离心15min。
（3）离心完毕后，弃去清液，得到酪蛋白粗制品。
2. 酪蛋白的纯化（1）用水洗涤沉淀3次，每次离心10min，弃去上清液。
（2）在沉淀中加入30mL乙醇，搅拌，悬浊液转移至布氏漏斗中抽滤。
（3）用乙醇和乙醚混合液清洗沉淀2次。
（4）最后用乙醚清洗沉淀2次，抽干。
（5）沉淀风干，得到纯净的酪蛋白。
3. 酪蛋白的性质研究（1）观察酪蛋白的外观，记录其颜色、形状等特征。
（2）取少量酪蛋白加入蒸馏水中，观察其在水中的溶解情况。
（3）用pH计测定酪蛋白的等电点。
（4）对酪蛋白进行缩二脲反应、蛋白黄色反应和茚三酮反应，观察其颜色变化。
五、实验结果与分析1. 酪蛋白的提取实验中观察到白色沉淀的形成，表明牛奶中的酪蛋白已经沉淀出来。
通过离心、洗涤、干燥等步骤，得到了纯净的酪蛋白。
2. 酪蛋白的纯化经过洗涤、抽滤、干燥等步骤，得到了纯净的酪蛋白。
酪蛋白呈白色粉末状，无异味。
3. 酪蛋白的性质研究（1）酪蛋白在水中溶解性较差，部分溶解。
15.实验十五 从牛乳中分离提取酪蛋白
等电点沉淀法原理
等电点沉淀法的原理是两性电解质在溶液pH值处于等电点时，分子表面净电荷 为零，导致赖以稳定的水化层和双电层的削弱或破坏，分子间引力增大，溶解 度降低，从而析出。
但单独利用等电点沉淀法来分离生化产品效果并不太理想，因为即使在等电点 时，有些两性物质仍有一定的溶解度，并不是所有的蛋白质在等电点时都能沉 淀下来，特别是同一类两性物质的等电点十分接近时。生产中常与有机溶剂沉 淀法、盐析法并用，这样沉淀的效果较好。
2. 缩二脲反应原理：具有两个或两个以上肽键的化合物在碱性条件下与Cu2+反应, 生成红紫色的络合物。所有的蛋白质均有此显色反应。
3. 茚三酮反应原理：蛋白质与茚三酮共热，产生蓝紫色的还原茚三酮、茚三酮和 氨的缩合物。此反应为一切氨基酸及α-氨基酸所共有。
三、实验步骤及现象
1. 称取10 g奶粉于250 mL烧杯中，加入50 mL水，室温下或温热至40℃不断搅拌使 奶粉充分溶解。在搅拌下缓慢滴加约10 mL 10%乙酸至酪蛋白不再析出，并形成无 定形大块。用玻璃棒将无定形大块酪蛋白直接转移至减压抽滤装置的布氏漏斗上， 抽滤5 min，将抽滤瓶中的液体转移至干净的250 mL烧杯中，保留，用于分离乳糖。 取少量25%冷乙醇洗涤沉淀，抽滤15 min，尽可能去除残留的液体。抽滤结束后， 用滤纸吸干固体，置于空气中干燥，称量并计算产率。
2. 取少量酪蛋白颗粒于试管中，加入少量水溶解。取2 mL酪蛋白溶液，加入2g·L-1水 合茚酮溶液2滴，振荡，放入沸水浴中加热片刻，溶液呈淡紫色(茚三酮反应)。取2 mL酪蛋白溶液，加入50g·L-1氢氧化钠溶液3滴，混匀，再加入20g·L-1硫酸铜溶液 2~3滴，振荡试管，溶液呈蓝紫色(缩二脲反应)。
四、注意事项
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实验五牛奶中酪蛋白的提取
一、实验目的
学习从牛奶中制备酪蛋白的方法
了解从牛奶中制取酪蛋白的原理
二、实验原理
牛乳中主要的蛋白质是酪蛋白，含量约为3.5/100ml。
酪蛋白是含磷蛋白质的混合物，相对密度1.25~1.31，不溶于水、醇、有机溶剂，等电点为4.7利用等电点时溶解度最低的原理，将牛乳的PH调至4.7时，酪蛋白就沉淀出来。
用乙醇洗涤沉淀物，除去脂质杂质后便可得到纯的酪蛋白。
三、实验材料与仪器
纯牛奶、白醋、滤纸、被子、锅等
四、实验步骤
将250ml或200ml牛奶置于锅中，隔水水浴小火加热，不断搅拌，加热至沸腾时停止搅拌和加热。
在牛奶中加入少量盐，并慢慢加入白醋，并轻轻搅拌，观察到牛奶中开始有白色絮状沉淀出现后，停止搅拌和加醋，静置10min。
待上述悬浮液冷却至室温，用滤纸过滤，得到滤渣。
用水清洗滤渣3次，每次都过滤得滤渣。
滤渣再用白酒清洗3次，每次都过滤得滤渣。
将滤渣摊在滤纸上风干，得酪蛋白制品
称重并品尝酪蛋白制品
五、实验结果记录与分析
酪蛋白（g/100ml）=（酪蛋白（g）/200ml或250ml ）*100
得率=测得含量/理论含量*100%
酪蛋白=（13.3g/200ml）*100=6.65 g/ml
结论：闻起来有较大的奶香味和酒精味。
在过滤的过程中，粘在滤纸上跟纱布，抠不下来，所以数据应该会偏小了。