弧菌属弯曲菌属幽门螺杆菌共28页共30页文档
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07.螺形菌
第二节 副溶血性弧菌
副溶血性弧菌是一种嗜盐性细菌，存在 于近海岸的海水和鱼、贝类海产品中，具有 致病性的菌株能引起人类食物中毒，是我国 沿海地区最常见的一种食物中毒
1、G－ 菌，常呈弧状、杆状、丝状等多 形性，菌体一端有单鞭毛，营养要求不高， 故在外界可长期生存。本菌特点嗜盐，在含 3.5%-4.5%NaCl的培养基中最易生长，在无 盐蛋白胨水中生长很差，甚至不生长。生长 的pH范围是7.0-9.5，最适pH为7.7
2、绝大多数致病性副溶血性弧菌能产
生溶血毒素使人或家兔的红细胞溶解。其溶
血能力与该菌的致病力呈平行关系，而大多
数非致病性菌株则无此毒素。该毒素也具有
肠道毒性
3、副溶血性弧菌引起的食物中毒 经海产品及盐淹渍后，经2-26h潜伏期后
发病 主要症状是腹痛、腹泻，呕吐及发热，粪便为水样 或糊状，少数有血水样便或粘液血便。多发于夏秋季， 病程较短，一般恢复较快
90%以上。
幽门螺杆菌与萎缩性胃炎、胃、十二指肠溃疡和胃癌等
疾病相关。
一、生物学特性
形态结构 G-,细长弯曲呈螺形。一 端或两端有多根带鞘鞭毛， 运动活泼有动力。鞭毛在定 居中起锚住作用。
培养特性
1. HP为微需氧菌，最适温度为37℃
2. HP对湿度(85%以上)要求较高，营养要求较高
需含血液才能生长，常用血琼脂培养基，经
72h才长出菌落
3. HP的菌落形态为圆形孤立的小菌落，无色半 透明呈露滴状
生化反应
• HP生化反应不活跃，不能利用糖类。
• HP具有大量高活力的胞外脲酶，故脲酶活性的
测定可作为HP的快速诊断方法。
• 还能产生氧化酶、触酶、碱性磷酸酶、α-谷
氨酰转肽酶、亮氨酸胺肽酶和DNA酶等。
微生物学检验弯曲菌属和幽门螺杆菌及检验PPT课件
2021/3/12
• 专性需氧 • 营养要求不高 • 氧化酶：＋ • O/F：O • Mac生长：＋ • 产生水溶性色素
2021/3/12
铜绿假单胞菌－－形态染色
• 革兰阴性杆菌，无芽孢、无荚膜，单 或丛鞭毛
2021/3/12
铜绿假单胞菌－－培养特性
• 专性需氧、营养要求不高 • 最适温度35℃，42 ℃ 生长，4℃不生长 • 产生荧光素和蓝绿色水溶性的绿脓素，
Campy-BAP） • 两种类型菌落：扁平湿润边缘不整齐，
沿穿刺线扩散生长；圆形、突起、湿润 、黏液样外观
2021/3/12
生化反应
• 氧化酶阳性 • 触酶阳性 • 不分解和不发酵糖 • 不分解尿素
2021/3/12
临床意义
• 传播方式：经口感染 • 致病物质：产生肠毒素、细胞毒素、内
毒素等致病物质 • 空肠弯曲菌可引起急性肠炎、格林巴利
标本
分离培养 （血平板、麦毛染色
2021/3/12
氧化酶
O/F 硝酸盐还原
KIA斜面底层不变色 其他生化反应
测验1
• 关于铜绿假单胞菌，错误的是 A 革兰阴性杆菌 B 氧化酶－、触酶－ C 硝酸盐还原－ D 产生水溶性蓝绿色素 E 菌落有金属光泽
2021/3/12
可疑菌落（性状、色素）
初步鉴定 最后鉴定
色素鉴定 生化反应 42℃生长 分型
O/F：O 枸櫞酸盐利用＋ 精氨酸双水解＋ 乙酰胺酶＋ 明胶液化＋
铜绿假单胞菌－－检验方法
• 显微镜检查：标本直接涂片革兰染色镜 检；鞭毛染色镜检
• 培养：标本接种血平板、Mac平板分离 培养，血标本先增菌，再转种
2021/3/12
2021/3/12
• 专性需氧 • 营养要求不高 • 氧化酶：＋ • O/F：O • Mac生长：＋ • 产生水溶性色素
2021/3/12
铜绿假单胞菌－－形态染色
• 革兰阴性杆菌，无芽孢、无荚膜，单 或丛鞭毛
2021/3/12
铜绿假单胞菌－－培养特性
• 专性需氧、营养要求不高 • 最适温度35℃，42 ℃ 生长，4℃不生长 • 产生荧光素和蓝绿色水溶性的绿脓素，
Campy-BAP） • 两种类型菌落：扁平湿润边缘不整齐，
沿穿刺线扩散生长；圆形、突起、湿润 、黏液样外观
2021/3/12
生化反应
• 氧化酶阳性 • 触酶阳性 • 不分解和不发酵糖 • 不分解尿素
2021/3/12
临床意义
• 传播方式：经口感染 • 致病物质：产生肠毒素、细胞毒素、内
毒素等致病物质 • 空肠弯曲菌可引起急性肠炎、格林巴利
标本
分离培养 （血平板、麦毛染色
2021/3/12
氧化酶
O/F 硝酸盐还原
KIA斜面底层不变色 其他生化反应
测验1
• 关于铜绿假单胞菌，错误的是 A 革兰阴性杆菌 B 氧化酶－、触酶－ C 硝酸盐还原－ D 产生水溶性蓝绿色素 E 菌落有金属光泽
2021/3/12
可疑菌落（性状、色素）
初步鉴定 最后鉴定
色素鉴定 生化反应 42℃生长 分型
O/F：O 枸櫞酸盐利用＋ 精氨酸双水解＋ 乙酰胺酶＋ 明胶液化＋
铜绿假单胞菌－－检验方法
• 显微镜检查：标本直接涂片革兰染色镜 检；鞭毛染色镜检
• 培养：标本接种血平板、Mac平板分离 培养，血标本先增菌，再转种
2021/3/12
2021/3/12
微肠杆菌科,弧菌,螺旋菌属
+-
-
+/- -
-
- -/+ -
++
+
3、抗原构造
（1）O抗原：1、脂多糖，耐热 2、可刺激机体产生IgM
（2）H抗原：1、蛋白质，不耐热 2、可刺激机体产生IgG
（3）Vi抗原（强毒株），表面抗原：抗吞噬
4、抵抗力
不强，对热及一般消毒剂敏感 对氯霉素极敏感 对胆盐、煌绿等耐受 水、有机物或低温耐受
+
红色大菌落(分解乳糖)
致病菌 (伤寒、痢疾） -
无色透明小菌落(不分解乳糖)
乳糖发酵试验： 初步鉴别肠道致病菌和肠道非致病菌
抗原结构复杂
Ｏ抗原： 耐热性菌体抗原；细胞壁脂多糖，稳定， 属特异性，刺激机体产生IgM抗体
Ｈ抗原：鞭毛蛋白，不耐热，失去后运动消失， 刺激机体产生IgG抗体
荚膜抗原（Ｋ抗原）：多糖类物质，位于Ｏ抗原外围。
止液体的重吸收，导致腹泻
三、微生物检查
1.标本：
肠外感染
尿、血等
腹泻
粪便
2.分离培养与鉴定：
涂片染色镜检
（选择培养基）分离培养
生化鉴定
*尿路感染需计数细菌总数，
ห้องสมุดไป่ตู้
＞10万/mL
卫生学指标
在环境和食品卫生学上，常被用作粪便污染的 检测指标
大肠菌群数
我国的卫生标准： ≤ 3个大肠菌群/1L饮水 ≤ 5个大肠菌群/100ml瓶装汽水、果汁
的病原菌
一.生物学性状
形态 无鞭毛，无芽孢，有菌毛 无鞭毛－－区别于其他肠道杆菌，初步鉴别 生化反应
不分解乳糖 SS培养基上为无色透明菌落 对理化因素的抵抗力
微生物学--弧菌
分离培养与鉴定
分离培养 粪便或肛拭标本：直接接种改良Campy-BAP
选择平板 血、脑脊液标本：布氏肉汤增菌后转种分离培
养基 微氧环境培养 不同细菌培养温度不同
Key Points
革兰阴性逗点状或S形的菌,运动活泼 微需氧：最佳生长环境为含5%O2、10% CO2、
85%N2 最适生长温度因菌种而异 营养要求高 氧化酶、触酶阳性，不能利用、不发酵各种糖类，
（3）快速诊断：O1和O139抗体做玻片凝集
（4）霍乱毒素的测定
二 分离培养和鉴定
初次分离用pH8.5碱性蛋白胨水，经4～6小时 液体表面大量繁殖，形成菌膜。
二 分离培养和鉴定
TCBS（硫代硫酸盐-枸橼酸盐-胆盐-蔗糖琼脂平板）
霍乱弧菌在TCBS琼脂平板上形成 发酵蔗糖的较大的黄色菌落
含亚碲酸钾的培养基：4号琼脂 庆大霉素琼脂
临床意义 (致病因素)
1.侵袭力
进入小肠，鞭毛、菌毛、分泌黏液，O139群有荚膜
穿过小肠黏膜表面黏液层
黏附于小肠黏膜上皮细胞刷 状缘的微绒毛上大量繁殖
临床意义 (致Βιβλιοθήκη 因素)2.霍乱肠毒素 MW：80000-90000 A1:活性亚单位 21812 A2:连接亚单位 5000 B：结合亚单位
霍乱弧菌肠毒素（CE, cholera enterotoxin）
鉴
定
定
生物学特性（培养特征）
需氧或兼性厌氧 营养要求不高，嗜盐（无盐不生长,最适盐浓度
3%） TCBS上形成绿色菌落
副溶血弧菌在TCBS 上菌落
鉴定特征
革兰阴性弧菌或杆菌，动力（＋） 氧化酶（＋），临床分离株脲酶常（＋） TCBS上绿色菌落、氯化钠生长试验 神奈川现象(+) 各种生化试验 TDH和TRH的检测：毒素和基因检测
弧菌属与弯曲菌
9.0的碱性蛋白胨水/碱性
琼脂平板上生长良好
无盐环境生长，其他致病性弧菌不能 TCBS培养基，黄色菌落 过氧化氢酶阳性 吲哚实验阳性
抗原构造与分型
Ｏ抗原: 现已有155个血清群
O1群与O139群引起霍乱
古典生物型 O1群 El Tor生物型
三、微生物学检查
1.标本采集： 临床标本：粪便、血液、脑脊液 2.直接镜检： 菌体细长，呈弧形、螺旋形、S 形的G-小杆菌 3.分离培养： 4.鉴定：氧化酶阳性、马尿酸水解试验
四、防治原则
预防：无特异性疫苗，注意饮水和食品卫生， 加强粪便管理，避免传播
治疗: 抗生素
第三节 螺杆菌属（Helicobacter pylori,Hp)
℃的粪便、牛奶中可存活3周
22
二、致病性与免疫性
致病物质
动力鞭毛入侵，导致肠粘膜的损伤 产生肠毒素，与肠黏膜上皮细胞腺苷环化酶结合，激活 环磷腺苷介质系统，环磷腺苷产生增多，导致肠液过度分
泌
产生细胞毒素，对哺乳动物细胞有细胞毒性作用
二、致病性与免疫性
所致疾病 肠道感染：空肠弯曲菌引起急性肠炎； 肠道外感染：胎儿弯曲菌引起：败血症、心 内膜炎等；
Ｈ抗原: 特异性低
抵抗力
耐冷，在水中可越冬 对湿热敏感，100℃，1分钟灭活 耐碱 ，pH8.8－9.0 对酸和消毒剂敏感，正常胃酸中存活4分钟
(二)、致病性与免疫性
1、致病物质－－鞭毛、菌毛、霍乱肠毒素
鞭毛－－运动、穿透
穿过肠粘膜粘液层接
近肠黏膜细胞
菌毛－－粘附、定居作用
霍乱肠毒素(CT)：致泻毒素中最强烈的毒素 蛋白质, 不耐热，甲醛脱毒成类毒素
• 临床表现： 上吐下泻：剧烈腹泻和呕吐（米泔水样腹泻物）， 大量水分和电解质丧失 低容量性休克和肾衰竭（死亡率高达60%）
琼脂平板上生长良好
无盐环境生长，其他致病性弧菌不能 TCBS培养基，黄色菌落 过氧化氢酶阳性 吲哚实验阳性
抗原构造与分型
Ｏ抗原: 现已有155个血清群
O1群与O139群引起霍乱
古典生物型 O1群 El Tor生物型
三、微生物学检查
1.标本采集： 临床标本：粪便、血液、脑脊液 2.直接镜检： 菌体细长，呈弧形、螺旋形、S 形的G-小杆菌 3.分离培养： 4.鉴定：氧化酶阳性、马尿酸水解试验
四、防治原则
预防：无特异性疫苗，注意饮水和食品卫生， 加强粪便管理，避免传播
治疗: 抗生素
第三节 螺杆菌属（Helicobacter pylori,Hp)
℃的粪便、牛奶中可存活3周
22
二、致病性与免疫性
致病物质
动力鞭毛入侵，导致肠粘膜的损伤 产生肠毒素，与肠黏膜上皮细胞腺苷环化酶结合，激活 环磷腺苷介质系统，环磷腺苷产生增多，导致肠液过度分
泌
产生细胞毒素，对哺乳动物细胞有细胞毒性作用
二、致病性与免疫性
所致疾病 肠道感染：空肠弯曲菌引起急性肠炎； 肠道外感染：胎儿弯曲菌引起：败血症、心 内膜炎等；
Ｈ抗原: 特异性低
抵抗力
耐冷，在水中可越冬 对湿热敏感，100℃，1分钟灭活 耐碱 ，pH8.8－9.0 对酸和消毒剂敏感，正常胃酸中存活4分钟
(二)、致病性与免疫性
1、致病物质－－鞭毛、菌毛、霍乱肠毒素
鞭毛－－运动、穿透
穿过肠粘膜粘液层接
近肠黏膜细胞
菌毛－－粘附、定居作用
霍乱肠毒素(CT)：致泻毒素中最强烈的毒素 蛋白质, 不耐热，甲醛脱毒成类毒素
• 临床表现： 上吐下泻：剧烈腹泻和呕吐（米泔水样腹泻物）， 大量水分和电解质丧失 低容量性休克和肾衰竭（死亡率高达60%）
〖医学〗弧菌属
EI Tor 生物型比古典生物型的抵抗力强。
➢致病因素
致病性和免疫性
1.黏附作用 鞭毛、普通菌毛定居因子(colonization factors)。 霍 乱 弧 菌 最 重 要 的 一 个 定 居 因 子 称 为 毒 素 协 同 调 节 菌 毛 ( toxin co-regulated pilus,TCP)。
弧菌属(Vibrio)
病原生物学教研室
弧菌科（Vibrionaceae）：为呈短小弧形或直线型， 菌体一端有鞭毛，运动活泼，需氧或呈兼性厌氧， 产生氧化酶，但不形成芽胞的一类革兰阴性杆菌。
弧菌属(Vibrio)：霍乱弧菌，副溶血性弧菌。 气单胞菌属（Aeromonas）： 邻单胞菌属（Pleisionomas）：
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1、 病 毒 性 肝 炎：由病毒造成的肝炎按照其病毒系列不同分为甲、乙、丙 、丁、 戊和庚 共六种 类型病 毒性肝 炎。能 引起肝 脏细胞 肿胀， 是世界 上流传 广泛， 危害很 大的传 染病之 一。
1908年，才发现病毒也是肝炎的致病因 素之一 。1947年，将 原来的 传染性 肝炎（i nfectious hepatitis）称为甲型肝炎（Hepatitis A, HA）；血清性肝炎（serum hepatitis）称为乙型肝炎（Hepatitis B, HB）。1965年人类首次检测到乙型肝 炎的表 面抗原 。
我国经济和科学技术日益发展， 学术文 化领域 百家争 鸣，（df高血压 958心 脏病983u6糖尿 病87fr ）特别 是思想 家的革 新精神 ，为中 医学理 论的创 新和突 破性进 展，提 供了有 利的文 化背景 。宋代 陈无择 著《三 因极一 病证方 论》一 书，（45传染 病q566丙肝964jo乙肝 28jgsx甲肝gh）提出 三因学 说；并 产生了 最具盛 名四大 学派， 刘完素 倡导火 热论； 张从正 力倡“ 攻邪论 ”；李 杲提出 “内伤 脾胃， 百病由 生”的 理论； 朱震亨 创造性 地阐明 了相火 的演变 规律。
弧菌属螺杆菌属
霍乱肠毒素的作用机理
2.所致疾病
霍 乱 烈性肠道传染病，为我国的甲类法定传染病
传染源 病人、无ห้องสมุดไป่ตู้状感染者
传播途径 主要是通过污染的水源或食物经口摄入
临床表现 上吐下泻 剧烈腹泻和呕吐（米泔水样腹泻物）， 大量水分和电解质丧失 ，低容量性休 克及心力不齐和肾衰竭（死亡率高达60%）
“米泔水样”粪便
无盐培养基中不生长，氯化钠含量超 过8%不能生长。 神奈川现象：致病性副溶血性弧菌在Wagatsuma 琼脂平板上多出现β溶血。
副溶血性弧菌：临床意义
致病物质：菌毛（黏附作用）、溶血素。 传播方式：食入烹饪不当（不耐热、不耐酸）
的海产品或腌制品，可导致食物中毒。 临床表现：可从自限性腹泻至霍乱样腹泻。
别名
O抗原成份
稻叶型
A、C
小川型
A、B
彦岛型
A、B、C
O1群霍乱弧菌：生物型
古典生物型和EI Tor生物型。 相同性：两种生物型的霍乱弧菌在许多生物
学特性、临床表现和流行特点等方 面基本相同。 区别性：表现在某些生物学性状方面的差异。
霍乱弧菌的生物型
初筛试验（P270)
霍乱红试验；粘丝试验；O／ 敏感试验
鉴别试验
特征 鸡红细胞凝集
古典生物 型
—
V-P 试验
—
多粘菌素 B 敏感试验
+
Ⅳ组噬菌体裂解
+
Ⅴ组噬菌体裂解
—
El-Tor 生物型 + + — — +
抗原构造与分型（根据O抗原不同，现已有155个血清
群）
霍乱弧菌
O1血清分群 生物学分型 血清学分型
非O1群（ O139群） 小川型
弧菌属、杆菌属和厌氧性细菌
弧菌属Vibrio-----菌体短小，弯曲成弧形的G-菌体，在水面上生长较为活跃。
【霍乱弧菌】Vibrio cholerae一、生物学性状特征简述备注形态结构G-，弧形或逗点形，有菌毛，无芽孢，有些菌株有荚膜，有单鞭毛，运动很快（取病人米泔水样粪便或培养物作悬滴观察，细菌呈穿梭样或流星状运动）、排列如“鱼群”状①初次分离霍乱常用碱性蛋白胨水增菌②O1群和O139群引起霍乱，O1群又分为小川型、稻叶型和彦岛型，每一个血清型又分为古典生物型和ElTor 生物型③O139型在抗原性方面与O1群无交叉培养特性营养要求：不高，兼性厌氧，氧气充足的条件下生长得更好温度：18-37℃（可在外界生长）；pH：8.8-8.9培养结果：碱性琼脂培养基：圆形、透明或半透明S形、无色、扁平菌落TCBS培养基：菌落黄色、培养基暗绿色生化反应能分解葡蔗甘，产酸不产气；能还原硝酸盐；吲哚反应阳性，过氧化氢酶阳性，氧化酶阳性抗原O抗原（耐热）、H抗原（不耐热）抵抗力对热和一般的消毒剂敏感，100℃煮沸1-2min （55℃10min），不耐酸；对氯敏感（以1:4比例加漂白粉处理病人排泄物或呕吐物1h)二、致病性致病类型致病物质简述疾病侵袭力鞭毛运动有利于穿过肠粘膜表面的粘液层霍乱●甲类法定传染病●人是唯一易感者●O1群霍乱弧菌感可从无症状或轻型腹泻到严重的致死性腹泻●在吞食细菌后2-3天出现剧烈的腹泻和呕吐，最严重时，每小时失水量达1L，排出米泔水样腹泻物●古典生物型>ElTor型●O139>O1●病菌携带在胆囊里荚膜O139粘附素acf和tcpA编码的粘附素和菌毛蛋白毒素内毒素——外毒素霍乱肠菌素：cholera toxin最强致泻毒素热不稳定多聚体蛋白，前噬菌体ctxA/B基因流行病学：传染源：患者和无症状感染者传播途径：粪-口传播，不治疗，死亡率60%常见临床表现：洗衣工手、舟状腹、皮肤干皱且湿冷无弹性、烦躁声嘶口渴、眼窝深陷、两颊深凹（代谢性酸中毒、低碱血症、低容量性休克、心率不齐和肾衰）三、免疫力1、感染后可获得牢固的免疫力，再感染少见2、霍乱弧菌引起的肠道局部粘膜免疫是霍乱保护性免疫的基础3、O1群的免疫对O139没有交叉保护作用四、微生物检查1、新鲜时立即送检（Cary-Blair保持液）2、悬滴法观察细菌呈穿梭样运动有助于诊断3、用TCBS培养基：含有硫代硫酸盐、枸橼酸盐、胆盐及蔗糖，霍乱弧菌因分解蔗糖呈黄色菌落五、治疗：及时补充液体和电解质，预防大量失水导致的低容量性休克和酸中毒是关键【副溶血性弧菌】V.parahaemolyticus1、嗜盐耐碱：35g/L NaCl,pH:7.5-8.52、神奈川现象（KP)：在普通平板（含羊、兔和马血）上不溶血或α溶血，在含有高盐（7%)的人O型血或兔血及以D-甘露醇作为碳源的我萋琼脂平板上可产生β溶血（区别致病和非致病菌株）3、该菌主要存在于海产品中，因烹饪不当的海产品和腌制品传播，表现为自限性腹泻至中度霍乱样病症。
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弧菌属弯曲菌属幽门螺杆菌共28页
36、如果我们国家的法律中只有某种 神灵， 而不是 殚精竭 虑将神 灵揉进 宪法， 总体上 来说， 法律就 会更好 。—— 马克·吐 温 37、纲纪废弃之日，便是暴政兴起之 时。— —威·皮 物特
38、若是没有公众舆论的支持，法律 是丝毫 没有力 量的。 ——菲 力普斯 39、一个判例造出另一个判例，它们 迅速累 聚，进 而变成 法律。 ——朱 尼厄斯
55、 为 中 华 之 崛起而 读书。 ——周 恩来
40、人类法律，事物有规律，这是不 容忽视 的。— —爱献 生
谢谢！
51、 天 下 之 事 常成 于困约 ，而败 于奢靡 。——陆 游 52、 生 命 不 等 于是呼 吸，生 命是活 动。——卢 梭
53、 伟 大 的 事 业，需 要决心 ，能力 ，组织 和责任 感。 ——易 卜 生 54、 唯 书 籍 不 朽。——乔 特
36、如果我们国家的法律中只有某种 神灵， 而不是 殚精竭 虑将神 灵揉进 宪法， 总体上 来说， 法律就 会更好 。—— 马克·吐 温 37、纲纪废弃之日，便是暴政兴起之 时。— —威·皮 物特
38、若是没有公众舆论的支持，法律 是丝毫 没有力 量的。 ——菲 力普斯 39、一个判例造出另一个判例，它们 迅速累 聚，进 而变成 法律。 ——朱 尼厄斯
55、 为 中 华 之 崛起而 读书。 ——周 恩来
40、人类法律，事物有规律，这是不 容忽视 的。— —爱献 生
谢谢！
51、 天 下 之 事 常成 于困约 ，而败 于奢靡 。——陆 游 52、 生 命 不 等 于是呼 吸，生 命是活 动。——卢 梭
53、 伟 大 的 事 业，需 要决心 ，能力 ，组织 和责任 感。 ——易 卜 生 54、 唯 书 籍 不 朽。——乔 特