药物的分析方法与验证
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第四章 药物定量分析与分析方法验证
1、含卤素有机药物
含卤素有机药物是指分子结构中所含卤素直接与芳环
如果测得理论板数低于规定的最小理论板数， 应改变色谱柱的某些条件（如柱长、载体性能、色 谱柱填充的优劣等），使理论板数达到要求。
(2)分离度(R)
在定量分析时，要求定量峰与其他峰 或内标峰之间有较好的分离度。除另有规定 外，分离度应大于1.5。
分离度（R）的计算公式见下式：
R 2 t R2 t R1
含量（CX）= f
AX AS / CS
式中，AX为供试品峰面积或峰高；CX为供
试品的浓度 。
丙酸睾酮含量测定采用高效液相法：取本品 对照品适量，精密称定，加甲醇定量稀释成 每lmL中约含1mg的溶液。精密量取该溶液 和内标溶液（1．6mg/ml苯丙酸诺龙甲醇溶 液）各5ml，置25ml量瓶中，加甲醇稀释至 刻度，摇匀，取10μl注入液相色谱仪，记录
例
取盐酸麻黄碱0.1532g，精密称定， 加冰醋酸10ml溶解后，加醋酸汞试液 2ml与结晶紫指示液1滴，用HClO4滴 定至绿色，用去0.1022mol/L的高氯 酸滴定液7.50m1，空白试验消耗高氯 酸滴定液0.08ml。已知每1ml高氯酸 滴定液（0.1mol/L）当于20.17mg的 C10H15ON·HCl。试计算盐酸麻黄碱 的百分含量？（99.80％）
1.分离原理
吸附色谱 分配色谱 离子交换色谱 排阻色谱
吸附色谱
根据填充剂吸附活性 对样品的吸收系数不 同而分离
充填剂：硅胶
分配色谱
根据固定相与流动相的极性不同而分为 正相分配色谱和反相分配色谱 两者的区别如下图所示：
固定相
流动相
正相分配
极性
药物分析课件第4章药物定量分析与分析方法验证
○ A．做空白试验 B．做对照实验 ○ C．做回收试验 D．增加平行测定次数 ○ E．选用多种测定方法
[B型题]
HPLC。
按分离方法分为：PC；TLC；柱色谱；GC；
（一）HPLC法
1. 对HPLC仪器一般要求 色谱柱、流动相按品种项下要求。
色谱柱的理论板数：n = 5.54(tR /Wh/2)2
2. 系统性试验 于1.5
分离度：R = 2（tR1 – tR2)/(W1 + W2); 要大
拖尾因子：T = W /2d 应在0.9 ～
1. 原料药 可用已知纯度对照品或样品进行测定；或与已建准 确
度的另一方法测定的结果进行比较。 2. 制剂 要考察辅料对回收率的影响。采用在空白辅料中加入 原
料对照品的方法作回收率试验，然后计算RSD。 具体做法：测定高、中、低三个浓度，n=3, 共9个数据来评价
回收率的RSD＜2%；用UV和HPLC发时，一般
三．含量测定 常用的方法对照品比较
法:Ci = (Ri-Rib)/(Rr-Rrb) ×Cr
Ch.P收载地高辛片、利血平片、洋地黄毒苷片。
二．荧光分析仪 有二个单
色光器—激发单色光器与
发射单色光
器；且激发光源、样品池和检测器成直 角。
三、色谱分析法
按分离原理分为：吸附；分配；离子交换；排阻色 谱
方法分类
2. 用硫酸水解后测定法 例如：硬脂酸镁的含量测定
Mg(C17H35COO)2 + H2SO4
H2SO4 + 2NaOH
MgSO4 + 2C17H35COOH Na2SO4 + 2H2O
（三）经氧化还原后测定法
COOH
I
I
[B型题]
HPLC。
按分离方法分为：PC；TLC；柱色谱；GC；
（一）HPLC法
1. 对HPLC仪器一般要求 色谱柱、流动相按品种项下要求。
色谱柱的理论板数：n = 5.54(tR /Wh/2)2
2. 系统性试验 于1.5
分离度：R = 2（tR1 – tR2)/(W1 + W2); 要大
拖尾因子：T = W /2d 应在0.9 ～
1. 原料药 可用已知纯度对照品或样品进行测定；或与已建准 确
度的另一方法测定的结果进行比较。 2. 制剂 要考察辅料对回收率的影响。采用在空白辅料中加入 原
料对照品的方法作回收率试验，然后计算RSD。 具体做法：测定高、中、低三个浓度，n=3, 共9个数据来评价
回收率的RSD＜2%；用UV和HPLC发时，一般
三．含量测定 常用的方法对照品比较
法:Ci = (Ri-Rib)/(Rr-Rrb) ×Cr
Ch.P收载地高辛片、利血平片、洋地黄毒苷片。
二．荧光分析仪 有二个单
色光器—激发单色光器与
发射单色光
器；且激发光源、样品池和检测器成直 角。
三、色谱分析法
按分离原理分为：吸附；分配；离子交换；排阻色 谱
方法分类
2. 用硫酸水解后测定法 例如：硬脂酸镁的含量测定
Mg(C17H35COO)2 + H2SO4
H2SO4 + 2NaOH
MgSO4 + 2C17H35COOH Na2SO4 + 2H2O
（三）经氧化还原后测定法
COOH
I
I
药物分析含量测定方法与验证
药物分析含量测定方法与验证选择合适的测定方法是药物分析含量测定的首要任务。
常用的测定方法包括色谱法、光谱法、电化学法和滴定法等。
在选择方法时，需要考虑以下几个因素：1.应用对象：考虑药物的理化性质和活性成分的特点，选择适合的分析方法。
例如，对于具有荧光特性的活性成分，可以选择荧光光谱法进行分析。
2.灵敏度和准确度：选取具有良好灵敏度和准确度的方法，以确保对样品中微量活性成分的准确测定。
例如，高效液相色谱法(HPLC)和气相色谱法(GC)是常用的灵敏度高的色谱法。
3.可行性和经济性：考虑方法的可行性和经济性，选择合适的仪器设备和试剂，以确保分析成本和操作难度的控制。
在药物分析含量测定方法选择后，需要对方法进行验证以确保其准确性和可靠性。
药物分析含量测定方法的验证主要包括以下几个方面：1.精密度和重复性：重复测定多个样品，并计算其相对标准偏差(RSD)来评估方法的精密度。
RSD越小，说明方法的重复性越好。
2.准确度：与已知浓度的标准样品进行比较，计算方法的准确度。
一般使用回收率作为评价指标，回收率越接近100%，说明方法的准确度越高。
3.灵敏度和线性：测定一系列不同浓度的样品，并计算测定结果的线性相关性。
通常使用相关系数和回归方程来评估方法的线性。
4.特异性和选择性：分析样品中可能存在的干扰物质，并验证方法对活性成分的选择性。
一般通过添加干扰物质来测试方法的特异性。
5.稳定性：测试方法在不同条件下的稳定性，包括温度、湿度、光照等。
确保方法在不同条件下的测定结果一致。
除了以上验证的基本步骤，还需要根据具体的药物分析含量测定方法的特点和要求，进行其他适当的验证参数的测试。
在实际操作中，应制定详细的验证方案和实施计划，并按照规定的方案进行验证实验。
实验结果需要进行统计分析，并按规定的标准判断方法的验证结果。
综上所述，药物分析含量测定方法的选择和验证是确保药物质量稳定性和一致性的重要环节。
通过选择合适的方法和进行严格的验证，可以保证药物分析结果的准确性和可靠性，并为药物研发和生产提供科学依据。
药物分析方法的开发与验证
药物分析方法的开发与验证药物分析方法的开发与验证药物分析方法是药物研究的重要环节之一，它的开发和验证对于药物的质量控制和治疗效果的保障至关重要。
药物分析方法的开发和验证需要遵循一定的规范和流程，本文将从这两个方面进行阐述。
一、药物分析方法的开发药物分析方法的开发是指根据药物的特性和需求，设计出一种可靠、准确、灵敏、重复性好的分析方法。
药物分析方法的开发需要进行以下几个步骤：1. 确定分析目标：首先需要确定要分析的药物种类、成分及其含量范围等，以及需要达到的分析指标和要求。
2. 确定分析方法：根据药物的化学特性、分子结构等，选择合适的分析方法，如色谱法、质谱法、光谱法等。
3. 优化实验条件：进行实验前，需要对实验条件进行优化，如样品前处理、色谱柱选择、流速和波长等参数的调整等。
4. 确定分析参数：根据实验结果，确定分析参数，如检测限、定量限、线性范围、精密度和准确度等。
5. 编写操作规程：根据实验结果，编写操作规程，确保实验的可重复性和准确性。
二、药物分析方法的验证药物分析方法的验证是指通过一系列实验，证明该方法能够满足预期的分析指标和要求。
药物分析方法的验证需要遵循以下几个步骤：1. 确定验证参数：根据药物特性和需求，选择适合的验证参数，如精密度、准确度、线性范围、检测限和定量限等。
2. 进行实验验证：根据操作规程进行实验验证，并记录实验结果。
3. 数据处理：对实验结果进行数据处理和统计分析，计算出各项验证参数。
4. 判断结果：根据验证结果，判断该方法是否符合预期要求，并进行合理解释。
5. 编写报告：根据验证结果，编写验证报告，并加以存档。
总之，药物分析方法的开发和验证是药物研究中不可或缺的环节。
只有通过科学规范的方法开发和验证出可靠的分析方法，才能保证药物质量的稳定性和治疗效果的有效性。
因此，在药物研究中，应高度重视药物分析方法的开发和验证工作。
药物分析方法的设计和验证
第三节 药物分析中的有效数字 一、有效数字 （一）定义：分析中，实际能测量到的数字。
根据测定方法和使用仪器的准确程度来确定，只有最
后一位欠准，欠准度为±1。
例: 电子分析天平读数0.3526 滴定管体积读数22.25
2、有效位数确定 （1）0在数据中位置不同，作用不同。
例：1.002---4位，0.0980---3位，2.0×103---2位
第三章 药物分析方法的设计和验证 第一节 药物分析方法的分类和设计 一、分类
常量分析（0.1~1g或10~100mL）
按取样量分
半微量 (10~100mg或1~10mL)
微量分析 微量 (0.1~10mg或10uL~1mL)
超微量(<0.1mg或10uL)
按测定原理与操作方法 分
重量分析法
化学分析法 滴定或容量分析法
一、误差及其分类 （一）绝对误差和相对误差
（二）系统误差和随机误差
1、系统误 差
（1）方法误差
解决方法
（2）仪器和试剂误差 （3）操作误差
对照或空白试验 校正仪器
2、随机误差-----多次平行测定
3、测量结果检验-----方差分析 （t检验、G检验、F检验）
一、准确度和精密度 （一）准确度（Accuracy)
50.11.45 0.281 50.11.4 0.3 51.8
（二）乘除法 以有效数字最少的那个测量值为准（相对误差最大）。
例：0.231× 20.24÷3.2=14.9618 ≈15
三、药物含量测定结果的表达法
测量结果的有效数字的保留取决于仪器的精确度和要求。一 般滴定和重量分析取4位有效数字；仪器分析取3 位有效数字。
实例分析
苯溴马隆
药物分析 药物分析方法的验证
2. 验证方法
（1） 含量测定
1）基质无（原料药）/可模拟（制剂）
回收率(%)=
测得量 加入量
100
2）基质不可模拟（制剂、中药）
回收率(%)=
测得量 - 本底值 加入量
100
（2） 杂质检查——方法同2）
2. 验证方法（其他方法）
• 可与已知准确度的另一方法的测定结果比较 ——药典标准方法 / 经过验证的方法
• LOD是一种限度检验效能指标， 反映方法的灵敏度
1 直观法
目视法评价的方法: 化学反应 / TLC ——鉴别的显色法； 杂质检查的TLC
2 信噪比法
3 标准偏差/ 标准曲线
显示信号与噪声水平的方法: HPLC ——S/N=3（2） 时的相应浓度或量
其他分析方法: UV-Vis法
LOD 3.3 / S δ空白响应偏差
含量水平
限度（%）
100 % 10 % 1% 0.1%
98~101 95~102 92~105 90~108
0.01 % 10 g/g （ppm） 1 g/g （ppm） 10 g/kg （ppb）
85~110 80~115 75~120 70~125
（二） 精密度
1. 定义 • 同一均匀供试品多次取样测定 所得结果之间的接近程度 • 相对标准偏差（%， RSD）；
• 也可由所测定的精密度、线性和专属性推算 ——原料药含量HPLC测定法
3. 数据要求 • 9个测定结果（n=9）
3水平×3样品 • 化药：1 ︰ 0.8、1 ︰ 1、1 ︰ 1.2 • 中药: 1 ︰ 0.5、1︰1、1︰1.5
3. 数据要求
样品中被测成分的含量水平 与回收率限度 要求的关系
药物分析课件 第四章 药物定量分析与分析方法验证_OK
样品能在足够的氧气中燃烧分解完全样品能在足够的氧气中燃烧分解完全有利于将燃烧分解产物较快地吸收到吸有利于将燃烧分解产物较快地吸收到吸防止爆炸的可能性防止爆炸的可能性26燃烧瓶要洁净不能残留有机溶剂不能用有机润滑剂涂抹瓶塞要有防爆措施氧气要充足确保燃烧完全产物不能有黑色炭化物燃烧产生的烟雾要被完全吸收充分振摇和放置都是为了保证吸收完全例
③要有防爆措施 ④氧气要充足，确保燃烧完全，产物不能有黑色
炭化物 ⑤燃烧产生的烟雾要被完全吸收
充分振摇和放置都是为了保证吸收完全 例：碘产生紫色烟雾；氯、氟产生白色烟雾，烟
雾颜色完全消失后，即表示吸收完全 ⑥测定含氟有机化合物时要用石英燃烧瓶
26
4、应用
含卤素、硫、磷、氟及硒等有机药物的鉴别、杂 质的检查及含量测定
100%
注射剂：标示量％＝
V0
V T 标示量
100%
V VO
T F 标示量
100%
VO : 量取注射剂的体积， ml
36
(2)间接滴定法 1）生成物滴定法
供试品＋试剂 A 化合物 B
化合物 B＋滴定液 C 化合物 D
计量滴定液消耗的量，计算供试品的含量 计算同直接滴定法
37
2）回滴定法（剩余滴定法） 原理：先在待测样品溶液中加定量、过量的滴定
10
（一）湿法破坏
（1） 硝酸-高氯酸法 适用于血、尿、组织等生物样品的破坏，有
机金属药物经破坏后，得到的无机金属离子一 般呈高价态。
本法不能用于含氮杂环药物的破坏
干法灼烧法 11
（2） 硝酸-硫酸法 适用于大多数有机物质的破坏，破坏得到的
无机金属离子均为高价态。 不能用于含碱土金属有机药物的破坏
27
氧瓶燃烧
③要有防爆措施 ④氧气要充足，确保燃烧完全，产物不能有黑色
炭化物 ⑤燃烧产生的烟雾要被完全吸收
充分振摇和放置都是为了保证吸收完全 例：碘产生紫色烟雾；氯、氟产生白色烟雾，烟
雾颜色完全消失后，即表示吸收完全 ⑥测定含氟有机化合物时要用石英燃烧瓶
26
4、应用
含卤素、硫、磷、氟及硒等有机药物的鉴别、杂 质的检查及含量测定
100%
注射剂：标示量％＝
V0
V T 标示量
100%
V VO
T F 标示量
100%
VO : 量取注射剂的体积， ml
36
(2)间接滴定法 1）生成物滴定法
供试品＋试剂 A 化合物 B
化合物 B＋滴定液 C 化合物 D
计量滴定液消耗的量，计算供试品的含量 计算同直接滴定法
37
2）回滴定法（剩余滴定法） 原理：先在待测样品溶液中加定量、过量的滴定
10
（一）湿法破坏
（1） 硝酸-高氯酸法 适用于血、尿、组织等生物样品的破坏，有
机金属药物经破坏后，得到的无机金属离子一 般呈高价态。
本法不能用于含氮杂环药物的破坏
干法灼烧法 11
（2） 硝酸-硫酸法 适用于大多数有机物质的破坏，破坏得到的
无机金属离子均为高价态。 不能用于含碱土金属有机药物的破坏
27
氧瓶燃烧
药物分析-药物定量分析与方法验证
44
特点：
仪器简单－滴定管、锥形瓶等玻璃仪器。 操作方便－通过观察溶液颜色变化确定滴
9
测 定 方 法 ： 取 本 品 约 0.1g ， 精 密 称 定 ， 加 乙 醇 5ml溶解后，加20%氢氧化钠溶液5ml，加热回流 15min，放冷至室温，加水20ml与硝酸5ml，精 密加硝酸银滴定液(0.1mol/L) 30ml，再加邻苯二 甲酸二丁酯5ml，密塞，强力振摇后，加硫酸铁 胺指示液2ml，用硫氰酸胺滴定液(0.1mol/L)滴定， 并将滴定的结果用空白试验校正。每1ml硝酸银 滴 定 液 (0.1mol/L) 相 当 于 6.216mg 的 三 氯 叔 丁 醇 （C4H7Cl3O·1/2H2O）。
13
（1） 碱性还原后测定
例 泛影酸的测定 ChP (2000)
取本品约0.4g，精密称定，加氢氧化钠溶 液30ml与锌粉1.0g，加热回流30min，放冷，冷 凝管用少量水洗涤，滤过，烧瓶与滤器用水洗 涤3次，每次15ml，洗液与滤液合并，加冰醋 酸 5ml 与 曙 红 钠 指 示 液 5 滴 ， 用 硝 酸 银 滴 定 液 (0.1mol/L)滴定。每1ml硝酸银滴定液(0.1mol/L) 相当于20.46mg的C11H9 I 3N2O4。
富马酸亚铁 C4H2FeO4的含量测定
原理
d H2SO4
O
HC C O
C CH Oˉ
+
Fe2+
富马酸亚铁
Oˉ
富马酸
Fe2+ + Ce4+
滴定 Ce3+ + Fe3+
邻二氮菲指示剂
N
N
红色
Fe2+ + Ce4+
特点：
仪器简单－滴定管、锥形瓶等玻璃仪器。 操作方便－通过观察溶液颜色变化确定滴
9
测 定 方 法 ： 取 本 品 约 0.1g ， 精 密 称 定 ， 加 乙 醇 5ml溶解后，加20%氢氧化钠溶液5ml，加热回流 15min，放冷至室温，加水20ml与硝酸5ml，精 密加硝酸银滴定液(0.1mol/L) 30ml，再加邻苯二 甲酸二丁酯5ml，密塞，强力振摇后，加硫酸铁 胺指示液2ml，用硫氰酸胺滴定液(0.1mol/L)滴定， 并将滴定的结果用空白试验校正。每1ml硝酸银 滴 定 液 (0.1mol/L) 相 当 于 6.216mg 的 三 氯 叔 丁 醇 （C4H7Cl3O·1/2H2O）。
13
（1） 碱性还原后测定
例 泛影酸的测定 ChP (2000)
取本品约0.4g，精密称定，加氢氧化钠溶 液30ml与锌粉1.0g，加热回流30min，放冷，冷 凝管用少量水洗涤，滤过，烧瓶与滤器用水洗 涤3次，每次15ml，洗液与滤液合并，加冰醋 酸 5ml 与 曙 红 钠 指 示 液 5 滴 ， 用 硝 酸 银 滴 定 液 (0.1mol/L)滴定。每1ml硝酸银滴定液(0.1mol/L) 相当于20.46mg的C11H9 I 3N2O4。
富马酸亚铁 C4H2FeO4的含量测定
原理
d H2SO4
O
HC C O
C CH Oˉ
+
Fe2+
富马酸亚铁
Oˉ
富马酸
Fe2+ + Ce4+
滴定 Ce3+ + Fe3+
邻二氮菲指示剂
N
N
红色
Fe2+ + Ce4+
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• （3）对于有机酸的碱金属盐，通常采用水-乙醚双相溶剂，用盐酸滴定液滴 定。如苯甲酸钠的含量测定。
• （4）对于易水解的酯类药物，可采用定量过量加入碱滴定液水解后，用酸 滴定液回滴的剩余滴定法。如氯贝丁酯、阿司匹林片的含量测定。
• 示例： 氯贝丁酯(Clofibrate，降血脂药)的含量测定
• 取本品2 g，精密称定，置锥形瓶中，加中性乙醇(对酚酞指示液显中 性)10mL与酚酞指示液数滴，滴加氢氧化钠滴定液(0.lmol/L)至显粉红色，再 精密加氢氧化钠滴定液(0.5mol/L)20mL，加热回流1小时至油珠完全消失， 放冷，用新沸过的冷水洗涤冷凝管，洗液并入锥形瓶中，加酚酞指示液数滴， 用盐酸滴定液(0.5mol/L)滴定，并将滴定的结果用空白试验校正。每1mL氢 氧化钠滴定液(0.5mol/L)相当于121.4mg的C12H15ClO3。
第二法：测定有机弱酸及其盐类（异维A酸、苄氟噻嗪、环吡酮等）
• 第二法：除另有规定外，精密称取供试品适量 [约消耗碱滴定液(0.1 mol/L)8 mL]，加各品种 项下规定的溶剂使溶解，再加规定的指示液 1~2滴，用规定的碱滴定液(0.1 mol/L)滴定。 终点颜色应以电位滴定时的突跃点为准，并将 滴定的结果用空白试验校正。
• 为消除这些酸性物质的干扰，采用两步滴定法：
第一步—中和供试品中的各种酸性杂质，消耗的氢氧化钠量较少，故采用较 稀的碱滴定液(0.1mol/L)
第二步—水解后返滴定，加入定量过量较浓的碱滴定液(0.5mol/L)，进行加热 回流1h，以保证水解完全，并可以准确滴定剩余量。
（三）氧化还原滴定法
• 该法是以氧化还原反应为基础的滴定分析法，既可直接测定具有氧化性或还 原性的物质，又可间接测定不具有氧化性或还原性的物质。
• 滴定分析所用的溶剂为水或中性乙醇，根据药物的酸碱性、 溶解度和稳定性等性质进行选择。
• （1）如枸橼酸以水为溶剂，阿司匹林、丙磺舒、水杨酸、 布洛芬、苯甲酸等以中性乙醇为溶剂，以酚酞为指示剂， 用氢氧化钠滴定液直接滴定。
• （2）一些弱酸性或强酸弱碱盐药物，也可在水/与水混溶的有机溶剂中用氢 氧化钠滴定液直接滴定。如巴比妥类药物、盐酸利多卡因等，在该混合溶剂 中，有机溶剂不仅增加了药物的溶解度、稳定性，同时可增加滴定突跃范围。
第七章 药物的分析 方法与验证
药品质量标准分析方法验证的目的： 证明采用的方法适合于相应检测要求
在建立药品 质量标准时， 分析方法需 经验证
在药品生产工艺变更、制 剂的组分变更、原分析方 法进行修订时，则质量标 准分析方与特点 第二节 分析验证指标与要求 第三节 分析样品的制备 第四节 分析方法的转移与确认 第五节 标准物质的作用与研究建立
• 反应式如下：
CH3
Cl
+ O C COOC2H5
NaOH
Cl
CH3
(定量过量 )
CH3
+ O C COONa
C2H5OH
CH3
NaOH + HCl ( 剩余 )
NaCl + H2O
• 注释：一些含酯结构的药物在合成或贮存过程中可能引入酸性杂质，或在制 剂工艺过程中为增加稳定性，加入少量酒石酸或枸橼酸等作稳定剂。
亚硝酸钠滴定法
碘量法
铈量法
溴量法
(1) 亚硝酸钠滴定法
原理：利用亚硝酸钠滴定液，在较浓盐酸溶液 中，与具有芳伯氨基的化合物发生重氮化反应， 定量生成重氮盐，根据消耗亚硝酸钠的量来计 算药物含量的方法。
• 注意事项：该法中常用的碱滴定液为甲醇钠滴 定液、甲醇锂滴定液等。在滴定过程中应注意 防止溶剂和碱滴定液吸收大气中的二氧化碳和 水蒸气，以及滴定液中溶剂的挥发。
• 示例： 肾上腺素受体激动药 肾上腺素(Epinephrine)的含 量测定
取本品约0.15g，精密称定，加 冰醋酸10mL，振摇溶解后，加 结晶紫指示液1滴，用高氯酸滴 定液(0.lmol/L)滴定至溶液显蓝 绿色，并将滴定的结果用空白 试验校正。每l mL髙氯酸滴定 液(0.lmol/L)相当于18.32mg的 C9H13NO3。
1
常用质控方法的分类与特点
一、容量分析法
在中国药典中，容量分析法被广泛应用于化学原料药物的含量测定。 容量分析方法的特点：
①简便易行，方法耐用性高 ☺ ②测定结果准确(相对误差0.2%)☺
③方法专属性一般较差，对结构相近的有关物质或其他干扰测定的
杂质缺乏选择性☹
④一般适用于主成分含量较高的试样的分析☺
容量分析法
1 非水溶液滴定法 2 酸碱滴定法 3 氧化还原滴定法
容量分析法
直接滴定法 间接滴定法
剩余滴定法
直接滴定法：含量%=V F T 100%
W 1000
剩余滴定法：含量%=
(V0 V ) F T W 1000
100%
置换滴定法
式中：V为供试品消耗滴定液的体 积(mL)；V0为空白试验消耗滴定 液的体积(mL)；F为滴定液浓度校 正因子；T为滴定度(mg/mL)；W 为供试品的重量(g)。
（二）酸碱滴定法
• 酸碱滴定法(Acid-base Titration)是以质子转移反应为基础的 滴定分析方法，包括强酸强碱的滴定、一元弱酸弱碱的滴 定和多元酸碱的滴定。
• 在药物分析中，由于多数药物为弱酸、弱碱或其盐类；故 最常见的是应用强酸、强碱，滴定弱碱或弱酸
• 常用的滴定液有盐酸、硫酸、氢氧化钠等
（一）非水溶液滴定法
• 非水溶液滴定法(Non-aqueous Titration, ChP2015通则0702)：是在非水溶剂中 进行滴定分析的方法。
常用的非水溶剂
酸性溶剂
碱性溶剂
（冰醋酸、醋酐） （二甲基甲酰胺、乙二胺、乙醇胺）
第一法：测定有机弱碱及其盐类（多数胺类药物，含氮杂环类药物 等）
• 第一法：除另有规定外，精密称取供试 品适量[约消耗高氯酸滴定液 (0.1mol/L)8mL]，加冰醋酸10~30 mL使 溶解，加各药品项下规定的指示液1~2滴， 用高氯酸滴定液(0.1mol/L)滴定。终点颜 色应以电位滴定时的突跃点为准，并将 滴定的结果用空白试验校正。
• 注意事项：非水滴定受温度、溶剂的选 择、指示终点方法以及被测物酸根等因 素的影响
• （4）对于易水解的酯类药物，可采用定量过量加入碱滴定液水解后，用酸 滴定液回滴的剩余滴定法。如氯贝丁酯、阿司匹林片的含量测定。
• 示例： 氯贝丁酯(Clofibrate，降血脂药)的含量测定
• 取本品2 g，精密称定，置锥形瓶中，加中性乙醇(对酚酞指示液显中 性)10mL与酚酞指示液数滴，滴加氢氧化钠滴定液(0.lmol/L)至显粉红色，再 精密加氢氧化钠滴定液(0.5mol/L)20mL，加热回流1小时至油珠完全消失， 放冷，用新沸过的冷水洗涤冷凝管，洗液并入锥形瓶中，加酚酞指示液数滴， 用盐酸滴定液(0.5mol/L)滴定，并将滴定的结果用空白试验校正。每1mL氢 氧化钠滴定液(0.5mol/L)相当于121.4mg的C12H15ClO3。
第二法：测定有机弱酸及其盐类（异维A酸、苄氟噻嗪、环吡酮等）
• 第二法：除另有规定外，精密称取供试品适量 [约消耗碱滴定液(0.1 mol/L)8 mL]，加各品种 项下规定的溶剂使溶解，再加规定的指示液 1~2滴，用规定的碱滴定液(0.1 mol/L)滴定。 终点颜色应以电位滴定时的突跃点为准，并将 滴定的结果用空白试验校正。
• 为消除这些酸性物质的干扰，采用两步滴定法：
第一步—中和供试品中的各种酸性杂质，消耗的氢氧化钠量较少，故采用较 稀的碱滴定液(0.1mol/L)
第二步—水解后返滴定，加入定量过量较浓的碱滴定液(0.5mol/L)，进行加热 回流1h，以保证水解完全，并可以准确滴定剩余量。
（三）氧化还原滴定法
• 该法是以氧化还原反应为基础的滴定分析法，既可直接测定具有氧化性或还 原性的物质，又可间接测定不具有氧化性或还原性的物质。
• 滴定分析所用的溶剂为水或中性乙醇，根据药物的酸碱性、 溶解度和稳定性等性质进行选择。
• （1）如枸橼酸以水为溶剂，阿司匹林、丙磺舒、水杨酸、 布洛芬、苯甲酸等以中性乙醇为溶剂，以酚酞为指示剂， 用氢氧化钠滴定液直接滴定。
• （2）一些弱酸性或强酸弱碱盐药物，也可在水/与水混溶的有机溶剂中用氢 氧化钠滴定液直接滴定。如巴比妥类药物、盐酸利多卡因等，在该混合溶剂 中，有机溶剂不仅增加了药物的溶解度、稳定性，同时可增加滴定突跃范围。
第七章 药物的分析 方法与验证
药品质量标准分析方法验证的目的： 证明采用的方法适合于相应检测要求
在建立药品 质量标准时， 分析方法需 经验证
在药品生产工艺变更、制 剂的组分变更、原分析方 法进行修订时，则质量标 准分析方与特点 第二节 分析验证指标与要求 第三节 分析样品的制备 第四节 分析方法的转移与确认 第五节 标准物质的作用与研究建立
• 反应式如下：
CH3
Cl
+ O C COOC2H5
NaOH
Cl
CH3
(定量过量 )
CH3
+ O C COONa
C2H5OH
CH3
NaOH + HCl ( 剩余 )
NaCl + H2O
• 注释：一些含酯结构的药物在合成或贮存过程中可能引入酸性杂质，或在制 剂工艺过程中为增加稳定性，加入少量酒石酸或枸橼酸等作稳定剂。
亚硝酸钠滴定法
碘量法
铈量法
溴量法
(1) 亚硝酸钠滴定法
原理：利用亚硝酸钠滴定液，在较浓盐酸溶液 中，与具有芳伯氨基的化合物发生重氮化反应， 定量生成重氮盐，根据消耗亚硝酸钠的量来计 算药物含量的方法。
• 注意事项：该法中常用的碱滴定液为甲醇钠滴 定液、甲醇锂滴定液等。在滴定过程中应注意 防止溶剂和碱滴定液吸收大气中的二氧化碳和 水蒸气，以及滴定液中溶剂的挥发。
• 示例： 肾上腺素受体激动药 肾上腺素(Epinephrine)的含 量测定
取本品约0.15g，精密称定，加 冰醋酸10mL，振摇溶解后，加 结晶紫指示液1滴，用高氯酸滴 定液(0.lmol/L)滴定至溶液显蓝 绿色，并将滴定的结果用空白 试验校正。每l mL髙氯酸滴定 液(0.lmol/L)相当于18.32mg的 C9H13NO3。
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常用质控方法的分类与特点
一、容量分析法
在中国药典中，容量分析法被广泛应用于化学原料药物的含量测定。 容量分析方法的特点：
①简便易行，方法耐用性高 ☺ ②测定结果准确(相对误差0.2%)☺
③方法专属性一般较差，对结构相近的有关物质或其他干扰测定的
杂质缺乏选择性☹
④一般适用于主成分含量较高的试样的分析☺
容量分析法
1 非水溶液滴定法 2 酸碱滴定法 3 氧化还原滴定法
容量分析法
直接滴定法 间接滴定法
剩余滴定法
直接滴定法：含量%=V F T 100%
W 1000
剩余滴定法：含量%=
(V0 V ) F T W 1000
100%
置换滴定法
式中：V为供试品消耗滴定液的体 积(mL)；V0为空白试验消耗滴定 液的体积(mL)；F为滴定液浓度校 正因子；T为滴定度(mg/mL)；W 为供试品的重量(g)。
（二）酸碱滴定法
• 酸碱滴定法(Acid-base Titration)是以质子转移反应为基础的 滴定分析方法，包括强酸强碱的滴定、一元弱酸弱碱的滴 定和多元酸碱的滴定。
• 在药物分析中，由于多数药物为弱酸、弱碱或其盐类；故 最常见的是应用强酸、强碱，滴定弱碱或弱酸
• 常用的滴定液有盐酸、硫酸、氢氧化钠等
（一）非水溶液滴定法
• 非水溶液滴定法(Non-aqueous Titration, ChP2015通则0702)：是在非水溶剂中 进行滴定分析的方法。
常用的非水溶剂
酸性溶剂
碱性溶剂
（冰醋酸、醋酐） （二甲基甲酰胺、乙二胺、乙醇胺）
第一法：测定有机弱碱及其盐类（多数胺类药物，含氮杂环类药物 等）
• 第一法：除另有规定外，精密称取供试 品适量[约消耗高氯酸滴定液 (0.1mol/L)8mL]，加冰醋酸10~30 mL使 溶解，加各药品项下规定的指示液1~2滴， 用高氯酸滴定液(0.1mol/L)滴定。终点颜 色应以电位滴定时的突跃点为准，并将 滴定的结果用空白试验校正。
• 注意事项：非水滴定受温度、溶剂的选 择、指示终点方法以及被测物酸根等因 素的影响