兔抗人ERA多克隆抗体的纯化
兔抗人ERA多克隆抗体的纯化
・研究原著・文章编号：$%%&’(&)(*5%%$4%5’$77’%)兔抗人ERA多克隆抗体的纯化万亚坤$85，张俊杰$，陈南春$，陈苏民$%*$第四军医大学生化与分子生物学教研室，陕西西安&$%%)565西北农林科技大学生命科学院，陕西杨凌&$5$%%4关键词：人9:;；多克隆抗体；纯化中图分类号：:)<5=))文献标识码：;摘要>目的纯化兔抗人9:;的多克隆抗体。
方法在大肠杆菌中，表达重组/?@’A9BC融合蛋白。
表达产物先继以直链淀粉树脂亲和柱和"2D-B0E-$5凝胶柱过滤纯化。
将纯化的/?@’A9BC偶联于#F"’CGHIJCH-K"-DACB0E-L/上，制备亲和层析柱，纯化兔抗人9:;多克隆抗体。
结果!表达、纯化的/?@’A9BC，相对分子质量*/B4为&(M$%)，其纯度为<NO。
"从抗血清中纯化获得可与/?@’A9BC特异性结合的兔抗A9BC多克隆抗体。
结论获得了特异性较好的纯化兔抗A9BC多克隆抗体。
Purification of rabbit anti-human ERA poly-clonal antibodyP;#QC’R23$858SF;#T+23’UI-$8,F9##C3’GA23$8 ,F9#"2’1I3$$V-DCBH1-3H0W?I0GA-1IEHBX C3K/0.-G2.CB?I0.0YX8Z02BHA/I.’IHCBX/-KIGC.[3IJ-BEIHX8\I]C3&$%%))8"ACC3^I@B0JI3G-8,AI3C 5,0..-Y-0W_IW-"GI-3G-E8#0BHA‘-EH"GI’L-GA[3IJ-BEIHX0W;YBI’G2.H2B-C3K Z0B-EHBX8"ACC3^I@B0JI3G-8,AI3CKeywords>A21C3’9:;6D0.XG.03C.C3HIa0KX6D2BIWIGCHI03Abstract:Aim L0D2BIWX BCaaIH C3HI’A9BC D0.XG.03C.C3HIa0KX= Methods LA-B-G01aI3C3H W2EI03DB0H-I3/?@’A9BC‘CE-^’DB-EE-K I3HA-9=G0.I C3K‘CE D2BIWI-K HAB02YA C1X.0E-B-EI3 GAB01CH0YBCDAX G0.213C3K"2D-B0E-$5Y-.WIHBCHI03=LA-D2BI’WI-K/?@’A9BC‘CE G02D.-K H0HA-#F"’CGHIJCH-K E-DACB0E-L/H0 DB-DCB-CWWI3IHX GAB01CH0YBCDAX G0.213H0D2BIWX BCaaIH C3HI’A9BC D0.XG.03C.C3HIa0KX=Results!/?@’A9BC‘CE-^DB-EE-K C3K D2BIWI-K E2GG-EEW2..X‘IHA B-.CHIJ-10.-G0.CB1CEE*/B40W&(M $%)C3K IHE D2BIHX G02.K B-CGA Ca02H<NO="D2BIWI-K:CaaIH C3HI’A9BC D0.XG.03C.C3HIa0KX G02.K aI3K ED-GIWIGC..X H0/?@’A9BC=Conclusion LA-D2BIWI-K BCaaIH C3HI’A9BC D0.XG.03C.C3HI’a0KX ACE a-HH-B ED-GIWIGIHX C3K D2BIHX=-BC基因是在测定大肠杆菌基因组的序列时，在编码:#CE-!!!的B3G基因下游发现的$个开放读框，因其编码的氨基酸序列与人和酵母的:CE蛋白有部分相似之处，故命名9=G0.I:CE’.IR-基因*-BC4〔$〕。
兔抗人APE1多克隆抗体的制备及鉴定_曹晓静
#论著#文章编号:1007-8738(2009)04-0325-04兔抗人APE1多克隆抗体的制备及鉴定曹晓静1,戴 楠1,易维京1,李增鹏1,杨宇馨1,王 东1*,胡川闽2*(第三军医大学:1大坪医院野战外科研究所肿瘤中心,重庆400042;2检验系临床生化教研室,重庆400038)收稿日期:2008-12-02; 接受日期:2009-02-20基金项目:国家自然科学基金资助面上项目(30872975)作者简介:曹晓静(1980-),女,河北保定人,硕士生Te:l 023-********;E-m ai:l caoxiaoji ng2006@126.co m*Corres pond i ng authorsPreparation and characterizati on of rabbit ant-i hu m an apuri nic /apyri m i d-inic endonuclease(APE1)pol ycl onal an -ti bodyCAO X iao -jing,DAI N an,YI W ei -jing,L I Zeng-p eng,Y ANG Yu-x in,WANG D ong *,H U Chuan-m in *Cancer Cente r ,Instit u te of Su rgery R esearch ,D ap i ng H osp ita,l T h i rd M ilitary M edical U nivers it y ,Chongqi ng 400042,China [Abstract ] A IM:To p repare a rabb it an t-i hu m an apu rin i c /apyrm i i d in ic endonuclease po lyc l o na l antibody and then have its cha racterization ana lyzed .METH ODS :A rab -b it po l y clona l an tibody was p repared t h rough a mod ified rap -id m i m une p rocedu re and t hen it was pur ified us i n g a speci-f ic avid it y co lu m n .The e fficacy o f th is antibody was de t ected by EL I SA ,W estern b l o t and m i munoh ist ochem is try .RE -SULTS :The titer o f the an tis e ru m de t e r m ined by EL I SA was up to 1B 128000.The ka ff va l u e o f the antibody w as 8.96@10-6m o l/L .W est e rn b lot ana lysis showed the an tibody waso f h igh specific ity .The fina l pu rified an tibody was h i g h lyspe cific t o na tive f o r m o f APE 1p ro t e in i n m ice and ra ts .CONCLUS I ON :The rabb it an t -i human APE 1po lyc l o na l an t -i body w ith h igh tit er and specificity has been successf u lly pre -pared .It can be used no t on ly t o e lucida te the ro les o fAPE 1p ro t e in in m any m i por t ant ce llular p rocedures ,bu t a lso t o de -tect the exp ress i o n o f the APE 1p rote in i n m ice and ra t s .[K ey word s]APE 1;po lyc l o na l an tibody[摘要] 目的:制备兔抗人脱嘌呤/脱嘧啶核酸内切酶多克隆抗体并进行鉴定。
兔多克隆抗体的制备流程
兔多克隆抗体的制备流程下载温馨提示:该文档是我店铺精心编制而成，希望大家下载以后，能够帮助大家解决实际的问题。
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1. 免疫原制备。
选择具有免疫原性的抗原，如蛋白质、多肽或多糖等。
兔抗人RBBP10多克隆抗体的纯化
ｈ Ｒ Ｂ Ｂ Ｐ １ ０ ｐ ｏ ｌ ｙ ｃ ｌ ｏ ｎ ａ ｌ ａ ｎ ｔ ｉ ｂ ｏ ｄ ｙ ． Ｒ ｅ ｓ ｕ ｌ ｔ ｓ ① Ｐ Ｔ Ｃ—ｈ Ｒ Ｂ Ｂ Ｐ ｌ ｏ ｗ ａ ｓ ｅ ｘ ｐ ｒ ｅ ｓ ｓ ｅ ｄ ａ ｎ ｄ ｐ ｕ ｒ ｉ ｉ ｆ ｅ ｄ ｓ ｕ ｃ ｃ ｅ ｓ ｓ ｆ ｕ ｌ ｌ ｙ ｗ ｉ ｔ ｈ ｒ ｅ ｌ ａ ｔ ｉ ｖ ｅ ｍ ｏ ｌ ｅ ｃ ｕ ｌ ａ ｒ ｍ ａ ｓ ｓ （ Ｍｒ ）ｏ ｆ ８ ０×１ ０ ａ ｎ ｄ ｉ ｔ ｓ ｐ ｕ ｉ ｒ ｔ ｙ ｃ ｏ ｕ ｌ ｄ ｒ ｅ ａ ｃ ｈ ａ ｂ ｏ ｕ ｔ ９ ５ ％． ② Ｐ ｕ ｉ ｒ ｉ ｆ ｅ ｄ Ｒ ａ ｂ ｂ ｉ ｔ ａ ｎ ｔ ｉ —ｈ Ｒ Ｂ Ｂ Ｐ ｌ ０ ｐ ｏ ｌ ｙ ｃ ｌ ｏ ｎ ａ ｌ ａ ｎ ｔ ｉ ｂ ｏ ｄ ｙ ｃ ｏ ｕ ｌ ｄ ｂ ｉ ｎ ｄ Ｓ ｐ ｅ ｃ ｉ ｉ ｆ ｃ ａ ｌ ｌ ｙ ｔ ｏ Ｐ Ｔ Ｃ—
链 淀粉 树脂 亲合 柱 和 ｓ ｕ ｐ ｅ ｒ ｏ ｓ ｅ １ ２凝 胶 柱 过 滤 纯 化 ， 将纯 化 的 Ｐ Ｔ Ｃ—ｈ Ｒ Ｂ Ｂ Ｐ 。 偶联 于 Ｎ Ｈ Ｓ— ａ ｃ ｔ ｉ ｖ ａ ｔ ｅ ｄ Ｓ ｅ ｐ ｈ ａ ｒ ｏ ｓ ｅ 上 ， 制 备 亲 合 层 析 柱， 纯化兔抗人 Ｒ Ｂ Ｂ Ｐ 。 多 克隆 抗 体 。 结 果 ①表达 、 纯化 的 Ｐ Ｔ Ｃ—ｈ Ｒ Ｂ Ｂ Ｐ ， 。 的相对分 子质量 （ Ｍ ｒ ） 为８ ０×１ ０ 。 ， 纯度 为 ９ ５ ％； ② 从
．
Ｔｈ ｅ
ｐ ｕ ｉｆ ｒ ｉｅ ｄ ＰＴＣ — ｈ ＲＢＢＰ１ ０ ｗａ ｓ ｃ ｏ ｕ ｐｌ ｅ ｄ ｔ ｏ ｔ ｈ ｅ ＮＨＳ — ａ ｃ ｔ ｉ ｖ ａ ｔ ｅ ｄ ｓ ｅ ｐｈ ａ ｒ ｏ ｓ ｅ ”ｔ ｏ ｐｒ ｅｐ ａ ｒ ｅ ａ ｆ ｉｎ ｆ ｉ ｔ ｙ ｃｈ ｒ ｏ ｍａ ｔ ｏ ｇ ｒ ａ ｐ ｈｙ ｃ ｏ ｌ ｕ ｍｎ ｔ ｏ ｐ ｕ ｉｆ ｒ ｙ ｒ ａ ｂ ｂｉ ｔ ａ ｎ ｔ ｉ—
兔抗人降钙素多克隆抗体
（CMV-PP65）细胞巨化病毒Cytomegalovirus(CMV底基质磷脂蛋白)
S-0271R
◆兔抗人细胞巨化病毒多克隆抗体
◆200ul/800.00 1ml/2200.00 (100ug/200ul 500ug/1ml)亲和纯化抗体
◆降钙素受体是G蛋白偶联受体，有两种受体亚型，CT-R可与多种配体结合，如CGRP、Amylin等。CT-R在破骨细胞中含量最高，也存在于肾等多种器官组织内。分子量为:56KDa.
抗体动物种属来源缩写：R-兔、M-小鼠、r-大鼠、Sh-山羊、H-人
Cytochrome C细胞色素CS-0013R◆兔抗人、大鼠、小鼠Cytochrome C多克隆抗体
抗体动物种属来源缩写：R-兔、M-小鼠、r-大鼠、Sh-山羊、H-人
ER-α(Estrogen)
S-0122R
◆兔抗人、大鼠的雄激素受体多克隆抗体
◆200ul/700.00 1ml/1800.00 (100ug/200ul 500ug/1ml)亲和纯化抗体
◆WB=1:300-600 Elisa=1:500-1500 IP=1:50-150 IHC=1:300-600
◆200ul/900.00 1ml/2200.00 (100ug/200ul 500ug/1ml)亲和纯化抗体
◆WB=1:300-600 Elisa=1:500-1500 IP=1:50-150 IHC=1:300-600
◆细胞色素C是一种电子传递链蛋白为线粒体呼吸链必须的成分之一。在哺乳动物中，如此高度保守性蛋白常分布在线粒体内膜。新近研究证明细胞浆中细胞色素C激活细胞凋亡所必须的因子。在凋亡过程中，细胞色素C从线粒体膜易位到细胞浆，由细胞色素C激活Caspase-3(CPP32).细胞色素C的易位可被过量表达的Bcl-2阻断。细胞色素B与细胞色素C1和Rieske蛋白相结合而形成复合物Ш(也称细胞色素B-C1复合物)参与细胞呼吸链。细胞色素分子量：12.8KDa.
多克隆抗体的标准制备流程
多克隆抗体的标准制备流程包括以下步骤：
1.免疫原的选择：选择合适的免疫原，可以是蛋白质、多肽、细胞表面抗原等。
2.免疫动物的选择：选择适合的免疫动物，常见的包括小鼠、兔子等。
3.免疫动物的免疫：将免疫原注射到免疫动物体内，刺激其免疫系统产生特异性
抗体。
4.收集免疫动物的血清：在免疫动物免疫一段时间后，收集其血清，其中含有特
异性抗体。
5.抗体的纯化和鉴定：利用亲和层析、离子交换等方法对抗体进行纯化，并通过
蛋白质印迹、ELISA等方法对抗体进行鉴定。
6.抗体的保存：将纯化的抗体进行分装，并加入适量的防腐剂，放入-20℃的冰
箱中进行保存。
多克隆抗体的制备过程中需要注意以下几点：
1.免疫原的纯度和浓度要高，以保证产生的抗体特异性高、效价高。
2.免疫动物的种属差异会影响抗体的质量和效价，因此要选择与免疫原同种属的
动物作为免疫对象。
3.在免疫过程中要保证免疫原的质量和安全性，避免对动物造成不必要的伤害。
4.在纯化和鉴定抗体时，要选择合适的方法和试剂，以保证抗体的质量和特异性。
5.在保存抗体时要注意温度和湿度等环境因素，避免抗体失活或变质。
总之，多克隆抗体的制备是一个相对复杂的过程，需要严格按照标准流程操作，以确保抗体质量和安全性。
多克隆抗体的制备技术
多克隆抗体的制备技术
多克隆抗体的制备技术是一种利用多个B细胞克隆的方法，用于生产特定抗原的抗体。
具体步骤如下：
1. 抗原制备：首先，需要制备抗原。
抗原可以是蛋白质、病原体、多肽或其他分子，可以通过基因工程技术在大肠杆菌等表达系统中表达、纯化或合成。
2. 免疫小动物：将制备好的抗原注射到小动物体内（如小鼠、兔子或大鼠）作为免疫原。
这样做可以激发动物的免疫系统产生抗原特异性的抗体。
3. 收集抗体：收集免疫小动物产生的抗原特异性抗体。
一般情况下，可以通过静脉采血或收集腹水来获得抗体。
4. 抗体纯化：对采集到的抗体进行纯化，可以使用亲和层析或离子交换层析等技术进行精确的纯化。
5. 克隆：将纯化的抗体进行多次稀释，然后分别稀释至单个细胞级别。
接下来，将单个细胞分别种植在含有培养液的孔中，使其形成克隆。
6. 验证：对每个克隆进行酶联免疫吸附测定（ELISA）或其他检测方法验证抗体的特异性和亲和力。
7. 扩大培养：对验证合格的克隆进行扩大培养，使其产生大量的抗体。
通过以上步骤，可以制备出多个来自不同克隆的抗体，这些抗体可以与同一抗原结合，用于生物学研究、诊断和治疗等领域。
多克隆抗体纯化
多克隆抗体纯化一、简介抗原分子通常具有多个抗原决定簇，免疫动物后可刺激具有相应抗原受体的B细胞发生免疫应答，产生多种抗体。
由不同B细胞克隆产生的抗体称多克隆抗体；免疫血清实际上是含有多种抗体的混合物；具有不均一性。
特异性差，易导致超敏反应。
抗原亲和纯化一般用在多抗的纯化上，这种纯化方式去掉了血清中那些非特异性结合的抗体分子，得到的抗体分子基本上都是能特异性与抗原结合的。
抗原亲和纯化需要先将抗原偶联到柱料上，然后通过亲和层析的方式去除非特异性抗体及杂蛋白，得到特异性抗体。
通常采用的柱料为溴化氢预处理和N-羟基琥珀酰亚胺预处理琼脂糖凝胶柱料，前者适合偶联大分子，后者适合偶联小分子物质，在实际操作中还是需要根据情况进行选择。
二、技术操作（一）实验准备1．实验材料：兔子血清2．抗原偶联亲和柱的制备（1）试剂与耗材：1）材料：CNBr活化的交联琼脂糖-4B；2）试剂：①偶联液：Buffer A：1mM HCl，体积为1L；Buffer B（pH8.3）：8.4g NaHCO3（0.1M）+29.25g NaCl（0.5M）+2.5mL12% SKL（0.03%），加水定容至1L；②封闭液（pH8.0）：12.1g Tris-HCl（0.1M）+29.25g NaCl（0.5M），加水定容至1L；③清洗液（pH4.0）：29.25g NaCl（0.5M）+11.5mL冰醋酸，加水定容至1L；④亲和纯化试剂：1xPBS缓冲溶液（pH7.4），0.1M Gly-HCl（pH2.7）;⑤其他试剂：硫酸铵，考马斯亮蓝G-2503）仪器与设备：Thermo台式离心机miro17R酶标仪（2）实验步骤①清洗：称取0.2g的CNBr活化交联琼脂糖-4B到柱子中，用偶联液A（1mM HCl）清洗，再用偶联液B清洗3-4遍。
②偶联：用偶联液B溶解的蛋白与填料介质混合，室温旋转孵育1h或4℃过夜；再用偶联液B洗去多余的蛋白；③封闭：将上述填料转移到封闭液（0.1M Tris-HCl，pH8.0）中封闭，室温封闭2h或4℃过夜；④循环清洗：封闭液（pH8.0）和清洗液（pH4.0）交替清洗填料至少3个循环；⑤平衡：用1xPBS缓冲溶液（pH7.4）平衡填料⑥保存：4℃，20%乙醇；3.多抗亲和纯化（1）硫酸铵沉淀①样品预处理：取过滤后的血清，用1xPBS稀释4-5倍；②硫酸铵沉淀：称取终浓度为0.277mg/mL的硫酸铵（45%）。
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・研究原著・文章编号：$%%&’(&)(*5%%$4%5’$77’%)兔抗人ERA多克隆抗体的纯化万亚坤$85，张俊杰$，陈南春$，陈苏民$%*$第四军医大学生化与分子生物学教研室，陕西西安&$%%)565西北农林科技大学生命科学院，陕西杨凌&$5$%%4关键词：人9:;；多克隆抗体；纯化中图分类号：:)<5=))文献标识码：;摘要>目的纯化兔抗人9:;的多克隆抗体。
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将纯化的/?@’A9BC偶联于#F"’CGHIJCH-K"-DACB0E-L/上，制备亲和层析柱，纯化兔抗人9:;多克隆抗体。
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后来研究发现，-BC基因在原核生物中普遍存在，其与细菌的细胞分裂有关，是细菌生存与繁殖所必需的重要基因。
在真核生物*如蠕虫、金鱼草、小鼠和人4中，也存在与细菌-BC基因高度同源的基因〔5b c〕。
人-BC的GV#;于$<<(年被克隆，全长为$%)(aD，与原核细胞中-BC基因有很高的同源性；人9:;与大肠杆菌9:;的氨基酸序列有)%O相同，两者的相似性为N)O〔)〕。
目前，人们对于人-BC基因的功能尚不清楚。
我们采用融合表达载体D/"/’A9BC表达并纯化了/?@’A9BC，并以其制备的亲和层析柱，纯化了兔抗A9BC多克隆抗体。
$材料和方法$=$材料表达载体D/"/’A9BC由陈苏民教授构建并提供。
兔抗A9BC血清为本实验室制备。
胎儿组织取自水囊引产7个月胎儿。
直链淀粉树脂为?I0’_CaE公司产品。
"2D-B0E-$5、#F"’CGHIJCH-K "-DACB0E-及Z@_,，均为@ACB1CGIC公司产品。
超声粉碎仪为,d_9’@;:/9:公司产品。
激光薄层扫描仪为岛津公司,"’<%%%产品。
蛋白电泳与转移仪为?I0’:CK公司产品。
$=5方法$=5=$/?@’A9BC的表达与纯化将含有重组质粒D/"/’A9BC的表达菌株，在含有氨苄青霉素*$%% 1Y e_4的_?培养液中，)5f振荡培养过夜。
次日，按$O接种于:IGA培养基*$%Y e_蛋白胨、N Y e_酵母提取物、N Y e_#C,.和5Y e_葡萄糖4中8再于)5f振荡培养。
待;7%%31值g%=N时8加入!!!!!!!!!!!!!!收稿日期：5%%%’%&’%)6修回日期：5%%%’$$’%<基金项目：国家自然科学基金资助8#0=)<(&%)(%6全军医药卫生科研基金资助，#0=<(/$%(作者简介：万亚坤*$<&7’4，男，新疆阿勒泰人，硕士生西安市长乐西路$&号%通讯作者>91CI.=,A-3E1h W112=-K2=G3L-.=*%5<4))&7N<<!89:至终浓度为%;)110.<=诱导表达>?@以>%%%A <1B3离心5%1B3。
收集菌体@按每C 菌体*湿重4加$%1=DBE?培养基，于’5%F 放置过夜。
次日，将菌体悬浮液在冰水浴中超声裂解51B3@以G %%%A <1B3>F 离心)%1B3，收集上清液。
将含有直链淀粉树脂的亲和柱，用柱缓冲液*5%110.<=9ABH’I,.、5%%110.<=#J,.及$110.<=KL9M NI&;>4充分平衡后，加入裂解上清液，再用柱缓冲液洗脱至基线。
然后用含有$%%110.<=麦芽糖的柱缓冲液洗脱，分部收集，并以"L"’8M:K 确定目的蛋白所在组分。
收集/O8’?KAJ 纯度较高的洗脱组分，加入到"2N-A0H-$5凝胶柱过滤@用8O"洗脱，收集各洗脱峰@并以"L"’8M:K 鉴定所在组分的位置。
将纯化的/O8’?KAJ 冻干，置’&%F 保存。
$;5;5/O8’?KAJ 亲和层析柱的制备将纯化的/O8’?KAJ 溶解于交联缓冲液*%;510.<=#JI,P )和%;Q 10.<=#J,.NI(;)4至蛋白浓度为)C <=。
用冰冷的$110.<=I,.洗涤#I"活化的"-N?JA0H-9/柱，然后立即注入含有/O8’?KAJ 的交联缓冲液密封柱，与室温下作用$Q R )%1B3。
用缓冲液M *%;Q 10.<=乙醇胺和%;Q 10.<=#J,.NI(。
)4和缓冲液O *%;$10.<=乙酸盐和%;Q 10.<=#J,.NI&;>4依次轮流洗柱)遍，最后再以NI &;%的缓冲液*%;%Q 110.<=#J 5I8P >含%;$S #J#)4洗涤后，储存备用。
$;5;)兔抗?KAJ 多克隆抗体的纯化将冻干的抗血清用8O"*%;510.<=NI&;>4溶解。
同时将$;5;5中制备的亲和层析柱用8O"充分平衡。
将8O"溶解的抗血清循环上样，经$%倍柱体积的8O"冲洗后@用甘氨酸’I,.溶液*%;$10.<.NI5;)4洗脱。
收集洗脱液，以$10.<=9ABH’I,.NI(;%调至中性@加入%;%5S #J#)，并置>F 保存备用。
$;5;>T-HU-A3V.0U 分析以纯化的兔抗?KAJ 抗体为一抗@碱性磷酸酶标记的羊抗兔!C:为二抗，通过碱性磷酸酶显色系统*O,!8@#O84进行检测，具体方法参照文献〔Q 〕。
5结果5;$MBP-hEra 的表达与纯化将含有表达载体N/"/’?KAJ 的大肠杆菌诱导后@经"L"’8M:K 分析，可见/A 为&(W $%)的新生蛋白带@大小与预期的结果相符。
/O8’?KAJ 的表达量随着诱导时间的延长而增加@以诱导>?最高，占总蛋白的5);GS ，随后下降*图$4。
有>%S 的/O8’?KAJ 以可溶性形式存在于裂解菌的上清中。
裂解上清经直链淀粉树脂亲和层析纯化@得到如下图谱*图5M 4，所得/O8’?KAJ 的纯度达7&S 。
纯化的/O8’?KAJ 洗脱液再经"2N-A0H-$5凝胶柱过滤纯化，得到比较对称的单一峰*图5O 4，"L"’8M:K 显示为单一条带，纯度为GQS *图)4。
图1诱导不同时间表达的MBP-hEra 的SDS-PAGE 分析Fig 1SDS-PAGE analysis of MBP-hEra expressed by differentinduction time$X 8A0U-B31JAY-A */A 465X #0’B3Z2E-Z VJEU-ABJ6)R (X OJEU-ABJ B3Z2E-Z [A01$?U07?;图2MBP-hEra 纯化的色谱图Fig 2Chromatography of MBP-hEraMX ,?A01JU0CAJN?\0303J1\.0H-A-HB3E?A01JU0CAJN?\E0.213OX ,?A01JU0CAJN?\03]8=,"2N-A0H-$5C-.E0.213;!X TJH?-Z N-JY6"X PV^-EU-ZN-JY;图3可溶性MBP-hEra的纯度检测Fig3The purity detection of soluble MBP-hEra $89:0;-<31=:>-:*/:4658"2?-:3=;=3;0@.AB=;-6)89:-C<?<;=;-0@.AB=;-6 D8#0’<3E2C-E F=C;-:<=6G8!3E2C-E F=C;-:<=678H:=C;<03-.2;-E@:01 =1A.0B-:-B<3=@@<3<;A CI:01=;0J:=?IA C0.2136&8H:=C;<03-.2;-E@:01 "2?-:0B-$5J-.@<.;-:=;<03C0.213K5K5兔抗hEra多克隆抗体的纯化与特异性其纯化色谱图与图5L相似，出现一主峰，经检测为兔抗IM:=多克隆抗体。