一例猪繁殖与呼吸综合征的RT-PCR诊断
高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒的RT-PCR鉴别诊断方法
（Ｒ Ｓ Ｐ Ｒ Ｖ）ｗ ｓｄｓ ｎ ｄ ａ ｄ ａｍ ｔｏ ｆＲ －Ｃ ａ ｅｅ ｐｄ ｔ ｄｓｎ ｕｓ ｅｈｇｌ ｐｔｏｅ ｉ ａ ｅｉ ｅ ｎ ｅ ｄ ｏ Ｔ Ｐ Ｒ ｗ ｓｄｖｌ ｅ ｏ ｉ ｉｇｉ ｔ ｉ ｙ ａ ｇｎｃ ｇ ｈ ｏ ｔ ｈｈ ｈ ｈ
ＰＲＲＳ ｆｏ ｔ ｅ ｃ ａ ｓｃ ａｔｎｕ ｔ ｄ ｖ ｃ ｉ ｅ ｓｒ ｉ ． Ｔｈ ｔ ｏ ｓ ｓ ｎ ｉｉｅ ｔ ｅｅ ｔ ａ ｏ ａ ． ｇ Ｖ ｒ ｍ ｌｓ ｉ ｔｅ ａｅ ａ ｃ ｎ ｔａ ｎ ｈ ｅ ｍｅ ｄ ｗａ ｅ ｓｔ ｏ ｄ ｔ ｃ ｓ ｌｗ ｓ０ ２ ｎ ｈ ｖ ｖｒ ｌｇ ｎ ｍｅ．ＰＣＶ２，ＰＲＶ ，Ｐ ｉａ ｅ ｏ ＰＶ ｎ ａ ｄ ＣＳＦ ｗｅ ｅ ｎ ｇ ｔｖ ｎ ｔ ｅｒｒ ａ ｔ ｎ ． Ｖ ｒ ｅ ａｉｅ ｉ ｉ ｅ ｃｉ ｓ ｈ ｏ
ｔ ｅａｄ ｒｓｉ ｔ ｙ ｄ ｍ ｉ ｓ， Ｒ Ｓ 所 致 的 ｔ ｉ ｓ（ Ｖ 为代表 的 欧洲 型 ．近年 来 ， Ｒ Ｓ ｉ ｎ ｅｐ ａ ｒ ｓｎ ｒ ｅｖ ｕ Ｐ Ｒ Ｖ） ｖ ｒｏ ｙ ｏ ｒ ａｖ ｄ ｒ Ｌ） ｕ Ｐ Ｒ Ｖ的
猪 繁殖 与呼 吸综合 征 （ｏｃ ｅｒｐｏｕｔ ｅａｄｒｓｉ 变异 现象 引起 了人们 的关 注 ， ｐｒｉ ｒｄｃｖ ｎ ｐｒ ｎ ｅ ｉ ｅ — 国外 的研 究 表 明 ， 同一 ａ ｒ ｙｄｏ ， Ｒ Ｓ ， ｔ ｓｎｒｍｅ Ｐ Ｒ ） 是一 种 以妊娠母 猪 的 繁殖 障 基 因型 的分 离 毒 株 之 间存 在 明显 的序 列 差异 ， 别 ｏ ｙ 特
Ｄｉ ｇ ｏ ｉ ｎｄ Ｉ ｎ ｉ ｃ ｔｏ ｆｔ ｇ ｙ Ｖｉｕ ｅ ｔＰｏ ｃｎｅ Ｒｅ ｒ ｄ ｔｖ ａ ｎ ｓｓａ ｄｅ ｔｆ ａ ｉ ｎ ｏ ｈｅ Ｈｉ ｈｌ ｒ ｌｎ ｒ ｉ ｐ ｏ ｕｃｉ ｅ ｉ
猪繁殖与呼吸综合征病毒RT—PCR鉴别诊断技术及临床应用
能 区分 Ｐ Ｒ Ｒ Ｓ Ｖ变异株 和经 典株病原的特异性 引物 ，预 期扩增产 物长度分别 ２ ４ １ ｂ ｐ（ 变异 株 ，Ｔ Ｊ Ｍ— Ｆ ９ ２ 株 ）和 ３ ３ ２ ｂ ｐ（ 经典株 ，ｃ Ｈ 一 １ Ｒ 株） 。
之 一 ，因 此对 猪 繁 殖 与呼 吸 综合 征 进 行 有效 的预 防 和控 制 ，研 究 能快 速 区 分猪 繁 殖 与 呼 吸综 合 征病 毒 变 异株 和
猪繁殖与呼吸综合征弱毒活疫苗 （ 经典株 ，Ｃ Ｈ 一 １ Ｒ 株） ，购 自上海海利生物药品有限公司 ；高致病性猪 繁
殖 与 呼 吸综 合 征 活 疫 苗 （ 变 异 株 ，Ｔ Ｊ Ｍ — Ｆ ９ ２ 株 ） ，购 自
照Ｐ Ｅ Ｒ 引 物 设 计 原 则 ，用 Ｄ Ｎ Ａ Ｓ Ｔ Ａ Ｒ软 件 设 计 了 １ 对
变异株其与经典株相 比，存在序列上 的缺失 ，即其中的 ｎ ｓ ｐ ２基 因存 在两处不 连续 的缺失 ，在 ｎ ｓ ｐ ２基因两端设 计特异性引物来鉴别猪繁殖与呼吸综合征病毒变异株和 经典株感染。现在大部分猪场 ，特别是中小 型规模猪场 都存在有高致病性猪繁殖与呼吸综合征和经典猪繁殖 与
欧 洲型 和 北 美 洲 型 两个 基 因型 ，我 国 流行 以北 美洲 型 为 主 ，而 此 次 大 流 行 的 高 致 病 性 Ｐ Ｒ Ｒ Ｓ Ｖ 仍 为 北 美 洲 型
１ － ３引物设计合成
根据Ｇ ｅ ｎ Ｂ ａ ｎ ｋ 上 已发表 的Ｐ Ｒ Ｒ Ｓ Ｖ变 异 株 和 经 典 株 的ｎ ｓ ｐ ２ 基 因序 列 （ Ｎ ｏ ． Ａ Ｙ ０ ３ ２ ６ ２ ６ ；Ｎ ｏ ． Ｅ Ｆ ６ ３ ５ ０ ０ ６） ， 按
采用RT-PCR方法诊断猪繁殖与呼吸综合征
采用RT-PCR方法诊断猪繁殖与呼吸综合征吕娜娜【期刊名称】《山东畜牧兽医》【年(卷),期】2019(040)001【总页数】2页(P30-31)【作者】吕娜娜【作者单位】山东畜牧兽医职业学院宠物科技系,山东潍坊 261061【正文语种】中文【中图分类】S854.4+3山东某猪场发生以猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)为主要特征的疾病。
笔者对送检的病料进行了实验室诊断：剖检主要发现肺水肿，出血；组织病理学检测主要发现肺间质明显增宽，肾小管上皮肿胀；采用RT-PCR检测方法检测猪肺脏组织，结果被验样品在400bp扩增带为PRRSV阳性，阴性对照无扩增带出现。
诊断结果表明：该猪场发生的病例为猪繁殖呼吸障碍综合征。
猪繁殖与呼吸综合征(Porcine reproductive and respiratory syndrome，PRRS)，俗称蓝耳病，由猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)引起的一种有高度传染性的猪综合征。
目前根据基因序列和抗原特性的不同，PRRSV可划分为I型(原欧洲型，代表毒株为Lelystad virus株)和II型(原美洲型，代表毒株为ATCCVR-2332株)。
1987年最早发现于美国(Zeman等，1993)，1994~1995年从美国引种传入我国。
1996年我国郭宝清等第一次分离出该病毒(郭宝清等，1996)。
2001~2002年发生跨省区流行；由南向北扩散、蔓延、由华东、华南、华北、东北等10个省市(县) 发病。
2006年5月下旬起，以高热病为特征的蓝耳病，首先在南方省市发病，同年11月至12 月延伸到东北地区，全国共有19个省市(县)出现疫情(林荣泉，2007)。
2008年，我国将高致病性蓝耳病列为一类动物疫病，并进行强制免疫。
在自然流行中，PRRS仅见于猪，其他家畜和动物未见发病。
不同年龄、品种、性别的猪均可被感染，生长猪和育肥猪感染后症状比较温和，母猪和仔猪的症状则较为严重。
猪繁殖与呼吸综合征RT-PCR诊断
猪繁殖与呼吸综合征RT-PCR诊断陈圣丰（生物工程 2 班）摘要:本试验采用RT－PCR方法来诊断猪疑似PRRS病毒结果为阳性，目前RT－PCR方法已经广泛应用于科研和生产中，该方法是分子生物学中的重要手段之一，是从生物界的微观领域研究生物的多用途工具,与传统的血清中和试验、酶联免疫吸附试验等方法相比具有高效特异和快速诊断和广泛实用等优点。
也是目前国内外最先进的分子生物学方法。
通过RT－PCR方法试验的多次摸索，以便熟练分离和扩增出不同类型的PRRSV株目的基因，掌握用RT－PCR技术在实验或临床上快速检测和诊断出某猪场疑似PRRS的目的。
本试验最重要的结果是扩增出PRRSV基因片段和确定其毒株类型，证实该病料带有PRRSV阳性。
因此，RT-PCR方法的建立为PRRS核酸的快速、准确诊断以及进行分子流行病学的调查和防治PRRSV提供了新的技术手段。
关键词:猪繁殖与呼吸道综合征; 核酸检测; RT－PCREstablishment of RT-PCR Method for Diagnosing Porcine Reproductive and Respiratory SyndromeCHEN Sheng-feng03 Bio-engeneering 2 classAbstract: This test adopts RT-PCR method to diagnose it is positive that the pig suspected PRRS virus result is,RT-PCR method has already been applied to scientific research extensively and in the production at present, This method is one of the important means in molecular biology, Study the biological multiuse tool from the micro field of the living nature, until traditional serum neutralize, test, enzyme unite immunity absorb method of testing etc. compare, have high-efficie. It is a domestic and international most advanced molecular biology method at present too, Try to find out many times through what RT-PCR method tested, In order to separate and amplify out different kinds of PRRSV a purpose genes skillfully, Measure and diagnose some pig farm suspected PRRS of purposes fast on mastering in the experiment with RT-PCR technology or clinical, It is to amplify PRRSV genetic fragment out and confirm its poisonous types to originally test the most important result, there is positive PRRSV to verify this pathological material of disease. So RT-PCR foundation of method core sour fastKey words:porcine reproductive and respiratory syndrome; detect ion of RNA; reverse transcription and polymerase chain reaction (RT-PCR)猪繁殖和呼吸综合征(Porcine reproductive and respiratory syndrome, PRRS) 是一种由猪繁殖和呼吸综合症病毒(PRRSV)诱发的世界性高度接触性传染病。
猪繁殖与呼吸综合征的RT-PCR检测报告
猪繁殖与呼吸综合征的RT-PCR检测报告
邹玲
【期刊名称】《畜禽业》
【年(卷),期】2009(0)7
【摘要】@@ 猪繁殖与呼吸综合征(Porcinereproductive and respiratory syndrome,PRBS)是由猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)引起的一种以母猪繁殖障碍和仔猪呼吸道疾病为特征的传染病[1].
【总页数】1页(P70-70)
【作者】邹玲
【作者单位】青岛农业大学动物科技学院,山东,青岛,266109
【正文语种】中文
【中图分类】S58.28
【相关文献】
1.复合RT-PCR检测猪繁殖与呼吸综合征和猪瘟及猪流感等3种病毒方法的建立[J], 夏俊;石进纯;成进;张美玲;陆桂丽;汪萍
2.猪繁殖与呼吸综合征病毒与猪流感病毒二重RT-PCR检测方法的建立 [J], 王洪光;汤德元;曾智勇;罗险峰;李春燕;郝飞;刘建;李达
3.多重荧光RT-PCR技术检测猪流感病毒、猪乙型脑炎病毒、猪瘟病毒、猪繁殖与呼吸综合征病毒方法的建立 [J], 梁晓艳;万东山;郭兰英
4.多重RT-PCR检测猪口蹄疫病毒、猪水泡病病毒和猪水疱性口炎病毒的研究 [J], 祁会彩;龚振华;杨增岐;郑增忍;潘康锁;李葳;黄秀梅;郭福生;蒋正军
5.猪繁殖与呼吸综合征和猪流感复合RT-PCR方法的建立及应用 [J], 柴春霞;夏平安;崔保安;张红英
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一例猪蓝耳病的实验室诊断
一例猪蓝耳病的实验室诊断佚名【摘要】运用实验室分子诊断技术对湖南岳阳某猪场一例疑似猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)感染病例进行确诊,测定并分析其基因序列,为猪蓝耳病的防控提供依据.采集病猪淋巴组织提取RNA,采用逆转录—聚合酶链式反应(RT-PCR)检测病毒核酸,构建重组栽体,经序列测定,利用DNAStar等生物信息学软件进行序列分析.结果显示,RT-PCR产物大小为657 bp,同源性比较结果显示,此毒株ORF5基因核苷酸序列与与经典美洲型毒株VR-2332的同源性为83.4％,与我国经典毒株CH-1a株的同源性为85.4％,与高致病性代表株HUN4和JXA1的同源性分别为84.5％和84.3％,与欧洲经典型毒株LV的同源性为62.8％,与GDZS2016和GD/YJ/2014的同源性分别为95.0％和95.9％.遗传进化分析表明,此毒株属美洲型毒株;美洲型毒株下分两个亚群,以近年来新流行的GDZS2016和GD/YJ/2014毒株为代表的Ⅰ亚群和以HuN4、JXA1和VR-2332等为代表的Ⅱ亚群,此毒株与GDZS2016和GD/YJ/2014等同属Ⅰ亚群.结果表明,此次病例是由美洲型PRRSV毒株感染引起,将此毒株命名为HuNYY201805.【期刊名称】《湖南畜牧兽医》【年(卷),期】2018(000)006【总页数】5页(P17-21)【关键词】PRRSV;ORF5;RT-PCR【正文语种】中文【中图分类】S858.28;S855.3猪蓝耳病又称猪繁殖与呼吸系统综合症（Porcine reproductive and pespiratory syndrome,PRRS）是由猪蓝耳病病毒（Porcine reproductive and pespiratory syndrome virus,PRRSV）引起以繁殖障碍和呼吸道为主要症状的高度接触性动物传染病[1]。
该病导致猪发热、呼吸不畅、早产、发情推迟、死胎或弱胎增多等现象，同时该病还会导致猪免疫力下降，易继发多种疾病，发病不分年龄段和品种，但尤以怀孕的母猪和仔猪最易感[2]。
猪繁殖与呼吸道综合征病毒RT-PCR检测方法研究
猪 繁 殖 与 呼 吸 综 合 征 （ｏｃｎ ｅｒｄ ｃｖ 省时、省力、快速 、敏感、高效等特点 。本试验 Ｐ ｒｉｅ ｒｐｏｕｔ ｅ ｉ
ａ ｄｒｓ ｉ ｔｒ ｖ ｄｏ ｅ Ｒ Ｓ ｎ ｅｐｒ ｏｙｓｎ ｒｍ ，Ｐ Ｒ ），又 称 “ 蓝 耳 利用 分子生物 学软件设计 了扩 增 Ｐ Ｒ Ｖ保 守基 ａ 猪 ＲＳ
立 了 Ｐ Ｒ ＶＲ — Ｃ Ｒ Ｓ Ｔ Ｐ Ｒ检测 方法 。临床 试验 证 明
Ｐ Ｓ ） 引起 的 ， 以母 猪 发 热 、厌 食 和 流 产 、死 该 方 法 能 特 异 、 敏 感 、 快 速 地 从 病 料 中检 测 出 ＲＲ Ｖ 产 、木 乃伊 胎 、弱 仔 等 繁殖 障碍 以及 仔猪 的 呼吸 Ｐ Ｒ Ｖ Ｒ Ｓ ，为猪 繁殖与 呼吸综合征病毒的临床快速 道症 状 和 高 死 亡 率 为特 征 。该 病 １８ ９ ７年 首 次 爆 诊 断和流行病 学的研究奠定 了基础 。
延到全 国。后来被诊断为高致病性猪繁殖与呼吸 品 有 限公 司 。 综合 征 病 毒所 致 ，给 我 国养 猪 业 造 成 了极 大 的经 １２ 细 胞 Ｍａｃ １５细 胞 、Ｐ 一 ５细胞 （ Ｐ Ｖ一 ． ｒ一 ４ Ｋ１ 无 Ｃ
济损 失 。
１ 染 ） Ｈ 一 １细胞 由本 实 验 室保 存 。 污 、Ｂ Ｋ ２
似病猪采取病变组织器官 ３ ３份 ， 用 已 建 立 的
１５ 病 毒 的 培养 与 收 获 ．
长 成 单层 的 Ｐ 一 ５ Ｒ — Ｃ Ｋ １、 Ｔ Ｐ Ｒ方 法 进 行 检 测 。
Ｍａｃ １５细 胞 分 别 接 种 Ｃ Ｆ ｒ一 ４ Ｓ Ｖ、 Ｐ Ｒ Ｖ。 Ｃ Ｆ ２ 结 果 与分 析 Ｒ Ｓ ＳＶ
发于美国后 ，迅速 蔓 延至 全 球所 有养 猪 国家 和 １ 材料 和 方 法 地 区 ［４。２０ １１ ０ ６年 夏 天 ，我 国南 方 一 些 地 区 的 养 １１ 病 毒 Ｐ Ｒ Ｖ － ． Ｒ Ｓ 、Ｐ Ｖ Ｒ 、Ｐ Ｖ一 Ｐ 、Ｐ Ｖ Ｃ ２等 为
猪繁殖与呼吸综合征综述及RT—PCR检测
猪繁殖与呼吸综合征综述及RT—PCR检测作者：牛宪翔来源：《农民致富之友》2016年第24期[摘要] 猪繁殖与呼吸综合征（PRRS）又称蓝耳病，以母猪的繁殖障碍和呼吸系统疾病为主要症状，由PRRS病毒引起。
该传染病主要引起的症状是发热、厌食，母猪怀孕后期导致流产，木乃伊胎、死胎、弱仔等；对幼龄仔猪损害比较大，会引起呼吸系统疾病，死亡率很高。
[关键词] 猪繁殖与呼吸综合征 RT-PCR[中图分类号] S831 [文献标识码] A [文章编号] 1003-1650 （2016）12-0274-01引言猪繁殖与呼吸综合征（PRRS）又称蓝耳病，以母猪的繁殖障碍和呼吸系统疾病为主要症状，由PRRS病毒引起。
该传染病主要引起的症状是发热、厌食，母猪怀孕后期导致流产，木乃伊胎、死胎、弱仔等；对幼龄仔猪损害比较大，引起呼吸系统疾病，死亡率很高。
导致严重的免疫抑制进而继发多种其他疾病而造成死亡。
由PRRSV变异株引起的“高热综合征”呈现高发病率和高死亡率的特点，我国将这种传染病称为“高致病性猪蓝耳病”，并且列为国家一类动物疫病。
1 病原学PRRSV具有两个基因型；1型是欧洲型，代表毒株为Lelystad病毒；2型是美洲型，代表毒株是VR2332病毒，欧洲型与美洲型核苷酸序列相似度为60%。
同一种基因型的PRRSV毒株之间有着较为广泛的变异，有基因突变、缺失和插入以及毒株间的基因重组现象，基因组中易变区域包括NSP2、ORF5和ORF3.不同毒株的GP5蛋白差异较大，1型与2型的同源性仅52%～55 %，相当于PRRSV与LDV的同源性。
欧洲型和美洲型病毒均具有典型的免疫抑制性。
2 流行病学2.1 传染源PRRS唯一易感染并且出现临床症状的自然宿主。
病猪和带毒猪是传染源与传播源。
处于感染猪可以通过唾液、鼻腔分泌物、公猪精液、粪便和尿液排出病毒，怀孕母猪后期以乳汁形式排毒，对本病耐过的猪也可长期带毒并且不断向体外排出病毒。
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图３ 仔 猪 出现 神 经症 状
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是严 重危害养猪 业的一大 隐患 。 我国 １ ９ 年在北 京郊 区 的某 降 。 ９５
猪 场 中首 次发现本 病 ， 分离到病毒 ， 并 命名 为ｃ 一 ａ 。 Ｈ １ 株 目前 ２
该病 已在 国 内许 多省市 流行和 蔓延 ， 给我 国的养猪业 带来严 重威胁 。
临床 症状 及剖检 变化
４ ４ ｃ Ｎ 合成 ． Ｄ Ａ
按照反转录酶Ａ Ｖ 行， Ｍ进 先将病 毒Ｒ Ａ Ｎ ５ １ Ｌ 上游引物 ， Ｌ ２ ｍ ｌ Ｌ 和Ｄ Ｐ 处理 水８ ｕＬ （５ ｏ ／ ） Ｅ Ｃ 混合 ， 然后７ ℃变 ０
性５ ｉ 后 ， ｍ ｎ 迅速放入冰 盒 ， 入５×Ｐ Ｒ 加 Ｃ 缓冲液６ Ｌ ｄ Ｔ ，Ｎ Ｐ （ Ｏ ｍ ｌ Ｌ） ． １ｍ ｏ ／ １ ５
猪首先发病 ， 采食量 减少 ， 粪便颜色 异常 ， 呈黄色 ， 部分 先发病
的猪 病情 曰趋 恶化 ， ３头死亡 。 有 母猪 群采食 量迅 速减 少 ， 分
其他 猪群精 神 普遍 不佳 ， 采食 量大 幅度 下 Ｐ Ｒ 白１ ８ 年 首次在美 国北卡罗来纳州 等地爆发 以来 ， Ｒ Ｓ ９７ 一直 娩母 猪死 胎 增加 ，
１
Ｌ Ｒ ａ ｅ 制剂 ｌ ，Ｎ ｓ 抑
ＬＭＭＶ ， — Ｌ 反转录酶
Ｌ ２ ℃ ４ ｉ ， ５ ℃ ５ ｉ ，２ ℃ 保 存 。 ４ ５ｍｎ９ ｍ ｎ 一 ０
４． Ｐ Ｒ ５ Ｃ
采用２ Ｌ ５ 体系，０ Ｃ 缓冲液２ Ｌ Ｄ ｔ （５ ｍ ｏ ／ ） ｕ １ ￣Ｐ Ｒ ５ 、ｎ ｐ ２ ｍ ｌ Ｌ
３ 病科送检
巴结 等病变器官送往沈 阳农业 大学畜牧兽医学 院中心 实验室 进行 诊 断 。
Ｐ Ｒ 病毒 Ｒ ｓ 特异性Ｄ Ａ Ｎ 片段 扩增片段 大小与预期相 符。
，
一
采 产 猪发 仔 和 检 的 、、、， 讨 与 结 中期发展 的 流 母 、病 猪 剖 猪 肺脾肝 肾淋 ６ Ｐ Ｒ论 小 ０ ｃ 为上世纪８ 年代
维普资讯
猪 业 科 学
一
例猪繁殖 与呼吸综 合征的
Ｒ － 断 Ｐ Ｒ诊 Ｔ Ｃ
秦晓光 ， 尹荣兰 ， 沈国顺
（ 阳农业大学畜牧兽 医学院 ， 沈 辽宁 沈阳 １Ｏ６ ） １１ １
摘 要： 利用猪 繁殖与呼吸综合征 的检 测性弓物对一例疑似 猪繁殖与 呼吸综合征的病猪进行Ｒ － Ｃ 检测 Ｊ Ｔ ＰＲ
２ ＬＭ ２ １ Ｌ Ｔ ｑ ． ５ Ｌ 上下游 引物各０ ５ Ｌ 、ｇ ＋ ５ 、ａ 酶０ ２ ， ．０ 、 ｃ Ｎ Ｌ Ｐ Ｒ ＤＡ ２ Ｃ 循环参 数为９ ℃变 性２ 、 ７℃退火３ 、 ｏ ４ ０ Ｓ４ ０ Ｓ ７ ２℃延￣ ３ ， ｆ ｏ Ｓ 循环３ 次， ０ ０ 最后７ ℃延伸 １ ｉ 。 ２ ０ ｍ ｎ
图 ｌ 粪 便 呈 黄 色
图２ 分 娩 母 猪 死 胎增 加
２６
Ｓ ＮＥ Ｎ Ｕ Ｒ ＳＣ Ｅ Ｅ ２０ ６。 ５ ＷＩ Ｉ Ｄ ＳＴ Ｙ Ｉ ＮＣ ０ ０
维普资讯
主题策划
检１ 头濒死 期典型病 例 ， ０ 主要表现 为全身重 要脏器广泛 出血
结果 扩增 出 目的条 带 。
关键词 ： 猪繁殖 与呼吸综合征 ； －ＰＣＲ ＲＴ
０ 公猪 １ 头， ８ 仔猪 、 育肥猪２ ２ 头 。０ ５ 月， ６ ８ ２ ０ 年２ 生长肥育 猪繁 殖与呼 吸综合 征（ Ｒ ｓ） 由病 毒 引起 的一种 繁殖 ５ 头 ， ＰＲ 是 与 呼吸 障碍 的传 染 病 ， 其特 征 是厌 食 、 发热 ， 猪妊 娠 后 期 母 发生流产 、 胎 、 乃伊胎 ， 死 木 幼龄 仔 猪 发 生 呼 吸 道 症 状 。
采 用 ＰＲＲｓ特异 性 检测 引物 （ 于扩 增 欧洲 株 和美洲 用
性病 变 ， 中４例 肺 肿 胀 ， 地 坚硬 ， 不 同程度 的肝变 ， 株 ） 上游 引物为 ： Ｃ Ｃ Ｔ Ｔ Ｔ Ａ Ｃ Ｔ Ｃ 共ｉ ｂ ； 其 质 有 ６ ， Ｃ Ｔ Ｃ Ｇ Ａ Ｇ Ａ Ｔ Ｇ ， ８ ｐ 下游 引 例 在 肾脏 、 软膜 、 胱 黏膜 有 点状 出血 ， 巴结淤 血 、 脑 膀 淋 肿 物为： Ｇ Ｔ Ｃ Ｃ Ａ Ｃ Ｔ Ａ Ｃ Ｇ 共２ ｂ ； Ａ Ｇ Ｃ Ｔ Ｇ Ａ Ｔ Ｇ Ｇ Ｔ ， Ｏ ｐ 扩增产物为６ ０ ｂ 。 ２ ｐ 大 ， 门淋 巴结 尤 为 明 显 。 肺
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图５ 患 病猪 不 同脏 器 组 织 Ｐ Ｒ 增 结 果 图 ｃ扩 Ｍ Ｄ Ａ ａ ｋ ｒ １ 患 病 猪 肺 脏 ： Ｎ ｍ ｒ ｅ ， ：
１ 月目
●
２： 患病 猪淋 巴结
图 肺 １ 结肿大 淋巴
５ 结果
取扩增产物５ Ｌ ％ Ｙ１ 琼脂糖凝胶电泳，Ｂ 后观察 Ｅ显 ｛
发病 猪体温升高至３ ． ℃～４ ℃， ９５ １ 母猪表现精神 沉郁 ，
食欲 减 退 ， 同程 度 的 出现 呼吸 困难 。 不 怀孕 母 猪 发生流 产 ，
１
发 病 情 况
产 死胎 、 木乃 伊胎 、 弱仔 ， 窝死 胎 、 产约 占分娩 母 猪 １ ％ 整 流 ０
仔 有 出 剖 辽宁省铁 岭某猪场存栏情况有 生产母猪２ ８ ， 备母猪 左 右 。 猪 呼 吸 困难 ， 的呈 腹 式 呼 吸 ， 现 神经 症 状 。 ６头 后