实验五薄层色谱实验
有机化学实验实验五 菠菜色素的提取和薄层色谱
片载玻片用肥皂水和水洗涤干净，再用碎滤纸吸干玻片上的水
分，然后将其重叠在一起，用手夹住片的上端，慢慢浸入已调
好的浆液浸涂2s左右（上端留一些不浸涂），然后缓慢地将载 玻片从浆液中取出，要求版面均匀平滑，载片边缘上的浆料用 抹布轻轻地擦去，小心将两片分开，放在磁盘中。待浆料自然 干燥后放入烘箱，在105～110℃下活化，约30min就制成了薄层
见下图所示。 第二块板重复做一次，选择较好的一块板进行测量Rf值。
溶剂前沿 斑点 d溶剂 d斑点 点样线 原斑点
影响Rf值的因素很多，如样品的结构、吸附剂和展开剂的性 质、温度以及薄层板的质量等。当这些条件都固定时，化合物
的比移值Rf是一个特性常数。但由于实验条件容易改变而不易
固定，因此在鉴定一个具体化合物，经常采用与已知标准样 品对照的方法。
剂）、硅胶G（含黏合剂）和硅胶HF（含荧光物质，可在 紫外光下观察）等。氧化铝同样也可分为以上几种类型。
展开剂（流动相）：也称洗脱剂，在色谱过程中起到将吸附
在固定相上的样品洗脱的作用。 选择展开剂时应考虑样品的极性、溶解度和吸附剂的活性 等因素。展开剂的极性越大，对化合物的解吸附（洗脱）能力 就越大，即Rf值就越大。如选用一种溶剂（展开剂）后发现其
样品成分的Rf值都比较大，则可换用一种极性较小的展开剂，
也可在原展开剂中加入一种极性较小的溶剂。展开剂的洗脱能 力按下列次序递增：已烷，四氯化碳，甲苯，苯，二氯甲烷， 氯仿，乙醚，乙酸乙酯，丙酮，丙醇，乙醇，甲醇，水。
2、比移值的计算 Rf值计算如下：
Rf＝d斑/d剂＝物质所移动的距离/溶剂前沿移动的距离
（4）展开 将展开剂倒入展开瓶或合适的广口瓶中，使液面 在样点的下方，不要接触到样点，否则样点会被溶入展开剂中无 法进行展开。 将薄层板小心斜放在展开瓶中盖好盖，观察展开剂通过毛细管 作用沿板上行。此时溶剂上行很快，必须留心观察。当展开剂上 行至距离涂层顶端约5mm时，将板小心取出，用铅笔做好溶剂前 沿的位置记号。样点各组分随展开剂上行同时被展开在各个部位 而形成各个有色斑点，取斑点的中心位置做好记号。如果斑点没 有颜色就用显色法使斑点显示出来。一种是在色谱缸中或密闭的 容器中放入几粒碘，把展开后的薄层板放入，待斑点明显时取出 做好记号。另一种是带有荧光的硅胶可用紫外灯照射观察斑点。
实验五类胡萝卜素的提取和薄层色谱
实验五类胡萝卜素的提取和薄层色谱实验五：类胡萝卜素的提取和薄层色谱一、实验目的1.学习和掌握类胡萝卜素的基本性质和提取方法。
2.了解和掌握薄层色谱的基本原理和操作方法。
3.通过实验，亲手操作提取类胡萝卜素，并利用薄层色谱对其进行分析。
二、实验原理类胡萝卜素是一类重要的天然色素，呈红色或黄色，主要存在于植物中，如胡萝卜、番茄、菠菜等。
其结构包含多个共轭双键，具有较高的稳定性，因此适用于提取和分析。
类胡萝卜素的提取主要采用有机溶剂萃取法。
通过使用具有极性的有机溶剂，如乙醇、丙酮等，将类胡萝卜素从植物材料中溶解出来，再利用类胡萝卜素在极性溶剂中的溶解度随着温度的升高而增大的性质，加热以提高其溶解度，从而得到类胡萝卜素。
薄层色谱是一种常用的分离和分析方法，其基本原理是利用不同物质在固定相和移动相之间的分配比的不同，从而实现物质的分离。
通过将待测样品点在薄层板上，固定相为硅胶或纤维素等，移动相为有机溶剂或混合溶剂等，当移动相在固定相上移动时，不同物质会以不同的速度移动，从而实现分离。
三、实验步骤1.准备试剂和器材：乙醇、丙酮、石油醚、硅胶G、玻璃板、点样器、展开剂、显色剂等。
2.样品处理：选取新鲜的胡萝卜或菠菜，洗净后烘干，磨成粉末。
称取适量粉末，加入适量的乙醇和丙酮混合液（体积比1:1），搅拌均匀后，静置10分钟。
3.装柱：将硅胶G研碎成粉末，加入适量石油醚溶解，制成硅胶G薄层。
将硅胶G薄层倒入玻璃板中，用玻璃棒轻轻搅拌，使硅胶G均匀分布在玻璃板上。
4.点样：用点样器取少量待测样品，轻轻点在薄层板上，避免样品重叠。
5.展开：将薄层板置于展开剂中（通常为石油醚和乙酸乙酯的混合液），展开剂会向上移动，带动样品向上移动。
当展开剂移动至薄层板末端时，取出薄层板。
6.显色：将展开后的薄层板置于浓氨水蒸气中熏蒸数分钟，取出后用乙醇-乙酸乙酯溶液进行喷雾显色。
7.观察和记录：观察显色后的薄层板上各色带的颜色和位置，根据各色带的Rf值（比移值）进行定性和定量分析。
薄层色谱实验
薄层色谱（TCL ）实验一、实验目的1、 掌握薄层色谱操作技巧2、 了解薄层色谱的基本原理和应用二、实验原理1、原理薄层色谱是一种微量分析的分离过程，它将样品点在以玻璃板或铝、塑料等片材为载体的多孔吸附剂薄层的固定相上，利用流动相在特定的展开室中将混合物中的组份推移到不同距离处，在色谱展开整个过程中，样品的成份受到正反不同的力的作用。
(1) 流动相利用毛细管力带着样品穿过固定相。
(2) 样品与固定相的相互作用是指组份在移行过程中由于偶极-（诱导）-偶极相互作用，氢键和范德华力的作用而产生不同程度的延缓、吸附、分散、离子交换和络合等分离机理。
由于样品组份与流动相和固定相之间的相互作用力程度不同，整个毛细管流动过程中分离运动都在进行。
基于这点，TLC 系统（流动相和固定相）必须与样品很好地匹配。
用显色试剂处理，许多组份可在日光或紫外灯光下检视。
色谱可用肉眼或使用光密度计和照相机记录或影像系统方法来评价。
2、薄层色谱的用途1）化合物的定性检验通过与已知标准物对比的方法进行未知物的鉴定。
在条件一致的情况下，纯化合物在薄层色谱中呈现一定的移动距离，称比移值（R f 值）。
利用薄层色谱法可鉴定化合物的纯度或确定两种性质相似化合物是否为同一种物质。
影响比移值的因素很多，如薄层的厚度，吸附剂颗粒的大小，酸碱度、活性、外界温度和展开剂纯度、组成、挥发度等。
所以要获得比移值重现性就比较困难。
为此，在测定某一式样时，最好用对照品和样品同时对照进行。
21d d R f 2）快速分离少量物质（几到几十u g ，甚至0.01u g ）3）跟踪反应进程，在进行化学反应时，常利用薄层色谱观察原料斑点的逐步消失，来判断反应是否完成。
4）化合物纯度的检验（只出现一个斑点，且无脱尾现象，为纯物质）3、主要操作步骤d 1d 2薄层板的制备；薄层板的活化；薄层板色谱展开；薄层色谱显色与分析。
四、薄层色谱操作技巧1、手工自制板1.1玻璃板的要求：用于制备薄层板的玻璃板要求表面光洁、平整，最好使用厚薄1~2mm 的优质平板玻璃，普通窗玻璃一般不宜用于制作薄层板，玻璃板需洗净至不挂水，晾干，贮存于干燥洁净处备用。
薄层色谱法实验报告
薄层色谱法实验报告一、实验目的1、掌握薄层色谱法的基本原理和操作方法。
2、学习利用薄层色谱法分离和鉴定混合物中的成分。
二、实验原理薄层色谱法（Thin Layer Chromatography，TLC）是一种快速、简便、灵敏的分离和分析方法。
它基于混合物中各组分在固定相（吸附剂）和流动相（展开剂）之间的分配系数不同，从而在薄层板上实现分离。
吸附剂通常是硅胶、氧化铝等具有吸附性能的物质，它们均匀地涂布在玻璃板或塑料板上形成薄层。
展开剂则是一种能够在吸附剂上移动的溶剂系统。
当样品点在薄层板的一端，放入装有展开剂的层析缸中时，展开剂在毛细作用下沿着薄层上升，样品中的各组分随着展开剂的移动而在薄层上发生不同程度的吸附和解吸，导致它们在薄层上的移动速度不同，最终实现分离。
通过与已知标准物质在相同条件下的色谱行为进行比较，可以对样品中的成分进行定性分析。
同时，根据斑点的大小和颜色深浅，可以进行半定量分析。
三、实验仪器与试剂1、仪器玻璃板（5×20cm）层析缸点样毛细管（内径 05mm）喷雾器紫外光灯（254nm 和 365nm）烘箱2、试剂硅胶 G羧甲基纤维素钠（CMCNa）水溶液（05%）展开剂（石油醚乙酸乙酯体系，不同比例）样品溶液（混合有机化合物）标准物质溶液（已知有机化合物）四、实验步骤1、制板将硅胶 G 与适量的 05% CMCNa 水溶液在研钵中充分研磨，调成均匀的糊状。
用涂布器将糊状物均匀地涂布在玻璃板上，厚度约为 025 05mm。
置于水平台上晾干，然后在 105℃烘箱中活化 30 分钟，取出后置于干燥器中备用。
2、点样用点样毛细管吸取样品溶液和标准物质溶液，在距薄层板一端 1 15cm 处轻轻点样，点样直径一般不超过 2mm，每次点样后用电吹风冷风吹干，重复点样 2 3 次，以保证样品量足够。
3、展开在层析缸中倒入适量的展开剂，使其高度不超过 1cm。
将点样后的薄层板小心放入层析缸中，盖上盖子，使展开剂蒸气饱和层析缸 5 10 分钟。
薄层色谱实验报告
薄层色谱实验报告一、实验目的。
本实验旨在通过薄层色谱技术对混合物中的化合物进行分离和鉴定，掌握薄层色谱法的基本原理和操作技能，以及对色谱结果的分析和解释。
二、实验仪器与试剂。
1. 实验仪器，薄层色谱仪、注射器、展开皿等。
2. 实验试剂，甲醇、乙酸乙酯、硅胶G薄层板、色谱柱。
三、实验原理。
薄层色谱是一种以吸附作用为基础的色谱分离技术，其原理是利用固定在薄层板上的吸附剂对混合物中的化合物进行分离。
当混合物在薄层板上进行展开时，不同成分会因为与吸附剂的亲和力不同而在薄层板上形成不同的斑点，从而实现分离。
四、实验步骤。
1. 准备薄层板，在薄层板上均匀涂抹一层薄层吸附剂。
2. 样品制备，将待分离的混合物溶解在适量的溶剂中，得到样品溶液。
3. 样品上板，用吸附剂涂抹的薄层板吸取一定量的样品溶液，滴于薄层板的起点处。
4. 色谱条件，将上板后的薄层板放入色谱槽中，加入适量的色谱溶剂，待色谱溶剂上升至薄层板顶端后取出晾干。
5. 显色观察，将晾干后的薄层板放入显色槽中，观察化合物的斑点情况。
五、实验结果与分析。
根据实验结果，我们成功地将混合物中的化合物分离出来，并通过对斑点的形状、颜色和位置进行分析，确定了各个化合物的Rf值。
进一步对比标准品的Rf值，我们成功地鉴定了混合物中的化合物。
六、实验总结。
通过本次实验，我们深入了解了薄层色谱技术的原理和操作方法，掌握了薄层色谱法对化合物进行分离和鉴定的基本技能。
同时，也对色谱结果的分析和解释有了更深入的理解和掌握。
七、实验心得。
薄层色谱技术作为一种简便、快速、准确的分析方法，具有广泛的应用前景。
在今后的学习和科研中，我们将继续深入探索色谱技术，不断提高自己的实验操作能力和科研水平。
以上就是本次薄层色谱实验的报告，希望对大家有所帮助。
薄层色谱
实验二十薄层色谱一、实验目的1、学习薄层色谱法的原理和方法；2、掌握比移值的计算方法；3、了解比移值的影响因素。
二、实验原理薄层色谱(thin layer chromatography)常用TLC表示，依其所采用的薄层材料性质和物理、化学原理的不同，可分为吸附薄层色谱、分配薄层色谱、离子交换薄层色谱和排阻薄层色谱等。
吸附薄层色谱采用硅胶、氧化铝等吸附剂铺成薄层，将样品以毛细管点在原点处，用移动的展开剂将溶质解吸，解吸出来的溶质随着展开剂向前移动，遇到新的吸附剂，溶质又会被吸附，新到的展开剂又会将其解吸，经过多次的解吸-吸附-解吸的过程，溶质就会随着展开剂移动。
吸附力强的溶质随展开剂移动慢，吸附力弱的溶质随展开剂移动快，这样不同的组分在薄层板上就得以分离。
一个化合物在吸附剂上移动的距离与展开剂在吸附剂上移动的距离的比值称为该化合物比移值R f展开剂是影响色谱分离度的重要因素。
一般来说，展开剂的极性越大，对特定化合物的洗脱能力也越大，一般常用展开剂按照极性从小到大的顺序排列大概为：石油醚<己烷<甲苯<苯<氯仿<乙醚<THF<乙酸乙酯<丙酮<乙醇<甲醇<水<乙酸。
三、主要试剂和材料邻硝基苯胺对硝基苯胺薄层层析硅胶G 薄玻璃板乙酸乙酯石油醚 0.5%羧甲基纤维钠(CMC-Na)水溶液毛细管(内径小于1mm)四、实验装置五、实验步骤【操作要点及注意事项】1、调浆时要将硅胶加到CMC-Na中，以免生成太多的团块,浆液要有一定的流动性，稠度以能沿玻棒成细线性下滴为宜。
2、铺板时一定要铺匀，特别是边、角部分，晾干时要放在平整的地方。
3、点样时点要细，直径不要大于2mm,间隔0.5cm以上，浓度不可过大，以免出现拖尾、混杂现象。
4、展开用的烧杯要洗净烘干，放入板之前，要先加展开剂，盖上表面皿，让烧杯内形成一定的蒸气压。
点样的一端要浸入展开剂0.5cm以上,但展开剂不可没过样品原点。
[参考实用]薄层色谱法实验报告
[参考实用]薄层色谱法实验报告实验报告：薄层色谱法的原理和应用一、实验目的：1.了解薄层色谱法的原理和应用。
2.掌握薄层色谱法的操作方法。
3.通过实验实践，了解如何通过薄层色谱法鉴定和分离混合物中的成分。
二、实验原理：薄层色谱法是一种分离和鉴定化合物的有效方法，其原理基于化合物在固定相和流动相之间的不同相互作用。
薄层色谱法的基本原理可以总结如下：1.固定相：将固体材料均匀地涂在薄层色谱板上，固定相可以是硅胶、氧化铝等。
固定相的选择要考虑待测物质与之的相互作用。
2.流动相：通常是有机溶剂或溶剂混合物，用于带动化合物在固定相上的运移。
3.样品的加载：将待测物质溶解于溶剂中，直接在固定相的起点处或者利用载体（例如玻璃纤维纸）上进行负载。
4.运移：将色谱板插入含有流动相的色谱槽中，通过毛细现象使得溶剂沿着板缘上升，溶质随着溶剂一起上升，与固定相发生相互作用。
5.鉴定和检测：用合适的方法在运移完成后，对色谱板上的斑点进行检测和鉴定。
三、实验操作步骤：1.准备工作：将薄层色谱板切割成所需尺寸，用铅笔在起点处标记出一个细线，用玻璃纤维纸负载样品。
2.准备固定相：将固定相在玻璃片或铝箔上均匀涂布，并将其插入薄层色谱槽中。
3.准备流动相：根据待测物质的性质和需求，选择合适的有机溶剂或溶剂混合物，并将其倒入薄层色谱槽中，使其淹没固定相。
4.进行色谱分离：将负载有样品的玻璃纤维纸插入薄层色谱槽中，让溶剂自下而上地进行运移。
5.取出色谱板：当溶剂前端接近色谱板的上端时，取出色谱板并迅速将其干燥。
6.鉴定和检测：将干燥的色谱板放入紫外灯下，观察样品斑点的颜色和位置，并记录下来。
四、实验结果和分析：根据实验操作步骤，完成了一次薄层色谱分离实验。
观察样品在薄层色谱板上的斑点后，我们可以得到样品中的不同成分在固定相和流动相之间的相互作用性质。
通过与已知标准物质的比对，可以对未知物质进行鉴定分析。
五、实验总结：通过本次实验，我对薄层色谱法有了更深入的认识和理解。
实验---薄层色谱法
（3）测定：紫外分光光度法：洗脱液调整至一定体积，在此化合物最大吸收波长处测定。同时把样品斑点相应位置薄层吸附剂同样取下做空白对照。
比色法：选择灵敏度高、专属性好的比色反应测定化合物含量，是比较常用的方法。
其它方法：极谱、库仑滴定、荧光测定等。
2 直接测定法：
（1） 目测法：样品经色谱分离后，直接观察所得斑点的大小和颜色的深浅，并与标准品在相同条件下展开所得到的一系列已知不同浓度的标准斑点相比较，而近似地判断样品中所测成分的含量。
薄层色谱法：
通常指以吸附剂为固定相的一种液相色谱法。即将固定相在玻璃、金属或塑料等光洁的表面上均匀地铺成薄层，试样点在薄层的一端，流动相借毛细作用流经固定相,使被分离的物质展开。
比移值（Rf）
Rf=原点至组分点中心的距离/原点至流动前沿的距离
组分A的Rf=a/c
(2)双波长扫描：是采用两种不同波长的光束先后扫描所要测定的斑点，并记录下此两波长吸光度之差。
扫描轨迹：
直线扫描、锯齿状扫描、圆形扫描
双底展开槽
水平展开槽
4.展开方式：
(1)近水平展开：将点样后的薄层板下端浸入展开剂0.5cm，薄层上端垫高使薄层与水平成5-10o的角。
(2)上行展开：将点样后的薄层放在盛有展开剂的直立型的展开槽中，展开剂由薄层下端借毛细管作用上升至前沿。
(3)下行展开
极性较小的溶剂降低极性大的溶剂的洗脱能力，使Rf值降低。
中等极性的溶剂往往起着使极性相差较大溶剂混合均匀的作用。
在展开剂中加入少量酸、碱可以使某些极性物质斑点集中，提高分离度。
用粘度太大的溶剂时需要加入一种溶剂以降低展开剂的粘度，加快展开速度。
(四)点样：
有机化学实验教案--5.薄层色谱的应用
活性级别
偶氮染料
勃劳克曼活性级的Rf值
Ⅱ
Ⅲ
Ⅳ
Ⅴ
偶氮苯
0.59
0.74
0.85
0.95
对甲氧基偶氮苯
0.16
0.49
0.69
0.89
苏丹黄
0.01
0.25
0.57
0.78
苏丹红
0.00
0.10
0.33
0.56
对氨基偶氮苯
0.00
4.薄层色谱定性分析（比移值计算）
在薄层色谱的分析中，经常使用比移值表示物质移动的相对距离。通过比移值判断分离情况。
= =
图薄层色谱展开图
5.薄层色谱应用试验
1）菠菜色素的提取
称取20g洗净后用滤纸吸干的新鲜菠菜叶，用剪刀剪碎并与20mL甲醇拌匀，研钵中研磨约5min，然后布氏漏斗抽滤菠菜汁，弃去滤液。
将菠菜汁放回研钵中，每次用20mL3:2体积比的石油醚——甲醇混合液萃取两次，每次需加以研磨并且抽滤。合并深绿色萃取液，转入分液漏斗，每次用10mL水洗涤两次，以除去萃取液中的甲醇。洗涤时要轻轻旋荡，以防止产生乳化。弃去水——甲醇层，石油醚层用无水硫酸钠干燥后虑入圆底烧瓶，水浴上蒸去大部分石油醚至体积约为1mL为止。
图薄层层析装置
3)显色
薄层展开完毕后，取出薄层板，画出溶剂前沿，如果化合物本身有颜色，就可直接观察它的斑点。如果本身无色，需要经过显色法显色后才能观察到斑点位置，判断分离情况。常用显色法包括碘蒸气显色法、紫外灯显色法和显色剂显色法。现简要介绍如下：
碘蒸气显色法：碘能与很多有机化合物可逆的结合成有颜色的络合物，先将几粒碘结晶放在密闭容器中，碘蒸气很快充满容器，然后将展开完毕挥干溶剂的薄层板放入容器中，有机化合物即与碘作用呈现棕色斑点。立即将薄层板取出，标记斑点形状和位置，计算比移值。
薄层色谱法实验报告
1. 掌握薄层色谱的基本原理。
2. 熟悉薄层色谱的操作步骤。
3. 学会利用薄层色谱法分离和鉴定有机化合物。
二、实验原理薄层色谱法（Thin Layer Chromatography，简称TLC）是一种用于分离和鉴定混合物中各组分的层析技术。
其原理基于混合物中各组分在固定相（吸附剂）和流动相（展开剂）中的分配系数不同。
当混合物在薄层板上展开时，各组分会在板上形成不同的斑点，从而实现分离。
在薄层色谱中，固定相通常为吸附剂，如硅胶、氧化铝或纤维素。
展开剂则是一种液体或气体，用于携带混合物在固定相上移动。
当展开剂流过固定相时，混合物中的各组分会发生吸附、解吸和再分配的过程，导致不同组分在固定相上的移动速度不同，从而实现分离。
三、实验仪器与药品1. 仪器：- 薄层板（硅胶板）- 展开剂（正己烷、乙酸乙酯、甲醇）- 层析缸- 毛细管- 点样器- 显色剂（如紫外灯、碘蒸气）2. 药品：- 有机混合物样品（如苯、甲苯、乙苯等）- 吸附剂（硅胶）- 溶剂（正己烷、乙酸乙酯、甲醇）1. 薄层板的制备：- 称取适量的硅胶，加入适量的水，搅拌均匀。
- 将混合物均匀涂布在玻璃板上，厚度约为0.2-0.3mm。
- 将涂布好的玻璃板在105℃下烘烤1小时，取出备用。
2. 点样：- 用毛细管吸取少量样品，在薄层板下端约2cm处轻轻点样。
- 点样后，用铅笔在点样位置画一个圈作为原点。
3. 展开剂的选择与制备：- 根据待分离混合物的极性，选择合适的展开剂。
- 将展开剂倒入层析缸中，液面高度约为1-2cm。
4. 展开与显色：- 将薄层板放入层析缸中，盖好盖子。
- 待展开剂上升到薄层板顶部时，取出薄层板，晾干。
- 用紫外灯或碘蒸气对薄层板进行显色，观察各组分在薄层板上的位置。
5. 结果分析：- 计算各组分在薄层板上的比移值（Rf值）。
- 比较不同样品的Rf值，鉴定各组分。
五、实验结果与分析1. 薄层色谱图：- 从薄层色谱图上可以看出，混合物中的各组分在薄层板上形成了不同的斑点，实现了分离。
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实验五薄层色谱实验
一、实验原理
薄层色谱(Thin-Layer Chromatography,TLC)是一种分离分析技术，
它将混合物分离并加以分析，以测定化学物质在混合物中的含量，并对其
结构进行分析。
薄层色谱实验的一般步骤为：用菲林纸或其他实验材料，
在玻璃板上均匀铺设一层纸片，在纸片中加入一定量溶剂，并将要分析的
物质涂在纸片上，然后放入含有一定量溶剂的气相色谱仪中，溶剂从纸片
上上升，复杂的物质分子会随着溶剂上升而沿着纸片的方向分离，当溶剂
沿着纸片方向移动时，部分物质分子会停留在纸片移动轨迹上，从而可以
以物质分子逐渐沿着纸片的轨迹分布的方式对复杂的物质进行分离和检测。
二、实验准备
1.实验仪器
（1）薄层色谱仪：用于给纸片滴加溶剂，把溶剂按一定速度从纸片
上升起，滴加溶剂的速度可以用薄层色谱仪调节。
（2）紫外可见光检测仪：它能够测量沿着纸片的轨迹上出现的物质
吸收紫外线的能力，以来检测混合物中物质的比例和浓度总量。
2.实验材料
（1）纸片：一般使用硅胶薄层色谱纸片，其薄厚约为0.25mm，它的
表面非常细腻，不吸附变性物质，表面有良好的润湿性，可以形成一层薄层。