普通细菌培养鉴定操作规程
细菌室标本操作流程
细菌室标本操作流程
细菌室是进行细菌培养和鉴定的重要实验室，操作流程的规范
性和严谨性对于实验结果的准确性至关重要。
下面将详细介绍细菌
室标本操作的流程。
1. 样本接收：首先，接收来自临床的标本，如血液、尿液、脑
脊液等，标本应该在规定时间内送到细菌室，并在接收时进行标记，包括标本来源、送检医生、送检时间等信息。
2. 样本处理：接收到标本后，需要进行处理，包括标本的分装、保存和处理。
不同类型的标本需要采取不同的处理方法，确保标本
的完整性和质量。
3. 样本培养：将处理好的标本进行培养，通常采用琼脂培养基，根据标本的性质选择不同的培养基。
培养条件包括温度、湿度、氧
气含量等，需要根据不同的细菌种类进行调整。
4. 细菌鉴定：培养出的细菌需要进行鉴定，包括形态学特征、
生理生化特性、抗生素敏感性等。
通常采用显微镜观察细菌形态，
进行生化试验和抗生素敏感性试验。
5. 结果记录：对鉴定结果进行记录，包括细菌种类、数量、鉴
定方法、结果等信息。
确保结果的准确性和可追溯性。
6. 报告发放：将鉴定结果整理成报告，发送给临床医生，帮助其进行治疗方案的制定。
7. 清洁消毒：操作结束后，对实验室进行清洁消毒，确保实验室的卫生和安全。
细菌室标本操作流程需要严格遵守操作规程，确保实验结果的准确性和可靠性。
同时，操作人员需要具备专业知识和技能，保证操作的规范性和安全性。
只有这样，才能为临床诊断和治疗提供可靠的实验结果。
细菌室操作规程
痰液培养1、痰涂片，根据需要分别做革兰氏染，抗酸染色等。
2、将痰加入盛有15-20ml灭菌生理盐水的试管中，剧烈振荡5-10秒，然用接种环将沉淀于管底的脓痰小片沾出，再放入另一试管内，以同样的方法反复二次，最后剩余的脓痰接种在培养基上。
3、对可疑病原菌，应做涂片镜检，鉴定及药物敏感试验。
4、检出致病菌时，应报告：草绿色链球菌（+～++++）、奈瑟菌（+～++++）、致病菌名称：×××5、未检出致病菌时，应报告：正常菌群。
尿液培养1、用5-25μl加样器，加消毒后的无菌吸咀，吸尿液5μl滴注在血平板上，用接种环涂抹，待表面干燥后，35℃培养过夜，计数生长菌落数，结果乘以200，求出每ml的细菌总数(cfu/ml)。
2、对革兰氏阴性杆菌菌落计数小于105 cfu/ml，革兰氏阳性球菌计数小于104 cfu/ml，结果报告：细菌培养阴性。
3、对革兰氏阴性杆菌菌落计数大于105cfu/ml,革兰氏阳性球菌计数大于104 cfu/ml有诊断意义,,应对细菌进行鉴定及药敏试验。
血液及骨髓培养1、无菌操作静脉取血5ml，0.5ml注入L型培养管，混匀后置烛缸内孵育；剩余血液注入普通培养瓶，置35℃温箱孵育。
2、血培养瓶和培养管经48小时35℃孵育后，在血平板或巧克力平板上盲目传种一次。
3、盲目传种后，培养瓶和培养管继续孵育至7天每日早晨取出检查有无生长，并摇匀培养液继续孵育。
4、肉眼见有细菌生长时应取生长物移种血平板，巧克力平板进行分离以获得纯培养，同时取生长物做革兰氏染色，将革兰氏染色结果，电话通知临床医师。
标本经平板分离纯培养后，做鉴定和药敏试验。
正式报告细菌名称和药敏结果。
粪便标本培养1、按需要进行涂片，做不同的镜检和染色2、接种SS平板及麦康凯或伊红美兰平板，3、未发现沙门菌或志贺菌的可疑菌落，可报告：未检出志贺菌和沙门氏菌。
4、对疑似该两种细菌的菌落且同志贺菌诊断血清之一发生明显凝集者，可报告：“检出XX志贺菌”并报出药敏结果；与沙门菌多价群因子诊断血清发生明显凝集者可报告：“检出XX群沙门菌”并报出药敏结果。
一般生菌数检验方法
一般生菌数检验方法
一般生菌数检验方法如下：
1.制备10倍品匀液。
按上一步操作程序，每递增稀释一次，换用1次1mL无菌吸管或吸头。
2.取样并制备平板。
同时，分别吸取1mL空白稀释液加入两个无菌平皿内空白对照。
及时将15mL-20mL冷却至46℃的平板计数琼脂培养基（可放置于46℃士1℃恒温水浴锅中保温）倾注平皿，并转动平皿使其混合均匀。
3.待琼脂凝固后，将平板翻转，36℃士1℃培养48h+2h。
如果样品中可能含有在琼脂培养基表面弥漫生长的菌落时，可在凝固后的琼脂表面覆盖薄层琼脂培养基（约4mL），凝固后翻转平板，按2.1条件进行培养。
4.平板上菌落计数可使用自动化菌落计数仪，也可用肉眼观察（必要时可用放大镜观察）记录培养基上菌落数量和相应的稀释倍数。
选取菌落数在30-300CFU之间、无蔓延菌落生长的平板计数菌落总数。
以上就是一般生菌数检验方法，希望对解决您的问题有所帮助。
微生物检测操作流程
微生物检测操作流程《微生物检测操作流程》微生物检测是一项重要的实验室技术，用于检测和鉴定各种微生物，包括细菌、真菌、病毒等。
本文将介绍一般的微生物检测操作流程。
一、样品采集与处理1. 样品选择：根据实验目的选择适当的样品类型，如水样、食品样、土壤样等。
2. 采集样品：采集样品时要注意避免污染和交叉污染。
3. 处理样品：根据具体情况，对样品进行处理，如稀释、研磨、过滤等。
二、培养基的制备1. 选择合适的培养基：根据待检微生物的特性选择适当的培养基类型。
2. 制备培养基：按照标准的配方和操作规程制备培养基。
三、菌落计数1. 加样和摇匀：将样品加入培养基中，并充分摇匀。
2. 培养：将培养基装入培养皿或培养瓶中，进行恒温培养。
3. 菌落计数：根据菌落的外观、形态等特征，进行菌落计数。
四、纯化和鉴定1. 提取纯种菌：从培养基上选取单个菌落，进行传代培养，获得纯种菌。
2. 形态鉴定：通过观察微生物的形态特征，如形状、大小、颜色等，进行初步鉴定。
3. 生理生化特性鉴定：通过对微生物的生理生化特性进行检测，如氧需求性、产气性、酶活性等，进一步鉴定。
五、分子生物学检测（可选）1. 提取DNA/RNA：采用适当的方法提取待检微生物的DNA或RNA。
2. PCR扩增：利用聚合酶链式反应（PCR）扩增目标序列。
3. 凝胶电泳：将PCR产物进行凝胶电泳分析，确定目标序列的存在与否。
六、结果分析与报告1. 结果解读：根据实验结果判断待检微生物是否合格。
2. 报告编写：撰写实验报告，包括实验方法、结果、分析和结论。
3. 结果验证：可以进行复核实验或委托第三方实验室进行验证。
以上即是一般的微生物检测操作流程，不同类型的微生物检测可能会有一些差异。
在实验中，操作人员应严格遵循操作规程，做好实验安全和样品处理，保证检测结果的准确性和可靠性。
临床细菌培养鉴定流程及报告
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一、医学微生物实验室基本条件及设备
▪ 细菌实验室 ▪ 无菌实验室 ▪ 基本设备
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细菌实验室
细菌实验室是细菌检验的场所，在此完 成标本接种、孵育、分离、细菌鉴定和 药物敏感试验。所以细菌实验室必须具 备空气及桌面消毒的条件，确保室内相 对无菌。如：足够强度的紫外线灯管， 耐酸碱的桌面等。
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⒋结果分析及报告
⑴结果分析 痰及下呼吸道分泌物标本易受到 定植在上呼吸道的正常菌群污染。当从送检标 本中分离出多种细菌时，确定那一种分离细菌 是引起下呼吸道感染的病原菌，这对临床诊断 与治疗至关重要。当在同一培养基上分离出1 种以上的病原菌（复合菌）时，要结合患者的 临床症状，涂片染色镜检情况及患者近期细菌 分离培养结果等，综合判断所分离的多种细菌 中那一种细菌可能为致病菌，通常多为优势菌。 当分离的优势菌与涂片染色镜检结果一致时， 要做药敏试验。若分离培养结果与涂片染色镜 检结果不一致时，可不进行药敏试验，以免误 导，仅报告分离鉴定结果，由临床大夫定夺是 否重试。
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⑶标本运送 采血后应立即送检，如不能立即 送检，需室温保存或置35～37℃孵箱中，切勿 冷藏。自动化连续检测系统虽有允许延迟上机 检测微生物生长的原理，还是应该尽量减少延 迟上机时间。
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3.分离培养
⑴血培养操作过程中应注意生物安全防护。
⑵血培养瓶处理 传统手工法血培养每天至少检 查一次，注意微生物生长可视信号，应无菌抽 取培养物，涂片革兰氏染色，选择合适的培养 基转种，同时做药敏试验。
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致病菌能够破坏宿主的防御系统，其致 病机理是细菌产生毒素和对人体组织的 侵袭性，值得注意的是有些细菌既具有 侵袭性又能产生毒素。抗生素治疗可以 破坏宿主的正常菌群，导致某些细菌如 艰难梭菌、金黄色葡萄球菌、铜绿假单 胞菌和念珠菌等过度生长，也可引起腹 泻。沙门氏菌、志贺氏菌、气单胞菌和 邻单胞菌应作为实验室常规培养的主要 腹泻病原菌。
菌种检定操作规程
菌种检定操作规程
《菌种检定操作规程》
一、目的
菌种检定操作规程旨在规范菌种检定过程，确保检定结果准确可靠，保障实验室菌种质量。
二、适用范围
本规程适用于各类实验室对菌种进行检定的操作。
三、设备和试剂
1. 必备设备：无菌工作台、培养箱、平板计数器等。
2. 必备试剂：琼脂培养基、生理盐水、甘油等。
四、菌种检定操作流程
1. 取样准备：将待检菌种进行悬浮液制备或直接取样，保证单一菌种在接种时的质量。
2. 培养基接种：将取样溶液均匀涂敷于琼脂培养基表面，将琼脂培养基放入培养箱进行培养。
3. 孵化：将接种后的琼脂培养基置于培养箱中，进行相应的温度和时间的培养。
4. 菌落计数：使用平板计数器对菌落进行计数，记录结果。
5. 结果分析：根据计数结果，对菌种进行鉴别和鉴定。
五、结果确认与报告
1. 只有经过两名以上实验人员的确认，结果方可出具。
2. 将检定结果填写在检定记录表上，并进行备份存储。
六、质量控制
1. 定期对实验室设备和试剂进行检验、校正。
2. 定期进行内部质量控制，对检定结果进行复核和比对。
七、附则
1. 对于异常情况的处理：出现异常结果时，要及时进行排查并记录处理过程。
2. 本规程未尽事宜，由实验室主管负责进行详细规定。
以上即为《菌种检定操作规程》的内容，希望各实验室严格按照此规程进行菌种检定工作，确保实验室菌种质量及检定结果的准确性。
细菌培养与鉴定操作规范
细菌培养与鉴定操作规范一、目的与适用范围本规范旨在确保医院细菌培养与鉴定操作的科学、规范和安全，保障患者的健康和利益，适用于医院各临床科室的细菌培养与鉴定工作。
二、术语定义1.细菌培养：指将细菌分别、培养到可见菌落的过程。
2.鉴定：指确定细菌菌种的过程。
三、细菌培养操作规范1.培养基的准备与使用–全部培养基都应标注菌名、日期和操作人员，并按规定保管。
–检查培养基的使用期限和质量指标，过期或有破损的不得使用。
–培养基的制备应依照操作规程进行，确保无菌条件，料子应经过高压灭菌处理。
–确保培养基的pH值符合要求，并严格掌控培养基的成调配比。
2.样本手记与处理–样本手记前，应确保患者知情并取得同意。
–样本手记器械应满足无菌要求，手记过程应避开污染。
–不同类型的样本应依照规定的方法进行处理，避开交叉感染。
–对于带有抗菌药物的样本，应妥当保管并标注抗菌药物名称及浓度。
3.培养条件与方法–培养箱和培养条件应定期检查，确保温度、湿度和气体环境符合要求。
–不同类型的细菌应依据其生长需求选择合适的培养基和培养条件。
–培养过程中，应避开传染性菌株的扩散，严禁用手接触培养基。
–培养时间视具体要求而定，依照标按时间进行察看。
四、细菌鉴定操作规范1.鉴定方法的选择与准备–依据不同类型的细菌和鉴定要求，选择适当的鉴定方法。
–依据鉴定方法的要求，准备所需的培养基、试剂和药物。
–确保鉴定方法的操作流程清楚，依照标准规定进行操作。
2.鉴定试剂和培养基质量掌控–对鉴定试剂和培养基进行质量掌控，保证准确性和全都性。
–试剂和培养基使用前应检查标签，过期或变质的应严禁使用。
–掌控试剂和培养基的保管条件，避开受潮、变质等情况。
3.鉴定操作步骤–依照鉴定方法的操作步骤进行操作，严格依照规定的操作时间和温度进行处理。
–操作前确保操作区域的清洁，准备必需的消毒工具和器材。
–小心操作，避开手指直接接触试剂。
4.鉴定结果的记录与报告–鉴定结果应准确记录，包含菌名、培养时间和鉴定方法等关键信息。
微生物检验流程及操作标准
微生物检验流程及操作标准全文共四篇示例，供读者参考第一篇示例：微生物检验是一种重要的实验室技术，用于检测食品、水质、环境等样品中的微生物存在情况。
微生物检验需要严格遵守一系列操作标准和流程，以确保检验结果的准确性和可靠性。
下面我们将介绍一下微生物检验的流程及操作标准。
一、样品采集1. 样品的采集需要采用无菌工具，并保持样品在采集过程中不受到外界环境的污染。
2. 样品的采集过程应尽量避免接触到任何可能引入外源微生物的物质，比如皮肤、空气等。
3. 采集的样品应标明正确的标识信息，包括样品名称、采集地点、采集日期等。
二、样品处理1. 样品收到实验室后，需要尽快进行处理，避免样品内的微生物增殖或死亡。
2. 样品处理过程需要保持在无菌条件下进行，使用无菌工具进行操作。
3. 样品处理过程中需要按照检验要求进行适当的稀释，以确保实验得出准确的结果。
三、培养基准备1. 培养基的制备需要按照标准的配方和步骤进行，以确保培养基的质量符合要求。
2. 制备培养基时需要严格遵守无菌操作规范，避免细菌、真菌等外源微生物的污染。
3. 制备好的培养基需要在适当的条件下保存，确保培养基的稳定性和有效性。
四、接种操作1. 在进行微生物检验之前，需要准备好无菌的接种环、移液器等工具。
2. 采取适当的方法将处理好的样品接种到培养基上，避免接种时引入外源微生物。
3. 接种操作需要在无菌条件下进行，避免培养物受到任何污染。
五、培养与观察1. 接种后的培养基需要置于适当的温度和湿度条件下进行培养，促使样品中的微生物生长。
2. 定期观察培养基上的生长情况，记录生长的数量和形态，用于后续的分析和鉴定。
3. 在观察过程中需要注意反复进行无菌操作，避免细菌、真菌等外源微生物的污染。
六、鉴定与结果解读1. 当样品中的微生物生长到一定程度时，需要进行鉴定和分析，确定其种属和数量。
2. 鉴定过程需要参考相关的鉴定手册和标准，进行适当的试验和测试。
3. 根据鉴定结果进行结果解读，判断样品中微生物的种类和数量是否符合标准要求。
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普通细菌培养鉴定操作规程
1 检验目的
做疾病的病原学诊断，查找于疾病有关的病原菌以及了解微生物与疾病的关系，指导临床治疗及预后和流行病学的调查。
2 原理
人体很多部位与外界相通，存在栖息菌群，但不致病，当菌群失调或分离到致病菌则具有临床意义；另外机体某些部位是无菌的，如检出细菌则视为致病菌。
并排除采样及操作污染。
3 标本要求
（1）标本类型：血液，骨髓，脑脊液，胸水，腹水，尿液，等体液；痰液，前列腺液，脓液，组织分泌物或穿刺液等。
（2）标本采集：见标本采集手册
（3）标本储存和运输：室温放置，室温运输并立即送检。
（4）标本拒收状态：非无菌方式采集的标本或未按要求部位采取的标本。
4 容器和添加剂类型
均使用灭菌器皿盛放标本
5 试剂
（1）试剂名称：革兰氏染液、氧化酶试剂、3%触酶、血平板、中国蓝平板、SS平板、柯玛嘉平板、相关生化试剂等。
6仪器设备：
（1）接种针、接种环、酒精灯
（2）梅里埃ATB药敏鉴定仪
（3）显微镜、SPX-150B型生化培养箱、超净工作台、台式离心机、天平
7 校准程序
(送市计量质量检测研究所校准)
8操作步骤
（1）所有标本按照培养目的增菌培养12-18小时后盲目接种，血培养发现阳性立即进行接种。
（2）接种：以上增菌标本及其他临床标本用接种环取标本接种环划线血平板及其他选择性培养基上,35℃培养过夜，观察结果。
（3）涂片：肉眼见细菌生长，取生长物涂片做革兰氏染色；
（4）纯培养：根据需要接种血平板、巧克力、中国蓝/柯玛嘉或厌氧平板过夜培养以获得纯培养。
（5）鉴定：按照鉴定仪要求调配菌液浓度，细菌的鉴定见梅里埃ATB微生物鉴定系统
9质量控制：
参加我科质量管理小组组织的各项质量控制活动
10 生物参考区间
血液，尿液，脑脊液等无菌部位采取的标本未见细菌生长；其他标本如大便，痰液为正常菌群或未见致病菌。
11 患者检验结果的可报告区间
细菌鉴定到种或属；菌群调查报告比例。
12 临床意义：
为医生提供病原学诊断，并为进一步药敏实验提供依据。