PCR仪基因扩增仪
分子生物学实验室仪器使用说明书
分子生物学实验室仪器使用说明书一、引言分子生物学实验室仪器的使用是进行基因研究和分析的重要环节，正确的仪器操作和维护对于保证实验结果的准确性具有至关重要的作用。
本说明书旨在提供对分子生物学实验室仪器的正确使用方法和维护技巧的指导，以确保实验室工作的顺利进行。
二、常用仪器1. 基因扩增仪基因扩增仪是分子生物学实验室常用的仪器之一，其中最常见的是PCR仪。
以下是PCR仪的使用步骤：- 将待扩增的DNA模板、引物和试剂添加至PCR管或96孔板中；- 根据所需的扩增程序，在PCR仪面板上设置合适的温度和时间参数；- 启动PCR仪，开始扩增；- 扩增结束后，及时取出试管或孔板，并进行下一步实验操作。
2. 凝胶电泳仪凝胶电泳仪主要用于观察DNA、RNA或蛋白质的迁移情况以及分子大小的测定。
以下是凝胶电泳仪的使用步骤：- 准备所需的琼脂糖凝胶，并注入到电泳槽中；- 将待检测的样品混合液加入到电泳槽中的样品孔中；- 在电泳槽两侧连接正负极电源，并设置合适的电压和时间参数；- 启动电源，进行电泳；- 电泳结束后，取出凝胶，进行染色或进一步分析。
3. 离心机离心机用于分离混合物中的固体颗粒和液体，是分子生物学实验室必备的仪器之一。
以下是离心机的使用步骤：- 将待离心的样品均匀加入离心管中，并保持离心管的平衡；- 将离心管放入离心机转盘的相应位置，并注意转盘的平衡；- 根据离心速度和时间要求，设置合适的参数；- 启动离心机，开始离心过程；- 离心结束后，小心取出离心管，注意避免离心管的倾斜或颠倒。
三、常见问题及处理方法1. 仪器出现异常- 若仪器出现异常操作或显示异常，应首先检查是否按照正确的使用步骤进行操作；- 仔细阅读仪器说明书，查看是否存在使用特殊注意事项；- 若仍无法解决问题，及时联系仪器维修人员进行检修。
2. 仪器维护- 每次使用仪器后，应进行基本的清洁和消毒，保持仪器干净整洁；- 定期检查仪器是否正常，如电源是否接触良好，仪器表面是否有明显损坏等；- 根据仪器的要求，及时更换耗材和维护配件。
细胞培养用的仪器
细胞培养用的仪器
细胞培养用的仪器包括细胞培养皿、细胞摇瓶、细胞计数器、离心机、PCR仪等。
这些仪器的作用分别是：
1. 细胞培养皿：用于细胞培养的实验室器具，一般由玻璃或塑料制成，形状为圆形或方形，用于观察细胞生长和繁殖的情况。
2. 细胞摇瓶：一种用于细胞培养的器具，由玻璃或塑料制成，形状为细长形，内装有细胞和培养基，通过摇晃可以使细胞得到充分的营养和氧气。
3. 细胞计数器：一种用于细胞计数的仪器，可以准确地测定细胞数量，帮助研究人员了解细胞生长和繁殖的情况。
4. 离心机：一种用于分离和纯化细胞的仪器，通过高速旋转将细胞和其他物质分离，可以用于细胞分离、洗涤和浓缩等操作。
5. PCR仪：一种用于DNA扩增的仪器，通过PCR技术可以将特定的DNA片段在短时间内大量扩增，用于基因克隆、突变分析和疾病诊断等领域。
这些仪器在细胞培养实验中是必不可少的，可以帮助研究人员更好地了解细胞生长和繁殖的情况，以及进行基因克隆和疾病诊断等研究工作。
四种常见PCR仪的区别及运用-科邦实验室-2020.6.24
四种常见PCR仪的区别及运用PCR扩增仪（俗称PCR仪）PCR：PCR（聚合酶链式反应）是利用DNA在体外摄氏95°高温时变性会变成单链，低温（经常是60°C左右）时引物与单链按碱基互补配对的原则结合，再调温度至DNA聚合酶最适反应温度（72°C左右），DNA聚合酶沿着磷酸到五碳糖(5'-3')的方向合成互补链。
PCR仪实际就是一个温控设备，能在95℃，55℃，72℃之间很好地进行温度控制。
PCR扩增仪又称为PCR基因扩增仪、PCR核酸扩增仪、聚合酶链反应核酸扩增仪，是利用PCR(Polymerase chain reaction，聚合酶链反应)技术对特定DNA扩增的一种仪器设备，被广泛运用于医学、生物学实验室中，例如用于判断检体中是否会表现某遗传疾病的图谱、传染病的诊断、基因复制以及亲子鉴定等。
根据DNA扩增的目的和检测的标准，可以将PCR仪分为普通PCR仪，梯度PCR 仪，原位PCR仪，实时荧光定量PCR仪四类。
1). 普通PCR仪（2万以下，赛默飞、伯乐、大龙，艾本德）一次PCR扩增只能运行一个特定退火温度的PCR仪称作传统PCR仪，也叫普通PCR仪。
如果要做不同的退火温度需要多次运行。
主要是用于简单的、对目的基因退火温度的扩增。
该仪器主要应用于科学研究、教学、医学临床、检验检疫等机构。
如:启步BSW-2P,BSW-3P,BSW-6P-I/II ,ABI 2720型2). 梯度PCR仪（2万-8万，赛默飞、伯乐、大龙，艾本德）一次性PCR扩增可以设置一系列不同的退火温度条件（温度梯度，通常有12种温度梯度）的PCR仪称作梯度PCR仪。
因为被扩增的不同DNA片段，其最适退火温度是不同的，通过设置一系列的梯度退火温度进行扩增，从而一次性PCR 扩增，就可以筛选出表达量高的最适退火温度，进行有效的扩增。
用于研究未知DNA退火温度的扩增，这样节约成本的同时也节约了时间。
基因扩增仪（PCR 仪）测温系统校准规范说明书
JJF ××××─201×基因扩增仪（PCR仪）测温系统校准规范1 范围本规范适用于48孔或96孔孔板结构的测量范围为（0～120）℃的多通道基因扩增仪（PCR仪）测温系统或者单通道基因扩增仪（PCR仪）测温仪的的校准，其他孔板结构和温度范围的基因扩增仪（PCR仪）测温系统的温度校准可以参考本规范。
2引用文件本规范引用下列文件：JJF 1071-2000 《国家计量校准规范编写规则》JJF 1007-2007 《温度计量名词术语及定义》JJF 1527-2015 《聚合酶链反应分析仪校准规范》YY/T 1173-2010《聚合酶链反应分析仪》ITS-90 1990年国际温标凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本规范；凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本规范。
3术语3.1 基因扩增仪（PCR仪），即聚合酶链反应分析仪polymerase chain reaction analyzer基于PCR（聚合酶链反应）技术原理，模拟DNA或RNA的复制过程，在模板、引物、校验和没等存在的条件下，特异扩增已知序列，对其进行检测分析的仪器设备。
[YY/T 1173-2010 3.2]3.2 基因扩增仪（PCR仪）测温系统temperature measuring system for Polymerasechain reaction analyzer用于基因扩增仪（PCR仪）的专用温度校准装置。
3.3 温度校准专用等温块与配件isothermal block and accessory for temperaturecalibration与标准恒温槽配套使用并提供基因扩增仪测（PCR仪）温系统温度校准的洁净温场的辅助装置。
3.4 温度校准专用等温块测试孔testing hole for temperature calibration模拟基因扩增仪控温块内的结构，提供基因扩增仪（PCR仪）测温系统探头布放插孔的专用等温块。
基因扩增仪(PCR仪)温度校准
link appraisement陕西中检计量测试技术有限公司图1 内部结构示意图CHINA SCIENCE AND TECHNOLOGY INFORMATION May.2021·中国科技信息2021年第10期10万～30万◎室或样品池中孔温度进行测量、在装有反映缓冲液的PCR管中安置温度传感器用于对反应缓冲液温度进行测量，是PCR仪现有的两种主要校准方法。
前者能将加热室或样品池中各点温度、均匀度直接获取，然而却无法将PCR管内反应体系温度反映；后者能获取可将PCR反应中各阶段温度更精确、真实反映的温度参数，然而PCR管质量却会对其构成巨大影响。
综合来看，采用后者展开测量，相对而言更加合理、科学。
PCR仪温度校准项目稳定的温度循环，是PCR得以成功实现的基础条件之一。
温度准确性、升降速度及温场均匀性和最大超调温度等温度控制的动、稳态特性，会对PCR扩增结果的准确性构成严重影响，温度准确性作为PCR仪关键性能指标之一的温度准确性，如果处于较低水平会引起非特异性扩增的情况，更有甚者会导致扩增结果出错，构成假阴性和假阳性。
现有PCR仪性能主要指标中，有关准确度方面的指标多以±0.5℃为主，个别PCR仪性能较好，能实现±0.3℃的温度准确度。
所以，有必要测试 PCR仪控温准确度。
在计算校准实验平均温度时，可采用公式：n ttnii∑==1，式中ti代表各个测量点实际温度值；i代表检测中使用的温度探头序号；n代表检测中使用的温度探头数量。
温场均匀性因PCR仪加热器难以均匀加热的缘故，PCR仪模块上各孔间会有适量温差存在，进而影响试验结果。
PCR仪边中间区域温度通常高于边缘点，因此PCR仪性能指标之一的均匀性也很重要，普遍规定在±0.5℃，个别性能较好的 PCR仪能实现±0.3℃的温度均匀度。
校准试验中，挑选16个孔板中的特殊反应位置用于温度测量，能将孔板温度均匀性获取。
荧光定量pcr仪的组成
荧光定量pcr仪的组成
荧光定量PCR仪主要由两部分组成：PCR系统和荧光检测系统。
1.PCR系统：主要由基因扩增热循环组件、微量荧光监测光学系统、
为电路控制系统、计算机及应用软件组成。
定量PCR必需借助样本和标准品之间的对比来实现定量的，对于定量PCR系统来说，重要的参数除了传统PCR的温控精确性、升降温速度等等，更重要的还在于样品孔之间的均一性，以避免微小的差别被指数级放大。
2.荧光检测系统：多色多通道检测是当今的主流趋势，仪器的激发
通道越多，仪器适用的荧光素种类越多。
荧光检测系统可以弥补背景荧光的差异，并设定域值水平，这是分析荧光数据的水平。
此外，实时荧光定量PCR仪还包括光路系统、检测器、热循环模块和分析软件等部分。
总之，荧光定量PCR仪是用于监测循环过程的荧光仪器，能够进行实时分析和数据处理，是生物学和医学研究的重要工具。
TC1000-SPCR基因扩增仪(1)
TC1000-SPCR基因扩增仪操作规程1.目的建立TC1000-SPCR基因扩增仪使用、维护保养与清洁操作规程，使操作规范化。
2.适用范围适用于本实验室TC1000-SPCR基因扩增仪的使用、维护保养与清洁操作。
3.责任本文件由实验员负责起草，实验室主任审核批准，实验人员严格按本程序操作，并进行日常维护保养与清洁工作，维修人员负责及时排除设备故障，并做好定期维护保养工作。
4.内容4.1操作方法4.1.1按PCR仪正面左下角电源开关，启动PCR仪。
4.1.2放PCR离心管，先把顶盖向上扳，再往前推，露出放样孔，PCR管放入前应加好反应体系各组分，再放入PCR离心管。
4.1.3反向重复第二步骤将顶盖板向后拉，盖好顶盖。
4.1.4按控制台面右方上下左右方向键，可随意移动编辑位置，输入需要的温度、时间、循环数等。
4.1.6据PCR离心管中加入的反应体积总量，在“Reaction volume”后输入相应数值，有Std“1～100ul”和9600“1~50ul”两档可供选择。
4.1.7按F1“Start”启动。
4.1.8按“INFO”对应键查看PCR结束键。
4.1.9扩增完成后按台面左方“Stop”键退出。
4.1.10按“Hist”，可查看上次扩增的历史记录。
4.1.11完全退出后，按台面左下方电源开关，拔出插销，切断电源。
4.2注意事项4.2.1使用PCR仪式要严格注意本机的使用环境条件和对电源的要求；4.2.2打开PCR仪机盖开关要轻，防止损坏盖锁；4.2.3 PCR基因扩增仪工作时严禁打开机盖；4.2.4要定期用肥皂水清洗仪器的样品槽，不能使用强碱，高浓度酒精和有机溶液擦洗；4.2.5产品出现故障时要及时请专业的维修人员或厂家的维修人员维修5.维护保养5.1. 更换保险丝先将PCR仪关机，拔去插头，打开电源插口旁边的保险盒，换上备用的保险丝，观第 1 页共2 页察是否恢复正常。
6.清洁操作6.1.清洁实施的频次6.1.1.首次安装后作一次清洁。
PCR基因扩增仪习题
4．压缩机PCR基因扩增仪：属于第二代PCR基因扩增仪，由压缩机自动控温，金属导热。
5．Overshooting：指升温过程中，由于一些加热元件，比如半导体、金属块本身会积蓄能量，虽然温度探头探测到温度到达了设定温度，但半导体、金属块上积蓄的能量仍然会传给PCR体系，造成实际的温度高于设定的温度。
3．PCR基因扩增仪按照变温方式的不同可分哪几类？分别有什么特点。
答：PCR基因扩增仪按照变温方式通常有以下三类：
（1）水浴式PCR仪：变温快、时间准、温度均一，但体积大，自动化程度不高。
（2）变温金属块式PCR仪：通过半导体加热和冷却，并由微机控制恒温和冷热处理过程。装置比较牢固耐用，温度变换平稳，有利于保持Taq DNA聚合酶的活性。
（3）变温气流式PCR仪：以空气作为热传播媒介，由大功率风扇及制冷设备提供外部冷空气而制冷。成本较低；安全程度高。微机配上软件，可灵活编程。
4．什么是梯度PCR仪？它有什么优点？
答：梯度PCR仪是由普通PCR仪衍生出的带梯度PCR功能的基因扩增仪。在反应过程中每个孔的温度控制条件可以在指定范围内按照梯度变化，根据结果，一步就可以摸索出最适合的反应条件。使用梯度PCR仪，多次实验可在一台仪器上完成，既节省实验时间，提高实验效率，又节约实验成本。
（3）各孔独立控温的定量PCR仪：各孔独立控温，适合多指标快速检测。但是上样不如传统方法方便，而且需要独特的扁平反应管，使用成本较高。
7．PCR基因扩增仪的温度控制包括哪些方面？
答：PCR基因扩增仪的温度控制是决定PCR反应能否成功的关键，主要包括温度的准确性、均一性以及升降温速度等方面。
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PCR仪基因扩增仪
1.快速运行，升降温速度快，设定时间短
2.全自动程序编写功能
3.热盖设计，适用的反应管范围广，支持低体积的PCR反应
4.能通过USB 闪存传输扩增程序和登录文件
5.能通过电脑编写扩增程序
6.能适配用户不同的反应耗材和检测通量需求，包括定量检测
7.运行时间显示，能对实验状态一目了然
8.显示屏：高分辨率超大彩色液晶显示屏，可选择图形编程、文字编程或自动编程
9.接口：5 USB-A ，1 USB-B；
10.内存容量：仪器自身可存储至少1000个反应程序，此外可使用U 盘扩展内存
11.可连接USB 闪存和USB 鼠标
12.程序编写选项：图形，文本，自动程序编写器
13.报告：可以输出的运行日志、系统报错日志
14.安全性能：保护模式，登录选项，文件夹保护；
15.可升级为6通道CFX96实时定量PCR 仪
16.温控模式：逻辑计算式和模块式
17.有PCR许可证
18.PC兼容性：Windows XP或更高，通过C1000连接。
反应模块：
1. 样品容量：96×0.2ml反应管
2.大升降温速率：5℃/sec；
3. 温度范围：0-100℃；
4. 温度准确性：±0.2℃（90℃值）
5. 温度均一性：达到设定温度10秒孔间±0.4℃（90℃值）
温度梯度：
1.梯度准确度：末列±0.2℃
2. 列内温度均一性：达到设定温度10秒内同列内孔间±0.4℃
3. 温度梯度范围：30-100℃，不低于室温30°C
4. 温度梯度温差范围：1-24℃
配置：快速PCR基座＋96×0.2ml反应管快速梯度反应模块
反应模块可选择：双48孔温度梯度快速模块，96孔温度梯度快速反应模块，96孔深孔温度梯度反应模块，384孔温度梯度反应模块，CFX96光学反应模块，CFX384光学反应模块。
无需额外工具，能满足不同实验的要求。