生物洁净室的灭菌方法总汇
洁净区臭氧灭菌验证及方案)
洁净区臭氧灭菌验证及方案一、简述臭氧有很高的能量，很不稳定，在常温，常压下，臭氧结构易变，很快自行分解为氧和单个氧原子。
后者具有极强的氧化作用，臭氧的半衰期为22~25min。
生成臭氧的原料主要是空气和电能。
臭氧杀菌机制：（1）作用于细胞膜，导致细胞膜的通透性增加，细胞内物质外流，使细胞失去活动；（2）使细胞活动必需的酶失去活性；（3）破坏细胞内的遗传物质或使其失去功能。
臭氧杀灭病毒是通过直接破坏核糖核酸或脱氧核酸完成的。
而杀灭细菌、霉菌类微生物则是臭氧首先作用与细胞膜，使细胞膜的构成收到损伤，导致新陈代谢障碍并抑制其生长，臭氧继续渗透破坏膜内组织，直到死亡。
不同洁净室可根据其体积，选用适当的臭氧发生器，将主机设置在HV AC系统的送、回风主管道中或净化空调箱的中效过滤器后端的合适位置，电源控制系统置于机房内。
消毒时，关闭新风进口（或关闭约90%的新风进口阀门）和回风对外排放阀门，是整个被消毒的洁净室空气通过净化系统风道形成内循环状态。
每天开机1~1.5h进行空气灭菌；替代化学药剂熏蒸消毒及设备表面灭菌需开机2~2.5h。
10万级别的洁净区，臭氧投加浓度为10MG/M3。
臭氧衰减率为0.375。
按空间的大小投加量计算：臭氧发生器产量=体积*10/0.375按这计算出来的臭氧发生器产量，基本的能达到10万级别洁净区的洁净标准。
二、目的制剂的生产过程主要在洁净区完成，洁净区用臭氧灭菌的效果直接影响到产品的质量，为确认臭氧灭菌的可靠性,用臭氧灭菌取代甲醛熏蒸灭菌，减少对员工身体健康的损害，特制订本验证方案进行验证。
验证过程应严格按照本方案规定的内容进行,若因特殊原因确需变更时,应填写验证方案变更申请及批准书,报验证小组批准。
三、工艺原理图将臭氧气体引到送风主管道中，利用HV AC系统中净化风机产生的压力风源，扩散至所控制的整个洁净区域。
四、验证计划(1)、洁净区空气消毒方法原理：1.1 是采用臭氧发生器产生臭氧后，通过HVAC 系统机组的正压送风段和送风管送入洁净区，再通过回风管回到机组，组成一个闭合的空气循环系统，控制消毒过程中的循环时间或密闭时间，从而使一定浓度的臭氧气体在规定的时间内，杀灭洁净区内的微生物。
洁净区消毒灭菌方案
洁净区消毒灭菌方案
1. 消毒灭菌目标：确保洁净区域内的空气和表面无菌，防止交叉感染。
2. 消毒频率：根据洁净区的使用频率和情况，制定定期消毒计划，通常每日开始工作前和结束后进行。
3. 消毒剂选择：选择适用于洁净区的高效消毒剂，如醚类酒精、过氧化氢、紫外线等。
确保所选消毒剂能够有效灭活目标菌种。
4. 操作步骤：
a. 准备工作：
-确保工作人员穿戴适当的洁净服，戴口罩、手套等。
-移除洁净区域内的不必要物品，确保表面清洁。
b. 表面清洁：
-使用预先配制好的消毒剂擦拭所有工作台面、设备表面和其他可能受污染的区域。
-注意对密闭设备的消毒，如培养箱、实验仪器等。
c. 空气消毒：
-使用紫外线灯对洁净区域内的空气进行辐照，确保灭活悬浮在空气中的微生物。
-通过高效空气过滤系统，过滤和清除悬浮颗粒和微生物。
d. 手部消毒：
-工作人员在进入洁净区前，必须按规定程序进行手部消毒，确保双手无菌。
5. 检测和验证：
-定期进行洁净区域的微生物监测，确保消毒灭菌效果符合要求。
-对消毒剂浓度、消毒时间等参数进行验证，保证消毒程序的有效性。
6. 紧急情况应对：
-制定应对洁净区域内紧急情况的应急预案，确保在意外事件发生时能够迅速采取措施。
7. 记录和报告：
-每次消毒灭菌操作后，记录消毒的时间、方法、消毒剂使用量等信息，建立详细的消毒档案。
-对异常情况及时报告，并进行相应的整改和改进。
8. 持续改进：
-定期评估洁净区消毒灭菌方案的效果，根据监测结果和实际情况进行持续改进，确保洁净区域的安全无菌状态。
常用的灭菌方法
常用的灭菌方法在生物医学领域，灭菌是一项非常重要的工作，它可以有效地杀灭各种微生物，包括细菌、真菌、病毒等，以确保实验室操作和医疗器械的无菌状态。
灭菌方法有很多种，下面我们就来了解一下常用的灭菌方法。
首先，我们来介绍常见的物理灭菌方法。
物理灭菌主要是通过高温、高压或辐射等方式来杀灭微生物。
其中，高温灭菌是最常见的一种方法，常用的设备有高压蒸汽灭菌器和干热灭菌箱。
高压蒸汽灭菌器利用高温高压的蒸汽来灭菌，适用于各种耐热器械和培养基的灭菌。
而干热灭菌箱则是利用高温干热来灭菌，适用于一些不耐潮湿的器械和材料。
此外，辐射灭菌也是一种常见的物理灭菌方法，它利用紫外线或γ射线来破坏微生物的遗传物质，从而达到灭菌的目的。
除了物理灭菌方法，化学灭菌方法也是常用的一种。
化学灭菌方法主要是利用化学药剂来杀灭微生物。
常见的化学灭菌药剂有乙烯氧化物、过氧化氢、醛类等。
乙烯氧化物灭菌是一种常用的气态化学灭菌方法，它适用于一些对高温敏感的器械和材料。
过氧化氢灭菌则是一种环保型的化学灭菌方法，它在灭菌过程中会产生水和氧气，不会留下任何残留物。
醛类灭菌则是一种常用的液态化学灭菌方法，它适用于各种器械和材料的灭菌。
最后，还有一种常用的灭菌方法是微生物过滤。
微生物过滤是利用微孔膜过滤器来过滤掉微生物，从而达到灭菌的目的。
微生物过滤适用于一些对高温、高压和化学药剂敏感的药品和生物制品的灭菌。
总的来说，常用的灭菌方法包括物理灭菌、化学灭菌和微生物过滤。
在实际应用中，我们可以根据具体情况选择合适的灭菌方法，以确保实验室操作和医疗器械的无菌状态。
同时，我们也要注意灭菌方法的操作规范和设备的维护保养，以确保灭菌效果和实验室安全。
希望本文能够对大家有所帮助，谢谢阅读！。
常见的微生物消毒与灭菌方法
常见的微生物消毒与灭菌方法物理灭菌法（一）加热灭菌法加热可破坏微生物中酶、蛋白质和核酸，导致微生物死亡。
加热灭菌又分干热灭菌法和湿热灭菌法。
在同一温度下，湿热灭菌的效果比干热灭菌好。
主要是因湿热灭菌时，有水分存在，蛋白质容易变性。
水分又易使微生物膜壁润湿，湿热的穿透力比干热大。
干热灭菌法常用的有火焰灭菌法与干热空气灭菌法两种。
（二）紫外线灭菌法是指用紫外线照射杀灭微生物的方法。
一般用于灭菌的紫外线波长是200~300nm，灭菌力最强的波长是253.7nm。
紫外线作用于核酸蛋白促使其变性，同时空气受紫外线照射后产生微量臭氧，从而起共同杀菌作用。
紫外线进行直线传播，可被不同的表面反射，穿透力微弱，但较易穿透清洁空气及纯净的水。
因此本法适用于照射物体表面之灭菌、无菌室的空气及水的灭菌；不适用于药液的灭菌、固体物质深部的灭菌；普通玻璃可吸收紫外线，因此装于玻璃容器中的药物不能用此法灭菌。
紫外线对人体照射过久，会发生结膜炎，红斑及皮肤烧灼等现象，故一般在人入室前开启紫外线灯1~2小时，关闭后人才进入洁净室。
如果必须在人进去后仍要开紫外线灭菌，则人的皮肤及眼睛应有有效的防护措施。
一般在6~15m3的空间可装置30瓦紫外线灯一盏，离地面2.5~3m为宜。
用紫外线照射灭菌时要注意下列问题：1、紫外线的杀菌力，随使用时间增加而减退，一般使用时间达到额定时间70%时应更换紫外线灯管，以保证杀菌效果。
国产紫外线灯平均寿命一般为2000h。
2、紫外线的杀菌作用随菌种不同而不同，杀霉菌的照射量要比杀杆菌大40~50倍。
3、紫外线照射通常按相对湿度为60%的基础设计，室内湿度增加时，照射量应相应增加。
4、紫外线灭菌效果与照射的时间长短有关，这需要通过验证来确定照射时间。
5、紫外照射灯的安装形式及高度，应根据实际情况,参考使用说明决定。
灭菌方法的验证采用生物指示剂挑战试验，生物指示剂多用枯草芽孢杆菌。
（三）微波灭菌法微波是指频率在30~3000MHz之间的电磁波。
医疗机构常用的消毒与灭菌方法
⑵应尽量将同类物品放在一 起灭菌，若将不同类物品装放在 一起，则以最难达到灭菌物品所 需要的温度和时间为准。
⑶物品装放时，上下左右相 互间均应间隔一定距离以利蒸汽 置换空气；
⑷难于灭菌的大包放在上层 ，较易灭菌的小包放在下层；金 属物品放在下层，织物包放在上 层； ⑸启闭式筛孔容器，应将筛 孔的盖打开。
2、包装： ⑴包装材料应允许物品内部 空气的排出和蒸汽的透入。市售 的普通铝饭盒与搪瓷盆，不得用 于装放待灭菌的物品，应用自动 启闭式或带通气孔的器具装放； 常用的有储物槽（盒）；
（2）布包装层数不少于两层， 用下排气式压力蒸汽灭菌器的物 品包，体积不得超过 30cm×30cm×25cm ； 用于预真空和脉动真空压力 蒸汽灭菌器的物品包，体积不得 超过30cm×30cm×50cm。 金属包的重量不超过7公斤， 敷料包不超过5公斤；
不能用于凡士林等油类和粉 剂的灭菌。预真空式压力蒸汽灭 菌器因所抽负压较强，可使瓶内 液体溢出，因此不能用于瓶装液 体的灭菌。
（三）灭菌前物品的准备
1 、清洗：灭菌前应将物品彻 底清洗干净，物品洗涤后，应干 燥并及时包装。清洗不彻底是灭 菌失败的因素之一。特别是接触 脓血便的物品污染严重，不容易 清洗，有机物残留影响了灭菌效 果。对于污染的医疗器械处理程 序应该是先消毒、再清洗。
医院的无菌器材中心供应室 往往将之作为灭菌的首选方法。 主要用于对耐热、耐湿物品的处 理。因此，正确的掌握压力蒸汽灭
菌器的使用方法及注意事项等知识， 对保证灭菌效果，减少医院性感染 是非常必要的。
（一）压力蒸汽Biblioteka 菌的分类根据排冷空气的方式和程度不同， 分为下排气式和预真空式两大类。手 提式、立式、卧式压力蒸汽灭菌器均 属于下排气式压力蒸汽灭菌器。
各种灭菌法详细介绍
各种灭菌法详细介绍灭菌法系指用适当的物理或化学手段将物品中活的微生物杀灭或除去的方法。
本法适用于无菌制剂、原料、辅料及医疗器械等物品的灭菌。
无菌物品是指物品中不含任何活的微生物。
然而，对于任何一批灭菌产品来说，绝对无菌既无法保证也无法用试验来证实。
物理或化学手段灭菌试验表明：微生物的杀灭遵循对数规则，因此，已灭菌物品的无菌标准一般以物品灭菌后微生物存活的概率-无菌保证水平SAL (Sterility Assurance Level)表示。
最终灭菌产品微生物存活的概率不得高于10-6。
已灭菌产品达到的无菌保证水平可通过验证确定。
灭菌产品的无菌保证并不能依赖于最终产品的无菌检验，而是取决于生产过程中采用合格的灭菌工艺、严格的GMP管理和良好的全面质量保证体系。
灭菌工艺的确定应综合考虑被灭菌物品的性质、灭菌方法的有效性和经济性、灭菌后物品的完整性和稳定性等因素。
灭菌程序的验证是无菌保证的必要条件。
灭菌程序经验证后，方可交付正式使用。
验证内容包括：⑴撰写验证方案及制定评估标准。
⑵确认灭菌设备技术资料齐全、安装正确,并能处于正常运行（安装确认）。
⑶确认关键控制设备和仪表能在规定的参数范围内正常运行（运行确认）。
⑷采用灭菌物品或模拟物品进行重复试验，确认灭菌效果符合规定（性能确认）。
⑸汇总并完善各种文件和记录，撰写验证报告。
日常生产中，应对灭菌程序的运行情况进行监控，确认关键参数（如温度、压力、时间、湿度、灭菌气体浓度及吸收的辐照吸收剂量等）均在验证确定的范围内。
灭菌程序应定期进行再验证。
当灭菌程序发生变更（包括灭菌物品装载方式和数量的改变）时，应进行再验证。
产品的无菌保证与灭菌前产品被污染的程度及污染菌的特性相关。
因此，应严格监控被灭菌品灭菌前的微生物污染水平及污染菌的耐受性，并在生产的各个环节采取各种措施降低污染，确保微生物污染控制在规定的限度内。
灭菌后，应防止已灭菌物品被再次污染。
任何情况下，都应要求容器及其密封系统确保产品在有效期内符合无菌要求。
常用的七大灭菌方法
常用的七大灭菌方法常用的灭菌方法有湿热灭菌法、干热灭菌法、辐射灭菌法、气体灭菌法、过滤除菌法、汽相灭菌法、液相灭菌法等，可依据被灭菌物品的特性采纳一种或多种方法组合灭菌。
一、湿热灭菌法本法系指将物品置于灭菌设备内利用饱和蒸汽、蒸汽-空气混合物、蒸汽-空气-水混合物、过热水等手段使微生物菌体中的蛋内质、核酸发生变性而杀灭微生物的方法。
该法灭菌力量强，为热力灭菌中最有效、应用最广泛的灭菌方法，适用于药品、容器、培育基、无菌衣、胶塞以及其他遇高温柔潮湿性能稳定的物品。
湿热灭菌条件通常采纳温度-时间参数或者结合F0值（F0值为标准灭菌时间，系灭菌过程给予被灭菌物品121°C 下的等效灭菌时间）综合考虑。
二、干热灭菌法本法系指将物品置于干热灭菌柜、隧道灭菌器等设备中，利用干热空气达到杀灭微生物或消退热原物质的方法。
适用于耐高温但不宜用湿热灭菌法灭菌的物品灭菌，如玻璃器具、金属制容器、纤维制品、陶瓷制品、固体试药、液状石蜡等。
干热灭菌条件通常采纳温度-时间参数或者结合FH值（FH值为标准灭菌时间，系灭菌过程给予被灭菌物品160°C下的等效灭菌时间）综合考虑。
三、辐射灭菌法本法系指利用电离辐射杀灭微生物的方法。
常用的辐射射线有60Co 或137Cs衰变产生的γ射线、电子加速器产生的电子束和X射线装置产生的X射线。
适用于能够耐辐射的医疗器械、生产帮助用品、药品包装材料、原料药及成品等。
辐射灭菌掌握的参数主要是辐射剂量（指灭菌物品的汲取剂量），为保证灭菌过程不影响被灭菌物品的平安性、有效性及稳定性，应确定最大可接受剂量。
四、气体灭菌法本法系指用化学灭菌剂形成的气体杀灭微生物的方法，最常用的化学灭菌剂是环氧乙烷，一般与80% ~90%的惰性气体混合使用，在充有灭菌气体的{压腔室内进行。
适用于不耐高温、不耐辐射的物品（如医疗器械、塑料制品和药品包装材料等），干粉类产品不建议采纳本法灭菌。
采纳环氧乙烷灭菌时，腔室内的温度、湿度、灭菌气体浓度、灭菌时间是影响灭菌效果的重要因素，同时需确认灭菌完成后灭菌气体和反应产物残留量对灭菌物品的平安性、有效性和稳定性的影响。
实验室消毒灭菌的方法
实验室消毒灭菌的方法
1. 物理方法，物理方法包括热力消毒和辐射消毒。
热力消毒通
常使用高温蒸汽或干热来杀灭细菌和病毒。
辐射消毒则利用紫外线
或离子辐射来破坏微生物的DNA和RNA，从而杀灭它们。
2. 化学方法，化学方法包括使用化学消毒剂，如乙醛、过氧化
氢和醇类。
这些消毒剂能够杀灭细菌、真菌和病毒，从而保持实验
室设备和表面的清洁。
3. 生物方法，生物方法主要指利用生物灭菌剂，如孢子悬浊液
或孢子粉末，来杀灭细菌和真菌。
这些生物灭菌剂通常会释放出孢子，通过破坏微生物的细胞壁来达到消毒的效果。
4. 气体灭菌，气体灭菌是一种常用的实验室消毒方法，它利用
一氧化氯或二氧化硫等气体来杀灭微生物，特别适用于对设备和材
料进行消毒。
除了以上方法外，实验室还可以采取一些其他措施来确保实验
室的清洁和安全，比如定期清洁和消毒工作台、实验室器皿和设备，以及加强实验室员工的个人卫生意识和操作规范。
综上所述，实验
室消毒灭菌的方法是多种多样的，选择合适的方法取决于实验室的具体情况和需求。
希望以上信息能够帮助你更好地了解实验室消毒灭菌的方法。
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生物洁净室的灭菌方法总汇
对生物洁净室不仅依靠空气过攘的方法，使送入洁净室内的空气中的生物或非生物微桂数量受到严格控制，还要对室内器具、地面、墙面、壁极等表面进行消毒处理。
因此，生物洁净室除了满足一般洁净室的要求外，其内部材料还要能经受各种灭菌剂的侵蚀。
通过亚高效或高敢过滤器的空气可视为无菌空气，但是过滤仅是－种除菌手段，并没有杀菌作用，由于洁净室内有人员、物料等污染掘存在，因此只要有微生物所需要的营养源存在的地方，就可能使微生物生存、繁衍。
因此生物洁净室的设计、管理运行中决不可忽视消毒灭菌措施。
传统的灭菌方法有紫外线灭菌、药剂灭菌和加热灭菌。
这些方法已被人们熟知，其安全可靠性已被长期的实践确认。
但这些方法也有各自的缺陆，如紫外线杀菌，其装置设置和使用都较方便，但因穿透能力有限，对紫外线照射不到的地方，灭菌效果不好，且灯管寿命短，更换频繁，运行费用高；化学试剂灭菌，如甲醒熏蒸法．操作麻烦，熏燕时间长，有二次污染物，对入体有－定的危害，熏蒸后残留物附着在洁净室的墙面和设备表面等，需要擦净，高时处理不当，在灭菌后的数日内，其悬浮粒子数会有所增加；加热灭菌包括干热和湿热，其缺点是温度高、能能大，有些物品如某些些原材料、仪器仪表、塑料制品等则不宜采用。
近年来，臭氧灭菌在医药产品、生物药品制造过程中得到日益广泛的应用，臭氧是一种广谱杀菌剂，可杀灭细菌繁体和芽抱、病毒、真菌等，可破坏内毒杆菌毒素。
臭氧在水中的杀菌作用较氯快。
臭氧灭菌方法现已在一些生物洁净室用于管道和容器的消毒灭菌，通过净化事调系统对洁净室灭菌，物品的表面消毒和水的消毒灭菌等。
在具体的生物洁净室中采用哪一种灭菌方法，应根据洁净室的用途、产品生产工艺特点和采用的生产设备的实际情况确定。