苏木素染色原理
苏木素染色原理
苏木素-伊红染色液(H-E)说明书【产品名称】苏木素-伊红染色液(H-E）【型号】苏木素染色液分别为：Mayer型、改良Harris型、型改良Lillie-Mayer型；伊红染色液分别为：水溶型、醇溶型。
【包装规格】货号：DH0006单瓶包装规格分别为：100ml、250ml、500ml、5000ml；每套/盒包装规格分别为：2×100ml/盒、2×250ml/盒、2×500ml/盒、2×5000ml/盒。
【预期用途】主要用于对细胞组织进行染色。
【检验原理】苏木素(Hematoxylin)和伊红(Eosin)联合主要用于对细胞组织进行染色，简称HE染色，是病理学常规制片中最基本的染色方法，应用极其广泛，苏木素-伊红染色是生物学、组织学、病理学及细胞学等学科必不可少的最基本的染色方法，在病理诊断、教学与科研中广泛应用，具有重要价值，细胞中的细胞核是由酸性物质组成，它与碱性染料(苏木素)的亲和力较强；细胞浆则相反，它所含的碱性物质与酸性染料(伊红)的亲和力较大。
因此细胞或组织切片经苏木素-伊红染色液染色后，细胞核被苏木素染成鲜明的蓝紫色，细胞浆、肌纤维、胶元纤维等呈不同程度的红色，红细胞则呈橙红色。
【主要组成成分】试剂组成主要成分苏木素染色液(改良Lillie-Mayer)或苏木素染色液(改良Harris)或木素染色液(Mayer) 苏木色精伊红染色液(水溶)或伊红染色液(醇溶) 伊红【储存条件及有效期】5℃～35℃保存，原包装未开封染色液的有效期为18个月，在有效期内的已开封染色建议在开封后6个月内使用完，每次用后及时拧紧瓶盖，以免挥发或变质。
【样本要求】涂片和切片必须充分固定，石蜡切片要充分脱蜡。
【检验方法】l、石蜡切片于二甲苯I、II中脱蜡；2、经无水乙醇和95%乙醇，经8O%乙醇，自来水冲洗；3、苏木素染色液(改良Lillie-Mayer或改良Harris)染色，自来水洗；或苏木素染色液(Mayer)染色；4、苏木素染色后用l%盐酸乙醇溶液分化数秒(l%盐酸乙醇溶液配制：99m1 75%乙醇加1ml浓盐酸）；若用苏木素染色液(Mayer)染色后则不需分化；5、自来水冲洗返蓝；亦可用碳酸锂水溶液返蓝，自来水洗；6、入伊红染色液(水溶)染色，稍洗；若用伊红染液(醇溶），切片应先经80%乙醇脱水后，再入伊红染液(醇溶)染色(忌水洗）；7、95%乙醇I、II中调色；8、无水乙醇I、II中脱水，二甲苯I、II中透明；9、封片胶封片，镜检。
苏木素染色原理
苏木素(Hematoxylin)和伊红( Eosin)染色，简称HE 染色，是病理学常规制片中最基本的染色方法，应用机器广泛。
苏木精是从原产中南美的洋苏木中提取出来的浅黄褐色的结晶，是一种碱性染色剂，它在被氧化后生成苏木素，同媒染剂(常用的是三价的铝或盐铁)一起使用，能够使细胞核染色。
在病理诊断、教学和科研工作中，常用HE 染色对正常组织和病变组织进行形态结构观察。
对于确定或鉴别病变组织、细胞中出现的某些异常物质与特殊成分，而需要采用的特殊染色方法、酶组织化学方法、免疫组织化学方法等也均是在观察HE 染色组织切片的基础上进行的。
在HE 染色的组织切片中，细胞核呈蓝色，细胞浆呈红色，二者形成鲜明的对比，易于观察分析。
苏木素伊红染色试剂盒中，苏木素染色液采用进口的高纯度苏木精、硫酸铝钾、甘油等组成，不含氧.化.汞、甲醇等有害物质，对细胞核染色效果好。
其特点：长期保存，不易产生沉淀和金属; 应用范围广，可以用于人、动物、畜牧、水产等领域，可以用于组织石蜡切片、冰冻切片和组织细胞的染色等；苏木素染色液可以重复使用。
染色原理：1、细胞核染色的原理：苏木素为碱性天然染料，可使细胞核着色。
细胞核内染色质的成分主要是DNA，在DNA双螺旋结构中，两条核苷酸链上的磷酸基向外，使DNA 双螺旋的外侧带负电荷，呈酸性，很容易与带正电荷的苏木素碱性染料以离子键或氢键结合而被染色。
苏木素在碱性溶液中呈蓝色，所以细胞核被染成蓝色。
2、细胞浆染色的原理：伊红是一种化学合成的酸性染料，在一定条件下可使细胞浆着色。
细胞浆的主要成分是蛋白质，为两性化合物，细胞浆的染色与染液的pH 值密切相关。
当染液的pH 值在胞浆蛋白质等电点(4.7～5.0)以下时，胞浆蛋白质以碱式电离，则细胞浆带正电荷，就可被带负电荷的酸性染料染色。
伊红在水中离解成带负电荷的阴离子，与胞浆蛋白质带正电荷的阳离子结合，使细胞浆着色，呈现红色。
3、分化作用：染色后，用某些特定的溶液将组织过多结合的染色剂脱去，这个过程称为分化作用，所用的溶液称为分化液。
HE Staining
苏木素-伊红染色（HE）【染色原理】苏木素染液中带正电荷的蓝色色精与细胞核中带负电荷的脱氧核糖核苷通过正、负电荷的极性吸附而守成染色；伊红是带负电荷的酸性染料，通过渗透或弥散作用而使组织着色。
【组织固定与切片】4%甲醛固定，石蜡切片厚度4~6μm。
【染色用具】常规染色用具一套：染色皿或染色缸、刻字笔、标签、树脂胶、盖玻片、鸭嘴镊、绸布或纱布。
滴管数支。
【试剂配制】1. Harris苏木素液苏木素2.5g，无水乙醇25ml，钾明矾50g，蒸馏水500ml，氧化汞1.25g，乙酸20ml。
将苏木素溶于乙醇（加热）后加入预先已加热溶解明矾的蒸馏水中，煮沸1~2min，改用小火加热，慢慢加入氧化汞（注意防止产生大量气泡和溶液溅出）再煮沸2min后立即浸于冷水中，冷却后加入乙酸，过滤后使用。
2. 伊红液（1) 水溶性伊红染液：伊红0.5g，蒸馏水100ml。
（2）醇溶性伊红染液：伊红0.5~1g，80%~95%乙醇100ml。
3. 分化液: 盐酸0.5~1ml，80%乙醇100ml。
4. 返蓝液: 氨水1ml，蒸馏水100ml。
5. 各级乙醇、二甲苯【注意事项】1. 石蜡切片在脱蜡前要烘烤使组织与切片粘贴。
烘烤温度50℃，时间30min 或30℃，24h。
2. 脱蜡要彻底，应定期更换脱蜡液。
3. 分化的时间要恰当掌握，可镜下观察着色情况。
4. 透明要充分。
【染色步骤】1. 石蜡切片二甲苯Ⅰ脱蜡10~15min。
2. 二甲苯Ⅱ脱蜡10~15min。
3. 无水乙醇5min。
4. 95%乙醇5min。
5. 80%乙醇5min。
6. 自来水冲洗1min。
7. 蒸馏水洗1min。
8. 苏木素染液5~15min。
9. 自来水冲洗1~5min。
10. 化液分化数秒至数分钟。
11. 自来水冲洗1~3min。
12. 返蓝液返蓝30s~1min。
13. 自来水冲洗。
14. 伊红液5~10min。
15. 自来水冲洗。
16. 80%乙醇脱水30s。
河南赛诺特生物 苏木素-伊红（H-E）染色液产品说明书
苏木素-伊红（H-E）染色液产品说明书【产品名称】通用名称：苏木素-伊红（H-E）染色液英文名称：Hemaxytolin-Eosin(HE)Staining kit【包装规格】500mL/瓶，5瓶/盒【预期用途】用于对石蜡切片和冰冻切片的细胞组织进行染色。
【检验原理】苏木素经过氧化变成酸性染料苏木红，苏木红与三价铝离子结合形成带正电荷的蓝色色精，便可与细胞中带负电荷的脱氧核糖核酸结合。
苏木素染液主要使细胞核内的染色质与胞质内的核糖体着紫蓝色；伊红Y为酸性胞质性染料，主要使细胞质和细胞外基质中的成分着红色。
【主要组成成份】每套苏木素-伊红（HE）染色液试剂盒是由高清恒定液（A液）、苏木素染液（B液）、分化液（C液）、返蓝液（D液）、伊红染液（E液）组成。
每套苏木素-伊红（HE）染色液试剂盒的主要成分为：1)高清恒定液（A液），由专用稳定剂等成分组成；2)苏木素染液（B液），主要由苏木素、乙二醇、硫酸铝钾等成分组成；3)分化液（C液），主要由酒石酸等成分组成；4)返蓝液（D液），主要由Tris、氯化钠和防腐剂等成分组成；5)伊红染液（E液），主要由伊红二钠Y和乙醇等成分组成。
【储存条件及有效期】试剂盒应存放于室温（15-30℃），有效期为12个月，在有效期内的已开封试剂使用期限为3个月。
每次用后应及时盖上盖子，以免挥发或变质。
【适用仪器】手动常规染色和全自动染色机染色。
【样本要求】病理组织经取材，福尔马林固定，脱水处理，用石蜡包埋后制成蜡块，用切片机切成2-5μm厚度的组织切片采集到载玻片上（有些特殊类型的组织可能要求不同的切片厚度）。
之后将载玻片放置于烤片机上65℃（±5℃）下烤片10-30分钟，即可染色。
【检验方法】1、二甲苯I、II、III脱蜡各2-4min；2、无水乙醇I、II、III各2min；3、95%乙醇15s；4、75%乙醇15s；5、水洗1min；6、高清恒定液30s-60s；7、苏木素染液3-5min；8、水洗1min；9、分化液3-15s；10、水洗1min；11、返蓝液1-2min；12、水洗1min；13、95%乙醇30-60s；14、伊红染液20-60s；15、无水乙醇I、II、III各2min；16、二甲苯I、II、III各2min。
H-E染色原理
苏木素-伊红染色液(H-E)说明书【产品名称】苏木素-伊红染色液(H-E）【型号】苏木素染色液分别为：Mayer型、改良Harris型、型改良Lillie-Mayer型；伊红染色液分别为：水溶型、醇溶型。
【包装规格】货号：DH0006单瓶包装规格分别为：100ml、250ml、500ml、5000ml；每套/盒包装规格分别为：2×100ml/盒、2×250ml/盒、2×500ml/盒、2×5000ml/盒。
【预期用途】主要用于对细胞组织进行染色。
【检验原理】苏木素(Hematoxylin)和伊红(Eosin)联合主要用于对细胞组织进行染色，简称HE染色，是病理学常规制片中最基本的染色方法，应用极其广泛，苏木素-伊红染色是生物学、组织学、病理学及细胞学等学科必不可少的最基本的染色方法，在病理诊断、教学与科研中广泛应用，具有重要价值，细胞中的细胞核是由酸性物质组成，它与碱性染料(苏木素)的亲和力较强；细胞浆则相反，它所含的碱性物质与酸性染料(伊红)的亲和力较大。
因此细胞或组织切片经苏木素-伊红染色液染色后，细胞核被苏木素染成鲜明的蓝紫色，细胞浆、肌纤维、胶元纤维等呈不同程度的红色，红细胞则呈橙红色。
【主要组成成分】试剂组成主要成分苏木素染色液(改良Lillie-Mayer)或苏木素染色液(改良Harris)或木素染色液(Mayer) 苏木色精伊红染色液(水溶)或伊红染色液(醇溶) 伊红【储存条件及有效期】5℃～35℃保存，原包装未开封染色液的有效期为18个月，在有效期内的已开封染色建议在开封后6个月内使用完，每次用后及时拧紧瓶盖，以免挥发或变质。
【样本要求】涂片和切片必须充分固定，石蜡切片要充分脱蜡。
【检验方法】l、石蜡切片于二甲苯I、II中脱蜡；2、经无水乙醇和95%乙醇，经8O%乙醇，自来水冲洗；3、苏木素染色液(改良Lillie-Mayer或改良Harris)染色，自来水洗；或苏木素染色液(Mayer)染色；4、苏木素染色后用l%盐酸乙醇溶液分化数秒(l%盐酸乙醇溶液配制：99m1 75%乙醇加1ml浓盐酸）；若用苏木素染色液(Mayer)染色后则不需分化；5、自来水冲洗返蓝；亦可用碳酸锂水溶液返蓝，自来水洗；6、入伊红染色液(水溶)染色，稍洗；若用伊红染液(醇溶），切片应先经80%乙醇脱水后，再入伊红染液(醇溶)染色(忌水洗）；7、95%乙醇I、II中调色；8、无水乙醇I、II中脱水，二甲苯I、II中透明；9、封片胶封片，镜检。
苏木素染色原理
苏木精是一种碱性染料，可与媒染剂（通常是铁或铝的三价盐）一起使用以染色细胞核。
苏木精和苏木精都没有染色能力，但与媒染剂结合形成具有染色能力的色淀。
核，染色体，着丝粒，中心体，线粒体，髓鞘可以染成蓝色甚至黑色。
苏木伊红双重染色结合伊红是普通组织最基本的染色方法
苏木精和曙红通常在组织学上使用。
与碘溶液不同，这是一条永久性的染色街。
其他常用的含有苏木精的染料是磷钨酸苏木精，即磷钨酸和苏木精的混合物。
苏木精通常用于组织研究中。
明矾和铁盐通常被用作媒染剂以显示核和细胞质结构。
这些媒染剂的原理是形成媒染剂染料复合体以显示颜色。
苏木精染色显示内质为淡蓝色黑色，胞质收缩，其余部分未染色或颜色较浅。
圆形核为蓝黑色。
中心的核仁是小黑点。
核膜很薄，其内部边缘是均匀的，并且有一层小的染色质粒。
可以在核仁和核膜之间看到核网。
吞噬的红细胞为蓝色和黑色，然后用苏木精染色液染色，操作过程简单，操作时间短。
它可以与免疫组织化学，免疫细胞化学，免疫荧光和原位杂交结合使用。
用苏木精溶液染色后，也可用于免疫染色或用其他染料重新染色。
苏维埃
苏木精染色的原理非常简单，苏木精染色也是一种常见的染色方法。
木质素染色后，细胞核为蓝色，细胞质为粉红色或红色。
染色溶液也可以重复使用，直到认为效果不佳为止。
苏木精染色原理
苏木精染色原理引言：苏木精染色是一种在细胞或组织学研究中常用的染色方法，其原理是利用苏木精作为染料，通过与细胞或组织中的核酸结合，实现细胞或组织的染色，从而观察和研究细胞或组织的结构和功能。
本文将详细介绍苏木精染色的原理及其应用。
一、苏木精的化学特性苏木精，又称苏木酸，是一种紫红色结晶体，具有很强的亲水性。
它可以与DNA、RNA等核酸结合形成复合物，从而实现细胞或组织的染色。
苏木精染色是一种常用的核酸染色方法，可以使细胞核染色为深紫色，胞浆染色为浅红色。
二、苏木精染色的原理苏木精染色的原理是基于核酸的亲和性。
DNA、RNA等核酸分子具有负电荷，而苏木精是带正电荷的染料分子。
当苏木精溶液与细胞或组织接触时，苏木精分子会与核酸分子中的磷酸基团发生静电作用，形成苏木精-核酸复合物。
这些复合物在细胞或组织中具有很强的染色性，使得细胞核和胞浆能够被染色而显示出来。
三、苏木精染色的步骤苏木精染色通常需要经过以下几个步骤：1. 固定：将待染色的细胞或组织进行适当的固定处理，以保持其形态和结构的完整性。
2. 脱水：将固定后的细胞或组织进行一系列浓度递增的乙醇洗涤，使其逐渐脱水。
3. 渗透：将细胞或组织置于苏木精溶液中，使其渗透进入细胞或组织内部。
4. 染色：在苏木精溶液中，苏木精与细胞或组织中的核酸结合形成复合物，实现染色。
5. 洗涤：将染色后的细胞或组织进行洗涤，以去除多余的苏木精。
6. 脱水：将洗涤后的细胞或组织进行一系列乙醇洗涤，使其逐渐脱水。
7. 透明化：将脱水后的细胞或组织置于透明化剂中，使其透明化。
8. 封片：将透明化后的细胞或组织置于玻片上，并加上封片剂，使其固定在玻片上。
四、苏木精染色的应用苏木精染色在细胞或组织学研究中有着广泛的应用。
它可以使细胞核染色为深紫色，胞浆染色为浅红色，从而使细胞或组织的结构和形态更加清晰可见。
苏木精染色可以用于观察细胞的形态、核分裂、细胞凋亡等现象，对于研究细胞的生理和病理过程具有重要意义。
HE染色
对策：适当稀释伊红染色液，减
少伊红染色时间，或者使切片在 乙醇脱水等步骤时，停留时间相 对均匀。同样， 也要检查切片的 厚度是否合适。
封片：
在显微镜下呈现大量水珠或 云雾状改变
原因：切片经梯度乙醇处理后没
染色：
（1）苏木素染色
苏木素染色太浅，细胞核 与细胞质颜色对比度差。
原因：染色时间短；苏木 素过度氧化，失去染色能 力；分化时间过长。
对策：切片重新染色。
原因：与图2相反，染色液
时间过长、切片太厚、分化 步骤时间太短。
细胞核过染， 核膜、核仁等不清晰， 细胞质( 尤其是皮肤上皮细胞) 含有大量的 细胞核染色液苏木精， 导致细胞核与细胞 质比例失调。
几种常见的染色问题
脱蜡：
切片中白色的区域脱蜡不彻底，染色液由 于石蜡斑点的残留而不能渗透着色。
原因：①烤( 烘) 片温度
太低，脱蜡前没有充分烤 ( 烘) 干。 ②二甲苯脱蜡时 间不足， 或二甲苯使用过 久，造成脱蜡不尽。
对策：①用无水乙醇去
掉玻璃片上的水分，重新 二甲苯脱去石蜡。 ②切 片需退回到脱蜡步骤，延 长脱蜡时间，或跟换二甲 苯，驼色、漂白、重新染 色。
原因：盖玻片上可能有封固切
片的封固剂。
对策：移去盖玻片， 重新用干
净的盖玻片封片。
盖玻片上有封固剂所致切片组织模糊不清
封片后镜下则会出现类似色素的 点状结晶或类似“裸核”样的改变
原因：切片封片前放置在
空气中时间太长， 以至于 二甲苯挥发切片干燥所致。
对策：移去组织切片上的
盖玻片和封固剂， 重新处 理。将切片水洗数分钟，然 后重新脱水、透明、封固。 封片过程中要保持组织切片 的轻度湿润，尽量不要让其 干燥。
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苏木素：
苏木素是从洋苏木中提取的一种染色剂，它在被氧化后生成苏木精，同媒染剂（常用的是三价的铁或铝的盐）一起使用，能够使细胞核染色。
苏木素是一种碱性染料。
简介：
苏木素和伊红在组织学上被经常使用，与碘液不同，这是一种永久染色剂。
其他常用的含有苏木素的染色剂有磷钨酸苏木素染色剂，也就是磷钨酸与苏木素的混合物。
苏木素染色剂经常为组织的研究使用。
明矾和三价铁盐常常被用作媒染剂，展示核和细胞质结构。
这些媒染剂的原理都是形成媒染剂－染料－组织复合体，从而显示颜色。
使用的盐不同颜色也不同：当用铁盐呈现深蓝色颜色沉淀，用铝盐通常显示蓝白色。
下面分别介绍铝苏木素溶液和铁苏木素溶液。
苏木素染色：
苏木素染色是指内质呈淡蓝黑色，外质收缩，剩下部分不着色或色泽更浅的一种染色工艺。
苏木素染色（Largetrophozoitesstainedwithironhematoxylin)01：圆形细胞核呈蓝黑色。
居中的核仁呈黑色小圆点。
核膜较薄，其内侧缘均匀，整齐地排列着一层细小的染色质粒。
核仁与核膜之间可见到核网。
被吞噬的红细胞呈蓝黑色。
采用苏木素染色液(HematoxylinstainingSolution)进行免疫染色后的复染，操作步骤简便，操作时间短。
可以操作步骤简便，操作
时间短或培养细胞的染色，或与免疫组织化学、免疫细胞化学、免疫荧光、原位杂交等配合使用。
使用苏木素染色液染色后还可以进行免疫染色或其它染料的复染。
苏木素染色后的细胞核呈现蓝色，细胞浆呈现粉红色或红色。
染色液也可以重复使用，直至认为效果不佳时再换用新的染色液。