Cole氏苏木素染色液(常规染色)使用介绍
苏木素染色液配制流程
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苏木染色方法
苏木染色方法苏木染色是一种常用的组织切片染色方法，常用于生物医学领域的组织学研究中。
苏木染色可以清晰地显示细胞核和细胞质，有助于观察细胞结构和组织形态。
下面将介绍苏木染色的方法步骤和注意事项。
1. 材料准备。
苏木染色所需材料包括，苏木精溶液、甲醛固定液、酒精、蜡块、切片、显微镜等。
其中，苏木精溶液和甲醛固定液是必不可少的试剂，其浓度和保存条件需严格控制。
2. 样本处理。
首先，将待染色的组织样本进行固定处理，一般采用甲醛固定液固定组织，固定时间视样本大小而定，一般为6-24小时。
固定后，进行脱水和透明化处理，使组织脱水透明。
3. 切片制备。
将处理后的组织样本进行包埋、切片，制备出5-8μm厚的切片。
切片后，将其放置在温水中，使切片展开并粘附在载玻片上。
4. 染色步骤。
将载玻片放置在苏木精溶液中浸泡，时间一般为5-10分钟，然后取出晾干。
接着，将载玻片放入蜡熔点略高于60℃的热蜡中，使切片蜡块包埋。
包埋后，切片放入苏木精溶液中浸泡，时间一般为2-5分钟。
最后，将切片取出，经过脱水、透明化处理后，封片即可。
5. 注意事项。
在进行苏木染色时，需要注意苏木精的浓度和染色时间，过浓的苏木精会使细胞核染色过深，影响观察效果；染色时间过长也会导致染色过深。
此外，切片的制备过程中要保持刀片锋利，切片厚度均匀，以确保染色效果。
总结。
苏木染色方法是一种简单易行的组织切片染色技术，通过对组织样本的固定、切片和染色处理，可以清晰地显示细胞核和细胞质的结构，为细胞学和组织学研究提供了重要的技术支持。
在实际操作中，需要严格控制各个步骤的条件和时间，才能获得理想的染色效果。
通过本文的介绍，相信大家对苏木染色方法有了更深入的了解，希望能够在实验操作中取得良好的结果。
祝大家实验顺利！。
形态学技能-苏木素-伊红染色
2.二甲苯：①染色前：溶解切片中的石蜡，以使染液可以进入细胞和组织，因此，石蜡的存在妨碍水和染料进入细胞；②染色后：透明切片的作用，以利于光线透过，否则组织切片透明度达不到光学显微镜观察时透光度的要求，在显微镜下看不清细胞和组织结构。
苏木素-伊红（HE）染色操作
【试剂和材料】
已烤片的石蜡切片、二甲苯、无水乙醇、90%乙醇、70%乙醇、Ehrlich苏木素颜色液、0.5%盐酸70%酒精分色液、稀氨水返兰液、1%伊红染色液、中性树胶、自来水、蒸馏水
【耗材和设备】
染缸、盖玻片、玻璃棒、显微镜
【具体步骤】
1.实验准备：按步骤顺序摆放好染缸，准备计时器用主要依靠盐酸在水中容易电离出氢离子，用来改变组织的电荷性质，使过染和吸附在组织表面的染料从组织中及表面脱落下来，从而达到分化的目的。根据盐酸的性质，盐酸在水中电离出的氢离子要比在乙醇中电离出的氢离子多，我们认为传统的盐酸乙醇用于分化乙醇在这里并不起作用，相反，由于乙醇的存在致使切片更易脱落，因为乙醇具有脱水及使组织收缩的作用，分化后水洗时组织又发生吸水、膨胀，而造成脱片。为此，改用盐酸水溶液进行分化，可避免脱片现象的发生。
分化和返兰的作用
1.分化作用：苏木素染色后，用水洗去为结合在切片中染液，但是对细胞核中结合过多的染料和细胞浆中吸附的染料必须用酸性分化液脱去，保证细胞核和细胞浆染色分明。
2.返兰作用：分化之后苏木精在酸性条件下处红色离子状态，呈红色，若在碱性条件下处于蓝色离子状态，呈蓝色，所以在酸性溶液中分化之后用水洗去酸而中止分化，后用弱碱水（稀氨水）使细胞核中苏木素呈蓝色，呈返兰作用。
Scott蓝化液使用说明书
北京索莱宝科技有限公司
Scott蓝化液使用说明书
货号：G1865
规格：500ml
保存：RT避光，12个月
产品说明：
苏木素(Hematoxylin)和伊红(Eosin)联合染色简称HE染色，是病理学和组织学最常用的一种染色方法。
苏木素为碱性天然染料，可使细胞核着色。
分化之后，苏木素在酸性条件下处于红色离子状态，呈红色；在碱性条件下处于蓝色离子状态，呈蓝色。
组织切片经酸性乙醇分化后呈红色或粉红色，立即用水除去组织切片上的酸而中止分化，再用弱碱性水使苏木素染上的细胞核呈现蓝色，这个过程称为返蓝作用或蓝化作用。
另外用自来水浸洗也可使细胞核返蓝，但所需时间较长。
Scott蓝化液全称为Scott Tap Water/Bluing，又称Scott促蓝液，主要由硫酸镁、碳酸氢钠等组成，多用于苏木素染色后蓝化，尤其适用于Gill苏木素染色液(Gill No.3)的蓝化。
操作说明(仅供参考)：
1.按实验具体要求操作。
一般蓝化2～60s。
注意事项：
1.切片脱蜡应尽量干净。
系列乙醇应经常更换新液。
2.为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
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HOCHEST_染色
H o e c h s t染色的讨论H o e c h s t染色的具体步骤caspase8428：我看到资料上说，荧光染色的时候可以用DAB与荧光物质反应生成沉淀。
那么，Hoechst染色时，什么时候加DAB，浓度是多少，用什么稀释，最后怎么来终止反应？是不是还要用抗退色固片介质来封片？sunandsuny：Hoechst染色时无需用DAB来显色，它直接结合细胞的DNA ，经过紫外光激发后发出蓝色荧光。
如果你是用来染培养的细胞的话，可以参考下面的步骤（切片雷同）：细胞涂片：甲醇：冰乙酸（3：1）固定15分钟，PBS洗一次，加Hoechest 33258荧光染料37℃孵育15~30分钟，于荧光显微镜下观察。
凋亡细胞由于染色质固缩，细胞核呈致密浓染，或呈碎块状致密浓染。
操作比较容易的。
altbenair:想做肝癌细胞hepG2。
看过很多帖子还有文献上的方法，但是都不太具体大都是这样：固定（福尔马林4%），pbs洗三遍，加hoechst孵育1H，将细胞悬液滴于载玻片上荧光显微镜检测。
细胞悬液怎么做？我要做贴壁细胞用胰酶消化？drake015: .1．贴壁细胞，让细胞自己在盖玻片上爬片。
操作如下：A. 取普通洁净盖玻片于70%乙醇中浸泡5分钟或更长时间，无菌超净台内吹干或用细胞培养PBS 或0.9%NaCl等溶液洗涤三遍，再用细胞培养液洗涤一遍。
将盖玻片置于六孔板内，种入细胞培养过夜，使约为50%-80%满。
B. 刺激细胞发生凋亡后，吸尽培养液，加入0.5ml固定液，固定10分钟或更长时间（可4℃过夜）。
C. 去固定液，用PBS或0.9%NaCl洗两遍，每次3分钟，吸尽液体。
洗涤时宜用摇床，或手动晃动数次。
D. 加入0.5ml Hoechst 33258染色液，染色5分钟。
也宜用摇床，或手动晃动数次。
E. 用PBS或0.9%NaCl洗两遍，每次3分钟。
F. 滴一滴抗荧光淬灭封片液于载玻片上，盖上贴有细胞的盖玻片，尽量避免气泡。
医院常规苏木素-伊红(HE)染色操作规程
常规苏木素－伊红（HE）染色操作规程染色步骤：1、二甲苯Ⅰ：5－10min2、二甲苯Ⅱ：5－10min3、二甲苯Ⅲ：5－10min4、无水乙醇Ⅰ：1－3min5、无水乙醇Ⅱ：1－3min6、95%乙醇：1－3min7、80%乙醇:：1－3min8、水洗：1min9、苏木素：3－10min10、流水冲洗：1min11、酸乙醇分化：1－3S12、水洗：30S13、40%氨水或温水（40度左右）返蓝1min14、0.5%伊红液染色：1－3min15、水洗：10S16、80%乙醇：10S17、95%乙醇：1－3min18、无水乙醇Ⅰ：1－3min19、无水乙醇Ⅱ：1－3min20、二甲苯Ⅰ：3－5min21、二甲苯Ⅱ：3－5min22、二甲苯Ⅲ：3－5min中性树胶封固（湿封）以上1、2、3中二甲苯的作用：石蜡切片的常规染色必须先用二甲苯脱去切片中的石蜡，其作用是二甲苯可以溶解切片中的石蜡，以使染料易于进入细胞和组织，石蜡的存在妨碍水和染料进入细胞。
以上4、5、6、7中酒精的作用：酒精用于苏木素染色前由高浓度向低浓度逐渐下降处理切片，是为了洗脱用于脱蜡的二甲苯，使水能进入细胞和组织中，因为纯酒精可以中和二甲苯互溶，二甲苯经过二次纯酒精的洗涤，完全被除去，再经过95%、80%酒精使水分逐渐进入切片，以免引起细胞形太结构改变。
此时水洗作用：洗去未与切片结合的染液。
此时分化的作用：苏木素染色之后，用水洗去未结合在切片中的染液，但是在细胞核中结合过多的染料和细胞浆中吸附的染料必须用分化液0.5~1%盐酸酒精脱去，才能保证细胞核和细胞浆染色的分明，把这个过程称为染色的分化作用，因酸能破苏木素的醌型结构，使色素与组织解离，分化不可过度。
此时水洗的作用：为了除去分化液和脱下的染料中止分化作用。
此时水洗的作用：用水洗去未结合的染液，以防止大量伊红染液进入脱水的酒精中。
以上16、17、18、19中酒精的作用：为二甲苯进入细胞创造条件，这时必须彻底脱水，否则二甲苯不能进入细胞组织切片透明度达不到光符显微镜观察时透光度的要求，在显微镜下能显示清晰的细胞和组织结构。
苏木染色方法
苏木染色方法
苏木染色是一种常用的组织学染色方法，适用于对细胞核和胞质进行染色，能够清晰地显示细胞核和细胞器的结构。
本文将介绍苏木染色的方法和步骤，希望能够对您有所帮助。
首先，准备工作。
在进行苏木染色之前，需要准备好所需的试剂和材料，包括苏木精染色液、95%乙醇、脱水醋酸、显微镜玻片、组织切片等。
其次，取组织切片。
将需要染色的组织切片放置在玻片上，确保切片的平整和干燥，以便后续的染色步骤顺利进行。
然后，脱水处理。
将组织切片依次浸泡在70%乙醇、95%乙醇和绝对乙醇中，每次浸泡5分钟，以去除切片中的水分，使得染色效果更加明显。
接着，染色处理。
将脱水后的组织切片放入苏木精染色液中浸泡5-10分钟，然后取出放入脱水醋酸中浸泡1-2分钟，最后用95%乙醇洗涤切片，直至切片表面不再有染色液渗出。
最后，封片。
将染色后的组织切片放入透明胶水中，然后放置
在显微镜玻片上，用玻片压实，使得组织切片与玻片紧密结合，最
后晾干即可进行观察。
需要注意的是，在整个染色过程中，要注意操作的细节和步骤，确保每一个步骤都能够得到严格的执行。
另外，苏木染色后的组织
切片要小心保存，避免受潮或者受到其它污染。
总之，苏木染色是一种简单而有效的组织学染色方法，通过合
理的操作步骤和技巧，可以得到清晰的染色效果，为细胞学研究提
供了重要的帮助。
希望本文所介绍的苏木染色方法能够对您的实验
工作有所帮助。
苏木素染液的配制
苏木素染液的配制1) Harry`s苏木素苏木素 1g无水酒精10ml硫酸铝钾 20g蒸馏水 200ml氧化汞 0.5g冰醋酸 8ml分别用无水酒精溶解苏木素，蒸馏水加热溶解硫酸铝钾，然后两液混合并煮沸，加入氧化汞，继续加热和搅拌至溶液为深紫色，立即冷却，恢复至室温后过滤备用。
(2) 改良Lillie-Mayer`s苏木素苏木素 2.5g无水酒精 20ml硫酸铝钾 5g蒸馏水330ml碘酸钠250mg甘油150ml冰醋酸 10ml分别用无水酒精溶解苏木素，蒸馏水溶解硫酸铝钾，然后两液混合后，依次加入碘酸钠、甘油和冰醋酸。
(3) Mayer`s苏木素苏木素100mg蒸馏水100ml碘酸钠 20mg硫酸铝铵 5g柠檬酸100ml水合氯醛 5g用蒸馏水溶解苏木素后，依次加入碘酸钠、硫酸铝铵和水合氯醛，过滤后备（4）Ehrlich氏苏木素（1886）苏木素1g无水酒精50ml甘油50ml硫酸铝钾 7.5g蒸馏水50ml冰醋酸5ml将苏木素溶于无水酒精里，硫酸铝钾溶于蒸馏水中，然后所有的试剂都加在一起，充分搅拌均匀后，放于窗台上阳光充足的地，让其慢慢氧化成熟，大约需四个星期，才可使用。
该液量种很好的细胞核染色液，用它染后，细胞核染色清晰，不易过染。
对于用酸脱钙组织细胞核的染色，该试剂优于其它各种苏木素。
这种自然氧化成熟的苏木素，可长期使用，不会变质。
但染色时间较长，需要20分钟以上。
如需急用而苏木素又未成熟时，该液可加入20-30mg的碘酸钠，以促使其迅速氧化成熟，但这试剂配成后，就不是原来的苏木素，不能长期使用，但起码可用半年左右。
（5）Weigert氏铁苏木素A液：苏木素 1g无水酒精100ml将苏木素溶于酒精，让其慢慢氧化成熟，约四周以后，便可以使用，或者用成熟的10%的苏木素酒精配制，即时可用。
B液：29%三氯化铁水溶液 4ml蒸馏水95ml盐酸1ml临用时，取A液和B液等份混合，即可使用，在4小时内使用完毕，如果超时，这种试剂便过分氧化而失效。
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Cole氏苏木素染色液(常规染色)
产品说明：
苏木素是组织化学和免疫组织化学中最常用的染料之一，可以广泛用于组织切片或培养细胞的染色。
本染色液可以和免疫荧光染色或免疫组化染色等配合使用。
可以在苏木素染色液染色后进行免疫荧光染色或其它染料的染色，也可以在免疫组化染色后再进行苏木素复染。
染色步骤简单，操作时间短。
苏木素染色后细胞核呈现蓝色。
使⽤说明:
1、样品处理
a)对于石蜡切片：二甲苯中脱蜡5-10 分钟。
换用新鲜的二甲苯，再脱蜡5-10 分钟。
无水乙醇5 分钟。
90%
乙醇2 分钟。
70%乙醇 2 分钟，蒸馏水2 分钟，
b)对于冰冻切片：蒸馏水2 分钟，
c)对于培养细胞：用4%多聚甲醛固定10 分钟以上，蒸馏水洗涤2 分钟，换用新鲜的蒸馏水，再洗涤 2 分钟。
2、苏木素（HE）染色对于上述处理好的样品，用苏木素染色5-10 分钟（可以根据染色结果和要求调整时间），用自来水洗去残留的染色液，约10 分钟。
蒸馏水再洗涤一遍(数秒钟)。
3、脱水、透明、封片或进行其它染色
a)脱水、透明、封片：95%乙醇脱水2 分钟，换用新鲜的95%乙醇再脱水2 分钟；二甲苯透明 5 分钟，换用新鲜的二甲苯，再透明 5 分钟，用中性树胶或其它封片剂封片。
显微镜下观察，细胞核呈蓝色。
b)进行其它染色：如果进行免疫荧光染色或荧光染料染色，在苏木素染色后，70％乙醇洗涤2 次，每次 2 分钟。
再用PBS 或生理盐水或TBS 或TBST 等用
于荧光染色的溶液浸泡 5 分钟。
然后就可以进行免疫荧光染色或其它荧光染料的染色了。
注意事项：
1、第一次使用本试剂时建议先取1-2 个样品做预实验。
样品数量很多时，可使用染色架和染色缸，以便于操作。
2、本产品亦可反复使用多次，但染色效果会逐渐降低。
3、染色过程推荐浅染，通常只需能够分辨细胞核即可，颜色过深有可能影响细胞质颜色。
4、为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
产地：国产
提示：本品仅用于科研实验，不能用作医疗及临床诊断。
保存：室温避光储存，有效期至少12 个月。
关键词：Mayer'苏木素染液(免疫组化)
Mayer'苏木素染液(免疫组化)相关染色产品:。