改良Lillie-Mayer苏木素染色液
苏木素染色原理
苏木素-伊红染色液(H-E)说明书【产品名称】苏木素-伊红染色液(H-E）【型号】苏木素染色液分别为：Mayer型、改良Harris型、型改良Lillie-Mayer型；伊红染色液分别为：水溶型、醇溶型。
【包装规格】货号：DH0006单瓶包装规格分别为：100ml、250ml、500ml、5000ml；每套/盒包装规格分别为：2×100ml/盒、2×250ml/盒、2×500ml/盒、2×5000ml/盒。
【预期用途】主要用于对细胞组织进行染色。
【检验原理】苏木素(Hematoxylin)和伊红(Eosin)联合主要用于对细胞组织进行染色，简称HE染色，是病理学常规制片中最基本的染色方法，应用极其广泛，苏木素-伊红染色是生物学、组织学、病理学及细胞学等学科必不可少的最基本的染色方法，在病理诊断、教学与科研中广泛应用，具有重要价值，细胞中的细胞核是由酸性物质组成，它与碱性染料(苏木素)的亲和力较强；细胞浆则相反，它所含的碱性物质与酸性染料(伊红)的亲和力较大。
因此细胞或组织切片经苏木素-伊红染色液染色后，细胞核被苏木素染成鲜明的蓝紫色，细胞浆、肌纤维、胶元纤维等呈不同程度的红色，红细胞则呈橙红色。
【主要组成成分】试剂组成主要成分苏木素染色液(改良Lillie-Mayer)或苏木素染色液(改良Harris)或木素染色液(Mayer) 苏木色精伊红染色液(水溶)或伊红染色液(醇溶) 伊红【储存条件及有效期】5℃～35℃保存，原包装未开封染色液的有效期为18个月，在有效期内的已开封染色建议在开封后6个月内使用完，每次用后及时拧紧瓶盖，以免挥发或变质。
【样本要求】涂片和切片必须充分固定，石蜡切片要充分脱蜡。
【检验方法】l、石蜡切片于二甲苯I、II中脱蜡；2、经无水乙醇和95%乙醇，经8O%乙醇，自来水冲洗；3、苏木素染色液(改良Lillie-Mayer或改良Harris)染色，自来水洗；或苏木素染色液(Mayer)染色；4、苏木素染色后用l%盐酸乙醇溶液分化数秒(l%盐酸乙醇溶液配制：99m1 75%乙醇加1ml浓盐酸）；若用苏木素染色液(Mayer)染色后则不需分化；5、自来水冲洗返蓝；亦可用碳酸锂水溶液返蓝，自来水洗；6、入伊红染色液(水溶)染色，稍洗；若用伊红染液(醇溶），切片应先经80%乙醇脱水后，再入伊红染液(醇溶)染色(忌水洗）；7、95%乙醇I、II中调色；8、无水乙醇I、II中脱水，二甲苯I、II中透明；9、封片胶封片，镜检。
介绍一种改良的苏木素染液
介绍一种改良的苏木素染液
张竞时;蔡晓雯;沈武成
【期刊名称】《现代肿瘤医学》
【年(卷),期】2005(13)6
【摘要】介绐应用Lillie-Mayerh配法配制的苏本素染色液,解决哈瑞氏(Harris)与吉尔氏(Gill)配法存在的缺点,以提高病理切片的制作质量.
【总页数】1页(P814-814)
【作者】张竞时;蔡晓雯;沈武成
【作者单位】福建省肿瘤医院病理科,福建,福州,350014;福建省肿瘤医院病理科,福建,福州,350014;福建省肿瘤医院病理科,福建,福州,350014
【正文语种】中文
【中图分类】R730
【相关文献】
1.一种再改良的Harris苏木素染液的最新配制法 [J], 黎红;周伟;茹景顺
2.一种改良苏木素染液的配制方法 [J], 程双华;吴立平;刘玮;涂译文;卢平
3.一种改良Gill苏木素染液配法 [J], 章良敏
4.介绍一种改良的Gill苏木素液 [J], 杨枫;魏艳华
5.介绍一种改良伊红染液的配制法 [J], 盛彩霞;周萍
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阿利新蓝染色液配制及使用方法
北京华越洋生物提供QQ1733351176标准阿利新蓝染色液CAS：75881-23-1分子式：C56H68N16S4Cl4Cu产品简介:阿利新蓝（Alcian）又称爱先蓝或阿尔辛蓝等，是一种类铜钛花青共轭染料，最初用于纺织纤维染色。
这种阳离子染料与酸性基团结合，也即阿尔辛蓝与组织内含有的阴离子基团如羧基和硫酸根形成不溶性复合物。
阿利新蓝由中央含铜的酞菁环与四个异硫脲基通过硫醚键相连而成。
该异硫脲基呈中度碱性，使阿利新蓝带阳离子。
阿利新蓝使碳水化合物着色的确切机制不明，普遍认为是阳离子的异硫脲基通过静电与组织内的多聚阴离子相连。
如含羧基和硫酸根的酸性黏液物质的羧基和硫酸根形成不溶性复合物，即染料分子中带正电荷的盐键和酸性黏液物质中带负电荷的酸性基团结合呈蓝色。
pH值为2.5时组织内的羧基电离，带有一个负电荷，与阿利新蓝中的阳离子形成盐键，是带有羧基的组织（如蛋白多糖/透明质酸以及上皮酸性黏蛋白）染色。
pH值为1.0时，组织内的硫酸根电离，带有一个负电荷，与阿利新蓝中的阳离子形成盐键，使带有硫酸根的组织（如硫酸黏液物质）染色。
中性黏蛋白(如胃黏膜和Brunner腺体部位的中性黏蛋白）不能与阿利新蓝反应。
操作步骤（仅供参考）：1、二甲苯脱蜡，通过梯度乙醇后，入蒸馏水再水化。
2、入阿利新蓝酸化液浸泡3min。
3、入阿利新蓝染色液染色30min。
4、流水冲洗5min。
5、入核固红染色液复染5-10min。
6、流水冲洗1min。
北京华越洋生物提供QQ17333511767、梯度乙醇脱水，二甲苯透明。
8、中性树胶封片。
染色结果：注意事项：1、固定液采用10%中性福尔马林。
2、若要选择性鉴别硫酸黏蛋白和蛋白多糖，应使用pH值低( pH=1)的阿利新蓝，即调pH值为1.0。
染色程序和孵育时间与pH值为2.5的阿利新蓝操作相同，染色时间应相应延长。
3、为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
产地：国产提示：本品仅用于科研实验，不能用作医疗及临床诊断。
苏木精、苏木素染色液溶液配制方法
华越洋苏木素(苏木精)染色液的配制各类溶液的配制方法如下：华越洋苏木素染色液：500ml1) Harry`s苏木素苏木素 1g 无水酒精 10ml硫酸铝钾 20g蒸馏水 200ml氧化汞 0.5g冰醋酸 8ml分别用无水酒精溶解苏木素，蒸馏水加热溶解硫酸铝钾，然后两液混合并煮沸，加入氧化汞，继续加热和搅拌至溶液为深紫色，立即冷却，恢复至室温后过滤备用。
(2) 改良Lillie-Mayer`s苏木素苏木素 2.5g无水酒精 20ml硫酸铝钾 5g蒸馏水330ml碘酸钠250mg甘油150ml冰醋酸 10ml分别用无水酒精溶解苏木素，蒸馏水溶解硫酸铝钾，然后两液混合后，依次加入碘酸钠、甘油和冰醋酸。
(3) Mayer`s苏木素苏木素100mg蒸馏水100ml碘酸钠 20mg硫酸铝铵 5g柠檬酸100ml水合氯醛 5g 用蒸馏水溶解苏木素后，依次加入碘酸钠、硫酸铝铵和水合氯醛，过滤后备（4）Ehrlich氏苏木素（1886）苏木素 1g无水酒精 50ml甘油50ml硫酸铝钾 7.5g蒸馏水 50ml冰醋酸 5ml将苏木素溶于无水酒精里，硫酸铝钾溶于蒸馏水中，然后所有的试剂都加在一起，充分搅拌均匀后，放于窗台上阳光充足的地，让其慢慢氧化成熟，大约需四个星期，才可使用。
该液量种很好的细胞核染色液，用它染后，细胞核染色清晰，不易过染。
对于用酸脱钙组织细胞核的染色，该试剂优于其它各种苏木素。
这种自然氧化成熟的苏木素，可长期使用，不会变质。
但染色时间较长，需要20分钟以上。
如需急用而苏木素又未成熟时，该液可加入20-30mg的碘酸钠，以促使其迅速氧化成熟，但这试剂配成后，就不是原来的苏木素，不能长期使用，但起码可用半年左右。
（5）Weigert氏铁苏木素A液：苏木素 1g无水酒精100ml将苏木素溶于酒精，让其慢慢氧化成熟，约四周以后，便可以使用，或者用成熟的10%的苏木素酒精配制，即时可用。
B液： 29%三氯化铁水溶液 4ml蒸馏水 95ml盐酸1ml临用时，取A液和B液等份混合，即可使用，在4小时内使用完毕，如果超时，这种试剂便过分氧化而失效。
HE染色操作
几种HE染色方法比较摘要：HE是苏木精（hematoxylin）和伊红（eosin）的首个字母缩写。
苏木精是碱性染料，使细胞核染色质和胞质内的核糖体呈紫蓝色。
伊红是酸性染料，使细胞质和细胞外基质中带较强碱基的蛋白质成份着红色。
通过本实验掌握石蜡切片HE染色技术，探讨一种适合动物材料的最佳HE染色方法。
我们分别用不同固定液固定兔颈总动脉，用不同HE染色方法染色，比较不同方法的效果。
染色结果是细胞核与细胞浆呈蓝红相映，色泽比较鲜艳。
改良Harris法染色效果最好，染色效果受组织病理变化情况影响，有个体差异。
关键词：HE染色；改良Harris法；改良Lillie-Mayer’s法；改良Mayer法；1 引言在病理学实验课中，要观察大体标本和镜下标本，为了能更好的掌握实验课中所学的知识和内容，尤其是镜下标本，熟悉病理组织的制片技术是非常重要的，这对能否看好切片有很大帮助，它是教学、医疗、科研中必不可少的重要组成部分。
染色原理和机制尚无定论，处于学说阶段。
可能既是化学反应，又有物理作用参加。
从化学角度看，动物或植物细胞内，一般有酸性和碱性部分的区分。
含有酸性物质的部分能与溶液中的阳离子结合，含有碱性物质的部分能与溶液中的阴离子结合。
例如细胞核，特别是核内的染色质，一般认为是酸性物质组成的，其中主要是核酸，故它与碱性染料的亲和力很强，易于染色，例如氧化苏木素铬盐因为碱性燃料中的碱性部分有染色作用的是阳离子，而细胞浆则相反，它含有碱性物质和酸性染料的亲和力很大易于染上它的颜色，如伊红，因为是酸性染料中的酸性部分有染色作用的是阴离子，所以细胞核为碱性染料苏木素所染，细胞浆为酸性染料伊红所染。
细胞内核的染色质、粘液和软骨的基质多染碱性染料。
但必须注意的是，嗜碱性和嗜酸性是相对的而不是绝对的，若细胞在盐基性染液内置留过久，胞浆也可着上盐基性染料的颜色。
相反，若细胞浆在酸性染液内置留过久，胞核也能着色。
从物理角度看，在染色过程中，染液中的色素微粒子浸入到被染组织的粒子间隙内，此时，因受到分子的引力作用，色素微粒子被吸附而着色。
阿利新蓝染色液配制及使用方法
北京华越洋生物提供QQ1733351176标准阿利新蓝染色液CAS：75881-23-1分子式：C56H68N16S4Cl4Cu产品简介:阿利新蓝（Alcian）又称爱先蓝或阿尔辛蓝等，是一种类铜钛花青共轭染料，最初用于纺织纤维染色。
这种阳离子染料与酸性基团结合，也即阿尔辛蓝与组织内含有的阴离子基团如羧基和硫酸根形成不溶性复合物。
阿利新蓝由中央含铜的酞菁环与四个异硫脲基通过硫醚键相连而成。
该异硫脲基呈中度碱性，使阿利新蓝带阳离子。
阿利新蓝使碳水化合物着色的确切机制不明，普遍认为是阳离子的异硫脲基通过静电与组织内的多聚阴离子相连。
如含羧基和硫酸根的酸性黏液物质的羧基和硫酸根形成不溶性复合物，即染料分子中带正电荷的盐键和酸性黏液物质中带负电荷的酸性基团结合呈蓝色。
pH值为2.5时组织内的羧基电离，带有一个负电荷，与阿利新蓝中的阳离子形成盐键，是带有羧基的组织（如蛋白多糖/透明质酸以及上皮酸性黏蛋白）染色。
pH值为1.0时，组织内的硫酸根电离，带有一个负电荷，与阿利新蓝中的阳离子形成盐键，使带有硫酸根的组织（如硫酸黏液物质）染色。
中性黏蛋白(如胃黏膜和Brunner腺体部位的中性黏蛋白）不能与阿利新蓝反应。
操作步骤（仅供参考）：1、二甲苯脱蜡，通过梯度乙醇后，入蒸馏水再水化。
2、入阿利新蓝酸化液浸泡3min。
3、入阿利新蓝染色液染色30min。
4、流水冲洗5min。
5、入核固红染色液复染5-10min。
6、流水冲洗1min。
北京华越洋生物提供QQ17333511767、梯度乙醇脱水，二甲苯透明。
8、中性树胶封片。
染色结果：注意事项：1、固定液采用10%中性福尔马林。
2、若要选择性鉴别硫酸黏蛋白和蛋白多糖，应使用pH值低( pH=1)的阿利新蓝，即调pH值为1.0。
染色程序和孵育时间与pH值为2.5的阿利新蓝操作相同，染色时间应相应延长。
3、为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
产地：国产提示：本品仅用于科研实验，不能用作医疗及临床诊断。
he染色苏木素
苏木素-伊红染色液(H-E)说明书【产品名称】苏木素-伊红染色液(H-E）【型号】苏木素染色液分别为：Mayer型、改良Harris型、型改良Lillie-Mayer型；伊红染色液分别为：水溶型、醇溶型。
【包装规格】货号：DH0006单瓶包装规格分别为：100ml、250ml、500ml、5000ml；每套/盒包装规格分别为：2×100ml/盒、2×250ml/盒、2×500ml/盒、2×5000ml/盒。
【预期用途】主要用于对细胞组织进行染色。
【检验原理】苏木素(Hematoxylin)和伊红(Eosin)联合主要用于对细胞组织进行染色，简称HE染色，是病理学常规制片中最基本的染色方法，应用极其广泛，苏木素-伊红染色是生物学、组织学、病理学及细胞学等学科必不可少的最基本的染色方法，在病理诊断、教学与科研中广泛应用，具有重要价值，细胞中的细胞核是由酸性物质组成，它与碱性染料(苏木素)的亲和力较强；细胞浆则相反，它所含的碱性物质与酸性染料(伊红)的亲和力较大。
因此细胞或组织切片经苏木素-伊红染色液染色后，细胞核被苏木素染成鲜明的蓝紫色，细胞浆、肌纤维、胶元纤维等呈不同程度的红色，红细胞则呈橙红色。
【主要组成成分】试剂组成主要成分苏木素染色液(改良Lillie-Mayer)或苏木素染色液(改良Harris)或木素染色液(Mayer) 苏木色精伊红染色液(水溶)或伊红染色液(醇溶) 伊红【储存条件及有效期】5℃～35℃保存，原包装未开封染色液的有效期为18个月，在有效期内的已开封染色建议在开封后6个月内使用完，每次用后及时拧紧瓶盖，以免挥发或变质。
【样本要求】涂片和切片必须充分固定，石蜡切片要充分脱蜡。
【检验方法】l、石蜡切片于二甲苯I、II中脱蜡；2、经无水乙醇和95%乙醇，经8O%乙醇，自来水冲洗；3、苏木素染色液(改良Lillie-Mayer或改良Harris)染色，自来水洗；或苏木素染色液(Mayer)染色；4、苏木素染色后用l%盐酸乙醇溶液分化数秒(l%盐酸乙醇溶液配制：99m1 75%乙醇加1ml浓盐酸）；若用苏木素染色液(Mayer)染色后则不需分化；5、自来水冲洗返蓝；亦可用碳酸锂水溶液返蓝，自来水洗；6、入伊红染色液(水溶)染色，稍洗；若用伊红染液(醇溶），切片应先经80%乙醇脱水后，再入伊红染液(醇溶)染色(忌水洗）；7、95%乙醇I、II中调色；8、无水乙醇I、II中脱水，二甲苯I、II中透明；9、封片胶封片，镜检。
苏木素伊红染色液
苏木素伊红染色液【产品名称】苏木素-伊红染色液(H-E）【型号】苏木素染色液分别为：Mayer型、改良Harris型、型改良Lillie-Mayer型；伊红染色液分别为：水溶型、醇溶型。
【包装规格】货号：DH0006单瓶包装规格分别为：100ml、250ml、500ml、5000ml；每套/盒包装规格分别为：2×100ml/盒、2×250ml/盒、2×500ml/盒、2×5000ml/盒。
【预期用途】主要用于对细胞组织进行染色。
【检验原理】苏木素(Hematoxylin)和伊红(Eosin)联合主要用于对细胞组织进行染色，简称HE染色，是病理学常规制片中最基本的染色方法，应用极其广泛，苏木素-伊红染色是生物学、组织学、病理学及细胞学等学科必不可少的最基本的染色方法，在病理诊断、教学与科研中广泛应用，具有重要价值，细胞中的细胞核是由酸性物质组成，它与碱性染料(苏木素)的亲和力较强；细胞浆则相反，它所含的碱性物质与酸性染料(伊红)的亲和力较大。
因此细胞或组织切片经苏木素-伊红染色液染色后，细胞核被苏木素染成鲜明的蓝紫色，细胞浆、肌纤维、胶元纤维等呈不同程度的红色，红细胞则呈橙红色。
【主要组成成分】试剂组成主要成分苏木素染色液(改良Lillie-Mayer)或木素染色液(改良Harris)或木素染色液苏木色精(Mayer)伊红染色液(水溶)或伊红染色液(醇溶)伊红【储存条件及有效期】5℃～35℃保存，原包装未开封染色液的有效期为18个月，在有效期内的已开封染色建议在开封后6个月内使用完，每次用后及时拧紧瓶盖，以免挥发或变质。
【样本要求】涂片和切片必须充分固定，石蜡切片要充分脱蜡。
【检验方法】l、石蜡切片于二甲苯I、II中脱蜡；2、经无水乙醇和95%乙醇，经8O%乙醇，自来水冲洗；3、苏木素染色液(改良Lillie-Mayer或改良Harris)染色，自来水洗；或苏木素染色液(Mayer)染色；4、苏木素染色后用l%盐酸乙醇溶液分化数秒(l%盐酸乙醇溶液配制：99m1 75%乙醇加1ml 浓盐酸）；若用苏木素染色液(Mayer)染色后则不需分化；5、自来水冲洗返蓝；亦可用碳酸锂水溶液返蓝，自来水洗；6、入伊红染色液(水溶)染色，稍洗；若用伊红染液(醇溶），切片应先经80%乙醇脱水后，再入伊红染液(醇溶)染色(忌水洗）；7、95%乙醇I、II中调色；8、无水乙醇I、II中脱水，二甲苯I、II中透明；9、封片胶封片，镜检。
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仅供科研版本号：070505 改良Lillie-Mayer苏木素染色液
【产品组成】
【保存条件】
室温,避光,12个月
【产品概述】
苏木素(Hematoxylin)和伊红(Eosin)联合染色简称HE染色，是病理学和组织学最常用的一种染色方法。
苏木精为碱性天然染料，可使细胞核着色。
细胞核内染色质的主要成分是DNA，在DNA的双螺旋结构中，两条核苷酸链上的磷酸基向外，使DNA双螺旋的外侧带负电荷，呈酸性，很容易不带正电荷的苏木精碱性染料以离子键或氢键结合而被染色。
改良Lillie-Mayer苏木素染色液无毒，无氧化膜，细胞核染色质着色深而细微，临床上常替代Harris 苏木素染色液。
对细胞核染色很清晰，不着染胞质和纤维成分，属进行性染色，故染色后可以不用盐酸乙醇分化，染色时间约5～8min，如果是充分氧化后可染色3～5min。
常用于糖原等特染、酶组化和免疫组化等染色后复染细胞核作对照染色，尤其适用于经过特殊染色后不能经酸处理时对细胞核的复染。
在特殊染色中，常不天青石蓝B液联合染色，使细胞核染色后不被后续的酸性染料所褪色。
【染色原理】
1、细胞核染色的原理：
苏木素为碱性天然染料，可使细胞核着色。
细胞核内染色质的成分主要是DNA，在DNA双螺旋结构中，两条核苷酸链上的磷酸基向外，使DNA双螺旋的外侧带负电荷，呈酸性，很容易不带正电荷的苏木素碱性染料以离子键或氢键结合而被染色。
苏木素在碱性溶液中呈蓝色，所以细胞核被染成蓝色。
2、细胞浆染色的原理：
伊红是一种化学合成的酸性染料，在一定条件下可使细胞浆着色。
细胞浆的主要成分是蛋白质，为两性化合物，细胞浆的染色不染液的pH值密切相关。
当染色液pH值在胞浆蛋白质等电点(4.7～5.0)以下时，胞浆蛋白质以碱式电离，则细胞浆带正电荷，就可被带负电荷的酸性染料染色。
伊红在水中离解成带负电荷的阴离子，不胞浆蛋白质带正电荷的阳离子结合，使细胞浆着色，呈现红色。
3、分化作用：
染色后，用某些特定的溶液将组织过多结合的染色剂脱去，这个过程称为分化作用，所用的溶液称为分化液。
在HE染色中常用1%盐酸乙醇作为分化液，因酸能破坏苏木素的醌型结构，使组织不色素分离而退色。
大多数组织经苏木素染色后，必须用1%盐酸乙醇分化，使细胞核过多结合的苏木素染料和细胞浆吸附的苏木素染料脱去，再进行伊红染色，才能保证细胞核不细胞浆染色的分明。
4、返蓝作用：
分化之后，苏木素在酸性条件下处于红色离子状态，呈红色；在碱性条件下处于蓝色离子状态，呈蓝色。
组织切片经酸性乙醇分化后呈红色或粉红色，立即用水除去组织切片上的酸而中止分化，再用弱碱性水使苏
木素染上的细胞核呈现蓝色，这个过程称为返蓝作用或蓝化作用。
另外用自来水浸洗也可使细胞核返蓝，但所需时间较长。
【使用方法】
(一)石蜡切片染色
1、切片脱蜡至水
①二甲苯作用2次，每次5～10min。
②(可选)无水乙醇作用2次，每次3～5min。
③95%的乙醇3～5min
④90%的乙醇3～5min
⑤80%的乙醇3～5min
⑥自来水或蒸馏水冲洗1～3min
2、染色
①改良Lillie-Mayer苏木素染色液染色5～8min
②自来水或蒸馏水冲洗5～10s
③(可选)盐酸乙醇分化2～5s
④自来水冲洗20～30s
⑤(可选)蓝化液返蓝 20～40s
⑥自来水冲洗30～60s
⑦伊红染色液染色3～5min
⑧自来水冲洗1～5s
2、脱水、透明、封固
①80%乙醇10～20s
②90%乙醇10～20s
③95%乙醇作用2次，每次1～2min。
④无水乙醇作用2次，每次2～3min。
⑤二甲苯透明3次，每次2～3min。
⑥中性树脂封片。
染色结果：细胞核呈蓝色；细胞质、肌纤维、胶原纤维等呈深浅丌一的红色；角蛋白、红细胞等呈明亮的橙红色。
(二)冰冻切片染色
1、乙醚-乙醇混合固定液 5～10s
2、自来水冲洗2～5s
3、改良Lillie-Mayer苏木素染色液滴染1～2min(可加热至50℃)。
4、自来水冲洗2～5s
5、(可选)盐酸乙醇分化2～5s
6、自来水冲洗2～5s
7、(可选)蓝化液返蓝2～5s
8、自来水冲洗5～10s
9、伊红染色液染色2～5s
10、自来水冲洗 1～2s
11、80%的乙醇1～2s
12、95%的乙醇1～2s
13、无水乙醇2～5s
14、苯酚二甲苯(1:3) 2～5s
15、二甲苯透明3次，每次2～5s。
16、中性树脂封片
染色结果：细胞核呈蓝色；细胞质、纤维呈红色。
(三)细胞染色
1、4%多聚甲醛固定10～20min。
2、自来水冲洗2次，每次2min。
3、蒸馏水冲洗2次，每次2min。
4、染色、脱蜡、透明、封固步骤同石蜡切片的染色步骤，作用时间应相应缩短。
染色结果：细胞核呈蓝色；细胞质、纤维呈红色。
【注意事项】
1、切片脱蜡应尽量干净。
2、系列乙醇应经常更换新液。
3、盐酸乙醇分化时间应根据切片厚薄、组织类别以及新旧而定，另外分化后自来水冲洗时间应该足够，以便彻底清洗酸。
4、乙醚-乙醇混合固定液是由乙醚和95%乙醇等量混合而得，再加入适量乙酸，密闭保存。
5、冷冻切片染色时间尽量要短。
6、蓝化液常使用0.2～1%氨水或Scott促蓝液或0.1～1%碳酸锂溶液。
7、为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。