苏木精苏木素染色液溶液配制方法
病理制片技术——常用试剂及染液的配制
病理制片技术——常用试剂及染液的配制一、Harris氏苏木精染色液的配制1．试剂准备：苏木精10 g，硫酸铝钾80 g，无水乙醇200 ml，蒸馏水2000 rnl，氧化汞3 g，冰乙酸40ml。
2．配制步骤(1)将2000 ml蒸馏水注入一只3000 的大号三角烧瓶内，加入80 g硫酸铝钾后置电炉或电磁炉上加热硫酸铝钾完全溶解。
(2)将200 ml无水乙醇注入一只300 ml的三角烧瓶内，加入10 g苏木精摇动使之完全溶解。
(3)将已完全溶解于无水乙醇的苏木色精液体缓缓注入已完全溶解的2000 ml硫酸铝钾液体中，继续加热至液体沸腾关闭电源。
此时液体应呈透明的玫瑰红色。
(4)将3 g氧化汞溶于20ml蒸馏水中搅匀后缓缓(一定要缓慢)方入未被氧化的苏木精液体中，边加氧化汞边搅拌。
此时苏木精被氧化，液体的颜色会迅速地变成深蓝紫色。
(5)氧化汞加完后用玻棒充分的搅拌液体并继续加热至液体再度沸腾关闭电源。
(6)用湿毛巾保护，将装有停止沸腾的热苏木精的三角烧瓶转移至冷水中迅速降温至室温。
(7)密封瓶口室温避光直射储存备用，临用前每100 ml苏木精液加入2～3 ml冰乙酸混匀。
二、伊红染色液的配制l. 试剂准备；伊红Y 20 g，蒸馏水1500 ml，95％乙醇500 ml，冰乙酸lml。
2．配制步骤(1)先将20 g伊红Y溶于500 m1蒸馏水中，用玻棒搅拌至其完全溶解后再加入1000 ml 蒸馏水并搅匀，液体呈深红色。
(2)加入500 ml 95％乙醇并搅匀，此时液体由深红色转变为荧光绿色。
(3)加入lml冰乙酸并搅匀，密封瓶口室温储存备用。
三、HE染色分化液的配制0.5％盐酸乙醇液：蒸馏水300 ml与95％乙醇700 ml混合后加入浓盐酸5 ml混匀。
四、HE染色返蓝液的配制0.5％氢氧化氨液：在1000毫拜蒸馏水中溶入5毫升浓氢氧化氨混匀。
常用染色液和试剂的配制
一、埃利希(EhrIiCh)氏苏木精染液先将苏木精2g溶于IOOm1乙醇中，再加冰醋酸IOm1,混合后加蒸储水IOOm1和IOOm1甘油，然后加硫酸铝钾(约Iog)至饱和，搅拌均匀，倒入瓶中。
将瓶口用1层纱布包着小块棉花塞上，放在暗处通风的地方，并经常摇动促进“成熟”，直到液体颜色变为深红色为止。
成熟时间约2-4周。
若加0.4g碘酸钠可加快成熟。
二、吉姆萨(GiemSa)氏母液将吉姆萨粉末Ig先溶于少量甘油，在研钵内研磨30min以上，至看不见颗粒为止，再将全部(66m1)剩余甘油倒入，于56℃温箱内保温2h。
然后再加入甲醇(66m1),搅匀后保存于棕色瓶中。
母液配制后放入冰箱可长期保存，一般刚配制的母液染色效果欠佳，保存时间越长越好。
临用时用PH6.8的磷酸盐缓冲液稀释10倍。
三、瑞(Wright)氏染液称取瑞氏染料粉末OJg于研钵内研细后，加入少量甲醇再反复研磨，最后将全部甲醇(总共60m1)加入研匀，染料全部溶解后，将染液保存于棕色瓶内备用。
四、醋酸洋红染液将洋红粉末Ig倒入IOOm145%醋酸溶液中，边煮边搅拌，煮沸(沸腾时间不超过30s),冷却后过滤，即可使用。
也可再加入1%~2%铁明矶水溶液5-10滴，至此液变为暗红色而不发生沉淀为止。
如制作永久标本染色时，可加入饱和氢氧化铁或醋酸铁(媒染剂)溶液数滴，至染色液呈浅蓝色为止。
五、硫堇染液(工作液)①干液(硫堇)：硫堇Ig或2g溶于Ioom150%乙醇中，溶解后过滤备用；②醋酸钠缓冲液：醋酸钠∙3H2O9.7g,巴比妥钠14.7g,溶于50Om1蒸储水中；③0.1mo1/1盐酸；按①：②：③=40：28：32比例配成混合液，调pH5.7±0.2,即得硫堇工作液。
六、0.02%盾纳斯绿B(JanusGreenB)用0.9%生理盐水溶液配制。
七、甲基绿一派洛宁染液(Unna试剂)派洛宁0.25g,甲基绿0.15g,95%乙醇20m1,甘油20m1。
苏木素改良配方
苏木素改良配方
苏木素1．5克，硫酸铝钾20克，碘酸钠．2克，无水乙醇5毫升，甘油100毫升，蒸馏水400毫升。
制配方法：用5毫升无水乙醇溶解苏木素，蒸馏水溶解钾明矾(加温至90度，勿煮沸)，离火后，将溶解的苏木素和碘酸钠同时加入钾明矾水溶液内，流水冷却至室温，再加甘油，震荡1小时后即可使用。
染液在六个月内染色效果最好。
我给你的只有苏木素
苏木素传统配方
苏木精 1.0g
乙醇50ml
醋酸5ml
甘油50ml
硫酸铝钾5g
蒸馏水50ml
将苏木精溶于少量的乙醇中，再加醋酸并搅拌，以加速其溶
解。
当苏木精溶解后将甘油加入并摇动容器，同时加入其余的乙醇；硫酸铝钾需研磨并加热，然后溶解于蒸馏水中，将其一滴滴地加入上边的溶液，并不断摇动，此液配好后，将瓶口用纱布盖好，置通风处，经常摇动以加速其成熟，成熟约需4周左右，成熟的染液为深红色。
3种苏木素染液的染色效果比较
3种苏木素染液的染色效果比较在HE染色中，细胞核的着色情况直接影响着病理切片的质量。
而苏木素染液又是细胞核染色的关键，苏木素染色的好坏决定着细胞核的着色深浅，也决定了一张切片的质量[1]。
所以选择合适的苏木素染液十分重要。
我们对3种常用的苏木素染液的染色效果进行分析和比较，寻找更为稳定可靠的苏木素染色液。
1 材料与方法1.1材料1.1.1 Harris苏木素原料：苏木精1g，硫酸铝钾15g，无水乙醇10ml，蒸馏水200ml。
配置方法：先用蒸馏水加热溶解硫酸铝钾，用无水乙醇溶解苏木精再倒入已经溶解好的硫酸铝钾蒸馏水中，煮沸1min，稍冷却，慢慢加入红色氧化汞0.5g防止溅出，再煮沸2min，此时将烧瓶立即浸于冷水中冷却，当染液冷却后用纱布盖好瓶口，使用之前用滤纸过滤后每100ml加冰醋酸5ml就可以使用。
1.1.2 Gill改良苏木素原料：苏木精2g，硫酸铝钾17g，无水乙醇250ml，蒸馏水750ml，碘酸钠0.2g，冰醋酸20ml。
配置方法：先将苏木素溶于无水乙醇，再将硫酸铝钾溶于蒸馏水中，两溶液溶解后将其混合入碘酸钠，待苏木精氧化成紫红色，再加入冰醋酸。
1.1.3 Lillie-Mayerh苏木素原料：苏木精5g，硫酸铝钾5g，碘酸钠0.5g，蒸馏水600ml，甘油300ml，冰醋酸20ml。
配置方法：取1000ml的烧杯一个，将硫酸铝钾倒入蒸馏水中，苏木素同样也在蒸馏水中加热搅拌，等两液完全溶解再相互混合，搅拌充分后缓缓加入碘酸钠，搅匀煮沸3分钟，等温度降低到40度左右再加入甘油，待完全冷却后加入冰醋酸入棕色瓶备用。
1.2方法选择各类手术切除的人体病变组织，包括乳腺、子宫内膜、皮肤、卵巢、子宫颈病变等存档蜡块60例，连续切片，分别使用上述3种染色液进行HE染色，光学显微镜观察。
2 结果Lillie-Mayerh苏木素的切片细胞核呈鲜亮的蓝色，细胞核结构清晰，与胞浆对比鲜明；Gill苏木素染色的切片总体较鲜亮，但部分组织切片细胞核微细结构不清晰，与胞浆对比不如Lillie-Mayerh苏木素的切片；Harris苏木素染色的切片染色效果尚可，但1/10（6例）切片内有苏木素结晶沉淀，影响观察。
苏木素染色液配制流程
苏木素染色液配制流程下载温馨提示：该文档是我店铺精心编制而成，希望大家下载以后，能够帮助大家解决实际的问题。
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Delafield苏木精染液配制及使用方法
Delafield苏木精染液配制及使用方法
配方：
配方1：苏木精4克，无水酒精25毫升；10%铵明矾水溶液400毫升（铵明矾40克，蒸馏水400毫升）；甘油100毫升，甲醛100毫升
配方2（苏木精10克/瓶）：苏木精10克，无水酒精62.5毫升；10%铵明矾1000毫升（铵明矾100克，蒸馏水1000毫升）；甘油250毫升，甲醇250毫升
配方3（苏木精10克/瓶，甘油、甲醇500毫升/瓶）：苏木精20克，无水酒精125毫升；10%铵明矾水溶液2000毫升（铵明矾200克，蒸馏水2000毫升）；甘油、甲醇500毫升
配方4（苏木精10克/瓶，无水酒精500毫升/瓶；甘油、甲醇500毫升/瓶）：苏木精80克（1瓶），无水酒精500毫升（1瓶），10%铵明矾水溶液8000毫升（铵明矾800克，蒸馏水8000毫升），甘油2000毫升（4瓶），甲醇2000毫升（4瓶）
配方5（苏木精10克/瓶，无水酒精500毫升/瓶；甘油、甲醇500毫升/瓶，铵明矾500克/瓶）：苏木精40克，无水酒精250毫升；10%铵明矾水溶液4000毫升（铵明矾200克，蒸馏水2000毫升）；甘油、甲醇1000毫升
配制方法：
苏木精溶于无水酒精中；倒入已溶解的10%铵明矾水溶液，置有光处3~4天，过滤；加甘油和甲醇，数日后过滤
能长期使用。
着色能力较强。
对细胞核和嗜碱性物质染色效果好。
使用方法：
一般染色数分钟；（苏木精-伊红染色中常用原液染10~20分钟，经盐酸酒精分色后流水冲洗至蓝色或用氨酒精返蓝）
蒸馏水稀释50~100倍，染色4~24小时
结果：细胞核和嗜碱性物质呈蓝色（新鲜的苏木精染色）或黑色（陈旧的苏木精染色）。
苏木精、苏木素染色液溶液配制方法
华越洋苏木素(苏木精)染色液的配制各类溶液的配制方法如下：华越洋苏木素染色液：500ml1) Harry`s苏木素苏木素 1g 无水酒精 10ml硫酸铝钾 20g蒸馏水 200ml氧化汞 0.5g冰醋酸 8ml分别用无水酒精溶解苏木素，蒸馏水加热溶解硫酸铝钾，然后两液混合并煮沸，加入氧化汞，继续加热和搅拌至溶液为深紫色，立即冷却，恢复至室温后过滤备用。
(2) 改良Lillie-Mayer`s苏木素苏木素 2.5g无水酒精 20ml硫酸铝钾 5g蒸馏水330ml碘酸钠250mg甘油150ml冰醋酸 10ml分别用无水酒精溶解苏木素，蒸馏水溶解硫酸铝钾，然后两液混合后，依次加入碘酸钠、甘油和冰醋酸。
(3) Mayer`s苏木素苏木素100mg蒸馏水100ml碘酸钠 20mg硫酸铝铵 5g柠檬酸100ml水合氯醛 5g 用蒸馏水溶解苏木素后，依次加入碘酸钠、硫酸铝铵和水合氯醛，过滤后备（4）Ehrlich氏苏木素（1886）苏木素 1g无水酒精 50ml甘油50ml硫酸铝钾 7.5g蒸馏水 50ml冰醋酸 5ml将苏木素溶于无水酒精里，硫酸铝钾溶于蒸馏水中，然后所有的试剂都加在一起，充分搅拌均匀后，放于窗台上阳光充足的地，让其慢慢氧化成熟，大约需四个星期，才可使用。
该液量种很好的细胞核染色液，用它染后，细胞核染色清晰，不易过染。
对于用酸脱钙组织细胞核的染色，该试剂优于其它各种苏木素。
这种自然氧化成熟的苏木素，可长期使用，不会变质。
但染色时间较长，需要20分钟以上。
如需急用而苏木素又未成熟时，该液可加入20-30mg的碘酸钠，以促使其迅速氧化成熟，但这试剂配成后，就不是原来的苏木素，不能长期使用，但起码可用半年左右。
（5）Weigert氏铁苏木素A液：苏木素 1g无水酒精100ml将苏木素溶于酒精，让其慢慢氧化成熟，约四周以后，便可以使用，或者用成熟的10%的苏木素酒精配制，即时可用。
B液： 29%三氯化铁水溶液 4ml蒸馏水 95ml盐酸1ml临用时，取A液和B液等份混合，即可使用，在4小时内使用完毕，如果超时，这种试剂便过分氧化而失效。
苏木精、苏木素染色液溶液配制方法
华越洋苏木素(苏木精)染色液的配制各类溶液的配制方法如下：华越洋苏木素染色液：500ml1) Harry`s苏木素苏木素1g 无水酒精10ml硫酸铝钾20g蒸馏水200ml氧化汞0.5g冰醋酸8ml分别用无水酒精溶解苏木素，蒸馏水加热溶解硫酸铝钾，然后两液混合并煮沸，加入氧化汞，继续加热和搅拌至溶液为深紫色，立即冷却，恢复至室温后过滤备用。
(2) 改良Lillie-Mayer`s苏木素苏木素 2.5g无水酒精20ml硫酸铝钾5g蒸馏水330ml碘酸钠250mg甘油150ml冰醋酸10ml分别用无水酒精溶解苏木素，蒸馏水溶解硫酸铝钾，然后两液混合后，依次加入碘酸钠、甘油和冰醋酸。
(3) Mayer`s苏木素苏木素100mg蒸馏水100ml碘酸钠20mg硫酸铝铵5g柠檬酸100ml水合氯醛5g用蒸馏水溶解苏木素后，依次加入碘酸钠、硫酸铝铵和水合氯醛，过滤后备（4）Ehrlich氏苏木素（1886）苏木素1g无水酒精50ml甘油50ml硫酸铝钾7.5g蒸馏水50ml冰醋酸5ml将苏木素溶于无水酒精里，硫酸铝钾溶于蒸馏水中，然后所有的试剂都加在一起，充分搅拌均匀后，放于窗台上阳光充足的地，让其慢慢氧化成熟，大约需四个星期，才可使用。
该液量种很好的细胞核染色液，用它染后，细胞核染色清晰，不易过染。
对于用酸脱钙组织细胞核的染色，该试剂优于其它各种苏木素。
这种自然氧化成熟的苏木素，可长期使用，不会变质。
但染色时间较长，需要20分钟以上。
如需急用而苏木素又未成熟时，该液可加入20-30mg的碘酸钠，以促使其迅速氧化成熟，但这试剂配成后，就不是原来的苏木素，不能长期使用，但起码可用半年左右。
（5）Weigert氏铁苏木素A液：苏木素1g无水酒精100ml将苏木素溶于酒精，让其慢慢氧化成熟，约四周以后，便可以使用，或者用成熟的10%的苏木素酒精配制，即时可用。
B液：29%三氯化铁水溶液4ml蒸馏水95ml盐酸1ml临用时，取A液和B液等份混合，即可使用，在4小时内使用完毕，如果超时，这种试剂便过分氧化而失效。
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华越洋苏木素(苏木精)
染色液的配制
各类溶液的配制方法如下：
1) Harry`s苏木素苏木素1g 无水酒精10ml
硫酸铝钾20g蒸馏水200ml氧化汞冰醋酸8ml分别用无水酒精溶解苏木素，蒸馏水加热溶解硫酸铝钾，然后两液混合并煮沸，加入氧化汞，继续加热和搅拌至溶液为深紫色，立即冷却，恢复至室温后过滤备用。
(2) 改良Lillie-Mayer`s苏木素苏木素无水酒精20ml硫酸铝钾5g蒸馏水
330ml碘酸钠250mg甘油150ml冰醋酸10ml
分别用无水酒精溶解苏木素，蒸馏水溶解硫酸铝钾，然后两液混合后，依次加入碘酸钠、甘油和冰醋酸。
(3) Mayer`s苏木素苏木素100mg
蒸馏水100ml碘酸钠20mg硫酸铝铵5g柠檬酸100ml水合氯醛5g用蒸馏水溶解苏木素后，依次加入碘酸钠、硫酸铝铵和水合氯醛，过滤后备
（4）Ehrlich氏苏木素（1886）
苏木素1g
无水酒精50ml
甘油50ml
硫酸铝钾
蒸馏水50ml
冰醋酸5ml
将苏木素溶于无水酒精里，硫酸铝钾溶于蒸馏水中，然后所有的试剂都加在一起，充分搅拌均匀后，放于窗台上阳光充足的地，让其慢慢氧化成熟，大约需四个星期，才可使用。
该液量种很好的细胞核染色液，用它染后，细胞核染色清晰，不易过染。
对于用酸脱钙组织细胞核的染色，该试剂优于其它各种苏木素。
这种自然氧化成熟的苏木素，可长期使用，不会变质。
但染色时间较长，需要20分钟以上。
如需急用而苏木素又未成熟时，该液可加入20-30mg的碘酸钠，以促使其迅速氧化成熟，但这试剂配成后，就不是原来的苏木素，不能长期使用，但起码可用半年左右。
（5）Weigert氏铁苏木素
A液：苏木素1g
无水酒精100ml
将苏木素溶于酒精，让其慢慢氧化成熟，约四周以后，便可以使用，或者用成熟的10%
的苏木素酒精配制，即时可用。
B液：29%三氯化铁水溶液4ml
蒸馏水95ml
盐酸1ml
临用时，取A液和B液等份混合，即可使用，在4小时内使用完毕，如果超时，这种试
剂便过分氧化而失效。
因此，每次使用，需要多少配制多少，采取一次性用完，以免造
成浪费。
该染液具有抗弱酸的能力，因此，常用于某些特殊染色核的染色，染色时间为20-30分钟。
华越洋苏木素染色液综合了多种经典的苏木素染色方法，例如Harris法、Mayer法等，简化了操作步骤，缩短了操作时间，并且染色液内不使用汞、甲醇等有毒试剂。
可以用于组织切片或培养细胞的染色。
本苏木素染色液染色后细胞核呈蓝色。
本染色液可以和免疫荧光染色或免疫组化染色配合使用。
一方面可以在本苏木素染色液染色后进行免疫荧光染色或其它染料的染色，另一方面也可以在免疫组化染色后再进行苏木素复染。
华越洋苏木素染色液可以重复使用，直至认为效果不佳时再换用新的染色液。
一个包装的本染色液至少可以染色200个样品。