软骨染色液(甲苯胺蓝法)染色步骤及注意事项
甲苯胺蓝染色液(0.5%,硼酸盐法)
甲苯胺蓝染色液(0.5%,硼酸盐法)简介：甲苯胺蓝(Toluidine Blue O)是一种常用的人工合成染料, 属于醌亚胺染料类, 这类染料主要含有胺基和醌型苯环两个发色团，从而成色原显色。
甲苯胺蓝中的阳离子有染色作用, 组织细胞的酸性物质与其中的阳离子相结合而被染色。
甲苯胺蓝还含有两个助色团，能促使染料产生电离成盐类, 帮助发色团对组织产生染色力, 使切片上的组织细胞着色，可染细胞核使之呈蓝色。
另外，肥大细胞胞质内含有肝素和组织胺等异色性物质，遇到甲苯胺蓝可呈异染性紫红色，临床上经常用于肥大细胞染色。
Leagene 甲苯胺蓝染色液(Toluidine Blue,1%,硼酸盐法)由于硼酸盐缓冲液呈强碱性，更利于组织细胞的着色。
组成：操作步骤(仅供参考)：(一)肥大细胞染色1、脱蜡至蒸馏水。
2、根据切片厚度和组织的不同，浸染于甲苯胺蓝染色液。
3、蒸馏水或去离子水轻轻冲洗。
4、冰乙酸分化，直到细胞核和颗粒清晰可见。
5、快速和无水乙醇脱水。
6、 二甲苯透明，封固。
染色结果：肥大细胞呈紫红色；背景呈淡蓝色。
(二)软骨染色1、 石蜡切片入二甲苯。
2、 系列乙醇各。
3、 自来水洗。
4、 入Toluidine Blue O Stain ，浸染。
5、 自来水洗，滤纸吸干水分。
6、 丙酮分化至软骨细胞呈紫蓝色清楚可见。
7、 逐级乙醇脱水。
编号 名称 DA0059 Storage Toluidine Blue O stain (0.5%,硼酸盐法) 100ml RT 避光 使用说明书 1份8、二甲苯透明，中性树胶封固。
染色结果：软骨、成骨细胞呈紫红色；背景呈淡蓝色。
(三)细胞涂片染色1、用乙醇溶液稀释甲苯胺蓝染色液, 一般要求稀释即可。
2、细胞涂片后，立即放入乙醇中固定，取出放在纸巾上。
3、滴加稀释后的甲苯胺蓝染色液进行滴染，加盖玻片让染料渗透到细胞中。
4、将玻片竖起，稍加压力，使多余染料被纸巾吸去。
5、无需干燥，直接镜检。
Masson三色染色试剂盒甲苯胺蓝
Masson 三色染色试剂盒（甲苯胺蓝）说明书修订日期：2018.07.31Cat number：KGMST-8004Store at 2-8℃ for 12 monthsFor Research Use Only（科研专用）【适用范围】Masson 三色染色试剂盒主要用于结缔组织染色。
用于判定各种组织、器官的病变程度与修复情况，以不同色调显示与区分某些非结缔组织及物质成分；如显示与区分肌肉及其肿瘤组织的正常或异常成分。
尤适用于软组织肿瘤的鉴别诊断。
【主要成分】【染色步骤】1、切片脱蜡处理至水。
2、滴加 1 滴（50-100µl）苏木素染色液（试剂 A）染色 5-10 分钟。
蒸馏水冲掉染液。
3、蒸馏水或自来水冲洗 2-5 分钟。
4、滴加 1 滴（50-100µl）复合染色液（试剂 B）染色 5 分钟。
5、蒸馏水或自来水冲洗一下（2-3 秒，冲掉染液即可）。
6、滴加 1 滴（50-100µl）磷钼酸（试剂 C）染色 1 分钟。
7、甩干或自然晾干。
8、滴加 1 滴（50-100µl）甲苯胺蓝染色液（试剂 D）染色 5min 左右。
9、蒸馏水或自来水冲洗一下（2-3 秒，冲掉染液即可）。
10、放入烘箱（50－60 摄氏度）烘干。
中性树胶封片。
【结果】胶元纤维、黏液、软骨、神经纤维呈蓝色；肌肉、弹力纤维呈红色；神经轴索呈粉红色；纤维素呈紫红色；红血球呈橘红色。
细胞核呈蓝紫色。
【注意事项】1、不同的固定液或固定时间以及不一样的组织，染色效果可有差异，要根据显微镜下观察来掌握染色或分化时间。
2、染色液必须充分淹盖组织。
3、每次染色宜用阳性切片作对照。
【有效期】12 个月仅供研究、不用于临床诊断。
甲苯胺蓝染色液(软骨专用)
Leagene 。
com 北京雷根生物技术有限公司
甲苯胺蓝染色液(软骨专用)
简介：
甲苯胺蓝(Toluidine Blue O)是一种常用的人工合成染料, 属于醌亚胺染料类, 这类染料主要含有胺基和醌型苯环两个发色团，从而成色原显色。
甲苯胺蓝中的阳离子有染色作用, 组织细胞的酸性物质与其中的阳离子相结合而被染色。
另外，肥大细胞胞质内含有肝素和组织胺等异色性物质，遇到甲苯胺蓝可呈异染性紫红色，临床上经常用于肥大细胞染色。
组成：
操作步骤(仅供参考)：
1、 石蜡切片入二甲苯2次。
2、 系列乙醇各1min ，自来水洗。
3、 入Toluidine Blue O Stain 浸染。
4、 自来水洗。
5、 丙酮分化至软骨细胞呈紫蓝色清楚可见。
染色结果：软骨、成骨细胞呈紫红色；背景呈淡蓝色。
编号 名称 DA0054 Storage Toluidine Blue O stain (软骨专用) 50ml RT 避光 使用说明书 1份。
肥大细胞染色液(甲苯胺蓝法)
肥大细胞染色液(甲苯胺蓝法)简介：肥大细胞(Mast cell)是疏松结缔组织内常见的细胞，常成群的沿着小血管和淋巴管分布，也常见于支气管和胰腺的小叶间导管周围，一般细胞较大，直径约为20-30μm ，呈圆形或椭圆形，胞核较小、胞质内充满粗大且具有异染性嗜酸性颗粒。
甲苯胺蓝(Toluidine Blue O)中的阳离子有染色作用, 组织细胞的酸性物质与其中的阳离子相结合而被染色。
甲苯胺蓝还含有两个助色团，能促使染料产生电离成盐类, 帮助发色团对组织产生染色力, 使切片上的组织细胞着色，可染细胞核使之呈蓝色。
肥大细胞颗粒呈紫红色，其他呈蓝色。
组成：操作步骤(仅供参考)：1、 取新鲜组织立即固定于10%中性福尔马林固定液中，常规脱水包埋。
2、 切片厚度4-5μm ，常规脱蜡至水。
3、 系列乙醇各，自来水洗2min 。
4、 入Toluidine Blue O Stain ，浸染。
5、 自来水稍洗。
6、 TBO 分化液分化，直至细胞核和颗粒清晰，可在显微镜下控制。
7、 自来水稍洗，滤纸吸干或吹风机吹干水分。
8、 95%乙醇1min ，无水乙醇2次，每次2min 。
9、 二甲苯透明，中性树胶封固。
染色结果： 肥大细胞颗粒紫蓝色 背景 淡蓝色注意事项：1、 针对于胃粘膜组织、软骨组织等较难着色组织的染色，浸染于甲苯胺蓝染色液的时间应 编号 名称 DA0050 Storage 试剂(A): Toluidine Blue O Stain 100ml RT 避光 试剂(B): TBO 分化液 250ml RT 使用说明书 1份相应延长。
2、应注意组织要新鲜，取出后立即固定。
3、甲苯胺蓝染色后不宜采用低浓度乙醇脱水，否则容易导致褪色。
4、分色后应快速入95%乙醇、无水乙醇、二甲苯的时间不宜过久，否则容易导致褪色。
有效期：6个月有效。
相关：编号名称DC0032 Masson三色染色液DF0111 中性福尔马林固定液(10%)DG0005 糖原PAS染色液DH0001 改良Lillie-Mayer苏木素染色液DJ0001 普鲁士蓝染色液(核固红法)DK0022 尼氏染色液(焦油紫法)NH0043 SSC缓冲液(20×,pH7.0)TC0713 葡萄糖检测试剂盒(GOD-POD比色法)。
甲苯胺蓝染色
染色方法:
(一)1.甲苯胺蓝液
甲苯胺蓝0.5g蒸馏水定容至100ml
2.冰醋酸液
冰醋酸0.5ml蒸馏水定容至100ml
染色步骤
1.组织切片常规脱蜡至水
2.入甲苯胺蓝液30min
3.稍水洗
4.入冰醋酸液分化，直到胞核和颗粒清晰。
5.稍水洗，用冷风吹干
6.二甲苯透明，中性树胶封固
(二)
①切片脱腊至水。
②蒸馏水浸洗3次。
③0.1%甲苯胺蓝液浸染10min。
④水洗，洗去多余染液。
⑤各级酒精脱水。
⑥二甲苯透明，中性树胶封固。
试剂的配制
称取0.1g甲苯胺蓝，溶于100ml 0.1M醋酸盐缓冲液中，置室温5天后，即可使用染液于室温下可保存3个月，若放于4℃冰箱则可保存半年左右，但该液的染色效果在早期为最佳，若染液存放时间较长，则染色偏淡，应适应延长染色时间。
软骨染色液(番红O法)
软骨染色液(番红O法)简介：软骨组织由软骨细胞和软骨基质组成，软骨组织及其周围的软骨膜构成软骨。
软骨根据基质内所含纤维素成分不同分为透明软骨、弹性软骨、纤维软骨。
软骨染色方法有很多种，例如甲苯胺蓝法、阿利新蓝法、番红O法等。
软骨染色液(番红O法)染色原理在于嗜碱性的软骨与碱性染料番红O结合呈现红色，番红O是一种结合多阴离子的阳离子染料，其显示软骨是基于阳离子染料与多糖中阴离子基团(硫酸软骨素或硫酸角质素)结合。
番红O着色与阴离子的浓度近似成正比关系，间接反映基质中蛋白多糖的含量和分布。
当软骨受到损伤时，软骨中的糖蛋白会释放出来，使基质成分分布不均匀，从而导致番红O淡染或不着色。
通过图像分析软件可对番红O染色的软骨基质进行定量分析，番红O分化很关键，分化过度易导致切片不着色，分化不足易导致切片着色过深。
组成：编号名称DB00712×100mlStorage试剂(A): Safranin O stain 100ml RT 避光试剂(B): Safranin分化液100ml RT使用说明书1份自备材料：1、10%福尔马林固定液2、脱钙液3、蒸馏水4、系列乙醇操作步骤(仅供参考)：1、标本的处理：福尔马林固定、脱钙、石蜡切片。
2、常规脱蜡至水。
3、蒸馏水洗。
4、入Safranin O stain内浸染，蒸馏水洗。
5、用Safranin分化液洗涤切片，蒸馏水洗。
6、分别用95%乙醇、无水乙醇脱水。
7、二甲苯透明，光学树脂封固。
染色结果：软骨基质红色注意事项：1、切片在Safranin O stain中染色不宜过长，否则易导致背景的深红色不易分化掉。
2、切片分化时间应恰当，以背景呈绿色为宜。
3、Safranin O stain染色后，不宜在低浓度乙醇脱水，否则易褪色。
4、95%乙醇脱水时间不宜过长。
5、为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
有效期：12个月有效。
相关：编号名称DC0032Masson三色染色液TC0713葡萄糖检测试剂盒(GOD-POD比色法)。
肥大细胞染色液(甲苯胺蓝法)
北京雷根生物技术有限公司
肥大细胞染色液(甲苯胺蓝法)
简介：
甲苯胺蓝(T oluidine Blue O)中的阳离子有染色作用, 组织细胞的酸性物质与其中的阳离子相结合而被染色。
甲苯胺蓝还含有两个助色团，能促使染料产生电离成盐类, 帮助发色团对组织产生染色力, 使切片上的组织细胞着色，可染细胞核使之呈蓝色。
临床上，经常用甲苯胺蓝对软骨细胞和肥大细胞进行染色。
组成：
操作步骤(仅供参考)：
1、 石蜡切片入二甲苯2次。
2、 系列乙醇各1min 。
自来水洗。
3、 入Toluidine Blue O Stain 浸染。
4、 自来水洗2min ，滤纸吸干水分。
5、 95%乙醇分色至肥大细胞呈紫蓝色，背景呈淡蓝色。
6、 95%乙醇1min 。
无水乙醇2次，每次2min 。
二甲苯透明，中性树胶封固。
染色结果： 肥大细胞颗粒
紫蓝色 背景
淡蓝色
注意事项：
1、 针对于胃粘膜组织、软骨组织等较难着色组织的染色，浸染于甲苯胺蓝染色液的时间应相应延长。
2、 固定液最好采用Carnoy 固定液。
3、 甲苯胺蓝染色后不宜采用低浓度乙醇脱水，否则容易导致褪色。
4、 分色后应快速入95%乙醇、无水乙醇、二甲苯的时间不宜过久，否则容易导致褪色。
有效期： 12个月有效。
编号 名称 DA0050 Storage Toluidine Blue O Stain 100ml RT 避光 使用说明书 1份。
石蜡甲苯胺蓝染色
石蜡切片的甲苯胺蓝染色法
方法一
配方：甲苯胺蓝1g 溶于95%酒精100ml ，置60℃温箱中2h后降至室温。
染液于室温下可保存3个月，若放于4℃冰箱则可保存半年左右，但该液的染色效果在早期为最佳，若染液存放时间较长，则染色偏淡，应适应延长染色时间。
1、脱蜡至蒸馏水。
2、根据切片厚度和组织的不同，浸染于甲苯胺蓝染色液20～30min。
3、蒸馏水或去离子水轻轻冲洗3～5min。
4、(可选)0.5%冰乙酸分化，直到细胞核和颗粒清晰可见。
5、快速95%和无水乙醇脱水。
6、二甲苯透明。
7、封固。
方法二
配方：甲苯胺蓝0.5g蒸馏水定容至100ml。
冰醋酸液：冰醋酸0.5ml蒸馏水定容至100ml
1.组织切片常规脱蜡至水
2.入甲苯胺蓝液30min
3.稍水洗
4.入冰醋酸液分化，直到胞核和颗粒清晰。
5.稍水洗，用冷风吹干
6.二甲苯透明，中性树胶封固。
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软骨染色液(甲苯胺蓝法)染色步骤及注意事项
货号：G2543
规格：100ml
保存：室温，避光，12个月。
产品说明：
甲苯胺蓝(Toluidine Blue O)是一种常用的人工合成染料,属于醌亚胺染料类。
这类染料主要含有胺基和醌型苯环两个发色团，从而成色原显色。
甲苯胺蓝中的阳离子有染色作用,组织细胞的酸性物质与其中的阳离子相结合而被染色。
甲苯胺蓝不仅含有两个发色团，还含有两个助色团，能促使染料产生电离成盐类,帮助发色团对组织产生染色力,使切片上的组织细胞着色，可染细胞核使之呈蓝色；肥大细胞胞质内含有肝素和组织胺等异色性物质遇到甲苯胺蓝可呈异染性紫红色。
甲苯胺蓝染色液(甲苯胺蓝法)呈强碱性，更利于组织细胞的着色。
操作说明：（仅供参考）
1、常规脱钙，包埋，固定。
2、石蜡切片入二甲苯2次。
3、系列乙醇各1min。
自来水洗2min。
4、入Toluidine Blue O Stain浸染30min。
根据不同组织，染色时间不完全相同。
5、自来水洗2min，滤纸吸干水分。
6、丙酮分化至软骨细胞呈紫蓝色清楚可见。
7、逐级乙醇脱水。
8、二甲苯透明，中性树胶封固。
染色结果：
软骨、成骨细胞呈紫红色；背景呈淡蓝色。
注意事项：
1、第一次使用本试剂时建议先取1-2个样品做预实验。
2、针对于胃粘膜组织、软骨组织等较难着色组织的染色，浸染于甲苯胺蓝染色液的时间应相应延长。
3、为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
相关试剂：
G3661甲苯胺蓝染色液(1%,磷酸盐法)
G3662甲苯胺蓝染色液(0.5%,磷酸盐法)
G3665甲苯胺蓝染色液(0.5%,硼酸盐法)。