不同浓度雌激素对人源性牙周膜干细胞成骨分化能力的影响

合集下载

补骨脂素对人牙周膜干细胞增殖、成骨分化的促进作用及其机制

补骨脂素对人牙周膜干细胞增殖、成骨分化的促进作用及其机制韩敏，张韶君，席迅山东第一医科大学第一附属医院（山东省千佛山医院）口腔科，济南 250014摘要：目的　观察补骨脂素对人牙周膜干细胞（hPDLSCs ）增殖、成骨分化的促进作用，并探讨其机制。

方法　将第三代hPDLSCs 分为6组，5、10、25、50、100 μmol /L 补骨脂素组加入5、10、25、50、100 μmol /L 补骨脂素，对照组正常培养，采用CCK -8法检测细胞增殖能力，比色法检测碱性磷酸酶（ALP ）活性，茜素红染色检测成骨诱导矿化结节。

另取第三代hPDLSCs 并分为两组，25 μmol /L 补骨脂素组加入25 μmol /L 补骨脂素，对照组正常培养，采用RT -PCR 法检测转录因子2（Runx2）、骨桥蛋白（OPN ）mRNA 。

结果　与对照组比较，5、10、25、50、100 μmol /L 补骨脂素组细胞增殖能力和ALP 活性增加，25 μmol /L 补骨脂素组细胞成骨矿化结节增加（P 均<0.05）；与5 μmol /L 补骨脂素组比较，25、50、100 μmol /L 补骨脂素组细胞增殖能力及10、25 μmol /L 补骨脂素组细胞ALP 活性和25 μmol /L 补骨脂素组细胞成骨矿化结节增加（P 均<0.05）；与10 μmol /L 补骨脂素组比较，25、50、100 μmol /L 补骨脂素组细胞增殖能力增加（P 均<0.05）；与25 μmol /L 补骨脂素组比较，50、100 μmol /L 补骨脂素组细胞ALP 活性降低（P 均<0.05）。

与对照组比较，25 μmol /L 补骨脂素组Runx2、OPN mRNA 相对表达量增加（P 均<0.05）。

结论　5～100 μmol /L 补骨脂素均能促进hPDLSCs 的增殖和成骨分化，在5～25 μmol /L 呈剂量依赖性增强，在50～100 μmol /L 变化不明显；补骨脂素促进hPDLSCs 的增殖和成骨分化的机制可能与调节Runx2信号通路有关。

高浓度唑来膦酸对人牙周膜干细胞凋亡及成骨分化影响的实验研究

高浓度唑来膦酸对人牙周膜干细胞凋亡及成骨分化影响的实验研究李萌宇; 俞叶佳; 施越琦; 戈旌; 王绍义【期刊名称】《《口腔医学》》【年(卷),期】2019(039)010【总页数】9页(P880-888)【关键词】唑来膦酸; 人牙周膜干细胞; 颌骨坏死; 凋亡; 成骨分化【作者】李萌宇; 俞叶佳; 施越琦; 戈旌; 王绍义【作者单位】上海交通大学医学院附属第九人民医院·口腔医学院口腔外科国家口腔疾病临床医学研究中心上海市口腔医学重点实验室上海市口腔医学研究所上海200011【正文语种】中文【中图分类】R349.5双膦酸盐是一类作用于骨组织、影响骨代谢的药物，由于具有良好的临床效果，目前被广泛用于治疗骨质疏松、多发性骨髓瘤以及乳腺癌、肺癌等实体瘤的骨转移疾病[1-3]。

然而，随着大量双膦酸盐类药物的使用，药物不良反应相继出现。

自2003年[4] 第1例骨坏死病例报道以来，有关双膦酸盐类药物引起颌骨坏死的病例报道逐年增多。

2011 年美国食品和药物管理局(Food and Drug Administration,FDA)称之为“双膦酸盐相关性颌骨坏死(bisphosphonate-related osteonecrosis of the jaw，BRONJ)”，以后又把BRONJ和其他抗肿瘤药物引起的颌骨坏死统称“药物相关性颌骨坏死”[5-6]。

2016年FDA报道双膦酸盐用药后BRONJ发生的风险显著增加，OR值16.3～171.3，个别达到498.9[7]。

由于双膦酸盐作用机制和BRONJ发生机制尚不十分明确，报道的发病率存在较大的差异。

这些不准确的数据资料，很难指导临床合理用药[8]。

所以，目前BRONJ的发病机制仍是国内外学者研究的核心。

关于BRONJ成因，一般认为：①与双膦酸盐药物抑制破骨细胞分化、促其凋亡、抑制骨转换有关[9-11]。

双膦酸盐抑制骨转换导致颌骨坏死的观点主要基于颌骨的骨转换率较四肢长骨更高，双膦酸盐用药后对其影响最大，骨稳态失衡造成了颌骨的坏死[12]。

rhBMP-4与rhIGF—Ⅰ联合应用对人牙周膜成纤维细胞增殖及分化能力的影响

ｐｒｄｎａｌａｅｔｒｈｓ．Ｍｅｈｄ：ｕｎｐｒｄｎａｌｍｅｔｍｂａｔｗｒｔａｅｉｇｍＢ一ｅｉ０ｔｉｍｎｏｌｇ０ｌｔａｓｔｏｓＨｍａｅｉｏｔｌ培ａｎｏｌｓｅｅｔｗｔ１ｎ／ｌｈＭＰｓｅｒｄｈ０ｒ
【摘要】目的：探讨ｒＢ一ｈＭＰ４与ｒＩＦＩｈＧ — 联合应用对人牙周膜成纤维细胞增殖及分化能力的影响。方法：将人
牙周膜成纤维细胞分别与１ｇｍｈＭＰ４、０ｎｍｈＧ－１ｍｈＭＰ４＋１ｍｈＧ — 无血０ｎ／ｌＢ一１１ＩＦＩ、０ｎｌＢ一ｒｒｒＯｎｌｒＩＦＩ、
清ＤＥＭＭ共同培养３ｄ用ＭＴ，Ｔ法测定细胞增殖情况，用碱性磷酸酶试剂盒检测细胞碱性磷酸酶的活性，羟用
脯氨酸试剂盒检测细胞分泌Ｉ型胶原的量。结果：３天，０ｎｌｈＭＰ４＋ｌｍｈＧ — 组人牙周膜第１ｍＢ一０ｎｌＩＦＩｒｒ
成纤维细胞的生长增殖能力最强，与其它３组比较有显著性差异（００）但其增强细胞碱性磷酸酶的活并Ｐ＜．５，
性及促进细胞分泌Ｉ型胶原的能力并不比两者单独作用强。结论：ＢＰ４与ｒＩＦＩｒＭ一ｈｈＧ－联合应用，能协同促进
人牙周膜成纤维细胞增殖，但不能协同促进细胞分化。
・
８２・４
实用口腔医学杂志（ｒｃＳｏａ１２０ｏ，４６ＪＰａｔｔｔ）０８Ｎｖ２（）ｍｏ
ｒＢＰ４与ｒＩＦＩ合应用对人牙周膜成纤维细胞增殖ｈＭ一ｈＧ — 联

高糖炎性环境下KLF4调控人牙周膜干细胞能量代谢的机制初探

高糖炎性环境下KLF4调控人牙周膜干细胞能量代谢的机制初探唐婧淇;徐萱雯;周逸;苟惠清;李璐;徐艳【期刊名称】《口腔生物医学》【年(卷),期】2024(15)2【摘要】目的:探究高糖炎性环境下Krüppel样因子4(KLF4)对人牙周膜干细胞(hPDLSCs)线粒体能量代谢和成骨分化的影响。

方法:利用免疫荧光和Western blot实验研究高糖炎性环境下KLF4在hPDLSCs的定位和表达情况。

通过碱性磷酸酶(ALP)和茜素红染色等检测高糖炎性环境下hPDLSCs成骨能力。

通过慢病毒敲低和过表达技术,结合实时荧光定量PCR与Western blot实验检测病毒感染后KLF4的表达,检测KLF4对hPDLSCs成骨分化的影响。

采用核酸酶靶向切割和释放(CUT&RUN)技术,分析高糖炎性环境下hPDLSCs中KLF4结合的DNA及相关信号通路变化。

使用Seahorse能量代谢仪探索KLF4对hPDLSCs氧化呼吸能力的影响。

结果:高糖炎性环境下,hPDLSCs中KLF4表达下调、ALP活性降低、钙结节形成减少(均P<0.001),Runt相关转录因子2(RUNX2)、骨钙素(OCN)表达降低(均P<0.001)。

敲低KLF4,导致hPDLSCs的ALP活性降低(P<0.001),钙结节形成减少(P<0.001);过表达KLF4促进hPDLSCs的成骨分化。

高糖炎性环境下,KLF4下游调控基因富集于能量代谢、成骨等相关通路。

敲低KLF4导致hPDLSCs线粒体耗氧率(OCR)水平下调,而细胞外酸化率(ECAR)水平上调;过表达KLF4使OCR水平上调,而ECAR水平下调。

结论:在高糖炎性环境下,hPDLSCs的成骨分化能力受损,KLF4可能通过上调线粒体氧化磷酸化能力来恢复hPDLSCs的成骨分化能力。

【总页数】9页(P82-90)【作者】唐婧淇;徐萱雯;周逸;苟惠清;李璐;徐艳【作者单位】南京医科大学附属口腔医院牙周病科【正文语种】中文【中图分类】R781.4【相关文献】1.炎症微环境下miR-30a调控Runx相关转录因子2对人牙周膜干细胞成骨分化的影响2.抵挡汤在高糖、高糖波动环境下对人脐静脉血管内皮细胞能量代谢相关因子表达的影响3.lncRNA GAS5靶向调控miR-136对高糖诱导的人肾小管上皮细胞中炎性和纤维化因子表达影响及机制研究4.高糖微环境下miR-449对人骨髓间充质干细胞成骨分化的作用和机制研究5.炎症微环境作用下BMP9通过ERK5/KLF4信号通路促进牙周膜干细胞成骨分化因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

柚皮苷促进人牙周膜成纤维细胞成骨分化能力的研究

柚皮苷促进人牙周膜成纤维细胞成骨分化能力的研究目的：研究柚皮苷对体外培养的人牙周膜成纤维细胞（HPDLCs）成骨分化能力的影响。

方法：组织块法培养原代HPDLCs，加入含不同浓度柚皮苷的培养液（100、10、1、0.1、0.01 mg/L），用碱性磷酸酶（ALP）试剂盒检测HPDLCs 的培养上清液中ALP的活性，用实时定量PCR检测加入柚皮苷后不同时间点（24h、48h、72h），HPDLCs的骨形成蛋白2（BMP2）、I型胶原蛋白（Col I）、骨保护蛋白（OPG）和核因子κb受体活化因子配体（RANKL）的mRNA表达水平的变化。

结果：与对照组比较，不同浓度柚皮苷试验组HPDLCs培养上清液中的ALP活性显著增高（P＜0.05），其中1mg/L组的ALP活性最高，此浓度柚皮苷作用下，24h后，BMP-2的mRNA表达水平显著升高，并呈时间依赖性，48h后，Col I和OPG的mRNA表达水平也显著上升。

结论：柚皮苷促进了HPDLCs 细胞向骨细胞分化功能，其作用可能是通过上调Coll I、BMP2和OPG基因的表达。

标签：柚皮苷；人牙周膜成纤维细胞；骨形成蛋白2；骨保护蛋白柚皮苷（Naringin）全称为柚皮素-7-O-新橙皮糖苷，是一种双氢黄酮类化合物，主要存在于芸香科植物葡萄柚、橘、橙的果皮和果肉中，是骨碎补的主要活性成分[1]。

Zhang等[2]的研究证实柚皮苷可以促进骨基质干细胞的增殖并且向成骨细胞的分化。

牙周膜细胞在牙周组织的再生和修复中起重要作用。

最新研究表明，柚皮苷可以促进牙周膜细胞的增殖和成骨分化的潜能[3-7]。

然而，柚皮苷通过何种分子途径促进牙周膜细胞的成骨分化尚未见报道。

本研究旨在观察柚皮苷对体外培养的人牙周膜细胞的分化能力的影响，进一步探讨其促进牙周组织改建的分子生物学基础。

1 材料和方法1.1主要试剂与仪器：柚皮苷（中国药品生物制品检定所，用含10%FBS的DMEM配制，浓度为100、10、1、0.1、0.01mg/L）胎牛血清（FBS，Gibco，美国），DMEM培养基（Gibco，美国），胰蛋白酶（Gibco，美国），双抗（青霉素100U/L、链霉素100μg/L，Sigma公司，美国），ALP检测试剂盒（南京建成生物工程研究所），MTT（Sigma公司，美国），二甲基亚砜（DMSO，天津汇英化学试剂有限公司），酶联免疫检测仪（Bio Tek公司，美国），TRIZOL Reagent （Invitrogen，美国），PrimeScriptTM RT-PCR试剂盒（Perfect Real Time，Takara Bio公司）。

木犀草素对人牙周膜细胞增殖及成骨分化能力的影响

木犀草素对人牙周膜细胞增殖及成骨分化能力的影响张淼;刘绣华;赵红宇【摘要】Objective:To evaluate the biological effects of Luteolinl on the proliferation and differentiation in human periodontal ligament cells (PDLC) . Methods:MTT, ALP kit and Q-PCR was used to detect the expression of osteogenesis related gene. Results:Luteolinl (100, 10, 1, 0.1, 0.01μmol/L) could increase the proliferation of PDLC, and there were significant differences compared with control group (P<0.05) . The ALP Kit results showed that Luteolinl could increase the ALP actiuty of PDLC(P<0.05) . The Q-PCR results showed that Luteolin could increase the expression of ALP and RUNX2 (P<0.05) . Conclution:At proper concentration,Luteolinl can increase the proliferation and differentiation of PDLC.%目的：探讨不同浓度木犀草素对人牙周膜细胞（PDLC）增殖及成骨分化能力的影响。

方法：体外培养PDLC并进行组织来源鉴定，取第3代细胞进行实验。

雌激素在人类红细胞生成过程中的作用

雌激素在人类红细胞生成过程中的作用红细胞是人体内非常重要的一种细胞，它们可以携带氧气到身体各个部位，供给能量和维持正常的生命运行。

人体内红细胞的生成是由骨髓中的造血前体细胞通过分化和成熟过程完成的，其中涉及到多种调节因素和分子的作用。

雌激素是一种具有重要生理效应的雌性激素，它不仅对女性的生殖系统和乳腺组织起调节作用，还可以影响到其他多个器官和组织。

近年来的研究发现，雌激素在人类红细胞生成过程中也扮演了一定的角色。

本文将从分子机制、环境影响、实验模型等多个角度综述雌激素在人类红细胞生成中的作用。

一、分子机制1. 雌激素受体和信号转导雌激素是通过作用于靶细胞表面或细胞质中的雌激素受体（estrogen receptor，ER）来介导生理和病理效应的。

人类体内有两种类型的雌激素受体：ERα和ERβ。

它们的基因分布和表达模式有所区别，但都包含有DNA结合区、LBD（ligand binding domain，配体结合区）和AF（activation function，激活功能区）等结构域。

雌激素通过与ER结合，形成复合物，并介导信号转导通路的启动。

ERα主要参与细胞生长、分化、凋亡等调控过程，而ERβ则与下丘脑-垂体-卵巢轴的调控以及胰岛素信号通路的调节相关。

2. 雌激素对造血细胞分化和成熟的影响在红细胞生成过程中，造血干细胞的分化和成熟是关键的环节。

雌激素促进骨髓中HSCs（hematopoietic stem cells）向MEPs（megakaryocytic-erythrocytic progenitor cells）分化，从而增加成熟红细胞的生成量。

除此之外，雌激素还可以通过多种途径参与到造血分化过程中，如影响细胞周期、调控细胞分化因子的表达、促进基因转录等。

二、环境影响1. 雌激素与生长环境雌激素可以通过调节生长环境影响到红细胞的生成过程。

研究表明，处于青春期的女性，由于体内雌激素水平的上升，其红细胞生成能力也相应增强。

Wnt信号通路调节人牙周膜干细胞成骨分化及其机制研究

Wnt信号通路调节人牙周膜干细胞成骨分化及其机制研究Wnt信号通路调节人牙周膜干细胞成骨分化及其机制研究摘要：牙周膜干细胞（PDSCs）是一类具有自我更新和多向分化潜能的成纤维细胞样细胞，其在牙周组织再生与重建中起着重要作用。

近年来，Wnt信号通路成为研究PDSCs成骨分化的热点。

本研究通过分离培养PDSCs，采用不同浓度的Wnt信号通路激动剂，检测细胞增殖情况和成骨分化相关分子表达，揭示Wnt信号通路调节PDSCs成骨分化的机制，并探讨其在牙周组织再生与重建中的应用前景。

结果表明，Wnt信号通路激动剂处理能够提高PDSCs的增殖能力和成骨分化潜能，同时上调关键成骨转录因子RUNX2和osteocalcin的表达，下调抑制PDSCs成骨分化的因子Dkk-1和SOST的表达，对蛋白质水平的磷酸化调节也发挥重要作用。

总之，Wnt信号通路在调节PDSCs成骨分化过程中发挥着关键作用，为其在牙周再生领域的应用提供了新的思路和方法。

关键词：Wnt信号通路；牙周膜干细胞；成骨分化；RUNX2；osteocalcin；Dkk-1；SOST近年来，牙周组织再生与重建的研究备受关注，其中PDSCs作为一种重要的细胞来源受到越来越多的关注。

PDSCs具有自我更新和多向分化潜能，是牙周组织再生和重建中的重要细胞类型之一。

研究发现，Wnt信号通路在胚胎发育和成骨分化等生物学过程中发挥着关键作用。

因此，不少研究将目光投向Wnt信号通路在PDSCs成骨分化中的作用机制。

本研究通过对PDSCs进行不同浓度的Wnt信号通路激动剂处理，研究发现Wnt信号通路能够促进PDSCs的增殖和成骨分化。

同时，Wnt信号通路的激动对PDSCs关键成骨转录因子RUNX2和osteocalcin的表达起到调节作用，并且抑制具有抑制PDSCs成骨分化的因子Dkk-1和SOST的表达。

实验还发现，Wnt信号通路的调节作用可能与蛋白质水平的磷酸化有关。

1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。

摘
要目的：对比研究不同浓度的雌激素对人源性牙周膜干细胞成骨分化的影响。方法：采用
ห้องสมุดไป่ตู้
ＤＭＥＭ完全培养基将人牙周膜干细胞制成单细胞悬液，分别加入浓度为０、１０￣１０。、１０ｘｌ０、１０ｘｌ０－ｓ、ｌＯｘｌＯ、ｌＯｘｌＯ、ｌＯｘｌＯｍｏｌ／Ｌ的雌激素，以未加入雌激素的成骨诱导液组（普通ＤＭＥＭ培养基中加入ｌＯｍＭ３－甘油磷酸钠、５０１ｘＭ维生素Ｃ及１０ｎＭ地塞米松）作为阴性对照。培养后实时定量ＰＣＲ
方法分别检测成骨早中晚期关键指标Ｒｕｎｘ２、ＡＬＰ和ＯＣＮｍＲＮＡ表达。结果：浓度为ｌＯｘｌＯ一０、ｌＯｘ
１０、ｌＯｘｌＯ一、１０￣１０、ｌＯｘｌＯ、１０ｘｌ０ｍｏｌ／Ｌ的雌激素对人源性的牙周膜干细胞培养均无毒性；不同
ｈｕｍａｎｐｅｒｉｏｄｏｎｔａｌｌｉｇａｍｅｎｔｓｔｅｍｃｅｉｌｓ．Ｍｅｔｈｏｄｓ：Ｈｕｍａｎｐｅｒｉｏｄｏｎｔａｌｌｉｇａｍｅｎｔｓｔｅｍｃｅｌｌｓｕｓｐｅｎｓｉｏｎｗａｓｐｒｅｐａｒｅｄ
ＲｅｄＣｒｏｓｓＨｏｓｐｉｔａｌ，Ｈａｎｇｚｈｏｕ（３１０００３），Ｃｈｉｎａ
ＡｂｓｔｒａｃｔＯｂｊｅｃｔｉｖｅ：Ｔｏｃｏｍｐａｒｅｔｈｅｅｆｆｅｃｔｏｆｅｓｔｒｏｇｅｎｗｉｔｈｄｉｆｆｅｒｅｎｔｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎｓｏｎｏｓｔｅｏｇｅｎｉｃｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｔｉｏｎｏｆ
浓度组间差异无统计学意义（ＪＰ＞０．０５）；在成骨诱导７、ｌ４、２１天时，Ｒｕｎｘ２、ＡＬＰ及ＯＣＮｍＲＮＡ表达在ｌＯｘｌＯ组最高（Ｐ＜０．０５～０，０１）。在不同浓度雌激素组中成骨相关基因的表达均高于阴性对照组
ｌｉｋｅＲｕｎｘ２，ＡＬＰ，ａｎｄＯＣＮｍＲＮＡａｔｅｆｒｅｏｅｕｈｕｒｅ．Ｒｅｓｕｌｔｓ：Ｎｏｔｏｘｉｃｅｆｆｅｃｔｏｎｈｕｍａｎｐｅｒｉｏｄｏｎｔａｌｌｉｇａｍｅｎｔｓｔｅｍｃｅｌｌｓ
ＥｆｆｅｃｔｏｆＥｓｔｒｏｇｅｎｏｎＯｓｔｅｏｇｅｎｉｃＤｉｆｅｒｅｎｔｉａｔｉｏｎｏｆＨｕｍａｎＰｅｒｉｏｄｏｎｔａｌＬｉｇａｍｅｎｔｓｔｅｍｃｅｌｌｓＸ／ＡＢｉｎｇ．Ｈａｎｇｚｈｏｕ
ｗｉｔｈＤＭＥＭｃｏｍｐｌｅｔｅｍｅｄｉｕｍａｎｄｔｈｅｎｗｅｒｅｃｏｃｕｈｕｒｅｄｗｉｔｈ０，１０ｘ１０一，１０ｘ１０，ｌＯｘ１０，ｌＯｘ１０，ｌＯｘ１０．ａｎｄｌ０ｘ１０。ｍｏｌ／Ｌｏｆｅｓｔｒｏｇｅｎ．Ｒｅａｌ－ｔｉｍｅｑｕａｎｔｉｔａｔｉｖｅＰＣＲｗａｓｕｓｅｄｔｏｄｅｔｅｃｔｔｈｅｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｏｆｏｓｔｅｏｇｅｎｉｃｋｅｙｉｎｄｉｃａｔｏｒｓ
ｗａｓｆｏｕｎｄｉｎ１０￣１０一ｍ，ｌＯｘｌＯ＿９，１０ｘｌ０，ｌＯｘｌＯｎ７，ｌＯｘｌＯ＿６，ａｎｄｌＯｘｌＯ一ｍｏｌ／Ｌｅｓｔｒｏｇｅｎｇｒｏｕｐｓａｎｄｎｏｓｔａｔｉｓｔｉｃａｌｌｙｓｉｇ－
（Ｐ＜０．０５）。结论：当雌激素浓度＜ｌＯｘｌＯｍｏｌ／Ｌ时，雌激素能够以剂量依赖的方式促进人牙周膜干细胞成骨分化过程中成骨相关基因的表达。当雌激素浓度＞１０￣１０ｍｏｌ／Ｌ时，雌激素浓度的增加并未促进成骨相关基因的表达。关键词牙周膜千细胞成骨分化雌激素
９７４
浙江中西医结合杂志２０１３年第２３卷第１２期
ＺｈｅｊｉｎｎｇＪＩＴＣＷＭ（Ｖｏ１．２３Ｎｏ．１２２０１３）
・
实验研究・
不同浓度雌激素对人源性牙周膜干细胞成骨分化能力的影响
夏冰杭州市红十字会医院口腔科杭州３１０００３