Tisser五步提取法译文
克雷斯威尔五步文献综述法
如何做文献综述：克雷斯威尔五步文献综述法文献综述抽取某一个学科领域中的现有文献，总结这个领域研究的现状，从现有文献及过去的工作中，发现需要进一步研究的问题和角度。
文献综述是对某一领域某一方面的课题、问题或研究专题搜集大量情报资料，分析综合当前该课题、问题或研究专题的最新进展、学术见解和建议，从而揭示有关问题的新动态、新趋势、新水平、新原理和新技术等等，为后续研究寻找出发点、立足点和突破口。
文献综述看似简单．其实是一项高难度的工作。
在国外，宏观的或者是比较系统的文献综述通常都是由一个领域里的顶级“大牛”来做的。
在现有研究方法的著作中，都有有关文献综述的指导，然而无论是教授文献综述课的教师还是学习该课程的学生，大多实际上没有对其给予足够的重视。
而到了真正自己来做研究，便发现综述实在是困难。
约翰 W.克雷斯威尔（John W. Creswell）曾提出过一个文献综述必须具备的因素的模型。
他的这个五步文献综述法倒还真的值得学习和借鉴。
他认为，文献综述应由五部分组成：即序言、主题1（关于自变量的）、主题2（关于因变量的）、主题3（关于自变量和因变量两方面阐述的研究）、总结。
1.序言告诉读者文献综述所涉及的几个部分，这一段是关于章节构成的陈述。
在我看也就相当于文献综述的总述。
2. 综述主题1提出关于“自变量或多个自变量”的学术文献。
在几个自变量中，只考虑几个小部分或只关注几个重要的单一变量。
记住仅论述关于自变量的文献。
这种模式可以使关于自便量的文献和因变量的文献分开分别综述，读者读起来清晰分明。
3. 综述主题2融合了与“因变量或多个因变量”的学术文献，虽然有多种因变量，但是只写每一个变量的小部分或仅关注单一的、重要的因变量。
4. 综述主题3包含了自变量与因变量的关系的学术文献。
这是我们研究方案中最棘手的部分。
这部分应该相当短小，并且包括了与计划研究的主题最为接近的研究。
或许没有关于研究主题的文献，那就要尽可能找到与主题相近的部分，或者综述在更广泛的层面上提及的与主题相关的研究。
IE七大手法之五五法PPT(共 33张)
5W1H
3.发生在何处?
When (何时)
4.作业的地点是否适
Where 当? (何处)
2.可否改变时间顺序?
Hale Waihona Puke 3.可否改变作业发生之时刻、时
期或时间?
5W1H
1.谁来做最好
2.是否可找其它人来做? 3.人的组合或工作分担
Who (谁)
恰当否?
1.如何使方法手段更
简单?
1.为何要如此做
5W1H
2.情形到底如何?
案例
更换法则
• 将顺序加以更换,效果是否会较好呢? 它的后面应该加上什么。
• 若是将形式改变,顺序更动,日程变更, 原因和结果改换的话,将会有不同的见 解。
案例
指示标语
• 开车的人最怕在转弯时,不能驶入专用的车道, 待车子到达十字路口时,才知占用别人的左转 车道,阻塞交通被别人骂,甚至被交警开红单子。
3.要如何来做?
Why
How
(为何)
(如何)
2.将所有的事物先怀疑多次,再作深入的研究.
3.把其它4W1H用Why来质问检讨,并找出最好
的改善方案.
五五法十大法则
相反法则
• 将现行的方式逆向倒过来做,将会变得如何 呢?里外调换,上下颠倒,职务互换,作业次 序反转,由左至右改为由右至左。
• 从相反的立场来加以思考,往往能获得很多 有用的创意。
• 颠倒情节,是好莱坞常用的名词。在这里, 一切的事实都颠倒,影片中出现的不是狗咬 人的场面,而是人咬狗的镜头。
毛皮商标
• 某一位毛皮商根据这种想法,来制造 商标。他把颠倒的商标缝在毛衣大衣 上。这一点,不但能帮助他区别自己 和别人所制的大衣,更重要的是,当这 种大衣挂在椅背上时,不必颠倒过来, 也能看清商标的名字。
Tisser五步提取法具体操作步骤
5步连续提取步骤中所用的试剂分别是：（a）MgCl2（b）NaOAc/HOAc（c）NH2OHHCl/HOAc（d）H2O2/HNO3，NH4OAc （e）HF/HClO4
本研究中分析重金属形态采用被学者广为使用的Tessier五步浸提法，具体步骤如下：
（1）可交换态：以8mL 1mol/L MgCl2 (pH=7.0)提取，于室温振荡1h ，4000r/min下离心后收集上清液待测；
（2）碳酸盐结合态：上一态残渣中加入8mL 1mol/L NaAc-HAc(pH=5.0)，室温下振荡，4000r/min下离心后收集上清液待测；
（3）铁锰氧化物结合态：在上一态残渣中加入40mL 0.04 mol/L NH2OH??HCl，在96℃水浴中振荡，以4000r/min下离心后收集上清液待测；
（4）有机结合态：上一态残渣中加0.02mol/L HNO3溶液6mL和30%的H2O2(用HNO3调节pH＝2.0)10mL，85℃偶尔振荡2h，然后加入5mL H2O2(30%，pH=2.0)，85℃间隙振荡3h，取出冷却至室温后，加入3.2mol/L NH4Ac 10mL，振荡0.5h后用前述方法离心分离；(5)用后面将会用到的分析痕量金属总量的HF-HClO4混合液消解法对（iv）中得到的沉淀进行消解。
每一步提取都需进行离心（50mL聚丙烯离心管）操作以尽量减少固体损失。
在相邻的两步之间均需进行10000rpm下的离心操作30min
以实现固液的有效分离。
上清液用移液管移走以供痕量金属分析（见下），沉淀物用8mL去离子水洗涤；再次离心30in后，弃去上清液。
洗涤用水量控制到最少以防止对固体物质，特别是有机物的过度溶解。
tessier五步法
土壤Cd形态采用Tessier五步连续提取法测定：（1）交换态（包括水溶态）（以下均称作交换态）：准确称取1.00 g过0.15 mm尼龙筛的风干土壤样品，于50 mL 离心管内，再加入8 mL MgCl2（浓度为1 mol·L-1并用稀HCl调pH为7.0）溶液，在常温下220 rpm连续振荡1 h，后在4×103 r·min-1下离心10 min，上清液滤入50 mL容量瓶中，并用去离子水清洗滤纸三次后定容，尽快测定或保存在冰箱中4℃冷藏待测。
用10 mL去离子水清洗残余物，4×103 r·min-1下离心10 min，倒掉上清液（切勿损失残余物）。
电感耦合等离子体质谱法测定。
（2）碳酸盐结合态：向上一步骤残余物中加入8 mL NaOAC（浓度为1 mol·L-1并用HOAC调节pH为5.0）溶液，常温下220 rpm连续振荡5 h，后在4×103 r·min-1下离心10 min，上清液过滤入50 mL容量瓶中，去离子水清洗滤纸三次后定容，尽快测定或保存在冰箱中4℃冷藏待测。
用10 mL去离子水清洗残余物，4×103 r·min-1下离心10 min，倒掉上清液（切勿损失残余物）。
电感耦合等离子体质谱法测定。
（3）铁锰氧化物结合态：向上一步骤残余物中加入20 mL含0.04 mol·L-1 NH2OH·HCl的浓度为25%的HOAC溶液，于96±3℃的水浴条件下不断搅拌反应6 h后，在4×103 r·min-1下离心10 min，上清液过滤入50 mL容量瓶中，去离子水清洗滤纸三次后定容，尽快测定或保存在冰箱中4℃冷藏待测。
用10 mL去离子水清洗残余物，4×103 r·min-1下离心10 min，倒掉上清液（切勿损失残余物）。
La Huelga de Brazos Caídos
La Huelga de Brazos CaídosPor Roberto Fernández Durán ÍndiceIntroducción (3)I. Fuerza pública y pueblo (4)II. Un martes, a las nueve de la noche (8)III. En Cartago, la heroica ciudad (11)IV. El fantasma del miedo (14)V. Las tres factores (20)VI. Mariachis de cobija (25)VII. Mariachis de corbata (29)VIII. Hay un frente impalpable (32)IX. El tiempo detenido (39)X. Milagro en la alta noche (44)Epílogo (51)INTRODUCCIÓNEn la noche de julio, Juan Morales piensa.Sobre el tejado roto de la casa rural corre la lluvia, inclemente, incesante y tenues chorros finos de agua clara caen en la habitación. Una columna azul sube de sucigarrillo encendido, diluyéndose poco a poco en el aire. A ratos, un golpe de viento la agita, rompiendo con violencia su continuada ascensión oscilante.Perdido tras el humo, en la noche de julio, Juan Morales piensa.Ya pronto hará seis años que una vez estuvo acostado, en una noche de julio y lluvia, perdido también tras la asociación vertiginosa de sus ideas. Y ahora en Juan Morales se va abriendo lentamente un oculto camino que desde, la memoria busca el alma. La vida fluye en el recuerdo. Las escenas aclaran y se animan y los actos cobran realidad y significado.I. FUERZA PUBLICA Y PUEBLOFrente la plaza de la Artillería, en San José, el Gobierno ha disuelto a tiros una de las muchas manifestaciones populares de solidaridad con la huelga de brazos caídos. Es cerca de la media noche del martes veintidós de julio, de mil novecientos cuarenta y siete y dos cadáveres, un herido de gravedad, y varios leves son el saldo trágico y el testimonio acusador del abuso de la fuerza pública en poder de políticos inescrupulosos y funcionarios venales.Juan Morales ha visto caer los heridos y ha esperado la llegada de las ambulancias de la Cruz Roja que los transportan al San Juan de Dios. Con los ojos desmesuradamente abiertos por la incredulidad y el miedo se ha acercado a los muertos: uno yace de espaldas en la esquina opuesta al Banco Nacional; el otro está tendido veinticinco varas al Oeste, sobre la media calle.Como obedeciendo a una consigna, los compañeros de hacesólo un instante están callados. El silencio es solamente interrumpido de tarde en tarde por las voces de la policía, acantonada en el cuartel y en la calle del Congreso:-Alto ¡Devuélvase!Se impide el paso. Se obliga a todo el mundo a devolverse bajo la amenaza del máuser y la ametralladora de pecho.Más tarde, al no poder conciliar el sueño, Juan Morales trata de recordar los acontecimientos de los últimos días. Comprende que vale la pena fijarlos claramente en la memoria, pues, como cada uno de manifestantes del lunes y del martes, sabe que está viendo momentos importantes enlos cuales cada persona es como la gota de una gran marejada. Es que en determinadas ocasiones, el pueblo pareciera escuchar una voz al conjuro de la cual toda la angustia, todo el dolor y la sed de justicia se canalizan en una dramática necesidad de acción. Y cuando el puebloactúa la historia acelera su ritmo y sus páginas más brillantes quedan escritas con sangre generosa de víctimas heroicas.El domingo veinte de julio, sorpresivamente, los militares habían sometido Cartago al terror. Al salir la gente de los teatros, tomando los más el rumbo a la Avenida Central para hacer la acostumbrada ronda, había sido atacada súbitamente por la policía, armada hasta los dientes, que salía de lugares estratégicos previamente ocupados, como las bodegasdel Ferrocarril del Norte, el parque Jesús. Jiménez y las de la Iglesia Parroquial. Sin distingos de ninguna naturaleza, mujeres, y hombres, ancianos y niños fueron objeto de una persecución encarnizada, cruel y violenta. Como los cartagineses hicieran frente a la fuerza pública, desarmando a varios policías, las autoridades consideraron llegado el momento de hacer funcionar ametralladoras de pie instaladas con anterioridad. Los ciudadanos que estaban en la Avenida Central, el Parque Principal y las cercanías del Banco de Crédito Agrícola, hubieron de soportar el fuego sostenido de esas armas, además de las ráfagas de ametralladoras de pecho disparadas por la oficialidad.Con bombas lacrimógenas y disparos de ametralladoras se obligó al público a desalojar los sitios de reunión, para ser atacado al salir por la policía. La furia oficialista llegó a tal grado, que fueron agredidos el Juez Civil de la Provincia y un Magistrado Suplente en ejercicio.Como el ataque obedecía a un plan preconcebido, la policía se dio a la búsqueda de los jefes de la oposición, tarea que no resulto difícil, pues los dirigentes estuvieronjunto al pueblo en los momentos de peligro. Casi ninguno se libró de la violencia desencadenada y casi todos fueronvíctimas de bárbaras flagelaciones.Tan enconada fue la persecución; tan inhumano el ataque de la fuerza pública, que a nadie extrañó el que no se respetase ni la puerta venerable del Hospital Max Peralta, en donde los cirujanos se vieron obligados a improvisar una sala de operaciones, ya que los gases de una bombalacrimógena habían tornado irrespirable el ambiente en la sala de cirugía. Aquellos que en la calle cercana al hospital esperaban por noticias, de los heridos, fueron desalojados por las autoridades, ametralladora en mano. Al día siguiente en Cartago no sólo se hizo el recuento de heridos y pérdidas; se tomó nota de las personas que habían actuado en contra de la ciudadanía, para un ajuste de cuentas que se adivinaba cercano. Y se hizo también un balance de la situación. Pudo confirmarse entonces que el plan de ataque había sido elaborado de antemano en San José y que habían participado, además de los policías de Cartago, destacados elementos de la capital, entre ellos el propio Edecán del Presidente de la República, quien llegó a Cartago en el momento del ataque en un carro blindado, e impartió órdenes para perseguir a los oposicionistas.Las funestas predicciones que los cartagineses habían venido haciendo desde muchos días atrás, quedaban confirmadas por la trágica realidad. Se pudo entender entonces por que se mantenía en la Comandancia a un militararbitrario; por qué el envío de tropas y armas de San José; por qué la actitud desafiante de los funcionarios de la Comandancia. Se supo entonces por qué la noche anterior al atropello las autoridades, vestidas de civil y a lasórdenes de un comunista, provocaban abiertamente a los miembros de la oposición, alardeando de su bandería calderonista. Se pudo entender también el por qué, con el nombramiento del Comandante de Plaza, se había reiniciado una era de violencias y arbitrariedades; por que el cuartel de policía se había convertido en un centro de política caldero-comunista y por que a todas, horas y especialmente por la noche, visitaban la institución destacados elementos de los partidos del Gobierno. Se tuvo la convicción entonces de que todo era parte de un plan para amedrentaral sector de opinión oposicionista y perdió importancia el hecho escandaloso de pocos días atrás, cuando el Comandante lanzó a la calle varios piquetes de policía al mando de un civil, hampón de varios líos judiciales, con el fin de provocar a los ciudadanos, atropellándolos luego.Sin embargo, el intento de las autoridades para amilanar a un pueblo de bien probada rebeldía tuvo un resultado contrario a lo previsto por los provocadores, pues inmediatamente después del brutal atentado, la oposición cartaginesa se declaró en huelga de brazos caídos,propuesta a mantenerse en tal estado hasta que fuese encontrada una fórmula satisfactoria que garantizase la seguridad y la vida. Se dispuso un paro general de actividades que comprendió, desde el Banco de CréditoAgrícola hasta el más humilde de los tramos del mercado. Los profesionales cerraron sus oficinas y fueronparalizados los transportes. Al mismo tiempo, todas las entidades públicas y privadas de la ciudad dirigieron al Presidente de la República encendidos mensajes de protesta, en los cuales lo responsabilizaban por lo ocurrido y por lo que pudiera ocurrir y le notificaban la actitud de huelga unánimemente adoptada.A pesar de la prohibición del Presidente de la República quien alegó que un acto de esa naturaleza quedaba comprendido en las prohibiciones del Código Electoral, los comités directivos del partido oposicionista convocaron para una manifestación que debía efectuarse a las cinco de la tarde del lunes veintiuno de julio. No se tomó en cuenta la objeción presidencial, pues el acto era cívico y nopolítico: Cartago había sido sometido al terror y sus habitantes se habían enfrentado valientemente a los rifles, las ametralladoras, la cincha y los gases lacrimógenos dela policía. La oposición de San José estaba en el deber de hacer patente su solidaridad con los cartagineses y dehacerles, sentir que estaba dispuesta a compartir con ellos su suerte.Minutos antes de la hora señalada la gente empezó a afluir al punto de reunión, llenando en pocos minutos la explanada de La Soledad. La manifestación constituyó un alto testimonio de fervor cívico y el pueblo mostró en ella la decisión de hacer que se respetasen sus derechos.Frente al Diario de Costa Rica la multitud aplaudió a los ciudadanos que pronunciaron discursos desde los balconesdel periódico. Y como el Jefe de la Oposición se encontraba fuera de San José se le esperó hasta las primeras horas de la noche, en que de regreso, improvisó una pieza oratoria para felicitar al pueblo por su resolución y recomendarle proceder con cordura.-La oposición -dijo- tomará siempre decisiones firmes a base de la necesaria reflexión.II. UN MARTES A LAS NUEVE DE LA NOCHEAl recordar los hechos del domingo y del lunes, Juan Morales busca en los periódicos del día el telegrama del Presidente de la República al Jefe de la Oposición, y la respuesta de éste. Lee:Casa Presidencial, 21 de Julio 1947, 11 y 45.A don Otilio Ulate, San José.Enterado de la convocatoria que se ha hecho para que elementos de su partido celebren en San José hoy una manifestación y un desfile, me adelanto a recordarle que de acuerdo con el Código Electoral están, prohibidos los desfiles políticos. Creo que usted debe dar instrucciones a sus partidarios para que se respete la prohibición delCódigo. De lo contrario usted asumirá las consecuencias que sobrevengan si las autoridades de policía se ven obligadas a intervenir en resguardo del orden y cumplimiento de las disposiciones de la ley. Atentamente,-TEODORO PICADO. Licenciado don Teodoro Picado San José.Las consecuencias de lo que sobrevenga debe asumirlas usted o su candidato según quien sea el responsable de que anoche se disparara con ametralladoras y fusiles, y se lanzaran gases lacrimógenos contra una ciudad indefensa. Personalmente oí de las Hermanas Terciarias en el Hospital de Cartago cómo ellas mismas sufrían los efectos de los gases mientras ayudaban a la atención de los heridos hechos por la policía. Si el Código Electoral le sirve a usted para amenazar a la Oposición injustamente agraviada, lasmás elementales leyes humanas lo deberían obligar a impedir que la policía le rompiera el cráneo a un joven, como en el caso de don Fernando Volio hijo, por haber acudido en ayuda de su padre y con los puños vacíos mientras la policía lo flagelaba en el suelo. Ningún código del mundo autoriza a ningún gobernante para hacer disparar ametralladoras yrifles sobre una ciudad que no tiene armas, por sus opiniones políticas. Su candidato hace reuniones y desfiles cuando le viene en gana; su policía lo acompaña y el Código Electoral no autoriza que se descargue el black jack sobre los ciudadanos ni que se ofenda como aquí en Zarcero, a las señoras, para todo lo cual usted se hace de la vista gorda, en tanto que nos amenaza cuando, con el corazón herido, nos alistamos para hacer una protesta cívica por la sangre que usted o su candidato hicieron correr en Cartago. El caminode mi deber me lo marca mi conciencia y le ruego no imponerse tarea de decirme qué es lo que yo debo hacer,sino preguntarle a su propia conciencia qué es lo que usted debe hacer como gobernante. Le ruego además, imponerse del telegrama que le dirijo a don Mario Echandi para que conozca la actitud que asumo en estas circunstancias. Atentamente,-OTILIO ULATE.Señor don Mario Echandi:Rogándole reunir comités directivos en sesión permanente y delegando yo en ellos mis funciones por imposibilidad de estar temprano de regreso, sírvase someter a consideración siguiente telegrama: (el dirigido a Teodoro Picado). Mi opinión es que manifestación se lleve adelante si comités consideran llegado ya momento de enfrentar resolución popular a la violencia oficial. Caso contrario puede sermás eficaz promover para dentro de tres o cuatro días gran movimiento nacional desobediencia y brazos caídos.Simultáneamente sugiero que por conducto de don Juan Dent se interpele al gobierno sobre si al amenazar a laOposición por manifestación de protestas contra atentado criminal de la República anoche en Cartago está dispuesto a dar garantías en aquella ciudad y resto República y ejercer sanciones y cuáles son específicamente las garantías y las sanciones. Afmo.,-OTILIO ULATE.Por los diarios se había enterado la gente de un memorandum, suscrito por el Presidente y resultado de la conferencia sugerida por el Jefe de la Oposición. Decíaasí:Memorandum para don Juan Dent.1) Insisto en que los desfiles políticos son prohibidos en esta etapa de la campaña política. No obstante ello, en obsequio a mi deseo de que no se produzcan choques de los manifestantes con la policía, y de acuerdo, con los deseos de usted, he dado instrucciones a las autoridades para que toleren dicho desfile de la explanada de La Soledad hastael edificio del «Diario de Costa Rica», donde habrá de terminarse, para evitar mayores trastornos u oportunidad de rozamiento con los demás partidos.Es entendido a su vez, que los oradores y dirigentes de la manifestación tratarán por todos los medios que estén a su alcance de evitar que los manifestantes ataquen propiedades de sus adversarios políticos o tengan incidentes con éstos.2) En lo que toca a la situación de Cartago debo advertir que la policía permanece reconcentrada, no obstante que los ulatistas han asaltado el club calderonista y han detenido un camión que traía para esta capital la leche de losseñores Francisco Calderón, Joaquín Aguilar Esquivel y Fernando Esquivel. Procuro designar un primer comandante que, a mi juicio, inspire confianza. Debo advertir que el Coronel Vaglio desempeña su cargo interinamente.TEODORO PICADO Cuando el permiso llegó a conocimiento de los oposicionistas, ya el desfile en disputa había recorrido toda la Avenida Central y comenzaban a llenarse de gentelas calles cercanas al «Diario de Costa Rica».La huelga nacional de brazos caídos fue proclamada oficialmente por la Oposición, a las nueve de la noche del martes veintidós de julio, después de una reunión de cuatro horas de los miembros de los comités, del Partido Unión Nacional y de los diputados oposicionistas. Se había deliberado largamente y a pesar de estar todos de acuerdo en la idea de un paro general, un grupo lo quería inmediato, mientras que otro había sugerido el previo nombramiento de un comité organizador el cual habría defijar el momento en que la huelga debiera producirse.El primer criterio prevaleció y en la decisión tuvieron peso las manifestaciones de los Jefes de Acción del Partido en Alajuela y Heredia, quienes garantizaron que en sus ciudades todo estaba listo para un paro inmediato. Vehementemente, una delegación de Puriscal insistió en la huelga inmediata y grupos de ciudadanos, de todas las clases, invadieron el edificio del Partido a un solo grito: -¡Huelga! ¡Huelga!Miles de ciudadanos, congregados por las sirenas de losperiódicos al servicio de la oposición, leyeron entusiasmados la noticia escrita con grandes caracteres en las pizarras:-¡Huelga! ¡Huelga!Y hacia todos los rumbos de la ciudad capital partieron improvisadas manifestaciones de júbilo. En una de ellas iba Juan Morales cuando la policía hizo fuego.III. EN CARTAGO LA HEROICA CIUDADAl despertar de una agitada noche de insomnios, Juan Morales busca ansiosamente las noticias en los periódicos. Por estos se entera que desde la misma noche comenzó la labor de los comités provinciales, para organizar la huelga en cada una de las localidades cabeceras.En lugar visible de las primeras páginas; el boletínoficial oposicionista:EL COMITE DE HUELGA NACIONAL hace saber a sus partidarios que la huelga decretada tiene carácter de resistenciapacífica y que desautoriza cualquier acto de violencia contra personas o propiedades.El Comité sesionará en las horas de la mañana de hoy en el Club del Partido Unión Nacional y dará las instruccionesdel caso.Lee también en los periódicos que el día anterior los estudiantes, desfilando por calles céntricas, habíanllegado al Parque Central de San José, en donde celebraron un mitin de protesta, decidiendo dirigirse telegráficamente al Presidente Picado en solicitud de la inmediata remoción de las autoridades culpables del asalto contra los cartagineses.Que en el momento en que la huelga es declarada, los estudiantes universitarios y de enseñanza secundaria deciden no asistir a clases en apoyo al movimiento, con la aprobación del Consejo Estudiantil Universitario. Y que anuncian para las nueve de La mañana, un desfile al grito de "queremos autoridades decentes".A pesar de su intransigencia, el Gobierno no ha podido desentenderse del comportamiento escandaloso de las autoridades destacadas en Cartago y se ha visto forzado a levantar una información sobre los sucesos del domingo, como resultado de la cual anuncia el nombramiento del Coronel Mario Jiménez Tinoco para Primer Comandante y eldel Coronel Héctor Sáenz Mata para Segundo Comandante de Cartago, y el traslado de Vaglio al Cuartel Bella Vista de San José.Se rumora al mismo tiempo que más de cien policías josefinos, pertenecientes a los cuarteles Principal y de Artillería, y concentrados en Cartago, serán trasladados ala capital como una de las primeras disposiciones del nuevo Comandante.Al abrir fuego el Gobierno contra los manifestantes de San José, en la noche del martes, cerró sus posibilidades para un fácil entendimiento con la Oposición. Esta, en adelante, no se limitará a pedir remociones en el personal militar, sino que exigirá garantías efectivas de carácter político, para situarse en un plano de igualdad en las elecciones presidenciales con los partidos calderonista y comunista aliados y mantenedores del Gobierno. Todo esto además delas garantías para la vida y seguridad de las personas no adictas al oficialismo, exigidas en un principio por los cartagineses y acogidas por todo el país.En tal forma, ya en la mañana del miércoles 23 de julio no podía impresionar favorablemente a nadie la noticia de un simple cambio de Comandantes y el rumor de que los policías josefinos serían reintegrados a sus cuarteles en lacapital. Ya el día anterior, delegados de Cartago habían manifestado al Jefe de la Oposición que aceptaban los nuevos Comandantes, pero que además, exigían otros cambios en la plana mayor de la Comandancia, amén del cambio total de la policía, exigencias que don Otilio Ulate trasmitió a dos Coroneles, delegados del Presidente, quienes lo habían convocado a una reunión. Las peticiones fueron aceptadas, con la única salvedad de que el cambio del personal de la policía sería paulatino, hasta su total sustitución.Una nueva conferencia tuvo el señor Ulate, en su oficina, con los delegados de Cartago, a quienes impuso de laactitud del Ejecutivo. Pensaba que Cartago había de decidir si las condiciones se aceptaban, finalizando la huelga, osi se persistía en esta ya que era esa ciudad la que desde el domingo había hecho el sacrificio, padecido el martirio y realizado la huelga con éxito sorprendente. La respuesta de los delegados fue: si se declarase a partir delmiércoles una huelga nacional, Cartago se uniría a ese movimiento; si la huelga no fuese declarada, o si se aplazase, Cartago no podría convenir en la espera y en ese caso aceptaría la propuesta del Gobierno, dando por terminada la huelga local.Fue después de estas conversaciones que tuvo lugar lareunión de Comités oposicionistas, en la cual se declaró la huelga. El señor Ulate se negó a hablar por radio y a pronunciar el discurso que delirantemente se le pedía, pues opinaba que era justo proclamar la huelga en Cartago. Acompañado por don José Figueres, Jefe de Acción delPartido oposicionista, se dirigió a la heroica ciudad, en donde, en una gran asamblea popular improvisada, hizo laproclamación oficial de la huelga, dando las siguientes instrucciones: Primera: la huelga debe desarrollarse ordenada y pacíficamente, porque no tiene carácter revolucionario y no es prudente exponer masas inermes a la furia policíaca. Segunda: deben suprimirse las manifestaciones que puedan dar pretexto para ataques, así como también debe evitarse toda discusión con las autoridades o los adversarios políticos, dedicándose cada uno a contribuir a la huelga silenciosamente. Y tercera: como no se trata de derrocar al Gobierno, la huelga cesará tan pronto como se obtengan garantías de libertadelectoral.De regreso a San José, los militares con quienes había conferenciado en la mañana le notificaron que se había dispuesto enviar fuerzas a Cartago, a las cinco de la madrugada del miércoles, para ocupar la ciudad militarmente y para impedir por la fuerza el cierre de los establecimientos. Les repitió que todo se podía arreglar si el Presidente garantizaba la libertad electoral, redactando al efecto un pliego de demandas, en compañía de un grupo de dirigentes de la oposición.El Presidente Picado, al recibir el pliego, lo rechazó de plano. El mandatario se había trasladado al Cuartel Bella Vista y mostró a las claras la actitud intransigente quesería su característica al correr de los doce días de huelga. Al enterarse del rechazo, el señor Ulate decidió advertir a los cartagineses de los peligros que los amenazaban y con tal fin envió un emisario de confianza el cual, tras vencer muchas dificultades, pues el camino estaba bloqueado por la policía, pudo al fin trasmitir el mensaje.IV. EL FANTASMA DEL MIEDOCon las noticias de los periódicos aguijoneando su angustia, Juan Morales sale a observar por las calles. Esla primera vez que una huelga de no cooperación se declara en el país y no puede atribuirse a falta de fe el que un hombre dude del éxito del movimiento.El sol está alto en la clara mañana cuando Juan Morales se ve obligado a detenerse, porque la emoción ha llenado sus ojos de lágrimas. El San José que ha mirado es algodiferente de la despreocupada y alegre ciudad cotidiana. Las cerradas puertas del comercio de los Bancos; de las oficinas, dan a la capital una gravedad de siglos. Sin saber exactamente por que, Juan Morales piensa en las piedras y en los cementerios. Comprende que muchos de los que a su lado pasan piensan en la muerte.-Será la voluntad de sacrificio -se dice- o más bien el temor de ser asesinado como los dos hombres de anoche. Otal vez nada más que el grave ambiente, extraño y nuevo.Se entera de que sólo unas pocas pulperías pequeñas permanecen abiertas; que los empleados de los Bancos han constituido un Comité de Huelga con representación del noventa por ciento del total, obligando al cierre de las instituciones por falta de personal para atender alpúblico; que se han comprometido bajo juramento a aceptar solidariamente las consecuencias de su actitud, declarando que se juega el destino de la Patria y que ningún hombre honrado y digno puede ceder un ápice. Se entera también de que las empresas de aviación están cerradas.En los días sucesivos se agregarán a la paralización de actividades el cuerpo médico, las barberías, los teatros, las carnicerías, las telefonistas, el personal del Ferrocarril del Norte, los empleados del tranvía, los dry cleanings, los depósitos de madera, las farmacias, los empleados judiciales, 135 agentes viajeros y los trabajadores de las Compañías Eléctricas.La policía acantonada en las calles cercanas a la Avenida Central, ha reprimido salvajemente la manifestación estudiantil anunciada en los diarios, disparando losmáuseres al cuerpo, a matar.Las autoridades se han acostumbrado pronto a asesinar, y su saña va en aumento. Al mediodía los gendarmes caen sobrelas estaciones radioemisoras al servicio de la oposición,decomisándoles piezas esenciales y dejándolas inútiles. Entretanto, las emisoras al servicio del Gobierno se dedican a propalar falsas noticias, resguardados sus estudios por piquetes de policía fuertemente armada. Y aunque inmediatamente después del atropello los oposicionistas presentan recursos de habeas corpus, se estima que estos no serán conocidos, por la Corte Suprema de Justicia antes del lunes.El Gobierno ha violado la libertad de pensamiento y de expresión, sin estar suspendidas las garantías constitucionales.Mientras las estaciones radiodifusoras son clausuradas, el Gobierno desata tremendas balaceras en el propio corazón de la capital. Frente al Diario de Costa Rica son atacados vilmente los ciudadanos que esperaban noticias y observaban los acontecimientos, y algunas balas horadan las paredesdel periódico. Al mismo tiempo, policía y jeeps dispara sin piedad sobre las personas que transitan en la cercanía de los Juzgados, hiriendo a varios ciudadanos y asesinando al escribiente de la Alcaldía Primera Civil. El número devíctimas va aumentando. Diez muertos y dieciocho heridos reportan los informes del Hospital San Juan de Dios. Y el alto porcentaje de muertos se atribuye a la horrible circunstancia de que las fuerzas gobiernistas están usando proyectiles de fragmentación. Un hilo de sangre va uniendo a los costarricenses, y el pueblo, en el dolor y el sacrificio, va afirmando su voluntad de triunfo.Por la noche, Juan Morales escucha nuevos tiroteos. Se entera que cerca de la estación del Atlántico un hombre ha sido herido y que en la vecindad del Hotel Europa los comunistas, ebrios de alcohol y sangre, han atacado a bala a un caballero que acompañaba a su esposa, dejándolotendido sobre la acera, entre la vida y la muerte.El Gobierno ha armado a tres mil comunistas, con los que ha reforzado el ejército. Y la noche asombrada del miércoles veintitrés, contempla a unos extraños personajes provenientes de las regiones costaneras que, envueltos en cobijas de lana o algodón, patrullan por las calles de San José. En cada esquina cuatro o cinco, armados de máuser y con fajas de tiros en la cintura, medio ebrios con el guaro que personajes influyentes del Gobierno les repartieran para hacerlos más irresponsables y crueles. La policía permanece concentrada en los cuarteles, ante el temor de represalias por parte de la oposición y lista para ser transportada al lugar en que se presenten los temidos disturbios.。
E S P R I T 算 法
NLP Lemmatisation（词性还原）和 Stemming（词干提取） NLTK pos_tag word_tokenize词形还原（lemmatization），是把一个词汇还原为一般形式（能表达完整语义），方法较为复杂；而词干提取（stemming）是抽取词的词干或词根形式（不一定能够表达完整语义），方法较为简单。
Stemming（词干提取）：基于语言的规则。
如英语中名词变复数形式规则。
由于基于规则，可能出现规则外的情况。
# Porter Stemmer基于Porter词干提取算法from nltk.stem.porter import PorterStemmerporter_stemmer = PorterStemmer()porter_stemmer.stem('leaves')# 输出：'leav'# 但实际应该是名词'leaf'nltk中主要有以下方法：# 基于Porter词干提取算法from nltk.stem.porter import PorterStemmerporter_stemmer = PorterStemmer()porter_stemmer.stem(‘maximum’)# 基于Lancaster 词干提取算法from ncaster import LancasterStemmerlancaster_stemmer = LancasterStemmer()lancaster_stemmer.stem(‘maximum’)# 基于Snowball 词干提取算法from nltk.stem import SnowballStemmersnowball_stemmer = SnowballStemmer(“english”)snowball_stemmer.stem(‘maximum’)Lemmatisation（词性还原）：基于字典的映射。
实验一RNA提取方法及原理
实验一RNA提取方法及原理RNA提取是从生物样本中提取RNA分子的一系列操作过程，其中包括细胞破碎、RNA与其他分子的分离和纯化。
RNA提取可用于研究基因表达、编码RNA功能等生物学研究领域。
一、RNA提取方法1.直接方法直接法是一种快速且简单的RNA提取方法，适用于较小的样本。
该方法不需要扩增RNA，并且避免了DNA污染。
主要步骤包括细胞破碎、蛋白质沉淀、RNA沉淀和洗涤。
直接方法可用于提取总RNA或其中一种特定类型的RNA（如mRNA）。
2.两步法两步法是RNA提取的常用方法之一，适用于大多数样本。
首先使用各种方法破碎细胞，使RNA释放出来。
然后通过蛋白质沉淀、RNA沉淀和洗涤来纯化RNA。
两步法具有更好的RNA纯度和更高的产量。
3.树脂结合法树脂结合法是一种通过RNA与树脂结合来纯化RNA的方法。
树脂有很强的亲和力，可以选择性地结合RNA。
树脂结合法适用于小样本量或从混合样本中纯化特定RNA的情况。
4.直接PCR法直接PCR法是一种将RNA直接用于PCR扩增的方法。
它通过添加DNA合成酶和逆转录酶，将RNA转录成cDNA，并立即进行PCR扩增。
二、RNA提取原理RNA提取的原理是利用物理和化学方法破坏细胞膜，使RNA释放出来，然后通过沉淀和洗涤来纯化RNA。
细胞破碎：细胞破碎的方法有多种选择，包括机械破碎、酶解和化学破碎等。
机械破碎可通过震荡或高压细胞破碎仪实现。
酶解法是利用酶消化细胞膜，促进RNA的释放。
化学破碎是利用化学物质，如氯仿、酚和乙酸酐等。
蛋白质沉淀：加入蛋白质沉淀剂（如酒精或异丙醇）可使蛋白质沉淀而RNA在上清液中。
RNA沉淀：加入RNA沉淀剂，通过离心将RNA从上清液中沉淀下来。
RNA沉淀后，上清液中的DNA和蛋白质会被除去。
洗涤：通过加入酒精或异丙醇溶液洗涤RNA，除去残留的污染物，如盐和酚。
在RNA提取过程中，需要注意一些关键点，以确保提取到高质量的RNA。
例如，实验过程中需注意酶和核酸酶的污染，使用无核酸酶的试剂和工具。
短时记忆的提取方式
所谓信息提取，又称检索，指把储存在假定的记忆系统中的特定信息提取出来以便使用。
短时记忆中的信息处在我们当前的意识中，只储存少数几个项目，由于工作或操作的需要可以立即被提取出来。
这使人感到，似乎短时记忆信息提取的机制很简单，但后来的研究表明，事实并非如此。
1．S.Sternberg的经典研究斯特伯格（S.Sternberg）开创了对短时记忆信息提取的研究，他的研究被看作经典性的，他的观点和方法有着广泛的影响，为本领域的深化奠定了基础。
Sternberg在对短时记忆条件下信息提取方式进行研究时，采用了"探查法"（Probe method）为主要手段（1966）。
其具体作法是：向被试逐一呈现1至6个由数字0至9组成的数字串（每个数字呈现时间为1.2秒）,要求被试识记,这几个数字称为"记忆集"（memory set）。
记忆集中的数字及数字串的长度是随机变化的，且每一记忆集中的数字没有重复。
刺激呈现后2秒，再呈现一个数字（探测项，p robe item），要求被试对本数字进行再认，并尽可能迅速地判断它是否曾在记忆集中呈现过，即做出肯定或否定的反应。
肯定和否定探测项出现的概率也相同。
Sternberg的研究目的在于检验短时记忆中，信息提取的方式究竟是从头到尾一个项目接一个项目的检索，还是一检索到检测项就自行终止。
他假定，完成一项作业所需时间是一系列信息加工阶段所需时间之和。
如果对影响作业的不同阶段的因素进行操作，各因素的不同效应就可以在作业反应时中表现出来。
他认为，若影响被试作业的两个因素相互制约，那么表明两个因素作用于同一信息加工阶段；反之，如果两因素的效应相互独立，则两个因素会各自作用于不同的信息加工阶段，即两因素的效应具有可加性。
Sternberg在一系列实验的基础上确定，影响短时记忆信息提取过程的因素有四个：（1）探测项的性质；（2）记忆集的数量（N）；（3）反映类型（肯定或否定）；（4）各反映类型的相对频率。
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颗粒态痕量金属的基础形态的连续提取过程（译）Tisser摘要：该研究发展了一种关于颗粒态痕量金属的分析方法，该方法利用一种连续的化学提取法将痕量金属（Cd，Co，Cu，Ni，Pb，Zn，Fe，Mn）分为五种形态，分别是：可交换态、碳酸盐结合态、Fe-Mn氧化物结合态、有机结合态与残余态。
使用该连续提取法对河流底泥样品进行重复实验，结果显示该法的相对标准差在正负10%以内。
同时，对痕量金属总量与其五种形态分量之和进行比对发现，精度是令人满意的。
为了评估不同提取试剂对于金属特定形态的分离性，对每一提取步骤的渗滤液与残余物进行了补充测量。
最后将本法应用于河流底泥，并讨论了底泥的痕量金属形态。
一、综述：对于自然水体中的颗粒态金属（如：结合在水体悬浮物体或底泥上的金属），大多数研究只考虑金属总量。
有一小部分研究尝试着评估过颗粒态金属的分形态（指颗粒态金属的更微观化学形态）。
利用金属总量作为评估底泥污染程度的指标，意味着对于给定的金属，其所有的化学形态对于环境都具有相同的影响。
这种方法明显是不合理的。
理论上来说，固体物质可以被分成不同的基本组份，而这些组份可以通过合适的试剂浸提分离开来；考虑到土壤与底泥的相似性，提取步骤可以借鉴土壤化学分析的方法。
现在有一些确定颗粒态痕量金属基本组成形态的实验方法。
这些方法在操作的复杂程度上各异，总体上可以分成以下两类：一种是将金属分成残渣态和非残渣态两类；另一种是更加复杂的连续提取方法。
前者通常只需一种浸提剂，这种方法比起总量预测法，可以使反常样品和背景样品之间的对比更加鲜明。
这种方法迅速、简便，但是这种方法很难找到一种既可以有效溶解非残渣态金属而且又不会攻击残渣态金属的浸提剂。
连续提取方法虽然耗时，但是在金属的迁移转化、来源、存在模式、生化有效性等诸多细节方面，为我们提供了更多的信息。
本研究的目的在于检验连续“分离”提取方法的优劣，该方法将颗粒态金属分离成不同的基本形态，这些形态的溶解态出现在不同的环境条件下。
研究的痕量金属包括：Cd，Co，Cu，Ni，Pb，Zn，Fe和Mn。
为了方便，实验选用底泥作为材料，这比悬浮物质更易获得所需材料量。
虽然在学术界不认为铁和锰是痕量金属，但为了简化结果陈述，本文特意加入了这两种金属。
二、基本形态划分：考虑到环境条件对于痕量金属基本组成形态的影响，本研究选择了以下几种形态：形态1：可交换态。
大量研究论证了底泥及其组成成分（如粘土、氢氧化铁、氢氧化锰、腐殖酸）对痕量金属的吸附作用；水体离子组成的改变很可能影响到痕量金属的吸附、解吸过程。
形态2：碳酸盐结合态。
一些研究者发现痕量金属的富集量与底泥的碳酸盐含量显著相关；这一形态对pH的变化比较敏感。
形态3：铁锰氧化物结合态。
已经确认，铁锰氧化物以颗粒之间的囊粒、结核、胶粘剂或是颗粒的外壳形式存在；这些氧化物是痕量金属优良的清道夫，在厌氧条件下具有热力学不稳定性。
形态4：有机结合态。
痕量金属可以和不同类型的有机物相结合：比如活的生物体、腐物、胶粒外壳等。
自然有机质，特别是腐殖酸和富里酸对金属的络合与胶溶作用，以及痕量金属在特定生物体中的生物富集现象已经得到了广泛的承认。
在自然水体的氧化条件下，有机质可以被降解，这可以导致可溶性痕量金属的释放。
形态5：一旦前四种形态被分离出去，则残余固体的成分主要应当是原生和次生矿物，这些矿物可以将金属元素封锁在自身晶格之内。
在自然条件下，一定的期限内这些金属元素应当是不会转化为溶解性的状态的。
三、实验1. 制样底泥样品收集自两个点：SM和PV。
用Ekman取泥器取得大量底泥。
使用聚乙烯药匙从采样器中间取泥，防上取泥器金属部分对样品的污染。
样品在4C 条件下保存不超过3天，然后在105C的强制通风炉中烘干。
之后用玛瑙研钵研磨、均粒之后在4C下保存直到使用。
2. 淋洗步骤与试剂经过对一系列可用文献的比选，留下了以下化学提取方法供进一步研究；以下提到的底泥样品用量均为1g（用做初步提取的原始样品干重）。
（i）可交换态。
在室温下，将底泥在连续搅拌下用8mL的MgCl2溶液（1M，pH=7.0）或者NaOAc溶液（1M，pH=8.2）提取1小时。
（ii）碳酸盐结合态。
将（i）中的沉淀物在室温下，在连续搅拌下用8mL的pH=5.0的醋酸缓冲液提取至反应完全。
所需提取时间进行了附加实验。
（iii）铁锰氧化物结合态。
利用：a. Anderson和Jene描述的方法：20mL，0.3M Na2S2O4+0.175M 柠檬酸钠+0.025M 柠檬酸；b. 20mL的溶解于25%（v/v）醋酸中的0.04M的NH2OH·HCl溶液两种方法对（ii）中的沉淀物进行提取。
后一种方法在96±3℃下进行偶尔的搅拌。
对完全溶解铁氧化物所需时间进行了附加实验。
（iv）有机结合态。
此处引用了Gupta和Chen的方法。
对（iii）得到的沉淀物中加入3mL0.02M的HNO3和5mL30%的用HNO3调整pH至2的H2O2。
将混合液在85±2℃下加热2小时，适当搅拌。
再加入另外3mL30%的用HNO3调整pH 至2的H2O2，再在85±2℃下加热3小时，间歇搅拌。
冷却后，再加入5 mL的溶解于20% (v/v) HNO3中的3.2 M 的NH4OAc 溶液，连续搅拌30分钟。
NH4OAc 的加入是为了防止已提取出的金属被氧化的底泥所吸附。
（v）残余态。
用后面将会用到的分析痕量金属总量的HF-HClO4混合液消解法对（iv）中得到的沉淀进行消解。
每一步提取都需进行离心（50mL聚丙烯离心管）操作以尽量减少固体损失。
在相邻的两步之间均需进行10000rpm下的离心操作30min以实现固液的有效分离。
上清液用移液管移走以供痕量金属分析（见下），沉淀物用8mL去离子水洗涤；再次离心30mL后，弃去上清液。
洗涤用水量控制到最少以防止对固体物质，特别是有机物的过度溶解。
本研究中用的去离子水使用Millipore公司的Milli-Q3RO/Milli-Q2系统制得。
实验所用的玻璃仪器均使用14%HNO3（v/v）洗涤并用去离子水冲洗。
所用试剂均为分析纯以上级别并进行了可能的痕量金属污染检测。
在用到的试剂中，只有亚硫酸钠受到了严重的Zn污染。
3. 痕量金属分析痕量金属浓度用AAS方法测定，仪器型号为Varian Techtron Model AA-5，该仪器可直接将待测样品输入氧炔焰。
以下技术用于前四种形态。
对于Cd、Co、Cu、Ni、Pb和Zn，由于存在可能由底泥物质浸出导致的母质效应，因而使用了一种标准附加方法。
母质效应在多数情况下会导致高达15%的误差。
对于浓度高的金属（Fe和Mn），上清液需要用去离子水稀释20-50倍之后再测量。
而且其浓度可以直接从相应的校准曲线上读出。
对于金属总量分析与残余态分析，固体物质首先用HF- HClO4（5:1）混合液进行消解。
对于1g的干燥底泥样品，首先在铂坩埚中用HClO4（2mL）和HF（10mL）消解至接近干化；之后再添加HClO4（1mL）和HF（10mL），并再次蒸至接近干化。
最后，再单独添加1mL HClO4，对其进行蒸干操作至出现白色烟雾。
得到的沉淀物质溶解在12N的HCl中之后再稀释至25mL。
最后得到的溶液用AAS依据标准附加方法进行痕量金属的检测。
4. 补充测量为了检验每一提取步骤的分离效果，本研究对浸出液中的Si、Al、Ca、S、有机碳、无机碳浓度和化学处理（X射线衍射）前后的底泥中的S、有机碳、无机碳浓度作了相关补充检测。
浸出液中Si、Al、Ca的浓度用氧化亚氮－乙炔陷的AAS方法检测。
对于Al和Si 的分析，其浸出液获取方法是：将样品与无水偏硼酸钠进行熔融，之后将该熔融物溶解于1.2N的盐酸中。
S的浓度利用选择性离子电极（Orion Model 96-16A）在硫抗氧化缓冲液（SAOB）存在的条件下进行测量。
SAOB须立即加入与底泥离心分离后的上清液中。
可溶性无机碳及有机碳浓度用Beckman总有机碳分析仪（Model 915A）进行检测。
颗粒状S和C分别用Leco总硫分析仪（Model 1R-32）和Leco总碳分析仪（Model 1R-12）进行检测。
无机碳假设是总碳与有机碳浓度的差值。
X射线衍射用来分析整体的底泥和其2-16um及<2um的片段；根据斯托克斯定律，各个片段使用差速离心实现有效分离。
四、结果与讨论1. 试剂的选择与浸出条件在选择连续提取所用的试剂时，特别强调每种淋洗液的潜在分离性。
用在土壤化学分析中的最新方法与最近的文献中提出的底泥及悬浮物痕量金属提取分离技术在本研究中都给予考虑。
很多试剂，包括醋酸铵、醋酸钠和氯化镁都曾用作离子态金属的游离化试剂。
在这些试剂中，醋酸铵（pH=7）在土壤和底泥的分析中是用的最广泛的。
但是，根据很多研究者的研究结果，醋酸铵同时会攻击碳酸盐。
Chapman的研究表明，CaCO3在中性的醋酸铵溶液中的溶解度要远高于在pH=8.2的醋酸钠溶液中的溶解度，醋酸钠也是现今用于测定土壤CEC的试剂。
因此，现在的研究一般不考虑用醋酸铵；Gibbs提到过1M、pH=8.2的醋酸钠的优点，这将在下面进行论证。
推荐用来选择性地溶出底泥中的碳酸盐的试剂是醋酸钠与/或醋酸，这一步需要在酸性pH条件下进行。
本研究所选用的是用醋酸把pH调至5.0的1M的醋酸钠溶液。
Grossman和Millet报道说让非钙质土壤与该缓冲液接触9周的时间，其中的有机碳和自由铁浓度也保持不变；其它研究者也论证说低的pH值会在一定程度上攻击铁锰铁化物。
溶解碳酸盐的时间取决于碳酸盐粒度、碳酸盐的种类和百分比还有样品粒度等因子。
为了探求浸出碳酸盐结合态金属的最佳时间，底泥样品先是用1M的醋酸钠或1M的氯化镁提取出可交换态金属（提取1小时），之后再用醋酸缓冲液进行浸提；在不同的时间间隔下测定上清液中的钙离子浓度。
图表1显示：在5小时内，两种底泥中的钙离子即可完全溶出。
这一提取时间可能对于大部分悬浮固体样品中钙离子的最终溶出是足够的。
但是对于粗糙底泥来说，因其具有高的碳酸盐浓度，所以可能还需要更长的浸提时间，并且还需要在实验进行中不时地调整反应液的pH值。
表1显示，两种底泥在分离形态2时浸出的钙离子量受前一步浸提所用浸提剂的影响，用醋酸钠浸提过的钙浸出量要低于用氯化镁浸提过的。
这一现象可能是由于醋酸根的配位效应。
如：Ca2++OAc－=CaOAc+；logK=1.24；经过热力学计算得到的醋酸配位效应甚至比图表1中观测到的更强。
此外，还由于氯化镁近期被发现具有吸附特定痕量金属的功能，因此本研究选用氯化镁作为连续提取步骤中的初始浸提试剂。
提取铁锰氧化物的最好办法是选择一种可以将铁、锰分别还原至2价铁与2价锰的混合试剂，并且该试剂还应当具有使相关金属以自由态存大量在于溶液中的能力；常用的两组混合试剂分别是：NH2OH·HCl+CH3COOH；Na2S2O4+柠檬酸钠。