快速梅毒血清反应素试验
梅毒几种检测方法的比较
梅毒几种检测方法的比较摘要】安全的血源，是输血安全的保证。
大多数采供血机构采用的非特异性的甲苯胺红不加热血清试验(TRUST)或快速血浆反应素试验(RPR)法，检测灵敏度低、特异性差，对输血安全影响很大。
为选择合适的梅毒检测方法，本文探讨各种检测方法的原理及优劣，从而总结出适合用于献血者梅毒筛查的方法。
【关键词】梅毒;检测;血站筛查【中图分类号】R210【文献标识码】A【文章编号】1005-0515(2011)06-0302-01 非特异性的甲苯胺红不加热血清试验(TRUST)或快速血浆反应素试验(RPR)法，是目前血站筛查梅毒的常用方法。
传染期的梅毒献血者，试验结果可能为阴性，献血者献血后造成梅毒传播；检测易出现生物学假阳性，部分假阳性的献血者被淘汰。
因此梅毒的检测方法对输血安全非常重要。
梅毒螺旋体侵入机体可产生两种抗体：特异性抗体与非特异性抗体。
目前用于梅毒检验的方法就是检测这两种抗体。
1梅毒螺旋体非特异性血清学试验1.1快速血浆反应素试验(RPR):抗原以胆固醇晶粒为载体，包被上心磷脂和卵磷脂，构成VDRL抗原颗粒。
再把抗原颗粒结合到活性炭上，当抗原与血清中反应素以一定的比例相互作用时，出现凝集，凝集颗粒呈黑色。
1.2甲苯胺红不加热血清试验(TRUST):抗原以胆固醇晶粒为载体，包被上心磷脂和卵磷脂，构成VDRL抗原颗粒。
再把抗原颗粒结合到甲基胺红上，当抗原与血清中反应素以一定的比例相互作用时，出现凝集，凝集颗粒呈红色。
2梅毒螺旋体特异性血清学试验2.1荧光密螺旋体抗体吸收试验(FTA-ABS):首先将梅毒螺旋体Nichols株抗原直接涂在载玻片上，然后将密螺旋体无毒株Reiter株制成吸收剂加至待测血清标本中，吸收掉血清中的非特异性抗体。
再将吸收后的血清加到玻片的抗原膜上，再加荧光素标记的抗人IgG，最后在荧光显微镜下观察结果。
2.2梅毒螺旋体血细胞凝集试验(TPHA):将梅毒螺旋体Nichols株经超声破碎后，得到可溶性抗原成分，致敏红细胞。
102.梅毒血清学检验
梅毒的血清学试验参考范围：性病研究实验室试验（VDRL）阴性不加热血清反应素试验（USR）阴性快速血浆反应素试验（RPR）阴性荧光密螺旋体抗体吸收试验（FTA-ABS）阴性梅毒螺旋体血凝试验（TPHA）1：25以下为阴性梅毒螺旋体制动试验试验标本活动螺旋体数为对照标本的40%为阴性梅毒螺旋体抗体试验（TP-Ab）阴性临床评价：1．梅毒螺旋体也称苍白密螺旋体，是性传播疾病梅毒的病原体。
机体对梅毒螺旋体感染可产生体液和细胞免疫反应，梅毒螺旋体血清学试验是诊断梅毒的依据之一。
血清学试验主要有两个类型，一类是VDR L，USR和RPR．属非螺旋体抗原试验，是用正常牛心类脂质作为抗原，测定血清中的反应素，为筛查试验。
另一类是FTA-ABS，TPHA和TPl，属螺旋体抗原试验，是用梅毒螺旋体作为抗原，检测血清中的特异性抗体，为确证试验。
2．非螺旋体抗原试验(VDRL，USR，RPR)敏感性高，其反应素效价与病变活动性有关。
第一期梅毒病灶出现后1～2周即可测出反应素，第二期梅毒病人血清中反应素效价最高，阳性率可达99％，经药物治疗后可转阴。
先天性梅毒80％～100％阳性。
但此类试验特异性不高，常有假阳性反应，在分析结果时应注意结合病史、临床症状及特异性试验作出正确判断。
FTA-ABS的敏感性和特异性均高，在早期梅毒首先出现阳性，病人经药物治疗后反应仍不转阴，故不能用作疗效的评价，常用于梅毒的确定诊断。
TPI是一种经典的特异性较高的梅毒血清学反应，假阳性不到1％，主要用于晚期梅毒及疑难病人的诊断。
TPHA具有敏感、快速、简便等特点，但特异性不及FTA-ABS和TPI。
采取脑脊液标本进行特异性抗体检测，对中枢神经系统的梅毒具有诊断价值。
3．暗视野检查法对梅毒的诊断有重要意义。
此法系采取病灶组织渗出液、淋巴穿刺液或组织悬液制成涂片，在暗视野显微镜下直接检查梅毒螺旋体，主要适用于初期梅毒的检查，有一定局限性。
暗视野检查法一次阴性结果不能否定梅毒的存在，一般连续检查3天阴性才能予以排除。
梅毒血清学实验分两类
梅毒血清学实验分两类：1、非梅毒螺旋体抗原血清试验：用心磷脂做抗原，检查血清中的抗心磷脂脂抗体，即反应素，属于这一类的试验的VDRL试验，USR试验及RPR（快血清反应素）试验，可作定量测定，可用于观察疗效，判断是否复发及再感染，2、梅毒螺旋体特异性抗原血清试验：用活的或死的梅毒螺旋体或其成份来测抗螺旋体抗体，属于这一类的试验有荧光螺旋体吸收试验FTA-ABS;梅毒螺旋体血凝试验TPHA：这类试验的特异性强，可用作证实试验，但不能用作观察疗效，判断复发及再感染。
当感染梅毒后，人体内会产生两类抗体，类是直接针对梅毒螺旋体的抗体，另一类则是针对类脂质的抗体。
针对类脂质的抗体因不直接针对梅毒螺旋体，因此无特异性，除感染梅毒外，患另外一些疾病以及生理状况的改变，体内也可能产生低滴度的抗类脂质抗体。
诊断梅毒时，所做的梅毒血清学检查即检测这两类抗体。
前面提到的RPR试验，即为检测类脂质抗体的实验；而TPHA则为直接检测梅毒螺旋体的实验。
因RPR是检测类脂质抗体，而不是直接检测抗梅毒螺旋体抗体的实验，因而无特异性，凡能导致产生类脂质抗体的疾病，均能使RPR阳性。
除梅毒外，患上呼吸道感染、肺炎、活动性肺结核、风湿性心脏病、亚急性细菌性心内膜炎、传染性肝炎、肝硬化、慢性肾炎、钩端螺旋体病、麻风、疟疾、类风湿性关节炎、系统性红斑狼疮及海洛因成瘾等，都可导致RPR阳性。
梅毒以外其他原因造成的RPR阳性有一个特点，滴度一般较低，小于1：8。
RPR实验容易出现假阳性，医生常同时做特异性较强的TPHA实验来证实梅毒诊断。
值得一提的是，TPHA等直接针对梅毒螺旋体的特异性实验，在一般人中也有1%的假阳性。
国内曾报道某医院内科住院患者中，TPHA阳性者竟有一半是假阳性。
已知可造成TPHA阳性的疾病有：类风湿性关节炎、红斑狼疮、糖尿病、结肠癌、淋巴肉瘤、丙型肝炎、肝硬化、AIDS、麻风、生殖器疱疹、海洛因成瘾等。
除疾病外，某些生理状况的改变，如妊娠，也可导致RPR及TPHA阳性。
梅毒筛查(TRUST)实验操作规程
梅毒筛查(TRUST)实验操作规程
本文介绍了梅毒筛查（TRUST）实验的操作规程。
该实
验采用VDRL抗原重悬于含有特制甲苯胺红溶液中制成，可
用于检测血清或血浆中反应素，作为梅毒病人的诊断和疗效之参考。
操作步骤分为定性试验和定量试验两部分。
在定性试验中，需要铺加阳性和阴性对照以及待检血清或血浆，然后滴加TRUST试剂，摇动8分钟后观察结果。
在定量试验中，需要
将待检血清用生理盐水稀释后进行试验，以呈现明显凝集反应的最高稀释度作为该血清的凝集效价。
结果判断分为阳性反应、弱阳性反应和阴性反应。
阳性反应可见中等或较大的红色凝聚物，弱阳性反应可见较小的红色凝聚物，阴性反应可见均匀的抗原颗粒而无凝聚物。
在进行实验时需要注意事项，包括在23～29℃条件下进行、TRUST试剂使用前应充分摇匀、本试验系非特异性反应，
需结合临床进行综合分析，并必要时作梅毒螺旋体抗体特异性试验。
正常值为阴性。
该实验在临床上具有重要意义，可用于梅毒病人的诊断和疗效评估。
梅毒快速血浆反应素诊断试剂
梅毒快速血浆反应素诊断试剂Meidu Kuaisuxuejiangfanyingsu ZhenduanshijiSyphilis Rapid Plasma Reagin (RPR)本品系用性病实验室玻片试验（VDRL）抗原重悬于含有炭末的特制溶液中制成，检测人血清或血浆中的反应素，用于临床辅助诊断梅毒。
1 基本要求生产和检定用设施、原料及辅料、水、器具、动物等应符合“凡例”的有关要求。
2 制造2.1 专用原材料2.1.1 VDRL抗原及VDRL缓冲盐水应符合本品附录的规定。
2.1.2 再混悬液为含有乙二胺四乙酸二钠、氯化胆碱、炭末、防腐剂的磷酸盐缓冲液。
其中炭末直径应小于20μm。
2.1.3 纸卡白色纸卡上印制18mm直径圆圈若干个，纸卡表面光滑，不渗水，不起毛，不吸附蛋白质。
2.1.4 专用滴头或相应器材使用专用滴头或相应器材，每滴量应符合要求。
2.1.5阳性对照反应素检测应为阳性。
2.1.6阴性对照反应素检测应为阴性。
2.2 制备程序2.2.1 用VDRL缓冲盐水将VDRL抗原配成悬液。
2.2.2 离心弃去上清，沉淀物以“再混悬液”制成均匀的灰黑色混悬液。
2.2.3 阳性对照选用反应素检测为阳性的5份以上人血清或血浆混合。
经60℃加温1小时处理后，除菌过滤，于低温保存。
也可选用其它适宜的阳性对照。
2.2.4 阴性对照选用反应素检测为阴性的5份以上人血清或血浆混合。
经60℃加温1小时处理后，除菌过滤，于低温保存。
也可选用其它适宜的阴性对照。
2.3 半成品检定按3.1项进行。
2.4 成品2.4.1分批应符合“生物制品分批规程”规定。
2.4.2分装应符合“生物制品分装和冻干规程”，分装后保存于2~8℃。
2.4.3 规格应为经批准的规格。
2.4.4 包装应符合“生物制品包装规程”规定。
3 检定3.1 半成品检定3.1.1阳性参考品符合率用国家参考品或经国家参考品标化的参考品进行检定，应符合要求。
3.1.2 阴性参考品符合率用国家参考品或经国家参考品标化的参考品进行检定，应符合要求。
梅毒检测方法
梅毒检测方法梅毒是一种由梅毒螺旋体引起的性传播疾病，早期可能没有明显症状，但如果不及时治疗，可能会导致严重的并发症。
因此，及时进行梅毒的检测是非常重要的。
本文将介绍几种常见的梅毒检测方法，帮助大家更好地了解和预防梅毒。
一、血清学试验。
血清学试验是目前最常用的梅毒检测方法之一，包括非梅毒螺旋体试验（非梅试）和梅毒螺旋体试验（梅试）。
非梅试通常用于筛查，而梅试则用于确诊。
这两种试验都是通过检测患者血清中的抗梅毒螺旋体抗体来进行的。
虽然血清学试验的准确性较高，但有时也会出现假阳性或假阴性的情况，因此需要结合临床表现和其他检测方法来综合判断。
二、直接检测法。
直接检测法包括暗视野显微镜检查和聚合酶链反应（PCR）检测。
暗视野显微镜检查是通过在显微镜下观察患者的疹子或溃疡样病变，直接检测梅毒螺旋体的存在。
而PCR检测则是通过扩增患者体液中的梅毒螺旋体DNA片段来进行检测。
这两种方法都能够直接检测梅毒螺旋体的存在，准确性较高，但需要专业设备和技术支持。
三、快速血浆反应试验。
快速血浆反应试验（RPR）和螺旋体血浆试验（TPPA）是两种常用的快速梅毒检测方法。
RPR是一种非特异性试验，通过检测患者血浆中的非特异性抗体来进行初步筛查，如果结果阳性，则需要进行TPPA等特异性试验来确认。
TPPA是一种特异性试验，能够检测患者血浆中的梅毒螺旋体特异性抗体，用于确诊。
这两种试验都具有较高的敏感性和特异性，是常用的快速检测方法。
总结。
梅毒的检测方法多种多样，每种方法都有其特点和适用范围。
在进行梅毒检测时，应根据患者的临床表现和检测条件，选择合适的方法进行检测。
同时，应注意避免假阳性或假阴性的情况，可以结合多种方法进行综合判断。
希望本文能够帮助大家更好地了解梅毒的检测方法，及时发现并治疗梅毒，预防并发症的发生。
梅毒rpr试验实验报告
梅毒rpr试验实验报告实验目的：本次实验旨在通过梅毒快速血浆反应试验（Rapid Plasma Reagin, RPR）来检测血清中的梅毒螺旋体抗体，以评估个体是否感染了梅毒。
实验原理：RPR试验是一种用于检测梅毒的非特异性抗体的筛选试验。
该试验利用心磷脂作为抗原，与患者血清中的抗体结合，产生可见的凝集反应。
如果患者血清中含有抗梅毒螺旋体抗体，就会在测试中显示出阳性结果。
实验材料：1. 待测血清样本2. RPR试剂盒，包含心磷脂抗原和缓冲液3. 微量滴管4. 微量离心管5. 显微镜或凝集反应观察器实验步骤：1. 从冰箱中取出待测血清样本和RPR试剂，恢复至室温。
2. 将RPR试剂盒中的心磷脂抗原和缓冲液按照说明书比例混合均匀。
3. 使用微量滴管取待测血清样本，滴入微量离心管中。
4. 向含有血清的离心管中加入混合好的心磷脂抗原缓冲液。
5. 轻轻摇动离心管，使血清与抗原充分混合。
6. 放置离心管于显微镜或凝集反应观察器下，观察是否有凝集现象发生。
7. 根据观察结果，记录凝集滴度，判断血清样本的RPR试验结果。
实验结果：在本次实验中，我们观察了多个血清样本的RPR试验结果。
结果显示，部分样本出现了明显的凝集现象，表明这些样本中存在抗梅毒螺旋体抗体，可能为梅毒感染。
而其他样本则未出现凝集现象，RPR试验结果为阴性。
实验结论：RPR试验是一种快速、简便的梅毒筛查方法。
通过本次实验，我们能够对梅毒感染进行初步的判断。
然而，需要注意的是，RPR试验存在一定的假阳性和假阴性可能，因此，对于阳性结果，建议进一步进行特异性抗体检测，如梅毒螺旋体颗粒凝集试验（TPPA）或酶联免疫吸附试验（ELISA），以确认诊断。
实验建议：1. 对于RPR试验结果为阳性的样本，应进行进一步的确诊性检测。
2. 实验室操作过程中应注意避免交叉污染，确保实验结果的准确性。
3. 定期对实验设备进行校准和维护，保证实验的重复性和可靠性。
请注意，本实验报告为模拟内容，实际实验结果应根据具体样本和实验条件进行记录和分析。
梅毒血清初筛试验及其生物学假阳性反应
梅毒血清初筛试验及其生物学假阳性反应尹建奇河北省人民医院皮肤科，石家庄 050051人体感染梅毒螺旋体后，患者体内产生一种抗心磷脂的抗体，又称反应素。
在体外，用心磷脂(cardiolipin)作为抗原检测梅毒患者血清中的抗心磷脂的抗体，称为梅毒血清反应素试验，即梅毒血清初筛试验。
目前常用的梅毒血清初筛试验主要有性病研究实验室(venereal disease research laboratory , VDRL)试验、快速血浆反应素环状卡片试验(rapid plasma reagin circle card test , RPR)、不加热血清反应素试验（unheated serum reagin test ,USR）、甲苯胺红试验（tolulized red unheated serum test ,TRUST）。
由于它们所用的心磷脂抗原不是梅毒螺旋体本身或其菌体成分，所以也称为非梅毒螺旋体抗原血清试验。
梅毒血清初筛试验检测梅毒敏感性高，但在某些疾病状态下可发生假阳性。
梅毒治疗以后，梅毒血清反应素试验滴度下降，直至阴转，因而可以作为监测病情和观察疗效的指标。
1抗心磷脂抗体的概况1.1梅毒感染中抗心磷脂抗体的产生机理对于梅毒感染中抗心磷脂抗体的产生机理，目前尚不完全清楚[1]。
1942年，Mary从牛心组织中分离纯化出一种能与梅毒患者血清发生反应的抗原，证实这种抗原为一种带阴电荷的磷脂，因此将其命名为心磷脂。
心磷脂属于甘油磷脂，化学名为二磷脂酞甘油，是由2分子磷脂酸和1分子甘油结合而成，是脂质中唯一具有抗原性的磷脂。
心磷脂广泛存在于各种细胞线粒体内膜上。
长期以来，一直推测梅毒螺旋体感染后，造成宿主组织细胞的破坏，宿主细胞的线粒体膜释放出心磷脂，刺激机体产生抗心磷脂抗体[2]。
但并不知道这种抗原性心磷脂究竟来源于人体哪种或哪些组织和细胞。
近年来研究发现，梅毒螺旋体菌体细胞溶解物中含有大量心磷脂，菌体外膜中亦含有少量心磷脂，因此认为梅毒感染中的抗原心磷脂亦有可能是由梅毒螺旋体本身释放的[3]。
梅毒的检测方法区别
不加热血清反应素实验采用改良VDRL抗原，即将VDRL抗原用稀释液稀释后离心沉淀，于沉淀中加入EDTA、氯化胆碱和防腐剂。EDTA可使抗原在半年内不变性，氯化胆碱可灭活补体等，使用血清可不必加热灭活。抗原不必每天配制，在4—8℃冰箱中可保存半年。
1、玻片定性实验
+ + +∽+ + + +：肉眼可见大或较大的块状物。
玻片半定量实验玻片定性实验阳性［（+ +）以上］者做半定量实验，以进一步诊断。先将待检血清用0.9%氯化钠稀释成6个稀释度，即血清原液1：2、1：4、1：8、1：16、1：32，各取0.05ml稀释血清加在玻片的圆圈内，按定性实验方法操作和判定结果。
梅毒螺旋体制动试验( TPI)
梅毒螺旋体制动试验是第一个建立的螺旋体抗原血清试验。其原理是用接种于动物体内（家兔睾丸）的Nichol株螺旋体（活的）加患者血清（抗体）后，在补体的参与下可抑制螺旋体的活动。用暗视野显微镜进行观察，如≥50%螺旋体停止活动，则为阳性，20%～50%螺旋体停止活动，则为可疑，≤20%螺旋体停止活动则为阴性结果ห้องสมุดไป่ตู้
不加热血清反应素实验采用改良VDRL抗原，即将VDRL抗原用稀释液稀释后离心沉淀，于沉淀中加入EDTA、氯化胆碱和防腐剂。EDTA可使抗原在半年内不变性，氯化胆碱可灭活补体等，使用血清可不必加热灭活。抗原不必每天配制，在4—8℃冰箱中可保存半年。
1、玻片定性实验
（1）吸取待检血清（不必灭活）0.05ml，加于玻片的圆圈中，并分散到整个圆圈。用1ml注射器专用针头吸取抗原，每份待检标本上滴加1滴，摇动玻片4分钟，观察结果。
梅毒快速血浆反应素试验标准操作规程
梅毒快速血浆反应素试验标准操作规程1.测定原理：梅毒患者血清中存在着能与VDRL抗原发生凝集反应的反应素,本试剂利用这一原理，将VDRL抗原吸附于活性炭颗粒表面，当待测血清中存在反应素时，即与其发生凝集反应，出现肉眼可见的黑色凝块。
2.试剂盒主要组成：（I）RPR试剂（2）RPR阳性对照（3）RPR阴性对照（4）纸卡（5）专用滴管、针头3.样本要求：血清4.测定步骤（定型试验）4.1分别吸取50ulRPR阳性对照和阴性对照均匀铺加在纸卡的两个圆圈中。
4.2另吸取50ul待测血清均匀铺加在纸卡的另一圆圈中。
4.3用盒中的专用针头、滴管吸取RPR试齐I」，分别垂直滴加1滴于上述血清中。
5.4用RPR旋转仪水平转动纸卡8分钟，100转/分钟，然后3分钟内在光纤充足处判读结果。
5.结果判断5.1阴性反应（一）：可见均匀的抗原颗粒而无凝集物。
5.2弱阳性反应（+-++）：可见较小的黑色凝集物。
6.3阳性反应（+++-++++）：可见中等或较大的黑色凝块，溶液清亮。
7.注意事项7.1实验条件：23-29℃的环境下进行。
6.2待测血清和试剂盒需平衡至检定试验环境后使用，未使用完试剂按贮藏条件保存。
6.3RPR试剂在使用前应充分摇匀。
6.4血清中加入试剂后充分振荡使其混匀。
6.5定性实验呈弱阳性或阳性者必须做定量试验才能了解患者血清中的抗体滴度，具体方法如下：将待测血清用生理盐水作倍比稀释（原血清、1：2、1：4、1：8、1：16、1：32）,然后对每个稀释度的血清按定型试验方法再进行测定并判断结果。
6.6定性试验呈弱阳性或阳性反应者，需结合临床进行综合分析判断，同时再做特异性密螺旋体试验加以确诊。
因为本试验是梅毒非特异性反应素试验，麻风患者可出现生物学假阳性反应。
6.7试剂盒中的专用滴管、针头只能用来吸取RPR试剂，不能用来吸取血清或作他用。
6.8本试剂盒应视为有传染性物质，请按传染病实验室检查规程来处理。
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快速梅毒血清反应素试验
梅毒是一种慢性的、系统性的、有着传播性的疾病，主要是通过性传染。
梅毒近几年在我国的发展十分的迅速，也是在有报告的病例中，较普遍的疾病。
那么，怎么进行快速梅毒血清反应素试验的呢？
梅毒血清试验分为以下两大类，非梅毒螺旋体抗原血清试验，梅毒螺旋体抗原血清试验。
非梅毒螺旋体抗原血清试验，主要是用心磷脂作抗原，测定血清中抗心磷脂抗体，亦称反应素。
这个试验敏感性高而特异性较低，且易发生生物学假阳性。
早期梅毒患者经充分治疗后，反应素可以消失，早期未经治疗者到晚期，部分病人中反应素也可以减少或消失。
目前一般这个试验作为筛选和定量试验，观察疗效，复发及再感染。
梅毒螺旋体抗原血清试验，主要用活的或死的梅毒螺旋体或其成分来作抗原测定抗螺旋体抗体。
这种试验敏感性和特异性均高，一般用作证实试验。
这种试验是检测血清中抗梅毒螺旋体IgG抗体，即使病人经过足够治疗，仍能长期存在，甚至终身不消失，血清反应仍持续存在阳性，一般不用于观察疗效。
性接触是梅毒的主要传播途径，感染梅毒的早期传染性最强。
随着病期的延长传染性越来越小感染后4年以上性接触的传染性十分微弱。
患有梅毒的孕妇可通过胎盘传染给胎儿，引起胎儿宫内感染，可导致流产、早产、死胎或分娩胎传梅毒儿。
所以梅毒病人如想要怀孕，最好可以详细咨询医师，权衡利弊之后，在医师的建议下做决定。
简而言之，梅毒可能会引发脊髓痨，麻痹性痴呆，视神经萎缩等疾病，容易损害骨骼系统和危害心血管，所以一旦确诊患上梅毒的病人，应及时进行治疗，以免耽误了最佳的治疗时间。