热空气处理对靖安椪柑幼果柠檬酸代谢的影响

江西农业大学学报㊀２０１８，４０（２）：３１６－３２２ｈｔｔｐ：／／ｘｕｅｂａｏ．ｊｘａｕ．ｅｄｕ．ｃｎＡｃｔａＡｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｅＵｎｉｖｅｒｓｉｔａｔｉｓＪｉａｎｇｘｉｅｎｓｉｓＤＯＩ：１０．１３８３６／ｊ．ｊｊａｕ．２０１８０４１高阳，陈明，杨滢滢，等．热空气处理对靖安椪柑幼果柠檬酸代谢的影响［Ｊ］．江西农业大学学报，２０１８，４０（２）：３１６－３２２．热空气处理对靖安椪柑幼果柠檬酸代谢的影响高㊀阳１，陈㊀明１，杨滢滢１，阚超楠１，陈楚英１，刘善军１，陈金印１，２∗（１．江西农业大学农学院／江西省果蔬采后处理关键技术与质量安全协同创新中心／江西省果蔬保鲜与无损检测重点实验室，江西南昌３３００４５；２．萍乡学院，江西萍乡３３７０５５）摘要：为探究柑橘果实柠檬酸的降解机制，以盛花后１２０ｄ的靖安椪柑果实为材料，研究了４０ħ热空气处理４８ｈ对椪柑果实有机酸含量变化及柠檬酸代谢相关基因表达的影响㊂结果表明：靖安椪柑幼果有机酸以柠檬酸为主，热处理能显著促进果实柠檬酸含量的下降㊂同时，热处理诱导ＣｉｔＣＳ１和ＣｉｔＣＳ２基因表达上调，其中ＣｉｔＣＳ１表达与对照达显著性差异水平；热处理后ＣｉｔＡｃｏｓ基因家族成员表达量均得到促进，ＣｉｔＩＤＨ２被短暂诱导表达，热处理对ＣｉｔＩＤＨ３基因表达也有促进作用；热处理还能显著促进ＣｉｔＧＡＤ４和ＣｉｔＧＡＤ５两个基因表达，但对ＣｉｔＧＳ基因表达无显著性影响㊂以上结果说明，热空气处理能促进靖安椪柑幼果中柠檬酸的降解，使果实有机酸含量下降，这种变化和柠檬酸代谢相关基因表达密切相关，其中ＣｉｔＡｃｏｓ㊁ＣｉｔＩＤＨ１／３和ＣｉｔＧＡＤ４基因表达上调可能是导致果实有机酸下降的主要原因㊂关键词：热空气处理；靖安椪柑；柠檬酸；基因表达中图分类号：Ｓ６６６．１㊀㊀文献标志码：Ａ㊀㊀文章编号：１０００－２２８６（２０１８）０２－０３１６－０７ＥｆｆｅｃｔｓｏｆＨｏｔＡｉｒＴｒｅａｔｍｅｎｔｏｎＣｉｔｒｉｃＡｃｉｄＭｅｔａｂｏｌｉｓｍＩｎＪｉｎｇ ａｎＰｏｎｋａｎＦｒｕｉｔｌｅｔＧＡＯＹａｎｇ１，ＣＨＥＮＭｉｎｇ１，ＹＡＮＧＹｉｎｇ⁃ｙｉｎｇ１，ＫＡＮＣｈａｏ⁃ｎａｎ１，ＣＨＥＮＣｈｕ⁃ｙｉｎｇ１，ＬＩＵＳｈａｎ⁃ｊｕｎ１，ＣＨＥＮＪｉｎ⁃ｙｉｎ１，２∗（１．ＣｏｌｌａｂｏｒａｔｉｖｅＩｎｎｏｖａｔｉｏｎＣｅｎｔｅｒｏｆＰｏｓｔ⁃ｈａｒｖｅｓｔＫｅｙＴｅｃｈｎｏｌｏｇｙａｎｄＱｕａｌｉｔｙＳａｆｅｔｙｏｆＦｒｕｉｔｓａｎｄＶｅｇｅ⁃ｔａｂｌｅｓｉｎＪｉａｎｇｘｉＰｒｏｖｉｎｃｅ，ＪｉａｎｇｘｉＫｅｙＬａｂｏｒａｔｏｒｙｆｏｒＰｏｓｔｈａｒｖｅｓｔＴｅｃｈｎｏｌｏｇｙａｎｄＮｏｎ⁃ｄｅｓｔｒｕｃｔｉｖｅＴｅｓｔｉｎｇｏｆＦｒｕｉｔｓ＆Ｖｅｇｅｔａｂｌｅ，ＣｏｌｌｅｇｅｏｆＡｇｒｏｎｏｍｙ，ＪｉａｎｇｘｉＡｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｎａｎｃｈａｎｇ３３００４５，Ｃｈｉｎａ；２．Ｐｉｎｇｘ⁃ｉａｎｇＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｐｉｎｇｘｉａｎｇ，Ｊｉａｎｇｘｉ３３７０５５，Ｃｈｉｎａ）Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｔｏｅｘｐｌｏｒｅｔｈｅｄｅｃｏｍｐｏｓｉｔｉｏｎｍｅｃｈａｎｉｓｍｏｆｃｉｔｒｉｃａｃｉｄｉｎｃｉｔｒｕｓｆｒｕｉｔ，Ｊｉｎｇ ａｎｐｏｎｋａｎｆｒｕｉｔｌｅｔｗｅｒｅｕｓｅｄｔｏｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｅｔｈｅｅｆｆｅｃｔｓｏｆｈｏｔａｉｒ（４０ħ，４８ｈ）ｔｒｅａｔｍｅｎｔ（ＨＡＴ）ｏｎｏｒｇａｎｉｃａｃｉｄｃｏｎｔｅｎｔａｎｄｃｉｔｒｉｃａｃｉｄｍｅｔａｂｏｌｉｓｍ⁃ｒｅｌａｔｅｄｇｅｎｅｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ．ＴｈｅｒｅｓｕｌｔｓｓｈｏｗｅｄｔｈａｔｃｉｔｒｉｃａｃｉｄｗａｓｔｈｅｍａｉｎｏｒｇａｎｉｃａｃｉｄｉｎＪｉｎｇ ａｎｐｏｎｋａｎｆｒｕｉｔｌｅｔ，ａｎｄｄｅｃｒｅａｓｅｄｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙｆａｓｔｅｒｉｎＨＡＴｆｒｕｉｔｓｔｈａｎｉｎｔｈｅｃｏｎｔｒｏｌ．ＭｅａｎｗｈｉｌｅＨＡＴｃｏｕｌｄｉｎｄｕｃｅ㊀㊀收稿日期：２０１７⁃０８⁃０７㊀㊀修回日期：２０１７⁃１１⁃１０基金项目：国家自然科学基金项目（３１３６０４６６）㊁江西省青年自然科学基金项目（２０１２２ＢＡＢ２１４０２４）和江西省教育厅项目（ＧＪＪ１２２２３）ＰｒｏｊｅｃｔｓｕｐｐｏｒｔｅｄｂｙｔｈｅＮａｔｉｏｎａｌＮａｔｕｒａｌＳｃｉｅｎｃｅＦｏｕｎｄａｔｉｏｎｏｆＣｈｉｎａ（３１３６０４６６），ＪｉａｎｇｘｉＰｒｏｖｉｎｃｅＹｏｕｔｈＳｃｉ⁃ｅｎｃｅＦｏｕｎｄａｔｉｏｎ（２０１２２ＢＡＢ２１４０２４）ａｎｄＪｉａｎｇｘｉＰｒｏｖｉｎｃｉａｌＤｅｐａｒｔｍｅｎｔｏｆＥｄｕｃａｔｉｏｎＰｒｏｊｅｃｔ（ＧＪＪ１２２２３）作者简介：高阳（１９９０ ），男，博士，主要从事果蔬采后生理研究，１１７３７８５８３６＠ｑｑ．ｃｏｍ；∗通信作者：陈金印，教授，博士生导师，ｊｉｎｙｉｎｇｃｈｅｎ＠１２６．ｃｏｍ㊂㊃７１３㊃第２期高阳等：热空气处理对靖安椪柑幼果柠檬酸代谢的影响ｔｈｅｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｏｆＣｉｔＣＳ１ａｎｄＣｉｔＣＳ２，ｗｈｉｃｈｈａｄｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙｄｉｆｆｅｒｅｎｔｌｅｖｅｌｓｉｎＣｉｔＣＳ１ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｓ．Ｔｈｅｅｘｐｒｅｓ⁃ｓｉｏｎｌｅｖｅｌｓｏｆＣｉｔＡｃｏｓｗｅｒｅａｌｓｏｐｒｏｍｏｔｅｄｂｙＨＡＴ．ＨＡＴｃｏｕｌｄｉｎｄｕｃｅｔｅｍｐｏｒａｒｙＣｉｔＩＤＨ２ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎａｎｄｐｒｏｍｏ⁃ｔｅｄｔｈｅｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｏｆＣｉｔＩＤＨ３．Ｉｎａｄｄｉｔｉｏｎ，ＨＡＴａｌｓｏｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙｕｐ⁃ｒｅｇｕｌａｔｅｄＣｉｔＧＡＤ４ａｎｄＣｉｔＧＡＤ５ｅｘｐｒｅｓ⁃ｓｉｏｎ，ｂｕｔｈａｄｎｏｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｅｆｆｅｃｔｏｎＣｉｔＧＳ．ＴｈｅｓｅｒｅｓｕｌｔｓｓｕｇｇｅｓｔｅｄｔｈａｔＨＡＴｃｏｕｌｄｐｒｏｍｏｔｅｔｈｅｄｅｇｒａｄａｔｉｏｎｏｆｃｉｔｒｉｃａｃｉｄｉｎＪｉｎｇ ａｎｐｏｎｋａｎｆｒｕｉｔｌｅｔ，ｔｈｅｎｔｈｅｏｒｇａｎｉｃａｃｉｄｃｏｎｔｅｎｔｓｄｅｃｒｅａｓｅｄ，ｗｈｉｃｈｗａｓｇｕｉｄｅｄｂｙｔｈｅｃｈａｎ⁃ｇｅｓｏｆｃｉｔｒｉｃａｃｉｄｍｅｔａｂｏｌｉｓｍ⁃ｒｅｌａｔｅｄｇｅｎｅｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ，ａｎｄｔｈｅｕｐ⁃ｒｅｇｕｌａｔｉｏｎｏｆＣｉｔＡｃｏ１，ＣｉｔＩＤＨ１，ＣｉｔＩＤＨ３ａｎｄＣｉｔＧＡＤ４ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｍａｙｂｅｔｈｅｍａｊｏｒｃａｕｓｅｏｆｏｒｇａｎｉｃａｃｉｄｄｅｃｌｉｎｅｉｎＪｉｎｇ ａｎｐｏｎｋａｎｆｒｕｉｔｄｕｒｉｎｇｍａｔｕｒａｔｉｏｎ．Ｋｅｙｗｏｒｄｓ：ｈｏｔａｉｒｔｒｅａｔｍｅｎｔ；Ｊｉｎｇ ａｎｐｏｎｋａｎ；ｃｉｔｒｉｃａｃｉｄ；ｇｅｎｅｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ柑橘是世界上最重要的商品水果，是我国南方栽培面积最广的果树，它包括的种类很多，主要栽培的有甜橙㊁宽皮柑橘㊁柚㊁金橘和柠檬等，而每一种类又有许多优良品种㊂靖安椪柑（ＣｉｔｒｕｓｒｅｔｉｃｕｌａｔａＢｌａｎｃｏｃｖ．Ｐｏｎｋａｎ）是颇具特色的江西地方品种，有 远东橘王 之称，具有果形美㊁色泽艳㊁肉脆和耐贮藏等优点，但存在果实偏酸等问题［１⁃２］㊂柑橘果实有机酸以柠檬酸为主，柠檬酸代谢是生物体内重要的代谢途径，它是果实品质研究的一个热点［３］㊂近年来，大多数研究表明，柑橘果实柠檬酸积累水平与合成无直接相关，而受降解速率的调控，肖玉明等［４］研究表明干旱胁迫下温州蜜柑果实柠檬酸大量积累，造成其主要原因是柠檬酸降解酶基因ＣｉｔＩＤＨ与ＣｉｔＮＡＤＰＩＤＨ表达量下调㊂ＧＡＢＡ途径是果实柠檬酸降解重要环节［５］，Ｃｅｒｃóｓ等［６］利用柑橘ＥＳＴ数据，通过基因芯片对柑橘果实发育和成熟阶段的７０００个基因的表达变化进行了研究，提出了柑橘果实成熟期间柠檬酸代谢和利用的一条新途径（ＧＡＢＡ途径）：柠檬酸先降解成异柠檬酸，再生成２－酮戊二酸和谷氨酸；谷氨酸经谷氨酸脱羧酶（ＧＡＤ）的催化生成γ－氨基丁酸（ＧＡＢＡ），ＧＡＢＡ在相关酶的作用下生后生成半醛琥珀酸和琥珀酸［７］，该条途径在柠檬酸的降解过程中起着重要作用㊂热处理可以有效地促进果实有机酸含量的下降，Ｗａｎｇ［８］研究表明 Ｎｏｒｔｈｅａｓｔｅｒ 草莓４５ħ热处理４０ｍｉｎ或４２ħ热处理６０ １００ｍｉｎ后可滴定酸含量明显降低，且柠檬酸和苹果酸含量均减少㊂红富士苹果［９］和新余蜜橘［１０］经热空气处理后在可滴定酸含量显著降低㊂同时也有研究发现，热处理能显著降低椪柑贮藏期间有机酸的含量，增加可溶性糖的积累［１１］㊂为更好地探索柑橘果实柠檬酸的降解机制，本文以含酸量较高的靖安椪柑幼果（盛花后１２０ｄ）［１２］为试验材料，研究了热空气处理对靖安椪柑果实柠檬酸代谢相关基因表达的影响，以期为提高椪柑果实品质方法的制定提供理论依据㊂１㊀材料与方法１．１㊀试验材料靖安椪柑果实于２０１４年９月１０日（盛花后１２０ｄ）采自江西省靖安县果业局果园㊂果实成熟度和大小一致，采摘后立即运回江西省果蔬保鲜与无损检测重点实验室㊂将采摘的果实分为２组：对照组果实不作处理，处理组果实在培养箱［（４０ʃ０．５）ħ㊁９０％ ９５％ＲＨ］中热空气处理４８ｈ，处理果和对照果采用单果塑料薄膜包装，于温度保鲜柜［（１０ʃ１）ħ㊁８５％ ９０％ＲＨ］中进行低温贮藏㊂每１０ｄ取一次样测定相关指标，每个处理每次取样１０个果，３次重复㊂１．２㊀测定指标及方法１．２．１㊀可滴定酸（ＴＡ）含量测定㊀采用酸碱中和滴定法测定，结果以柠檬酸的量换算㊂１．２．２㊀有机酸含量的提取与测定㊀果实有机酸含量的提取参照Ｃｈｅｎ等［１３］的方法，采用高效液相色谱法（ＨＰＬＣ）测定其含量㊂有机酸测定的色谱条件为：Ｃ１８柱（４．６ｍｍˑ２５０ｍｍ），柱温为２５ħ；流动相为５０ｍｍｏｌ／Ｌ磷酸氢二氨（ｐＨ＝２．７），流速为０．５ｍＬ／ｍｉｎ；二极管阵列检测器检测㊂１．２．３㊀ＲＮＡ的提取与逆转录㊀ＲＮＡ的提取采用ＣＴＡＢ法进行㊂提取的ＲＮＡ用琼脂糖凝胶电泳法进行检测㊂ＲＮＡ逆转录采用ＴａＫａＲａ公司的反转录试剂盒，制备ｃＤＮＡ用于荧光定量分析㊂１．２．４㊀荧光定量ＰＣＲ㊀使用Ｂｉｏ⁃ＲＡＤ荧光定量ＰＣＲ仪（ＣＦＸ９６ＴＭＲｅａｌ⁃ＴｉｍｅＳｙｓｔｅｍ），美国ＴａＫａＲａ公司的ＳＹＢＲＰｒｅｍｉｎｘＥｘＴａｑＴＭ进行Ｑ⁃ＰＣＲ基因定量表达分析㊂内参基因与柠檬酸相关基因引物设计参照㊀江西农业大学学报第４０卷陈明［１３］的设计，引物序列由华大科技公司合成㊂ＰＣＲ反应体系为２５μＬ：ｄｄＨ２Ｏ９．５μＬ，上㊁下游引物各０．５μＬ，ＳＹＢＲ（ＴａＫａＲａ，日本）１２．５μＬ，ｃＤＮＡ２μＬ㊂反应程序为：９５．０ħ的预变性３０ｓ，４０个循环的９５ħ５ｓ，６０ħ３０ｓ；溶解曲线：６０ħ保温３０ｓ，９５ħ保温３０ｓ㊂１．３㊀数据统计与分析试验采用完全随机设计，使用Ｅｘｃｅｌ２００３进行数据统计和ＧｒａｐｈＰａｄＰｒｉｓｍ５Ｄｅｍｏ作图，用ＤＰＳ７．０软件中Ｄｕｎｃａｎ ｓ新复极差法进行显著性差异分析（Ｐ＜０．０５）㊂２㊀结果与分析２．１㊀热空气处理对靖安椪柑果实有机酸和可滴定酸含量变化的影响靖安椪柑果实有机酸以柠檬酸为主，随贮藏时间延长，柠檬酸含量呈不断下降趋势（图１Ａ），但热空气处理显著促进了柠檬酸的降解，热处理４８ｈ后果实柠檬酸含量为３３．４４ｍｇ／ｇ，显著低于对照果实的３５．１４ｍｇ／ｇ，热空气处理和对照果实柠檬酸含量在贮藏第６０天时分别为２８．９８ｍｇ／ｇ和３２．３８ｍｇ／ｇ㊂奎宁酸和酒石酸含量在贮藏期间均呈先升后降的趋势（图１Ｂ㊁Ｃ），热空气处理果实的酒石酸含量在贮藏第２天时为０．９０ｍｇ／ｇ，而对照为０．６４ｍｇ／ｇ，两者差异显著；热空气处理果实的奎宁酸含量在贮藏第２天时达到最大值７．９８ｍｇ／ｇ，而对照在贮藏第１０天时才达到最大值８．２２ｍｇ／ｇ㊂靖安椪柑果实苹果酸含量很低（图１Ｄ），在整个贮藏期间均低于０．０５３ｍｇ／ｇ，且两个处理间差异不显著㊂靖安椪柑果实总有机酸和可滴定酸含量变化整体和柠檬酸类似（图１Ｅ㊁Ｆ），均呈整体下降的趋势，从贮藏第２天到第６０天热空气处理果实的总有机酸和可滴定酸含量均低于对照㊂综合分析可知，热空气处理能显著促进靖安椪柑果实有机酸含量的下降，且以降低柠檬酸为主㊂图１㊀热空气处理对靖安椪柑果实有机酸和可滴定酸含量的影响Ｆｉｇ．１㊀ＥｆｆｅｃｔｓｏｆｈｏｔａｉｒｔｒｅａｔｍｅｎｔｏｎｔｈｅｃｏｎｔｅｎｔｏｆｏｒｇａｎｉｃａｃｉｄｓａｎｄＴＡｉｎＪｉｎｇａｎｐｏｎｋａｎｆｒｕｉｔｓ㊃８１３㊃第２期高阳等：热空气处理对靖安椪柑幼果柠檬酸代谢的影响２．２　热空气处理对靖安椪柑果实柠檬酸代谢相关基因表达的影响２．２．１㊀热空气处理对果实ＣｉｔＣＳｓ表达量的影响㊀柑橘果实柠檬酸的合成与柠檬酸合成酶（ＣＳ）密切相关，在柑橘基因组中有２个ＣＳ基因家族成员，分别为ＣｉｔＣＳ１和ＣｉｔＣＳ２㊂从图２可以看出，靖安椪柑果实的ＣｉｔＣＳ１表达经过热空气处理４８ｈ后显著高于对照，且在整个贮藏期间保持较高水平㊂ＣｉｔＣＳ２表达在贮藏期间呈先升后降的趋势，热空气处理诱导ＣｉｔＣＳ２表达在贮藏前期略高于对照，但从贮藏第４０天开始热处理果实一直低于对照㊂图２㊀热处理对靖安椪柑果实ＣｉｔＣＳｓ表达量的影响Ｆｉｇ．２㊀ＥｆｆｅｃｔｓｏｆｈｏｔａｉｒｔｒｅａｔｍｅｎｔｏｎｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｓｏｆＣｉｔＣＳｓｉｎＪｉｎｇａｎｐｏｎｋａｎｆｒｕｉｔｓ２．２．２㊀热空气处理对果实ＣｉｔＡｃｏｓ表达量的影响㊀顺乌头酸酶（Ａｃｏ）将柠檬酸催化分解为异柠檬酸㊂柑橘Ａｃｏ基因包括ＣｉｔＡｃｏ１㊁ＣｉｔＡｃｏ２和ＣｉｔＡｃｏ３３个家族成员㊂由图３可知，靖安椪柑果实ＣｉｔＡｃｏ１表达量随柠檬酸含量的下降呈上升的趋势，热空气处理后从第１０天开始果实ＣｉｔＡｃｏ１表达量显著高于对照，在贮藏第６０天时，热空气处理果实ＣｉｔＡｃｏ１表达量是对照的２．０７倍㊂ＣｉｔＡｃｏ２表达是呈先上升后下降的趋势，热空气处理果实在贮藏第２０天时到达最大，对照在第１０天表达量达到最大，但热空气处理后的整个贮藏期间ＣｉｔＡｃｏ２表达量均高于对照㊂靖安椪柑果实ＣｉｔＡｃｏ３表达并不稳定，热空气处理仅诱导贮藏前期ＣｉｔＡｃｏ３表达，尤其是处理２ｄ后急剧增加，为对照的３．１８倍㊂图３㊀热空气处理对靖安椪柑果实ＣｉｔＡｃｏｓ表达量的影响Ｆｉｇ．３㊀ＥｆｆｅｃｔｓｏｆｈｏｔａｉｒｔｒｅａｔｍｅｎｔｏｎｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｓｏｆＣｉｔＡｃｏｓｉｎＪｉｎｇａｎｐｏｎｋａｎｆｒｕｉｔｓ２．２．３㊀热空气处理对果实ＣｉｔＩＤＨｓ表达量的影响㊀异柠檬酸脱氢酶（ＩＤＨ）参与柠檬酸的降解，它将异柠檬酸降解为２⁃酮戊二酸㊂由图４可知，靖安椪柑果实ＣｉｔＩＤＨ１表达量随贮藏时间的增加总体呈递增的趋势，热空气处理果实ＣｉｔＩＤＨ１表达量在贮藏第１０天显著高于对照㊂热空气处理４８ｈ后果实ＣｉｔＩ⁃ＤＨ２表达量急剧上升，达到了对照的２．９８倍，之后其表达量迅速回落，这说明热空气处理能短暂诱导ＣｉｔＩＤＨ２的表达㊂靖安椪柑果实ＣｉｔＩＤＨ３表达在贮藏期间整体呈上升的趋势，在贮藏第１０天时，热空气处理果实ＣｉｔＩＤＨ３表达量显著高于对照，且之后一直高于对照㊂２．２．４㊀热空气处理对果实ＣｉｔＧＡＤｓ和ＣｉｔＧＳｓ表达量的影响㊀谷氨酸一方面可以在谷氨酸脱氢酶（ＧＡＤ）的作用下进入ＧＡＢＡ循环，另一方面它还可以在谷氨酰胺合成酶（ＧＳ）作用下催化生成谷氨酰胺进入氨基酸代谢㊂从图５可以看出，ＣｉｔＧＡＤ４表达量在整个贮藏期间呈先升后降的趋势，对照果实在贮藏第３０天达到最大值，热空气处理果实ＣｉｔＧＡＤ４表达量在贮藏第２天急剧上升，达到了对照的１．９８倍，且一直保持较高水平㊂而靖安椪柑果实ＣｉｔＧＡＤ５表达量在整个贮藏期间都较低水平，在贮藏第２㊁１０和３０天时热空气处理果实ＣｉｔＧＡＤ５表达量显著高于对照㊂靖安椪柑果实ＣｉｔＧＳ２表达量在各贮藏期间比较稳㊃９１３㊃㊀江西农业大学学报第４０卷定，热空气处理和对照之间无显著性差异㊂图４㊀热空气处理对靖安椪柑果实ＣｉｔＩＤＨｓ基因表达量的影响Ｆｉｇ．４㊀ＥｆｆｅｃｔｓｏｆｈｏｔａｉｒｔｒｅａｔｍｅｎｔｏｎｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｓｏｆＣｉｔＩＤＨｓｉｎＪｉｎｇａｎｐｏｎｋａｎｆｒｕｉｔｓ图５㊀热空气处理对靖安椪柑果实ＣｉｔＧＡＤｓ和ＣｉｔＧＳ表达量的影响Ｆｉｇ．５㊀ＥｆｆｅｃｔｓｏｆｈｏｔａｉｒｔｒｅａｔｍｅｎｔｏｎｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｓｏｆＣｉｔＧＡＤｓａｎｄＣｉｔＧＳｉｎＪｉｎｇａｎｐｏｎｋａｎｆｒｕｉｔｓ３　讨论与结论㊀㊀采后热空气处理对果实品质有显著影响，其结果因品种不同而存在差异㊂杜正顺等［１４］用４０ħ热空气处理 丰香 草莓３０ｍｉｎ可以明显抑制贮藏期间果实花青素的积累，延缓果实可溶性固形物㊁可滴定酸含量和硬度下降，保持果实的贮藏品质㊂Ｌａｒａ等［１５］研究表明，热处理能让Ｄｉｘｉｌａｎｄ桃柠檬酸和苹果酸含量分别降低５０％和２０％㊂关于柑橘果实热处理的研究已有报道，李绍佳［１６］和陈明［１７］研究表明４０ħ热空气处理４８ｈ能有效降低椪柑果实有机酸含量，提高果实品质㊂本研究结果表明，热空气处理能显著加速靖安椪柑幼果柠檬酸含量的下降，从而降低有机酸含量，在贮藏后６０ｄ热处理果实柠檬酸含量比对照低１．７０ｍｇ／ｇ，这与课题组之前的研究结果［１１］一致㊂ＣＳ广泛存在于果实细胞中，是柠檬酸合成的关键酶［１８］㊂张规富［１９］发现不同时期的水分胁迫均能促进发育阶段柑橘果实ＣｉｔＣＳ１和ＣｉｔＣＳ２的表达上调，这可能是导致果实有机酸积累原因之一㊂本试验结果显示，热空气处理诱导靖安椪柑果实ＣｉｔＣＳ１和ＣｉｔＣＳ２表达，但同时促进果实柠檬酸含量降低，说明热空气处理可能通过加速柠檬酸的降解来促进靖安椪柑果实有机酸含量的下降，这与前人［１１］的研究结果一致㊂大量研究表明，柠檬酸的降解与Ａｃｏ密切相关，Ｊｉａｎｇ等［２０］发现地表覆膜后椪柑果实Ａｃｏ活性显著降低，柠檬酸含量显著增加㊂在番茄中当ＳｌＡｃｏ３ａ和ＳｌＡｃｏ３ｂ受抑制时，Ａｃｏ活性及其转录水平均下降，成熟果实柠檬酸含量增加㊂本试验结果表明（４０ʃ０．５）ħ热空气处理后，靖安椪柑果实基因ＣｉｔＡｃｏ１㊁ＣｉｔＡｃｏ２表达量在整个贮藏期均上调，ＣｉｔＡｃｏ３表达量在热空气处理２ｄ后急剧增加，推测热空气处理诱导ＣｉｔＡｃｏ１㊁ＣｉｔＡｃｏ２表达可能是幼果期靖安椪柑果实有机酸含量下降的原因之一㊂ＩＤＨ在果实有ＮＡＤＰ⁃ＩＤＨ和ＮＡＤ⁃ＩＤＨ两种存在形式，催化异柠檬酸降解为２⁃酮戊二酸［２１］㊂热空气处理诱导靖安椪柑果实ＣｉｔＩＤＨ１和ＣｉｔＩＤＨ３表达，短暂诱导ＣｉｔＩＤＨ２的表达，导致柠檬酸进一步降解㊂ＧＡＢＡ途径是近来年认为是柠檬酸降解的一个重要途径，Ａｐｒｉｌｅ等［２２］研究发现ＧＡＢＡ途径中ＧＡＤ和氨基酸合成相关酶基因在甜柠檬中呈高表达，认为其参与了柠檬酸降解㊂ＬＩＵ等［２３］研究发现注射脱落酸和硫酸钾叶面喷施能显著增加温州蜜柑ＴＡ含量，并显著降低ＧＡＤ活性以及ＣｓＧＡＤ１转录，进一步表明ＣｓＧＡＤ１在柑橘果实的柠檬酸降解利用中的重要作用㊂本试验研究发现，热空气处理后，靖安椪柑㊃０２３㊃㊃１２３㊃第２期高阳等：热空气处理对靖安椪柑幼果柠檬酸代谢的影响果实ＣｉｔＧＡＤ４表达量在贮藏第２天急剧上升，且一直保持较高水平，而在整个贮藏期间ＣｉｔＧＡＤ５表达量都较低，且ＣｉｔＧＳ２基因的表达量在整个贮藏期间比较稳定，热空气处理和对照之间无显著性差异㊂由此推测热空气处理诱导ＣｉｔＧＡＤ４表达激活ＧＡＢＡ途径从而促进柠檬酸降解㊂综合以上结果可以得出，热空气处理能促进靖安椪柑幼果柠檬酸的降解，使得果实有机酸含量下降，这种变化和柠檬酸代谢相关基因表达密切相关，其中ＣｉｔＡｃｏｓ㊁ＣｉｔＩＤＨ１／３和ＣｉｔＧＡＤ４表达上调可能是导致果实有机酸下降的主要原因㊂参考文献：［１］罗章．靖安椪柑：远东橘王［Ｊ］．质量探索，２０１１，８（６）：４３．ＬｕｏＺ．Ｊｉｎｇ ａｎｐｏｎｋａｎ：ｆａｒｅａｓｔｏｒａｎｇｅｋｉｎｇ［Ｊ］．ＱｕａｌｉｔｙＥｘｐｌｏｒａｔｉｏｎ，２０１１，８（６）：４３．［２］ＬｉｎＱ，ＷａｎｇＣ，ＤｏｎｇＷ，ｅｔａｌ．ＴｒａｎｓｃｒｉｐｔｏｍｅａｎｄｍｅｔａｂｏｌｏｍｅａｎａｌｙｓｅｓｏｆｓｕｇａｒａｎｄｏｒｇａｎｉｃａｃｉｄｍｅｔａｂｏｌｉｓｍｉｎＰｏｎｋａｎ（Ｃｉｔｒｕｓｒｅｔｉｃｕｌａｔａ）ｆｒｕｉｔｄｕｒｉｎｇｆｒｕｉｔｍａｔｕｒａｔｉｏｎ［Ｊ］．Ｇｅｎｅ，２０１５，５５４（１）：６４⁃７４．［３］ＣｈｅｎＬＳ，ＴａｎｇＮ，ＪｉａｎｇＨＸ，ｅｔａｌ．ＣｈａｎｇｅｓｉｎｏｒｇａｎｉｃａｃｉｄｍｅｔａｂｏｌｉｓｍｄｉｆｆｅｒｂｅｔｗｅｅｎｒｏｏｔｓａｎｄｌｅａｖｅｓｏｆＣｉｔｒｕｓｇｒａｎｄｉｓｉｎｒｅｓｐｏｎｓｅｔｏｐｈｏｓｐｈｏｒｕｓａｎｄａｌｕｍｉｎｕｍｉｎｔｅｒａｃｔｉｏｎｓ［Ｊ］．ＪｏｕｒｎａｌｏｆＰｌａｎｔＰｈｙｓｉｏｌｏｇｙ，２００９，１６６（１８）：２０２３⁃２０３４．［４］肖玉明，卢晓鹏，黄成能，等．水分胁迫对温州蜜柑果实品质及柠檬酸代谢相关基因表达的影响［Ｊ］．湖南农业大学学报（自然科学版），２０１４，４０（３）：２８１⁃２８７．ＸｉａｏＹＭ，ＬｕＸＰ，ＨｕａｎｇＣＮ，ｅｔａｌ．Ｅｆｆｅｃｔｓｏｆｗａｔｅｒｓｔｒｅｓｓｏｎｔｈｅｆｒｕｉｔｑｕａｌｉｔｙｏｆｃｉｔｒａｔｅａｎｄｔｈｅｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｏｆｇｅｎｅｓｒｅｌａｔｅｄｔｏｍｅｔａｂｏｌｉｓｍｏｆｃｉｔｒｉｃａｃｉｄ［Ｊ］．ＪｏｕｒｎａｌｏｆＨｕｎａｎＡｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ（ＮａｔｕｒａｌＳｃｉｅｎｃｅｓＥｄｉｔｉｏｎ），２０１４，４０（３）：２８１⁃２８７．［５］ＡｒｉｓｔｏｙＭＣ，ＯｒｌａｎｄｏＬ，ＮａｖａｒｒｏＪＬ，ｅｔａｌ．Ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｚａｔｉｏｎｏｆｓｐａｎｉｓｈｏｒａｎｇｅｊｕｉｃｅｆｏｒｖａｒｉａｂｌｅｓｕｓｅｄｉｎｐｕｒｉｔｙｃｏｎｔｒｏｌ［Ｊ］．ＪＡｇｒｉｃＦｏｏｄＣｈｅｍ，１９８９，３７（３）：５９６⁃６００．［６］ＣｅｒｃóｓＭ，ＳｏｌｅｒＧ，ＩｇｌｅｓｉａｓＤＪ，ｅｔａｌ．Ｇｌｏｂａｌａｎａｌｙｓｉｓｏｆｇｅｎｅｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｄｕｒｉｎｇｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔａｎｄｒｉｐｅｎｉｎｇｏｆｃｉｔｒｕｓｆｒｕｉｔｆｌｅｓｈ．Ａｐｒｏｐｏｓｅｄｍｅｃｈａｎｉｓｍｆｏｒｃｉｔｒｉｃａｃｉｄｕｔｉｌｉｚａｔｉｏｎ［Ｊ］．ＰｌａｎｔＭｏｌｅｃｕｌａｒＢｉｏｌｏｇｙ，２００６，６２（４／５）：５１３⁃５２７．［７］杨滢滢，高阳，郑嘉鹏，等．柑橘果实柠檬酸降解代谢途径与调控研究进展［Ｊ］．江西农业大学学报，２０１６，３８（３）：４７６⁃４８２．ＹａｎｇＹＹ，ＧａｏＹ，ＺｈｅｎｇＪＰ，ｅｔａｌ．Ａｄｖａｎｃｅｓｉｎｒｅｓｅａｒｃｈｏｎｔｈｅａｐｐｒｏａｃｈｏｆｄｅｇｒａｄａｔｉｏｎｍｅｔａｂｏｌｉｓｍｏｆｃｉｔｒｉｃａｃｉｄｉｎｃｉｔｒｕｓｆｒｕｉｔａｎｄｉｔ＇ｓｒｅｇｕｌａｔｉｏｎ［Ｊ］．ＡｃｔａＡｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｅＵｎｉｖｅｒｓｉｔａｔｉｓＪｉａｎｇｘｉｅｎｓｉｓ，２０１６，３８（３）：４７６⁃４８２．［８］ＷａｎｇＣＹ．Ｅｆｆｅｃｔｏｆｍｏｉｓｔｈｏｔａｉｒｔｒｅａｔｍｅｎｔｏｎｓｏｍｅｐｏｓｔｈａｒｖｅｓｔｑｕａｌｉｔｙａｔｔｒｉｂｕｔｅｓｏｆｓｔｒａｗｂｅｒｒｉｅｓ［Ｊ］．ＪｏｕｒｎａｌｏｆＦｏｏｄＱｕａｌｉ⁃ｔｙ，２０００，２３（１）：５１⁃５９．［９］张春云，周会玲，张维，等．热处理对红富士苹果虎皮病和贮藏效果的影响［Ｊ］．西北农林科技大学学报（自然科学版），２０１３，４１（６）：１１７⁃１２３．ＺｈａｎｇＣＹ，ＺｈｏｕＨＬ，ＺｈａｎｇＷ，ｅｔａｌ．Ｅｆｆｅｃｔｓｏｆｈｏｔ⁃ａｉｒｔｒｅａｔｍｅｎｔｏｎｓｕｐｅｒｆｉｃｉａｌｓｃａｌｄａｎｄｓｔｏｒａｇｅｏｆＲｅｄＦｕｊｉａｐｐｌｅｓ［Ｊ］．ＪｏｕｒｎａｌｏｆＮｏｒｔｈｗｅｓｔＡ＆ＦＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ（ＮａｔｕｒａｌＳｃｉｅｎｃｅＥｄｉｔｉｏｎ），２０１３，４１（６）：１１７⁃１２３．［１０］陈楚英，彭旋，万春鹏，等．采后热空气处理对新余蜜桔冷藏保鲜效果的影响［Ｊ］．中国南方果树，２０１４，４３（５）：３９⁃４１．ＣｈｅｎＣＹ，ＰｅｎｇＸ，ＷａｎｇＣＰ，ｅｔａｌ．ＥｆｆｅｃｔｏｆｈｏｔａｉｒｔｒｅａｔｍｅｎｔｏｎｐｏｓｔｈａｒｖｅｓｔｐｒｅｓｅｒｖａｔｉｏｎｏｆＸｉｎｙｕｔａｎｇｅｒｉｎｅ［Ｊ］．ＳｏｕｔｈＣｈｉ⁃ｎａＦｒｕｉｔｓ，２０１４，４３（５）：３９⁃４１，４８．［１１］ＣｈｅｎＭ，ＪｉａｎｇＱ，ＹｉｎＸＲ，ｅｔａｌ．Ｅｆｆｅｃｔｏｆｈｏｔａｉｒｔｒｅａｔｍｅｎｔｏｎｏｒｇａｎｉｃａｃｉｄ⁃ａｎｄｓｕｇａｒ⁃ｍｅｔａｂｏｌｉｓｍｉｎＰｏｎｋａｎ（Ｃｉｔｒｕｓｒｅｔｉｃｕｌａ⁃ｔａ）ｆｒｕｉｔ［Ｊ］．ＳｃｉｅｎｔｉａＨｏｒｔｉｃｕｌｔｕｒａｅ，２０１２，１４７（４）：１１８⁃１２５．［１２］高阳，杨滢滢，郑嘉鹏，等．靖安椪柑果实发育阶段糖㊁酸组分含量变化［Ｊ］．江西农业大学学报，２０１６，３８（４）：６３１⁃６３６．ＧａｏＹ，ＹａｎｇＹＹ，ＺｈｅｎｇＪＰ，ｅｔａｌ．ＣｈａｎｇｅｓｏｆｓｕｇａｒａｎｄａｃｉｄｃｏｍｐｏｎｅｎｔｓｉｎｆｒｕｉｔｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔｏｆＪｉｎｇ ａｎｏｒａｎｇｅ［Ｊ］．Ｊｉａｎ⁃ｇｘｉＡｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，２０１６，３８（４）：６３１⁃６３６．［１３］ＣｈｅｎＭ，ＸｉｅＸＬ，ＬｉｎＱ，ｅｔａｌ．Ｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｌｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｏｆｏｒｇａｎｉｃａｃｉｄｄｅｇｒａｄａｔｉｏｎ⁃ｒｅｌａｔｅｄｇｅｎｅｓｄｕｒｉｎｇｆｒｕｉｔｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔｏｆＮａｖｅｌｏｒａｎｇｅｓ（Ｃｉｔｒｕｓｓｉｎｅｎｓｉｓ）ｉｎｔｗｏｈａｂｉｔａｔｓ［Ｊ］．ＰｌａｎｔＭｏｌＢｉｏｌＲｅｐ，２０１３，３１（５）：１１３１⁃１１４０．［１４］杜正顺，巩惠芳，汪良驹，等．热水预处理延长冷藏草莓果实保鲜效应的研究［Ｊ］．江苏农业学报，２００８，２４（６）：９２２⁃９２８．㊃２２３㊃㊀江西农业大学学报第４０卷ＤｕＺＳ，ＧｏｎｇＨＦ，ＷａｎｇＬＪ，ｅｔａｌ．Ｈｏｔｗａｔｅｒｐｒｅｔｒｅａｔｍｅｎｔｅｘｔｅｎｄｉｎｇｐｒｅｓｅｒｖａｔｉｏｎｏｆｃｏｌｄ⁃ｓｔｏｒｅｄｓｔｒａｗｂｅｒｒｙｆｒｕｉｔ［Ｊ］．ＪｏｕｒｎａｌｏｆＪｉａｎｇｓｕＡｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌＳｃｉｅｎｃｅｓ２００８，２４（６）：９２２⁃９２８．［１５］ＬａｒａＭＶ，ＢｏｒｓａｎｉＪ，ＢｕｄｄｅＣＯ，ｅｔａｌ．Ｂｉｏｃｈｅｍｉｃａｌａｎｄｐｒｏｔｅｏｍｉｃａｎａｌｙｓｉｓｏｆ Ｄｉｘｉｌａｎｄ ｐｅａｃｈｆｒｕｉｔ（Ｐｒｕｎｕｓｐｅｒｓｉｃａ）ｕｐｏｎｈｅａｔｔｒｅａｔｍｅｎｔ［Ｊ］．ＪｏｕｒｎａｌｏｆＥｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌＢｏｔａｎｙ，２００９，６０（１５）：４３１５⁃４３３３．［１６］李绍佳．ＣｉｔＥＲＦ１３与ＣｉｔＶＨＡ⁃ｃ４协同调控柑橘果实柠檬酸代谢研究［Ｄ］．杭州：浙江大学，２０１６．ＬｉＳＪ．ＳｙｎｅｒｇｉｓｔｉｃｅｆｆｅｃｔｏｆＣｉｔＥＲＦ１３ａｎｄＣｉｔＶＨＡ⁃ｃ４ｏｎｃｉｔｒｉｃａｃｉｄｍｅｔａｂｏｌｉｓｍｉｎｃｉｔｒｕｓｆｒｕｉｔｓ［Ｄ］．Ｈａｎｇｚｈｏｕ：ＺｈｅｊｉａｎｇＵ⁃ｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，２０１６．［１７］陈明．椪柑和脐橙果实柠檬酸合成与降解相关基因表达及其调控研究［Ｄ］．杭州：浙江大学，２０１３．ＣｈｅｎＭ．Ｃｉｔｒｉｃａｃｉｄａｎｄｎａｖｅｌｏｒａｎｇｅｆｒｕｉｔｃｉｔｒａｔｅｓｙｎｔｈｅｓｉｓａｎｄｄｅｇｒａｄａｔｉｏｎ⁃ｒｅｌａｔｅｄｇｅｎｅｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎａｎｄｒｅｇｕｌａｔｉｏｎ［Ｄ］．Ｈａｎ⁃ｇｚｈｏｕ：ＺｈｅｊｉａｎｇＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，２０１３．［１８］ＮｏｔｔｏｎＢＡ，ＢｌａｎｋｅＭＭ．Ｐｈｏｓｐｈｏｅｎｏｌｐｙｒｕｖａｔｅｃａｒｂｏｘｙｌａｓｅｉｎａｖｏｃａｄｏｆｒｕｉｔ：ｐｕｒｉｆｉｃａｔｉｏｎａｎｄｐｒｏｐｅｒｔｉｅｓ［Ｊ］．Ｐｈｙｔｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，１９９３，３３（６）：１３３３⁃１３３７．［１９］张规富，卢晓鹏，谢深喜．不同时期水分胁迫对椪柑果实柠檬酸代谢相关基因表达的影响［Ｊ］．果树学报，２０１５，３２（４）：５２５⁃５３５．ＺｈａｎｇＧＦ，ＬｕＸＰ，ＸｉｅＳＸ．Ｉｎｆｌｕｅｎｃｅｏｆｗａｔｅｒｓｔｒｅｓｓｉｎｄｉｆｆｅｒｅｎｔｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔｓｔａｇｅｏｎｔｈｅｃｉｔｒｉｃａｃｉｄｍｅｔａｂｏｌｉｓｍ⁃ｒｅｌａｔｅｄｇｅｎｅｓｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｉｎｔｈｅＰｏｎｋａｎｆｒｕｉｔｓ［Ｊ］．ＪｏｕｒｎａｌｏｆＦｒｕｉｔＳｃｉｅｎｃｅ，２０１５，３２（４）：５２５⁃５３５．［２０］ＪｉａｎｇＮ，ＪｉｎＬＦ，ｄａＳｉｌｖａＪＡＴ，ｅｔａｌ．Ａｃｔｉｖｉｔｉｅｓｏｆｅｎｚｙｍｅｓｄｉｒｅｃｔｌｙｒｅｌａｔｅｄｗｉｔｈｓｕｃｒｏｓｅａｎｄｃｉｔｒｉｃａｃｉｄｍｅｔａｂｏｌｉｓｍｉｎｃｉｔｒｕｓｆｒｕｉｔｉｎｒｅｓｐｏｎｓｅｔｏｓｏｉｌｐｌａｓｔｉｃｆｉｌｍｍｕｌｃｈ［Ｊ］．ＳｃｉｅｎｔｉａＨｏｒｔｉｃｕｌｔｕｒａｅ，２０１４，１６８（３）：７３⁃８０．［２１］郝兆丰，袁进成，刘颖慧．异柠檬酸脱氢酶在植物抗氧化胁迫中的作用［Ｊ］．生物技术通报，２０１２（６）：３２⁃３５．ＨａｏＺＦ，ＹｕａｎＪＣ，ＬｉｕＹＨ．Ｒｏｌｅｏｆｉｓｏｃｉｔｒａｔｅｄｅｈｙｄｒｏｇｅｎａｓｅｏｎｏｘｉｄａｔｉｖｅｓｔｒｅｓｓｉｎｐｌａｎｔｓ［Ｊ］．ＢｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙＢｕｌｌｅｔｉｎ，２０１２（６）：３２⁃３５．［２２］ＡｐｒｉｌｅＡ，ＦｅｄｅｒｉｃｉＣ，ＣｌｏｓｅＴＪ，ｅｔａｌ．ＥｘｐｒｅｓｓｉｏｎｏｆｔｈｅＨ＋－ＡＴＰａｓｅＡＨＡ１０ｐｒｏｔｏｎｐｕｍｐｉｓａｓｓｏｃｉａｔｅｄｗｉｔｈｃｉｔｒｉｃａｃｉｄａｃｃｕ⁃ｍｕｌａｔｉｏｎｉｎｌｅｍｏｎｊｕｉｃｅｓａｃｃｅｌｌｓ［Ｊ］．Ｆｕｎｃｔｉｏｎａｌ＆ＩｎｔｅｇｒａｔｉｖｅＧｅｎｏｍｉｃｓ，２０１１，１１（４）：５５１⁃５６３．［２３］ＬｉｕＸ，ＨｕＸＭ，ＪｉｎＬＦ，ｅｔａｌ．Ｉｄｅｎｔｉｆｉｃａｔｉｏｎａｎｄｔｒａｎｓｃｒｉｐｔａｎａｌｙｓｉｓｏｆｔｗｏｇｌｕｔａｍａｔｅｄｅｃａｒｂｏｘｙｌａｓｅｇｅｎｅｓ，ＣｓＧＡＤ１ａｎｄＣｓ⁃ＧＡＤ２，ｒｅｖｅａｌｔｈｅｓｔｒｏｎｇｒｅｌａｔｉｏｎｓｈｉｐｂｅｔｗｅｅｎＣｓＧＡＤ１ａｎｄｃｉｔｒａｔｅｕｔｉｌｉｚａｔｉｏｎｉｎｃｉｔｒｕｓｆｒｕｉｔ［Ｊ］．ＭｏｌｅｃｕｌａｒＢｉｏｌｏｇｙＲｅｐｏｒｔｓ，２０１４，４１（９）：６２５３⁃６２６２．。