LD50的测定方法
半数致死量的测定
4、精确配制一号药液
应取原液的量：
40＊5％＝x＊25％ x＝8ml
取原液8ml加入32ml水（一号药液） 从中取出每组药液量供一组使用， 在加入等量生理盐水，从中取出每 组药液量供二组使用，依此类推。
四、试验
［方法］ 一、预试
快速找出0%和100%估计致死量（Dn，Dm）
首先用原液尼克刹米（25%）10倍稀释
液的一系列药液以不同容量各试4鼠，进而 2ml / 10g ＝6ml。
动物：小鼠，体重18－22g ，雌雄各半 将一定浓度的药物按一定剂量比值给小鼠腹腔注射，记录小鼠的死亡情况，计算药物的半数致死量。
半数致死量的测定
半数致死量（LD50）测定 [Bliss法]
(综合性实验)
[目的]
1.掌握药物半数致死量（LD50）测定的基本步骤 2.掌握用Bliss法计算药物的半数致死量。
[原理]
将一定浓度的药物按一定剂量比值给小鼠腹腔 注射，记录小鼠的死亡情况，计算药物的半数致 死量。
[材料]
动物：小鼠，体重18－22g ，雌雄各半 药物：25%尼克刹米、生理盐水 器材：注射器、量筒、烧杯、鼠笼、 电子天平
则可逐渐递增或递减剂量，找到4/4和0/4剂 将一定浓度的药物按一定剂量比值给小鼠腹腔注射，记录小鼠的死亡情况，计算药物的半数致死量。
＝每组药液量／（1－K） 器材：注射器、量筒、烧杯、鼠笼、 电子天平
量即（Dm，Dn）。（0.2X0.7=0.14ml， ＝10＊30g＊ 0.
快速找出0%和100%估计致死量（Dn，Dm）
1、每组均取10只小鼠，腹腔注射尼克刹米按照不况。（40分）
药物半数致死量(LD50)的测定
实验 药物半数致死量（LD50）的 测定——序贯法
实验目的
1. 掌握测定药物LD50的药理学意义、序贯法 的实验方法和计算方法；
2.熟悉盐酸普鲁卡因的毒性作用。
实验动物与实验器材
1. 实验动物： 小白鼠（18-22g），雌雄各半 2.实验器材：
仪器：注射器、鼠笼、函数型计算器 药品：2％普鲁卡因、苦味酸溶液
实验步骤
1. 实验前按表3-6拟定实验的药物剂量，相邻两剂 量按等比安排。相邻两剂量对数差为0.046。
2.每实验组取取小鼠10只，雌雄各半，称重后用 苦味酸标记；
浓度
剂量D （mg/kg）
r＝ 0.046
2.22 ％
2％
1.8 ％
1.62 ％
1.45 ％
合计
表3-6 小鼠半数致死量实验结果
4. 实验结果的计算与表达 LD50=log－1（C/N）mg/kg
式中： C＝∑（R·logD） R＝剂量组的动物只数
logD＝剂量D的对数值； N＝实验动物总数＝∑R
注意事项
1. 对实验动物进行随机化分组； 2.各组药物浓度不能混淆； 3.给药剂量及部位要准确,进针的深浅一致；
教师：康白
药理学实验
一、实验目的： 二、注意事项：1.分组，组长负责，穿隔离衣，轮流操作； 2.预习指导做到心中有数，注意观察结果；3.节约药品动物， 爱护仪器，不要大声喧哗，结束后清点仪器，打扫卫生；4. 轮流值日，拿送动物。 三、实验设计：（P11）对照、随机、重复的原则。 四、报告的书写：目的、器材、方法、结果、讨论、结论 五、成绩分配：理论80%，实验20%（报告5%、设计5%、 实验测验10%）
LogD
实验结果
R
R·log D
实验2 LD50的测定
半数致死量的意义
测定药物的LD50是药物急性毒性实验的重 要内容。 LD50是恒量药物急性毒性的重要指标。
LD50的测定
一、测定LD50的常用方法：
1. 改良冠氏法：方法简单，计算简便。 2. 序贯法（上下法）：使用动物少，费时多， 不适于作用慢的药物 3. Biss法：设计严谨，结果可靠，是目前公认 的最佳方法，但计算复杂，一般需借助于计 算机或计算器才能进行计算。
100个自然数的随机排列
1 0 10 20 30 40 50 0 1 2 3 4 5 6 7 8 9
Back
60
70 80 90
26 23 49 51 04 00 58 15 70 64
03 08 34 52 53 27 83 90 63 88
86 20 97 47 98 40 78 57 67 59
37 36 66 83 43 29 23 95 32 64
19 54 65 28 63 05 04 20 89 00
62 81 78 59 48 17 52 68 15 79
47 30 84 92 94 26 71 99 02 08
10 55 61 13 85 33 88 69 87 97
16 86 53 56 80 06 74 67 90 22
86 19 34 69 13 54 26 99 30 22
09 94 96 60 77 01 47 50 55 23
48 73 15 98 06 40 18 88 21 16
53 92 95 85 11 29 58 25 78 83
63 59 28 02 91 42 41 71 56 33
66 00 85 67 76 17 90 14 51 46
ld50的测定方法的实验报告思考题
ld50的测定方法的实验报告思考题【引言】在进行科学研究或毒理学评估时，LD50（半数致死剂量）的测定是一项重要的实验。
LD50是指能够致死一半受试动物的剂量，它是评估某种物质毒性的指标。
本文章将探讨LD50的意义和测定方法，并思考在实验报告中应该包含哪些重要的内容。
【LD50的意义】在毒理学研究中，确定物质的毒性是至关重要的。
而LD50作为一种实验评估指标，可以帮助我们判断物质的毒性程度和剂量效应。
通过测定一种物质在动物体内的LD50，可以进行危险品分类、毒物识别和毒性研究等领域的工作。
【LD50的测定方法】要测定一种物质的LD50，我们需要进行一系列的实验。
下面是常见的几种测定方法：1. 最常用的方法：经典Litchfield-Wilcoxon法（Up-and-Down 法）。
该方法是在动物（如小鼠、大鼠）体内逐渐增加剂量，直到对半数动物产生死亡为止。
根据每个动物的反应调整下一个动物的剂量，以便更接近于LD50。
最后通过计算不同剂量的死亡率，确定LD50。
2. 毒性分类法：根据测定的数据，将物质分为毒性类别。
这种方法是根据动物对不同剂量物质的反应，将物质分为五个毒性类别：非常毒、有毒、有限毒、少量毒和微毒。
这种分类法便于在实验中确定剂量的范围，并提供定量和定性的信息。
3. 统计学分析法：使用统计学方法来计算LD50。
这种方法是将实验测定得到的数据进行统计学分析，通过计算得到近似的LD50值，并给出统计上的置信区间以反映结果的可靠性。
统计学方法可以帮助我们更准确地评估LD50和预测剂量效应。
【实验报告的重要内容】实验报告是对实验进行总结和回顾的重要文件，对于展示和传达实验结果至关重要。
当涉及到LD50的测定时，以下是应该包含在实验报告中的重要内容：1. 实验目的和背景：简要介绍LD50的测定方法背后的科学原理和意义。
2. 实验设计和材料：详细描述实验所使用的动物种类、药物剂量、实验环境等。
3. 实验步骤：清晰地描述每个实验步骤，包括剂量递增、动物反应观察等。
实验普鲁卡因半数致死量(LD50)的测定
DJY
2
测定LD50的方法很多 本实验用的是简化机率单位法
y = a+bx
机 率 单 位 y
对数剂量x
DJY 3
药物的剂量与效应关系
死 亡 数 累 积 死 亡 率
剂量
累 积 死 亡 率 对数剂量
DJY
剂量 机 率 单 位 对数剂量
4
测定药物LD50的设计方法 1.预实验：摸索接近100%和0%死亡的剂量 2.按比例设5-7个剂量组（0.65~0.90） 3.随机分组，动物数不少于10只（小鼠） 4.实验条件均应相等
【注意事项】
1.动物应随机分组
2.各小组的动物标记要统一
3.剂量由小到大，注射量要准。
DJY
9
思考题
1.什么是LD50?
2.测定LD50的根据和意义何在?
DJY
10
【结果与统计】
对数剂量 动物数 死亡率 机率单位 死亡数 (mg/kg) (x) (n) (%) (y) 剂量 1 2 110.8 147.7 2.0445 2.1694
3 4
5
196.9 262.5
350.0
2.2942 2.4191
2.5441
y = a+bx
用直线回归法求 a, b, r
DJY 8
DJY
5
测定LD50的用药设计方法 同一浓度 不同浓度 不同剂量 同一剂量
DJY
6
【方法与步骤】
1.分组：随机分成5个剂量组，每组2只小白鼠。
2.给药：采用不同浓度,同一剂量的方法
0.20ml/10g,腹腔注射，涂上标记
3.观察：用药1小时后,观察小白鼠死亡情况,并记
录各组动物的鲁卡因半数致死量(LD50)的测定
实验三杀虫剂触杀毒力（LD50）测定
实验三 杀虫剂触杀毒力（LD 50）测定（点滴法）目前使用的杀虫剂大多数都具有较强的触杀作用，所以杀虫剂的触杀毒力测定显得特别重要。
触杀毒力测定有药膜法、点滴法、喷雾法、喷粉法和浸液法等。
室内比较精确的触杀毒力测定方法是点滴法和药膜法。
本实验采用点滴法（topical application ）。
是将一定量农药丙酮液点滴在虫体的一定部位上，药剂可能自体壁进入体内。
目的要求通过本实验可以学习到一种比较准确的杀虫剂触杀毒力测定方法，并进行有关毒力数据整理及其可靠性检验。
实验用具容量瓶（10、25、50及100ml ）、微量点滴器或毛细管微量点滴器、吸管、培养皿、烧杯、滤纸、平头镊子、计算纸。
实验材料乙酰甲胺磷，辛硫磷，丙酮，可选用室内人工饲养的粘虫（Mythimna separta Walker ）、玉米螟（Ostrinia furnacalis G ）、棉铃虫（Heliothis armigera Hubner ）或直接采自田间的菜青虫等4龄幼虫，荔枝椿象成虫（Tessaratoma papillosa Drury ）也可根据不同地区或不同季节任选一种试虫。
测试方法（选用玉米螟为实验材料）1) 预备试验 先用丙酮将乙酰甲胺磷配制成若干个不同浓度，选取4龄玉米螟幼虫若干，每个浓度用点滴器（或微量进样器）点滴药液于幼虫的胸部背面，每头虫点滴1ul,每浓度点滴虫数不少于30头，待药液干后，把5－8头虫盛于一皿中，加入少量饲料，盖好培养皿，写好标记，经24小时后检查试虫的生存及死亡头数，计算其死亡率。
从这些浓度中找出适合的浓度，即找出其死亡率在20－90％之间的5－7个不同剂量的等比浓度供下一步试验用。
2) 根据上步预备试验结果，如本实验可用乙酰甲胺磷有如下浓度：500、1000、2000、4000、8000、12000和16000ppm 。
可设7组，每组选择4龄玉米螟幼虫210头，分别放在垫有滤纸的培养皿中（滤纸预先加湿），每皿放10头，每种浓度设有3个重复。
急性毒性试验-LD50的测定
急性毒性试验-LD50的测定急性毒性试验是一种通过给实验动物注射、灌胃或其他途径给予高剂量试验物质来评估其致死或严重的毒性反应的试验。
LD50是一种常用的急性毒性指标，表示半数实验动物在接受单位剂量试验物质后死亡的剂量。
本文将介绍LD50的测定方法和其应用。
一、LD50的测定方法1. 实验动物的选择LD50实验通常使用小鼠、大鼠、兔子和狗等动物进行。
选用实验动物需要秉持道德原则，并考虑到动物的生物学特征、毒物代谢能力等方面的因素。
例如，小鼠和大鼠体型较小、代谢能力较低，适合于测定具有代谢性毒性的化合物的LD50；兔子和狗体型较大，代谢能力较强，适合于测定纯化、非代谢性毒性的化合物的LD50。
2. 给药途径和剂量选择通常使用口服、皮下注射、静脉注射等给药途径。
对于口服试验，需要注意试验物质的水溶性和毒性，对于毒性高的化合物，通常使用灌胃的方式。
实验的剂量需要考虑到实验动物体型、种类、代谢能力等因素，并进行逐步递增以确定LD50。
3. 实验计划设计实验计划设计需要考虑到试验物质的毒性、剂量效应关系和死亡率等因素。
一般采用正反两次递增的方法，进行急性毒性试验评估。
根据试验物质的毒性情况和实验者的安全考虑，同时采取风险预警措施。
4. 数据处理和计算完成实验后，需要统计每个剂量组的死亡率和死亡时间。
按照统计学原理，可以根据实验数据计算出LD50值。
LD50值表示使用单位剂量试验物质对半数实验动物致死的剂量。
该值越小，试验物质的毒性越高。
二、LD50的应用LD50值可以作为急性毒性评估的定量指标，用于比较不同化合物的毒性。
在化学品、药品等领域里进行LD50测定可以帮助人们更好地预测和评估一些原料与产品的安全性，以便于过程优化和产品开发，同时为相关政策制定提供科学依据。
LD50值的应用最为广泛的领域是毒性测试和安全性评估。
在毒理学和环境毒理学领域里，常用LD50为评估的标准；在某些国家的法律法规中，也要求企业对使用的化学品或产品进行毒性测试，以保证工人和消费者的安全。
常见的药物半数致死量(LD50)的测定
常见的药物半数致死量(LD50)的测定1. 阿司匹林阿司匹林作为一种常见的解热镇痛药，其LD50值为每千克体重250500毫克。
在大鼠体内进行的实验表明，口服阿司匹林的LD50值约为每千克体重200400毫克。
2. 青霉素青霉素是一种广泛应用的抗生素，但其对某些动物（如小鼠、大鼠）的LD50值较高，约为每千克体重500010000单位。
需要注意的是，青霉素的毒性因物种而异，对人类的毒性较低。
3. 地高辛地高辛是一种用于治疗心脏病的药物，其LD50值为每千克体重13毫克。
在犬体内的实验显示，地高辛的LD50值约为每千克体重0.52毫克。
4. 吗啡吗啡是一种强效镇痛药，其LD50值为每千克体重300500毫克。
在大鼠体内进行的实验表明，口服吗啡的LD50值约为每千克体重400600毫克。
5. 苯巴比妥苯巴比妥是一种镇静催眠药，其LD50值为每千克体重200500毫克。
在小鼠体内进行的实验显示，苯巴比妥的LD50值约为每千克体重300400毫克。
需要注意的是，LD50值并非绝对固定，它受实验条件、给药途径、动物种类等多种因素影响。
因此，在评估药物安全性时，应以实际实验结果为准，并结合其他毒性指标进行综合分析。
同时，我们还需关注药物在人体内的实际毒性，以确保用药安全。
当然，让我们继续探讨药物半数致死量(LD50)的测定，并补充一些额外的信息。
6. 氯霉素氯霉素是一种广谱抗生素，其对小鼠的LD50值为每千克体重250300毫克。
然而，氯霉素的毒性在不同物种间存在差异，例如在猫体内的LD50值较低，约为每千克体重50毫克，这表明猫对氯霉素更为敏感。
7. 哌甲酯（利他林）哌甲酯是一种用于治疗注意力缺陷多动障碍（ADHD）的药物，其LD50值为每千克体重190毫克（大鼠口服）。
需要注意的是，哌甲酯的毒性作用可能与其药理作用相似，因此在用药时需严格控制剂量。
8. 硫酸亚铁硫酸亚铁是一种常用的补铁药物，其对大鼠的LD50值为每千克体重250300毫克。
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LD50的测定方法
LD50的测定方法有三种：概率单位法（Bliss法）、累计法（Reed-Muench、Karber）、序贯法
概率单位法：
1、进行实验：死亡率为10%-50%、50%-90%的组数各占一半。
死亡率为
0%和100%时，舍去不用
2、数据转换：计算剂量对数x和死亡率概率单位y
3、对x和y进行回归分析，求出回归方程
4、由回归方程计算当y=5时的x值
5、取x值的反对数得到LD50
如某农药对急性大白鼠的LD50测定计算
得：
累积法测定LD50
1、剂量组按等差或等比级数分5-8组
2、死亡率在0-100%之间
3、分别累计各组动物死亡总数和存活总数
4、分别求各组的累计动物死亡率
5、用线性插值法求半数致死量
例：
序贯法测定
1、做实验:从接近LD50的各组动物组数n剂量开始，等比级数分4-6组；
一只一只动物进行，阳性，下一只动物用低一级剂量，反之，则相反
2、计算各组动物数
3、计算各组动物组数n与剂量对数x的乘积之和：∑nx
4、计算LD50的对数值：∑nx/∑n
5、取反对数得到LD50。