LD50测定实验
半数致死量的测定
4、精确配制一号药液
应取原液的量：
40＊5％＝x＊25％ x＝8ml
取原液8ml加入32ml水（一号药液） 从中取出每组药液量供一组使用， 在加入等量生理盐水，从中取出每 组药液量供二组使用，依此类推。
四、试验
［方法］ 一、预试
快速找出0%和100%估计致死量（Dn，Dm）
首先用原液尼克刹米（25%）10倍稀释
液的一系列药液以不同容量各试4鼠，进而 2ml / 10g ＝6ml。
动物：小鼠，体重18－22g ，雌雄各半 将一定浓度的药物按一定剂量比值给小鼠腹腔注射，记录小鼠的死亡情况，计算药物的半数致死量。
半数致死量的测定
半数致死量（LD50）测定 [Bliss法]
(综合性实验)
[目的]
1.掌握药物半数致死量（LD50）测定的基本步骤 2.掌握用Bliss法计算药物的半数致死量。
[原理]
将一定浓度的药物按一定剂量比值给小鼠腹腔 注射，记录小鼠的死亡情况，计算药物的半数致 死量。
[材料]
动物：小鼠，体重18－22g ，雌雄各半 药物：25%尼克刹米、生理盐水 器材：注射器、量筒、烧杯、鼠笼、 电子天平
则可逐渐递增或递减剂量，找到4/4和0/4剂 将一定浓度的药物按一定剂量比值给小鼠腹腔注射，记录小鼠的死亡情况，计算药物的半数致死量。
＝每组药液量／（1－K） 器材：注射器、量筒、烧杯、鼠笼、 电子天平
量即（Dm，Dn）。（0.2X0.7=0.14ml， ＝10＊30g＊ 0.
快速找出0%和100%估计致死量（Dn，Dm）
1、每组均取10只小鼠，腹腔注射尼克刹米按照不况。（40分）
药物半数致死量(LD50)的测定
实验 药物半数致死量（LD50）的 测定——序贯法
实验目的
1. 掌握测定药物LD50的药理学意义、序贯法 的实验方法和计算方法；
2.熟悉盐酸普鲁卡因的毒性作用。
实验动物与实验器材
1. 实验动物： 小白鼠（18-22g），雌雄各半 2.实验器材：
仪器：注射器、鼠笼、函数型计算器 药品：2％普鲁卡因、苦味酸溶液
实验步骤
1. 实验前按表3-6拟定实验的药物剂量，相邻两剂 量按等比安排。相邻两剂量对数差为0.046。
2.每实验组取取小鼠10只，雌雄各半，称重后用 苦味酸标记；
浓度
剂量D （mg/kg）
r＝ 0.046
2.22 ％
2％
1.8 ％
1.62 ％
1.45 ％
合计
表3-6 小鼠半数致死量实验结果
4. 实验结果的计算与表达 LD50=log－1（C/N）mg/kg
式中： C＝∑（R·logD） R＝剂量组的动物只数
logD＝剂量D的对数值； N＝实验动物总数＝∑R
注意事项
1. 对实验动物进行随机化分组； 2.各组药物浓度不能混淆； 3.给药剂量及部位要准确,进针的深浅一致；
教师：康白
药理学实验
一、实验目的： 二、注意事项：1.分组，组长负责，穿隔离衣，轮流操作； 2.预习指导做到心中有数，注意观察结果；3.节约药品动物， 爱护仪器，不要大声喧哗，结束后清点仪器，打扫卫生；4. 轮流值日，拿送动物。 三、实验设计：（P11）对照、随机、重复的原则。 四、报告的书写：目的、器材、方法、结果、讨论、结论 五、成绩分配：理论80%，实验20%（报告5%、设计5%、 实验测验10%）
LogD
实验结果
R
R·log D
实验2 LD50的测定
半数致死量的意义
测定药物的LD50是药物急性毒性实验的重 要内容。 LD50是恒量药物急性毒性的重要指标。
LD50的测定
一、测定LD50的常用方法：
1. 改良冠氏法：方法简单，计算简便。 2. 序贯法（上下法）：使用动物少，费时多， 不适于作用慢的药物 3. Biss法：设计严谨，结果可靠，是目前公认 的最佳方法，但计算复杂，一般需借助于计 算机或计算器才能进行计算。
100个自然数的随机排列
1 0 10 20 30 40 50 0 1 2 3 4 5 6 7 8 9
Back
60
70 80 90
26 23 49 51 04 00 58 15 70 64
03 08 34 52 53 27 83 90 63 88
86 20 97 47 98 40 78 57 67 59
37 36 66 83 43 29 23 95 32 64
19 54 65 28 63 05 04 20 89 00
62 81 78 59 48 17 52 68 15 79
47 30 84 92 94 26 71 99 02 08
10 55 61 13 85 33 88 69 87 97
16 86 53 56 80 06 74 67 90 22
86 19 34 69 13 54 26 99 30 22
09 94 96 60 77 01 47 50 55 23
48 73 15 98 06 40 18 88 21 16
53 92 95 85 11 29 58 25 78 83
63 59 28 02 91 42 41 71 56 33
66 00 85 67 76 17 90 14 51 46
实验普鲁卡因半数致死量(LD50)的测定
DJY
2
测定LD50的方法很多 本实验用的是简化机率单位法
y = a+bx
机 率 单 位 y
对数剂量x
DJY 3
药物的剂量与效应关系
死 亡 数 累 积 死 亡 率
剂量
累 积 死 亡 率 对数剂量
DJY
剂量 机 率 单 位 对数剂量
4
测定药物LD50的设计方法 1.预实验：摸索接近100%和0%死亡的剂量 2.按比例设5-7个剂量组（0.65~0.90） 3.随机分组，动物数不少于10只（小鼠） 4.实验条件均应相等
【注意事项】
1.动物应随机分组
2.各小组的动物标记要统一
3.剂量由小到大，注射量要准。
DJY
9
思考题
1.什么是LD50?
2.测定LD50的根据和意义何在?
DJY
10
【结果与统计】
对数剂量 动物数 死亡率 机率单位 死亡数 (mg/kg) (x) (n) (%) (y) 剂量 1 2 110.8 147.7 2.0445 2.1694
3 4
5
196.9 262.5
350.0
2.2942 2.4191
2.5441
y = a+bx
用直线回归法求 a, b, r
DJY 8
DJY
5
测定LD50的用药设计方法 同一浓度 不同浓度 不同剂量 同一剂量
DJY
6
【方法与步骤】
1.分组：随机分成5个剂量组，每组2只小白鼠。
2.给药：采用不同浓度,同一剂量的方法
0.20ml/10g,腹腔注射，涂上标记
3.观察：用药1小时后,观察小白鼠死亡情况,并记
录各组动物的鲁卡因半数致死量(LD50)的测定
ld50的测定实验报告
ld50的测定实验报告
LD50的测定实验报告
实验目的：本实验旨在测定一种化学物质对实验动物的半数致死量（LD50），以评估其毒性水平。
实验材料和方法：我们选取了实验室常用的小鼠作为实验动物，以及待测化学物质。
首先，我们将小鼠随机分为不同剂量组，每组包含5只小鼠。
然后，我们分别给不同剂量组的小鼠口服待测化学物质，并观察其死亡情况。
根据实验结果，我们利用经典的Probit分析法计算出LD50值。
实验结果：经过实验观察和数据统计分析，我们得出了待测化学物质的LD50值为X mg/kg。
根据国际毒性标准，我们将其毒性水平评定为（低/中等/高）。
实验讨论：LD50值是评估化学物质毒性水平的重要参数，它可以帮助我们确定合理的安全使用剂量，并指导相关毒性评价和风险评估工作。
通过本次实验，我们对待测化学物质的毒性水平有了清晰的认识，并为其在实际应用中提供了科学依据。
结论：本次实验成功测定了待测化学物质的LD50值，并对其毒性水平进行了评估。
我们将继续深入研究，以便更好地了解该化学物质的毒性机制，并为其安全使用提供更多的科学依据。
通过本次实验，我们对LD50的测定方法有了更深入的了解，并对化学物质的毒性评估工作有了更清晰的认识。
我们相信，这将有助于更好地保障人类和环境的安全。
LD50实验
实验三普鲁卡因半数致死量（LD50）的测定和计算【目的】通过实验了解测定药物LD50的方法、步骤和计算过程。
【材料】1、器材：鼠笼，天平，1ml注射器。
2、药品：2%盐酸普鲁卡因溶液，苦味酸溶液。
3、动物：小鼠（体重17～25克，雌雄均可，应注明性别）。
【方法和步骤】1、探索剂量范围：取小鼠8-10只，以2只为一组，选择剂量间距较大的一系列剂量，分别给各组腹腔注射盐酸普鲁卡因溶液，观察出现的症状并记录死亡数，找出引起0%及100%死亡率剂量的所在范围（致死量约在105～150mg/kg范围内）。
本步骤可由教研室预先进行。
2、正式试验：在预试验所获得的0%和100%致死量的范围内，选用几个剂量（一般用5个剂量，按等比级数增减，相邻剂量之间比例为1：0.7或1：0.8），各剂量组动物数为10只，分别用苦味酸标记。
动物的体重和性别要分层随机分配，完成动物分组和剂量计算后按组腹腔注射给药。
最好先从中剂量组开始，以便能从最初几组动物接受药物后的反应来判断两端的剂量是否合适，否则可随时进行调整，尽可能使动物的死亡率在50%上下，死亡率为0%或100%时，不能用于计算。
实验以全班为一个单位，可以一个组观察一个剂量组（10只小鼠），或每组各作每一剂量组的2只小鼠，务求用药量准确，注射方法规范，以减少操作误差，避免非药物所致的死亡，得到较理想的结果。
中剂量组：200mg/kg，2%浓度换算成体积为：0.1ml/10g，相邻剂量之间比例为1：0.85常态，故观察30分钟内的死亡率。
4、计算LD50及其95%可信限：LD50计算方法有多种，这里介绍最常用的加权直线回归法（Bliss法）。
此法虽计算步骤稍繁，但结果较精确，实际应用时可借助于计算机。
首先，用较大的剂量间距确定致死剂量的范围，进而在此范围内设定若干剂量组，剂量按等比方式设计，相邻两个剂量间距比例在0.65-0.85之间，给药后观察7-14天内动物一般情况和死亡数，根据死亡率计算LD50。
ld50的测定实验报告
ld50的测定实验报告LD50的测定实验报告概述：LD50是一种常用的毒性测定指标，用于衡量某种物质对于生物体的毒性程度。
本实验旨在通过测定某种化学物质对小白鼠的LD50值，评估其毒性，并为毒性研究提供参考。
实验材料与方法：实验所需材料包括小白鼠、待测物质、标准饲料、饮水、实验器材等。
按照以下步骤进行实验：1. 实验组织与分组：将小白鼠随机分为若干组，每组10只。
其中一组为对照组，其余组为实验组。
2. 毒性物质的制备：待测物质按照一定浓度配制成溶液。
3. 毒性物质的给药：将待测物质溶液按照一定剂量注射到小白鼠体内，对照组注射生理盐水。
4. 观察与记录：观察小白鼠在给药后的行为、食欲、体重等变化，并记录观察结果。
5. LD50的计算：根据实验数据，利用统计学方法计算出LD50值。
实验结果与分析：根据实验数据统计，不同剂量的待测物质对小白鼠产生了不同程度的毒性反应。
观察到高剂量组小白鼠出现明显的行为异常、食欲减退、体重减轻等现象，而低剂量组则没有明显异常。
LD50值是指在给定时间内，使一半实验动物死亡的物质剂量。
通过计算LD50值，可以评估待测物质的毒性程度。
LD50值越小，表示物质对生物体的毒性越高。
实验的结果显示，待测物质的LD50值为X mg/kg。
根据国际毒理学标准，该物质被归类为高毒性物质。
这意味着在相同剂量下，该物质对生物体的毒性较强，需谨慎使用。
实验的局限性与改进：本实验仅使用小白鼠作为实验对象，其生物体特征与人类存在差异，因此对于人体的毒性评估仍需谨慎。
此外，实验中仅测定了一种待测物质，结果无法推广到其他物质。
为了提高实验的准确性和可靠性，可以考虑以下改进措施：1. 使用多种动物模型，如小鼠、大鼠、兔子等，以更全面地评估待测物质的毒性。
2. 增加实验组数和样本量，以提高统计学分析的可靠性。
3. 结合其他毒性指标，如生化指标、组织病理学等，对待测物质的毒性进行更全面的评估。
结论：LD50测定实验是一种常用的毒性测定方法，通过计算LD50值可以评估待测物质的毒性程度。
ld50测定的实验报告
ld50测定的实验报告LD50测定的实验报告引言：药物的安全性评价是药物研发过程中至关重要的一环。
在药物研发的早期阶段，需要进行一系列的实验来评估药物的毒性。
其中，LD50测定是评估药物毒性的重要方法之一。
本实验旨在通过LD50测定，评估某药物对实验动物的毒性，为进一步的药物研发提供参考。
材料与方法：1. 实验动物：选取同龄、同种、同性别的小鼠作为实验动物。
2. 药物制备：将待测药物按照一定比例配制成不同浓度的溶液。
3. 实验组设置：将小鼠随机分为若干组，每组6只，其中一组作为对照组，其余组分别注射不同浓度的药物溶液。
4. LD50测定：将药物溶液通过静脉注射的方式给予小鼠，记录注射后小鼠的行为、体重变化、呼吸等生理指标。
5. 数据处理：根据实验结果，计算出药物的LD50值。
结果与讨论：在实验过程中，观察到小鼠在注射药物后出现了一系列的生理反应。
随着药物浓度的增加，小鼠的行为异常、体重减轻、呼吸困难等现象逐渐加重。
通过对实验数据的统计分析，可以得出药物的LD50值。
LD50值是指将药物给予实验动物后，导致50%的动物死亡所需的药物剂量。
LD50值越小，说明药物的毒性越大；LD50值越大，说明药物的毒性越小。
通过LD50测定，可以初步评估药物的毒性，并为药物的安全性评价提供参考。
然而，需要注意的是，LD50测定只是评估药物毒性的初步方法，其结果并不能完全代表药物的毒性水平。
在实际的药物研发过程中，还需要进行更加全面、细致的毒性评价，包括长期毒性、亚慢性毒性和慢性毒性等实验。
此外，LD50测定也存在一定的局限性。
由于药物对不同物种的毒性可能存在差异，所以LD50值只能作为初步参考，不能直接推广到人体。
在进行LD50测定时，需要选择合适的实验动物，并进行合理的数据分析，以得出准确可靠的结果。
结论：LD50测定是评估药物毒性的重要方法之一。
通过LD50测定，可以初步评估药物的毒性水平，为药物研发提供参考。
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2. 剂量分组
首先摸索合适剂量范围，测出0%和 100%死亡的剂量范围
在预试验所获得的0%和100%死亡的剂 量范围内，选用几个剂量组（小鼠一般 不少于5个剂量组，按等比级数增减，相 邻组间比一般取1:0.9~1:0.7），尽可能使 半数组的死亡率在50%以上，另半数组 死亡率在50%以下。
Number
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10
Weight (g)
Injection volume (ml)
0.2ml/10g
盐酸普鲁卡因LD50测定结果
No. of group
1
No. of mice
10
Concentration Dose
No. of
(%)
(mg/kg) death
1.25
What is LD50?
半数致死量：能引起50%的实验动物出 现死亡反应时的药物剂量
LD50 ( Median Lethal Dose) is the dose of a substance that will kill half of the test animals.
以死亡率做纵坐标，剂量对数做横坐标，呈一个长尾“S”形曲 线。这条曲线两端平缓，中间陡峭，在反应率50%处斜度最 大，因此LD50是剂量反应曲线上最敏感的一点。
193.2(7)
注意事项
捉持小鼠动作坚决，防止咬伤。 小鼠称重及给药剂量力求准确。
ATTENTION
Please hand in your reports before next Friday.
Put the mice to death and clean the cages The group on duty should clean the
250 7
Percentage mortality (%)
2
10
1.1
220 18
90
3
10
0.97
194 9
90
4
10
0.85
170 5
5
10
0.75
150 5
50
6
10
0.66
132 2
7
10
0.58
116 0
0
LD50(mg/kg)=160.3(6) 160.6(7)
Confident limitation(95%)=147.5-174.2(6) 133.5-
The mouse is grasped tightly, and held in a head-down position.
The injection is made in the lateral aspect of the lower left abdomen. The needle of syringe is inserted through the skin and muscle with a 450 angle and inject the solution.
mortality
50%
LD50
dose
LD50测定的意义
是药物筛选的第一步，药物安全性评价 的第1道关卡
初步估计该药的安全性
TI=LD50/ED50 TI值越大，越安全
提供药物毒性的基本资料：症状、靶器 官、剂量
方法和步骤
1.动物选择 Various species are used for LD50 tests.
2. 剂量分组
本次实验 剂量组已设置好，剂间比1:0.88 每组一个剂量，随机取10只小鼠给药
How to mark?
4
1
7
2
5
8
3
9
6
3. 给药途径
新药报批要求2个，其中1个与临床给药 途径一致
本次实验：ip 0.2ml/10g
Intraperitoneal injection, ip P17
本次实验：死亡数，症状
6. LD50计算
改良寇氏法，Bliss法（新药报批方法） 本次实验：Bliss法
结果：LD50，95%可信限
7. 实验报告
日期、室温 受试物的名称、生产厂家、批号、规格、理化
性状、溶液浓度。 实验动物的种系、性别、体重范围、分组情况、
给药途径、剂量、给药时间、给药后的中毒症 状、死亡时间和死亡率。 LD50的计算过程和结果（包括LD50值和95% 可信限范围）
classroom
Avoid puncture of the abdominal viscera
4. 观察时间
正式实验：7~14d 本次实验：20min
5. 观察指标
正式实验
每天死亡数 笼边观察：包括动物体重变化、饮食、外观、
行为、分泌物、排泄物等 解剖和病理检查：死亡动物与观察期结束后
动物需解剖尸检。
药物半数致死量（LD50）的测定 P164
医学部药理系
实验目的
掌握LD50测定的意义 掌握LD50测定的方法、步骤和计算方法
急性毒性试验 Acute Toxicity
指机体一次或短时间内（24 h）多次接 受大剂量某种药物后所产生的快速而剧 烈的中毒反应，包括死亡效应，是药物 安全性评价的第1道关卡。