荧光定量PCR在疟疾实验室诊断中的应用_李素华
荧光定量PCR技术在医学检测中的应用研究
荧光定量PCR技术在医学检测中的应用研究一、引言PCR（Polymerase Chain Reaction）技术是一种能够扩增DNA 分子序列的技术，广泛应用于医学诊断、环境监测、生物学研究等领域。
其中，荧光定量PCR技术作为PCR技术的一种变种，具有高灵敏度、高特异性和高准确度等优点，在医学检测中得到广泛应用。
二、荧光定量PCR技术原理荧光定量PCR技术是一种基于荧光探针检测PCR扩增产物的技术。
当PCR反应进行到合成新链阶段时，荧光探针与PCR产物结合，导致荧光信号的释放。
通过检测反应体系中的荧光信号强度，可以确定模板DNA的初始数量和扩增情况。
具体而言，荧光定量PCR技术分为两类。
一类是多重实时荧光定量PCR技术（Real-time PCR），它可以同时检测多个抗原或位点，具有高通量、高速度和高灵敏度等特点。
另一类是数字PCR 技术（Digital PCR），它则可以对DNA分子进行分子计数，具有更高的准确性和可靠性。
三、荧光定量PCR技术在医学检测中的应用1. 检测病原体荧光定量PCR技术可以快速、准确地检测病原体，例如呼吸道病毒、肠病毒、流感病毒等。
采用多重实时荧光定量PCR技术可以实现多个病原体的同时检测，对于快速诊断和治疗有着重要意义。
2. 遗传疾病诊断荧光定量PCR技术可以对基因突变进行检测，为遗传疾病的早期诊断和治疗提供了有效手段。
例如，使用荧光定量PCR技术可以检测肌萎缩侧索硬化症相关基因的突变，为临床医学提供重要的参考数据。
3. 检测癌症荧光定量PCR技术可以检测肿瘤标志物，并对肿瘤进行定量分析。
例如，在乳腺癌的筛查中，可以采用荧光定量PCR技术检测乳腺癌相关基因的表达情况，为肿瘤的早期诊断和治疗提供参考数据。
4. 检测基因表达荧光定量PCR技术可以对基因表达进行定量检测，为研究基因功能及表达调控提供了有效手段。
例如，在研究心脏病发病机制中，可以采用荧光定量PCR技术检测心脏病相关基因的表达情况，从而揭示其发病机制。
疟疾的实时荧光PCR快速检测方法
状体区分开， 虫种 鉴 别 较 难， 容易 出 现 误 诊， 并 只 按 单 一疟 原 虫感染进行治疗; 输入性的卵 形 疟 和 三 日疟 在 国 内较 少 见， 准 确 鉴 别 有 难 度 。因 此 ， 准 确 的 诊断 和鉴定 疟 原 虫 种 对 疟疾 防 治具有重要的实用意义。 最近国内外开始将实时荧光 PCR 技术应用于 疟疾 的 快速 ， 它 能 在 短 时 间 内 判 断 疑似 病 例 或 可 疑 媒 介 是否感染疟疾或携带疟原虫， 及 时 采 取 必 要 的 防 控 措 施， 防止 检测 和 分型
［1 ］ 镜检难以查到原虫， 容易出现 漏 诊 ; 当 发 生 疟 原 虫 混 合感 染 时， 镜检不易将恶 性 疟 的 环 状 体 或 早 期 滋 养 体 与 间 日疟 的 环
该传染病疫情在国境口岸的 传 入 和 传 出， 为 早 期 筛查、 快速 诊 断、 有效监测和 控 制 疾 病的 发 生 和 传 播 提 供 支 持 和 依据。 本 文根据疟原虫小亚单位核糖体核糖核酸( SSU rRNA) 基因序列 ［6 ］ 的高度保守性 ， 建立了疟疾的通用型实时荧光 PCR 方法， 对 60 例血样进行了检测， 并比较 了 该 方法 同 镜检 和 巢 式 PCR 间 的敏感性和阳性检出率。 1 1． 1 材料与方法
中国卫生检验杂志 2011 年 3 月 第 21 卷 第 3 期
Chinese Journal of Health Laboratory Technology，Mar 2011 ; Vol 21
No 3
625
【微生物检测方法】
疟疾 的实 时荧 光 PCR 快速 检 测方法
师永霞， 苏锦坤， 洪烨， 李小波， 郑夔， 黄吉城， 幸检疫技术中心， 广州 510700 ) ［ 摘要］ 目的: 建立疟疾的实时荧光 PCR 检测方法并 用 于 疟疾 的 快速 检测。 方法: 设 计 了 疟 原 虫 通 用 型 实 时 荧光 PCR 检测的引物和探针， 建立了疟疾的实时荧光 PCR 检测方法。对 40 份 疟疾 镜检 阳 性 样 本 和 20 份 镜检 阴 性 样 本 进 行 实 时 20 分 钟 即 可 完 成。40 荧光 PCR 检测， 并和巢式 PCR 方法检测结果进行了比较。 结 果: 疟疾 实 时 荧光 PCR 检测 速 度 快， PCR 2 PCR ; 20 份镜检阳性样本的荧光 检测均为阳性， 份样本的 巢 式 结果为阴性 份 镜检 阴 性 样 本 中 有 3 份 样 本 为 实 时 荧光 PCR 阳性， 其余 17 份样本为实时荧光 PCR 阴性， 与疟疾巢式 PCR 检测结果相同。结论: 该 实 时 荧光 PCR 方法检测 速度 快 ， 特异性强， 准确性高， 阳性率高， 不易漏检， 适用于疟疾的快速检验， 这对防止 该 病在 国 境 口 岸 的 传 入 提 供了 技术 依据。 ［ 关键词］ 疟疾; 小亚单位核糖体核糖核酸; 实时荧光 PCR; 巢式 PCR ［ ［ ［ 中图分类号］ R531． 3 文献标识码］ A 文章编号］ 1004 － 8685 ( 2011 ) 03 － 0625 － 03
荧光定量PCR技术在基因诊断中的应用
荧光定量PCR技术在基因诊断中的应用随着科学技术的发展，越来越多的医学领域应用到PCR技术。
其中，荧光定量PCR技术（qPCR）是一种常用的PCR技术。
它的特点是可以在反应过程中实时监测PCR产物的数量，从而实现对异物DNA定量测量及扩增效率、扩增特异性的监测，使得荧光定量PCR技术在基因诊断中得到广泛的应用。
一、荧光定量PCR技术原理荧光定量PCR技术是一种使用一种实时检测方法来测定DNA放大的产物的数量的PCR技术。
其原理是在每次放大后添加一种特定标记物，并通过实时检测PCR产物的数量来计算最初所拥有的基因或片段的数量。
使用荧光定量PCR技术，可以在反应中实时测量细胞核酸（DNA或RNA）的数量或浓度，可以将反应分为两个不同的阶段：指数和平台阶段。
在指数阶段，PCR产物的数量随着反应温度的增加而指数倍增长。
在平台阶段，PCR放大反应逐渐停滞，达到反应容量的极限。
在该技术中，所添加的标记物是一种特定的DNA染料或荧光探针，它能够与合成的PCR产物结合，从而表现出一定的荧光强度，并实现对PCR产物进行实时检测。
当PCR产物数量达到一定浓度时，检测到的荧光信号就比较高。
通过测定荧光强度的变化来确定PCR产物和细胞核酸模板的数量。
二、荧光定量PCR技术在基因诊断领域中的应用非常广泛。
下面我们就来简单介绍一下。
1. 重复序列测定多种人类遗传疾病与重复序列的变异有关。
细胞中有两种类型的DNA序列：核糖核酸基因（编码蛋白质的基因）和非编码DNA（其他DNA序列）。
其中，许多非编码DNA包括了高度重复的DNA序列。
荧光定量PCR技术可以从DNA样本中分离出重复序列并测量它们的数量。
通过这种方法，可以检测出多种与重复序列变异相关的疾病，如肌萎缩性侧索硬化症等。
2. 微生物检测荧光定量PCR技术可以用于检测微生物。
比如，在糖尿病、肿瘤等临床诊断中，常常需要进行微生物感染的检测。
通过荧光定量PCR技术可以检测到微生物DNA，从而实现对微生物感染的快速、准确检测。
荧光定量PCR技术在医学诊断中的应用
荧光定量PCR技术在医学诊断中的应用PCR(聚合酶链式反应)技术的发明极大的推动了现代生物医学领域的进展，而荧光定量PCR技术则更是在基因检测和药物筛选领域中得到了广泛应用。
PCR技术是一种通过体外放大目标DNA序列的技术，而荧光定量PCR技术则可以通过荧光检测放大的DNA序列的数量，还可以通过正常化和标准曲线等方法来精确测量。
因此，荧光定量PCR技术被广泛用于医学诊断、药物研究、环境监测和生物学研究领域。
本文将重点讨论荧光定量PCR技术在医学诊断中的应用。
一、概述PCR技术已成为当前医学诊断中常用的一种技术。
通过使用PCR技术，可以在短时间内从临床样本中检测出病原体和基因突变等。
由于PCR技术所放大的DNA序列数量极少，因此常常无法直接检测PCR产物。
为解决这个问题，荧光定量PCR技术应运而生。
荧光定量PCR技术可以通过荧光检测来定量放大目标DNA 序列的数量。
荧光分子与PCR产物结合后，会发出一个荧光信号，荧光信号越强，说明PCR产物数量越多。
二、应用1、基因突变检测荧光定量PCR技术可以在临床检测中用于筛选基因突变。
这对于诸如肿瘤等疾病的早期和准确检测非常重要。
荧光定量PCR技术可以用于检测各种基因变异，如单核苷酸多态性(SNPs)、缺失和插入突变等。
此外，荧光定量PCR技术还可以用于检测病原体基因突变，以便为疾病的诊断和治疗提供有力支持。
2、病毒和微生物检测荧光定量PCR技术也可以用于病毒和微生物的快速筛查和定量测量。
病毒和微生物数量通常非常少，因此需要进行放大和测量。
荧光定量PCR技术可以测量不同生物体系中的某些基因序列的RNA/DNA量，从而快速确定病原体存在与否。
此外，荧光定量PCR技术还可以确定微生物和病毒载量，这为疾病治疗和公共卫生方面的决策提供了有效的支持。
3、肿瘤标志物检测荧光定量PCR技术也可以用于检测肿瘤标志物。
肿瘤标志物是一种体内指示肿瘤存在的分子标志物。
荧光定量PCR技术可以用于检测这些标志物，可以更敏感和精确地检测肿瘤，从而提高了诊断和治疗的准确性和追踪效果。
荧光定量pcr技术的临床应用
疗效评估与预后判
断
通过荧光定量PCR技术，可以监 测肿瘤在治疗过程中的变化情况， 评估治疗效果和预测预后。
遗传性疾病检测
单基因遗传病检测
荧光定量PCR技术的临床 应用
• 荧光定量PCR技术概述 • 荧光定量PCR的临床应用 • 荧光定量PCR技术的优势与局限性 • 荧光定量PCR技术的实验操作流程 • 荧光定量PCR技术的质量控制与标准
化 • 荧光定量PCR技术在临床研究中的应
用案例
01
荧光定量PCR技术概述
定义与原理
定义
荧光定量PCR技术是一种在PCR 反应过程中，通过荧光信号的实 时监测，对DNA或RNA进行定量 分析的方法。
化
实验室设计与布局
实验室分区
根据实验需求，将实验室划分为试剂准备区、样品处理区、 扩增区和产物分析区，各区域之间应有物理隔离和明确的标 识。
实验室环境
实验室应保持清洁、干燥，温度和湿度应控制在适宜范围内 ，定期进行环境监测和消毒。
仪器设备与试剂选择
仪器设备
选择性能稳定、精度高、易于操作的荧光定量PCR仪，定期进行仪器校准和维护。
自动化程度高
随着技术的发展，荧光定量 PCR已经实现了自动化，提高
了检测效率和准确性。
局限性
成本较高
对操作人员要求高
荧光定量PCR技术需要特定的仪器和试剂， 成本相对较高，限制了其在一些基层医疗 单位的应用。
荧光定量PCR技术需要专业的操作人员，对 实验条件和操作过程要求较高，否则会影 响结果的准确性和可靠性。
VS
荧光定量pcr技术及在动物疫病检测中的应用
荧光定量pcr技术及在动物疫病检测中的应用
荧光定量聚合酶链反应（real-time PCR，RT-PCR）是一种实时监测DNA及RNA扩增
过程并量化扩增产物，这种反应把一种无荧光探针或荧光标记后的探针添加到反应组分中，同时，该探针会特异性结合样品中的特性序列，从而实现荧光信号的产生。
当扩增的反应
产物的数量与样品的终末浓度呈正比时，荧光定量聚合酶链反应就可以推断出样品中特异
性序列的存在性。
荧光定量PCR技术由聚合酶链反应（PCR）和荧光定量技术结合而成，可用于快速，
准确，灵敏地检测动物DNA及RNA水平，尤其是病原体检测，比如病毒、细菌及其他微生
物等。
目前荧光定量PCR技术被广泛应用于动物疫病检测，其核心技术是根据病原体的特性
序列选择特异性探针，在设计制备的PCR 试剂盒中添加其它必要成分，在特定的温度及时间范围内反复扩增，其最终结果可以在实验过程及最后结果中反映出，能够更精确的检测
到一些低检出限的病原体，有效提高检测速度和准确性。
荧光定量PCR技术在动物疫病检测中有以下优点：1.检测灵敏度高，能够以少量样品
快速、准确检测出病原体定量；2.试剂、耗材及仪器成本低廉，可有效节约检测成本；3.
可以同时实现多项检测，样品及检测条件敏感；4.实时荧光反应可以直接在PCR反应完
成时监测样品中扩增片段的变化。
总之，荧光定量聚合酶链反应技术已经成功的应用于动物疫病检测，其良好的检测性能，低廉的成本，实用性强及可靠性，使其在动物疫病领域中地位日益显著。
荧光定量PCR技术在生物医学领域中的应用分析
荧光定量PCR技术在生物医学领域中的应用分析引言PCR技术是现代生命科学领域中的重要技术之一，广泛应用于医学和生物学领域。
荧光定量PCR技术是一种新型的PCR技术，比传统PCR技术更精确，灵敏，可靠，并且能够定量表达目标基因。
本文将主要着重探讨荧光定量PCR技术在生物医学领域中的应用现状和未来发展。
第一章荧光定量PCR技术简介1.1 PCR技术的概述PCR技术是一种用于体外扩增特定DNA片段的技术。
PCR技术的基本原理是基于DNA的复制机制，即在DNA双链分离的基础上，引物与模板DNA互补配对，并通过核酸酶的催化作用将两个引物延长成同向的链，从而扩增出目标DNA片段。
1.2 荧光定量PCR技术的优劣势与传统PCR技术相比，荧光定量PCR技术具有以下优点：（1）更高的灵敏度：荧光定量PCR技术的基本原理是利用荧光标记的探针对扩增出的目标DNA进行实时检测，比传统PCR技术更具有灵敏度。
（2）更高的特异性：荧光定量PCR技术的末端探针可以设计为具有序列特异性，因此能够避免非特异性扩增产物的干扰。
（3）更高的精度：荧光定量PCR技术的实时检测和定量效果更好，能够更准确地定量目标基因的表达水平。
（4）更快的实验速度：荧光定量PCR技术的扩增过程能够在较短时间内进行，并且不需要后续步骤，因此可以更快地获取结果。
1.3 荧光定量PCR技术的基本原理荧光定量PCR技术的基本原理是利用一个荧光标记的探针，该探针上有一个荧光发射器和一个荧光信号抑制器。
在扩增反应中，荧光探针会与模板DNA的目标序列互补结合，核酸酶会将探针切割，并释放出荧光发射器，导致荧光信号的释放。
荧光信号的数量取决于扩增出的DNA的数量，因此能够实时监测扩增反应，并给出精确的定量结果。
第二章荧光定量PCR技术在生物医学领域的应用2.1 荧光定量PCR技术在基因表达研究中的应用荧光定量PCR技术在基因表达研究中的应用非常广泛。
例如，使用荧光定量PCR技术可以定量表达不同类型的基因在不同细胞和组织类型中的表达水平，寻找不同基因的表达模式，分析基因调控机制等。
荧光定量pcr实验原理与应用
荧光定量pcr实验原理与应用荧光定量PCR（Polymerase Chain Reaction）是一种基于PCR技术的一种变种，它利用荧光探针实现对PCR产物的定量检测。
荧光定量PCR结合了PCR扩增和实时荧光检测技术，能够快速、准确地检测目标DNA的含量。
本文将介绍荧光定量PCR的原理及其在科研和临床应用中的重要性。
一、荧光定量PCR的原理荧光定量PCR的原理基本与常规PCR相似，也包括三个步骤：变性、退火和延伸。
其区别在于，在PCR反应体系中加入了含有荧光素的探针，这些探针与目标DNA序列特异性结合，并在PCR反应中被DNA聚合酶酶切，导致荧光信号的释放。
在PCR反应进行过程中，荧光信号与PCR产物量成正比，通过检测荧光信号的强度，可以实时监测PCR反应的进程，从而实现对目标DNA的定量检测。
荧光定量PCR可以通过不同的荧光探针来检测多个靶标，实现多重PCR检测。
二、荧光定量PCR的应用1. 病原微生物检测：荧光定量PCR广泛应用于病原微生物的检测，包括细菌、病毒、真菌等。
通过荧光定量PCR技术，可以实现对微生物的快速、准确的检测，有助于早期诊断和治疗。
2. 癌症诊断：荧光定量PCR可用于癌症早期筛查和诊断。
通过检测癌基因的表达水平，可以帮助医生判断肿瘤的类型、分级和预后，指导个体化治疗方案。
3. 遗传病检测：荧光定量PCR可用于遗传病的基因检测。
通过对患者DNA样本进行荧光定量PCR分析，可以准确检测遗传突变，帮助家庭规划和遗传咨询。
4. 食品安全监测：荧光定量PCR可以用于食品中致病微生物和转基因成分的检测。
通过对食品样品中目标DNA的定量检测，可以确保食品安全，保障公众健康。
5. 环境微生物监测：荧光定量PCR可用于环境微生物的监测和鉴定。
通过对环境样品中微生物的定量检测，可以了解微生物种类和数量，指导环境保护和生态恢复工作。
荧光定量PCR作为一种高灵敏、高特异性的分子生物学技术，在医学、生物学、食品安全和环境科学等领域发挥着重要作用。
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1 材料与方法 1.1 血样来源
外周 血 吉 氏 染 色 厚尧 薄 血 涂 片 和 EDTA鄄抗 凝 全 血 来 源 于河南省2015-2016年疟疾发热病例袁 由河南省各省市 疾病 预防控制中心送交至河南省疾病预防控制中心寄生虫病预 防控制所进行实验室复核确认遥 1.2 主要仪器和试剂
全血基因组核酸提取试剂盒购自苏州天隆生物科技有 限公 司袁 PCR Master Mix购自 美 国Promega公 司 袁 疟 原 虫 分 型 核 酸检 测 试 剂 盒 渊 PCR 荧 光探 针 法 冤 购 自上 海 科 华 生 物 工程股份有限公司遥 显微镜 渊CX21冤 为日本Olympus公司产 品袁 PCR扩增仪 渊iQ5冤 为 美国 BioRad 公 司产 品 袁 凝 胶 成 像 系统 渊Geldoc XR冤 为美国Bio鄄Rad公司产品遥 1.3 方法 1.3.1 涂片染色镜检 按照中华人民共和国卫生行业标准鄄 疟疾诊断标准 渊WS259鄄2015冤 附录B 叶病原学检查曳 规范要 求袁 对收集到的血涂片在油镜视野 渊 伊1 000冤 下进行镜检 观察袁 并鉴定疟原虫虫种遥 1.3.2 疟原虫DNA提取 参照全血基因组核酸提取试剂盒 说明书提取抗凝全血DNA袁 提取的DNA于-20 益保存备用遥 1.3.3 巢 氏 PCR 检 测 提 取 的 抗 凝 全血 DNA进 行 疟原 虫 巢 氏PCR扩增袁 疟 原 虫 18S rRNA 基 因 引 物 序 列 由 上 海 生 工 生 物 工 程 有 限 公 司 合 成 袁 引物序列见表1遥 PCR反应体系 渊50 滋l冤院 2伊PCR预混液25 滋l袁 上尧 下游引物各1.5 滋l袁 模板DNA 渊50 ng/滋l冤 5 滋l袁 ddH2O补至50 滋l 渊第1轮冤遥 反应条件院 94 益 3 min曰 94 益 30 s袁 58 益 30 s袁 72 益 60 s袁 35个循环遥 72 益延 伸5 min遥 取 第1轮扩 增产 物2 滋l作 为第 2轮 PCR扩 增
出版确认：纸质期刊编辑部通过与《中国学术期刊（光盘版）》电子杂志社有限公司签约，在《中国 学术期刊（网络版）》出版传播平台上创办与纸质期刊内容一致的网络版，以单篇或整期出版形式，在印刷 出版之前刊发论文的录用定稿、排版定稿、整期汇编定稿。因为《中国学术期刊（网络版）》是国家新闻出 版广电总局批准的网络连续型出版物（ISSN 2096-4188，CN 11-6037/Z），所以签约期刊的网络版上网络首 发论文视为正式出版。
作者单位院 1 河南省疾病预防控制中心袁 郑州 450016曰 2 河南国 际旅行卫生保健中心袁 郑州 450046
* 通讯作者袁 E鄄mail院 819482937@
渊P. malariae 冤遥 随着消除疟疾的进展袁 我国大部分地区已无 本地疟疾病例袁 但由于社会经济一体化及日益频繁的贸易 往来袁 以及劳务输出等人员的流动袁 境外输入病例出现增 多趋势咱2暂袁 我国疟疾形势依然充满挑战遥
疟疾是由带有疟原虫的雌性按蚊叮咬人体而感染袁 是 全球热带尧 亚热带最严重的公共卫生问题之一咱1暂袁 主要有4 种致病疟原虫院 恶性疟原虫 渊Plasmodium falciparum冤尧 间日 疟原虫 渊P. vivax冤尧 卵形疟原虫 渊P. ovale 冤 和三日 疟原 虫
基 金 项 目 院 2017 年 度 河 南 省 医 学 科 技 攻 关 计 划 项 目 渊 No. 201702274冤曰 2016 年度河南省医学科技攻关计划项目 渊 No. 162102310066冤 曰 河 南 省 科 技 攻 关 项 目 渊 No. 162102310035冤
目前袁 临床疟疾诊断最常规的方法是临床症状观察尧 镜检疟原虫和抗原检测袁 但其准确性和灵敏性均有待提高遥 PCR是一种灵敏性和特异性均较高的分子生物学方法袁 在疟 原虫分型鉴定中有特殊优势遥 巢氏PCR 尧 咱3鄄4暂 一步法单管多 重PCR咱5暂尧 荧光定量 PCR 渊 qPCR冤 咱6暂尧 环介 导等温 扩增 PCR 渊LAMP冤 等是目前用于疟原虫分型的主要方法遥
揖Key words铱 Malaria; Microscopy; Nested PCR; Fluorescence quantitative PCR
Suppoal Science and Technology of Henan Province 渊 No. 201702274 & No. 162102310066冤, Science and Technology of Henan Province 渊No. 162102310035冤 * Corresponding author袁 E鄄mail院 819482937@
中国寄生虫学与寄生虫病杂志 Chinese Journal of Parasitology and Parasitic Diseases ISSN 1000-7423,CN 31-1248/R
《中国寄生虫学与寄生虫病杂志》网络首发论文
题目： 作者：
收稿日期： 网络首发日期： 引用格式：
荧光定量 PCR 在疟疾实验室诊断中的应用 李素华，李静，高丽君，张雅兰，周瑞敏，钱丹，杨成运，刘颖，赵玉玲， 张红卫 2018-07-16 2018-10-15 李素华，李静，高丽君，张雅兰，周瑞敏，钱丹，杨成运，刘颖，赵玉玲， 张红卫．荧光定量 PCR 在疟疾实验室诊断中的应用[J/OL]．中国寄生虫学与 寄生虫病杂志. /kcms/detail/31.1248.r.20181010.1552.006.html
网络首发：在编辑部工作流程中，稿件从录用到出版要经历录用定稿、排版定稿、整期汇编定稿等阶 段。录用定稿指内容已经确定，且通过同行评议、主编终审同意刊用的稿件。排版定稿指录用定稿按照期 刊特定版式（包括网络呈现版式）排版后的稿件，可暂不确定出版年、卷、期和页码。整期汇编定稿指出 版年、卷、期、页码均已确定的印刷或数字出版的整期汇编稿件。录用定稿网络首发稿件内容必须符合《出 版管理条例》和《期刊出版管理规定》的有关规定；学术研究成果具有创新性、科学性和先进性，符合编 辑部对刊文的录用要求，不存在学术不端行为及其他侵权行为；稿件内容应基本符合国家有关书刊编辑、 出版的技术标准，正确使用和统一规范语言文字、符号、数字、外文字母、法定计量单位及地图标注等。 为确保录用定稿网络首发的严肃性，录用定稿一经发布，不得修改论文题目、作者、机构名称和学术内容， 只可基于编辑规范进行少量文字的修改。
窑1窑
文 章 编 号 院 1000 鄄 7423 渊 2018 冤 鄄 05 鄄 0000 鄄 03
荧光定量 PCR 在疟疾实验室诊断中的应用
揖研究简报铱
李素华 1，李静 2，高丽君 1，张雅兰 1，周瑞敏 1，钱丹 1，杨成运 1，刘颖 1，赵玉玲 1*，张红卫 1
【提要】 分别采用镜检尧 巢氏 PCR 和荧光定量 PCR 等 3 种检测方法对收集到的 79 份疟疾血样进行检测袁 并 对检测结果进行比较分析遥 结合患者临床症状和 3 种检测结果 袁 79 份 血样最 终确 诊 74 份 袁 阳 性率为 93.7%袁 其 中镜检检出率为 82.3%袁 巢氏 PCR 检出率为 82.3%袁 荧光定量 PCR 检出率为 93.7%袁 荧光定量 PCR 检 出率 高 于 其他两种方法 渊P < 0.05冤遥 镜检和巢氏 PCR 的一致率为 78.4%袁 镜检和荧光定量 PCR 的一 致率为 63.5%袁 巢 氏 PCR 和荧光定量 PCR 的一致率为 83.8%遥 相比镜检和巢氏 PCR袁 荧光定量 PCR 敏感性和检 出率更高袁 且用时 更短遥
渊1 Henan Center for Disease Control and Prevention, Zhengzhou 450016, China; 2 Henan International Travel Healthcare Center, Zhengzhou 450046, China冤
揖 Abstract铱 Seventy鄄nine malaria samples were examined by microscopy, nested PCR and fluorescence quantitative PCR, and the detection rate was analyzed among the three methods. After combining clinical symptoms of the patients and results of the three methods, 74 of the 79 samples were confirmed to be malaria samples, with a positive rate of 93.7% . Specifically, the detection rate of microscopy, nested PCR and fluorescence quantitative PCR were 82.3% , 82.3% and 93.7% , respectively. The concordance rate between microscopy and nested PCR was 78.4% , and that between microscopy and fluorescence quantitative PCR was 65.3% 袁 between nested PCR and fluorescence quantitative PCR was 83.8%. In addition, the detection rate of fluorescence quantitative PCR 渊93.7%冤 was significantly higher than that of the nested PCR 渊82.3%冤 渊P < 0.05冤. Compared with microscopy and nested PCR, the fluorescence quantitative PCR has higher sensitivity and positive detection rate, and is less time鄄consuming.