人胆囊收缩素CCK试剂盒使用方法
人胆囊收缩素CCK试剂盒使用方法

人胆囊收缩素(CCK)试剂盒使用方法检测范围:96T8pg/ml-200pg/ml使用目的:本试剂盒用于测定人血清、血浆及相关液体样本中胆囊收缩素(CCK)含量。
实验原理本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人胆囊收缩素(CCK)水平。
用纯化的人胆囊收缩素(CCK)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入胆囊收缩素(CCK),再与HRP标记的胆囊收缩素(CCK)抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。
TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。
颜色的深浅和样品中的胆囊收缩素(CCK)呈正相关。
用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中人胆囊收缩素(CCK)浓度。
标本要求1.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。
若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融2.不能检测含NaN3的样品,因NaN3抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。
操作步骤1.标准品的稀释:本试剂盒提供原倍标准品一支,用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。
2.加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、标准孔、待测样品孔。
在酶标包被板上标准品准确加样50μl,待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl(样品最终稀释度为5倍)。
加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。
3.温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。
4.配液:将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用5.洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。
6.加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。
7.温育:操作同3。
8.洗涤:操作同5。
9.显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色15分钟.10.终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。
乙酰胆碱酯酶试剂盒说明书

乙酰胆碱酯酶试剂盒说明书人胆碱乙酰化酶(CHAc)ELISA试剂盒说明书本试剂盒仅供体外研究使用!预期应用ELISA法定量测定人血清、血浆或其它相关生物液体中CHAc含量。
实验原理用纯化的抗体包被微孔板,制成固相载体,往包被抗CHAc抗体的微孔中依次加入标本或标准品、生物素化的抗CHAc抗体、HRP标记的亲和素,经过彻底洗涤后用底物TMB显色。
TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。
颜色的深浅和样品中的CHAc呈正相关。
用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),计算样品浓度。
试剂盒组成及试剂配制1. 酶联板:一块(96孔)2. 标准品(冻干品): 2瓶,每瓶临用前以样品稀释液稀释至1ml,盖好后静置10分钟以上,然后反复颠倒/搓动以助溶解,其浓度为10 ng/ml,做系列倍比稀释(注:不要直接在板中进行倍比稀释)后,分别稀释成10 ng/ml,5 ng/ml,2.5ng/ml,1.25 ng/ml,0.625 ng/ml,0.312 ng/ml,0.156 ng/ml,样品稀释液直接作为标准浓度0 ng/ml,临用前15分钟内配制。
如配制5 ng/ml标准品:取0.5ml (不要少于0.5ml ) 10 ng/ml的上述标准品加入含有0.5ml样品稀释液的Eppendorf管中,混匀即可,其余浓度以此类推。
3. 样品稀释液:1×20ml。
4. 检测稀释液A:1×10ml。
5. 检测稀释液B:1×10ml。
6. 检测溶液A:1×120μl(1:100)临用前以检测稀释液A 1:100稀释,稀释前根据预先计算好的每次实验所需的总量配制(100μl/孔),实际配制时应多配制0.1-0.2ml。
如10μl检测溶液A加990μl检测稀释液A的比例配制,轻轻混匀,在使用前一小时内配制。
7. 检测溶液B:1×120μl/瓶(1:100)临用前以检测稀释液B 1:100稀释。
肌酸激酶(Creatine Kinase, CK)测定试剂盒使用说明

肌酸激酶(Creatine Kinase,CK)测定试剂盒使用说明微量法注意:正式测定之前选择2-3个预期差异大的样本做预测定。
货号:BC1145规格:100管/96样产品内容:提取液:液体100mL×1瓶,4℃保存。
试剂一:粉剂1瓶,4℃避光保存,使用前加10mL蒸馏水溶解。
试剂二:液体10mL×1瓶,4℃保存。
工作液:临用前根据用量将试剂一和试剂二以1:1混合。
使用前37℃温育2min。
产品说明:CK(EC2.7.3.2)主要存在于心脏、肌肉以及脑等组织中,能可逆地催化肌酸与ATP之间的转磷酰基反应,在能量运转、肌肉收缩和ATP再生中有重要作用,是临床诊断心脑疾病的一个重要指标。
CK催化磷酸肌酸和ADP生成肌酸和ATP,己糖激酶催化ATP与葡萄糖形成6-磷酸葡萄糖,6-磷酸葡萄糖脱氢酶催化6-磷酸葡萄糖与NADP+生成NADPH,导致340nm光吸收值增加。
自备实验用品及仪器:天平、低温离心机、恒温水浴锅、紫外分光光度计/酶标仪、微量石英比色皿/96孔板和蒸馏水。
操作步骤:一、粗酶液提取1.组织样本:按照组织质量(g):提取液体积(mL)为1:5~10的比例(建议称取约0.1g组织,加入1mL提取液)进行冰浴匀浆,然后10000g,4℃离心15min,取上清,置冰上待测。
2.血清样本:直接测定。
二、测定操作表1.分光光度计/酶标仪预热30min,调节波长至340nm。
2.操作表空白管测定管酶液(μL)60工作液(μL)150150H2O(μL)15090混匀,取200μL于微量石英比色皿/96孔板中,测定管调零,测定340nm的初始值A1,37℃反应3min,分别测定1min,2min,3min时的吸光值A2,计算时取平均值,△A=A2-A1。
注意:空白管只需测定一次。
三、CK活性计算公式a.用微量石英比色皿测定的计算公式如下(1)按组织蛋白含量计算酶活定义:37℃,pH7.0时,每毫克蛋白质1min内催化产生1nmolNADPH为一个酶活单位。
CCK-8的步骤

人胆囊收缩素/缩胆囊素八肽(CCK-8)ELISA试剂盒说明书本试剂盒仅供体外研究使用、不用于临床诊断!预期应用ELISA法定量测定人血清、血浆或其它相关生物液体中CCK-8含量。
实验原理用纯化的CCK-8抗体包被微孔板,制成固相载体,往微孔中依次加入标本或标准品、生物素化的CCK-8抗体、HRP标记的亲和素,经过彻底洗涤后用底物(TMB)显色。
TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。
颜色的深浅和样品中的CCK-8呈正相关。
用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(值),计算样品浓度。
试剂盒组成及试剂配制1、酶标板:一块(96孔)2、标准品(冻干品): 2瓶,请临用前15分钟内配制。
每瓶以样品稀释液稀释至0.5ml,盖好后室温静置大约10分钟,同时反复颠倒/搓动以助溶解,其浓度为50 pmol/L,然后做系列倍比稀释(注:不要直接在板中进行倍比稀释),分别配制成50 pmol/L,25 pmol/L,12.5 pmol/L,6.25 pmol/L,3.12 pmol/L,1.56 pmol/L,0.78 pmol/L,样品稀释液直接作为空白孔 0 pmol/L。
如配制25 pmol/L 标准品:取0.3ml (不要少于0.3ml )50 pmol/L的上述标准品加入含有0.3ml样品稀释液的Eppendorf 管中,混匀即可,其余浓度以此类推。
3、样品稀释液:1×20ml。
4、检测稀释液A:1×10ml。
5、检测稀释液B:1×10ml。
6、检测溶液A:1×120 /瓶(1:100)。
临用前以检测稀释液A 1:100稀释(如:10 检测溶液A / 990 检测稀释液A),充分混匀,稀释前根据预先计算好的每次实验所需的总量配制(100 /孔),实际配制时应多配制 0.1-0.2ml。
7、检测溶液B:1×120 /瓶(1:100)。
cck8说明

试剂盒的储存及有效期
所有试剂均按试剂瓶标签上所示保存。请注意,收到试剂盒后请尽快将标准品、检 测溶液 A 以及 96 孔板保存于-20 。开封后的酶标板要密封加干燥剂后保存于-20 ,避 免潮湿。有效期为 6 个月。
实验原理
本试剂盒应用竞争抑制酶标免疫分析法测定标本中待测物质水平。用纯化的抗体包被
微孔板,制成固相抗体,往包被抗体的微孔中同时加入酶标的抗原和待测抗原,被测抗原 与酶标记抗原对特异性抗体进行竞争结合。经过彻底洗涤后用底物 TMB 显色。TMB 在过 氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。待测标本浓度越高, 标记抗原和抗体的结合就越受到抑制,显色愈浅。显色的深浅与酶量呈正相关,而与样品 中待测物质含量呈负相关。用酶标仪在 450nm 波长下测定吸光度(值),计算样品浓度。
TMB底物
1 × 9ml
浓洗涤液(30 x)
1 × 20ml
试剂名称 96孔板覆膜 标准品稀释液 检测稀释液A(2 x) 检测稀释液B(2 x) 终止液 使用说明书
数量 4 1 × 20ml 1 × 6ml 1 × 6ml 1 × 6ml 1
本试剂盒未提供但需自备的设备及试剂
1、450±10nm 滤光片的酶标仪(建议仪器使用前提前预热) 2、单道和多道微量加液器及吸头 3、稀释样品的 EP 管 4、蒸馏水或去离子水 5、吸水纸 6、盛放洗液的容器
CCK-8的步骤

人胆囊收缩素/缩胆囊素八肽(CCK-8)ELISA试剂盒说明书本试剂盒仅供体外研究使用、不用于临床诊断!预期应用ELISA法定量测定人血清、血浆或其它相关生物液体中CCK-8含量。
实验原理用纯化的CCK-8抗体包被微孔板,制成固相载体,往微孔中依次加入标本或标准品、生物素化的CCK-8抗体、HRP标记的亲和素,经过彻底洗涤后用底物(TMB)显色。
TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。
颜色的深浅和样品中的CCK-8呈正相关。
用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(值),计算样品浓度。
试剂盒组成及试剂配制1、酶标板:一块(96孔)2、标准品(冻干品): 2瓶,请临用前15分钟内配制。
每瓶以样品稀释液稀释至0.5ml,盖好后室温静置大约10分钟,同时反复颠倒/搓动以助溶解,其浓度为50 pmol/L,然后做系列倍比稀释(注:不要直接在板中进行倍比稀释),分别配制成50 pmol/L,25 pmol/L,12.5 pmol/L,6.25 pmol/L,3.12 pmol/L,1.56 pmol/L,0.78 pmol/L,样品稀释液直接作为空白孔 0 pmol/L。
如配制25 pmol/L 标准品:取0.3ml (不要少于0.3ml )50 pmol/L的上述标准品加入含有0.3ml样品稀释液的Eppendorf 管中,混匀即可,其余浓度以此类推。
3、样品稀释液:1×20ml。
4、检测稀释液A:1×10ml。
5、检测稀释液B:1×10ml。
6、检测溶液A:1×120 /瓶(1:100)。
临用前以检测稀释液A 1:100稀释(如:10 检测溶液A / 990 检测稀释液A),充分混匀,稀释前根据预先计算好的每次实验所需的总量配制(100 /孔),实际配制时应多配制 0.1-0.2ml。
7、检测溶液B:1×120 /瓶(1:100)。
人胆囊收缩素CCK试剂盒使用方法

人胆囊收缩素(CCK)试剂盒使用方法检测范围:96T8pg/ml-200pg/ml使用目的:本试剂盒用于测定人血清、血浆及相关液体样本中胆囊收缩素(CCK)含量。
实验原理本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人胆囊收缩素(CCK)水平。
用纯化的人胆囊收缩素(CCK)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入胆囊收缩素(CCK),再与HRP标记的胆囊收缩素(CCK)抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。
TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。
颜色的深浅和样品中的胆囊收缩素(CCK)呈正相关。
用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中人胆囊收缩素(CCK)浓度。
试剂盒组成1.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。
若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融2.不能检测含NaN3的样品,因NaN3抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。
操作步骤1.标准品的稀释:本试剂盒提供原倍标准品一支,用户可按照下列图表在小试管中进行稀2.加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、标准孔、待测样品孔。
在酶标包被板上标准品准确加样50μl,待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl(样品最终稀释度为5倍)。
加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。
3.温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。
4.配液:将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用5.洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。
6.加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。
7.温育:操作同3。
8.洗涤:操作同5。
9.显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色15分钟.10.终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。
人缓激肽(BK)酶联免疫吸附测定试剂盒说明书

人缓激肽(BK)酶联免疫吸附测定试剂盒使用说明书本试剂盒仅供体外研究使用、不用于临床诊断!预期应用ELISA法定量测定人血清、血浆或其它相关生物液体中缓激肽(BK)含量。
实验原理用纯化的BK抗体包被微孔板,制成固相载体,往微孔中依次加入标本或标准品、生物素化的BK抗体、HRP 标记的亲和素,经过彻底洗涤后用底物(TMB)显色。
TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。
颜色的深浅和样品中的BK呈正相关。
用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(值),计算样品浓度。
试剂盒组成及试剂配制1、酶标板:一块(96孔)2、标准品(冻干品):2瓶,请临用前15分钟内配制。
每瓶以样品稀释液稀释至1ml,盖好后室温静置大约10分钟,同时反复颠倒/搓动以助溶解,其浓度为6,000pg/ml,然后做系列倍比稀释(注:不要直接在板中进行倍比稀释),分别配制成6,000pg/ml,3,000pg/ml,1,500pg/ml,750pg/ml,375pg/ml,188pg/ml,94 pg/ml,样品稀释液直接作为空白孔0pg/ml。
如配制3,000pg/ml标准品:取0.5ml(不要少于0.5ml)6,000 pg/ml的上述标准品加入含有0.5ml样品稀释液的Eppendorf管中,混匀即可,其余浓度以此类推。
3、样品稀释液:1×20ml。
4、检测稀释液A:1×10ml。
5、检测稀释液B:1×10ml。
6、检测溶液A:1×120/瓶(1:100)。
临用前以检测稀释液A1:100稀释(如:10检测溶液A/990检测稀释液A),充分混匀,稀释前根据预先计算好的每次实验所需的总量配制(100/孔),实际配制时应多配制0.1-0.2ml。
7、检测溶液B:1×120/瓶(1:100)。
临用前以检测稀释液B1:100稀释。
稀释方法同检测溶液A。
8、底物溶液:1×10ml/瓶。
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人胆囊收缩素(CCK)试剂盒使用方法
检测范围:
8pg/ml-200pg/ml 使用目的:
本试剂盒用于测定人血清、血浆及相关液体样本中胆囊收缩素 (CCK)含量。
实验原理
本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人胆囊收缩素
(CCK)水平。
用纯化的人胆囊收缩
素(CCK)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入胆囊收缩素
(CCK),
再与HRP 标记的胆囊收缩素(CCK)抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗 涤后加底物TMB 显色。
TMB 在HRP 酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终 的黄色。
颜色的深浅和样品中的胆囊收缩素 (CCK)呈正相关。
用酶标仪在450nm 波长下测定 吸光度(OD 值),通过标准曲线计算样品中人胆囊收缩素 (CCK)浓度。
试剂盒组成
1. 标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。
若不能
马上进行试验,可将标本放于 -20 C 保存,但应避免反复冻融 2. 不能检测含 NaN3的样品,因NaN3抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。
操作步骤 1. 标准品的稀释:本试剂盒提供原倍标准品一支, 用户可按照下列图表在小试管中进行稀
2.
加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂, 其余各步操作相同)、标准孔、 待测样品孔。
在酶标包被板上标准品准确加样 50此待测样品孔中先加样品稀释液 40此 然后再加待测样品10 U (样品最终稀释度为 5倍)。
加样将样品加于酶标板孔底部,尽 量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。
3. 温育:用封板膜封板后置 37 C 温育30分钟。
4. 配液:将30倍浓缩洗涤液用蒸储水 30倍稀释后备用
5.
洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置
30秒后弃去,如此
96T
重复5次,拍干。
6. 加酶:每孔加入酶标试剂50 4,空白孔除外。
7. 温育:操作同3。
8. 洗涤:操作同5。
9. 显色:每孔先加入显色剂A50 4,再加入显色剂B50U,轻轻震荡混匀,37 C避光显色
15分钟.
10. 终止:每孔加终止液50 pl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。
11. 测定:以空白空调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。
测定应在加终止液后15
分钟以内进行。
操作程序总结:
计算
以标准物的浓度为横坐标,OD值为纵坐标,在坐标纸上绘出标准曲线,根据样品的
OD值由标准曲线查出相应的浓度;再乘以稀释倍数;或用标准物的浓度与OD值计算出标
准曲线的直线回归方程式,将样品的OD值代入方程式,计算出样品浓度,再乘以稀释倍数,即为样品的实际浓度。
注意事项
1. 试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用,酶标包被板开封后如未用
完,板条应装入密封袋中保存。
2. 浓洗涤液可能会有结晶析出,稀释时可在水浴中加温助溶,洗涤时不影响结果。
3. 各步加样均应使用加样器,并经常校对其准确性,以避免试验误差。
一次加样时间最好
控制在5分钟内,如标本数量多,推荐使用排枪加样。
4. 请每次测定的同时做标准曲线,最好做复孔。
如标本中待测物质含量过高(样本OD值
大于标准品孔第一孔的OD值),请先用样品稀释液稀释一定倍数(n倍)后再测定,计算时请最后乘以总稀释倍数(X n X 5)。
5. 封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。
6. 底物请避光保存。
7. 严格按照说明书的操作进行,试验结果判定必须以酶标仪读数为准^
8. 所有样品,洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。
9. 本试剂不同批号组分不得混用。
10. 如与英文说明书有异,以英文说明书为准。
保存条件及有效期
1.试剂盒保存:;2-8 C。
2 .有效期:6个月。