水质粪大肠菌群的测定
现行两种水质粪大肠菌群测定方法的比较
现行两种水质粪大肠菌群测定方法的比较作者：马旭东赵锋来源：《绿色科技》2015年第10期摘要：指出了由国家环境保护总局主持修订的第三版地表水环境质量标准《地表水环境质量标准》（GB3838—2002）2002年4月发布，其中粪大肠菌群也被列为24项基本项目之一。
然而直到2007年3月才由国家环境保护总局发布了行业标准《水质粪大肠菌群的测定多管发酵发和滤膜法》（HJ/T347-2007）（以下简称“行业标准”）。
之前环境监测部门一直都是在使用卫生部发布的《生活饮用水标准检验方法微生物指标》（GB/T5750.12-2006）（以下简称“国家标准”）。
主要通过对这两个标准的异同点的比较，探究了将这两种方法的优点用在实际的环境监测工作中。
关键词：地表水环境质量标准；粪大肠菌群；环境监测中图分类号：X832文献标识码：A 文章编号：1674-9944（2015）10-0216-021 概述大肠菌群并非细菌学分类命名，它不代表某一个或某一属细菌，而指的是具有某些特性的一组与粪便污染有关的细菌，这些细菌在生化及血清学方面并非完全一致，其定义为：需氧及兼性厌氧、在37℃能分解乳糖产酸产气的革兰氏阴性无芽胞杆菌，粪大肠菌群则是大肠菌群的一部分主要来自于粪便，因此粪大肠菌群的存在表明可能受到了粪便污染，可能存在大肠杆菌。
国家标准和行业标准中都对粪大肠菌群的检测（多管发酵法）作出了比较详细的规定，现就其两个标准中的异同作出如下探讨。
2 相同点适用范围相同：行业标准和国家标准都适用于地表水、地下水和污水中的粪大肠菌群的检测。
原理相同：多管发酵法是以最可能数简称MPN来表示试验结果的。
实际上它是根据统计学理论，估计水体中的大肠菌群密度和卫生质量的一种方法。
如果从理论上考虑，并且进行大量的重复检定，可以发现这种估计有大于实际数字的倾向。
不过只要每一稀释度试管重复数目增加，这种差异便会减少，对于细菌含量的估计值，大部分取决于那些既显示阳性又显示阴性的稀释度。
酶底物法检测水中粪大肠菌群方法验证
酶底物法检测水中粪大肠菌群方法验证摘要：本文对《水质总大肠菌群、粪大肠菌群和大肠埃希氏菌的测定酶底物法》HJ1001 -2018、《生活饮用水标准检验方法》GB/T5750-2006进行了方法验证，以评价该两种检测方法是否适用于水中粪大肠菌群的检测工作，以确保该方法能够满足水中粪大肠菌群的测定。
关键词：粪大肠菌群；质控样品。
引言：试样与固定底物酶底物法（DST）采用大肠菌群能产生β—半乳糖苷酶分解ONPG使培养液呈黄色的原理，来判断水样中是否含耐热大肠菌群，大肠菌群的培养温度是44.5℃。
1.测定方法与参数（注：方法为酶底物法法，参数为质控样品）2.仪器与设备2.1恒温培养箱2.2冰箱2.3高压蒸汽灭菌锅2.4烘箱2.5量筒2.6吸管2.7程控定量封口机2.8 51孔或97孔定量盘2.9无菌水样瓶（100mL）2.10阳性比色盘2.11干热灭菌器3培养基和试剂3.1无菌水3.2科立德（固定底物技术酶底物法）检测试剂：MMO-MUG培养基。
4.样品的采集和保存4.1采样前准备：4.1.1采样瓶：高压灭菌瓶。
4.2样品采样及注意事项4.2.1将已灭菌和封包好的采样瓶，无论在什么条件下采样时，均要小心开启包封纸和瓶盖，避免瓶盖及瓶子颈部受杂菌污染。
4.2.2在采集江，河湖，库，地表水时，可握住瓶子底部直接将采样瓶插入水中，约距水面10-15厘米时，瓶口朝来水方向，使水样灌入瓶内。
如果没有水流，可握住瓶子水平前推，直至充满水样为止。
采样后，迅速盖上瓶盖和包装纸。
采样后，采样瓶内上不应留有一些空隙，一边检验前充分混匀水样。
4.2.3从自来水龙头采集样品时，不要选用漏水的水龙头，采水前可先将水龙头用酒精灯火焰灼烧灭菌或用75﹪酒精溶液消毒水龙头，然后将水龙头打开，放水数分钟后除去水管中的滞流杂质。
采水时控制水流速度小心接入瓶内。
4.2.4在同一采样点进行分层采样时，应自上向下进行，以免不同层次的干扰；同一采样点与理化检测项目同时采样时，应先采集细菌等检验样品，否则样品可能被污染，采样前，不得用水样刷洗采样瓶。
多管发酵法测定水质中粪大肠菌群 方法验证11
检测分析方法验证报告报告编号:xxxxxxxx方法名称：xxxxxxxxx验证人员：xxx xxx审核人员：xxx验证日期：xxxx年xx月xx日xxxxxx有限公司水质粪大肠菌群的测定多管发酵法一、方法依据本方法依据《水质粪大肠菌群的测定多管发酵法》（HJ 347.2-2018）用多管发酵法测定水中粪大肠菌群，适用于地表水、地下水、生活污水以及工业废水的粪大肠菌群测定。
本方法的检出限为，12管法为3CFU/L；15管法为20MPN/L。
二、方法原理将待测样品加入含乳糖蛋白胨培养基的试管中，37℃初发酵富集培养，大肠菌群在培养基中生长繁殖分解乳糖产酸产气，产酸能够使溴甲酚紫指示剂由紫色变为黄色，产气则由倒管指示。
将初发酵中产酸产气的试管进行复发酵接种，44.5℃复发酵培养，复发酵培养基中的胆盐三号能够抑制革兰氏阳性菌生长，最后产气的细菌确定为粪大肠菌群。
通过查MPN表，得出粪大肠菌群浓度值。
样品采集时可加入硫代硫酸钠溶液消除活性氯对样品的干扰，或加入乙二胺四乙酸二钠溶液消除重金属离子对样品的干扰。
参加验证的人员情况登记表使用仪器情况登记表使用试剂及溶剂登记表三、分析步骤3.1样品稀释及接种3.1.1 15管法3.1.1.1本次15管法选用的待检样品为xx水源水，其接种量分别为10mL、1mL、0.1mL、,在5支装有已灭菌的5mL三倍乳糖蛋白胨培养基的试管中，按无菌操作要求各加入样品10mL，在5支装有已灭菌的10mL单倍乳糖蛋白胨培养基的试管中，按无菌操作要求各加入样品1mL，在5支装有已灭菌的10mL单倍乳糖蛋白胨培养基的试管中，按无菌操作要求各加入1：10稀释样品1mL。
在做10倍梯度稀释时，按无菌操作吸取10mL充分混匀的待稀释样品，加入到盛有90mL 无菌水的三角瓶中。
3.1.1.2阳性试验：挑取一粒大肠埃希氏菌（ATCC 25922）磁珠置于BHI液体培养液中，24h培养，使之菌悬液浓度在109CFU/mL，用无菌生理盐水按照10倍系列稀释法，稀释至10-7至10-8。
水质 总大肠菌群和粪大肠菌群的测定 纸片快速法 征求意见稿
水质总大肠菌群和粪大肠菌群的测定纸片快速法征求意见稿
为了保证水质安全，控制疫情传播，本文介绍一种快速测定水质中总大肠菌群和粪大肠菌群的纸片快速法。
一、原理
本方法采用四氯化钴染色，将水样中的大肠杆菌转化为深蓝色紫色的水溶液中的杆菌，然后用过滤纸吸取样品中大肠杆菌杆菌的胞外成分，与专门的涂层结合，形成深紫色的杆菌珠，并进行定量比色分析。
二、材料和方法
1. 带有蓝色涂层的滤纸一支
2. 四氯化钴溶液
3. 水样
方法：
1. 取一片纸片，将其放入含有四氯化钴溶液的水样中，搅拌均匀。
等待5分钟。
2. 用净水彻底清洗纸片，并在滤纸周围波动，使大肠菌群在水中更容易分散。
3. 在处理好的样品中取一滴，用滤纸吸取。
4. 将纸片放入合适的容器中(如管子或托盘)，等待5分钟，直到纸片上形成紫色的结晶。
5. 用比色板或显微镜进行分析测量。
三、结果
根据纸片上杆菌珠的形成特征，可以快速测定水样中的大肠杆菌群和粪大肠菌群含量。
四、注意事项
1. 纸片处理过程中要严格保持无菌，避免外源菌污染。
2. 样品选择要具有代表性，尽量选取水流清澈，色泽透明，入口甜润的水源，避免河流污染或废水回流。
3. 纸片使用后应当严格清洗，避免杆菌珠继续生长。
4. 此方法仅适用于快速初步筛查水质安全，不适用于作为严格的水质监测标准。
方法验证水质的粪大肠菌群
方法验证报告测试方法：HJ 347.2-2018测试项目：水质粪大肠菌群编写：日期：审核：日期：批准：日期：水质粪大肠菌群的方法验证1.目的确认所采用的方法适合于在本实验室进行对水质的粪大肠菌群的测定，照此方法检测和检验条件进行水样的粪大肠菌群检测，能保证检验结果的准确、可靠。
2.原理和范围2.1原理将样品加入含乳糖蛋白胨培养基的试管中，37℃初发酵富集培养，大肠菌群在培养基中生长繁殖分解乳糖产酸产气，产生的酸使溴甲酚紫指示剂由紫色变为黄色，产生的气体进入倒管中，指示产气。
44℃复发酵培养，培养基中的胆盐三号可抑制革兰氏阳性菌的生长，最后产气的细菌确定为是粪大肠菌群。
通过查MPN表，得出粪大肠菌群浓度值。
2.2范围本法适用于地表水、地下水、生活污水和工业废水中粪大肠菌群的测定。
3.主要仪器3.1 净化工作台。
3.2 立式高压蒸汽灭菌器。
3.3恒温恒湿培养箱。
3.4电热恒温鼓风干燥箱。
3.5电子天平。
3.6酒精灯、试管架、试管（带塞子）、平皿、小倒管、三角烧瓶（带塞子）、刻度吸管、采样瓶、接种环。
4.主要试剂乳糖蛋白胨培养液、EC培养液。
5.检验步骤5.1样品稀释与接种5.1.1 15管法将样品充分混匀后，在5支装有已灭菌5ml三倍乳糖蛋白胨培养液的大试管中（内有小倒管），按无菌操作要求各加入样品10ml，在5支装有已灭菌的10ml单倍乳糖蛋白胨培养液中（内有小倒管），按无菌操作要求各加入样品1ml，在5支装有已灭菌的10ml单倍乳糖蛋白胨培养液中（内有小倒管），按无菌操作要求各加入样品0.1ml。
对于受到污染的样品，先将样品稀释后再按照上述操作接种，以生活污水为例，先将样品稀释104倍，然后按照上述操作步骤分别接种10ml 、1ml 、0.1ml 。
当样品接种量小于1ml 时，应将样品制成稀释样品后使用。
按无菌操作要求方式吸取10ml 充分混匀的样品，注入盛有90ml 无菌水的三角烧瓶中，混匀成1：10稀释样品。
酶底物法与多管发酵法和纸片法测定水中粪大肠菌群方法比较
酶底物法与多管发酵法和纸片法测定水中粪大肠菌群方法比较背景介绍随着人口的不断加添和城市化的进程，水诘责题也越来越受到关注。
其中水中粪大肠菌群是判定水质是否达标的指标之一、因此，快速、精准地测定水中粪大肠菌群已成为保障公共卫生和水环境安全的紧要工作。
在测定水中粪大肠菌群时，目前紧要有三种方法：酶底物法、多管发酵法和纸片法。
本文将对这三种方法进行比较，以便选择适合的方法进行水质检测。
酶底物法酶底物法是利用粪大肠菌群分泌的β—D—半乳糖苷酶对其底物苯基—β—D—半乳苷（X—Gal）水解，产生可见的蓝色色素。
实在试验步骤如下：1.接受分光光度计，读取X—Gal水解产生的蓝色产物的吸取值。
吸取值越高，表明样品中粪大肠菌群的数量越多。
该方法具有快速、精准等优点，但存在确定的局限性，比如无法区分大肠杆菌和其他肠道菌，仅仅只能检测粪生源的水体样品。
多管发酵法多管发酵法是利用粪大肠菌群在固体培育基中进行培育，利用二氧化碳生成的压力变化判定粪大肠菌群的数量。
实在试验步骤如下：1.将含有气管的玻璃管一端紧贴于固体培育基上。
2.向不同的玻璃管中分别加入不同的水样，并进行固体培育。
3.通过察看玻璃管顶端气泡的产生和数量，判定样品中粪大肠菌群的数量。
该方法不仅可以检测含有粪便的水产品中的粪大肠菌群，而且适用范围广，可以检测非点源污染和净化污水等水产品中的粪大肠菌群，但操作多而杂、时间较长。
纸片法纸片法是将覆盖了0.5～1.0 ml水体样品的纤维素纸分别带入含有荧光素β—D—葡萄糖苷（MUG）的细菌培育基中，然后在黑暗中孵育后，通过紫外线灯照射MUG荧光显带样品，察看荧光显带情况，得出粪大肠菌群数量。
实在试验步骤如下：1.制备含有MUG的培育基。
2.将确定数量的水样加入到带有MUG的培育基中并进行培育。
3.在黑暗中察看培育基上产生的荧光显带情况，得出样品中粪大肠菌群的数量。
该方法具有灵敏度高、操作简便等优点，但也有局限性，例如无法检测混合大肠杆菌和其他的大肠杆菌感染和污染的水样。
水质粪大肠菌群的测定
14 测定步骤
• 1. 水样接种量的选择
• 将水样充分混匀后，根据水样污染的程度 确定水样接种量。每个样品至少用三个不 同的水样量接种。同一接种水样量要有五 管。
• 相对未受污染的水样接种量为10ml、1 ml、 0.1 ml。受污染水样接种量根据污染程度接 种1 ml、0.1 ml、0.01 ml、或0.1 ml、 0.01 ml、0.001 ml等。
• 制法：将上述成分加热溶解，然后分装于 含有 玻璃倒管的试管中。置高压蒸气灭菌 器中，115℃高压灭菌器中灭菌20min，灭 菌后pH应为。
13 培养基的存放
• 在密封瓶中的脱水培养基成品要存放 在大气湿度低，温度低于30摄氏度的 暗处，存放时应避免阳光直接照射， 并且要避免杂菌倾入和液体蒸发。当 培养液颜色变化，或体积变化明显时 应废弃不用。
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单倍乳糖蛋白胨培养液：
• 将10g 蛋白胨、3g 牛肉寖膏、5g 乳糖和5g 氯化钠加热溶解于1000mL 蒸馏水中，调节 溶液pH 为，再加入1.6%溴甲酚紫乙醇溶液 1mL，充分混匀，分装于试管中，于115℃ 高压灭菌器中灭菌20min，贮存于冷暗处备 用。
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三倍浓缩乳糖蛋白胨培养液：
将10g 蛋白胨、3g 牛肉寖膏、5g 乳糖和5g 氯化钠加热溶解于1000mL 蒸馏水中，调节溶液pH 为，再加入1.
而定。 轻微震荡初发酵试验阳性结果的发酵管，用3mm接种环或灭菌棒将培养物转移到EC培养液中。
9 培养基及试剂
• 本标准所用试剂除另有说明，均为符合国 家标准的分析纯化学试剂；实验用水为新 制备的去离子水。
接种环要求用酒精灯灼烧消毒，复发酵接种时每一管都要在酒精灯上灼烧消毒。
示阴性的稀释度。因此在实验设计上，水样检验 接种1：10 的水样1mL 的5 管均为阴性。
水质 粪大肠菌群的测定 滤膜法HJ 347.1-2018
中华人民共和国国家环境保护标准HJ 347.1-2018部分代替HJ/T 347-2007水质粪大肠菌群的测定滤膜法Water quality—Determination of fecal coliform—Membrane filtration（发布稿）本电子版为发布稿。
请以中国环境出版集团出版的正式标准文本为准。
2018-12-26 发布2019-06-01 实施生态环境部发布目次前言 (ii)1适用范围 (1)2规范性引用文件 (1)3术语和定义 (1)4方法原理 (1)5干扰和消除 (1)6试剂和材料 (2)7仪器和设备 (2)8样品 (3)9分析步骤 (3)10结果计算与表示 (5)11精密度和准确度 (6)12质量保证和质量控制 (6)13废物处理 (7)14注意事项 (7)附录A（资料性附录）粪大肠菌群检验记录及报告格式 (8)i前言为贯彻《中华人民共和国环境保护法》和《中华人民共和国水污染防治法》，保护生态环境，保障人体健康，规范水中粪大肠菌群的测定方法，制定本标准。
本标准规定了测定地表水、地下水、生活污水和工业废水中粪大肠菌群的滤膜法。
本标准是对《水质粪大肠菌群的测定多管发酵法和滤膜法（试行）》（HJ/T 347-2007）滤膜法部分的修订。
本标准首次发布于2007年，原起草单位为中国环境监测总站。
本次为第一次修订。
本次修订的主要内容如下：——完善了方法原理的表述；——增加了检出限；——增加了规范性引用文件、术语和定义、干扰和消除、仪器和设备、样品采集、样品保存、精密度和准确度、质量保证和质量控制、废物处理等章节；自本标准实施之日起，《水质粪大肠菌群的测定多管发酵法和滤膜法（试行）》（HJ/T347-2007）废止。
本标准的附录A为资料性附录。
本标准由生态环境部生态环境监测司、法规与标准司组织制订。
本标准起草单位：辽宁省环境监测实验中心。
本标准验证单位：大连市环境监测中心、丹东市环境监测中心站、锦州市环境监测中心站、辽阳市环境监测站、铁岭市环境保护监测站和沈阳市疾病预防控制中心。
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• 自然界的水可分为地下水和地面水，除了 地下深层水外，如湖泊，河流，海洋等各 种地面水中都存在着各种各样的微生物。 但它们所含的微生物种类，数量和分布都 不相同。其中有些是“土生土长”的。另 一些水生细菌是外来的，它们来自土壤， 空气，垃圾，工厂废物或城市下水道污水。 而来自下水道的微生物中，很可能含有人 体肠道致病菌，例如霍乱，伤寒，副伤寒 和痢疾等病原菌。
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举例：
• 某水样接种10mL 的5 管均为阳性；接种 1mL 的5 管中有2 管为阳性；接种1：10 的 水样1mL 的5 管均为阴性。从最可能数 （MPN）表中查检验结果5-2-0，得知 100mL 水样中的总大肠菌群数为49 个，故 1L 水样中的总大肠菌群数为49×10=490 个。
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• 如果接种的水样量不是10mL、1mL 和 0.1mL，而是较低或较高的三个浓度的水样 量，也可查表求得MPN 指数，再经下面公 式换算成每100mL 的MPN 值。
表2 大肠菌群检数表
接种水样总量300mL(100mL2份，10mL10份)
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25 注意事项
• • • • • 灭菌 初发酵后以有阴、有阳稀释效果最好。 水样一定要摇均。 每个稀释倍数要求做5管。 接种环要求用酒精灯灼烧消毒，复发酵接 种注意：
• 加入水样时，先将培养管管口用酒 精灯消毒一次，加入水样后再用酒 精灯消毒一次，封口。
18 • 阳性的判别：既产酸又产气： • 观察：24h小时后取出观察培养 管，颜色由紫色变为黄色和有 气泡产生两个方面才能判为阳 性
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3. 复发酵试验
• 轻微震荡初发酵试验阳性结果的发酵管， 用3mm接种环或灭菌棒将培养物转移到EC 培养液中。在44.5℃±0.5℃下培养 24h±2h（水浴箱的水面应高于试管中培养 基液面）。接种后所有发酵管必须在30分 钟内放进水浴中。培养后立即观察，发酵 管产气则证实为粪大肠菌群阳性。
4 污水的细菌学检验
•
水质的细菌学检验主要包括两个 常规项目：细菌总数和总大肠菌群。
5 总大肠菌群测定的两种方法
• 多管发酵法 • 滤膜法
6 粪大肠菌群的定义
• 粪大肠菌群是总大肠菌群的一部分，主要 来自粪便。在44.5℃温度下能生长并发酵乳 糖产酸产气的大肠菌群称为粪大肠菌群。 用提高培养温度的方法，造成不利于来自 自然环境的大肠菌群生长的条件，使培养 出来的菌主要为来自粪便中的大肠菌群， 从而更准确地反映出水质受粪便污染的情 况。
11 三倍浓缩乳糖蛋白胨培养液：
• 按上述乳糖蛋白胨培养液的制备方法配制。 除蒸馏水外，各组分用量增加至三倍。 （即按上述配方比例三倍（除蒸馏水外）， 配成三倍浓缩的乳糖蛋白胨培养液）
12 EC培养液：
• 成分： 胰胨 20克， 乳糖 5克， 胆盐三号 1.5克，磷酸氢二钾（K2HPO4）4克，磷酸 二氢钾（KH2PO4）1.5克，氯化钠5克，蒸 馏水1000毫升。 • 制法：将上述成分加热溶解，然后分装于 含有 玻璃倒管的试管中。置高压蒸气灭菌 器中，115℃高压灭菌器中灭菌20min，灭 菌后pH应为6.9。
13 培养基的存放
•
在密封瓶中的脱水培养基成品要存放 在大气湿度低，温度低于30摄氏度的 暗处，存放时应避免阳光直接照射， 并且要避免杂菌倾入和液体蒸发。当 培养液颜色变化，或体积变化明显时 应废弃不用。
14 测定步骤
• 1. 水样接种量的选择 • 将水样充分混匀后，根据水样污染的程度 确定水样接种量。每个样品至少用三个不 同的水样量接种。同一接种水样量要有五 管。 • 相对未受污染的水样接种量为10ml、1 ml、 0.1 ml。受污染水样接种量根据污染程度接 种1 ml、0.1 ml、0.01 ml、或0.1 ml、 0.01 ml、0.001 ml等。
9 培养基及试剂
• 本标准所用试剂除另有说明，均为符合国 家标准的分析纯化学试剂；实验用水为新 制备的去离子水。
10
单倍乳糖蛋白胨培养液：
• 将10g 蛋白胨、3g 牛肉寖膏、5g 乳糖和5g 氯化钠加热溶解于1000mL 蒸馏水中，调节 溶液pH 为7.2—7.4，再加入1.6%溴甲酚紫 乙醇溶液1mL，充分混匀，分装于试管中， 于115℃高压灭菌器中灭菌20min，贮存于 冷暗处备用。
20 结果的计算
• 根据不同接种量的发酵管所出现阳性结果 的数目，从表2或表3中查得每升水样中的 粪大肠菌群。 • 接种水样为100ml 2份，10ml 10份，总量 300ml 时，查表2可得每升水样中粪大肠菌 群； • 接种5份10ml 水样，5份1ml水样，5份 0.1ml水样时，查表3求得MPN指数，MPN 值再乘10，即为1升水样中的粪大肠菌群；
7 适用范围
• 本标准适用于地表水，地下水 及废水中粪大肠菌群的测定。
8 原理
• 多管发酵法是以最可能数（most probable number），简称MPN 来表示试验结果的。实际 上它是根据统计学理论，估计水体中的大肠杆菌 密度和卫生质量的一种方法。如果从理论上考虑， 并且进行大量的重复检定，可以发现这种估计有 大于实际数字的倾向。不过只要每一稀释度试管 重复数目增加，这种差异便会减少，对于细菌含 量的估计值，大部分取决于那些既显示阳性又显 示阴性的稀释度。因此在实验设计上，水样检验 所要求重复的数目，要根据所要求数据的准确度 而定。
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• 培养液的浓度和量的选择：
• 如接种体积为10 ml，则试管内应装有三倍 浓度乳糖蛋白胨培养液5mL；如接种量为 1mL或少于1mL，则可接种普通浓度的乳糖 蛋白胨培养液10mL中。
16 2. 初发酵试验
将水样分别接种到盛有乳糖蛋白胨 培养液的发酵管中。在 37℃±0.5℃下培养24h±2h。产 酸和产气的发酵管表明试验阳性。 入在倒管内产气不明显，可轻拍试 管，有小气泡升起的为阳性。
26 思考题
• 配制好的培养基保存多少时间？存放时应 注意哪些事项？
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• 答：配制好的培养基不宜保存过久，以少 量勤配为宜。已灭菌的培养基可在4—100C 存放一个月。存放时应避免阳光直射，并 且避免杂菌侵入和液体蒸发。
28 填空题
0C 1. 细菌采样玻璃瓶洗涤干燥后，要在 0C灭菌 干热灭菌 或高压蒸汽 min。 • 2. 对受污染严重的水体，可选择 方法 测定其总大肠菌群数。 • 3. 总大肠菌群测定过程的复发酵试验中， 0C温 接种完菌落后，应将发酵管置于 度下培养 h。 • 4. 复发酵试验使用 培养基。
29
• 计算题： • 某水样接种10mL 的5 管中有4管 为阳性；接种1mL 的5 管中有3 管 为阳性；接种1：10 的水样1mL 的5 管中有1管为阳性。求1L 水样 中的总大肠菌群数为多少？